RU2008107150A - Способ и система для сворачивания белка ин витро - Google Patents

Способ и система для сворачивания белка ин витро Download PDF

Info

Publication number
RU2008107150A
RU2008107150A RU2008107150/13A RU2008107150A RU2008107150A RU 2008107150 A RU2008107150 A RU 2008107150A RU 2008107150/13 A RU2008107150/13 A RU 2008107150/13A RU 2008107150 A RU2008107150 A RU 2008107150A RU 2008107150 A RU2008107150 A RU 2008107150A
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
protein
static mixer
mixing
mixture
static
Prior art date
Application number
RU2008107150/13A
Other languages
English (en)
Inventor
ДЖОН Ричард СТ. (US)
ДЖОН Ричард СТ.
Джеффри ЛЮК (US)
Джеффри ЛЮК
Тукдоан ЛИ (US)
Тукдоан ЛИ
Original Assignee
Новартис Аг, (Ch)
Новартис АГ,
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Новартис Аг, (Ch), Новартис АГ, filed Critical Новартис Аг, (Ch)
Publication of RU2008107150A publication Critical patent/RU2008107150A/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
    • C07K1/107—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length by chemical modification of precursor peptides
    • C07K1/113—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length by chemical modification of precursor peptides without change of the primary structure
    • C07K1/1136—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length by chemical modification of precursor peptides without change of the primary structure by reversible modification of the secondary, tertiary or quarternary structure, e.g. using denaturating or stabilising agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
    • C07K1/107—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length by chemical modification of precursor peptides
    • C07K1/113—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length by chemical modification of precursor peptides without change of the primary structure
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/52—Cytokines; Lymphokines; Interferons
    • C07K14/555—Interferons [IFN]
    • C07K14/565—IFN-beta
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/24—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2)
    • C12N9/2402—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2) hydrolysing O- and S- glycosyl compounds (3.2.1)
    • C12N9/2462—Lysozyme (3.2.1.17)

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

1. Способ сворачивания белка, содержащий: ! введение концентрированного раствора денатурированного белка; и ! статическое перемешивание денатурированного белка со сворачивающим растворителем для получения смеси, содержащей сворачиваемый белок. ! 2. Способ по п.1, отличающийся тем, что белок является рекомбинантным белком, полученным микробным способом. ! 3. Способ по п.2, отличающийся тем, что раствор денатурированного белка получается отделением белка от микробного носителя и его обработкой денатурирующим реагентом. ! 4. Способ по п.1, отличающийся тем, что сворачивающий растворитель является буфером, в котором растворим белок. ! 5. Способ по п.4, отличающийся тем, что статическое перемешивание производится в статическом смесителе, содержащем серию перемешивающих элементов в трубопроводе. ! 6. Способ по п.5, отличающийся тем, что раствор белка вводится в поток сворачивающего растворителя в трубопроводе непосредственно перед тем, как поток достигает перемешивающих элементов статического смесителя. ! 7. Способ по п.1, отличающийся тем, что смесь после статического перемешивания поступает в камеру динамического перемешивания. ! 8. Способ по п.7, отличающийся тем, что смесь динамически перемешивается в камере динамического перемешивания. ! 9. Способ по п.1, отличающийся тем, что свернутый белок получается с выходом готового продукта больше, чем 75% мономера, менее чем за 1 ч. ! 10. Способ по п.9, отличающийся тем, что свернутый белок получается с выходом готового продукта больше, чем 95%. ! 11. Способ по п.10, отличающийся тем, что свернутый белок получается за время, меньшее 30 мин. ! 12. Способ по п.11, отличающийся тем, что свернутый белок полу

Claims (39)

1. Способ сворачивания белка, содержащий:
введение концентрированного раствора денатурированного белка; и
статическое перемешивание денатурированного белка со сворачивающим растворителем для получения смеси, содержащей сворачиваемый белок.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что белок является рекомбинантным белком, полученным микробным способом.
3. Способ по п.2, отличающийся тем, что раствор денатурированного белка получается отделением белка от микробного носителя и его обработкой денатурирующим реагентом.
4. Способ по п.1, отличающийся тем, что сворачивающий растворитель является буфером, в котором растворим белок.
5. Способ по п.4, отличающийся тем, что статическое перемешивание производится в статическом смесителе, содержащем серию перемешивающих элементов в трубопроводе.
6. Способ по п.5, отличающийся тем, что раствор белка вводится в поток сворачивающего растворителя в трубопроводе непосредственно перед тем, как поток достигает перемешивающих элементов статического смесителя.
7. Способ по п.1, отличающийся тем, что смесь после статического перемешивания поступает в камеру динамического перемешивания.
8. Способ по п.7, отличающийся тем, что смесь динамически перемешивается в камере динамического перемешивания.
9. Способ по п.1, отличающийся тем, что свернутый белок получается с выходом готового продукта больше, чем 75% мономера, менее чем за 1 ч.
10. Способ по п.9, отличающийся тем, что свернутый белок получается с выходом готового продукта больше, чем 95%.
11. Способ по п.10, отличающийся тем, что свернутый белок получается за время, меньшее 30 мин.
12. Способ по п.11, отличающийся тем, что свернутый белок получается за время меньше, чем 5 мин.
13. Способ по п.4, отличающийся тем, что концентрация денатурирующего реагента в растворе белка составляет по меньшей мере 3М.
14. Способ по п.1, отличающийся тем, что растворение является по меньшей мере десятикратным.
15. Способ по п.14, отличающийся тем, что растворение является приблизительно шестидесятикратным.
16. Способ по п.1, отличающийся тем, что температура во время перемешивания находится приблизительно между 2 и 30°С.
17. Способ по п.1, отличающийся тем, что температура во время перемешивания составляет около 4°С.
18. Способ по п.1, отличающийся тем, что концентрация белка во время перемешивания составляет менее чем 0,2 мг/мл.
19. Способ по п.18, отличающийся тем, что концентрация белка во время перемешивания составляет около 0,1 мг/мл.
20. Способ по п.1, отличающийся тем, что скорость потока смеси выбирается такой, чтобы статический смеситель имел число Рейнольдса приблизительно от 200 до 7000.
21. Способ по п.1, отличающийся тем, что объем смеси больше, чем 10 л.
22. Способ по п.1, отличающийся тем, что объем смеси больше, чем 100 л.
23. Способ по п.1, отличающийся тем, что объем смеси больше, чем 1000 л.
24. Способ по п.1, отличающийся тем, что белок имеет одну или более внутримолекулярных дисульфидных связей в его нативной форме.
25. Способ по п.24, отличающийся тем, что белок имеет одну внутримолекулярную дисульфидную связь в его нативной форме.
26. Способ по п.25, отличающийся тем, что белком является Интерферон β.
27. Способ по п.26, отличающийся тем, что белком является Интерферон β-1b.
28. Способ по п.27, отличающийся тем, что раствор белка содержит НА-свободный Интерферон β.
29. Способ по п.1, отличающийся тем, что свернутый белок является биологически активным.
30. Способ по п.1, отличающийся тем, что смесь содержит также наполнители, воспринимаемые обычно как безопасные ингредиенты терапевтического состава активного белка.
31. Способ по п.30, отличающийся тем, что наполнители содержат трегалозу.
32. Способ по п.31, отличающийся тем, что раствор белка содержит 0,1 мг/мл НА-свободного Интерферона β-1b в 2 мМ аспарагиновой кислоты при рН около 4, а наполнители содержат 9% трегалозы.
33. Система для восстановления свернутого белка из раствора, содержащая:
статический смеситель;
трубопровод, соосный с входящим потоком статического смесителя; и
подводящий канал к входящему потоку трубопровода статического смесителя.
34. Система по п.33, содержащая также:
источник сворачивающего растворителя, сконфигурированный для подвода к входящему потоку статического смесителя; и
источник концентрированного денатурированного белка, сконфигурированный для подвода к трубопроводу через входящий поток подводящего канала статического смесителя.
35. Система по п.34, отличающаяся тем, что статический смеситель содержит в трубопроводе несколько неподвижных перемешивающих элементов, подвижных перемешивающих элементов или их комбинацию.
36. Система по п.35, отличающаяся тем, что трубопровод статического смесителя имеет диаметр не более чем 2 дюйма.
37. Система по п.36, отличающаяся тем, что трубопровод статического смесителя имеет диаметр около 3/4 дюйма.
38. Система по п.35, отличающаяся тем, что статический смеситель имеет неподвижные элементы.
39. Система по п.33, содержащая также камеру динамического перемешивания в нисходящем потоке статического смесителя.
RU2008107150/13A 2005-07-29 2006-07-28 Способ и система для сворачивания белка ин витро RU2008107150A (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US70364705P 2005-07-29 2005-07-29
US60/703,647 2005-07-29

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2008107150A true RU2008107150A (ru) 2009-09-10

Family

ID=37102983

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2008107150/13A RU2008107150A (ru) 2005-07-29 2006-07-28 Способ и система для сворачивания белка ин витро

Country Status (11)

Country Link
US (2) US20070027305A1 (ru)
EP (1) EP1910413A1 (ru)
JP (1) JP2009502173A (ru)
KR (1) KR20080040674A (ru)
CN (1) CN101233152A (ru)
AU (1) AU2006275800A1 (ru)
BR (1) BRPI0614440A2 (ru)
CA (1) CA2617029A1 (ru)
MX (1) MX2008001396A (ru)
RU (1) RU2008107150A (ru)
WO (1) WO2007016272A1 (ru)

Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8067201B2 (en) * 2009-04-17 2011-11-29 Bristol-Myers Squibb Company Methods for protein refolding
US7932356B1 (en) * 2010-06-23 2011-04-26 Bing Lou Wong Method for the preparation of a heat stable oxygen carrier-containing pharmaceutical composition
DE102012016210A1 (de) * 2012-08-16 2014-02-20 Fresenius Medical Care Deutschland Gmbh T-Stück rnit Turbulenzerzeugung
CN106243186B (zh) * 2015-06-15 2020-12-25 张鹏 可独立用于蛋白质复性或作为蛋白质复性前导操作的循环运作方法
ES2798763T3 (es) 2015-11-09 2020-12-14 Biological E Ltd Procedimiento escalable industrialmente para recuperar proteínas transportadoras recombinantes biológicamente activas
EP3878856A4 (en) * 2018-11-05 2022-07-13 Ajinomoto Co., Inc. METHOD OF PRODUCTION OF A REFOLDED PROTEIN USING A FLOW MICROREACTOR AND PROTEIN REFOLDING DEVICE

Family Cites Families (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4588585A (en) * 1982-10-19 1986-05-13 Cetus Corporation Human recombinant cysteine depleted interferon-β muteins
US4737462A (en) * 1982-10-19 1988-04-12 Cetus Corporation Structural genes, plasmids and transformed cells for producing cysteine depleted muteins of interferon-β
US4959314A (en) * 1984-11-09 1990-09-25 Cetus Corporation Cysteine-depleted muteins of biologically active proteins
US4961969A (en) * 1987-05-11 1990-10-09 Cetus Corporation Process for recovering microbially produced interferon-β
US5288931A (en) * 1991-12-06 1994-02-22 Genentech, Inc. Method for refolding insoluble, misfolded insulin-like growth factor-I into an active conformation
US5837529A (en) * 1994-10-17 1998-11-17 Genzyme Corporation Method for lysing cells
US6004025A (en) * 1997-05-16 1999-12-21 Life Technologies, Inc. Automated liquid manufacturing system
US7544354B2 (en) * 2000-10-27 2009-06-09 Novartis Vaccines And Diagnostics Methods of protein purification and recovery
UY27373A1 (es) * 2001-07-09 2003-02-28 Schering Ag Formulaciones de interferón beta-humano
GB0123114D0 (en) * 2001-09-26 2001-11-14 Accentus Plc Protein production

Also Published As

Publication number Publication date
KR20080040674A (ko) 2008-05-08
US20070027305A1 (en) 2007-02-01
CN101233152A (zh) 2008-07-30
BRPI0614440A2 (pt) 2011-03-29
MX2008001396A (es) 2008-04-16
CA2617029A1 (en) 2007-02-08
EP1910413A1 (en) 2008-04-16
JP2009502173A (ja) 2009-01-29
AU2006275800A1 (en) 2007-02-08
US20090054628A1 (en) 2009-02-26
WO2007016272A1 (en) 2007-02-08

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP6812403B2 (ja) 標的化剤としてのＧｌａドメイン
RU2008107150A (ru) Способ и система для сворачивания белка ин витро
CN102007140B (zh) 生物活性肽
JP6387019B2 (ja) ジケトピペラジンおよびジケトピペラジン含有組成物を生産するための方法
CN106604741A (zh) 酶法制备同质的抗体‑药物缀合物
CN1046097A (zh) 喷雾胶凝基质和应用该基质的喷雾胶凝剂
RU2009141987A (ru) Композиции прокариотической фенилаланин-аммиак-лиазы и способы лечения рака с использованием таких композиций
CN102639144A (zh) 长效凝固因子及产生其的方法
CN103930134A (zh) 长效促黄体激素(lh)化合物
CN102575244A (zh) 抗生物素蛋白与生物素衍生物的解离方法以及解离剂
CN1174508A (zh) 子宫内膜功能或相关功能的改善
EP3400241A1 (en) Modulation of afucosylated species in a monoclonal antibody composition
CN104593319B (zh) 一种用于细胞培养基的小麦活性肽添加剂
CN1853730A (zh) 用于治疗癌症的修饰细胞因子
Ogunnaike et al. Bovine mammary alveolar MAC-T cells afford a tool for studies of bovine milk exosomes in drug delivery
CN104593318B (zh) 一种用于细胞培养基的玉米活性肽添加剂
CN1404486A (zh) 纯化的黄体生成激素
CN104558150A (zh) 一类新型生长激素释放激素类似肽及其在制备治疗不孕不育药物中的应用
CN104248651A (zh) 一种原料为鹿骨和甜瓜子的药物组合物
CN103372202B (zh) 一种含有乳蛋白和脂肪酸的组合物及其制备方法与应用
JP2005516043A5 (ru)
CN1876677A (zh) 新型lhrh拮抗剂,其制备方法和药物用途
CN111574583B (zh) 蛋白复性试剂及其应用
CN104248652A (zh) 一种鹿瓜多肽注射制剂的制备方法
US20110200737A1 (en) Composition to enhance cognitive activity

Legal Events

Date Code Title Description
FA93 Acknowledgement of application withdrawn (no request for examination)

Effective date: 20100701