RU2015128102A - Компоненты системы crispr-cas, способы и композиции для манипуляции с последовательностями - Google Patents

Компоненты системы crispr-cas, способы и композиции для манипуляции с последовательностями Download PDF

Info

Publication number
RU2015128102A
RU2015128102A RU2015128102A RU2015128102A RU2015128102A RU 2015128102 A RU2015128102 A RU 2015128102A RU 2015128102 A RU2015128102 A RU 2015128102A RU 2015128102 A RU2015128102 A RU 2015128102A RU 2015128102 A RU2015128102 A RU 2015128102A
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
sequence
crispr
composition
enzyme
crispr enzyme
Prior art date
Application number
RU2015128102A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2701662C2 (ru
RU2701662C9 (ru
RU2015128102A3 (ru
Inventor
Фэн ЧЖАН
Девид Оливье БИКАРД
Лэ ЦУН
Девид Бенджамин Туриц КОКС
Патрик ХСЮ
Вэньянь ЦЗЯН
Шауйлян ЛИНЬ
Лучано МАРРАФФИНИ
Рэндол Джеффри ПЛАТТ
Фэй ЖАНЬ
Невилл Эспи САНДЖАНА
Original Assignee
Те Брод Инститьют, Инк.
Массачусетс Инститьют Оф Текнолоджи
Президент Энд Феллоуз Оф Харвард Коллидж
Те Рокфеллер Юниверсити
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Те Брод Инститьют, Инк., Массачусетс Инститьют Оф Текнолоджи, Президент Энд Феллоуз Оф Харвард Коллидж, Те Рокфеллер Юниверсити filed Critical Те Брод Инститьют, Инк.
Priority claimed from PCT/US2013/074611 external-priority patent/WO2014093595A1/en
Publication of RU2015128102A publication Critical patent/RU2015128102A/ru
Publication of RU2015128102A3 publication Critical patent/RU2015128102A3/ru
Publication of RU2701662C2 publication Critical patent/RU2701662C2/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2701662C9 publication Critical patent/RU2701662C9/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • C12N15/113—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
    • C12N15/8509—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells for producing genetically modified animals, e.g. transgenic
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/87—Introduction of foreign genetic material using processes not otherwise provided for, e.g. co-transformation
    • C12N15/90—Stable introduction of foreign DNA into chromosome
    • C12N15/902—Stable introduction of foreign DNA into chromosome using homologous recombination
    • C12N15/907—Stable introduction of foreign DNA into chromosome using homologous recombination in mammalian cells
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/16—Hydrolases (3) acting on ester bonds (3.1)
    • C12N9/22—Ribonucleases RNAses, DNAses

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)

Claims (80)

1. Не встречающаяся в природе или сконструированная композиция, содержащая векторную систему, которая содержит один или несколько векторов, содержащих
1. первый регуляторный элемент, функционально связанный с полинуклеотидной последовательностью химерной РНК (chiRNA) системы CRISPR-CAS, где полинуклеотидная последовательность содержит
(a) направляющую последовательность, способную гибридизироваться с целевой последовательностью в эукариотической клетке,
(b) парную tracr-последовательность и
(c) tracr-последовательность, и
II. второй регуляторный элемент, функционально связанный с кодирующей фермент последовательностью, кодирующей фермент CRISPR, содержащий по меньшей мере одну или несколько последовательностей ядерной локализации (NLS) вблизи конца фермента CRISPR,
где (а), (b) и (с) расположены в 5'-3' ориентации,
где компоненты I и II находятся в одном и том же или в различных векторах системы,
где при транскрипции парная tracr-последовательность гибридизируется с tracr-последовательностью, а направляющая последовательность управляет специфичным к последовательности связыванием комплекса CRISPR с целевой последовательностью,
где комплекс CRISPR содержит фермент CRISPR, образующий комплекс с (1) направляющей последовательностью, которая гибридизируется с целевой последовательностью, и (2) парной tracr-последовательностью, которая гибридизируется с tracr-гюследовательностью, и
где полинуклеотидная последовательность химерной РНК содержит две или более "шпильки".
2. Композиция по п. 1, отличающаяся тем, что используется множество полинуклеотидных последовательностей chiRNA для получения мультиплексной системы.
3. Мультиплексная ферментная система CRISPR, отличающаяся тем, что система содержит векторную систему, которая содержит один или несколько векторов, содержащих
I. первый регуляторный элемент, функционально связанный с полинуклеотидной последовательностью химерной РНК (chiRNA) системы CRISPR-CAS, где полинуклеотидная последовательность содержит
(a) направляющую последовательность, способную гибридизироваться с целевой последовательностью в эукариотической клетке,
(b) парную tracr-последовательность и
(c) tracr-последовательность, и
II. второй регуляторный элемент, функционально связанный с кодирующей фермент последовательностью, кодирующей фермент CRISPR, содержащий по меньшей мере одну или несколько последовательностей ядерной локализации (NLS) вблизи конца фермента CRISPR,
где (а), (b) и (с) расположены в 5'-3' ориентации,
где компоненты I и II находятся в одном и том же или в различных векторах системы,
где при транскрипции парная tracr-последовательность гибридизируется с tracr-последовательностью, а направляющая последовательность управляет специфичным к последовательности связыванием комплекса CRISPR с целевой последовательностью,
где комплекс CRISPR содержит фермент CRISPR, образующий комплекс с (1) направляющей последовательностью, которая гибридизируется с целевой последовательностью, и (2) парной tracr-последовательностью, которая гибридизируется с tracr-последовательностью,
где полинуклеотидная последовательность chiRNA содержит две или более "шпильки", и
где в мультиплексной системе используется множество полинуклеотидных последовательностей chiRNA.
4. Композиция или система по пп. 1, 2 или 3, отличающаяся тем, что первый регуляторный элемент является промотором полимеразы III.
5. Композиция или система по пп. 1, 2 или 3, отличающаяся тем, что второй регуляторный элемент является промотором полимеразы П.
6. Композиция или система по пп. 1, 2 или 3, отличающаяся тем, что фермент CRISPR содержит одну или несколько NLS, достаточно эффективных, чтобы управлять накоплением указанного фермента CRISPR в обнаруживаемом количестве в ядре эукариотической клетки.
7. Композиция или система по пп. 1, 2 или 3, отличающаяся тем, что tracr-последовательность характеризуется по меньшей мере 50% комплементарности последовательности по длине парной tracr-последовательности при оптимальном выравнивании.
8. Композиция или система по пп. 1, 2 или 3, отличающаяся тем, что фермент CRISPR является ферментом системы CRISPR II типа.
9. Композиция или система по пп. 1, 2 или 3, отличающаяся тем, что фермент CRISPR является ферментом Cas9.
10. Композиция или система по пп. 1, 2 или 3, отличающаяся тем, что фермент CRISPR кодон-оптимизирован для экспрессии в эукариотической клетке.
11. Композиция или система по пп. 1, 2 или 3, отличающаяся тем, что направляющая последовательность составляет по меньшей мере 15 нуклеотидов в длину.
12. Композиция или система по пп. 1, 2 или 3, отличающаяся тем, что полинуклеотидная последовательность химерной РНК содержит две, три, четыре или пять "шпилек".
13. Не встречающаяся в природе или сконструированная композиция, содержащая векторную систему, которая содержит один или несколько векторов, содержащих
I. первый регуляторный элемент, функционально связанный с
(a) направляющей последовательностью, способной гибридизироваться с целевой последовательностью в эукариотической клетке, и
(b) парной tracr-последовательностью,
II. второй регуляторный элемент, функционально связанный с кодирующей фермент последовательностью, кодирующей фермент CRISPR, содержащий по меньшей мере одну или несколько последовательностей ядерной локализации (NLS) вблизи конца фермента CRISPR, и
III. третий регуляторный элемент, функционально связанный с tracr-последовательностью,
где компоненты I, II и III находятся в одном и том же или в различных векторах системы,
где при транскрипции парная tracr-последовательность гибридизируется с tracr-последовательностью, а направляющая последовательность управляет специфичным к последовательности связыванием комплекса CRISPR с целевой последовательностью, и
где комплекс CRISPR содержит фермент CRISPR, образующий комплекс с (1) направляющей последовательностью, которая гибридизируется с целевой последовательностью, и (2) парной tracr-последовательностью, которая гибридизируется с tracr-последовательностью.
14. Композиция по п. 13, отличающаяся тем, что используется множество направляющих последовательностей и одна tracr-последовательность для получения мультиплексной системы.
15. Мультиплексная ферментная система CRISPR, отличающаяся тем, что система содержит векторную систему, которая содержит один или несколько векторов, содержащих
I. первый регуляторный элемент, функционально связанный с
(a) направляющей последовательностью, способной гибридизироваться с целевой последовательностью в эукариотической клетке, и
(b) парной tracr-последовательностью,
II. второй регуляторный элемент, функционально связанный с кодирующей фермент последовательностью, кодирующей фермент CRISPR, содержащий по меньшей мере одну или несколько последовательностей ядерной локализации (NLS) вблизи конца фермента CRISPR, и
III. третий регуляторный элемент, функционально связанный с tracr-последовательностью,
где компоненты I, II и III находятся в одном и том же или в различных векторах системы,
где при транскрипции парная tracr-последовательность гибридизируется с tracr-последовательностью, а направляющая последовательность управляет специфичным к последовательности связыванием комплекса CRISPR с целевой последовательностью,
где комплекс CRISPR содержит фермент CRISPR, образующий комплекс с (1) направляющей последовательностью, которая гибридизируется с целевой последовательностью, и (2) парной tracr-последовательностью, которая гибридизируется с tracr-последовательностью, и
где в мультиплексной системе используется множество направляющих последовательностей и одна tracr-последовательность.
16. Композиция или система по любому из пп. 13-15, отличающаяся тем, что первый регуляторный элемент является промотором полимеразы III.
17. Композиция или система по пп. 13, 14 или 15, отличающаяся тем, что второй регуляторный элемент является промотором полимеразы II.
18. Композиция или система по пп. 13, 14 или 15, отличающаяся тем, что третий регуляторный элемент является промотором полимеразы III.
19. Композиция или система по пп. 13, 14 или 15, отличающаяся тем, что фермент CRISPR содержит одну или несколько NLS, достаточно эффективных, чтобы управлять накоплением указанного фермента CRISPR в обнаруживаемом количестве в ядре эукариотической клетки.
20. Композиция или система по пп. 13, 14 или 15, отличающаяся тем, что tracr-последовательность характеризуется по меньшей мере 50% комплементарности последовательности по длине парной tracr-последовательности при оптимальном выравнивании.
21. Композиция или система по пп. 13, 14 или 15, отличающаяся тем, что фермент CRISPR является ферментом системы CRISPR II типа.
22. Композиция или система по пп. 13, 14 или 15, отличающаяся тем, что фермент CRISPR является ферментом Cas9.
23. Композиция или система по пп. 13, 14 или 15, отличающаяся тем, что фермент CRISPR кодон-оптимизирован для экспрессии в эукариотической клетке.
24. Композиция или система по пп. 13, 14 или 15, отличающаяся тем, что направляющая последовательность составляет по меньшей мере 15 нуклеотидов в длину.
25. Эукариотическая клетка-хозяин, содержащая композицию или систему по любому из предыдущих пунктов.
26. Организм, содержащий эукариотическую клетку-хозяина по п. 25.
27. Отличный от человека организм, содержащий эукариотическую клетку-хозяина по п. 25.
28. Набор, содержащий композицию по любому из пп. 1, 2, 3, 13, 14 или 15 и инструкции по применению указанного набора.
29. Способ изменения экспрессии представляющего интерес локуса генома в эукариотической клетке, включающий
приведение локуса генома в контакт с композицией по любому из пп. 1, 2, 3, 13, 14 или 15 и
определение того, была ли изменена экспрессия локуса генома.
30. Способ по п. 29, отличающийся тем, что направляющая последовательность управляет специфичным к последовательности связыванием комплекса CRISPR с целевой последовательностью, которое основывается на наличии последовательности мотива CRISPR.
31. Способ по п. 30, отличающийся тем, что последовательностью мотива CRISPR является NAG.
32. Способ отбора одной или нескольких прокариотических клеток путем введения одной или нескольких мутаций в ген в одной или нескольких прокариотических клетках, при этом способ включает:
введение одного или нескольких векторов в прокариотическую(ие) клетку(и), где один или несколько векторов управляют экспрессией одного или нескольких из: фермента CRISPR, направляющей последовательности, связанной с парной tracr-последовательностью, tracr-последовательности и матрицы редактирования;
где матрица редактирования содержит одну или несколько мутаций, которые прекращают расщепление фермента CRISPR;
обеспечение гомологичной рекомбинации матрицы редактирования с целевым полинуклеотидом в отбираемой(ых) клетке(ах);
обеспечение связывания комплекса CRISPR с целевым полинуклеотидом для осуществления расщепления целевого полинуклеотида в указанном гене, где комплекс CRISPR содержит фермент CRISPR, образующий комплекс с (1) направляющей последовательностью, которая гибридизируется с целевой последовательностью в целевом полинуклеотиде, и (2) парной tracr-последовательностью, которая гибридизируется с tracr-последовательностью,
где связывание комплекса CRISPR с целевым полинуклеотидом индуцирует гибель клеток,
с обеспечением тем самым отбора одной или нескольких прокариотических клеток, в которые были введены одна или несколько мутаций.
33. Способ по п. 32, отличающийся тем, что фермент CRISPR является ферментом системы CRISPR II типа.
34. Способ по п. 33, отличающийся тем, что фермент CRISPR представляет собой Cas9.
RU2015128102A 2012-12-12 2013-12-12 Компоненты системы crispr-cas, способы и композиции для манипуляции с последовательностями RU2701662C9 (ru)

Applications Claiming Priority (13)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201261736527P 2012-12-12 2012-12-12
US61/736,527 2012-12-12
US201361748427P 2013-01-02 2013-01-02
US61/748,427 2013-01-02
US201361757972P 2013-01-29 2013-01-29
US61/757,972 2013-01-29
US201361768959P 2013-02-25 2013-02-25
US61/768,959 2013-02-25
US201361791409P 2013-03-15 2013-03-15
US61/791,409 2013-03-15
US201361835931P 2013-06-17 2013-06-17
US61/835,931 2013-06-17
PCT/US2013/074611 WO2014093595A1 (en) 2012-12-12 2013-12-12 Crispr-cas component systems, methods and compositions for sequence manipulation

Related Child Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2019127238A Division RU2796549C2 (ru) 2012-12-12 2013-12-12 Компоненты системы crispr-cas, способы и композиции для манипуляции с последовательностями

Publications (4)

Publication Number Publication Date
RU2015128102A true RU2015128102A (ru) 2018-12-21
RU2015128102A3 RU2015128102A3 (ru) 2018-12-21
RU2701662C2 RU2701662C2 (ru) 2019-09-30
RU2701662C9 RU2701662C9 (ru) 2019-10-31

Family

ID=55306645

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2015128102A RU2701662C9 (ru) 2012-12-12 2013-12-12 Компоненты системы crispr-cas, способы и композиции для манипуляции с последовательностями

Country Status (4)

Country Link
DK (1) DK2825654T3 (ru)
ES (3) ES2635244T3 (ru)
HK (2) HK1208045A1 (ru)
RU (1) RU2701662C9 (ru)

Families Citing this family (23)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2734621B1 (en) 2011-07-22 2019-09-04 President and Fellows of Harvard College Evaluation and improvement of nuclease cleavage specificity
US9163284B2 (en) 2013-08-09 2015-10-20 President And Fellows Of Harvard College Methods for identifying a target site of a Cas9 nuclease
US9359599B2 (en) 2013-08-22 2016-06-07 President And Fellows Of Harvard College Engineered transcription activator-like effector (TALE) domains and uses thereof
US9526784B2 (en) 2013-09-06 2016-12-27 President And Fellows Of Harvard College Delivery system for functional nucleases
US9388430B2 (en) 2013-09-06 2016-07-12 President And Fellows Of Harvard College Cas9-recombinase fusion proteins and uses thereof
US9340799B2 (en) 2013-09-06 2016-05-17 President And Fellows Of Harvard College MRNA-sensing switchable gRNAs
US9840699B2 (en) 2013-12-12 2017-12-12 President And Fellows Of Harvard College Methods for nucleic acid editing
CA2956224A1 (en) 2014-07-30 2016-02-11 President And Fellows Of Harvard College Cas9 proteins including ligand-dependent inteins
US10167457B2 (en) 2015-10-23 2019-01-01 President And Fellows Of Harvard College Nucleobase editors and uses thereof
SG11201900907YA (en) 2016-08-03 2019-02-27 Harvard College Adenosine nucleobase editors and uses thereof
CN109804066A (zh) 2016-08-09 2019-05-24 哈佛大学的校长及成员们 可编程cas9-重组酶融合蛋白及其用途
US11542509B2 (en) 2016-08-24 2023-01-03 President And Fellows Of Harvard College Incorporation of unnatural amino acids into proteins using base editing
SG11201903089RA (en) 2016-10-14 2019-05-30 Harvard College Aav delivery of nucleobase editors
US10745677B2 (en) 2016-12-23 2020-08-18 President And Fellows Of Harvard College Editing of CCR5 receptor gene to protect against HIV infection
WO2018165504A1 (en) 2017-03-09 2018-09-13 President And Fellows Of Harvard College Suppression of pain by gene editing
WO2018165629A1 (en) 2017-03-10 2018-09-13 President And Fellows Of Harvard College Cytosine to guanine base editor
US11268082B2 (en) 2017-03-23 2022-03-08 President And Fellows Of Harvard College Nucleobase editors comprising nucleic acid programmable DNA binding proteins
WO2018209320A1 (en) 2017-05-12 2018-11-15 President And Fellows Of Harvard College Aptazyme-embedded guide rnas for use with crispr-cas9 in genome editing and transcriptional activation
EP3658573A1 (en) 2017-07-28 2020-06-03 President and Fellows of Harvard College Methods and compositions for evolving base editors using phage-assisted continuous evolution (pace)
WO2019139645A2 (en) 2017-08-30 2019-07-18 President And Fellows Of Harvard College High efficiency base editors comprising gam
CN111757937A (zh) 2017-10-16 2020-10-09 布罗德研究所股份有限公司 腺苷碱基编辑器的用途
BR112021018607A2 (pt) 2019-03-19 2021-11-23 Massachusetts Inst Technology Métodos e composições para editar sequências de nucleotídeos
JP2023525304A (ja) 2020-05-08 2023-06-15 ザ ブロード インスティテュート，インコーポレーテッド 標的二本鎖ヌクレオチド配列の両鎖同時編集のための方法および組成物

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU2003290937A1 (en) * 2002-11-15 2004-06-15 Trustees Of Boston University Cis/trans riboregulators
EP3284833B1 (en) * 2005-08-26 2021-12-01 DuPont Nutrition Biosciences ApS Use of crispr associated genes (cas)
US20100076057A1 (en) * 2008-09-23 2010-03-25 Northwestern University TARGET DNA INTERFERENCE WITH crRNA
US20140113376A1 (en) * 2011-06-01 2014-04-24 Rotem Sorek Compositions and methods for downregulating prokaryotic genes

Also Published As

Publication number Publication date
HK1208045A1 (en) 2016-02-19
ES2618531T3 (es) 2017-06-21
HK1247961A1 (zh) 2018-10-05
DK2825654T3 (en) 2017-08-21
ES2635244T3 (es) 2017-10-03
RU2019127238A (ru) 2019-09-20
RU2701662C2 (ru) 2019-09-30
ES2861623T3 (es) 2021-10-06
RU2701662C9 (ru) 2019-10-31
RU2015128102A3 (ru) 2018-12-21

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2015128102A (ru) Компоненты системы crispr-cas, способы и композиции для манипуляции с последовательностями
IL293526A (en) Providing, engineering and optimizing systems, methods and compositions for sequence manipulation and therapeutic applications
US20210017507A1 (en) Methods and compositions for sequences guiding cas9 targeting
ES2802984T3 (es) Ingeniería del genoma multiplex mediante CRISPR
RU2015128098A (ru) Конструирование систем, способы и оптимизированные направляющие композиции для манипуляции с последовательностями
US20190390223A1 (en) Novel cas9 proteins and guiding features for dna targeting and genome editing
FI3445388T3 (fi) Materiaaleja ja menetelmiä hemoglobinopatioiden hoitamiseksi
AU2017286122A1 (en) Use of Cpf1 endonuclease for plant genome modifications
HRP20201443T1 (hr) Postupci i pripravci za liječenje genetskog stanja
MX2015006220A (es) Insercion de adn de tranferencia mediada por efectores tipo activadores de la transcripción (tal).
RU2015112583A (ru) Функциональные локусы fad2 и соответствующие специфичные для сайта-мишени связывающиеся белки, способные индуцировать направленные разрывы
RU2016120636A (ru) Оптимальные локусы сои
RU2017130143A (ru) Гибридные днк/рнк-полинукдеотиды crispr и способы
JP2019508051A5 (ru)
WO2009073629A3 (en) Efficient shotgun sequencing methods
RU2018101710A (ru) Мутации фермента crispr, уменьшающие нецелевые эффекты
CA2936646A1 (en) Methods and compositions for sequences guiding cas9 targeting
JP2016500262A5 (ru)
UA118014C2 (uk) Спосіб модифікації днк-мішені
RU2016122067A (ru) Оптимальные локусы кукурузы
RU2022103641A (ru) Искусственная модификация генома для регуляции экспрессии гена
WO2009150222A3 (en) Improved protein expression system
RU2016125246A (ru) Генетические локусы, связанные с реакцией на абиотический стресс
MX2021004455A (es) Composiciones y métodos para administrar transgenes.
JPWO2019183150A5 (ru)

Legal Events

Date Code Title Description
TH4A Reissue of patent specification