RU2007123606A

RU2007123606A - Способ выращивания бактерий для доставки биологически активных соединений в кишечный тракт жвачных животных

Info

Publication number: RU2007123606A
Application number: RU2007123606/13A
Authority: RU
Inventors: Лайл М. РОУД (CA); Лайл М. РОУД; Джеймс К. НЬЮБОЛД (GB); Джеймс К. НЬЮБОЛД
Original assignee: Сейдж Байосайенсиз Инк. (Ca); Сейдж Байосайенсиз Инк.
Priority date: 2004-12-06
Filing date: 2005-12-06
Publication date: 2009-01-27
Also published as: EP1831349B1; DK1831349T3; EP1831349A2; AU2005328193B2; RU2416636C2; ATE525457T1; WO2006090212A2; JP2008522609A; BRPI0518845A2; US20080118472A1; EP2311937A1; AU2005328193A1; CA2590719A1; NZ555789A; CN101072864A; WO2006090212A3

Claims

1. Способ увеличения устойчивости к инактивации в рубце продуцирующего лизин грамположительного бактериального штамма, включающий стадии

выращивания культуры этого бактериального штамма посредством по меньшей мере одного пассажа в среде для выращивания, содержащей количество лизоцима, эффективное для индукции роста клеточных стенок бактерий, устойчивых к протозойному поглощению; и

выделения этого бактериального штамма из содержащей лизоцим среды.

2. Способ по п.1, где указанным бактериальным штаммом является штамм Corynebacterium glutamicum.

3. Способ по п.2, где указанным штаммом Corynebacterium glutamicum является штамм АТСС, выбранный из группы, состоящей из 13058, 13825, 14066, 14067, 14068, 21127 и 700239.

4. Способ по п.2, где указанный штамм Corynebacterium glutamicum сверхпродуцирует лизин.

5. Способ по п.4, где указанный штамм Corynebacterium glutamicum генетически модифицирован для сверхпродуцирования лизина.

6. Способ по п.1, где концентрация лизоцима в указанной среде для выращивания находится в диапазоне от приблизительно 0,01 до приблизительно 100 мкг/мл.

7. Способ по п.6, где указанная концентрация лизоцима находится в диапазоне от приблизительно 0,1 до приблизительно 10 мкг/мл.

8. Способ по п.1, где используют множество пассажей в содержащей лизоцим среде для выращивания.

9. Способ по п.8, где используют от приблизительно 2 до приблизительно 10 пассажей.

10. Защищенная от воздействия рубца лизиновая кормовая добавка, содержащая продуцирующий лизин бактериальный штамм, выращенный посредством способа по п.1.

11. Защищенная от воздействия рубца лизиновая кормовая добавка по п.10, где указанным бактериальным штаммом является штамм Corynebacterium glutamicum.

12. Защищенная от воздействия рубца лизиновая кормовая добавка по п.11, где указанный штамм Corynebacterium glutamicum сверхпродуцирует лизин.

13. Защищенная от воздействия рубца лизиновая кормовая добавка по п.12, где указанный штамм Corynebacterium glutamicum генетически модифицирован для сверхпродуцирования лизина.

14. Защищенная от воздействия рубца лизиновая кормовая добавка по п.10, где указанный бактериальный штамм имеет скорость деградации в рубце меньшую, чем приблизительно 8% в час, как измерено по высвобождению ¹⁴С-меченого лейцина в соответствии со способом Wallace et al.

15. Защищенная от воздействия рубца лизиновая кормовая добавка по п.14, где указанная скорость деградации является меньшей, чем приблизительно 6% в час.

16. Защищенная от воздействия рубца лизиновая кормовая добавка, содержащая продуцирующий лизин бактериальный штамм, имеющий скорость деградации в рубце, меньшую, чем приблизительно 8% в час, как измерено по высвобождению ¹⁴С-меченого лейцина в соответствии со способом Wallace et al.

17. Защищенная от воздействия рубца лизиновая кормовая добавка по п.14 или 16, где скорость деградации в рубце является такой, что более чем 20% дозы бактерий, скармливаемой жвачному животному в день, доставляется через ретикуло-рубец в интактном виде.

18. Защищенная от воздействия рубца лизиновая кормовая добавка по п.14 или 16, где указанным бактериальным штаммом является штамм Corynebacterium glutamicum АТСС, выбранный из группы, состоящей из 13058, 13825, 14066, 14067, 14068, 21127 и 700239.

19. Способ увеличения метаболически доступного содержания лизина в кормовом рационе жвачных животных, включающий добавление в указанный кормовой рацион эффективного количества защищенной от воздействия рубца лизиновой кормовой добавки по п.10 или 16.

20. Способ по п.19, где указанную кормовую добавку добавляют в указанный кормовой рацион в количестве, эффективном для обеспечения от приблизительно 5 до приблизительно 150 мг метаболически доступного лизина на кг массы тела жвачного животного.

21. Способ по п.19, где указанным жвачным животным является молочная корова.

22. Способ in vitro для оценки устойчивости продуцирующего лизин бактериального штамма к инактивации в рубце in vivo, включающий стадии

культивирования in vitro грамположительного продуцирующего лизин бактериального штамма в питательной среде, содержащей натуральную или синтетическую жидкость рубца; и

измерения деградации белка в этой бактериальной культуре как функции времени.

23. Способ по п.22, где указанным бактериальным штаммом является штамм Corynebacterium glutamicum.

24. Способ по п.23, где указанным штаммом Corynebacterium glutamicum является штамм АТСС, выбранный из группы, состоящей из 13058, 13825, 14066, 14067, 14068, 21127 и 700239.

25. Способ по п.23, где указанный штамм Corynebacterium glutamicum сверхпродуцирует лизин.

26. Способ по п.25, где указанный штамм Corynebacterium glutamicum генетически модифицирован для сверхпродуцирования лизина.

27. Способ по п.22, где указанная стадия измерения деградации белка предусматривает измерение высвобождения ¹⁴С-меченого лейцина в соответствии со способом Wallace et al.

28. Способ по п.22, где указанный способ дополнительно включает стадию идентификации в качестве устойчивых к инактивации в рубце бактериальных штаммов, имеющих скорость деградации меньшую, чем 8% в час.

29. Способ по п.22, где указанной жидкостью рубца является натуральная жидкость рубца.

30. Способ по п.22, где указанной жидкостью рубца является синтетическая жидкость рубца.

31. Способ по п.28, где указанный способ дополнительно включает стадию идентификации в качестве устойчивых к инактивации в рубце бактериальных штаммов, имеющих такую скорость деградации в рубце, что более чем 20% дозы бактерий, скармливаемой жвачному животному в день, доставляется через ретикуло-рубец в интактном виде.

32. Способ по п.31, где идентифицированные штаммы имеют такую скорость деградации, что более чем 50% указанной дозы доставляются в интактном виде.