RU2018119112A - Композиции и способы на основе dac hyp - Google Patents

Композиции и способы на основе dac hyp Download PDF

Info

Publication number
RU2018119112A
RU2018119112A RU2018119112A RU2018119112A RU2018119112A RU 2018119112 A RU2018119112 A RU 2018119112A RU 2018119112 A RU2018119112 A RU 2018119112A RU 2018119112 A RU2018119112 A RU 2018119112A RU 2018119112 A RU2018119112 A RU 2018119112A
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
daclizumab
composition
cell
dac hyp
day
Prior art date
Application number
RU2018119112A
Other languages
English (en)
Inventor
Теймар ХАРТМАН
Пол У. СОЭР
Джон Е. БЕРКИ
Марк С. ВЕССОН
Пин И. Хуан
Томас Дж. РОБИНСОН
Бреден ПАРТРИДЖ
Дж. Юнь Тсо
Original Assignee
Эббви Байотекнолоджи Лтд.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Эббви Байотекнолоджи Лтд. filed Critical Эббви Байотекнолоджи Лтд.
Publication of RU2018119112A publication Critical patent/RU2018119112A/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2866—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against receptors for cytokines, lymphokines, interferons
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
    • A61K38/21—Interferons [IFN]
    • A61K38/215—IFN-beta
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2/00—Methods or apparatus for disinfecting or sterilising materials or objects other than foodstuffs or contact lenses; Accessories therefor
    • A61L2/16—Methods or apparatus for disinfecting or sterilising materials or objects other than foodstuffs or contact lenses; Accessories therefor using chemical substances
    • A61L2/18—Liquid substances or solutions comprising solids or dissolved gases
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/10—Immunoglobulins specific features characterized by their source of isolation or production
    • C07K2317/14—Specific host cells or culture conditions, e.g. components, pH or temperature
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/40—Immunoglobulins specific features characterized by post-translational modification
    • C07K2317/41—Glycosylation, sialylation, or fucosylation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
    • C07K2317/732—Antibody-dependent cellular cytotoxicity [ADCC]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/94—Stability, e.g. half-life, pH, temperature or enzyme-resistance
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2500/00—Specific components of cell culture medium
    • C12N2500/90—Serum-free medium, which may still contain naturally-sourced components
    • C12N2500/95—Protein-free medium and culture conditions
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2510/00—Genetically modified cells
    • C12N2510/02—Cells for production
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2510/00—Genetically modified cells
    • C12N2510/04—Immortalised cells
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2511/00—Cells for large scale production
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Claims (125)

1. Модифицированная клетка NS0, которая адаптирована к росту в бессывороточных и не содержащих холестерина средах и которая сконструирована для экспрессии рекомбинантного белка, где указанная клетка способна достигать объемного выхода, превышающего 100 мг/л/сутки рекомбинантного белка, в культуре объемом 100 л в 10-суточном способе с подпиткой при культивировании в бессывороточных и не содержащих холестерина средах.

2. Модифицированная клетка NS0 по п. 1, которая способна достигать объемного выхода, превышающего 100 мг/л/сутки рекомбинантного белка, в культуре объемом 1000 л в 10-суточном способе с подпиткой при культивировании в средах, не содержащих холестерина и компонентов животного происхождения.

3. Модифицированная клетка NS0 по п. 1, которая способна достигать объемного выхода, превышающего 100 мг/л/сутки рекомбинантного белка, в культуре объемом 16000 л в 10-суточном способе с подпиткой при культивировании в средах, не содержащих холестерина и компонентов животного происхождения.

4. Модифицированная клетка NS0 по одному из пп. 1-3, где указанный способ с подпиткой включает добавление питательной среды, которую добавляют по следующей схеме, где добавленный объем представляет процент от первоначального объема клеточной культуры:
Сутки Добавленный объем 0 0 1 0 2 4 3 7,8 4 7,8 5 7,8 6 11 7 13 8 15 9 15 10 0

5. Модифицированная клетка NS0 по п. 1, которая способна достигать объемного выхода, превышающего 200 мг/л/сутки рекомбинантного белка, в культуре объемом, по меньшей мере, 100 л в 13-суточном способе с подпиткой.

6. Модифицированная клетка NS0 по п. 5, которая способна достигать объемного выхода, превышающего 200 мг/л/сутки рекомбинантного белка, в культуре объемом 1000 л в 13-суточном способе с подпиткой при культивировании в средах, не содержащих холестерина.

7. Модифицированная клетка NS0 по п. 5, которая способна достигать объемного выхода, превышающего 100 мг/л/сутки рекомбинантного белка, в культуре объемом 16000 л в 10-суточном способе с подпиткой при культивировании в бессывороточных и не содержащих холестерина средах.

8. Модифицированная клетка NS0 по п. 1, которую стабильно трансфектируют нуклеиновой кислотой, пригодной для экспрессии моноклонального анти-CD25-антитела.

9. Модифицированная клетка NS0 по п. 8, где моноклональное анти-CD25-антитело содержит VL легкой цепи, соответствующую по последовательности положениям 21-233 в SEQ ID NO:2, и VH тяжелой цепи, соответствующую по последовательности положениям 20-465 в SEQ ID NO:4.

10. Модифицированная клетка NS0 по п. 1, которую трансформируют вектором pAbX.gpt.

11. Модифицированная клетка NS0 по п. 1, которую трансформируют вектором pHAT.IgG1.rg.dE.

12. Способ получения рекомбинантного белка, включающий культивирование модифицированной клетки NS0 по одному из пп. 1-11.

13. Способ по п. 12, в котором модифицированную клетку NS0 культивируют в условиях, которые приводят к продукции, по меньшей мере, 100 мг/л/сутки рекомбинантного белка, в 100, 1000 или 16000 л культуры в 10-суточном способе с подпиткой, или, по меньшей мере, 200 мг/л/сутки рекомбинантного белка в 100, 1000 или 16000 л культуры в 13-суточном способе с подпиткой.

14. Способ по п. 12 или 13, в котором модифицированную клетку NS0 культивируют в отсутствии сыворотки крови и холестерина.

15. Способ по п. 14, в котором модифицированную клетку NS0 культивируют в отсутствии трополона и гидрокортизона.

16. Способ по п. 12 или 13, в котором модифицированную клетку NS0 культивируют в базальной и/или питательной среде, содержащей 10-35 г/л глюкозы.

17. Способ по п. 16, в котором модифицированную клетку NS0 культивируют в базальной среде, содержащей 15 г/л глюкозы, и/или питательной среде, содержащей 28 г/л глюкозы.

18. Способ по п. 17, в котором базальная среда состоит из компонентов PFBM2±10%.

19. Способ по п. 17, в котором питательная среда состоит из компонентов PFFM3±10%.

20. Способ по п. 18 или 19, в котором клетку культивируют в базальной среде в течение 1-3 суток и затем в питательной среде в течение 10-13 суток.

21. Способ по п. 18, в котором питательную среду добавляют по схеме, приведенной в таблице 7 ± 10%.

22. Вектор, пригодный для рекомбинантной экспрессии интересующего белка, содержащий слабый промотор, регулирующий экспрессию селектируемого маркера, функционирующего в клетках млекопитающих, и сильный промотор, регулирующий экспрессию интересующего белка.

23. Вектор по п. 22, где интересующий белок является терапевтическим антителом.

24. Вектор по п. 23, где терапевтическое антитело представляет анти-CD25-антитело.

25. Вектор по п. 24, где анти-CD25-антитело содержит CDR даклизумаба.

26. Вектор по п. 25, где анти-CD25-антитело представляет даклизумаб.

27. Способ получения клетки-хозяина млекопитающих, которая имеет высокий объемный выход интересующего белка, включающий трансфектирование клетки вектором по одному из пп. 22-26 и отбор клетки, которая способна продуцировать, по меньшей мере, 100 мг/л/сутки рекомбинантного белка в 100, 1000 или 16000 л культуры в 10-суточном способе с подпиткой, или, по меньшей мере, 200 мг/л/сутки рекомбинантного белка в 100, 1000 или 16000 л культуры в 13-суточном способе с подпиткой.

28. Композиция, содержащая даклизумаб, в которой даклизумаб отличается присутствием N-связанной изоформы тяжелой цепи pE/Q и/или N-концевой изоформы тяжелой цепи Q/VHS.

29. Композиция по п. 28, в которой N-концевая изоформа тяжелой цепи pE/Q составляет примерно 3-17% или 6-15% даклизумаба.

30. Композиция по п. 28, в которой N-концевая изоформа тяжелой цепи pE/Q составляет примерно 5-12 или 7-12% даклизумаба.

31. Композиция по одному из пп. 28-30, в которой N-концевая изоформа тяжелой цепи Q/VHS составляет примерно 1-15% даклизумаба.

32. Композиция по п. 31, в которой N-концевая изоформа тяжелой цепи Q/VHS составляет примерно 3-12% даклизумаба.

33. Композиция по п. 28, в которой тяжелая цепь даклизумаба находится в следующих N-концевых изоформах:
Изоформа Содержание pE/pE 25-50% pE/Q 6-15% pE/VHS 25-48% Q/VHS 1-15% VHS/VHS 0,5-25%

34. Композиция по п. 28, в которой тяжелая цепь даклизумаба находится в следующих N-концевых изоформах:
Изоформа Содержание pE/pE 31-46% pE/Q 5-12% pE/VHS 31-42% Q/VHS 3-12% VHS/VHS 1-17%

35. Композиция по п. 28, в которой даклизумаб отличается профилем изоформ при катионообменной хроматографии по существу аналогичным представленному на фигуре 18.

36. Композиция по п. 28, в которой даклизумаб представляет DAC HYP.

37. Композиция, содержащая даклизумаб, в которой даклизумаб отличается профилем N-связанного гликозилирования по данным ВЭЖХ, содержащим два основных пика, один соответствующий олигосахариду G0-GlсNAc, и один, соответствующий олигосахариду G0, где объединенные AUC данных двух пиков составляют примерно 75-100%, примерно 80-100% или примерно 88-99,5% от общей AUC всех пиков.

38. Композиция по п. 37, в которой AUC пика G0-GlcNAc составляет примерно 5-20%, примерно 5-18% от общей AUC всех пиков, и AUC пика G0 составляет примерно 70-99%, примерно 75-92% или примерно 75-90% от общей AUC всех пиков.

39. Композиция по п. 38, в которой AUC пика G0-GlcNAc составляет примерно 6-16% или примерно 7-15% от общей AUC всех пиков, и AUC пика G0 составляет примерно 78-90% или примерно 81-88% от общей AUC всех пиков.

40. Композиция по одному из пп. 37-39, в которой профиль N-связанного гликозилирования имеет менее чем примерно 3% Man5.

41. Композиция по п. 40, в которой профиль N-связанного гликозилирования имеет менее чем примерно 0,5% G2, Man6 и/или Man7.

42. Композиция по п. 37, в которой профиль N-связанного гликозилирования содержит третий пик, соответствующий сиалилированным олигосахаридам, и AUC пика сиалилированных олигосахаридов составляет 1% или менее от общей AUC всех пиков.

43. Композиция по п. 37, в которой профиль N-связанного гликозилирования содержит третий пик, соответствующий олигосахариду G1, и AUC пика G1 составляет менее чем примерно 10%, менее чем примерно 5%, менее чем примерно 4%, менее чем примерно 3% или примерно 1-5%, примерно 1-4% или примерно 1-3% от общей AUC всех пиков.

44. Композиция по п. 43, в которой AUC пика G1 составляет примерно 1-2% от общей AUC всех пиков.

45. Композиция по п. 37, в которой даклизумаб имеет профиль N-связанного гликозилирования по данным ВЭЖХ по существу аналогичный представленному на фигуре 19 или представленному на нижней панели фигуры 21.

46. Композиция по п. 37, в которой даклизумаб представляет DAC HYP.

47. Композиция, содержащая даклизумаб, который проявляет менее чем 30%, менее чем 20%, менее чем 15%, менее чем 10% или менее чем 5% среднюю ADCC-цитотоксичность по данным клеточного теста в условиях in vitro с использованием эффекторных клеток, по меньшей мере, от 3 здоровых доноров и клеток Kit 225 K6 в качестве клеток-мишеней, в концентрации даклизумаба 1 мкг/мл и при соотношении эффектора к клеткам-мишеням, равным примерно 25:1.

48. Композиция по п. 47, где даклизумаб проявляет 5-30, 5-25, 10-30, 10-25 или 15-25% среднюю ADCC-цитотоксичность в указанном тесте.

49. Композиция по п. 47 или 48, где в указанном тесте используются эффекторные клетки, по меньшей мере, от 6 здоровых доноров.

50. Композиция по п. 47 или 48, где в указанном тесте используются эффекторные клетки, по меньшей мере, от 10 здоровых доноров.

51. Композиция по пп. 47-50, в которой даклизумаб представляет DAC HYP.

52. Композиция, пригодная для получения лекарственной формы даклизумаба, содержащая примерно 150-190 мг/мл даклизумаба и количества наполнителей так, что разведение композиции буфером для разведения дает разбавленную композицию, которая содержит примерно 85-165 мг/мл даклизумаба и имеет осмолярность в пределах примерно 267-327 мОсм/кг и рН в пределах примерно 5,8-6,2 при 25°С, и в которой, по меньшей мере, примерно 95% даклизумаба находится в мономерной форме по данным эксклюзионной хроматографии.

53. Композиция по п. 52, которая содержит количества наполнителей так, что при разведении композиции буфером для разведения разбавленная композиция содержит примерно 85-115 мг/мл даклизумаба.

54. Композиция по п. 52, которая содержит количества наполнителей так, что при разведении композиции буфером для разведения разбавленная композиция содержит примерно 150±15 мг/мл даклизумаба.

55. Композиция, содержащая примерно от 4 до 15 мг/мл даклизумаба, где 0,1% или менее даклизумаба находится в агрегатной форме.

56. Композиция по п. 55, которую получают очисткой композиции даклизумаба, содержащей примерно от 4 до 15 мг/мл даклизумаба, где до 2,5% даклизумаба находится в агрегатной форме, с использованием колоночной хроматографии на слабой катионообменной смоле.

57. Композиция по п. 56, где слабая катионообменная смола представляет СМ-650М.

58. Композиция по п. 57, где смолу СМ-650М уравновешивают буфером для уравновешивания, содержащим примерно 20 мМ цитрата натрия, рН 4,4-4,6, и даклизумаб элюируется буфером для элюирования, содержащим примерно 20 мМ цитрата натрия и примерно 75 мМ сульфата натрия, рН 4,4-4,6.

59. Композиция по п. 58, где хроматографию проводят на цилиндрической колонке с использованием основания смолы с высотой примерно 10-30 см или примерно 17-19 см, и даклизумаб элюируется при температуре в пределах примерно 4-22°С или примерно 18-22°С, и со скоростью потока в пределах примерно 50-200 см/ч или примерно 90-110 см/ч.

60. Композиция, подходящая для введения людям, содержащая примерно 85-165 мг/мл даклизумаба; и примерно 0,02-0,04% (мас./об.) полисорбата 80, где композиция имеет осмолярность в пределах примерно 267-327 мОсм/кг и рН в пределах примерно 5,8-6,2 при 25°С, и по меньшей мере, примерно 95% даклизумаба находится в мономерной форме по данным эксклюзионной хроматографии.

61. Композиция по п. 60, в которой, по меньшей мере, примерно 99% даклизумаба находится в мономерной форме по данным эксклюзионной хроматографии.

62. Композиция по п. 60, которая содержит примерно 85-115 мг/мл даклизумаба.

63. Композиция по п. 62, которая в основном состоит примерно из 100 мг/мл даклизумаба, примерно 40 мМ сукцината натрия, примерно 100 мМ хлорида натрия и примерно 0,03% (мас./об.) полисорбата 80, и имеет рН примерно 6,0 при 25°С.

64. Композиция по п. 60, которая содержит примерно 135-165 мг/мл даклизумаба.

65. Композиция по п. 64, которая в основном состоит примерно из 150 мг/мл даклизумаба, примерно 40 мМ сукцината натрия, примерно 100 мМ хлорида натрия и примерно 0,03% (мас./об.) полисорбата 80, и имеет рН примерно 6,0 при 25°С.

66. Композиция по п. 64, которую получают способом, включающим стадии концентрирования композиции даклизумаба, содержащей примерно 4-15 мг/мл даклизумаба, посредством ультрафильтрации в подходящем буфере с достижением концентрации даклизумаба в пределах примерно 85-180 мг/мл и необязательно разведения концентрированной композиции буфером для разведения.

67. Фармацевтическая композиция, подходящая для подкожного введения, содержащая примерно 85-165 мг/мл даклизумаба, в которой процент даклизумаба в агрегатной форме не превышает примерно 3% после хранения в течение 12 месяцев при температуре в пределах примерно 2-8°С.

68. Фармацевтическая композиция по п. 67, которая содержит примерно 85-115 мг/мл даклизумаба.

69. Фармацевтическая композиция по п. 68, которая содержит примерно 135-165 мг/мл даклизумаба.

70. Фармацевтическая композиция по п. 68 или 69, в которой процент даклизумаба в агрегатной форме не превышает примерно 2% после хранения в течение 12 месяцев при температуре в пределах примерно 2-8°С.

71. Фармацевтическая композиция по п. 68 или 69, в которой процент даклизумаба в агрегатной форме не превышает примерно 3% после хранения в течение 18 месяцев при температуре в пределах примерно 2-8°С.

72. Способ сбора рекомбинантного белка из клеточной культуры, включающий стадии:
(i) доведения рН клеточной культуры, которая экспрессирует и секретирует рекомбинантный белок до рН в пределах примерно 4,5-5,5;
(ii) инкубации клеточной культуры с доведенным рН в течение примерно 30-90 мин при температуре в пределах примерно 4-15°С; и
(iii) центрифугирования инкубированной клеточной культуры с доведенным рН для удаления клеточного дебриса.

73. Способ получения очищенной композиции даклизумаба, включающий стадии:
(i) абсорбции даклизумаба из сырого препарата даклизумаба на смолу для аффинной хроматографии;
(ii) промывания смолы для аффинной хроматографии буфером для промывания для удаления загрязняющих примесей;
(iii) элюирования адсорбированного даклизумаба буфером для элюирования;
(iv) инактивации вирусов в элюате доведением рН примерно до рН 3-4 и инкубации элюата с доведенным рН при определенной температуре в течение периода времени, достаточного для инактивации вирусов;
(v) нейтрализации элюата с инактивированными вирусами до рН в пределах примерно рН 7,7-7,9 (при 25°С);
(vi) пропускания нейтрализованного элюата через смолу для сильной анионообменной хроматографии;
(vii) адсорбции даклизумаба элюата со стадии (vi) на смоле для слабой катионнообменной хроматографии; и
(viii) элюирования адсорбированного даклизумаба со смолы для слабой катионообменной хроматографии.

74. Способ по п. 73, в котором сырой препарат даклизумаб собирают из клеточной культуры.

75. Способ по п. 73, в котором даклизумаб собирают с использованием способа по п. 72.

76. Способ по п. 73, который дополнительно включает стадии:
(ix) фильтрования элюированной композиции даклизумаба со стадии (viii) для удаления вирусов; и
(x) концентрирования профильтрованного раствора с использованием ультрафильтрации с получением очищенной композиции даклизумаба, содержащей примерно 85-180 мг/мл даклизумаба.

77. Способ по п. 76, который дополнительно включает стадию разведения очищенной композиции даклизумаба буфером для разведения с получением композиции, содержащей примерно 85-165 мг/мл даклизумаба и примерно 0,02-0,04% (мас./об.) полисорбата 80, где композиция имеет осмолярность в пределах примерно 267-327 мОсм/кг и рН в пределах примерно 5,8-6,2 при 25°С, и, по меньшей мере, примерно 95% даклизумаба находится в мономерной форме по данным эксклюзионной хроматографии.

78. Способ по п. 77, в котором полученная композиция содержит менее чем примерно 50 ppm белков клеток-хозяев из рекомбинантного источника даклизумаба, менее чем примерно 10 ppm протеина А, и не более чем 3% даклизумаба в композиции находится в агрегатной форме.

79. Базальная среда PFBM2.

80. Питательная среда PFFM3.

81. Композиция даклизумаба, которую получают способом, включающим стадии культивирования клетки-хозяина по одному из пп. 1-11 в условиях, в которых даклизумаб секретируется в культуральную среду.

82. Композиция даклизумаба по п. 81, где способ дополнительно включает стадию выделения секретированного даклизумаба из клеточной культуральной среды.

83. Буфер, пригодный для санитарной обработки смолы с протеином А для аффинной хроматографии, содержащий примерно 100-500 мМ цитрата натрия, примерно 10-30 мМ NaOH и примерно 0,5-3% (об./об.) бензилового спирта.

84. Способ санитарной обработки колонки с протеином А для аффинной хроматографии, включающий промывание колонки буфером для санитарной обработки по п. 83 со скоростью потока и в течение периода времени, достаточных для санитарной обработки колонки.

85. Способ по п. 84, в котором колонку промывают примерно 1,8 объемами колонки буфера для санитарной обработки со скоростью потока 150 см/ч, промытую колонку инкубируют без протока в течение примерно 30-45 мин и затем уравновешивают буфером для уравновешивания.

86. Способ по п. 85, в котором буфер для уравновешивания содержит примерно 20 мМ цитрата натрия и 150 мМ NaCl, и имеет рН примерно 7 (при 25°С).

87. Способ лечения пациента, страдающего рассеянным склерозом, включающий введение пациенту количества композиции DAC HYP, достаточного для обеспечения терапевтического эффекта.

88. Способ по п. 87, в котором композицию DAC HYP вводят внутривенно.

89. Способ по п. 88, в котором композицию DAC HYP вводят в количестве, соответствующем примерно 0,8-0,9 мг/кг DAC HYP.

90. Способ по п. 89, в котором композицию DAC HYP вводят в количестве, соответствующем примерно 1 мг/кг DAC HYP.

91. Способ по одному из пп. 87-90, в котором DAC HYP вводят один раз в неделю в течение, по меньшей мере, 6 недель, по меньшей мере, 12 недель, по меньшей мере, 24 недель.

92. Способ по одному из пп. 87-91, в котором DAC HYP вводят в виде монотерапии.

93. Способ по п. 92, в котором пациент не отвечал на предшествующую терапию интерфероном-бета или прервал предшествующее лечение интерфероном-бета.

94. Способ по одному из пп. 87-91, в котором DAC HYP вводят дополнительно к интерферону-бета.

95. Способ по п. 87, в котором композицию DAC HYP вводят подкожно.

96. Способ по п. 95, в котором композицию DAC HYP вводят в количестве, соответствующем примерно 1 мг/кг DAC HYP.

97. Способ по п. 96, в котором композицию DAC HYP вводят один раз в две недели.

98. Способ по п. 97, в котором композицию DAC HYP вводят в целом в течение примерно 24 недель.

99. Способ по п. 95, в котором композицию DAC HYP вводят в количестве, соответствующем примерно 2 мг/кг DAC HYP.

100. Способ по п. 99, в котором композицию DAC HYP вводят в один раз в 4 недели.

101. Способ по п. 100, в котором композицию DAC HYP вводят в целом в течение примерно 24 недель.

102. Способ по п. 101, в котором композицию DAC HYP вводят в количестве, соответствующем от 75 до 300 мг DAC HYP.

103. Способ по п. 102, в котором композицию DAC HYP вводят в количестве, соответствующем 150 мг.

104. Способ по п. 102, в котором композицию DAC HYP вводят в количестве, соответствующем 300 мг.

105. Способ по одному из пп. 101-104, в котором DAC HYP вводят в один раз в 4 недели.

106. Способ по п. 105, в котором композицию DAC HYP вводят в целом в течение примерно 48 недель.

107. Способ по одному из пп. 101-106, в котором DAC HYP вводят в виде монотерапии.

108. Способ по п. 107, в котором пациент не отвечал на предшествующую терапию интерфероном-бета или прервал предшествующее лечение интерфероном-бета.

109. Способ по одному из пп. 101-106, в котором DAC HYP вводят дополнительно к интерферону-бета.
RU2018119112A 2011-05-27 2012-05-25 Композиции и способы на основе dac hyp RU2018119112A (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201161490998P 2011-05-27 2011-05-27
US61/490,998 2011-05-27

Related Parent Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2012121876A Division RU2661764C2 (ru) 2011-05-27 2012-05-25 Композиции и способы на основе dac hyp

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2018119112A true RU2018119112A (ru) 2018-11-07

Family

ID=46177353

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2018119112A RU2018119112A (ru) 2011-05-27 2012-05-25 Композиции и способы на основе dac hyp
RU2012121876A RU2661764C2 (ru) 2011-05-27 2012-05-25 Композиции и способы на основе dac hyp

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2012121876A RU2661764C2 (ru) 2011-05-27 2012-05-25 Композиции и способы на основе dac hyp

Country Status (10)

Country Link
US (7) US20120301429A1 (ru)
EP (1) EP2527429A3 (ru)
JP (4) JP6055615B2 (ru)
CN (2) CN107090040A (ru)
AU (4) AU2012203095B2 (ru)
BR (1) BR102012012673A8 (ru)
CA (1) CA2777978A1 (ru)
MX (1) MX339533B (ru)
RU (2) RU2018119112A (ru)
SG (1) SG185920A1 (ru)

Families Citing this family (18)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP6055615B2 (ja) * 2011-05-27 2016-12-27 アッヴィ バイオテクノロジー リミテッド Ｄａｃｈｙｐ組成物および方法
US9809652B2 (en) 2011-08-08 2017-11-07 Abbvie Biotherapeutics Inc. Methods of treating progressive forms of multiple sclerosis comprising subcutaneously administering daclizumab
EP2785731B1 (en) * 2011-11-30 2019-02-20 AbbVie Biotechnology Ltd Vectors and host cells comprising a modified sv40 promoter for protein expression
US9217168B2 (en) 2013-03-14 2015-12-22 Momenta Pharmaceuticals, Inc. Methods of cell culture
KR102146414B1 (ko) 2013-09-04 2020-08-20 이엠디 밀리포어 코포레이션 단백질 a 기반 친화성 크로마토그래피 컬럼의 세정 방법
GB201503578D0 (en) * 2015-03-03 2015-04-15 Ge Healthcare Bio Sciences Ab Sanitization method for affinity chromatography matrices
US20180072769A1 (en) 2015-03-23 2018-03-15 Alexion Pharmaceuticals, Inc. Virus filtration
RU2742260C2 (ru) * 2015-08-12 2021-02-04 Пфайзер Инк. Кэпированные и некэпированные цистеины антитела и их применение в конъюгации антитело-лекарственное средство
EP3408397B1 (en) 2016-01-27 2020-07-15 Just-Evotec Biologics, Inc. Hybrid promoter and uses thereof
US11098310B2 (en) 2016-01-27 2021-08-24 Just-Evotec Biologics, Inc. Expression from transposon-based vectors and uses
US11261462B2 (en) 2016-01-27 2022-03-01 Just-Evotec Biologics, Inc. Inducible expression from transposon-based vectors and uses
WO2018027195A1 (en) * 2016-08-05 2018-02-08 Abbvie Biotherapeutics Inc. Compositions containing reduced amounts of daclizumab acidic isoforms and methods for preparing the same
CA3086186A1 (en) * 2017-12-21 2019-06-27 Genzyme Corporation Methods for enhanced removal of impurities during protein a chromatography
US20220220423A1 (en) * 2019-04-17 2022-07-14 Bristol-Myers Squibb Company Methods for regenerating chromatography resins
KR20210009982A (ko) * 2019-07-18 2021-01-27 에이비온 주식회사 2당화된 인터페론-베타 단백질의 정제 방법
WO2021021260A1 (en) * 2019-08-01 2021-02-04 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Method for viral inactivation
MY190626A (en) 2019-12-06 2022-04-27 Regeneron Pharma Anti-vegf protein compositions and methods for producing the same
CN114181300A (zh) * 2021-12-20 2022-03-15 方坦思(上海)生物医药有限公司 一种高纯度单克隆抗体的制备方法

Family Cites Families (20)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB1430566A (en) * 1974-11-15 1976-03-31 Nestel Sa Isolation of proteins
US7442777B2 (en) * 2000-11-29 2008-10-28 Arius Research Inc. Cytotoxicity mediation of cells evidencing surface expression of CD63
RU2318537C2 (ru) * 2001-04-06 2008-03-10 Юниверсити Оф Бристоль Применение cd25-связывающих молекул для лечения пациентов, устойчивых к стероидам
JP2005325133A (ja) * 2001-10-15 2005-11-24 Kirin Brewery Co Ltd 抗ｈｌａ−ｄｒ抗体の利用
US20040002135A1 (en) * 2002-03-28 2004-01-01 Sauer Paul W. Adapted NS0 cell lines with the ability to grow under glutamine-free conditions
US7365168B2 (en) * 2002-10-15 2008-04-29 Pdl Biopharma, Inc. Alteration of FcRn binding affinities or serum half-lives of antibodies by mutagenesis
EP1614693A4 (en) * 2003-03-31 2006-07-19 Kirin Brewery PURIFICATION OF A HUMAN MONOCLONAL ANTIBODY AND A HUMAN POLYCLONAL ANTIBODY
US20070190057A1 (en) * 2006-01-23 2007-08-16 Jian Wu Methods for modulating mannose content of recombinant proteins
WO2007146847A2 (en) 2006-06-09 2007-12-21 University Of Maryland, Baltimore Glycosylation engineered antibody therapy
EP2069387A4 (en) * 2006-06-14 2011-02-02 Glaxosmithkline Llc METHODS OF PURIFYING ANTIBODIES USING HYDROXYAPATITE CERAMIC
US20090209656A1 (en) * 2006-07-06 2009-08-20 Ge Healthcare Bio-Sciences Ab Disinfection/sanitation method where the material is treated with a solution comprising benzyl alcohol and c2-3 alcohol
JP2011512875A (ja) * 2008-03-11 2011-04-28 ジェネンテック， インコーポレイテッド 増強されたａｄｃｃ機能を有する抗体
US20100055098A1 (en) * 2008-08-28 2010-03-04 Facet Biotech Corporation Method for treating multiple sclerosis patients with anti-il2r antibodies
US20120329709A1 (en) * 2009-05-26 2012-12-27 Brian Edward Collins Production of glycoproteins
WO2010141855A1 (en) 2009-06-05 2010-12-09 Momenta Pharmaceuticals, Inc. Methods of modulating fucosylation of glycoproteins
ES2817802T3 (es) * 2009-08-07 2021-04-08 Emd Millipore Corp Métodos para purificar una proteína objetivo de una o más impurezas en una muestra
WO2011019622A1 (en) 2009-08-14 2011-02-17 Genentech, Inc. Cell culture methods to make antibodies with enhanced adcc function
US10087236B2 (en) * 2009-12-02 2018-10-02 Academia Sinica Methods for modifying human antibodies by glycan engineering
US8993524B2 (en) 2010-03-05 2015-03-31 The Johns Hopkins University Compositions and methods for targeted immunomodulatory antibodies and fusion proteins
JP6055615B2 (ja) * 2011-05-27 2016-12-27 アッヴィ バイオテクノロジー リミテッド Ｄａｃｈｙｐ組成物および方法

Also Published As

Publication number Publication date
BR102012012673A8 (pt) 2021-02-17
AU2016202873A1 (en) 2016-05-26
MX2012006115A (es) 2012-12-04
EP2527429A3 (en) 2013-10-30
AU2016202873B2 (en) 2018-02-22
US9340619B2 (en) 2016-05-17
CN102796705A (zh) 2012-11-28
CN107090040A (zh) 2017-08-25
BR102012012673A2 (pt) 2015-11-17
AU2020202298A1 (en) 2020-04-23
US20200157230A1 (en) 2020-05-21
JP2012244993A (ja) 2012-12-13
SG185920A1 (en) 2012-12-28
US20150203583A1 (en) 2015-07-23
CA2777978A1 (en) 2012-11-27
US20150197573A1 (en) 2015-07-16
MX339533B (es) 2016-05-30
RU2012121876A (ru) 2013-11-27
AU2012203095A1 (en) 2012-12-13
RU2661764C2 (ru) 2018-07-19
US20150274832A1 (en) 2015-10-01
EP2527429A2 (en) 2012-11-28
US20170247461A1 (en) 2017-08-31
US9815903B2 (en) 2017-11-14
US9260528B2 (en) 2016-02-16
JP6055615B2 (ja) 2016-12-27
AU2012203095B2 (en) 2016-02-04
US9676860B2 (en) 2017-06-13
JP2018134091A (ja) 2018-08-30
JP2016210796A (ja) 2016-12-15
US20180127506A1 (en) 2018-05-10
AU2018200654A1 (en) 2018-02-15
JP2020078348A (ja) 2020-05-28
US20120301429A1 (en) 2012-11-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2018119112A (ru) Композиции и способы на основе dac hyp
JP2012244993A5 (ru)
TW516962B (en) A human TNFR1-IgG1 preparation
EP3400241B1 (en) Modulation of afucosylated species in a monoclonal antibody composition
US9045543B2 (en) Humanized anti-CD20 monoclonal antibody
US20190048070A1 (en) Reduction of high molecular weight species, acidic charge species and fragments in a monoclonal antibody composition
EP1748063B1 (en) Protein A production and purification without using animal derived components
AU2006292700A1 (en) Protein a production and purification without using animal derived components
EP3101035B1 (en) Bifunctional fusion protein, preparation method therefor, and use thereof
EP4335459A1 (en) Pharmaceutical composition for treatment of mucopolysaccharidosis type 1
WO2022232376A1 (en) Methods for reducing low molecular weight species of recombinantly-produced proteins

Legal Events

Date Code Title Description
FA93 Acknowledgement of application withdrawn (no request for examination)

Effective date: 20210525