RU2014148172A

RU2014148172A - Способы индукции антигенспецифических регуляторных т-клеток

Info

Publication number: RU2014148172A
Application number: RU2014148172A
Authority: RU
Inventors: Жан-Мари СЭН-РЕМИ
Original assignee: Имсиз Са; Католике Университейт Левен
Priority date: 2012-04-30
Filing date: 2013-04-29
Publication date: 2016-06-20
Also published as: ZA201407298B; HK1206786A1; AU2013255888A1; US20150125880A1; EP2844741A1; CA2871541A1; CN104411818A; JP2015518376A; KR20150028225A; WO2013164289A1; IN2014DN08964A; BR112014026606A2

Abstract

1. Способ получения антигенспецифических природных регуляторных Τ-клеток, предусматривающий:a) наличие антигенспецифических цитолитических CD4+ Т-клеток для антигена,b) наличие антигенпрезентирующих клеток, способных экспрессировать детерминанты МНС класса II, презентирующие указанный антиген,c) стадию воздействия указанных антигенпрезентирующих клеток на указанные цитолитические CD4+ Т-клетки, индуцируя тем самым апоптоз указанных антигенпрезентирующих клеток;d) стадию выделения апоптотических телец из антигенпрезентирующих клеток, которые подвергали апоптозу на стадии с); иe) стадию инкубирования указанных апоптотических телец с клетками, способными презентировать антигены, с получением, таким образом, антигенпрезентирующих клеток, загруженных апоптотическими тельцами,f) стадию приведения указанных загруженных антигенпрезентирующих клеток стадии е) в контакт с популяцией CD4+клеток, содержащей природные регуляторные Т-клетки, увеличивая тем самым количество природных антигенспецифических регуляторных Т-клеток.2. Способ по п. 1, дополнительно предусматривающий стадию выделения указанных антигенспецифических регуляторных Т-клеток.3. Способ по п. 2, дополнительно предусматривающий стадию разделения указанных антигенспецифических регуляторных Т-клеток на отдельные субпопуляции на основе экспрессии поверхностных маркеров CD25 и/или CTLA-4, или на основании продуцирования цитокинов TGF-бета и/или IL-10 или экспрессии Foxp3.4. Способ по любому из пп. 1-3, где указанными антигенспецифическими регуляторными Т-клетками являются Foxp3 high CD4+ Т-клетки.5. Способ по п. 1, где на стадии е) указанные клетки, способные презентировать антигены, выбраны из группы,состоящей из д

Claims

1. Способ получения антигенспецифических природных регуляторных Τ-клеток, предусматривающий:

a) наличие антигенспецифических цитолитических CD4+ Т-клеток для антигена,

b) наличие антигенпрезентирующих клеток, способных экспрессировать детерминанты МНС класса II, презентирующие указанный антиген,

c) стадию воздействия указанных антигенпрезентирующих клеток на указанные цитолитические CD4+ Т-клетки, индуцируя тем самым апоптоз указанных антигенпрезентирующих клеток;

d) стадию выделения апоптотических телец из антигенпрезентирующих клеток, которые подвергали апоптозу на стадии с); и

e) стадию инкубирования указанных апоптотических телец с клетками, способными презентировать антигены, с получением, таким образом, антигенпрезентирующих клеток, загруженных апоптотическими тельцами,

f) стадию приведения указанных загруженных антигенпрезентирующих клеток стадии е) в контакт с популяцией CD4+клеток, содержащей природные регуляторные Т-клетки, увеличивая тем самым количество природных антигенспецифических регуляторных Т-клеток.

2. Способ по п. 1, дополнительно предусматривающий стадию выделения указанных антигенспецифических регуляторных Т-клеток.

3. Способ по п. 2, дополнительно предусматривающий стадию разделения указанных антигенспецифических регуляторных Т-клеток на отдельные субпопуляции на основе экспрессии поверхностных маркеров CD25 и/или CTLA-4, или на основании продуцирования цитокинов TGF-бета и/или IL-10 или экспрессии Foxp3.

4. Способ по любому из пп. 1-3, где указанными антигенспецифическими регуляторными Т-клетками являются Foxp3 high CD4+ Т-клетки.

5. Способ по п. 1, где на стадии е) указанные клетки, способные презентировать антигены, выбраны из группы,

состоящей из дендритных клеток, макрофагов, В-лимфоцитов и клеток, способных экспрессировать детерминанты МНС класса II.

6. Способ по п. 1, где апоптотические тельца выделяют на стадии d) аффинной очисткой, центрифугированием, гель-фильтрацией, сортировкой с помощью магнитных гранул или флуоресцентно-активированной сортировкой.

7. Способ по п. 1, где на стадии е) указанные клетки, способные к презентации антигенов, выбраны из группы, состоящей из незрелых антигенпрезентирующих клеток, полученных путем трансформации моноцитов периферической крови или полученных из костного мозга предшественников.

8. Способ по п. 1, где указанным антигеном на стадии а) является аутоиммунный антиген, аллерген или антиген, участвующий в отторжении трансплантата.

9. Способ по п. 1, где на стадии а) указанные антигенспецифические цитолитические CD4+ Т-клетки получают путем приведения клеток периферической крови в контакт с пептидами, содержащими рестриктированный эпитоп МНС класса II указанного антигена и последовательность с мотивом [CST]-X(2)-C или С-Х(2)-[CST].

10. Способ по п. 1, где на стадии а) указанные антигенспецифические цитолитические CD4+ Т-клетки получают из наивных CD4+ Т-клеток, поляризованных CD4+ Т-клеток или из природных Treg.