RU2345080C2 - 4-(4'-ГИДРОКСИБУТИЛ)-6-ФЕНИЛ-1,2,4-ТРИАЗОЛО[5,1-c][1,2,4]ТРИАЗИН-7-ОН - Google Patents

4-(4'-ГИДРОКСИБУТИЛ)-6-ФЕНИЛ-1,2,4-ТРИАЗОЛО[5,1-c][1,2,4]ТРИАЗИН-7-ОН Download PDF

Info

Publication number
RU2345080C2
RU2345080C2 RU2007105908/04A RU2007105908A RU2345080C2 RU 2345080 C2 RU2345080 C2 RU 2345080C2 RU 2007105908/04 A RU2007105908/04 A RU 2007105908/04A RU 2007105908 A RU2007105908 A RU 2007105908A RU 2345080 C2 RU2345080 C2 RU 2345080C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
triazin
triazolo
phenyl
hydroxybutyl
cells
Prior art date
Application number
RU2007105908/04A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2007105908A (ru
Inventor
Владимир Леонидович Русинов (RU)
Владимир Леонидович Русинов
Олег Николаевич Чупахин (RU)
Олег Николаевич Чупахин
Евгений Нарциссович Уломский (RU)
Евгений Нарциссович Уломский
Валерий Николаевич Чарушин (RU)
Валерий Николаевич Чарушин
Тать на Сергеевна Шестакова (RU)
Татьяна Сергеевна Шестакова
нова Людмила Сергеевна Лукь (RU)
Людмила Сергеевна Лукьянова
Сергей Леонидович Деев (RU)
Сергей Леонидович Деев
Олег Иванович Киселев (RU)
Олег Иванович Киселев
Элеонора Германовна Деева (RU)
Элеонора Германовна Деева
Лариса Ивановна Русинова (RU)
Лариса Ивановна Русинова
Original Assignee
ГОУ ВПО Уральский государственный технический университет-УПИ
Институт органического синтеза им. И.Я. Постовского УрО РАН
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by ГОУ ВПО Уральский государственный технический университет-УПИ, Институт органического синтеза им. И.Я. Постовского УрО РАН filed Critical ГОУ ВПО Уральский государственный технический университет-УПИ
Priority to RU2007105908/04A priority Critical patent/RU2345080C2/ru
Publication of RU2007105908A publication Critical patent/RU2007105908A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2345080C2 publication Critical patent/RU2345080C2/ru

Links

Landscapes

  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)

Abstract

Описывается 4-(4'-гидроксибутил)-6-фенил-1,2,4-триазоло[5,1-с][1,2,4]триазин-7-он формулы (1), обладающий противовирусным действием,
Figure 00000008
который может найти применение в медицине и сельском хозяйстве. 1 табл.

Description

1. Область техники, к которой относится изобретение.
Изобретение относится к области биологически активных соединений и касается 4-(4'-гидроксибутил)-6-фенил-1,2,4-триазоло[5,1-с][1,2,4]триазин-7-она, обладающего противовирусным действием, предназначенного для лечения и профилактики инфекционных заболеваний человека и животных вирусной природы. Изобретение может быть использовано в лечебных учреждениях, научно-исследовательских лабораториях, а также в животноводстве и птицеводстве.
2. Уровень техники.
Актуальность проблемы противовирусной терапии в условиях мутации вирусов, выявления новых возбудителей опасных и медленных вирусных инфекций, вызывает потребность в новых эффективных противовирусных средствах. В настоящее время наиболее перспективной группой противовирусных препаратов, эффективных в отношении вирусов герпеса, гепатитов и проч. являются ациклические нуклеозиды - АЦИКЛОВИР, ГАНЦИКЛОВИР, ФАМЦИКЛОВИР и проч. (Машковский М.Д. Лекарственные средства: в 2-х т. 14-е изд. М.: Новая волна. 2000. Т.1, 2.; Регистр лекарственных средств России. Энциклопедия лекарств. Под ред. Г.Л.Вышковского. М.: ООО РЛС-2004. 2004. 1503 с.), являющиеся структурными аналогами природных нуклеозидов пуринового ряда и ингибиторами ферментов синтеза нуклеиновых кислот.
Figure 00000001
Figure 00000002
Figure 00000003
В то же время, имеются данные о противовирусном действии 6-нитро-1,2,4-триазоло[5,1-с]-1,2,4-триазин-7(4Н)-онов (Синтез и противовирусная активность 6-нитро-7-оксо-4,7-дигидроазоло [5,1-с][1,2,4]триазинов. В.Л.Русинов, Е.Н.Уломский, О.Н.Чупахин, М.М.Зубаиров, А.Б.Капустин, Н.И.Митин и др. / Химико-фармацевтический журнал. №9, 1990, с.41-44), являющихся структурными аналогами пуринов.
Figure 00000004
Данные о противовирусной активности ациклических нуклеозидов на основе азоло[5,1-с]-1,2,4-триазинов отсутствуют.
3. Сущность изобретения.
Сущность изобретения составляет 4-(4'-гидроксибутил)-6-фенил-1,2,4-триазоло[5,1-с][1,2,4]триазин-7-он формулы (1),
Figure 00000005
4. Сведения, подтверждающие возможность осуществления изобретения.
4.1. Синтез 4-(4'-гидроксибутил)-6-фенил-1,2,4-триазоло[5,1-c][1,2,4]триазин-7-она (1)
4-(4'-Гидроксибутил)-6-фенил-1,2,4-триазоло[5,1-с][1,2,4]триазин-7-он (1) синтезируют в соответствии со следующей схемой (схема 1).
Figure 00000006
Исходным соединением для синтеза 4-(4'-гидроксибутил)-6-фенил-1,2,4-триазоло[5,1-с][1,2,4]триазин-7-она (1) является 6-фенил-1,2,4-триазоло[5,1-с][1,2,4]триазин-7-он (3). Действием карбоната натрия на соединение (3) получают натриевую соль 6-фенил-1,2,4-триазоло[5,1-с][1,2,4]триазин-7-она (3), которую затем алкилируют 4-бромбутилацетатом в диметилформамиде (ДМФА) с образованием 4-(4'-ацетоксибутил)-6-фенил-1,2,4-триазоло[5,1-с][1,2,4]триазин-7-она (2). Обработка соединения (2) раствором метилата натрия в метаноле приводит к гидролизу ацетоксильной группы с образованием заявляемого соединения (1).
4.2. Биологическое действие 4-(4'-гидроксибутил)-6-фенил-1,2,4-триазоло|5,1-с][1,2,4]триазин-7-она (1)
Для исследования противовирусной активности 4-(4'-гидроксибутил)-6-фенил-1,2,4-триазоло[5,1-с][1,2,4]триазин-7-она (1) использовался вирус простого герпеса 1-го типа (ВПГ-1) штамм ЕС, полученный из коллекции вирусов НИИ вирусологии им. Ивановского и культура клеток почки зеленой мартышки - Vero, полученная из Банка клеточных культур НИИ гриппа РАМН.
В качестве контрольного препарата использовали ацикловир в концентрации 50 мкг/мл, который полностью ингибировал развитие вирусного цитопатического действия (ЦПД) во всех разведениях на протяжении всего эксперимента.
Пример 1. Синтез 4-(4'-гидроксибутил)-6-фенил-1,2,4-триазоло[5,1-с][1,2,4]триазин-7-она (1).
4-(4'-Ацетоксибутил)-6-фенил-1,2,4-триазоло[5,1-c][1,2,4]триазин-7-она (2). 6-Фенил-1,2,4-триазоло[5,1-с][1,2,4]триазин-7-он (3) 2,13 г (0,01 моль) обрабатывают раствором 1,1 (0,01 моль) г Na2СО3 в 7 мл воды. Образовавшуюся суспензию фильтруют, осадок соли (4) сушат. Сухую соль (4) растворяют в 10 мл ДМФА, добавляют 1,95 г (0,01 моль) 4-бромбутилацетата и выдерживают 3 ч при температуре 100°С. Реакционную массу охлаждают до комнатной температуры, добавляют 250 мл воды, выпавший осадок отфильтровывают, кристаллизуют из изопропилового спирта и сушат на воздухе. Выход 2,1 г (64%).
4-(4'-Ацетоксибутил)-6-фенил-1,2,4-триазоло[5,1-с][1,2,4]триазин-7-он (2) имеет следующие характеристики: ТПЛ 74°С; Rf=0,65 (этилацетат 100%), 1Н ЯМР спектр в ДМСО-d6 δ, м.д.: 1,69-1,80 (2Н, м, CH2), 1,96-2,10 (2Н, м, СН2), 1,97 (3Н, с, СОСН3), 4,06 (2Н, т, ОСН2), 4,46 (2Н, т, NCH2), 7,45-7,49 (3Н, м, C6H5), 8,00-8,10 (2Н, м, С6H5), 8,3 (1Н, с, 2-Н). Найдено: С - 58,68, Н - 5,12, N - 21,36%. Брутто-формула - С16Н17N5O3. Вычислено: С - 58,71, Н - 5,23, N - 21,39%.
4-(4'-Гидроксибутил)-6-фенил-1,2,4-триазоло[5,1-c] [1,2,4]триазин-7-она (1). К раствору 0,14 г (0,006 моль) металлического натрия в 15 мл абсолютного метанола добавляют 2,1 г (0,006 моль) 4-(4'-ацетоксибутил)-6-фенил-1,2,4-триазоло[5,1-с][1,2,4]триазин-7-она (2). Реакционную массу кипятят 0,5 ч, охлаждают до комнатной температуры, добавляют ледяной уксусной кислоты до нейтральной реакции и упаривают в вакууме при 100°С. Остаток хроматографируют на силикагеле марки Kieselgel 60 с использованием этилацетата (100%) в качестве элюента и выделяют 4-(4'-гидроксибутил)-6-фенил-1,2,4-триазоло[5,1-с] [1,2,4] триазин-7-он (1). Выход 1,27 г (70%).
4-(4'-Гидроксибутил)-6-фенил-1,2,4-триазоло[5,1-с][1,2,4]триазин-7-он (1) имеет следующие характеристики: ТПЛ 84°C; Rf=0,25 (этилацетат 100%), 1Н ЯМР спектр в ДМСО-d6 δ, м.д.: 1,50-1,61 (2Н, м, СН2), 1,96-2,07 (2Н, м, CH2), 3,46 (2Н, к, ОСН2), 4,19 (1Н, т, ОН), 4,44 (2Н, т, NCH2), 7,44-7,47 (3Н, м, С6Н5), 8,00-8,10 (2Н, м, С6H5), 8,25 (1Н, с, 2-Н). Найдено: С - 58,94, Н - 5,33, N - 24,57%. Брутто-формула - С14Н15N5O2. Вычислено: С - 58,94, Н - 5,30, N - 24,55.
Заявляемое соединение (1) представляет собой бесцветное кристаллическое вещество, растворимое в ацетоне, хлороформе, этилацетате, диметилформамиде, диметилсульфоксиде, малорастворимое в воде, метаноле, этаноле, нерастворимое в бензоле и большинстве апротонных растворителей.
Пример 2. Определение токсичности 4-(4'-гидроксибутил)-6-фенил-1,2,4-триазоло[5,1-с][1,2,4]триазин-7-она (1).
Определение токсичности 4-(4'-гидроксибутил)-6-фенил-1,2,4-триазоло[5,1-с][1,2,4]триазин-7-она (1) проводили на культуре клеток MDCK в культуре, которая определялась по состоянию клеточного монослоя в инвертированном микроскопе после 3-суточной инкубации с препаратом. В результате была определена МТД (минимальная токсическая дозы) 4-(4'-гидроксибутил)-6-фенил-1,2,4-триазоло[5,1-с][1,2,4]триазин-7-она (1). Для исследования противовирусной активности 4-(4'-гидроксибутил)-6-фенил-1,2,4-триазоло[5,1-с][1,2,4]триазин-7-она (1) использовали половинную концентрацию от МТД.
Пример 3. Определение противовирусной активности 4-(4'-гидроксибутил)-6-фенил-1,2,4-триазоло[5,1-с][1,2,4]триазин-7-она (1).
1. Клетки Vero и 4-(4'-гидроксибутил)-6-фенил-1,2,4-триазоло[5,1-с][1,2,4]триазин-7-он (1) культивировали в 96-луночных планшетах для клеточных культур при 37°С в атмосфере 5% CO2 до состояния монослоя. Вещество в удвоенной концентрации в объеме 100 мкл/лунка было добавлено к клеткам, через 20 минут был внесен ВПГ-1 в разведения 10-3, 10-4, 10-5, 10-6 в том же объеме. Клетки инкубировали с вирусом 72 часа, после чего учитывали развитие вирусного ЦПД.
2. По истечении 120 часов количество живых клеток было подсчитано при помощи микротетразолиевого теста (МТТ), характеризующего митохондриальную активность клеток. С этой целью клетки дважды отмывали фосфатно-солевым буфером и в лунки добавляли по 100 мкл раствора (0,2 мг/мл) 3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифинилтетразолия бромида в 0,15М NaCl. Клетки инкубировали при 37°С в атмосфере 5% СО2 в течение 2 часов до появления характерного фиолетового осадка и затем трижды отмывали фосфатно-солевым буфером. Осадок растворяли в ДМСО (10 мкл/лунка), после чего измеряли оптическую плотность с помощью спектрофотометра при длине волны λ=535 нм.
Наблюдение развития цитопатического действия ВПГ-1 показало, что через 72 часа во всех планшетах в контроле вируса в разведении 10-3 более 90% клеток имели характерные изменения, в разведении 10-4 около 60% клеток, в разведении 10-5 - менее 20% и в разведении 10-6 цитопатическое действие вируса не наблюдалось.
Через 120 часов наблюдалась массовая гибель клеток в контроле вируса, что позволило провести МТТ-тест.
Во всех планшетах с добавлением заявляемого соединения (4-(4'-гидроксибутил)-6-фенил-1,2,4-триазоло[5,1-с][1,2,4]триазин-7-она (1)) наблюдалось снижение цитапатогенного действия ВПГ-1. Так, в эксперименте в разведении вируса в 10-3 75% клеток имели характерные изменения, разведение 10-4 - 38%, разведение 10-5 - 20% (таблица 1).
Таблица 1
Результаты испытаний противовирусной активности 4-(4'-гидроксибутил)-6-фенил-1,2,4-триазоло|5,1-с]{1,2,4]триазин-7-он в отношении вируса простого герпеса. Среднее значения оптической плотности (интенсивности клеточного дыхания) по результатам МТТ-теста.
Препарат Концентрация препарата, мкг/мл Титр вируса, lg (ТЦД50)/мл
10-3 10-4 10-5 10-6
4-(4'-гидроксибутил)-6-фенил-1,2,4-триазоло[5,1-с][1,2,4]триазин-7-он 30 0,124 0,252 0,284 0,287
Ацикловир 50 0,307 0,315 0,316 0,303
Контроль вируса 0,044 0,075 0,152 0,343
Контроль клеток 0,347

Claims (1)

  1. 4-(4'-Гидроксибутил)-6-фенил-1,2,4-триазоло[5,1-с][1,2,4]триазин-7-он
    Figure 00000007
RU2007105908/04A 2007-02-16 2007-02-16 4-(4'-ГИДРОКСИБУТИЛ)-6-ФЕНИЛ-1,2,4-ТРИАЗОЛО[5,1-c][1,2,4]ТРИАЗИН-7-ОН RU2345080C2 (ru)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2007105908/04A RU2345080C2 (ru) 2007-02-16 2007-02-16 4-(4'-ГИДРОКСИБУТИЛ)-6-ФЕНИЛ-1,2,4-ТРИАЗОЛО[5,1-c][1,2,4]ТРИАЗИН-7-ОН

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2007105908/04A RU2345080C2 (ru) 2007-02-16 2007-02-16 4-(4'-ГИДРОКСИБУТИЛ)-6-ФЕНИЛ-1,2,4-ТРИАЗОЛО[5,1-c][1,2,4]ТРИАЗИН-7-ОН

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2007105908A RU2007105908A (ru) 2008-08-27
RU2345080C2 true RU2345080C2 (ru) 2009-01-27

Family

ID=40544434

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2007105908/04A RU2345080C2 (ru) 2007-02-16 2007-02-16 4-(4'-ГИДРОКСИБУТИЛ)-6-ФЕНИЛ-1,2,4-ТРИАЗОЛО[5,1-c][1,2,4]ТРИАЗИН-7-ОН

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2345080C2 (ru)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2013122575A2 (en) * 2012-02-14 2013-08-22 Grl Small molecule having antiviral properties

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Русинов В.Л. и др. Химико-фармацевтический журнал, №9, 1990, с.41-44. *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2013122575A2 (en) * 2012-02-14 2013-08-22 Grl Small molecule having antiviral properties
WO2013122575A3 (en) * 2012-02-14 2014-05-01 Grl Small molecule having antiviral properties

Also Published As

Publication number Publication date
RU2007105908A (ru) 2008-08-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2294936C1 (ru) Натриевая соль 2-метилтио-6-нитро-1,2-4-триазоло[5,1-c]-1,2,4-триазин-7(4h)-она, дигидрат, обладающая противовирусной активностью
Tomé et al. Synthesis of glycoporphyrin derivatives and their antiviral activity against herpes simplex virus types 1 and 2
JP5809702B2 (ja) 新規化合物及びその製造方法
US11084796B2 (en) Heterocyclic derivatives for the treatment of RSV
RU2595038C1 (ru) Лекарственное средство с противовирусной активностью (варианты)
RU2404182C2 (ru) НАТРИЕВАЯ СОЛЬ 2-ЭТИЛТИО-6-НИТРО-1,2,4-ТРИАЗОЛО[5,1-c]-1,2,4-ТРИАЗИН-7-ОНА ДИГИДРАТ
RU2330036C1 (ru) НАТРИЕВАЯ СОЛЬ 5-МЕТИЛ-6-НИТРО-1,2,4,-ТРИАЗОЛО[1,5-a]ПИРИМИДИН-7-ОНА ДИГИДРАТ
RU2345080C2 (ru) 4-(4'-ГИДРОКСИБУТИЛ)-6-ФЕНИЛ-1,2,4-ТРИАЗОЛО[5,1-c][1,2,4]ТРИАЗИН-7-ОН
US10098899B2 (en) Drug with activity against the herpes virus family
RU2628456C1 (ru) Новые пиримидиновые ингибиторы репликации аденовируса человека
RU2365591C2 (ru) ЛЕКАРСТВЕННОЕ СРЕДСТВО, ОБЛАДАЮЩЕЕ ПРОТИВОВИРУСНЫМ ДЕЙСТВИЕМ И СОДЕРЖАЩЕЕ 2-МЕТИЛТИО-5-МЕТИЛ-6-НИТРО-1,2,4-ТРИАЗОЛО[1,5-a]ПИРИМИДИН-7(3Н)-ОН
RU2376307C1 (ru) 4-((Z)-4'-ГИДРОКСИБУТЕН-2'-ИЛ)-2-R-6-ФЕНИЛ-1,2,4-ТРИАЗОЛО[5,1-c][1,2,4]ТРИАЗИН-7-ОНЫ
EP0746559A1 (en) Pyrrolo(2,3-d)pyrimidine derivatives as antivirals
RU2402552C2 (ru) НАТРИЕВАЯ СОЛЬ 2-н-ПРОПИЛТИО-6-НИТРО-1,2,4-ТРИАЗОЛО[5,1-с]-1,2,4-ТРИАЗИН-7-ОНА ДИГИДРАТ И НАТРИЕВАЯ СОЛЬ 2-н-БУТИЛТИО-6-НИТРО-1,2,4-ТРИАЗОЛО[5,1-с]-1,2,4-ТРИАЗИН-7-ОНА ДИГИДРАТ
RU2536874C1 (ru) 2-МЕТИЛСУЛЬФАНИЛ-6-НИТРО-7-ОКСО-1,2,4-ТРИАЗОЛО[5,1-c] [1,2,4]ТРИАЗИНИД L-АРГИНИНИЯ ДИГИДРАТ, ОБЛАДАЮЩИЙ ПРОТИВОВИРУСНОЙ АКТИВНОСТЬЮ, СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ И ПРИМЕНЕНИЕ ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ ЛИХОРАДКИ ЗАПАДНОГО НИЛА
JPH01503457A (ja) 抗ウイルス剤
RU2644351C1 (ru) (3S)-4-[6-(Пурин-6-иламино)гексаноил]-3,4-дигидро-3-метил-7,8-дифтор-2Н-[1,4]бензоксазин и (3R)-4-[6-(Пурин-6-иламино)гексаноил]-3,4-дигидро-3-метил-7,8-дифтор-2Н-[1,4]бензоксазин, обладающие противовирусной активностью
JPS63287770A (ja) １−〔２−（ヒドロキシメチル）シクロアルキルメチル〕−５−置換ウラシル類
US6071905A (en) Biologically active substance on the basis of tetracyclic nitrogen heterocycles of pyrimidine row
RU2775551C2 (ru) 3-Нитро-4-гидрокси-7-пропаргилтио-[1,2,4]триазоло[5,1c][1,2,4]триазин и 3-нитро-4-гидрокси-7-этилтио-[1,2,4]триазоло[5,1c][1,2,4]триазин, обладающие противовирусной активностью
RU2246496C1 (ru) Вещество с противовирусной и антибактериальной активностью на основе производных 2,8-дитиоксо-1h-пирано[2,3-d, 6,5-d`] дипиримидина и их 10-аза-аналогов
RU2783659C1 (ru) 2-[5-(4-Метокси)-3-фенил-5,6-дигидро-4Н-[1,2,4,5]тетразин-1-ил]-бензотиазолы с противовирусной активностью в отношении вирусов Коксаки В3
EP1033369B1 (en) 5H-PYRANO [2,3-d:6,5-d']DIPYRIMIDINE DERIVATIVES HAVING AN ANTIBACTERIAL, ANTIVIRAL AND IMMUNO-MODULATING ACTIVITY
RU2529487C1 (ru) 5-метил-6-нитро-7-оксо-4,7-дигидро-1,2,4-триазоло[1,5-альфа]пиримидинид l-аргининия моногидрат
RU2340614C2 (ru) 2-r-4-(аллилоксиметил)-6-нитро-1,2,4-триазоло[5,1-с]-1,2,4-триазин-7(4н)-оны и 2-r-4-(пропаргилоксиметил)-6-нитро-1,2,4-триазоло[5,1-с]-1,2,4-триазин7(4н)-оны, обладающие противовирусным действием

Legal Events

Date Code Title Description
NF4A Reinstatement of patent

Effective date: 20110610

MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20190217