RU2019116216A - Способ очистки для удаления вариантов антител с сульфатированием тирозина; очищенные композиции - Google Patents
Способ очистки для удаления вариантов антител с сульфатированием тирозина; очищенные композиции Download PDFInfo
- Publication number
- RU2019116216A RU2019116216A RU2019116216A RU2019116216A RU2019116216A RU 2019116216 A RU2019116216 A RU 2019116216A RU 2019116216 A RU2019116216 A RU 2019116216A RU 2019116216 A RU2019116216 A RU 2019116216A RU 2019116216 A RU2019116216 A RU 2019116216A
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- seq
- amino acid
- acid sequence
- cdr
- antibodies
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J47/00—Ion-exchange processes in general; Apparatus therefor
- B01J47/02—Column or bed processes
- B01J47/026—Column or bed processes using columns or beds of different ion exchange materials in series
- B01J47/028—Column or bed processes using columns or beds of different ion exchange materials in series with alternately arranged cationic and anionic exchangers
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/06—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies from serum
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/10—Immunoglobulins specific features characterized by their source of isolation or production
- C07K2317/14—Specific host cells or culture conditions, e.g. components, pH or temperature
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
- C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/40—Immunoglobulins specific features characterized by post-translational modification
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
- C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Claims (68)
1. Композиция, включающая антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, которое включает:
вариабельный домен легкой цепи, включающий:
CDR-L1, которая включает аминокислотную последовательность: KASQSLDYEGDSDMN (SEQ ID NO: 38);
CDR-L2, которая включает аминокислотную последовательность: GASNLES (SEQ ID NO: 39); и
CDR-L3, которая включает аминокислотную последовательность: QQSTEDPRT (SEQ ID NO: 40); и
вариабельный домен тяжелой цепи, включающий:
CDR-H1, которая включает аминокислотную последовательность: DYNVD (SEQ ID NO: 33);
CDR-H2, которая включает аминокислотную последовательность:
DINPNNGGTIYAQKFQE (SEQ ID NO: 59);
DINPNSGGTIYAQKFQE (SEQ ID NO: 60);
DINPNDGGTIYAQKFQE (SEQ ID NO: 61);
DINPNQGGTIYAQKFQE (SEQ ID NO: 62);
DINPNGGGTIYAQKFQE (SEQ ID NO: 63); или
DINPNX1GGTIYX2QKFX3X4 (SEQ ID NO: 64), где X1= D,N,S или Q, X2= A или S, X3= Q или K, и X4= E или G; и
CDR-H3: NYRWFGAMDH (SEQ ID NO: 35); не содержащая определяемых уровней антител или фрагментов, которые включают сульфатированный тирозин на CDR-L1.
2. Композиция по п. 1, где антитело или антигенсвязывающий фрагмент также не содержит определяемых уровней сульфатированного тирозина в одном или нескольких членах, выбранных из группы, включающей FR-L1, FR-L2, CDR-L2, FR-L3, CDR-L3, FR-L4, FR-H1, CDR-H1, FR-H2, CDR-H2, FR-H3, CDR-H3, FR-H4 и константный домен.
3. Композиция по любому из пп. 1-2, где антитело представляет собой Ab6, включающее аминокислотную последовательность тяжелой цепи SEQ ID NO: 52 и аминокислотную последовательность легкой цепи SEQ ID NO: 51.
4. Композиция по любому из пп. 1-3, где антитело или антигенсвязывающий фрагмент включает N-связанные гликаны CHO.
5. Композиция по любому из пп. 1-4, где антитело представляет собой Ab6, и композиция включает одну или несколько разновидностей гликозилированного антитела Ab6, имеющих молекулярные массы около 148590 Да, 148752 Да или 148914 Да.
6. Композиция по любому из пп. 1-5, где антитело представляет собой Ab6, в котором N-концевой глутамин в тяжелой цепи преобразован в пироглутамат и/или C-концевой лизин в тяжелой цепи удален.
7. Способ для удаления антител с сульфатированным тирозином или их антигенсвязывающих фрагментов из водной смеси, включающей антитела, в которых тирозин является сульфатированным и в которых тирозин не является сульфатированным, или их антигенсвязывающие фрагменты, включающий доведение pH смеси до около 6,5 - около 7,0, контактирование водной смеси с анионообменной смолой и сохранение не связанной со смолой водной фракции смеси из смолы.
8. Способ по п. 7, который дополнительно включает промывку смолы водной композицией в изократических условиях и удаление и сохранение промывочной композици из смолы.
9. Способ по любому из пп. 7, 8, включающий уравновешивание анионообменной хроматографической смолы, которая включает диметиламинопропильный анионообменный лиганд, в хроматографической колонке раствором 25 мМ фосфата натрия pH 6,5, доведение pH водной смеси до около 6,5, нанесение смеси на колонку, сбор проточной фракции из колонки, промывку смолы в колонке раствором 25 мМ фосфата натрия pH 6,5 и сбор проточной фракции из промывки.
10. Способ по любому из пп. 7, 8, включающий уравновешивание анионообменной хроматографической смолы, которая включает кватернизированный полиэтилениминовый анионообменный лиганд, в хроматографической колонке раствором 25 мМ фосфата натрия и 5 мМ NaCl pH 7,0, доведение pH водной смеси до около 7,0, нанесение смеси на колонку, сбор проточной фракции из колонки, промывку смолы в колонке раствором 25 мМ фосфата натрия и 5 мМ NaCl pH 7,0 и сбор проточной фракции из промывки.
11. Способ по любому из пп. 7-10, где осуществляют сбор проточной фракции анионообменной хроматографии при A280 поглощении, когда A280 сначала достигает по меньшей мере около 2,5 единиц оптической плотности/см, и продолжают до тех пор, пока A280 не падает ниже около 1,0 единиц оптической плотности/см.
12. Способ по любому из пп. 7-11, дополнительно включающий очистку антитела или антигенсвязывающего фрагмента катионообменной хроматографией, анионообменной хроматографией в режиме связывания-элюирования, хроматографией гидрофобных взаимодействий, хроматографией с протеином-A, хроматографией с протеином-L, хроматографией с протеином-G, хроматографией на гидроксиапатите, эксклюзионной хроматографией, фракционированным осаждением, фильтрованием, центрифугированием или вирусной инактивацией.
13. Способ по любому из пп. 7-12, где легкие цепи и тяжелые цепи иммуноглобулинов антител или антигенсвязывающих фрагментов экспрессированы в клетке яичника китайского хомячка.
14. Способ по любому из пп. 7-13, где антитела или антигенсвязывающие фрагменты включают:
вариабельный домен легкой цепи, включающий:
CDR-L1, которая включает аминокислотную последовательность: KASQSLDYEGDSDMN (SEQ ID NO: 38);
CDR-L2, которая включает аминокислотную последовательность: GASNLES (SEQ ID NO: 39); и
CDR-L3, которая включает аминокислотную последовательность: QQSTEDPRT (SEQ ID NO: 40); и
вариабельный домен тяжелой цепи, включающий:
CDR-H1, которая включает аминокислотную последовательность: DYNVD (SEQ ID NO: 33);
CDR-H2, которая включает аминокислотную последовательность:
DINPNNGGTIYAQKFQE (SEQ ID NO: 59);
DINPNSGGTIYAQKFQE (SEQ ID NO: 60);
DINPNDGGTIYAQKFQE (SEQ ID NO: 61);
DINPNQGGTIYAQKFQE (SEQ ID NO: 62);
DINPNGGGTIYAQKFQE (SEQ ID NO: 63); или
DINPNX1GGTIYX2QKFX3X4 (SEQ ID NO: 64), где X1= D,N,S или Q, X2= A или S, X3= Q или K, и X4= E или G; и
CDR-H3: NYRWFGAMDH (SEQ ID NO: 35).
15. Способ по любому из пп. 7-14, где антитела или антигенсвязывающие фрагменты представляют собой антитела, и где антитела с отсутствием определяемых уровней сульфатированного тирозина представляют собой разновидности гликозилированного Ab6 антитела, имеющие молекулярные массы около 148590 Да, 148752 Да и/или 148914 Да.
16. Способ по любому из пп. 7-15, где антитела включают аминокислотную последовательность тяжелой цепи SEQ ID NO: 52 и аминокислотную последовательность легкой цепи SEQ ID NO: 51.
17. Способ по любому из пп. 7-15, где антитела включают аминокислотную последовательность тяжелой цепи SEQ ID NO: 52 и аминокислотную последовательность легкой цепи SEQ ID NO: 51, где N-концевой глутамин в тяжелой цепи преобразован в пироглутамат и/или C-концевой лизин в тяжелой цепи удален.
18. Композиция, которая является продуктом способа по любому из пп. 7-17.
19. Способ для удаления антител с сульфатированным тирозином или их антигенсвязывающих фрагментов из водной смеси, включающей антитела, в которых тирозин является сульфатированным и в которых тирозин не является сульфатированным, или их антигенсвязывающие фрагменты, включающий доведение pH водной смеси до около 6,5 - около 7,5, контактирование смеси с анионообменной смолой и сохранение не связанной со смолой водной фракции смеси из смолы.
20. Способ по п. 19, который дополнительно включает промывку смолы водной композицией в изократических условиях и удаление и сохранение промывочной композиции из смолы.
21. Способ по любому из пп. 19, 20, включающий уравновешивание анионообменной хроматографической смолы, которая включает анионообменный лиганд, в хроматографической колонке раствором фосфата натрия около 10-50 мМ pH около 6,5-7,5, доведение pH водной смеси до около 6,5-7,5, нанесение смеси на колонку, сбор проточной фракции из колонки, промывку смолы в колонке раствором фосфата натрия около 10-50 мМ pH около 6,5-7,5 и сбор проточной фракции из промывки.
22. Способ по любому из пп. 19-21, где легкие цепи и тяжелые цепи иммуноглобулинов антител или антигенсвязывающих фрагментов экспрессированы в клетках яичников китайского хомячка.
23. Способ по любому из пп. 19-22, где антитела или антигенсвязывающие фрагменты включают:
вариабельный домен легкой цепи, включающий:
CDR-L1, которая включает аминокислотную последовательность: KASQSLDYEGDSDMN (SEQ ID NO: 38);
CDR-L2, которая включает аминокислотную последовательность: GASNLES (SEQ ID NO: 39); и
CDR-L3, которая включает аминокислотную последовательность: QQSTEDPRT (SEQ ID NO: 40); и
вариабельный домен тяжелой цепи, включающий:
CDR-H1, которая включает аминокислотную последовательность: DYNVD (SEQ ID NO: 33);
CDR-H2, которая включает аминокислотную последовательность:
DINPNNGGTIYAQKFQE (SEQ ID NO: 59);
DINPNSGGTIYAQKFQE (SEQ ID NO: 60);
DINPNDGGTIYAQKFQE (SEQ ID NO: 61);
DINPNQGGTIYAQKFQE (SEQ ID NO: 62);
DINPNGGGTIYAQKFQE (SEQ ID NO: 63); или
DINPNX1GGTIYX2QKFX3X4 (SEQ ID NO: 64), где X1= D,N,S или Q, X2= A или S, X3= Q или K, и X4= E или G; и
CDR-H3: NYRWFGAMDH (SEQ ID NO: 35).
24. Способ по любому из пп. 19-23, где антитела включают аминокислотную последовательность тяжелой цепи SEQ ID NO: 52 и аминокислотную последовательность легкой цепи SEQ ID NO: 51.
25. Способ по любому из пп. 19-23, где антитела включают аминокислотную последовательность тяжелой цепи SEQ ID NO: 52 и аминокислотную последовательность легкой цепи SEQ ID NO: 51, где N-концевой глутамин в тяжелой цепи преобразован в пироглутамат и/или C-концевой лизин в тяжелой цепи удален.
26. Способ по п. 25, где антитела с отсутствием определяемых уровней сульфатированного тирозина представляют собой разновидности гликозилированных антител, имеющие молекулярные массы около 148590 Да, 148752 Да и/или 148914 Да.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US201662414209P | 2016-10-28 | 2016-10-28 | |
| US62/414,209 | 2016-10-28 | ||
| PCT/US2017/058386 WO2018081329A1 (en) | 2016-10-28 | 2017-10-26 | Purification process for removal of tyrosine sulfation antibody variants; purified compositions |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2019116216A true RU2019116216A (ru) | 2020-11-30 |
| RU2019116216A3 RU2019116216A3 (ru) | 2021-04-28 |
| RU2793400C2 RU2793400C2 (ru) | 2023-03-31 |
Family
ID=
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP2019535676A (ja) | 2019-12-12 |
| CN109963560A (zh) | 2019-07-02 |
| BR112019007856A8 (pt) | 2023-04-11 |
| KR102617873B1 (ko) | 2023-12-22 |
| KR20190067898A (ko) | 2019-06-17 |
| WO2018081329A1 (en) | 2018-05-03 |
| AU2017347809A1 (en) | 2019-05-09 |
| RU2019116216A3 (ru) | 2021-04-28 |
| CA3039667A1 (en) | 2018-05-03 |
| EP3532046A1 (en) | 2019-09-04 |
| JP7229157B2 (ja) | 2023-02-27 |
| BR112019007856A2 (pt) | 2019-10-01 |
| EP3532046A4 (en) | 2020-12-30 |
| US20200123251A1 (en) | 2020-04-23 |
| JP2023011753A (ja) | 2023-01-24 |
| MX2019004957A (es) | 2019-06-24 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US11261238B2 (en) | Immunoglobulin purification | |
| US20230060770A1 (en) | Cation exchange chromatography wash buffer | |
| CN106103465A (zh) | 使用预清洗步骤的免疫球蛋白纯化 | |
| AU2009331897A1 (en) | Immunoglobulin purification | |
| KR20210021542A (ko) | 크로마토그래피를 사용하여 단백질을 정제하는 방법 | |
| CN111163804A (zh) | 使用阳离子交换色谱法分离三轻链抗体 | |
| CN112851813A (zh) | 一种抗pd-1抗体的纯化方法 | |
| JP2020531557A (ja) | タンパク質の精製方法 | |
| US20160347833A1 (en) | Antibody process | |
| RU2019116216A (ru) | Способ очистки для удаления вариантов антител с сульфатированием тирозина; очищенные композиции | |
| CN114729003A (zh) | 提高离子交换色谱过程中抗体产率的方法 | |
| EP4081554A1 (en) | Method for the production of bispecific fcyriii x cd30 antibody construct | |
| WO2020084503A1 (en) | A composition comprising antibody with reduced level of basic variants thereof | |
| RU2795432C2 (ru) | Отделение антител с тремя легкими цепями при помощи катионообменной хроматографии | |
| RU2019140335A (ru) | Способ получения биспецифических антител, биспецифические антитела и терапевтическое применение таких антител | |
| AU2022369694A1 (en) | Method for purifying fusion protein having igg fc domain |