RU2012141653A - Способ получения растворимого рекомбинантного белка интерферона без денатурирования - Google Patents

Способ получения растворимого рекомбинантного белка интерферона без денатурирования Download PDF

Info

Publication number
RU2012141653A
RU2012141653A RU2012141653/10A RU2012141653A RU2012141653A RU 2012141653 A RU2012141653 A RU 2012141653A RU 2012141653/10 A RU2012141653/10 A RU 2012141653/10A RU 2012141653 A RU2012141653 A RU 2012141653A RU 2012141653 A RU2012141653 A RU 2012141653A
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
interferon
protein
recombinant
insoluble fraction
host cell
Prior art date
Application number
RU2012141653/10A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2573909C2 (ru
Inventor
Джефри АЛЛЕН
Пин-Хуа ФЭН
Анант ПАТКАР
Кейт Л. ХЭНИ
Лоуренс ЧЬЮ
Лэй Лэй Фокхам СЕНЧАНТАЛАНГСИ
Original Assignee
Пфенекс Инк.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Пфенекс Инк. filed Critical Пфенекс Инк.
Publication of RU2012141653A publication Critical patent/RU2012141653A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2573909C2 publication Critical patent/RU2573909C2/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
    • C12P21/02—Preparation of peptides or proteins having a known sequence of two or more amino acids, e.g. glutathione
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
    • A61K38/21—Interferons [IFN]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
    • C07K1/02—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length in solution
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/52—Cytokines; Lymphokines; Interferons
    • C07K14/555—Interferons [IFN]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

1. Способ получения рекомбинантного белка интерферона I типа, причем упомянутый способ включает:экспрессию рекомбинантного белка интерферона культивированием клетки-хозяина Pseudomonas или E.coli, содержащей экспрессионную конструкцию, причем упомянутая экспрессионная конструкция содержит нуклеиновую кислоту, содержащую кодирующую последовательность для интерферона I типа, которая была оптимизирована для экспрессии в клетке-хозяине;лизис культиворованной клетки-хозяина;получение нерастворимой фракции и растворимой фракции из лизированной клетки-хозяина;экстрагирование нерастворимой фракции подверганием ее неденатурирующим условиям экстракции, причем упомянутые неденатурирующие условия экстракции включают цвиттерионный детергент или октилглюкопиранозид; иполучение осадка экстракта и супернатанта экстракта из экстрагированной нерастворимой фракции;причем рекомбинантный белок в супернатанте экстракта присутствует в растворимой форме, активной форме или их комбинации, без необходимости осуществления дополнительной стадии его ренатурации или рефолдинга.2. Способ по п.1, в котором кодирующая последовательность для интерферона I типа является функционально связанной с производным промотора lac, причем культивирование включает:выращивание клетки-хозяина при температуре от около 25°C до около 33°C и при значении рН от около 5,7 до около 6,5, до значения OD, равного от около 80 до около 160, ииндукцию клетки-хозяина IPTG в концентрации, равной от около 0,08 мМ до около 0,4 мМ.3. Способ по п.1, в котором цвиттерионный детергент представляет собой Zwittergent 3-08, Zwittergent 3-10, Zwittergent 3-12, Zwittergent 3-14 или CHAPS.4. Способ по п.3, в котором неденату�

Claims (19)

1. Способ получения рекомбинантного белка интерферона I типа, причем упомянутый способ включает:
экспрессию рекомбинантного белка интерферона культивированием клетки-хозяина Pseudomonas или E.coli, содержащей экспрессионную конструкцию, причем упомянутая экспрессионная конструкция содержит нуклеиновую кислоту, содержащую кодирующую последовательность для интерферона I типа, которая была оптимизирована для экспрессии в клетке-хозяине;
лизис культиворованной клетки-хозяина;
получение нерастворимой фракции и растворимой фракции из лизированной клетки-хозяина;
экстрагирование нерастворимой фракции подверганием ее неденатурирующим условиям экстракции, причем упомянутые неденатурирующие условия экстракции включают цвиттерионный детергент или октилглюкопиранозид; и
получение осадка экстракта и супернатанта экстракта из экстрагированной нерастворимой фракции;
причем рекомбинантный белок в супернатанте экстракта присутствует в растворимой форме, активной форме или их комбинации, без необходимости осуществления дополнительной стадии его ренатурации или рефолдинга.
2. Способ по п.1, в котором кодирующая последовательность для интерферона I типа является функционально связанной с производным промотора lac, причем культивирование включает:
выращивание клетки-хозяина при температуре от около 25°C до около 33°C и при значении рН от около 5,7 до около 6,5, до значения OD600, равного от около 80 до около 160, и
индукцию клетки-хозяина IPTG в концентрации, равной от около 0,08 мМ до около 0,4 мМ.
3. Способ по п.1, в котором цвиттерионный детергент представляет собой Zwittergent 3-08, Zwittergent 3-10, Zwittergent 3-12, Zwittergent 3-14 или CHAPS.
4. Способ по п.3, в котором неденатурирующие условия экстракции включают от около 0,5% до около 2% Zwittergent 3-14.
5. Способ по п.1, в котором неденатурирующие условия экстракции дополнительно включают хаотропный агент и космотропную соль.
6. Способ по п.5, в котором хаотропный агент представляет собой мочевину или гидрохлорид гуанидина, и в котором космотропная соль представляет собой NaCl, KCl или (NH4)2SO4.
7. Способ по п.1, в котором неденатурирующие условия экстракции включают: от около 0,5 до около 2% Zwittergent 3-14; от около 0 до около 2М мочевины; от около 0 до около 2М NaCl, и в котором значения рН составляют от около 6,5 до около 8,5.
8. Способ по п.7, в котором неденатурирующие условия экстракции включают: около 1% Zwittergent 3-14; около 2М мочевины; около 2М NaCl; и в котором значение рН составляет около 8,2.
9. Способ по п.1, в котором неденатурирующие условия экстракции дополнительно включают от около 1% до около 40% масс./об. твердых веществ.
10. Способ по п.9, в котором неденатурирующие условия экстракции дополнительно включают около 5% масс./об. твердых веществ.
11. Способ по п.1, в котором рекомбинантный белок интерферон I типа представляет собой интерферон-β, интерферон-α, интерферон-κ или интерферон-ω.
12. Способ по п.11, в котором рекомбинантный белок интерферон I типа представляет собой интерферон-β, и в котором упомянутый интерферон-β выбирают из группы, состоящей из: человеческого интерферона-β 1b и человеческого интерферона-β 1b C17S, или в котором рекомбинантный белок интерферон I типа представляет собой интерферон-α, и в котором интерферон-α выбирают из группы, состоящей из: человеческого интерферона-α 2а и человеческого интерферона-α 2b.
13. Способ по п.1, дополнительно включающий измерение количества рекомбинантного белка интерферона I типа в образце нерастворимой фракции, причем упомянутый образец нерастворимой фракции получен до экстрагирования нерастворимой фракции, и измерение количества рекомбинантного белка интерферона I типа в образце супернатанта экстракта, причем упомянутый образец супернатанта экстракта получен после экстрагирования нерастворимой фракции, причем количество рекомбинантного белка интерферона, обнаруженное в образце супернатанта экстракта, полученном после экстрагирования нерастворимой фракции, составляет от около 10% до около 95% количества рекомбинантного белка интерферона, измеренного в образце нерастворимой фракции, полученном до экстрагирования нерастворимой фракции.
14. Способ по п.1, дополнительно включающий измерение активности рекомбинантного белка интерферона I типа в образце супернатанта экстракта, причем упомянутый образец супернатанта экстракта получен после экстрагирования нерастворимой фракции, в котором определяется, что от около 40% до около 100% рекомбинантного белка, присутствующего в образце супернатанта экстракта, полученном после экстрагирования нерастворимой фракции, является активным, или в котором от около 75% до около 100% рекомбинантного белка, присутствующего в образце супернатанте экстракта, полученном после экстрагирования нерастворимой фракции, является активным при сравнении с колчеством активного белка интерферона в стандартном образце, содержащем то же самое количество рекомбинантного белка интерферона, что и образец супернатанта экстракта, полученный после экстрагирования нерастворимой фракции.
15. Способ по п.1, в котором рекомбинантный белок представляет собой интерферон-β, и в котором количество активного рекомбинантного белка определяется аффинной хроматографией на колонке с Blue Sepharose, анализом связывания с рецептором, анализом противовирусной активности или анализом цитопатического эффекта.
16. Способ по п.1, в котором рекомбинантный белок интерферон I типа в супернатанте экстракта присутствует в концентрации, составляющей от около 0,3 г/л до около 10 г/л.
17. Способ по п.1, в котором клетка-хозяин представляет собой штамм с делецией Lon протеазы и протеазы hslUV.
18. Способ по п.1, в котором интерферон I типа экспрессируется в цитоплазме клетки-хозяина.
19. Способ по п.12, в котором интерферон I типа представляет собой человеческий интерферон-β 1b или человеческий интерферон-β 1b C17S, и в котором человеческий интерферон-β 1b или человеческий интерферон-β 1b C17S экспрессируется в цитоплазме клетки-хозяина.
RU2012141653/10A 2010-03-04 2011-03-02 Способ получения растворимого рекомбинантного белка интерферона без денатурирования RU2573909C2 (ru)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US31067110P 2010-03-04 2010-03-04
US61/310,671 2010-03-04
PCT/US2011/026921 WO2011109556A2 (en) 2010-03-04 2011-03-02 Method for producing soluble recombinant interferon protein without denaturing

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2012141653A true RU2012141653A (ru) 2014-04-10
RU2573909C2 RU2573909C2 (ru) 2016-01-27

Family

ID=44531690

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2012141653/10A RU2573909C2 (ru) 2010-03-04 2011-03-02 Способ получения растворимого рекомбинантного белка интерферона без денатурирования

Country Status (16)

Country Link
US (2) US9187543B2 (ru)
EP (1) EP2542574B1 (ru)
JP (1) JP5840148B2 (ru)
KR (1) KR101857825B1 (ru)
CN (1) CN102906108B (ru)
AU (1) AU2011223627B2 (ru)
BR (1) BR112012022292A2 (ru)
CA (1) CA2791361C (ru)
CL (1) CL2012002378A1 (ru)
CO (1) CO6592086A2 (ru)
ES (1) ES2639398T3 (ru)
MX (1) MX2012010148A (ru)
NZ (1) NZ602255A (ru)
PE (1) PE20130557A1 (ru)
RU (1) RU2573909C2 (ru)
WO (1) WO2011109556A2 (ru)

Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2011109556A2 (en) 2010-03-04 2011-09-09 Pfenex Inc. Method for producing soluble recombinant interferon protein without denaturing
US9169304B2 (en) 2012-05-01 2015-10-27 Pfenex Inc. Process for purifying recombinant Plasmodium falciparum circumsporozoite protein
CN106967175A (zh) * 2013-05-15 2017-07-21 复旦大学 长效干扰素及其制备方法和用途
LT6164B (lt) 2013-10-15 2015-06-25 Uab Biotechnologinės Farmacijos Centras "Biotechpharma" Sulieti interferono-alfa 5 baltymai su kitu citokinu ir jų gamybos būdas
CN107099569B (zh) * 2017-06-30 2021-05-07 北京生物制品研究所有限责任公司 一种规模化发酵生产重组人干扰素β1b蛋白的方法
CN116120424A (zh) * 2022-06-06 2023-05-16 江苏靶标生物医药研究所有限公司 一种干扰素α2b可溶性重组表达和分离纯化方法及其应用

Family Cites Families (78)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4551433A (en) * 1981-05-18 1985-11-05 Genentech, Inc. Microbial hybrid promoters
US4992271A (en) * 1982-09-23 1991-02-12 Cetus Corporation Formulation for lipophilic IL-2 proteins
US4462940A (en) * 1982-09-23 1984-07-31 Cetus Corporation Process for the recovery of human β-interferon-like polypeptides
US5643566A (en) * 1982-09-23 1997-07-01 Cetus Corporation Formulation processes for lipophilic proteins
US5702699A (en) * 1982-09-23 1997-12-30 Cetus Corporation Process for the recovery of lipophilic proteins
US4588585A (en) * 1982-10-19 1986-05-13 Cetus Corporation Human recombinant cysteine depleted interferon-β muteins
US4755465A (en) * 1983-04-25 1988-07-05 Genentech, Inc. Secretion of correctly processed human growth hormone in E. coli and Pseudomonas
US5281532A (en) * 1983-07-27 1994-01-25 Mycogen Corporation Pseudomas hosts transformed with bacillus endotoxin genes
US4695462A (en) * 1985-06-28 1987-09-22 Mycogen Corporation Cellular encapsulation of biological pesticides
US4695455A (en) * 1985-01-22 1987-09-22 Mycogen Corporation Cellular encapsulation of pesticides produced by expression of heterologous genes
GB8517071D0 (en) 1985-07-05 1985-08-14 Hoffmann La Roche Gram-positive expression control sequence
US4810643A (en) * 1985-08-23 1989-03-07 Kirin- Amgen Inc. Production of pluripotent granulocyte colony-stimulating factor
US4734362A (en) * 1986-02-03 1988-03-29 Cambridge Bioscience Corporation Process for purifying recombinant proteins, and products thereof
DK203187A (da) 1986-04-22 1987-10-23 Immunex Corp Human g-csf proteinekspression
US5183746A (en) * 1986-10-27 1993-02-02 Schering Aktiengesellschaft Formulation processes for pharmaceutical compositions of recombinant β-
NO176799C (no) 1986-12-23 1995-05-31 Kyowa Hakko Kogyo Kk DNA som koder for et polypeptid, rekombinant plasmid som koder for og kan uttrykke et polypeptid og fremgangsmåte for fremstilling av dette polypeptid
JP2618618B2 (ja) 1988-03-04 1997-06-11 協和醗酵工業株式会社 抗ｇ−ｃｓｆ誘導体、ｎｄ２８モノクローナル抗体
US4904584A (en) * 1987-12-23 1990-02-27 Genetics Institute, Inc. Site-specific homogeneous modification of polypeptides
US5128130A (en) * 1988-01-22 1992-07-07 Mycogen Corporation Hybrid Bacillus thuringiensis gene, plasmid and transformed Pseudomonas fluorescens
US5055294A (en) * 1988-03-03 1991-10-08 Mycogen Corporation Chimeric bacillus thuringiensis crystal protein gene comprising hd-73 and berliner 1715 toxin genes, transformed and expressed in pseudomonas fluorescens
CA1340810C (en) 1988-03-31 1999-11-02 Motoo Yamasaki Polypeptide derivatives of human granulocyte colony stimulating factor
WO1990006952A1 (en) 1988-12-22 1990-06-28 Kirin-Amgen, Inc. Chemically modified granulocyte colony stimulating factor
US6372206B1 (en) 1989-03-02 2002-04-16 University Of Florida Orally-administered interferon-TAU compositions and methods
US5166322A (en) 1989-04-21 1992-11-24 Genetics Institute Cysteine added variants of interleukin-3 and chemical modifications thereof
US5169760A (en) * 1989-07-27 1992-12-08 Mycogen Corporation Method, vectors, and host cells for the control of expression of heterologous genes from lac operated promoters
GB9107846D0 (en) 1990-04-30 1991-05-29 Ici Plc Polypeptides
DE4014750A1 (de) 1990-05-08 1991-11-14 Boehringer Mannheim Gmbh Muteine des granulozyten-stimulierenden faktors (g-csf)
IE912365A1 (en) 1990-07-23 1992-01-29 Zeneca Ltd Continuous release pharmaceutical compositions
WO1992006116A1 (en) 1990-09-28 1992-04-16 Ortho Pharmaceutical Corporation Hybrid growth factors
US5508192A (en) * 1990-11-09 1996-04-16 Board Of Regents, The University Of Texas System Bacterial host strains for producing proteolytically sensitive polypeptides
US5240834A (en) * 1991-01-22 1993-08-31 Albert Einstein College Of Medicine Of Yeshiva University Solubilization of protein after bacterial expression using sarkosyl
DE4105480A1 (de) 1991-02-21 1992-08-27 Boehringer Mannheim Gmbh Verbesserte aktivierung von rekombinanten proteinen
US6171824B1 (en) 1991-08-30 2001-01-09 Fred Hutchinson Cancer Research Center Hybrid cytokines
US6057133A (en) 1992-11-24 2000-05-02 G. D. Searle Multivariant human IL-3 fusion proteins and their recombinant production
ITFI940106A1 (it) 1994-05-27 1995-11-27 Menarini Ricerche Sud Spa Molecola ibrida di formula gm-csf-l-epo o epo-l-gm-csf per la stimolaz ione eritropoietica
US5824784A (en) * 1994-10-12 1998-10-20 Amgen Inc. N-terminally chemically modified protein compositions and methods
RU2098124C1 (ru) * 1994-10-24 1997-12-10 Общество с ограниченной ответственностью "Ниготек" Способ получения интерферона
US5814485A (en) 1995-06-06 1998-09-29 Chiron Corporation Production of interferon-β (IFN-β) in E. coli
IT1285405B1 (it) 1995-06-06 1998-06-03 Alza Corp Modificazione di farmaci polipeptidici per accrescere il flusso per elettrotrasporto.
JP2001523480A (ja) * 1997-11-20 2001-11-27 バイカル インコーポレイテッド サイトカイン発現ポリヌクレオチドおよびそれらの組成物を用いた癌の処置
AU751823B2 (en) 1998-05-14 2002-08-29 Merck Patent Gmbh Fused protein
US20030167531A1 (en) * 1998-07-10 2003-09-04 Russell Douglas A. Expression and purification of bioactive, authentic polypeptides from plants
AU765801B2 (en) 1999-02-18 2003-10-02 Rmf Dictagene S.A. Malaria vaccine
US7001892B1 (en) * 1999-06-11 2006-02-21 Purdue Research Foundation Pharmaceutical materials and methods for their preparation and use
US6531122B1 (en) * 1999-08-27 2003-03-11 Maxygen Aps Interferon-β variants and conjugates
KR100358948B1 (ko) 2000-03-31 2002-10-31 한국과학기술원 인체 과립성 백혈구의 콜로니 자극인자를 분비하는 대장균
AU9096001A (en) 2000-09-08 2002-03-22 Amgen Inc G-csf analog compositions and methods
AU3070702A (en) * 2000-11-07 2002-05-21 Chiron Corp Stabilized inteferon compositions
ATE399794T1 (de) 2001-02-06 2008-07-15 Merck Patent Gmbh Modifizierter granulozyten stimulierender factor (g-csf) mit verringerter immunogenität
ES2309167T3 (es) 2001-02-19 2008-12-16 Merck Patent Gmbh Metodo para identificar epitotes de celulas t y metodo para preparar moleculas con inmunogenicidad reducida.
US7189830B2 (en) 2001-02-19 2007-03-13 Merck Patent Gmbh Anti-KSA/IL-2 fusion proteins with reduced immunogenicity
DE60236522D1 (de) 2001-07-11 2010-07-08 Maxygen Inc G-csf konjugate
EP1432822B1 (en) * 2001-09-10 2007-05-23 EMD Biosciences, Inc. Method for recovering and analyzing a cellular component of cultured cells without having to harvest the cells first
US20040247562A1 (en) 2001-09-28 2004-12-09 Sang Yup Lee Diagnostic method for cancer characterized in the detection of the deletion of g-csf exon 3
ES2516041T3 (es) 2001-10-10 2014-10-30 Ratiopharm Gmbh Remodelación y glicoconjugación de la hormona del crecimiento humano (hGH)
EP1572936A2 (en) 2002-03-05 2005-09-14 Eli Lilly And Company Heterologous g-csf fusion proteins
SI21273A (sl) * 2002-07-31 2004-02-29 LEK farmacevtska dru�ba d.d. Priprava inkluzijskih teles z visokim deležem pravilno zvitega prekurzorja heterolognega proteina
AU2003267827A1 (en) 2002-08-31 2004-03-19 Cj Corp. Glycosylated human granulocyte colony-stimulating factor (g-csf) isoform
US9453251B2 (en) * 2002-10-08 2016-09-27 Pfenex Inc. Expression of mammalian proteins in Pseudomonas fluorescens
US8399217B2 (en) * 2003-03-14 2013-03-19 Brookhaven Science Associates, Llc High density growth of T7 expression strains with auto-induction option
KR101237651B1 (ko) * 2003-11-19 2013-02-27 다우 글로벌 테크놀로지스 엘엘씨 개선된 단백질 발현 시스템
EP2314602A1 (en) * 2003-11-21 2011-04-27 Pfenex, Inc. Improved expression systems with SEC-system secretion
KR100524872B1 (ko) * 2003-12-04 2005-11-01 씨제이 주식회사 인터페론 베타의 정제방법
AU2005206951B2 (en) 2004-01-16 2010-08-19 Pfenex Inc. Expression of mammalian proteins in Pseudomonas fluorescens
AU2005269527B2 (en) * 2004-07-26 2011-12-01 Pfenex Inc. Process for improved protein expression by strain engineering
CA2591235C (en) * 2004-12-20 2014-03-11 Cadila Healthcare Limited Process for preparing high levels of interferon beta
EP1828241A1 (en) * 2004-12-23 2007-09-05 Laboratoires Serono S.A. G-csf polypeptides and uses thereof
GB0605684D0 (en) 2006-03-21 2006-05-03 Sicor Biotech Uab Method For Purifying Granulocyte-Colony Stimulating Factor
KR20090018799A (ko) * 2006-05-30 2009-02-23 다우 글로벌 테크놀로지스 인크. 코돈 최적화 방법
EP1939212A1 (en) * 2006-12-20 2008-07-02 LEK Pharmaceuticals D.D. Organic compounds
AU2008210538B2 (en) * 2007-01-31 2013-06-06 Pelican Technology Holdings, Inc. Bacterial leader sequences for increased expression
JP5444553B2 (ja) * 2007-04-27 2014-03-19 フェネックス インコーポレイテッド 微生物宿主を迅速にスクリーニングして、異種タンパク質発現の収率および／または質が改善されている特定の株を同定する方法
US9580719B2 (en) * 2007-04-27 2017-02-28 Pfenex, Inc. Method for rapidly screening microbial hosts to identify certain strains with improved yield and/or quality in the expression of heterologous proteins
US7625555B2 (en) * 2007-06-18 2009-12-01 Novagen Holding Corporation Recombinant human interferon-like proteins
KR20100058541A (ko) * 2007-08-15 2010-06-03 아뮤닉스 인코포레이티드 생물학적 활성 폴리펩티드의 특성을 변경하기 위한 조성물 및 방법
EP2445924B2 (en) 2009-06-25 2023-12-13 Amgen Inc. Capture purification processes for proteins expressed in a non-mammalian system
WO2011109556A2 (en) 2010-03-04 2011-09-09 Pfenex Inc. Method for producing soluble recombinant interferon protein without denaturing
WO2011123570A2 (en) * 2010-04-01 2011-10-06 Pfenex Inc. Methods for g-csf production in a pseudomonas host cell

Also Published As

Publication number Publication date
US9611499B2 (en) 2017-04-04
ES2639398T3 (es) 2017-10-26
CA2791361A1 (en) 2011-09-09
EP2542574B1 (en) 2017-08-09
PE20130557A1 (es) 2013-05-19
CN102906108B (zh) 2016-01-20
WO2011109556A3 (en) 2012-01-12
CA2791361C (en) 2018-06-12
EP2542574A4 (en) 2014-01-29
CO6592086A2 (es) 2013-01-02
KR101857825B1 (ko) 2018-05-14
JP5840148B2 (ja) 2016-01-06
BR112012022292A2 (pt) 2017-01-10
US20160032345A1 (en) 2016-02-04
KR20130018743A (ko) 2013-02-25
CN102906108A (zh) 2013-01-30
CL2012002378A1 (es) 2014-01-10
US20110217784A1 (en) 2011-09-08
AU2011223627A1 (en) 2012-09-27
EP2542574A2 (en) 2013-01-09
RU2573909C2 (ru) 2016-01-27
AU2011223627B2 (en) 2015-06-18
US9187543B2 (en) 2015-11-17
MX2012010148A (es) 2013-01-22
JP2013524775A (ja) 2013-06-20
NZ602255A (en) 2014-04-30
WO2011109556A2 (en) 2011-09-09

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2012141653A (ru) Способ получения растворимого рекомбинантного белка интерферона без денатурирования
Nandakumar et al. Solubilization of trichloroacetic acid (TCA) precipitated microbial proteins via NaOH for two-dimensional electrophoresis
Hu et al. CXCL8 of Scophthalmus maximus: Expression, biological activity and immunoregulatory effect
JP2016518833A5 (ru)
JP2013524775A5 (ru)
Goud et al. Expression, purification, and molecular analysis of the Necator americanus glutathione S-transferase 1 (Na-GST-1): a production process developed for a lead candidate recombinant hookworm vaccine antigen
Li et al. Gene cloning and recombinant expression of a novel fungal immunomodulatory protein from Trametes versicolor
Bis et al. High yield soluble bacterial expression and streamlined purification of recombinant human interferon α-2a
Ohta et al. Anti-viral effects of interferon administration on sevenband grouper, Epinephelus septemfasciatus
Minor et al. A putative serine protease, SpSsp1, from Saprolegnia parasitica is recognised by sera of rainbow trout, Oncorhynchus mykiss
CA2628086A1 (en) Cation-exchange displacement chromatography process and cationic organic compounds for use as displacer compounds in cation-exchange displacement chromatography process
Perez-Riverol et al. Molecular cloning, expression and IgE-immunoreactivity of phospholipase A1, a major allergen from Polybia paulista (Hymenoptera: Vespidae) venom
Yan et al. Isolation, purification, gene cloning and expression of antifungal protein from Bacillus amyloliquefaciens MG-3
Shen et al. Expression of recombinant AccMRJP1 protein from royal jelly of Chinese honeybee in Pichia pastoris and its proliferation activity in an insect cell line
Burger et al. Investigating the chaperone properties of a novel heat shock protein, Hsp70. c, from Trypanosoma brucei
Alam et al. Proteolytic activity of Plasmodium falciparum subtilisin-like protease 3 on parasite profilin, a multifunctional protein
Behera et al. Characterisation and expression analysis of trophozoite and cyst proteins of Acanthamoeba spp. isolated from Acanthamoeba keratitis (AK) patient
Ayed et al. High level production and purification of human interferon α2b in high cell density culture of Pichia pastoris
Ahmed et al. Optimization of conditions for high‐level expression and purification of human recombinant consensus interferon (rh‐cIFN) and its characterization
Cha et al. Optimal conditions for expressing a complement component 3b functional fragment (α2-macroglobulin receptor) gene from Epinephelus coioides in Pichia pastoris
Uribe-Echeverry et al. Fungal immunomodulatory proteins in the context of biomedicine
CN110845594A (zh) 可增强长牡蛎免疫应答的重组血清淀粉样蛋白a及制备方法
Yazdani et al. Improvement in yield and purity of a recombinant malaria vaccine candidate based on the receptor-binding domain of Plasmodium vivax Duffy binding protein by codon optimization
CN102586202A (zh) 一种硫氧还蛋白及其制备和应用
Berg et al. An antiserum against Atlantic salmon IFNa1 detects IFN and neutralizes antiviral activity produced by poly I: C stimulated cells

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20200303