Claims (73)
1. Способ культивирования цирковируса свиней типа 1, включающий в себя:1. A method of cultivating circovirus pigs type 1, including:
a) получение клеток млекопитающего, экспрессирующих функцию Е1 аденовируса млекопитающего, причем указанные клетки являются пермиссивными для репликации цирковируса свиней типа 1;a) obtaining mammalian cells expressing the E1 function of a mammalian adenovirus, said cells being permissive for replication of type 1 pig circovirus;
b) введение генома цирковируса свиней типа 1 или его части, способной реплицироваться, в указанные клетки млекопитающего; иb) the introduction of the genome of the circovirus pig type 1 or part thereof, capable of replicating, in these mammalian cells; and
c) культивирование указанных клеток млекопитающего в условиях, пригодных для репликации указанного цирковируса свиней типа 1.c) culturing said mammalian cells under conditions suitable for replication of said pig type 1 circovirus.
2. Способ по п.1, дополнительно включающий в себя извлечение указанного цирковируса свиней типа 1 из указанных культивируемых клеток.2. The method according to claim 1, further comprising extracting said pig circovirus type 1 from said cultured cells.
3. Способ по п.1, где указанные клетки млекопитающего происходят от свиньи.3. The method of claim 1, wherein said mammalian cells are derived from a pig.
4. Способ по п.1, где указанными клетками млекопитающего являются клетки сетчатки свиньи.4. The method of claim 1, wherein said mammalian cells are pig retinal cells.
5. Способ по п.1, где указанной функцией Е1 аденовируса млекопитающего является Е1 функция аденовируса человека.5. The method according to claim 1, where the specified function E1 of a mammalian adenovirus is the E1 function of human adenovirus.
6. Способ по п.1, где указанной функцией Е1 аденовируса млекопитающего является функция Е1 аденовируса свиней.6. The method according to claim 1, wherein said mammalian adenovirus E1 function is swine adenovirus E1 function.
7. Способ по п.1, где указанные клетки млекопитающего, экспрессирующие функцию Е1 аденовируса млекопитающего, стабильно трансформированы последовательностью гена Е1 аденовируса млекопитающего.7. The method according to claim 1, where these mammalian cells expressing the E1 function of a mammalian adenovirus are stably transformed by the sequence of the E1 gene of a mammalian adenovirus.
8. Способ по п.7, где указанной последовательностью гена Е1 является последовательность гена Е1 аденовируса человека.8. The method according to claim 7, where the specified sequence of the E1 gene is the sequence of the E1 gene of human adenovirus.
9. Способ по п.7, где указанная последовательность гена Е1 является гетерологичной по отношению к указанной клетке млекопитающего.9. The method of claim 7, wherein said E1 gene sequence is heterologous with respect to said mammalian cell.
10. Способ по п.1, где указанной функцией Е1 является функция Е1А и/или Е1В.10. The method according to claim 1, where the specified function E1 is a function E1A and / or E1B.
11. Способ по п.1, где указанный цирковирус свиней типа 1 содержит химерную нуклеотидную последовательность.11. The method according to claim 1, where the specified pig circovirus type 1 contains a chimeric nucleotide sequence.
12. Рекомбинантная клетка млекопитающего, которая экспрессирует функцию Е1 аденовируса млекопитающего и содержит геном цирковируса свиней типа 1 или его часть, способную к репликации, причем указанная клетка является пермиссивной для репликации указанного цирковируса свиней типа 1.12. A recombinant mammalian cell that expresses the E1 function of a mammalian adenovirus and contains the type 1 pig circovirus genome or a part thereof capable of replication, said cell being permissive for replication of said type 1 pig circovirus.
13. Рекомбинантная клетка млекопитающего по п.12, где указанной функцией Е1 аденовируса является функция Е1 аденовируса человека.13. The recombinant mammalian cell of claim 12, wherein said E1 function of adenovirus is human E1 function of adenovirus.
14. Рекомбинантная клетка млекопитающего по п.12, где указанной функцией Е1 ад еновируса является функция Е1 аденовируса свиней.14. The recombinant mammalian cell of claim 12, wherein said function of E1 adenovirus is the E1 function of pig adenovirus.
15. Рекомбинантная клетка млекопитающего по п.12, где указанная клетка происходит от свиньи.15. The recombinant mammalian cell of claim 12, wherein said cell is derived from a pig.
16. Рекомбинантная клетка млекопитающего по п.15, где указанной клеткой является клетка сетчатки свиньи.16. The recombinant mammalian cell of claim 15, wherein said cell is a pig retinal cell.
17. Рекомбинантная клетка млекопитающего по п.12, где клетка млекопитающего, экспрессирующая функцию Е1 аденовируса млекопитающего, стабильно трансформирована последовательностью гена Е1 аденовируса млекопитающего.17. The recombinant mammalian cell of claim 12, wherein the mammalian cell expressing the E1 function of the mammalian adenovirus is stably transformed with the sequence of the E1 gene of the mammalian adenovirus.
18. Рекомбинантная клетка млекопитающего по п.17, где указанной последовательностью гена Е1 является последовательность гена Е1 аденовируса человека.18. The recombinant mammalian cell of claim 17, wherein said E1 gene sequence is a human adenovirus E1 gene sequence.
19. Рекомбинантная клетка млекопитающего по п.17, где указанная последовательность гена Е1 аденовируса млекопитающего является гетерологичной по отношению к указанной клетке млекопитающего.19. The recombinant mammalian cell according to claim 17, wherein said mammalian adenovirus E1 gene sequence is heterologous with respect to said mammalian cell.
20. Рекомбинантная клетка млекопитающего, которая экспрессирует функцию Е1 аденовируса млекопитающего и содержит геном цирковируса млекопитающего или его часть, способную к репликации, причем указанная клетка является пермиссивной для репликации указанного цирковируса млекопитающего.20. A recombinant mammalian cell that expresses the mammalian adenovirus E1 function and contains the mammalian circovirus genome or a portion thereof capable of replication, said cell being permissive for replication of said mammalian circovirus.
21. Способ получения рекомбинантной клетки млекопитающего, содержащей функцию Е1 аденовируса млекопитающего и геном цирковируса свиней типа 1, предусматривающий стадии: а) получения клетки млекопитающего, экспрессирующей функцию Е1 аденовируса млекопитающего, и b) введения указанного генома цирковируса свиней типа 1 или его части, способной реплицироваться, в эту клетку млекопитающего.21. A method of producing a recombinant mammalian cell containing the E1 function of a mammalian adenovirus and a pig type 1 circovirus gene, comprising the steps of: a) obtaining a mammalian cell expressing the mammalian adenovirus E1 function, and b) introducing the said type 1 pig circovirus genome or part thereof, capable of replicate into this mammalian cell.
22. Способ по п.21, дополнительно включающий в себя стадию культивирования указанной клетки млекопитающего в условиях, пригодных для репликации указанного цирковируса свиней типа 1.22. The method of claim 21, further comprising the step of culturing said mammalian cell under conditions suitable for replication of said type 1 pig circovirus.
23. Способ по п.22, дополнительно включающий в себя стадию извлечения указанного цирковируса типа 1 из указанных культивируемых клеток.23. The method according to item 22, further comprising the step of extracting said circovirus type 1 from said cultured cells.
24. Способ по п.21, где указанные клетки млекопитающего происходят от свиньи.24. The method of claim 21, wherein said mammalian cells are derived from a pig.
25. Способ по п.24, где указанные клетки млекопитающего являются клетками сетчатки свиньи.25. The method of claim 24, wherein said mammalian cells are pig retinal cells.
26. Способ по п.21, где указанной функцией Е1 аденовируса является функция Е1 аденовируса человека.26. The method according to item 21, where the specified function E1 of adenovirus is the function E1 of human adenovirus.
27. Способ по п.21, где указанной функцией Е1 аденовируса является функция Е1 аденовируса свиней.27. The method according to item 21, where the specified function E1 of adenovirus is the function of E1 of pig adenovirus.
28. Способ по п.21, где указанный цирковирус свиней типа 1 содержит химерную нуклеотидную последовательность.28. The method according to item 21, where the specified pig circovirus type 1 contains a chimeric nucleotide sequence.
29. Способ по п.21, где указанная клетка млекопитающего, содержащая функцию Е1 аденовируса млекопитающего, стабильно трансформирована последовательностью гена Е1 аденовируса млекопитающего.29. The method of claim 21, wherein said mammalian cell comprising the mammalian adenovirus E1 function is stably transformed by the sequence of the mammalian adenovirus E1 gene.
30. Способ по п.29, где указанная последовательность гена Е1 аденовируса млекопитающего является гетерологичной по отношению к указанной клетке млекопитающего.30. The method according to clause 29, where the specified sequence of the E1 gene of the mammalian adenovirus is heterologous with respect to the specified mammalian cell.
31. Способ по п.21, где указанной функцией Е1 является функция Е1А и/или Е1В.31. The method according to item 21, where the specified function E1 is a function E1A and / or E1B.
32. Способ репликации цирковируса млекопитающего типа 1, включающий культивирование клетки млекопитающего, содержащей геном цирковируса свиней типа 1 или его часть, способную к репликации, в условиях, пригодных для репликации указанного цирковируса свиней типа 1, где клетка млекопитающего экспрессирует функциональный белок Е1 аденовируса млекопитающего и является пермиссивной для репликации цирковируса свиней типа 1, и при необходимости извлечение указанного цирковируса свиней типа 1 из культивированной клетки.32. A method of replicating a mammalian type 1 circovirus, comprising culturing a mammalian cell containing the pig type 1 circovirus genome or a part thereof capable of replication under conditions suitable for replication of said type 1 pig circovirus, wherein the mammalian cell expresses the mammalian adenovirus functional protein E1 and is permissive for the replication of circulatory virus of pigs of type 1, and, if necessary, the extraction of the specified circovirus of pigs of type 1 from the cultured cell.
33. Способ по п.32, где указанная клетка млекопитающего происходит от свиньи.33. The method of claim 32, wherein said mammalian cell is derived from a pig.
34. Способ по п.33, где указанной клеткой млекопитающего является клетка сетчатки свиньи.34. The method of claim 33, wherein said mammalian cell is a pig retinal cell.
35. Способ по п.32, где указанным функциональным белком Е1 аденовируса млекопитающего является функциональный белок Е1 аденовируса человека.35. The method according to p, where the specified functional protein E1 of a mammalian adenovirus is a functional protein E1 of human adenovirus.
36. Способ по п.32, где указанным функциональным белком Е1.аденовируса млекопитающего является функциональный белок Е1 аденовируса свиней.36. The method according to p, where the specified functional protein E1.denovirus of a mammal is a functional protein E1 of porcine adenovirus.
37. Способ по п.32, где указанная клетка млекопитающего, экспрессирующая функциональный белок Е1 аденовируса млекопитающего, стабильно трансформирована последовательностью гена Е1 аденовируса млекопитающего.37. The method of claim 32, wherein said mammalian cell expressing the mammalian adenovirus functional E1 protein is stably transformed with the mammalian adenovirus E1 gene sequence.
38. Способ по п.37, где указанной последовательностью гена Е1 является последовательность гена Е1 аденовируса человека.38. The method according to clause 37, where the specified sequence of the E1 gene is the sequence of the E1 gene of human adenovirus.
39. Способ по п.37, где указанная последовательность гена Е1 аденовируса млекопитающего является гетерологичной по отношению к указанной клетке млекопитающего.39. The method according to clause 37, where the specified sequence of the E1 gene of the adenovirus of a mammal is heterologous with respect to the specified cell of the mammal.
40. Способ по п.32, где указанным функциональным белком Е1 является функциональный белок Е1А и/или Е1В.40. The method according to p, where the specified functional protein E1 is a functional protein E1A and / or E1B.
41. Способ по п.32, где указанный цирковирус свиней типа 1 содержит химерную нуклеотидную последовательность.41. The method according to p, where the specified pig circovirus type 1 contains a chimeric nucleotide sequence.
42. Способ получения рекомбинантной клетки млекопитающего, включающий введение генома цирковируса свиней типа 1 или его части, способной к репликации, в клетку млекопитающего, которая экспрессирует функциональный белок Е1 аденовируса млекопитающего, где клетка является пермиссивной для репликации цирковируса свиней типа 1.42. A method for producing a recombinant mammalian cell, comprising introducing the replication type 1 pig circovirus genome or a portion thereof capable of replication into a mammalian cell that expresses the mammalian adenovirus functional E1 protein, where the cell is permissive for replicating pig type 1 circovirus.
43. Способ по п.42, дополнительно включающий в себя стадию культивирования указанной рекомбинантной клетки млекопитающего в условиях, пригодных для репликации указанного цирковируса свиней типа 1.43. The method according to § 42, further comprising the step of culturing said recombinant mammalian cell under conditions suitable for replication of said type 1 pig circovirus.
44. Способ по п.43, дополнительно включающий в себя стадию извлечения указанного цирковируса свиней типа 1 из указанной культивированной клетки.44. The method according to item 43, further comprising the stage of extraction of the specified pig circovirus type 1 from the specified cultured cells.
45. Способ по п.42, где указанная клетка млекопитающего происходит от свиньи.45. The method of claim 42, wherein said mammalian cell is derived from a pig.
46. Способ по п.45, где указанной клеткой млекопитающего является клетка сетчатки свиньи.46. The method of claim 45, wherein said mammalian cell is a pig retinal cell.
47. Способ по п.42, где указанным функциональным белком Е1 аденовируса млекопитающего является функциональный белок Е1 аденовируса человека.47. The method according to § 42, where the specified functional protein E1 of a mammalian adenovirus is a functional protein E1 of human adenovirus.
48. Способ по п.42, где указанным функциональным белком Е1 аденовируса млекопитающего является функциональный белок Е1 аденовируса свиньи.48. The method according to § 42, where the specified functional protein E1 of a mammalian adenovirus is a functional protein E1 of porcine adenovirus.
49. Способ по п.42, где указанный цирковирус свиней типа 1 содержит химерную нуклеотидную последовательность.49. The method according to § 42, where the specified pig circovirus type 1 contains a chimeric nucleotide sequence.
50. Способ по п.42, где указанная клетка млекопитающего стабильно трансформирована последовательностью гена Е1 аденовируса млекопитающего.50. The method according to § 42, where the specified mammalian cell is stably transformed by the sequence of the E1 gene of a mammalian adenovirus.
51. Способ по п.42, где указанная последовательность гена Е1 аденовируса млекопитающего является гетерологичной по отношению к указанной клетке млекопитающего.51. The method of claim 42, wherein said mammalian adenovirus E1 gene sequence is heterologous to said mammalian cell.
52. Способ по п.42, где указанным функциональным белком Е1 является функциональный белок Е1А и/или Е1В.52. The method according to § 42, where the specified functional protein E1 is a functional protein E1A and / or E1B.
53. Способ получения рекомбинантной клетки млекопитающего, включающий введение области гена Е1 аденовируса млекопитающего в клетку млекопитающего, которая содержит геном цирковируса свиней типа 1 или его часть, способную к репликации, где клетка является пермиссивной для репликации цирковируса свиней типа 1.53. A method for producing a recombinant mammalian cell, comprising introducing a region of the E1 gene of the mammalian adenovirus into a mammalian cell that contains the pig type 1 circovirus genome or a portion thereof capable of replication, where the cell is permissive for replicating pig type 1 circovirus.
54. Способ по п.53, дополнительно включающий в себя стадию культивирования указанной рекомбинантной клетки млекопитающего в условиях, пригодных для репликации указанного цирковируса свиней типа 1.54. The method of claim 53, further comprising the step of culturing said recombinant mammalian cell under conditions suitable for replication of said type 1 pig circovirus.
55. Способ по п.54, дополнительно включающий в себя стадию извлечения указанного цирковируса свиней типа 1 из указанной культивированной клетки.55. The method according to item 54, further comprising the step of extracting said pig type 1 circovirus from said cultured cell.
56. Способ по п.53, где указанная клетка млекопитающего происходит от свиньи.56. The method of claim 53, wherein said mammalian cell is derived from a pig.
57. Способ по п.56, где указанной клеткой млекопитающего является клетка сетчатки свиньи.57. The method of claim 56, wherein said mammalian cell is a pig retinal cell.
58. Способ по п.53, где указанным функциональным белком Е1 аденовируса млекопитающего является функциональный белок Е1 аденовируса человека.58. The method according to item 53, where the specified functional protein E1 of a mammalian adenovirus is a functional protein E1 of human adenovirus.
59. Способ по п.53, где указанным функциональным белком Е1 аденовируса млекопитающего является функциональный белок Е1 аденовируса свиней.59. The method according to item 53, where the specified functional protein E1 of a mammalian adenovirus is a functional protein E1 of pig adenovirus.
60. Способ по п.53, где указанный цирковирус свиней типа 1 содержит химерную нуклеотидную последовательность.60. The method according to item 53, where the specified pig circovirus type 1 contains a chimeric nucleotide sequence.
61. Способ по п.53, где указанная клетка млекопитающего стабильно трансформирована последовательностью гена Е1 аденовируса млекопитающего.61. The method of claim 53, wherein said mammalian cell is stably transformed with the sequence of the mammalian adenovirus E1 gene.
62. Способ по п.53, где указанная последовательность гена Е1 аденовируса млекопитающего является гетерологичной по отношению к указанной клетке млекопитающего.62. The method of claim 53, wherein said mammalian adenovirus E1 gene sequence is heterologous to said mammalian cell.
63. Способ по п.53, где указанным функциональным белком Е1 является функциональный белок Е1А и/или Е1В.63. The method according to item 53, where the specified functional protein E1 is a functional protein E1A and / or E1B.
64. Способ экспрессии генома цирковируса свиней типа 1 или его части, включающий культивирование клетки млекопитающего, которая содержит геном цирковируса свиней типа 1 или его часть, в условиях, пригодных для экспрессии указанного генома цирковируса свиней типа 1 или его части, где клетка млекопитающего экспрессирует функциональный белок Е1 аденовируса млекопитающего, и при необходимости извлечение указанного цирковируса свиней типа 1 или его части из культивированной клетки.64. A method of expressing the genome of a pig circovirus type 1 or part thereof, comprising culturing a mammalian cell that contains the genome of a pig circovirus type 1 or part thereof, under conditions suitable for the expression of the specified genome of a pig circovirus type 1 or part thereof, wherein the mammalian cell expresses a functional a mammalian adenovirus E1 protein, and optionally recovering said type 1 pig circovirus or part thereof from the cultured cell.
65. Способ по п.64, где указанная клетка млекопитающего происходит от свиньи.65. The method of claim 64, wherein said mammalian cell is derived from a pig.
66. Способ по п.65, где указанной клеткой млекопитающего является клетка сетчатки свиньи.66. The method of claim 65, wherein said mammalian cell is a pig retinal cell.
67. Способ по п.64, где указанным функциональным белком Е1 аденовируса млекопитающего является функциональный белок Е1 аденовируса человека.67. The method according to item 64, where the specified functional protein E1 of a mammalian adenovirus is a functional protein E1 of human adenovirus.
68. Способ по п.64, где указанным функциональным белком Е1 аденовируса млекопитающего является функциональный белок Е1 аденовируса свиньи.68. The method according to item 64, where the specified functional protein E1 of a mammalian adenovirus is a functional protein E1 of porcine adenovirus.
69. Способ по п.64, где указанная клетка млекопитающего стабильно трансформирована последовательностью гена Е1 аденовируса млекопитающего.69. The method of claim 64, wherein said mammalian cell is stably transformed with a mammalian adenovirus E1 gene sequence.
70. Способ по п.69, где указанной последовательностью гена Е1 является последовательность гена Е1 аденовируса человека.70. The method according to p, where the specified sequence of the E1 gene is the sequence of the E1 gene of human adenovirus.
71. Способ по п.69, где указанная последовательность гена Е1 аденовируса млекопитающего является гетерологичной по отношению к указанной клетке млекопитающего.71. The method of claim 69, wherein said mammalian adenovirus E1 gene sequence is heterologous to said mammalian cell.
72. Способ по п.64, где указанным функциональным белком Е1 является функциональный белок Е1А и/или Е1В.72. The method according to item 64, where the specified functional protein E1 is a functional protein E1A and / or E1B.
73. Способ по п.64, где указанный цирковирус свиней содержит химерную нуклеотидную последовательность.73. The method of claim 64, wherein said pig circovirus comprises a chimeric nucleotide sequence.