RU2017121232A - Плазмиды и способ получения вирусных частиц - Google Patents

Плазмиды и способ получения вирусных частиц Download PDF

Info

Publication number
RU2017121232A
RU2017121232A RU2017121232A RU2017121232A RU2017121232A RU 2017121232 A RU2017121232 A RU 2017121232A RU 2017121232 A RU2017121232 A RU 2017121232A RU 2017121232 A RU2017121232 A RU 2017121232A RU 2017121232 A RU2017121232 A RU 2017121232A
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
seq
plasmid
rna
expression
paragraphs
Prior art date
Application number
RU2017121232A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2017121232A3 (ru
RU2708151C2 (ru
Inventor
ПАВЕС Каролина БЕЛТРАН
САН МАРТИН Марсело КОРТЕС
ОССА Еугенио СПЕНСЕР
САМОРАНО Каролина ТАМБЛЕЙ
АСКУЙ Даниэла ТОРО
Original Assignee
Универсидад Де Сантьяго Де Чили
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Универсидад Де Сантьяго Де Чили filed Critical Универсидад Де Сантьяго Де Чили
Publication of RU2017121232A publication Critical patent/RU2017121232A/ru
Publication of RU2017121232A3 publication Critical patent/RU2017121232A3/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2708151C2 publication Critical patent/RU2708151C2/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
    • C12N15/86—Viral vectors
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/16011—Orthomyxoviridae
    • C12N2760/16021—Viruses as such, e.g. new isolates, mutants or their genomic sequences
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/16011—Orthomyxoviridae
    • C12N2760/16022—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/16011—Orthomyxoviridae
    • C12N2760/16034—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/16011—Orthomyxoviridae
    • C12N2760/16041—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector
    • C12N2760/16043—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector viral genome or elements thereof as genetic vector
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/16011—Orthomyxoviridae
    • C12N2760/16051—Methods of production or purification of viral material
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/16011—Orthomyxoviridae
    • C12N2760/16111—Influenzavirus A, i.e. influenza A virus
    • C12N2760/16151—Methods of production or purification of viral material
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/16011—Orthomyxoviridae
    • C12N2760/16111—Influenzavirus A, i.e. influenza A virus
    • C12N2760/16151—Methods of production or purification of viral material
    • C12N2760/16152—Methods of production or purification of viral material relating to complementing cells and packaging systems for producing virus or viral particles
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2800/00—Nucleic acids vectors
    • C12N2800/10—Plasmid DNA
    • C12N2800/106—Plasmid DNA for vertebrates
    • C12N2800/107—Plasmid DNA for vertebrates for mammalian
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2830/00—Vector systems having a special element relevant for transcription
    • C12N2830/80—Vector systems having a special element relevant for transcription from vertebrates

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Claims (24)

1. Способ выработки химерного ns-RNA вируса, включающий в себя следующие действия:
а) трансфицируют клетки животного экспрессионным вектором или набором экспрессионных векторов, способных к экспрессии нуклеопротеина и РНК-зависимой полимеразы РНК;
б) трансфицируют клетку животного из (а) экспрессионным вектором или набором экспрессионных векторов с последовательностью нуклеотидов, кодирующих молекулы рекомбинантной РНК.
2. Способ по п. 1, в котором клетки культивируют в условиях, подходящих для репликации трансфицированных клеток.
3. Способ по п. 1 или 2, в котором получают функциональные частицы рекомбинантного вируса.
4. Функциональная рекомбинантная плазмида в клетках животных, содержащая плазмиду pSS-URG, в которую могут быть внедрены последовательности генома вирусов, экспрессированные в виде РНК.
5. Плазмида по п. 4, проявляющая функциональность в клетках животных.
6. Плазмида по п. 4, отличающаяся тем, что плазмида pSS-URG содержит последовательность промотора, расположенную в области ITS-1 атлантического лосося; последовательность рибозима рыбы-молота; сайт клонирования; последовательность рибозима вируса гепатита δ; и терминатор транскрипции β-глобина кролика.
7. Плазмида по любому из пп. 4–6, в которой последовательность промотора атлантического лосося соответствует SEQ ID No 1.
8. Плазмида по любому из пп. 4–6, в которой последовательность рибозима рыбы-молота соответствует SEQ ID No 2.
9. Плазмида по любому из пп. 4–6, в которой последовательность сайта клонирования соответствует SEQ ID No 3.
10. Плазмида по любому из пп. 4–6, в которой последовательность рибозима вируса гепатита δ соответствует SEQ ID No 4.
11. Плазмида по любому из пп. 4–6, в которой терминатор транскрипции β-глобина кролика соответствует SEQ ID No 5.
12. Плазмида по любому из пп. 4–11, отличающаяся тем, что указанная плазмида обеспечивает клонирование генетических последовательностей животного, растения, протиста, гриба, бактерии или вируса с использованием фермента удаленной рестрикции SapI.
13. Плазмида по любому из пп. 4–12, отличающаяся тем, что указанная плазмида трансфицируется в клетку животного, обеспечивая транскрипцию гена с получением РНК без дополнительных нуклеотидов на ее концах.
14. Экспрессионная плазмида, кодирующая необходимые протеины для формирования cRNP.
15. Экспрессионная плазмида по п. 14, отличающаяся тем, что последовательности PB2 SEQ ID No 7, PB1 SEQ ID No 8, PA SEQ ID No 9 и NP SEQ ID No 10 вируса ISAV901_09 клонируются раздельно.
16. Способ получения вирусных частиц, включающий в себя следующие действия:
а) трансфицируют клетки животного экспрессионным вектором или набором экспрессионных векторов, способных к экспрессии нуклеопротеина и РНК-зависимой полимеразы РНК, а также последовательностей PB2 SEQ ID No 7, PB1 SEQ ID No 8, PA SEQ ID No 9 и NP SEQ ID No 10 вируса ISAV901_09;
б) трансфицируют клетку животного из (а) экспрессионным вектором или набором экспрессионных векторов pSS-URG с последовательностями нуклеотидов, кодирующими молекулы рекомбинантной РНК под контролем последовательности промотора, расположенной в области ITS-1 атлантического лосося; последовательности рибозима рыбы-молота; сайта клонирования; последовательности рибозима вируса гепатита δ; и терминатора транскрипции β-глобина кролика;
в) получают рекомбинантные вирусные частицы.
17. Использование вирусных частиц с целью экспрессирования нуклеиновых кислот типа РНК.
18. Использование вирусных частиц по п. 17 с целью экспрессирования протеинов, являющихся аутогенными или экзогенными для вируса.
19. Использование вирусных частиц по п. 17 с целью экспрессирования нуклеиновых кислот типа интерферирующей РНК, заглушающей РНК или микро-РНК.
RU2017121232A 2014-11-20 2016-01-06 Плазмиды и способ получения вирусных частиц RU2708151C2 (ru)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CL3146-2014 2014-11-20
CL2014003146A CL2014003146A1 (es) 2014-11-20 2014-11-20 Método para producir virus arn monocatenario negativo; plásmido recombinante funcional en células animales, que consta de un esqueleto pss-urg; método de obtención de partículas virales; y uso para expresar arn, proteínas autógenas o exógenas al virus.
PCT/CL2016/050002 WO2016077938A1 (es) 2014-11-20 2016-01-06 Plásmidos y método para obtener partículas virales

Publications (3)

Publication Number Publication Date
RU2017121232A true RU2017121232A (ru) 2018-12-20
RU2017121232A3 RU2017121232A3 (ru) 2018-12-20
RU2708151C2 RU2708151C2 (ru) 2019-12-05

Family

ID=56013004

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2017121232A RU2708151C2 (ru) 2014-11-20 2016-01-06 Плазмиды и способ получения вирусных частиц

Country Status (11)

Country Link
US (1) US10544398B2 (ru)
EP (1) EP3222730B8 (ru)
CN (1) CN107532180A (ru)
AU (1) AU2016203557B2 (ru)
BR (1) BR112017010630A2 (ru)
CA (1) CA2968430C (ru)
CL (1) CL2014003146A1 (ru)
DK (1) DK3222730T3 (ru)
MX (1) MX2017006671A (ru)
RU (1) RU2708151C2 (ru)
WO (1) WO2016077938A1 (ru)

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP6843065B2 (ja) 2015-03-30 2021-03-17 グリーンライト バイオサイエンシーズ インコーポレーテッドＧｒｅｅｎｌｉｇｈｔ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｉｎｃ． リボ核酸の無細胞生産
US10954541B2 (en) 2016-04-06 2021-03-23 Greenlight Biosciences, Inc. Cell-free production of ribonucleic acid
SG11202003192UA (en) 2017-10-11 2020-05-28 Greenlight Biosciences Inc Methods and compositions for nucleoside triphosphate and ribonucleic acid production
WO2024055123A1 (en) * 2022-09-16 2024-03-21 Gmg Fish Services Inc. Vaccines against infectious salmon anemia and uses thereof

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DK1194580T4 (da) * 1999-07-14 2011-01-03 Sinai School Medicine In-vitro rekonstitution af segmenterede negativstrengede RNA-virus
TWI477602B (zh) * 2006-02-09 2015-03-21 Educational Foundation Jichi Medical Univ Novel viral vector
EP1867725A1 (en) 2006-06-16 2007-12-19 Institut National De La Recherche Agronomique (Inra) Recombinant novirhabdoviruses and uses thereof

Also Published As

Publication number Publication date
AU2016203557B2 (en) 2022-02-24
EP3222730A1 (en) 2017-09-27
EP3222730A4 (en) 2018-06-20
BR112017010630A2 (pt) 2018-02-14
US10544398B2 (en) 2020-01-28
MX2017006671A (es) 2018-11-09
EP3222730B8 (en) 2022-02-23
RU2017121232A3 (ru) 2018-12-20
AU2016203557A1 (en) 2017-06-15
CA2968430C (en) 2023-11-07
WO2016077938A1 (es) 2016-05-26
CA2968430A1 (en) 2016-05-26
CN107532180A (zh) 2018-01-02
DK3222730T3 (da) 2022-01-31
EP3222730B1 (en) 2021-10-27
RU2708151C2 (ru) 2019-12-05
US20180030416A1 (en) 2018-02-01
CL2014003146A1 (es) 2015-06-12

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2017121232A (ru) Плазмиды и способ получения вирусных частиц
CN109072257B (zh) 增强的睡美人转座子、试剂盒和转座方法
WO2014082644A1 (en) Circular rna for inhibition of microrna
JP2018534937A5 (ru)
RU2018122636A (ru) Стабильные клеточные линии для продуцирования ретровирусов
RU2014128987A (ru) Быстрый способ клонирования и экспрессии сегментов гена родственной вариабельной области антитела
EP2937417A1 (en) MiRNAs enhancing cell productivity
IL277883B1 (en) Optimized engineered nucleases with specificity for the human t-cell receptor alpha constant region gene
CN109022449A (zh) 黄瓜CsMLO1基因及其沉默表达载体构建方法、应用
Mostafa et al. Improved dual promotor-driven reverse genetics system for influenza viruses
AU2014314079B2 (en) RNA based method to obtain stably integrated retroviral vectors
CN105734138B (zh) 基于四环素调控系统检测叶绿体启动子活性的方法
BR112020005154A2 (pt) métodos de integração genômica em pichia e outras células hospedeiras
MX356630B (es) Uso del promotor rd29 o fragmentos del mismo para expresión de transgenes inducible por estrés en algodón.
Oliviero et al. RNA polymerase III promoter elements enhance transcription of RNA polymerase II genes
CN106222172B (zh) 一种烟草gcn2启动子及其应用
JP2016538000A5 (ru)
Lan et al. Characterization of the GmDREB5 gene isolated from the soybean cultivar Xanh Tiendai, Vietnam
KR102129584B1 (ko) 목적 유전자를 선형 벡터에 삽입하는 방법
RU2670128C2 (ru) Способ генетической регистрации и коррекции нейрогенеза на основе генетических конструкций для трансфекции нейронов
Karpova et al. Capsid protein of potato virus S can suppress systemic RNA-silencing
JP2015180203A (ja) タンパク質生産の増強のためのｍＲＮＡの一次構造の再操作
RU2021110306A (ru) Нуклеиновая кислота для активации экспрессии гена и продукции белка
Ivankin et al. A POINT DELETION SHORTLY DOWNSTREAM OF EGFP REPORTER 3′ UTR INCREASES LEVEL OF THE REPORTER EXPRESSION IN MOUSE AND HUMAN CELLS
Boldyreva et al. Minor variations in the region immediately downstream of eGFP reporter 3′ UTR notably increases level of its expression in mouse and human, but not in Drosophila cell cultures