RU2016108144A - Композиция для улучшения состояний кожи, содержащая в качестве активного ингредиента фрагмент белка теплового шока 90а человека - Google Patents

Claims (20)

1. Липосомальная композиция инкапсулированного полипептида, содержащая HSP90a, полипептид HPf, HPfΔC1, HPfΔC2 или их комбинацию.

2. Липосомальная композиция инкапсулированного полипептида по п.1, отличающаяся тем, что фрагмент полипептида HPf представляет собой HPfΔC1 или НРΔС2.

3. Липосомальная композиция инкапсулированного полипептида по п.1, отличающаяся тем, что липосома представляет собой нанолипосому, имеющую размер частиц около 50-500 нм, около 50-350 нм или около 100-250 нм.

4. Липосомальная композиция инкапсулированного полипептида по п.1, отличающаяся тем, что полипептид представляет собой HSP90a.

5. Химерная конструкция, кодирующая гибридный белок, содержащая последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую HSP90a, полипептид HPf, полипептид HPfΔC1 или HPfΔC2, или их фрагменты, и последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую пептид, используемый в качестве партнера слияния.

6. Химерная конструкция по п.5, отличающаяся тем, что пептид, используемый в качестве партнера слияния, представляет собой теоредоксин А, связывающий мальтозу белок (МВР) или гормон роста человека (hGH).

7. Химерная конструкция по п.6, дополнительно содержащая сайт узнавания фермента, расщепляющего белки, расположенный между последовательностью нуклеиновой кислоты, кодирующей пептид HPf, и последовательностью нуклеиновой кислоты, кодирующей пептид, используемый в качестве партнера слияния.

8. Химерная конструкция по п.7, отличающаяся тем, что сайт узнавания фермента, расщепляющего белки, представляет собой сайт узнавания протеазы вируса гравировки табака (Tabacco Etch Virus, TEV) или сайт узнавания гидроксиламина.

9. Химерная конструкция по п.5, отличающаяся тем, что полипептид HPf имеет последовательность нуклеиновой кислоты согласно SEQ ID. NO. 1.

10. Химерная конструкция по п.5, содержащая полипептид HPfΔС1 или HPfΔC2.

11. Трансформированная клеточная линия, трансформированная для экспрессии химерного белка HPf-партнер слияния, при этом указанная линия клеток включает линию клеток ТОР10, линию клеток RZ4500, линию клеток BL21(DE3)pLyS или линию клеток RosettaBlue (DE3).

12. Трансформированная клеточная линия по п.11, отличающаяся тем, что химерный белок HPf-партнер слияния представляет собой гибридный белок TRX(TEVc)-HPf, гибридный белок MBP(TEVc)-HPf или гибридный белок TRX(NGc) HPf.

13. Способ получения нанолипосомальной композиции инкапсулированного полипептида HSP90a, HPf, HPfΔC1 или HPfΔC2, при этом способ включает:

(a) растворение фосфолипида, способного формировать липосому с полипептидом HSP90a, HPf, HPfΔC1 или HPfΔC2, в буферном водном растворе соли, при этом указанный фосфолипид содержит лецитин яичного желтка или соевый лецитин; и

(b) пропускание водного раствора через гомогенизатор высокого давления при ступенчатом увеличении содержания фосфолипида и давления в гомогенизаторе высокого давления по мере увеличения числа пассажей с получением нанолипосомальной композиции инкапсулированного полипептида HPf, содержащей полипептид HSP90a, HPf, HPfΔC1 или HPfΔC2.

14. Способ по п.13, отличающийся тем, что полипептид представляет собой HSP90a.

15. Рецептура для местного введения, содержащая композицию по п.1, для лечения состояния кожи, при этом состояние кожи представляет собой атопический дерматит, морщины, черные точки, потерю эластичности кожи или старение кожи, отличающаяся тем, что указанная композиция имеет концентрацию полипептида HPf или фрагмента полипептида HPf от около 100 нг/мл до около 1 мг/мл.

16. Рецептура для местного введения, содержащая композицию по п.1, для лечения накопления подкожного жира, отличающаяся тем, что указанная композиция имеет концентрацию полипептида HPf или фрагмента полипептида HPf от около 100 нг/мл до около 1 мг/мл.

17. Применение композиции по п.1 в изготовлении препарата для лечения состояния кожи, отличающееся тем, что состояние кожи представляет собой атопический дерматит, морщины, черные точки, потерю эластичности кожи или старение кожи.

18. Применение композиции по п.1 в изготовлении препарата для лечения ожирения, целлюлита, варикозного расширения вен нижних конечностей с язвой, отека нижних конечностей, варикозного расширения вен, изменения цвета кожи, венозной экземы, склеродермы, воспалительного процесса с формированием тромба, язв кожи или хронической боли.