RU1391052C

RU1391052C - Производные 5-формилтиено [2,3-D]пиримидина, обладающие противогерпетической активностью

Info

Publication number: RU1391052C
Authority: RU
Inventors: Н.В. Каплина; А.Н. Гринев; В.И. Шведов; А.Н. Фомина; И.С. Николаева; Т.В. Пушкина
Original assignee: Всесоюзный научно-исследовательский химико-фармацевтический институт им.Серго Орджоникидзе
Priority date: 1986-08-25
Filing date: 1986-08-25
Publication date: 1993-11-30

Abstract

Изобретение касаетс замещеннь х пиримидина , в. частности производных З-фтормилтиено 2,3-d пиримидина (ПМ) общей формулы -C CM-S-CR -СН-СН 0, где а) 1 I2, R -морфолииил: R Н; б) R ОСН ; R Н; в) R - морфолинил; R Вг, которые обладают противогер- петической активностью и могут быть использованы в медицине. Цель - создание более активных веществ указанного класса. Синтез ПМ ведут броми- , рованием 4-мopфoлинo-5-фopмилтиeнo 2,3-d пиримидина бромом в среде диметилформамида при комнатной темлерат ре. Выход %, т.пл. &deg;С; брутто ф-ла: а) 75,156 - 157. С Н N О S: б) 71, 158 - 159, С в) 179, С Н N О SBr. Мака1мально переносима кон11 10 3 2 центраци дл переично-трипсиннзированных культур клеток фиброблааов эмбриона курицы составл ет дл ПМ 5 мкг/мл лри токсичности 250 - 500 иг/кг. 2 табл.

Description

А «

ы ч©

)

о

Ol

ы

Изобретение касаетс новых химических , соединений р да Ti/ieHo 2,3-d nHpHMH- дииа, а именно производных 5-формилтиено 2,3-Ь пиримидина общей формулы г

1 N-;.....,.CHO

JCIL.,,

N S гдеП1«ы(0 R2°H(1a):

I , R2 H (16);

обладающих протиаогерпетической актив ОСТЬЮ .., .

Цель изобретени - производные тие- ,3d пиpимидинa, .обладающие более выраженной противогерпетической активностью а отношении вирусов простого герпеса и меньшей токсичностью.

Приме р 1. Получение 4-морфолино-5- формилтиено 2,3-Ь пири1Мидина (la. I А, Получение исходного соединени :(Па)-4-хлор-5-дибромметилтиено 2 ,3-й пиримидина,

Смесь 3,68 г (0,02 моль) 5-метил-4-хлор- тйeмo 2,3-d пмpимидинa, 7,12 г (0,04 моль) N-бромсукцинимида, 0,01 г перекиси бензо- ила в 30 мл четыреххлористого углерода кип т т 30 мин. Реакционную массу промывают водой, растворитель упаривают в вакууме досуха, остаток кристаллизуют из хлористого метилена.

Получают 5,13 г (75%) 4-хлор-5-дибром- мeтилтиeнo 2,3-d пиpимидинa в виде кри- Ьталлического порошка белого цвета с желтоаатым оттенком, т.пл. 81-82°С

l(CH2Cl2).

Вычислено, %: С 24,5; Н 0,8; Вг 46,7; С 10,3;-М 8,2; 59,4,

C7H4Br2CIN2S

Найдено, %: С 24.5; Н 0,9; Вг 46,7; CI 10,2; N 8,2; S 9,4.....

Б. Получение целевого продукта (1а}-4-мор- фoлинo-5-фopмилтиeнo 2,3-d пиpиммдинa.

Смесь 6,84 г (0,02 моль) 4-хлор-5-диб- :ромметилтиено 2,3-Ь пиримидина в бензола и 21 мл морфолина выдерживают npi; в течение 30 мин. Реакционную массу промывают водой, бензол отгон ют. Костатку при перемешивании добавл ют 18 МП воды и 20 мл 20%-ной l-t2S04. Образовавшийс раствор оставл ют на .12ч при ком- нгчтной температуре, экстрагируют хлороформом, последний упаривают в вакуме . Остаток кристаллизуют из водного спирта (1;1.).

Получают 3,68 г (75%) 4-морфолино-5- opмилтиeнo 2iЗ-d пиpимидинa в виде кри- сталлического порошка белого цвета с кремовым оттенком, т.пл, 156-157 С.

Вычислено, %: С 52,99; Н 4,44; N 16.85; S 12,86

CiiHiiN302:S

Найдено, %: С 53,0; Н 4,46; N 16,81; S 12,9,:

ИК-спектр. v,CM Vl680(CO). П р и м е р 2, Получение 4-метокси-5- фopмилтиeнo 2,3-d пиpимидинa (15). А. Получение исходного соединени (Иб) - 4-метокси-5-дибромметилтиено 2, римидина-провод т в услови х, описанных в примере 1а, из3.6 г(0.02 моль)4-метокси- 5-мeтилтиeнo 2.3-d пиpимидинa, 7.12 г N- бромсукцинимида, OjOT г перекиси бензоила в ЗО мл четыреххлористого углерода.

Получают 5J4 (85%) 4-метокси-6-дибpoммётилтиeнo 2iЗ-d пиpимидинa в виде

кристаллического порошка кремового цвета , растворимого в хлоруглеводородах,

спиртах диоксане, т.пл. 7б-77°С.

Вычислено, %: G 28,4; Н 1,8; Вг 47,3; N 8.3; 59,5.

С8НбВГ2Н203

Найдено, %; С 28,6; Н 1,8; Вг47,3; N8.2; 59,6,

6, Получение целевого продукта (16) 4- мeтoкcи-5-фopмилтиeнo 2,3-d пиpимидинa провод т в услови х примера 16 из 6,76 г

(0,02 моль) 4-метокси -5-дибромметилтие- )иримидина. 21 мл морфолина. 18 мл воДы и 20 мл 20%-ной H2S04. После кислотного гидролиза продукт выпадает в осадок , , .: -

Получают 2,75 г (71 %) 4-метокси-5-формилтиeнo 2 .3-d пиpимидинa в виде кристаллического порошка кремового цвета, растворимого в спиртах, диоксане, хлоруглеводородах , т.пл. 158-159°С.

Вычислено, %: С 49,5; Н 3,1; N 14,4; S

16,5.

C8H6N2025

Найдено, %; С49,6; И3,3; N 14,5; 5 16,6.

-1.

ИК-спектр, V,CM : 1680 (СО).

П р и м е р 3. Получение 4-МОРФОЛИНО-5- фopмил-6-бpoмтиeнo 2,3-dlпиpимидинa

(1в)К раствору2 г(0,008мoлb)4-мopфoлинo- 55 5-фopмилтиeнo 2,3-d пйpимидинa в 20 мл ДМФА при перемешивании прикапывают 0,41 мл (0,008 моль) брома, Реакционную массу выдерживают при комнатной температуре 1 ч, выливают в воду. Выпавший осадок отфильтровывают, сушат и кристаллизуют из спирта.

Получают 1.3 г (50%) 4-морфолино-б формил-6-бромтиено 2,3- пиримидина в виде кристаллического порошка белого та с желтоватым оттенком, растворимого в спиртах, диоксане, т.пл. 178-179°С.

Вычислено, %: С 40,3; Н 3.7: N 12,8; S 9,8: Вг24,4.

CiiHioN302SBr

Найдено. %: С 40.4; Н 3.5: N 12.8; S 9.7: Вг24.4.;

ИК-спектр, V. см -: 1710 (СО).

П р и м е р 4. Полученные соединени обладают противогерпетической активно- стью 8 отношении вирусов простого герпеса f и (I антигенных типов.

Изучение активности соединений рб- щей формулы I провод т на культурах клеток по подавлению размножени вирусов.

Дл изучени противогерпетической активности соединений используют первич- но-трансинизированную культуру клеток фибробластов эмбриона курицы (сЬэК). которую получают путем трипсиНизации 9- дневных куриных эмбрионов. В качестве тест-вирусов используют вирусы герпеса простого I и 11 антиг енных типов (штаммы Л2 иТр).

Двухдневный монослой культуры кле-. ток инфицируют разведени ми вируса, содержащими 10 1000 ТЦД50 в 0.4 мл. После адсорбции и удалени неадоорбировавще- гос вируса (через 1 ч после инокул ции вируса) внос т изучаемые соединени в кон- центраци х, составл ющих 1/2 максимально переносимой дл культуры клётОК концентрации, и в меньших концентраци х. Результаты учитывают через 48 ч по cndt6b6- ности изучаемых соединений предотвра- щать цитопатическое действие вируса на клетки и выражают количеством ингибируемых 50% тканевых цитопатических доз вируса (ТЦДйо).

Изучение вирусингибирующейактивности предлагаемых соединений в отношении вируса простого герпеса проведено на 15.00 пробирках с монослоем клеточной культуры ФЭК.

Токсичность полученных соединений изучают в опытах на культуре клеток ФЭК (96 пробирок) и на 120 белых нелинейных мышах массой тела 18-20 г.

На монослой 48-часовой культуры клеток ФЭК нанос т питательную среду № 199, срдержащую испытуемое соединение в различных концентраци х. В течение 5 дней провод т мифоскопию клеточных культур дл вы влени цитотоксйческого действи

соединений и определени максимально переносимой клетками концентрации (МИК).

Мышам испытуемые соединени ввод т внутрь в виде взвеси в 1 %-ном крахмальном геле в объеме 0.5 мл 1 раз в день в течение 5 дней. Наблюдение за выживаемостью животных провод т в течение 14 дней и определ ют максимально переносимую дозу (МПД) соединени .

Результаты изучени полученных соединений приведены в табл.1 и 2. Сравнение провод т с известным 3-(п-оксифенилами- но)-4-9ксо-5,б-диметил-3.4-дигидротиено 2 ,3-б пиримидином (соединение А), обладающим вирусингибирующим действием в отношении вируса простого герпеса в клеточной культуре ФЭК.

Результаты изучени полученных соединений свидетельствуют о том. что эти соединени обладаютвысокой вирусингибирующей активностью а отношении вируса герпеса простого I антигенного типа, выращенного в клеточной культуре ФЭК. В концентраци х от 5 до 2 мкг/мл они подавл ют репродукцию 2,0-2,25 Ig ТЦДво вируса. ,

Соединение А. уступает по активности . предлагаемым соединени м : в максимально переносимой дл клеток концентрации 5 мкг/мл оно снижает инфекционный титр вируса на 1,0 Ig ТЦДбо, предлагаемое соединение 16 - на 2,25 дТЦП50.

Кроме того, соединени а и 16 активны в отноше1-1ии вируса герпеса простого И антигенного типа, соединение А такой активностью не обладает (см.табл.1).

Результаты изучени токсичности предлагаемых соединений свидетельствуют о том, что они хорошо перенос тс животными - при введении 1 раз в день в течение 5 дней МПД дл мышей составл ют 250 мг/кг (соединение 1а) и 500 мг/кг (соединени 16,в), менее токсичны, чем соединение А. МИД которого составл ет 125 мг/кг.

Дл клеточной культуры ФЭК. МПК дл всех трех указанных соединений примерно 5-10 мкг/мл.

Предлагаемые соединени обладают более вырзжент1ым противогерпетическим дейстеием и меньшей токсичностью по сравнению с соединением А.

(56) Харизомемова И.А. и др. Функциональные производные тйофела XX. Синтез и про- тивовируснэ активность производных 3-aMiiHOTneHo 2.3-d nMpMM nKa. Хим. фарм. журнал, 198}. т.15, № 9, с: .

713910528

Табли ца 1 Результаты изучени противовирусной активност предлагаемых соединений 1а, 16, 1в.

ХТИ-обратна величина отношени минимально активной концентрации к максимально переносимой.

,01 (уровень достоверности). ,05.

Та б л и ца 2 Результаты изучени токсичности предлагаемых соединений

Claims

Формулаизобретени

Производные 5-формилтиено 2,3-dримидина общей формулы

/Г

N4 J-1Ц,у

где а)

X

R N О -„У

R2-H.б )Н1«оенз.«2-н,8 )

/

R N о -/

.

обладающие противогерпетической активностью .