RU2012101779A

RU2012101779A - Варианты протеза

Info

Publication number: RU2012101779A
Application number: RU2012101779/10A
Authority: RU
Inventors: Карл Иннес ВЕБСТЕР; Лутц Ульрих Йохен Вильхельм ЙЕРМУТУС; Йорг Биркенфельд; Андреа АЙККЕР; Пер-Ола ФРЕСКГАРД; Клаудиа ГОТЦБЕРГЕР-ШАД; Йоанна ГРУДЦИНСКА; Ульрих ХАУПТС; Йози ИННИГ; Кристоф МАЛЕРТ; Андреас ШАЙДИГ; Михаэль СТРЕРАТ; Ян Теббе; Йохан Пер ВАЛЛИН; Нина Вобст
Original assignee: МЕДИММЬЮН, ЭлЭлСи
Priority date: 2009-06-19
Filing date: 2010-06-21
Publication date: 2013-07-27
Also published as: JP2012530498A; US20120237496A1; CN102647998A; AU2010262974A1; BRPI1014942A2; SG176922A1; MX2011014040A; CA2765688A1; EP2442824A2; WO2010148413A2; KR20120112350A

Abstract

1. Полипептид, содержащий вариант протеазы внеклеточного каталитического домена неприлизина человека дикого типа (SEQ ID NO:2), обладающий повышенной специфичностью к пептиду Αβ по сравнению с неприлизином человека дикого типа, в котором G399 заменена другой природной аминокислотой и/или G714 заменена другой природной аминокислотой, причем необязательно указанные природные аминокислоты не являются Ala (A).2. Полипептид, содержащий вариант протеазы, по п. 1, отличающийся тем, что G399 заменена валином (V) и/или G714 заменена лизином (K).3. Полипептид, содержащий вариант протеазы, по п. 1, отличающийся тем, что G399 заменена валином (V) и G714 заменена лизином (K).4. Полипептид по п. 1, содержащий вариант протеазы внеклеточного каталитического домена неприлизина человека дикого типа, представленный в SEQ ID NO:2, обладающий измененной специфичностью к амилоиду β, амилоиду β, ангиотензину-1 и -2, ANP, BNP, брадикинину, эндотелину-1 и -2, нейропептиду Y, нейротензину, адреномедуллину, бомбезину, BLP, CGRP, энкефалинам, FGF-2, fMLP, GRP, нейрокинину А, нейромедину С, окситоцину, PAMP, веществу Р или VIP.5. Полипептид по п. 1, содержащий вариант протеазы внеклеточного домена неприлизина человека дикого типа SEQ ID NO:2, обладающий измененной специфичностью к амилоиду β, амилоиду β, ангиотензину-1 и -2, ANP, BNP, брадикинину, эндотелину-1 и -2, нейропептиду Y или нейротензину.6. Полипептид по п. 1, содержащий фрагмент-модулятор времени полужизни, N-терминально присоединенный к варианту протеазы и предпочтительно выбираемый из Fc-домена и человеческого сывороточного альбумина (HSA) или их вариантов, где необязательно указанный фрагмент-модулятор времени полужизни и вариант протеазы соединены линк

Claims

1. Полипептид, содержащий вариант протеазы внеклеточного каталитического домена неприлизина человека дикого типа (SEQ ID NO:2), обладающий повышенной специфичностью к пептиду Αβ по сравнению с неприлизином человека дикого типа, в котором G399 заменена другой природной аминокислотой и/или G714 заменена другой природной аминокислотой, причем необязательно указанные природные аминокислоты не являются Ala (A).

2. Полипептид, содержащий вариант протеазы, по п. 1, отличающийся тем, что G399 заменена валином (V) и/или G714 заменена лизином (K).

3. Полипептид, содержащий вариант протеазы, по п. 1, отличающийся тем, что G399 заменена валином (V) и G714 заменена лизином (K).

4. Полипептид по п. 1, содержащий вариант протеазы внеклеточного каталитического домена неприлизина человека дикого типа, представленный в SEQ ID NO:2, обладающий измененной специфичностью к амилоиду β₄₀, амилоиду β₄₂, ангиотензину-1 и -2, ANP, BNP, брадикинину, эндотелину-1 и -2, нейропептиду Y, нейротензину, адреномедуллину, бомбезину, BLP, CGRP, энкефалинам, FGF-2, fMLP, GRP, нейрокинину А, нейромедину С, окситоцину, PAMP, веществу Р или VIP.

5. Полипептид по п. 1, содержащий вариант протеазы внеклеточного домена неприлизина человека дикого типа SEQ ID NO:2, обладающий измененной специфичностью к амилоиду β₄₀, амилоиду β₄₂, ангиотензину-1 и -2, ANP, BNP, брадикинину, эндотелину-1 и -2, нейропептиду Y или нейротензину.

6. Полипептид по п. 1, содержащий фрагмент-модулятор времени полужизни, N-терминально присоединенный к варианту протеазы и предпочтительно выбираемый из Fc-домена и человеческого сывороточного альбумина (HSA) или их вариантов, где необязательно указанный фрагмент-модулятор времени полужизни и вариант протеазы соединены линкером.

7. Нуклеиновая кислота, кодирующая полипептид по п. 1.

8. Вектор, содержащий нуклеиновую кислоту по п. 7.

9. Клетка-хозяин, содержащая вектор по п. 8.

10. Способ получения полипептида по п. 1, включающий следующие этапы:

а. культивирование клетки-хозяина по п. 9 в условиях, подходящих для экспрессии варианта протеазы; и

б. выделение варианта протеазы из культуры клетки-хозяина.

11. Фармацевтическая композиция, включающая полипептид по п. 1.

12. Способ лечения заболевания, связанного с субстратом неприлизина человека, например, патологии, связанной с Αβ, например, болезни Альцгеймера, включающий введение пациенту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективной дозы полипептида, содержащего вариант протеазы, по п. 1, в результате чего происходит улучшение симптома заболевания, связанного с субстратом неприлизина человека.

13. Полипептид с повышенной специфичностью к Αβ по п. 4 или 5 для применения в целях предотвращения и/или лечения патологии, связанной с Αβ, например, болезни Альцгеймера.