RU2006127446A - Линия эмбриональных стволовых клеток и способ ее получения - Google Patents

Линия эмбриональных стволовых клеток и способ ее получения Download PDF

Info

Publication number
RU2006127446A
RU2006127446A RU2006127446/15A RU2006127446A RU2006127446A RU 2006127446 A RU2006127446 A RU 2006127446A RU 2006127446/15 A RU2006127446/15 A RU 2006127446/15A RU 2006127446 A RU2006127446 A RU 2006127446A RU 2006127446 A RU2006127446 A RU 2006127446A
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
oocyte
stage
item
nucleus
cell
Prior art date
Application number
RU2006127446/15A
Other languages
English (en)
Inventor
Сунг-Ил РОХ (KR)
Сунг-Ил РОХ
Воо-Сук ХВАНГ (KR)
Воо-Сук ХВАНГ
Биеонг-Чун ЛИ (KR)
Биеонг-Чун ЛИ
Сунг-Кеун КАНГ (KR)
Сунг-Кеун КАНГ
Янг-Дзуне РИУ (KR)
Янг-Дзуне РИУ
Еу-Гене ЛИ (KR)
Еу-Гене ЛИ
Соон-Воонг КИМ (KR)
Соон-Воонг КИМ
Дае-Кее КВОН (KR)
Дае-Кее КВОН
Хее-Сун КВОН (KR)
Хее-Сун КВОН
Дза-Мин КОО (KR)
Дза-Мин КОО
Еул-Соон ПАРК (KR)
Еул-Соон ПАРК
Йоун-Янг ХВАНГ (KR)
Йоун-Янг ХВАНГ
Син-Йонг МООН (KR)
Син-Йонг МООН
Сун-Киунг ОХ (KR)
Сун-Киунг ОХ
Ку-Рие АХН (KR)
Ку-Рие АХН
Хиун-Соо ЙООН (KR)
Хиун-Соо ЙООН
Дзонг-Хиук ПАРК (KR)
Дзонг-Хиук ПАРК
Сун-Дзонг КИМ (KR)
Сун-Дзонг КИМ
Янг-Киу ЧОЙ (KR)
Янг-Киу ЧОЙ
Original Assignee
Сеул Нэшнл Юниверсити Индастри Фаундейшн (Kr)
Сеул Нэшнл Юниверсити Индастри Фаундейшн
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=34737817&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=RU2006127446(A) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Сеул Нэшнл Юниверсити Индастри Фаундейшн (Kr), Сеул Нэшнл Юниверсити Индастри Фаундейшн filed Critical Сеул Нэшнл Юниверсити Индастри Фаундейшн (Kr)
Publication of RU2006127446A publication Critical patent/RU2006127446A/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
    • C12N5/0602—Vertebrate cells
    • C12N5/0603—Embryonic cells ; Embryoid bodies
    • C12N5/0606—Pluripotent embryonic cells, e.g. embryonic stem cells [ES]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/87—Introduction of foreign genetic material using processes not otherwise provided for, e.g. co-transformation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/87—Introduction of foreign genetic material using processes not otherwise provided for, e.g. co-transformation
    • C12N15/873—Techniques for producing new embryos, e.g. nuclear transfer, manipulation of totipotent cells or production of chimeric embryos
    • C12N15/877—Techniques for producing new mammalian cloned embryos
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/87—Introduction of foreign genetic material using processes not otherwise provided for, e.g. co-transformation
    • C12N15/873—Techniques for producing new embryos, e.g. nuclear transfer, manipulation of totipotent cells or production of chimeric embryos
    • C12N15/877—Techniques for producing new mammalian cloned embryos
    • C12N15/8776—Primate embryos
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
    • C12N5/0602—Vertebrate cells
    • C12N5/0618—Cells of the nervous system
    • C12N5/0619—Neurons
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2500/00—Specific components of cell culture medium
    • C12N2500/05—Inorganic components
    • C12N2500/10—Metals; Metal chelators
    • C12N2500/20—Transition metals
    • C12N2500/24—Iron; Fe chelators; Transferrin
    • C12N2500/25—Insulin-transferrin; Insulin-transferrin-selenium
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2500/00—Specific components of cell culture medium
    • C12N2500/30—Organic components
    • C12N2500/38—Vitamins
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2500/00—Specific components of cell culture medium
    • C12N2500/30—Organic components
    • C12N2500/40—Nucleotides, nucleosides or bases
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
    • C12N2501/10—Growth factors
    • C12N2501/115—Basic fibroblast growth factor (bFGF, FGF-2)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
    • C12N2501/10—Growth factors
    • C12N2501/13—Nerve growth factor [NGF]; Brain-derived neurotrophic factor [BDNF]; Cilliary neurotrophic factor [CNTF]; Glial-derived neurotrophic factor [GDNF]; Neurotrophins [NT]; Neuregulins
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
    • C12N2501/20—Cytokines; Chemokines
    • C12N2501/23—Interleukins [IL]
    • C12N2501/235—Leukemia inhibitory factor [LIF]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2506/00—Differentiation of animal cells from one lineage to another; Differentiation of pluripotent cells
    • C12N2506/02—Differentiation of animal cells from one lineage to another; Differentiation of pluripotent cells from embryonic cells
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
    • C12N5/0602—Vertebrate cells
    • C12N5/0618—Cells of the nervous system
    • C12N5/0623—Stem cells

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Developmental Biology & Embryology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Gynecology & Obstetrics (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)

Claims (50)

1. Линия эмбриональных стволовых клеток, происходящая из ооцита с пересаженным ядром, полученного путем пересадки соматической клетки человека в энуклеированный ооцит человека.
2. Линия эмбриональных стволовых клеток по п.1, которая представляет собой клеточную линию, депонированную под номером KCLRF-BP-00092.
3. Способ получения линии бластоцисты, происходящей из соматической клетки человека и ооцита человека, включающий в себя
(1) культивирование соматической клетки человека для получения ядерной донорской клетки;
(2) энуклеирование ооцита человека для получения ооцита-реципиента;
(3) получение ооцита с пересаженным ядром путем пересадки ядра ядерной донорской клетки в ооцит-реципиент и слияния ядра ядерной донорской клетки и ооцита-реципиента; и
(4) проведение перепрограммирования, активации и культивирования in vitro ооцита с пересаженным ядром до формирования бластоцисты.
4. Способ по п.3, в котором стадия (2) включает в себя разрез части блестящей оболочки ооцита и удаление цитоплазмы, содержащей первое направительное тельце путем сдавливания ооцита.
5. Способ по п.4, в котором стадия (2) дополнительно включает в себя удаление с ооцита окружающих клеток кумулюса перед разрезом и удалением.
6. Способ по п.3, в котором стадия (2) включает в себя удержание ооцита человека фиксирующей пипеткой, разрез части блестящей оболочки ооцита пипеткой-скальпелем, удаление первого направительного тельца и ядра из ооцита, удерживаемого фиксирующей пипеткой через отверстие, выполненное в процессе разрезания путем сдавливания ооцита пипеткой-скальпелем.
7. Способ по п.3, в котором стадия (2) включает в себя удаление части цитоплазмы, содержащей первое направительное тельце, соответствующей 10-15% общего объема цитоплазмы.
8. Способ по п.3, в котором перепрограммирование на стадии (4) проводят в течение периода времени до 20 ч.
9. Способ по п.3, в котором перепрограммирование на стадии (4) проводят в течение периода времени до 6 ч.
10. Способ по п.3, в котором перепрограммирование на стадии (4) проводят в течение периода времени до 3 ч.
11. Способ по п.3, в котором перепрограммирование на стадии (4) проводят в течение периода времени около 2 ч.
12.Способ по п.3, в котором активация на стадии (4) выполняется путем обработки ооцита с пересаженным ядром кальциевым ионофором, а затем 6-диметиламинопурином.
13. Способ по п.12, в котором концентрация кальциевого ионофора находится в диапазоне 5 мкМ-15 мкМ.
14. Способ по п.13, в котором концентрация кальциевого ионофора составляет около 10 мкМ.
15. Способ по п.12, в котором концентрация 6-диметиламинопурина находится в диапазоне от 1,5 мкМ до 2,5 мкМ.
16. Способ по п.15, в котором концентрация 6-диметиламинопурина составляет около 2,0 мкМ.
17. Способ по п.3, в котором культивирование in vitro на стадии (4) выполняют путем последовательного использования по меньшей мере двух сред, каждая из которых имеет отличающийся друг от друга состав.
18. Способ по п.17, в котором культивирование in vitro на стадии (4) выполняют путем последовательного использования по меньшей мере двух сред, каждая из которых имеет отличающийся друг от друга состав.
19. Способ по п.18, в котором культивирование in vitro выполняют путем последовательного использования среды G1.2 и среды SUnt-2.
20. Способ по п.3, в котором стадию (4) выполняют путем перепрограммирования ооцита с пересаженным ядром в течение периода времени до 20 ч, обработки ооцита с пересаженным ядром кальциевым ионофором в концентрационном диапазоне от 5 мкМ до 15 мкМ, а затем 6-диметиламинопурином в концентрационном диапазоне от 1,5 мМ до 2,5 мМ и последовательного культивирования in vitro ооцита с пересаженным ядром в среде G1.2 и среде SUnt-2.
21. Бластоциста, полученная способом по п.3.
22. Способ получения эмбриональных стволовых клеток, включающий в себя
(1) культивирование соматической клетки человека для получения ядерной донорской клетки;
(2) энуклеирование ооцита человека для получения ооцита-реципиента;
(3) получение ооцита с пересаженным ядром путем пересадки ядра ядерной донорской клетки в ооцит-реципиент и слияние ядра ядерной донорской клетки и ооцита-реципиента;
(4) проведение перепрограммирования ооцита с пересаженным ядром, его активации и культивирования in vitro для формирования бластоцисты; и
(5) выделение из бластоцисты внутренней клеточной массы и культивирование внутренней клеточной массы в недифференцированном состоянии для получения линии эмбриональных стволовых клеток.
23. Способ по п.22, в котором стадия (2) включает в себя разрез блестящей оболочки ооцита и удаление цитоплазмы, содержащей первое направительное тельце путем сдавливания ооцита.
24. Способ по п.23, в котором стадия (2) дополнительно включает в себя удаление с ооцита окружающих его клеток кумулюса перед проведением разреза и удаления.
25. Способ по п.22, в котором стадия (2) включает в себя удержание упомянутого ооцита человека фиксирующей пипеткой, разрез части блестящей оболочки ооцита пипеткой-скальпелем; удаление первого направительного тельца и ядра из ооцита, удерживаемого фиксирующей пипеткой через отверстие, проделанное в ходе разреза, путем сдавливания ооцита пипеткой-скальпелем.
26. Способ по п.22, в котором стадия (2) включает в себя удаление части цитоплазмы, содержащей первое направительное тельце, соответствующей 10-15% общего объема цитоплазмы.
27. Способ по п.22, в котором линия эмбриональных стволовых клеток представляет собой линию, депонированную под номером KCLRF-BP-00092.
28. Способ по п.22, в котором перепрограммирование на стадии (4) проводят в течение периода времени до 20 ч.
29. Способ по п.22, в котором перепрограммирование на стадии (4) проводят в течение периода времени до 6 ч.
30. Способ по п.22, в котором перепрограммирование на стадии (4) проводят в течение периода времени до 3 ч.
31. Способ по п.22, в котором перепрограммирование на стадии (4) проводят в течение периода времени около 2 ч.
32. Способ по п.22, в котором активацию на стадии (4) выполняют путем обработки ооцита с пересаженным ядром кальциевым ионофором, а затем 6-диметиламинопурином.
33. Способ по п.32, в котором концентрация кальциевого ионофора находится в диапазоне от 5 мкМ до 15 мкМ.
34. Способ по п.33, в котором концентрация кальциевого ионофора составляет около 10 мкМ.
35. Способ по п.32, в котором концентрация 6-диметиламинопурина находится в диапазоне от 1,5 мМ до 2,5 мМ.
36. Способ по п.35, в котором концентрация 6-диметиламинопурина составляет около 2,0 мМ.
37. Способ по п.22, в котором культивирование in vitro на стадии (4) выполняют путем последовательного использования двух сред, каждая из которых имеет отличающуюся от другой композицию.
38. Способ по п.37, в котором культивирование in vitro выполняют путем последовательного использования двух сред, каждая из которых имеет отличающуюся от другой композицию.
39. Способ по п.38, в котором культивирование in vitro выполняют путем последовательного использования среды Gl.2 и среды SNUnt-2.
40. Способ по п.22, в котором стадию (4) выполняют путем перепрограммирования ооцита с пересаженным ядром в течение периода времени до 20 ч, обработки ооцита с пересаженным ядром кальциевым ионофором в диапазоне концентраций от 5 мкМ до 15 мкМ, а затем 6-диметиламинопурином в диапазоне концентраций от 1,5 мМ до 2,5 мМ и последующего культивирования in vitro ооцита с пересаженным ядром в среде G1.2 и среде SNUnt-2.
41. Способ по п.22, в котором внутреннюю клеточную массу выделяют из бластоцисты на стадии (5) способом, включающим в себя стадии
(1) удаления с бластоцисты блестящей оболочки или ее части и
(2) выделения внутренней клеточной массы путем удаления трофобласта у образовавшейся бластоцисты.
42. Способ по п.22, в котором внутреннюю клеточную массу культивируют на стадии (5) на питающем подслое, включающем в себя клетки, дифференцированные из линии эмбриональных стволовых клеток по п.1.
43. Линия стволовых клеток, полученная способом по п.22.
44. Предшественник нейронов, дифференцированный из линии эмбриональных стволовых происходящих клеток из ооцита с пересаженным ядром, полученного путем пересадки ядра соматической клетки человека в энуклеированный ооцит человека.
45. Предшественник нейрона по п.44, где линия эмбриональных стволовых клеток представляет собой клеточную линию, депонированную под номером KCLRF-BP-00092.
46. Способ получения предшественника нейронов по п.44, включающий в себя
(1) культивирование линии эмбриональных стволовых клеток для формирования эмбриоидного тела;
(2) культивирование эмбриоидного тела в присутствии агента, пригодного для того, чтобы вызвать дифференцировку эмбриоидного тела в предшественник нейрона; и
(3) отбор клеток, экспрессирующих маркер предшественника нейронов, и культивирование отобранной клетки для получения предшественника нейронов.
47. Способ по п.46, в котором линия эмбриональных стволовых клеток представляет собой клеточную линию, депонированную под номером KCLRF-BP-00092.
48. Способ по п.46, в котором агент, используемый на стадии (2), выбран из группы, включающей в себя ретиноевую кислоту, аскорбиновую кислоту, никотинамид; конглютинин N-2; конглютинин B-27 и смесь инсулина, трансферрина, селенита натрия и фибронектина.
49. Среда для использования при культивировании in vitro на стадии (4) по п.3 или 22, содержащая
95-110 мМ NaCl; 7,0-7,5 мМ KC1; 20-30 мМ NaHC03; 1,0-1,5 мМ NaH2P04; 3-8 мМ лактата натрия; 1,5-2,0 мМ CaCl2·2H20; 0,3-0,8 мМ MgCl2·6H20; 0,2-0,4 мМ пирувата натрия; 1,2-1,7 мМ фруктозы; 6-10 мг/мл сывороточного альбумина человека; 0,7-0,8 мкг/мл канамицина; 1,5-3% незаменимых аминокислот; 0,5-1,5% заменимых аминокислот; 0,7-1,2 мМ L-глютамина и 0,3-0,7% смеси инсулина, трансферрина и селенита натрия.
50. Среда по п.49, которая содержит
99,1-106 мМ NaCl; 7,2 мМ KC1; 25 мМ NaHC03; 1,2 мМ NaH2P04; 5 мМ лактата натрия; 1,7 мМ CaCl2·2H20; 0,5 мМ MgCl2·6H20; 0,3 мМ пирувата натрия; 1,5 мМ фруктозы; 8 мг/мл сывороточного альбумина человека; 0,75 мкг/мл канамицина; 2% незаменимых аминокислот; 1% заменимых аминокислот; 1 мМ L-глютамина и 0,5% смеси инсулина, трансферрина и селенита натрия.
RU2006127446/15A 2003-12-30 2004-12-30 Линия эмбриональных стволовых клеток и способ ее получения RU2006127446A (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR0302899 2003-12-30
KRPCT/KR03/02899 2003-12-30

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2006127446A true RU2006127446A (ru) 2008-02-10

Family

ID=34737817

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2006127446/15A RU2006127446A (ru) 2003-12-30 2004-12-30 Линия эмбриональных стволовых клеток и способ ее получения

Country Status (12)

Country Link
US (4) US20070243610A1 (ru)
EP (1) EP1711599B1 (ru)
JP (1) JP2007516720A (ru)
KR (2) KR20160139045A (ru)
CN (1) CN1922307A (ru)
AT (1) ATE458038T1 (ru)
AU (1) AU2004309300B8 (ru)
BR (1) BRPI0418310A (ru)
CA (1) CA2551266C (ru)
DE (1) DE602004025623D1 (ru)
RU (1) RU2006127446A (ru)
WO (1) WO2005063972A1 (ru)

Families Citing this family (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR100817020B1 (ko) * 2006-10-30 2008-03-27 건국대학교 산학협력단 셀레늄을 유효성분으로 하는 배아 발생 개선용 조성물 및그 방법
US9574173B2 (en) * 2010-11-15 2017-02-21 Accelerated Biosciences Corp. Generation of neural stem cells from human trophoblast stem cells
US10017733B2 (en) 2013-02-15 2018-07-10 Sung Kwang Medical Foundation Production of parthenogenetic stem cells and patient-specific human embryonic stem cells using somatic cell nuclear transfer
EP2997131A4 (en) * 2013-05-13 2016-10-26 Univ Oregon Health & Science HUMAN PLURIPOTENTIAL STEM CELLS MADE BY SOMATIC CELL CORE TRANSFER
US9783779B2 (en) 2013-11-27 2017-10-10 The Curators Of The University Of Missouri Artificial oocyte activation
CN108026544A (zh) 2015-07-17 2018-05-11 医疗法人圣光医疗财团 Nt细胞的贮存方法和存储系统
WO2017014513A1 (ko) * 2015-07-17 2017-01-26 의료법인 성광의료재단 Nt세포의 보관방법 및 뱅킹 시스템
US11535824B2 (en) 2015-10-29 2022-12-27 Sung Kwang Medical Foundation Nuclear transfer
CN106399229A (zh) * 2016-10-25 2017-02-15 浙江译美生物科技有限公司 一种诱导剂及采用该诱导剂制备表皮干细胞的方法
CN106754654A (zh) * 2016-12-02 2017-05-31 内蒙古大学 以干细胞为基础的哺乳动物人工胚胎构建‑动物克隆繁育的方法及其模型
CN106834207A (zh) * 2016-12-14 2017-06-13 中国水产科学研究院珠江水产研究所 一种中华鳖卵巢细胞分离及体外培养方法
CN113151158A (zh) * 2021-05-19 2021-07-23 杭州憶盛医疗科技有限公司 一种组织干细胞分离和功能评价系统
WO2023008918A1 (ko) * 2021-07-28 2023-02-02 의료법인 성광의료재단 B2m 유전자의 발현이 저해된 유전적으로 조작된 줄기세포 및 이의 이용방법
CN115927169B (zh) * 2022-10-11 2023-08-11 再造再生医学科技(杭州)有限公司 用于扩增cd34+造血干细胞的培养液和体外扩增cd34+造血干细胞的方法

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1986007377A1 (en) 1985-06-12 1986-12-18 Luminis Pty. Ltd. Culture media for in vitro fertilization and embryo transfer
AU5577600A (en) 1999-06-30 2001-01-31 Woo-Suk Hwang A method for producing human embryonic skin cells by employing an inter-species nuclear transplantation technique
JP2001017160A (ja) * 1999-07-07 2001-01-23 Fuso Pharmaceutical Industries Ltd 体外受精用培地組成物
WO2001088104A2 (en) 2000-05-17 2001-11-22 Geron Corporation Neural progenitor cell populations
WO2002086073A2 (en) * 2001-04-20 2002-10-31 Memorial Sloan-Kettering Cancer Center Generation of differentiated tissue from nuclear transfer embryonic stem cells and methods of use

Also Published As

Publication number Publication date
US20110065192A1 (en) 2011-03-17
US20120083032A1 (en) 2012-04-05
EP1711599A1 (en) 2006-10-18
CN1922307A (zh) 2007-02-28
AU2004309300B2 (en) 2008-06-12
CA2551266C (en) 2011-07-26
CA2551266A1 (en) 2005-07-14
US9476064B2 (en) 2016-10-25
WO2005063972A1 (en) 2005-07-14
KR20060105041A (ko) 2006-10-09
AU2004309300A1 (en) 2005-07-14
US20140154800A1 (en) 2014-06-05
JP2007516720A (ja) 2007-06-28
EP1711599A4 (en) 2008-04-16
AU2004309300B8 (en) 2009-03-26
EP1711599B1 (en) 2010-02-17
KR20160139045A (ko) 2016-12-06
ATE458038T1 (de) 2010-03-15
US8647872B2 (en) 2014-02-11
BRPI0418310A (pt) 2007-05-02
KR101680269B1 (ko) 2016-11-29
DE602004025623D1 (de) 2010-04-01
US20070243610A1 (en) 2007-10-18

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US6887706B2 (en) Method of in vitro differentiation of transplantable neural precursor cells from primate embryonic stem cells
RU2006127446A (ru) Линия эмбриональных стволовых клеток и способ ее получения
US20050026133A1 (en) Cryopreservation medium for primate embryo stem cells and cryopreservation method
JP2008017840A (ja) 胚性幹細胞の成長
WO2011134210A1 (zh) 一种培养基添加剂及其应用
WO2003078608A1 (en) Methods of inducing differentiation of stem cells into a specific cell lineage
US20240240141A1 (en) Rapid and efficient clinical grade pigment epithelium induction method, kit, and application
WO2002034890A2 (en) Pluripotential stem cells
CN113943695A (zh) 一种干细胞诱导分化建立肾脏类器官的方法
CN114807034A (zh) 一种人多能干细胞来源的Müller细胞的制备方法
WO2004039965A1 (ja) 多能性幹細胞培養用の組成物とその使用
Richa et al. Introduction of human DNA into mouse eggs by injection of dissected chromosome fragments
CN112544613B (zh) 一种多能干细胞冻存液、其应用及冻存方法
WO2020203538A1 (ja) 多能性幹細胞を含む細胞集団及びその製造方法
CN104195102A (zh) 诱导人胚胎干细胞向神经外胚层分化的方法
US5508189A (en) Regeneration of plants from cultured guard cell protoplasts
CN114276984B (zh) 雌性生殖干细胞转分化至功能精子的方法及应用
CN113564101A (zh) 一种多能干细胞来源的角质形成细胞的培养方法
KR20080077738A (ko) 돼지 미성숙란의 체외배양 방법
RU2430158C1 (ru) Способ дифференцировки стволовых клеток взрослого человека в клетки, секретирующие инсулин
WO2006025937B1 (en) Embryonic stem cell derivatives, and methods of making and using the same
CN114540280B (zh) 一种体外诱导人类原始生殖细胞培养液以及定向诱导方法和应用
CN108707600A (zh) 一种猪鼠细胞单细胞融合方法
US20240052318A1 (en) Methods for Differentiating AT2 Cells
US20040043482A1 (en) Method of producing stem cell lines

Legal Events

Date Code Title Description
FA92 Acknowledgement of application withdrawn (lack of supplementary materials submitted)

Effective date: 20090420