RU2019104496A - Udp-зависимая гликозилтрансфераза для высокоэффективного продуцирования ребаудиозидов - Google Patents
Udp-зависимая гликозилтрансфераза для высокоэффективного продуцирования ребаудиозидов Download PDFInfo
- Publication number
- RU2019104496A RU2019104496A RU2019104496A RU2019104496A RU2019104496A RU 2019104496 A RU2019104496 A RU 2019104496A RU 2019104496 A RU2019104496 A RU 2019104496A RU 2019104496 A RU2019104496 A RU 2019104496A RU 2019104496 A RU2019104496 A RU 2019104496A
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- seq
- genetically modified
- modified host
- host cell
- amino acid
- Prior art date
Links
- 102000051366 Glycosyltransferases Human genes 0.000 title claims 69
- 108700023372 Glycosyltransferases Proteins 0.000 title claims 69
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims 7
- 229930188195 rebaudioside Natural products 0.000 title 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims 89
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims 65
- RPYRMTHVSUWHSV-CUZJHZIBSA-N rebaudioside D Chemical compound O([C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]([C@@H]1O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)O[C@]12C(=C)C[C@@]3(C1)CC[C@@H]1[C@@](C)(CCC[C@]1([C@@H]3CC2)C)C(=O)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O RPYRMTHVSUWHSV-CUZJHZIBSA-N 0.000 claims 36
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 claims 34
- 241000954177 Bangana ariza Species 0.000 claims 27
- 235000019202 steviosides Nutrition 0.000 claims 18
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims 17
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims 17
- 239000004383 Steviol glycoside Substances 0.000 claims 17
- 230000037361 pathway Effects 0.000 claims 17
- 235000019411 steviol glycoside Nutrition 0.000 claims 17
- 229930182488 steviol glycoside Natural products 0.000 claims 17
- 150000008144 steviol glycosides Chemical class 0.000 claims 17
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims 16
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims 16
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims 16
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims 10
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims 10
- 238000000034 method Methods 0.000 claims 9
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims 8
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 7
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims 7
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims 7
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims 6
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims 6
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims 6
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims 5
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 4
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims 4
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 4
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 claims 4
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 claims 4
- 239000004474 valine Substances 0.000 claims 4
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 claims 3
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims 3
- 108090000854 Oxidoreductases Proteins 0.000 claims 3
- 102000004316 Oxidoreductases Human genes 0.000 claims 3
- 108010064741 ent-kaurene synthetase A Proteins 0.000 claims 3
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 claims 3
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 claims 3
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 claims 3
- GOJUJUVQIVIZAV-UHFFFAOYSA-N 2-amino-4,6-dichloropyrimidine-5-carbaldehyde Chemical group NC1=NC(Cl)=C(C=O)C(Cl)=N1 GOJUJUVQIVIZAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 108010007508 Farnesyltranstransferase Proteins 0.000 claims 2
- 102000007317 Farnesyltranstransferase Human genes 0.000 claims 2
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 claims 2
- 102000008109 Mixed Function Oxygenases Human genes 0.000 claims 2
- 108010074633 Mixed Function Oxygenases Proteins 0.000 claims 2
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 claims 2
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 claims 2
- 101100262416 Stevia rebaudiana UGT76G1 gene Proteins 0.000 claims 2
- 101100048059 Stevia rebaudiana UGT85C2 gene Proteins 0.000 claims 2
- DRTQHJPVMGBUCF-XVFCMESISA-N Uridine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-XVFCMESISA-N 0.000 claims 2
- 240000006365 Vitis vinifera Species 0.000 claims 2
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 claims 2
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 claims 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims 2
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 claims 2
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 238000002864 sequence alignment Methods 0.000 claims 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims 2
- ONVABDHFQKWOSV-UHFFFAOYSA-N 16-Phyllocladene Natural products C1CC(C2)C(=C)CC32CCC2C(C)(C)CCCC2(C)C31 ONVABDHFQKWOSV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 102000018832 Cytochromes Human genes 0.000 claims 1
- 108010052832 Cytochromes Proteins 0.000 claims 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims 1
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 claims 1
- 108010045510 NADPH-Ferrihemoprotein Reductase Proteins 0.000 claims 1
- 101100427140 Stevia rebaudiana UGT74G1 gene Proteins 0.000 claims 1
- QFVOYBUQQBFCRH-UHFFFAOYSA-N Steviol Natural products C1CC2(C3)CC(=C)C3(O)CCC2C2(C)C1C(C)(C(O)=O)CCC2 QFVOYBUQQBFCRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- UEDUENGHJMELGK-HYDKPPNVSA-N Stevioside Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@]12C(=C)C[C@@]3(C1)CC[C@@H]1[C@@](C)(CCC[C@]1([C@@H]3CC2)C)C(=O)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O UEDUENGHJMELGK-HYDKPPNVSA-N 0.000 claims 1
- 108010075920 UDP-galactose translocator Proteins 0.000 claims 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims 1
- DRTQHJPVMGBUCF-PSQAKQOGSA-N beta-L-uridine Natural products O[C@H]1[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-PSQAKQOGSA-N 0.000 claims 1
- 230000001588 bifunctional effect Effects 0.000 claims 1
- NIKHGUQULKYIGE-OTCXFQBHSA-N ent-kaur-16-en-19-oic acid Chemical compound C([C@@H]1C[C@]2(CC1=C)CC1)C[C@H]2[C@@]2(C)[C@H]1[C@](C)(C(O)=O)CCC2 NIKHGUQULKYIGE-OTCXFQBHSA-N 0.000 claims 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 claims 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 claims 1
- NIKHGUQULKYIGE-UHFFFAOYSA-N kaurenoic acid Natural products C1CC2(CC3=C)CC3CCC2C2(C)C1C(C)(C(O)=O)CCC2 NIKHGUQULKYIGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims 1
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims 1
- QFVOYBUQQBFCRH-VQSWZGCSSA-N steviol Chemical compound C([C@@]1(O)C(=C)C[C@@]2(C1)CC1)C[C@H]2[C@@]2(C)[C@H]1[C@](C)(C(O)=O)CCC2 QFVOYBUQQBFCRH-VQSWZGCSSA-N 0.000 claims 1
- 229940032084 steviol Drugs 0.000 claims 1
- 229940013618 stevioside Drugs 0.000 claims 1
- OHHNJQXIOPOJSC-UHFFFAOYSA-N stevioside Natural products CC1(CCCC2(C)C3(C)CCC4(CC3(CCC12C)CC4=C)OC5OC(CO)C(O)C(O)C5OC6OC(CO)C(O)C(O)C6O)C(=O)OC7OC(CO)C(O)C(O)C7O OHHNJQXIOPOJSC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims 1
- 230000002103 transcriptional effect Effects 0.000 claims 1
- 108091008023 transcriptional regulators Proteins 0.000 claims 1
- DRTQHJPVMGBUCF-UHFFFAOYSA-N uracil arabinoside Natural products OC1C(O)C(CO)OC1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 229940045145 uridine Drugs 0.000 claims 1
- 210000005253 yeast cell Anatomy 0.000 claims 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L2/00—Non-alcoholic beverages; Dry compositions or concentrates therefor; Their preparation
- A23L2/52—Adding ingredients
- A23L2/60—Sweeteners
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L27/00—Spices; Flavouring agents or condiments; Artificial sweetening agents; Table salts; Dietetic salt substitutes; Preparation or treatment thereof
- A23L27/30—Artificial sweetening agents
- A23L27/33—Artificial sweetening agents containing sugars or derivatives
- A23L27/36—Terpene glycosides
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
- C12N15/52—Genes encoding for enzymes or proenzymes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/80—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for fungi
- C12N15/81—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for fungi for yeasts
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/10—Transferases (2.)
- C12N9/1048—Glycosyltransferases (2.4)
- C12N9/1051—Hexosyltransferases (2.4.1)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
- C12P19/18—Preparation of compounds containing saccharide radicals produced by the action of a glycosyl transferase, e.g. alpha-, beta- or gamma-cyclodextrins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
- C12P19/44—Preparation of O-glycosides, e.g. glucosides
- C12P19/56—Preparation of O-glycosides, e.g. glucosides having an oxygen atom of the saccharide radical directly bound to a condensed ring system having three or more carbocyclic rings, e.g. daunomycin, adriamycin
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Y—ENZYMES
- C12Y204/00—Glycosyltransferases (2.4)
- C12Y204/01—Hexosyltransferases (2.4.1)
- C12Y204/01017—Glucuronosyltransferase (2.4.1.17)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L27/00—Spices; Flavouring agents or condiments; Artificial sweetening agents; Table salts; Dietetic salt substitutes; Preparation or treatment thereof
- A23L27/30—Artificial sweetening agents
- A23L27/33—Artificial sweetening agents containing sugars or derivatives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2250/00—Food ingredients
- A23V2250/24—Non-sugar sweeteners
- A23V2250/262—Stevioside
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Seasonings (AREA)
Claims (140)
1. Генетически модифицированная клетка-хозяин, содержащая гетерологичную нуклеиновую кислоту, кодирующую UDP-гликозилтрансферазу, содержащую аминокислотную последовательность, имеющую идентичность последовательности с SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 11 не менее 80%, 85%, 90% или 95%.
2. Генетически модифицированная клетка-хозяин по п. 1, которая способна преобразовывать RebA в RebD с эффективностью, превышающей 90%, 95%, 96% или 97%.
3. Генетически модифицированная клетка-хозяин по п. 1, в которой UDP-гликозилтрансфераза содержит аминокислотную последовательность, имеющую последовательность SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 11.
4. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, в которой UDP-гликозилтрансфераза способна к бета 1,2-гликозилированию С2' позиции 19-O глюкозы стевиолового гликозида.
5. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, где UDP-гликозилтрансфераза кодируется гетерологичной нуклеиновой кислотой, где гетерологичная нуклеиновая кислота содержит нуклеотидную последовательность, имеющую идентичность последовательности с SEQ ID NO: 13, по меньшей мере, 80%, 85%, 90% или 95%.
6. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, в которой UDP-гликозилтрансфераза кодируется гетерологичной нуклеиновой кислотой, имеющей последовательность SEQ ID NO: 13.
7. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, которая способна преобразовывать RebA в RebD с эффективностью более 90%, 95%, 96% или 97%, и где UDP-гликозилтрансфераза содержит аминокислотную последовательность, имеющую идентичность последовательности с SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 11 не менее 95%.
8. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, где UDP-гликозилтрансфераза представляет собой полипептид, имеющий функциональный домен с идентичностью последовательности функционального домена SEQ ID. NO: 1 или SEQ ID NO: 11 не менее 80%, 85%, 90% или 95%.
9. Генетически модифицированная клетка-хозяин по п. 8, в которой функциональный домен представляет собой акцепторный домен сахара.
10. Генетически модифицированная клетка-хозяин по п. 9, где акцепторный домен сахара расположен на N-конце UDP-гликозилтрансферазы.
11. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, где UDP-гликозилтрансфераза содержит акцепторный домен сахара SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 11.
12. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, где UDP-гликозилтрансфераза содержит акцепторный домен сахара, где аминокислотная последовательность акцепторного домена сахара имеет идентичность последовательности с аминокислотной последовательностью акцепторного домена сахара SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 11 по меньшей мере, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99%.
13. Генетически модифицированная клетка-хозяин по п. 12, где UDP-гликозилтрансфераза содержит:
(a) аминокислотную последовательность loop1 SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 11, последовательность SEQ ID NO: 28 или вариантную аминокислотную последовательность loop1, в позиции UDP-гликозилтрансферазы, которая соответствует местоположению loop1 в SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 11 соответственно;
(b) аминокислотную последовательность lоор2 SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 11, или вариантную аминокислотную последовательность lоор2, в позиции UDP-гликозилтрансферазы, которая соответствует местоположению loop 2 в SEQ ID NO: 1, или SEQ ID NO: 11 соответственно;
(c) аминокислотную последовательность lоор3_1 SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 11, или вариантную аминокислотную последовательность lоор3_1, в позиции UDP-гликозилтрансферазы, которая соответствует местоположению loop 3_1 в SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 11 соответственно;
(d) аминокислотную последовательность lоор2_2 SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 11, или вариантную аминокислотную последовательность lоор3_2 в позиции UDP-гликозилтрансферазы, которая соответствует местоположению lоор3_2 в SEQ ID NO: 1, или SEQ ID NO: 11 соответственно;
(e) аминокислотную последовательность lоор4_1 SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 11, или вариантную аминокислотную последовательность lоор4_1, в позиции UDP-гликозилтрансферазы, которая соответствует местоположению lоор4_1 в SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 11 соответственно;
(f) аминокислотную последовательность lоор4_2 SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 11 в позиции, которая соответствует местоположению lоор4_2 в SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 11, соответственно; или
(g) любаую комбинацию от (а) до (f).
14. Генетически модифицированная клетка-хозяин по п. 13, в которой любая из вариантной аминокислотной последовательности loop1, вариантной аминокислотной последовательности lоор2, вариантной аминокислотной последовательности lоор3_1, вариантной аминокислотной последовательности loop 3_2, и вариантной аминокислотной последовательности lоор4_1, получена из соответствующих им позиций петли другой UDP-гликозилтрансферазы, отличной от SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 11, где другая UDP-гликозилтрансфераза содержит аминокислотную последовательность, имеющую идентичность последовательности с SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 11 не менее 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90% или 95%.
15. Генетически модифицированная клетка-хозяин по п. 14, где другая UDP-гликозилтрансфераза способна к бета-1,2-гликозилированию С'2 позиции 19-О-глюкозы стевиолового гликозида.
16. Генетически модифицированная клетка-хозяин по п. 15, в которой другой UDP-гликозилтрансферазой является Os_UGT_91C1.
17. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, где UDP-гликозилтрансфераза содержит:
(a) акцепторный домен сахара другой UDP-гликозилтрансферазы, содержащей аминокислотную последовательность, имеющую идентичность последовательности не менее 61%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90% или 95% по отношению к последовательности акцепторного домена сахара SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 11; и
(b) аминокислотную последовательность lоор4_1 SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 11 в местоположении другой UDP-гликозилтрансферазы, которое соответствует расположению lоор4_1 в SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 11, соответственно.
18. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, в которой UDP-гликозилтрансфераза содержит последовательность SEQ ID NO: 22 в качестве акцепторного домена сахара.
19. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, в которой UDP-гликозилтрансфераза содержит аминокислотную последовательность, имеющую идентичность последовательности с SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 11, по меньшей мере, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90% или 95%, и имеет аминокислотную последовательность lоор4_1 последовательности SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 11 в позиции, которая соответствует местоположению lоор4_1 SEQ ID NO: 1, или SEQ ID NO: 11 соответственно.
20. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, где UDP-гликозилтрансфераза содержит последовательность SEQ ID NO: 25.
21. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, где UDP-гликозилтрансфераза содержит один или несколько из следующих аминокислотных остатков:
(a) валин в аминокислотной позиции UDP-гликозилтрансферазы, который соответствует аминокислотной позиции 11 в SEQ ID NO: 11;
(b) изолейцин в аминокислотной позиции UDP-гликозилтрансферазы, который соответствует аминокислотной позиции 12 в SEQ ID NO: 11;
(c) пролин в аминокислотной позиции UDP-гликозилтрансферазы, которая соответствует аминокислотной позиции 55 в SEQ ID NO: 11;
(d) глутаминовая кислота в аминокислотной позиции UDP-гликозилтрансферазы, которая соответствует аминокислотной позиции 90 в SEQ ID NO: 11;
(e) серии в аминокислотной позиции UDP-гликозилтрансферазы, которая соответствует аминокислотной позиции 203 в SEQ ID NO: 11;
(f) глутаминовая кислота в аминокислотной позиции UDP-гликозилтрансферазы, которая соответствует аминокислотной позиции 223 в SEQ ID NO: 11; или
(g) валин в аминокислотной позиции UDP-гликозилтрансферазы, которая соответствует аминокислотной позиции 413 в SEQ ID NO: 11,
где позиции аминокислот UDP-гликозилтрансферазы, которые соответствуют позициям аминокислот SEQ ID NO: 11, определяются выравниванием последовательности.
22. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, где UDP-гликозилтрансфераза содержит аминокислотную последовательность, имеющую SEQ ID NO: 24.
23. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, где UDP-гликозилтрансфераза содержит донорный домен сахара, где донорный домен сахара содержит аминокислотную последовательность, имеющую идентичность последовательности с аминокислотной последовательностью домена донора сахара SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 11, по меньшей мере, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99%.
24. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, где донорный домен сахара расположен на С-конце UDP-гликозилтрансферазы.
25. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, где UDP-гликозилтрансфераза содержит аминокислотную последовательность, имеющую идентичность последовательности с SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 11, по меньшей мере, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99%.
26. Генетически модифицированная клетка-хозяин, содержащая гетерологичную нуклеиновую кислоту, кодирующую UDP-гликозилтрансферазу, содержащую аминокислотную последовательность, имеющую идентичность последовательности с SEQ ID NO: 2 не менее 80%, 85%, 90% или 95%.
27. Генетически модифицированная клетка-хозяин по п. 26, которая способна преобразовывать RebA в RebD с эффективностью более 50%.
28. Генетически модифицированная клетка-хозяин по п. 26 или 27, где UDP-гликозилтрансфераза представляет собой полипептид, имеющий последовательность SEQ ID NO: 2.
29. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из пп. 26-28, в которой UDP-гликозилтрансфераза представляет собой полипептид, содержащий функциональный домен с идентичностью последовательности функционального домена SEQ ID NO: 2 не менее 80%, 85%, 90% или 95%.
30. Генетически модифицированная клетка-хозяин, содержащая гетерологичную нуклеиновую кислоту, кодирующую UDP-гликозилтрансферазу, содержащую аминокислотную последовательность, имеющую идентичность последовательности с SEQ ID NO: 5 не менее 80%, 85%, 90% или 95%.
31. Генетически модифицированная клетка-хозяин по п. 30, которая способна преобразовывать RebA в RebD с эффективностью более 40%.
32. Генетически модифицированная клетка-хозяин по п. 30 или 31, где UDP-гликозилтрансфераза содержит аминокислотную последовательность, имеющую последовательность SEQ ID NO: 5.
33. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из пп. 30-32, где UDP-гликозилтрансфераза содержит полипептид, имеющий функциональный домен с идентичностью последовательности функционального домена SEQ. ID NO: 5 не менее 80%, 85%, 90% или 95%.
34. Генетически модифицированная клетка-хозяин, содержащая гетерологичную нуклеиновую кислоту, кодирующую UDP-гликозилтрансферазу, содержащую аминокислотную последовательность, имеющую идентичность последовательности с SEQ ID NO:6 не менее 85%, 90% или 95%.
35. Генетически модифицированная клетка-хозяин по п. 34, которая способна преобразовывать RebA в RebD с эффективностью более 85% или 90%.
36. Генетически модифицированная клетка-хозяин по п. 34 или 35, где UDP-гликозилтрансфераза представляет собой полипептид, имеющий последовательность SEQ ID NO: 6.
37. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из пп. 34-36, в которой UDP-гликозилтрансфераза содержит полипептид, имеющий функциональный домен с идентичностью последовательности функционального домена SEQ ID NO: 6 не менее 80%, 85%, 90% или 95%.
38. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из пп. 29, 33 и 37, в которой функциональный домен представляет собой акцепторный домен сахара.
39. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, способная продуцировать RebD.
40. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, способная продуцировать RebM.
41. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, которая способна продуцировать в RebM и RebM2 в соотношении не менее 10:1, 100:1 или 1000:1.
42. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, где генетически модифицированная клетка-хозяин продуцирует необнаружимый уровень RebM2.
43. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, где генетически модифицированная клетка-хозяин способна преобразовывать стевиозид в RebE.
44. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, где генетически модифицированная клетка-хозяин дополнительно содержит одну или несколько гетерологичных нуклеиновых кислот, кодирующих один или несколько ферментов пути для получения стевиола.
45. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, где генетически модифицированная клетка-хозяин дополнительно содержит одну или несколько гетерологичных нуклеиновых кислот, кодирующих один или несколько ферментов пути для получения стевиолового гликозида.
46. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, где генетически модифицированная клетка-хозяин дополнительно содержит одну или несколько гетерологичных нуклеиновых кислот, кодирующих один или несколько ферментов пути для получения RebA.
47. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, где генетически модифицированная клетка-хозяин дополнительно содержит одну или несколько гетерологичных нуклеиновых кислот, кодирующих один или несколько ферментов пути для получения RebM.
48. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, где генетически модифицированная клетка-хозяин дополнительно содержит одну или несколько гетерологичных нуклеиновых кислот, кодирующих один или несколько ферментов пути для получения RebE.
49. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, где один или несколько ферментов пути включают геранилгеранил-дифосфат синтазу.
50. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, где один или несколько ферментов пути включают копалил-дифосфат-синтазу.
51. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, где один или несколько ферментов пути включают энт-каурен-синтазу.
52. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, где один или несколько ферментов пути содержат кауреноксидазу.
53. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, где один или несколько ферментов пути включают гидроксилазу кауреновой кислоты.
54. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, где один или несколько ферментов пути включают цитохром Р450-редуктазу.
55. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, где один или несколько ферментов пути включают уридин-5'-дифосфо гликозилтрансферазу.
56. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, в которой один или несколько ферментов пути включают UGT74G1, UGT76G1, UGT85C2, и UGT91D.
57. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, где один или несколько ферментов пути включают геранилгеранил-дифосфатсинтазу, копалил-дифосфат-синтазу, энт-каурен-синтазу, кауреноксидазу, гидроксилазу кауреновой кислоты, цитохром Р450 редуктазу, UGT74G1, UGT76G1, UGT85C2 и UGT91D.
58. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, где один или несколько ферментов пути включают бифункциональную копалил-дифосфат-синтазу и кауренсинтазу.
59. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, где одна или несколько гетерологичных нуклеиновых кислот, кодирующих один или несколько ферментов пути, находятся под контролем одного регулятора транскрипции.
60. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, где одна или несколько гетерологичных нуклеиновых кислот, кодирующих один или несколько ферментов пути, находятся под контролем множества гетерологичных регуляторов транскрипции.
61. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, в которой клетка выбрана из группы, состоящей из бактериальной клетки, грибковой клетки, клетки водорослей, клетки насекомого, и клетки растения.
62. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, где клетка представляет собой дрожжевую клетку.
63. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, где дрожжи представляют собой Saccharomyces cerevisiae.
64. Способ производства RebD:
(a) культивирование популяции генетически модифицированных клеток-хозяев по любому из предшествующих пунктов в среде с источником углерода в условиях, подходящих для получения RebD; и
(b) извлечение указанного соединения RebD из среды.
65. Способ производства RebM:
(a) культивирование популяции генетически модифицированных клеток-хозяев по любому из предшествующих пунктов в среде с источником углерода в условиях, подходящих для получения RebM; и
(b) извлечение указанного соединения RebM из среды.
66. Способ производства RebD:
(a) контактирование RebA с глюкозой и UDP-гликозилтрансферазой по любому из предшествующих пунктов, способных преобразовывать RebA в RebD, в условиях, подходящих для образования RebD; и
(b) извлечение указанного соединения RebD из среды.
67. Способ производства RebM:
(а) контактирование в условиях, подходящих для образования RebM, субстрата с глюкозой или UDP-сахаром и:
(i) UDP-гликозилтрансферазой по любому из предшествующих пунктов, способной преобразовывать RebA в RebD; и
(ii) UDP-гликозилтрансферазой, способной преобразовывать RebD в RebM.
68. Способ получения RebD, включающий преобразование RebA в RebD с использованием любой из UDP-гликозилтрансферазы по любому из предшествующих пунктов, способной преобразовывать RebA в RebD.
69. Способ получения RebM, включающий:
(a) преобразование RebA в RebD с использованием любой из UDP-гликозилтрансферазы по любому из предшествующих пунктов, способной преобразовывать RebA в RebD; и
(b) преобразование RebD в RebM с использованием UDP-гликозилтрансферазы, способной преобразовывать RebD в RebM.
70. Ферментационная композиция, содержащая:
(a) генетически модифицированную клетку-хозяина, содержащую:
(i) гетерологичную нуклеиновую кислоту, кодирующую UDP-гликозилтрансферазу по любому из предшествующих пунктов, способную преобразовывать RebA в RebD; и
(b) стевиоловые гликозиды, полученные из генетически модифицированной клетки-хозяина.
71. Ферментационная композиция, произведенная генетически модифицированными клетками-хозяевами по любому из предшествующих пунктов, включающая стевиоловые гликозиды, где стевиоловые гликозиды включают RebA, RebD и RebM при соотношении RebA:RebD:RebM по меньшей мере 1:7:50.
72. Ферментационная композиция по п. 71, в которой стевиоловые гликозиды включают RebA, RebD и RebM при соотношении RebA:RebD:RebM, по меньшей мере, от 1:7:50 до 1:100:1000.
73. Ферментационная композиция по п. 71, в которой стевиоловые гликозиды включают RebA, RebD и RebM при соотношении RebA:RebD:RebM по меньшей мере от 1:7:50 до 1:200:2000.
74. Ферментационная композиция, произведенная генетически модифицированными клетками-хозяевами по любому из предшествующих пунктов, включающая стевиоловые гликозиды, где стевиоловые гликозиды включают RebD и RebM при соотношении RebD: RebM, по меньшей мере, 7:50.
75. Ферментационная композиция по п. 74, в которой стевиоловые гликозиды включают RebD и RebM при соотношении RebD:RebM по меньшей мере от 7:50 до 7:100.
76. Ферментационная композиция по п. 74, в которой стевиоловые гликозиды включают RebD и RebM при соотношении RebD:RebM по меньшей мере чем от 7:50 до 7:200.
77. Ферментационная композиция, произведенная генетически модифицированными клетками-хозяевами по любому из предшествующих пунктов, содержащая стевиоловые гликозиды, где стевиоловые гликозиды включают RebA и RebM при соотношении RebA: RebM, по меньшей мере, 1:50.
78. Ферментационная композиция по п. 77, в которой стевиоловые гликозиды включают RebA и RebM при соотношении RebA: RebM, по меньшей мере, от 1:50 до 1:1000.
79. Ферментационная композиция по п. 77, в которой стевиоловые гликозиды включают RebA и RebM при соотношении RebA: RebM, по меньшей мере, от 1:50 до 1:2000.
80. Не встречающаяся в природе UDP-гликозилтрансфераза, имеющая по меньшей мере 80%, 85%о, 90%, 95% идентичность последовательности с SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 11.
81. He встречающаяся в природе UDP-гликозилтрансфераза, способная преобразовывать RebA в RebD с эффективностью более 90%, 95%, 96% или 97% in vivo.
82. Не встречающаяся в природе UDP-гликозилтрансфераза, где UDP-гликозилтрансфераза:
(a) содержит аминокислотную последовательность lоор4_1, имеющую SEQ ID NO:22 в позиции UDP-гликозилтрансферазы, которая соответствует местоположению lоор4_1 SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 11; и
(b) способна к бета-1,2-гликозилированию С2' позиции 19-О-глюкозы стевиолового гликозида.
83. Не встречающаяся в природе UDP-гликозилтрансфераза по любому из пп. 80-82, где UDP-гликозилтрансфераза содержит один или несколько следующих аминокислотных остатков;
(a) валин в аминокислотной позиции UDP-гликозилтрансферазы, который соответствует аминокислотной позиции 11 SEQ ID NO: 11;
(b) изолейцин в аминокислотной позиции UDP-гликозилтрансферазы, который соответствует аминокислотной позиции 12 SEQ ID NO: 11;
(c) пролин в аминокислотной позиции UDP-гликозилтрансферазы, который соответствует аминокислотной позиции 55 SEQ ID NO: 11;
(d) глутаминовая кислота в аминокислотной позиции UDP-гликозилтрансферазы, которая соответствует аминокислотной позиции 90 SEQ ID NO: 11;
(e) серии в аминокислотной позиции UDP-гликозилтрансферазы, который соответствует аминокислотной позиции 203 SEQ ID NO: 11;
(f) глутаминовая кислота в аминокислотной позиции UDP-гликозилтрансферазы, которая соответствует аминокислотной позиции 223 SEQ ID NO: 11; или
(g) валин в аминокислотной позиции UDP-гликозилтрансферазы, который соответствует аминокислотной позиции 413 SEQ ID NO: 11,
где положения аминокислот UDP-гликозилтрансферазы, которые соответствуют положениям аминокислот SEQ ID NO:11, определяются выравниванием последовательности.
84. Не встречающаяся в природе нуклеиновая кислота, кодирующая не встречающуюся в природе UDP-гликозилтрансферазу по любому из пп. 80-82.
85. Подсластитель, содержащий RebM, полученный способом
(a) культивирования популяции генетически модифицированных клеток-хозяев по любому из предшествующих пунктов в среде с источником углерода в условиях, подходящих для получения RebM; и
(b) извлечения указанного соединения RebM из среды.
86. Композиция подсластителя, содержащая, по меньшей мере, одно другое вещество и RebM, полученные способом
(a) культивирования популяции генетически модифицированных клеток-хозяев по любому из предшествующих пунктов в среде с источником углерода в условиях, подходящих для получения RebM; и
(b) извлечения указанного соединения RebM из среды.
87. Подслащенная композиция, содержащая RebM, полученная способом
(a) культивирования популяции генетически модифицированных клеток-хозяев по любому из предшествующих пунктов в среде с источником углерода в условиях, подходящих для получения RebM; и
(b) извлечения указанного соединения RebM из среды.
88. Способ получения композиции подсластителя, включающий объединение по меньшей мере одного другого вещества с RebM, полученного способом
(a) культивирования популяции генетически модифицированных клеток-хозяев по любому из предшествующих пунктов в среде с источником углерода в условиях, подходящих для получения RebM; и
(b) извлечения указанного соединения RebM из среды.
89. Способ изготовления подслащенной композиции, включающий объединение по меньшей мере одной подслащенной композиции с RebM, полученной способом
(a) культивирования популяции генетически модифицированных клеток-хозяев по любому из предшествующих пунктов в среде с источником углерода в условиях, подходящих для получения RebM; и
(b) извлечения указанного соединения RebM из среды.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US201662374408P | 2016-08-12 | 2016-08-12 | |
| US62/374,408 | 2016-08-12 | ||
| PCT/US2017/046637 WO2018031955A2 (en) | 2016-08-12 | 2017-08-11 | Udp-dependent glycosyltransferase for high efficiency production of rebaudiosides |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2019104496A true RU2019104496A (ru) | 2020-09-14 |
| RU2019104496A3 RU2019104496A3 (ru) | 2021-04-09 |
| RU2777901C2 RU2777901C2 (ru) | 2022-08-11 |
Family
ID=
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| US20210355458A1 (en) | 2021-11-18 |
| JP2022137061A (ja) | 2022-09-21 |
| WO2018031955A2 (en) | 2018-02-15 |
| PT3497222T (pt) | 2022-02-09 |
| US11091743B2 (en) | 2021-08-17 |
| BR112018074999A2 (pt) | 2019-03-12 |
| CN109804073A (zh) | 2019-05-24 |
| US20190185826A1 (en) | 2019-06-20 |
| EP3497222B1 (en) | 2021-12-22 |
| SG11201900930UA (en) | 2019-02-27 |
| JP2019524134A (ja) | 2019-09-05 |
| ES2906310T3 (es) | 2022-04-18 |
| US20240174987A1 (en) | 2024-05-30 |
| AU2017308143B2 (en) | 2022-04-07 |
| AU2017308143A1 (en) | 2019-02-07 |
| MX2019001631A (es) | 2019-08-05 |
| KR102331018B1 (ko) | 2021-11-26 |
| RU2019104496A3 (ru) | 2021-04-09 |
| CN109804073B (zh) | 2023-05-16 |
| WO2018031955A3 (en) | 2018-03-15 |
| KR20190038612A (ko) | 2019-04-08 |
| CA3031162A1 (en) | 2018-02-15 |
| US11866738B2 (en) | 2024-01-09 |
| EP3497222A2 (en) | 2019-06-19 |
| MY194280A (en) | 2022-11-25 |
| JP7404068B2 (ja) | 2023-12-25 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Klähn et al. | Compatible solute biosynthesis in cyanobacteria | |
| JP2019524134A5 (ru) | ||
| US10000783B2 (en) | Steviol glucosyltransferases and genes encoding the same | |
| JP2013533736A5 (ru) | ||
| RU2676730C2 (ru) | Способы и вещества для основанного на рекомбинации получения соединений шафрана | |
| US20180132515A1 (en) | Geranylgeranyl pyrophosphate synthase | |
| JP2014524247A5 (ru) | ||
| ES2660301T3 (es) | Glicosiltransferasa que glicosila ácido flavokermésico y/o ácido kermésico | |
| JP2019513392A5 (ru) | ||
| CA2867572C (en) | Method for producing steviol glycoside | |
| CN108300726B (zh) | α-红没药醇合成质粒及其构建方法与大肠杆菌工程菌株 | |
| JP7318989B2 (ja) | Ｕｄｐ－ラムノースの生合成生産 | |
| US10472661B2 (en) | Method for increasing glycosylation of a composition comprising steviol glycosides | |
| KR101502745B1 (ko) | 수산화칼슘설탕액을 이용한 올리고당 제조방법 | |
| RU2019104496A (ru) | Udp-зависимая гликозилтрансфераза для высокоэффективного продуцирования ребаудиозидов | |
| US20190169664A1 (en) | Microbial platform for production of glycosylated compounds | |
| KR101669041B1 (ko) | 스테비오사이드 생산능을 가지는 재조합 미생물 및 이를 이용한 스테비오사이드의 생산 방법 | |
| KR20140134636A (ko) | 카우린 생성능을 가지는 재조합 미생물 및 이를 이용한 카우린의 제조 방법 | |
| CN115449514B (zh) | 一种β-1,2-糖基转移酶及其应用 | |
| KR101669044B1 (ko) | 스테비올바이오사이드 생산능을 가지는 재조합 미생물 및 이를 이용한 스테비올바이오사이드의 생산 방법 | |
| US9340809B2 (en) | Microbial conversion of sugar acids and means therein | |
| RU2020109765A (ru) | Применение кауреноксидазы pisum sativum для высокоэффективного производства ребаудиозидов | |
| KR101669057B1 (ko) | 스테비올모노사이드 생산능을 가지는 재조합 미생물 및 이를 이용한 스테비올모노사이드의 생산 방법 | |
| US20220389043A1 (en) | Improved isolation of steviol glycosides | |
| RU2021112544A (ru) | Гидроксилаза кауреновой кислоты stevia rebaudiana для высокоэффективного производства ребаудиозидов |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| HE9A | Changing address for correspondence with an applicant |