RU2009105699A - Области присоединения матрикса (mar) для повышения транскрипции и их применение - Google Patents

Области присоединения матрикса (mar) для повышения транскрипции и их применение Download PDF

Info

Publication number
RU2009105699A
RU2009105699A RU2009105699/10A RU2009105699A RU2009105699A RU 2009105699 A RU2009105699 A RU 2009105699A RU 2009105699/10 A RU2009105699/10 A RU 2009105699/10A RU 2009105699 A RU2009105699 A RU 2009105699A RU 2009105699 A RU2009105699 A RU 2009105699A
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
mar
nucleotide sequence
sequence
human
gene
Prior art date
Application number
RU2009105699/10A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2469089C2 (ru
Inventor
Николя МЕРМО (CH)
Николя МЕРМО
Пьер Ален ЖИРО (CH)
Пьер Ален ЖИРО
Давид КАЛАБРЕЗ (CH)
Давид КАЛАБРЕЗ
Александр РЕГАМЕ (CH)
Александр РЕГАМЕ
Салин ДОНИНЕЛЛИ-АРОП (CH)
Салин ДОНИНЕЛЛИ-АРОП
Original Assignee
Селексис С.А. (Ch)
Селексис С.А.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Селексис С.А. (Ch), Селексис С.А. filed Critical Селексис С.А. (Ch)
Publication of RU2009105699A publication Critical patent/RU2009105699A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2469089C2 publication Critical patent/RU2469089C2/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/67—General methods for enhancing the expression
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6806—Preparing nucleic acids for analysis, e.g. for polymerase chain reaction [PCR] assay

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

1. Экспрессионная система для экспрессии высокого уровня по меньшей мере одного гена, включающая: ! промотор для оперативного сцепления с нуклеотидной последовательностью, кодирующей интересующий ген, и ! по меньшей мере одну нуклеотидную последовательность MAR млекопитающего, отличного от человека, для усиления экспрессии указанного гена в клетке, трансформированной указанной экспрессионной системой, ! где указанная нуклеотидная последовательность MAR млекопитающего, отличного от человека, повышает экспрессию указанного гена примерно в 2, примерно в 3, примерно в 4, примерно в 5, примерно в 6, примерно в 7, примерно в 8, примерно в 9, примерно в 10 раз или более после трансформации указанной клетки указанной конструкцией. ! 2. Экспрессионная система по п.1, где экспрессионная кассета, содержащая указанный промотор и указанную нуклеотидную последовательность, кодирующую интересующий ген, оперативно сцеплена с промотором. ! 3. Экспрессионная система по любому из пп.1 и 2, где указанная по меньшей мере одна нуклеотидная последовательность MAR млекопитающего, отличного от человека, представляет собой нуклеотидную последовательность MAR грызунов, такую как нуклеотидная последовательность MAR мыши или хомячка. ! 4. Экспрессионная система по п.1 или 2, где указанная нуклеотидная ! последовательность MAR млекопитающего, отличного от человека, включает: ! (i) SEQ ID No. 3, SEQ ID No. 10 или ее функциональный фрагмент; либо ! (ii) нуклеотидную последовательность, имеющую примерно 80%, примерно 90%, примерно 95% или примерно 98% идентичности последовательности с любой из последовательностей (i). ! 5. Экспрессионная система по п.1 или 2, где указанный ген экс�

Claims (46)

1. Экспрессионная система для экспрессии высокого уровня по меньшей мере одного гена, включающая:
промотор для оперативного сцепления с нуклеотидной последовательностью, кодирующей интересующий ген, и
по меньшей мере одну нуклеотидную последовательность MAR млекопитающего, отличного от человека, для усиления экспрессии указанного гена в клетке, трансформированной указанной экспрессионной системой,
где указанная нуклеотидная последовательность MAR млекопитающего, отличного от человека, повышает экспрессию указанного гена примерно в 2, примерно в 3, примерно в 4, примерно в 5, примерно в 6, примерно в 7, примерно в 8, примерно в 9, примерно в 10 раз или более после трансформации указанной клетки указанной конструкцией.
2. Экспрессионная система по п.1, где экспрессионная кассета, содержащая указанный промотор и указанную нуклеотидную последовательность, кодирующую интересующий ген, оперативно сцеплена с промотором.
3. Экспрессионная система по любому из пп.1 и 2, где указанная по меньшей мере одна нуклеотидная последовательность MAR млекопитающего, отличного от человека, представляет собой нуклеотидную последовательность MAR грызунов, такую как нуклеотидная последовательность MAR мыши или хомячка.
4. Экспрессионная система по п.1 или 2, где указанная нуклеотидная
последовательность MAR млекопитающего, отличного от человека, включает:
(i) SEQ ID No. 3, SEQ ID No. 10 или ее функциональный фрагмент; либо
(ii) нуклеотидную последовательность, имеющую примерно 80%, примерно 90%, примерно 95% или примерно 98% идентичности последовательности с любой из последовательностей (i).
5. Экспрессионная система по п.1 или 2, где указанный ген экспрессируется в клетке млекопитающего, отличного от человека, такой как клетка грызуна, в частности, клетка мыши или хомячка, или в человеческой клетке, такой как клетка HeLa.
6. Экспрессионная система по п.1 или 2, где указанная по меньшей мере одна нуклеотидная последовательность MAR млекопитающего, отличного от человека, действует в цис или транс положении на указанном гене.
7. Способ усиленного продуцирования белка в клетке, при котором
получают клетку человека или млекопитающего, отличного от человека,
вводят экспрессионную систему по любому из пп.1-6 в указанную клетку таким образом, что экспрессия гена повышается примерно в 2, примерно в 3, примерно в 4, примерно в 5, примерно в 6, примерно в 7, примерно в 8, примерно в 9, примерно в 10 раз или более.
8. Изолированная и очищенная молекула нуклеиновой кислоты, содержащая:
(а) нуклеотидную последовательность SEQ ID No. 3 или SEQ ID No. 10 или ее функциональный фрагмент, либо
(б) нуклеотидную последовательность, которая имеет по меньшей мере примерно 80%, примерно 90%, примерно 95% или примерно 98% идентичности последовательности с последовательностью (а) и обладает активностью MAR.
9. Способ идентификации последовательностей MAR млекопитающего, отличного от человека, при котором:
получают по меньшей мере одну молекулу нуклеиновой кислоты млекопитающего, отличного от человека, предпочтительно геном млекопитающего, отличного от человека, или его часть,
подвергают указанную молекулу нуклеиновой кислоты методике сканирования на последовательности MAR, включающей:
установку размера окна для молекул нуклеиновой кислоты, подлежащих оцениванию,
выбор по меньшей мере 1 или по меньшей мере 2, предпочтительно 3, более предпочтительно 4 или более признаков, связанных с MAR,
установку пороговых значений для последовательностей, проявляющих этот/эти признаки, и
выбор нуклеотидных последовательностей-кандидатов MAR, превышающих эти пороговые значения,
подтверждение того, что указанная нуклеотидная последовательность MAR млекопитающего, отличного от человека, повышает экспрессию гена примерно в 2, примерно в 3, примерно в 4, примерно в 5, примерно в 6, примерно в 7, примерно в 8, примерно в 9, примерно в 10 раз или более после трансформации клетки человека и/или млекопитающего, отличного от человека, экспрессионной системой, содержащей указанные нукпеотидные последовательности MAR млекопитающего, отличного от человека.
10. Способ по п.9, где указанный по меньшей мере один признак может представлять собой угол изгиба ДНК, глубину большой бороздки, ширину малой бороздки, температуру плавления или их комбинации.
11. Способ по п.10, где значения угла изгиба ДНК включают значения между примерно 3 и примерно 5° (радиальные градусы), предпочтительно между примерно 3,8 и примерно 4,4°, включая примерно 3,9, примерно 4,0, примерно 4,1, примерно 4,2 и примерно 4,3°.
12. Способ по п.10 или 11, где значения глубины большой бороздки находятся между примерно 8,9 и примерно 9,3 Е, а значения ширины малой бороздки находятся между примерно 5,2 и примерно 5,8 Е, предпочтительно значения глубины большой бороздки находятся между примерно 9,0 и примерно 9,2 Е, включая примерно 9,1 Е, а значения ширины малой бороздки могут находиться между примерно 5,4 и примерно 5,7 Е, включая примерно 5,5 Е и примерно 5,6 Е.
13. Способ по п.10 или 11, где температура плавления находится между примерно 55 и примерно 75°С, в частности, между примерно 55 и примерно 62°С, включая примерно 56, примерно 57, примерно 58, примерно 59, примерно 60 и примерно 61°С.
14. Способ по п.10, где значения угла изгиба ДНК составляют от примерно 4,0 до примерно 5,0°, включая примерно 4,1, примерно 4,2, примерно 4,3, примерно 4,4, примерно 4,5, примерно 4,6, примерно 4,7, примерно 4,8 и примерно 4,9°.
15. Способ по п.14, где указанные значения угла изгиба ДНК объединяют со значениями окна в интервале от примерно 50 п.о. до примерно 150 п.о., включая, например, примерно 80 п.о., примерно 100 п.о. и примерно 120 п.о.
16. Способ по п.10, где значение угла изгиба ДНК, умноженное на значение размера окна, равняется примерно от 320 до 1320, как, например, от примерно 420 до примерно 1220, от примерно 520 до примерно 1120, от примерно 620 до примерно 1020, от примерно 720 до примерно 920, значение глубины большой бороздки, умноженное на значение размера окна, равняется от примерно 900 до примерно 4000, как, например, от примерно 1200 до 3700, от примерно 1500 до примерно 3400, от примерно 1800 до примерно 3100, от примерно 2100 до примерно 2800 и/или значение ширины малой бороздки, умноженное на значение размера окна, равняется от примерно 500 до примерно 2500, как, например, от примерно 750 до примерно 2250, от примерно 1000 до примерно 2000, от примерно 1250 до 1750.
17. Способ по любому из пп.9-11 или 14-16, дополнительно включающий:
получение экспериментально подтвержденных MAR человеческого или не человеческого происхождения;
определение указанных пороговых значений, используя указанные экспериментально подтвержденные MAR человеческого или не человеческого происхождения.
18. Конструкция MAR, содержащая:
(а) (i) изолированную нуклеотидную последовательность, содержащую по меньшей мере часть концевой области идентифицированной MAR, и
(ii) дополнительную изолированную нуклеотидную последовательность, содержащую примерно 10%, примерно 15%, примерно 20%, примерно 25%, примерно 30% или более указанной идентифицированной MAR или другой идентифицированной MAR; либо
(б) (i) нуклеотидную последовательность, имеющую примерно 90%, примерно 95%, примерно 96%, примерно 97% примерно 98%, примерно 99% идентичности последовательности с нуклеотидной последовательностью (a)(i), и
(ii) нуклеотидную последовательность, имеющую примерно 70%, примерно 80%, предпочтительно примерно 90%, примерно 95%, примерно 96%, примерно 97% примерно 98%, примерно 99% идентичности последовательности с нуклеотидной последовательностью (б)(i).
19. Конструкция MAR по п.18, где указанная нуклеотидная последовательность в (a)(ii) содержит АТ-богатую область.
20. Конструкция MAR по п.18 или 19, где указанная конструкция MAR содержит менее чем примерно 90%, предпочтительно менее чем примерно 80%, даже более предпочтительно менее чем примерно 70%, менее чем примерно 60% или менее чем примерно 50% числа нуклеотидов идентифицированной последовательности MAR.
21. Конструкция MAR по любому из пп.18 и 19, где указанная конструкция MAR содержит примерно такое же или по меньшей мере примерно 110% числа нуклеотидов идентифицированной последовательности MAR.
22. Конструкция MAR, содержащая
области идентифицированной последовательности MAR в последовательном расположении, где порядок и/или ориентация отличается от таковой идентифицированной последовательности MAR.
23. Конструкция MAR по п.22, где указанные области включают по меньшей мере одну АТ-богатую область и по меньшей мере одну область сайта связывания.
24. Конструкция MAR по п.22 или 23, где указанная конструкция MAR дополнительно содержит по меньшей мере часть по меньшей мере одной области сайта связывания, и где указанная по меньшей мере часть указанной по меньшей мере одной области сайта связывания возможно имеет происхождение из указанной идентифицированной последовательности MAR.
25. Конструкция MAR по п.22 или 23, где указанная идентифицированная последовательность MAR представляет собой человеческую или мышиную MAR.
26. Конструкция MAR по п.22 или 23, где указанные области идентифицированной последовательности MAR или ее частей имеют примерно 70% идентичности последовательности, примерно 80% идентичности последовательности, примерно 90% идентичности последовательности, примерно 95% идентичности последовательности или примерно 98% идентичности последовательности с областями встречающейся в природе человеческой 1_68 MAR или мышиной MAR S4 или их частями.
27. Конструкция MAR по п.22 или 23, где указанные области соответствуют парам оснований 1-1189, 1190-1952 и 1953-3600, соответственно, встречающейся в природе человеческой 1_68 MAR.
28. Конструкция MAR по п.22 или 23, где области представляют собой области специфичной последовательности.
29. Конструкция MAR, содержащая:
(а) внутреннюю нуклеотидную последовательность, содержащую
(i) по меньшей мере одну изолированную или синтетическую АТ-богатую область идентифицированной последовательности MAR; или
(П) по меньшей мере одну АТ-богатую область, имеющую по меньшей мере 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичности последовательности с АТ-богатой областью (а) (i),
(б) нуклеотидную последовательность, содержащую
по меньшей мере один сайт связывания ДНК-белок, прилежащий к указанной нуклеотидной последовательности (а), где указанный сайт связывания представляет собой
(i) сайт связывания ДНК-белок дополнительной идентифицированной последовательности MAR,
(ii) сайт связывания ДНК-белок идентифицированной последовательности MAR (а), где указанный сайт связывания ДНК-белок находится в идентифицированной последовательности MAR расположенным снаружи от внутренней нуклеотидной последовательности (а), либо
(iii) первый сайт связывания ДНК-белок, присутствующий во внутренней последовательности (а), но прилежащий по меньшей мере к одному дополнительному сайту связывания ДНК-белок, где первый и по меньшей мере один из указанных дополнительных сайтов связывания ДНК-белок не являются прилежащими к внутренней последовательности (а), либо
(iv) сайты связывания ДНК-белок последовательности, представляющей собой не MAR.
30. Конструкция MAR по п.29, где указанная конструкция усиливает экспрессию гена, оперативно сцепленного с промотором, примерно в 2, примерно в 3, примерно в 4, примерно в 5, примерно в 6, примерно в 7, примерно в 8, примерно в 9, примерно в 10 раз или более после введения указанной конструкции MAR в клетку.
31. Конструкция MAR по п.29, где указанная конструкция MAR имеет длину менее чем 500 нуклеотидов, предпочтительно менее чем примерно 250 нуклеотидов, даже более предпочтительно менее чем примерно 200, примерно 150 или примерно 100 нуклеотидов.
32. Конструкция MAR по п.29, указанная внутренняя нуклеиново-кислотная последовательность (а) содержит по меньшей мере один TFBS указанной идентифицированной MAR, где указанный по меньшей мере один TFBS фланкирует указанную АТ-богатую область в идентифицированной MAR с одной стороны или с двух сторон.
33. Конструкция MAR по п.29, где указанный по меньшей мере один сайт связывания ДНК-белок в (б) представляет собой TFBS и модифицирован 1, 2, 3, 4, 5 или большим количеством замен, добавлений и/или делеций и/или полностью или частично синтезирован.
34. Конструкция MAR по п.29, где указанный TFBS, который фланкирует указанную АТ-богатую область, модифицирован 1, 2, 3, 4, 5 или большим количеством замен, добавлений и/или делеций.
35. Конструкция MAR по п.33 или 34, где указанный TFBS представляет собой оптимизированный TFBS без известного природного прототипа.
36. Конструкция MAR по п.29, где указанные сайты связывания выбраны из группы, состоящей из SATB1, NMP4, НОХ, HOXF, Gsh, СЕВР, Fasti и SATB1 или комбинации двух или более чем двух из этих факторов транскрипции.
37. Конструкция MAR по п.29, где серия указанных сайтов связывания ДНК-связывающих белков (б) прилежит к указанной нуклеотидной последовательности (а).
38. Конструкция MAR по п.29, где указанная конструкция MAR представляет собой усиленную конструкцию MAR.
39. Экспрессионная система, содержащая
по меньшей мере одну конструкцию MAR по любому из предшествующих пунктов, и, возможно,
промотор и по меньшей мере один сайт связывания фермента рестрикции для встраивания интересующей нуклеотидной последовательности под контролем указанного промотора.
40. Клетка, содержащая экспрессионную систему по любому из предшествующих пунктов.
41. Трансгенное животное, отличное от человека, содержащее экспрессионную систему по любому из предшествующих пунктов.
42. Набор, содержащий:
экспрессионную систему по любому из предшествующих пунктов и инструкции по применению указанной экспрессионной системы.
43. Способ усиления экспрессии гена, при котором
получают экспрессионную систему, содержащую указанный ген под контролем промотора и конструкции MAR по любому из предшествующих пунктов;
трансфицируют клетку указанной экспрессионной системой, так что экспрессия указанного гена усиливается.
44. Способ по п.43, где указанная экспрессионная система дополнительно усиливает стабильность экспрессии указанного гена.
45. Применение конструкций MAR, экспрессионных систем, трансгенных животных, отличных от человека, наборов и/или способов по любому из предшествующих пунктов при продуцировании белков, таких как антитела, распознающие патогенные белки человека или белки клеточной поверхности человека, и белков, таких как эритропоэтин, интерфероны или другие терапевтические или диагностические белки.
46. Применение конструкций MAR, экспрессионных систем, трансгенных животных, отличных от человека, наборов и/или способов по любому из предшествующих пунктов при генотерапии in vitro и/или in vivo и/или при заместительной терапии клеток или тканей.
RU2009105699/10A 2006-08-23 2007-08-22 Экспрессионная система для повышения уровня экспрессии гена, молекула нуклеиновой кислоты, клетка, трансгенное животное и набор RU2469089C2 (ru)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US82331906P 2006-08-23 2006-08-23
US60/823,319 2006-08-23
US95391007P 2007-08-03 2007-08-03
US60/953,910 2007-08-03
PCT/IB2007/002404 WO2008023247A2 (en) 2006-08-23 2007-08-22 Matrix attachment regions (mars) for increasing transcription and uses thereof

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2009105699A true RU2009105699A (ru) 2010-09-27
RU2469089C2 RU2469089C2 (ru) 2012-12-10

Family

ID=38925516

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2009105699/10A RU2469089C2 (ru) 2006-08-23 2007-08-22 Экспрессионная система для повышения уровня экспрессии гена, молекула нуклеиновой кислоты, клетка, трансгенное животное и набор

Country Status (10)

Country Link
US (1) US20110061117A1 (ru)
EP (1) EP2061883A2 (ru)
JP (1) JP2010501170A (ru)
KR (1) KR20090053893A (ru)
AU (1) AU2007287327B2 (ru)
CA (1) CA2658775A1 (ru)
IL (1) IL197145A0 (ru)
RU (1) RU2469089C2 (ru)
SG (1) SG176501A1 (ru)
WO (1) WO2008023247A2 (ru)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2682884C2 (ru) * 2012-11-20 2019-03-22 Новартис Аг Оптимизированная экспрессионная кассета для экспрессии полипептида с высоким выходом

Families Citing this family (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IN2014DN02484A (ru) 2003-10-24 2015-05-15 Selexis Sa
US20110190482A1 (en) * 2008-06-10 2011-08-04 Avesthagen Limited Polymer encapsulated aluminum particulates
EP2362911A4 (en) * 2008-10-28 2012-07-18 Avesthagen Ltd EXPRESSION VECTOR AND METHOD THEREFORE
WO2012139195A1 (en) 2011-04-13 2012-10-18 National Research Council Of Canada EXPRESSION SYSTEM WITH SAR ELEMENT FROM IFNα2
US9879278B2 (en) 2012-03-05 2018-01-30 Wake Forest University Health Sciences Non-viral episomal suicide construct
KR20140015999A (ko) * 2012-07-27 2014-02-07 한화케미칼 주식회사 신규 ＭＡＲｓ 및 이를 이용하여 목적 단백질을 생산하는 방법
US9982027B2 (en) * 2013-10-22 2018-05-29 Lubris Llc Control of rheological properties of mixed hyaluronate/lubricin solutions
TW201522629A (zh) * 2013-10-24 2015-06-16 Medgenics Medical Israel Ltd 提供治療多肽之持續遞送的微器官及其使用方法
KR101591823B1 (ko) * 2013-12-27 2016-02-04 재단법인 목암생명공학연구소 증가된 유전자 발현능을 갖는 발현벡터
CN110343718A (zh) * 2018-04-03 2019-10-18 新乡医学院 一种高效稳定的细胞表达载体、表达系统及其制备方法、应用
EP4110798A1 (en) 2020-02-24 2023-01-04 Novartis AG Purification of recombinantly produced polypeptides
CN114891829B (zh) * 2022-05-24 2023-09-26 新乡医学院 一种肝特异性游离型表达载体和基因治疗载体及其应用

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA2256484A1 (en) * 1996-06-06 1997-12-11 Novartis Ag Vectors comprising sar elements
DE19848017A1 (de) * 1998-10-17 2000-04-20 Multigene Biotech Gmbh Episomal replizierender Vektor zur Expression eines Transgens in Säugerzellen
ATE279524T1 (de) * 1998-12-01 2004-10-15 Dow Agrosciences Llc Künstliche matrix-anheftungsregion zur erhöhung der expression von in pflanzen eingeführten genen
AU2002255995A1 (en) * 2001-03-30 2002-10-15 Avigenics, Inc. Avian lysozyme promoter
IN2014DN02484A (ru) * 2003-10-24 2015-05-15 Selexis Sa

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2682884C2 (ru) * 2012-11-20 2019-03-22 Новартис Аг Оптимизированная экспрессионная кассета для экспрессии полипептида с высоким выходом

Also Published As

Publication number Publication date
KR20090053893A (ko) 2009-05-28
JP2010501170A (ja) 2010-01-21
US20110061117A1 (en) 2011-03-10
RU2469089C2 (ru) 2012-12-10
SG176501A1 (en) 2011-12-29
WO2008023247A2 (en) 2008-02-28
EP2061883A2 (en) 2009-05-27
CA2658775A1 (en) 2008-02-28
AU2007287327B2 (en) 2012-11-22
IL197145A0 (en) 2011-08-01
AU2007287327A1 (en) 2008-02-28
WO2008023247A3 (en) 2008-05-08

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2009105699A (ru) Области присоединения матрикса (mar) для повышения транскрипции и их применение
ES2575223T3 (es) Ratones que expresan una cadena ligera con las regiones variable lambda humana y constante de ratón
RU2645475C2 (ru) Опосредованное нуклеазой нацеливание с большими нацеливающими векторами
EA201071323A1 (ru) Axmi-115, axmi-113, axmi-005, axmi-163, axmi-184 инсектицидные белки и способы их применения
EA201170980A1 (ru) Пестицидные белки и способы их применения
WO1994016092A1 (en) Method for producing tagged genes, transcripts, and proteins
US20020132290A1 (en) Coordinate cytokine regulatory sequences
CN102787125B (zh) 一种构建tale重复序列的方法
EA201200199A1 (ru) Семейство axmi-192 пестицидных генов и способы их применения
EA200701023A1 (ru) Отбор клеток-хозяев, экспрессирующих белок на высоких уровнях
CN108070035B (zh) 可诱导性遗传重组酶系统CrexER
EA201170685A1 (ru) Гены, кодирущие токсины нематод
CN102653756B (zh) 一种定向改造动物基因组特定基因的方法及其应用
WO2009150222A3 (en) Improved protein expression system
RU2377248C2 (ru) Устойчивые к грибкам растения и их использование
RU2009130108A (ru) Секретируемая люцифераза mluc7 и ее применение
KR101796306B1 (ko) 말전복 탐지용 마이크로새틀라이트 마커 및 이를 이용한 말전복 탐지 방법
DE60026733D1 (de) Histone-deacetylase-8 proteine, nukleinsäuren und methoden zur verwendung
FI3687287T3 (fi) Humanisoitua c1q-kompleksia ilmentävät jyrsijät
CN112280800B (zh) 一种构建体及其在制备动物衰老细胞示踪和衰老细胞清除药物中的应用
Zelnick et al. A composite transposon 3′ to the cow fetal globin gene binds a sequence specific factor
CN103272221B (zh) Wsb-1蛋白在制备治疗骨肉瘤药物中的应用
CN115851666B (zh) 新型Cas酶和系统以及应用
Loots et al. Interrogating transcriptional regulatory sequences in Tol2-mediated Xenopus transgenics
JP2010124782A (ja) 線虫を用いたタンパク質の生産方法

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20130823