RU2013138177A - Антитела, действующие селективно на клетки с повышенной плотностью мишени рецептор эпидермального фактора роста (egfr) - Google Patents

Abstract

1. Анти-EGFR антитело, которое связывается селективно и в первую очередь с пораженными клетками с плотностью EGFR выше нормальной; анти-EGFR антитело включает тяжелую цепь и легкую цепь, каждая из которых имеет константную область и вариабельную область, каждая вариабельная область состоит из фреймовых участков и участков, определяющих комплементарность (гипервариабельные участки CDR), аминокислотная последовательность которых описана ниже:Для тяжелой цепи:CDR1 NYGVH (SEQ ID No. 1)CDR2 VIWSGGNTDYNTPFTS (SEQ ID No. 2)CDR3 ALTYYDYEFAY (SEQ ID No. 3)Для легкой цепи:CDR1 RASQSIGTNIH (SEQ ID No. 4)CDR2 ASESIS (SEQ ID No. 5)CDR3 QQNNNWPTT (SEQ ID No. 6) где, по крайней мере, один из E, D, W, Y, Y, D, и E замещен аминокислотой, которая сообщает данному антителу пониженную EGFR связывающую аффинность (Kd) со значением 1,0 nM и менее.2. Антитело по п.1, в котором значение Kd 10 nM и менее.3. Антитело по п.1, в котором значение Kd составляет от 10 nM до 500 nM.4. Антитело по п.1, в котором, по крайней мере, одно из упомянутых замещений находится в тяжелой цепи.5. Антитело по п.4, в котором Yзамещено на А.6. Антитело по п.4, в котором Yзамещено на А.7. Антитело по п.4, в котором Dзамещено на N.8. Антитело по п.4, в котором по крайней мере одно из упомянутых замещений находится в тяжелой цепи и по крайней мере одно из замещений - в легкой цепи.9. Антитело по п.8, в котором Еи Yоба замещены.10. Антитело по п.9, в котором Езамещено на Kи Yзамещено на А.11. Антитело по п.10, в котором тяжелая цепь включает по крайней мере два из упомянутых замещений.12. Антитело по п.11, в котором Dи Dоба замещены.13. Антитело по п.9, в котором D58 замещено N58 и Dзамещено на N103.14. Антитело по п.12, в котором далее Езамещено.15. Антитело по п.14, в котором Езамещено на Q.16. Антитело по п.1, в котором, по крайней ме�

Claims (26)

1. Анти-EGFR антитело, которое связывается селективно и в первую очередь с пораженными клетками с плотностью EGFR выше нормальной; анти-EGFR антитело включает тяжелую цепь и легкую цепь, каждая из которых имеет константную область и вариабельную область, каждая вариабельная область состоит из фреймовых участков и участков, определяющих комплементарность (гипервариабельные участки CDR), аминокислотная последовательность которых описана ниже:

Для тяжелой цепи:

CDR1 NYGVH (SEQ ID No. 1)

CDR2 VIWSGGNTD⁵⁸YNTPFTS (SEQ ID No. 2)

CDR3 ALTY¹⁰¹Y¹⁰²D¹⁰³YE¹⁰⁵FAY (SEQ ID No. 3)

Для легкой цепи:

CDR1 RASQSIGTNIH (SEQ ID No. 4)

CDR2 ASE⁵³SIS (SEQ ID No. 5)

CDR3 QQNNNW⁹⁴PTT (SEQ ID No. 6) где, по крайней мере, один из E, D, W, Y, Y, D, и E замещен аминокислотой, которая сообщает данному антителу пониженную EGFR связывающую аффинность (Kd) со значением 1,0 nM и менее.

2. Антитело по п.1, в котором значение Kd 10 nM и менее.

3. Антитело по п.1, в котором значение Kd составляет от 10 nM до 500 nM.

4. Антитело по п.1, в котором, по крайней мере, одно из упомянутых замещений находится в тяжелой цепи.

5. Антитело по п.4, в котором Y¹⁰¹ замещено на А¹⁰¹.

6. Антитело по п.4, в котором Y¹⁰² замещено на А¹⁰².

7. Антитело по п.4, в котором D¹⁰³ замещено на N¹⁰³.

8. Антитело по п.4, в котором по крайней мере одно из упомянутых замещений находится в тяжелой цепи и по крайней мере одно из замещений - в легкой цепи.

9. Антитело по п.8, в котором Е⁵³ и Y¹⁰² оба замещены.

10. Антитело по п.9, в котором Е⁵³ замещено на K⁵³ и Y¹⁰² замещено на А¹⁰².

11. Антитело по п.10, в котором тяжелая цепь включает по крайней мере два из упомянутых замещений.

12. Антитело по п.11, в котором D⁵⁸ и D¹⁰³ оба замещены.

13. Антитело по п.9, в котором D58 замещено N58 и D¹⁰³ замещено на N103.

14. Антитело по п.12, в котором далее Е¹⁰⁵ замещено.

15. Антитело по п.14, в котором Е¹⁰⁵ замещено на Q¹⁰⁵.

16. Антитело по п.1, в котором, по крайней мере, одно из упомянутых замещений находится в легкой цепи.

17. Антитело по п.16, в котором Е⁵³ замещено на K⁵³.

18. Антитело по п.16, в котором W⁹⁴ замещено на А⁹⁴.

19. Антитело по п.1, в котором присутствуют последовательности фреймового участка цетуксимаба.

20. Антитело по п.1, в котором присутствуют последовательности фреймового участка и последовательность константного участка цетуксимаба.

21. Бивалентный фрагмент антитела по п.1.

22. Конъюгат, имеющий цитотоксин или распознаваемую метку и конъюгированное к нему антитело по п.1.

23. Фармацевтический состав, включающий фармацевтически приемлемый носитель и анти-EGFR антитело в количестве, достаточном для контролирования роста клеток с плотностью EGFR выше нормальной, со значением аффинности Kd анти-EGFR антитела в пределах от 1,0 nM до 1 nM; данное антитело имеет незначительную связывающую аффинность с клетками EGFR с нормальной плотностью.

24. Метод лечения пациента, имеющего пораженные клетки с плотностью EGFR выше нормальной, включая лечение пациента фармацевтическим составом с фармацевтически приемлемым носителем и количеством анти-EGFR антитела, его бивалетным фрагментом или конъюгатом, эффективным для контролирования роста этих пораженных клеток, минимизируя при этом нежелательные последствия для клеток EGFR с нормальной плотностью; анти-EGFR антитело имеет значения аффинности Kd в пределах от 1.0 nM до 1 nM, а также незначительную связывающую аффинность с клетками EGFR с нормальной плотностью.

25. Метод лечения по п.24, где под пораженными клетками понимаются раковые клетки.

26. Метод лечения по п.25, где под раковыми клетками понимаются колоректальные раковые клетки.