NO833526L - Fremgangsmaate for fremstilling av guanidinderivater med anti-virus-virkning - Google Patents

Description

Foreliggende oppfinnelse angår en fremgangsmåte for fremstilling av 1-monofosfatestere, 1,3-bisfosfatestere og sykliske fosfatestere av 9-(1,3-dihydroksy-2-propoksymetyl)guanin som er egnet til behandling av virus-infeksjoner i varmblodige og kaldblodige dyr.

Virusinfeksjoner er meget utbredt og fører til en lang

rekke symptomer. Enkelte virusinfeksjoner bekjempes lett av kroppens egen forsvarsmekanisme, mens andre er av mer alvorlig natur som fører til permanent skade, for eksempel blindhet eller til og med til død. En slik virusfamilie som kan forårsake alvorlige infeksjoner, er herpes virusgruppen.

De midler som idag anvendes for behandling av virusinfeksjoner, er i mange tilfeller ineffektive, eller hvis de er effektive, må de anvendes i store og/eller kontinuerlige doseringer som fører til alvorlige bivirkninger og/eller forgiftning. Det er derfor et behov for et effektivt anti-virus-middel som er effektivt ved lavere doseringer enn de midler som er tilgjenge-lige idag, slik at man reduserer muligheten for mulige bivirkninger og forgiftning.

Us-patent 4.199.574 beskriver forbindelser med den følgende

generelle formel:

hvor X er svovel eller oksygen, R i er hydrogen, halogen, hydroksy, alkoksy, azid, tio, alkyltio, amino, alkylamino eller dialkyl-amino; R 2 er hydrogen, halogen, alkyltio, acylamino, amino eller azid; R* er hydrogen, lineær eller forgrenet eller cyklisk alkyl, hydroksyalkyl, benzyloksyalkyl eller fenyl; R 4er hydrogen, hydroksy eller alkyl; R<5>er hydrogen, hydroksy, amino, alkyl, hydroksyalkyl, benzyloksy, benzoyloksy, benzoyloksymetyl,sulfa-moyloksy, fosfat, karboksypropiamyloksy, lineær eller cyklisk acyloksy med fra 1 til 8 karbonatomer, for eksempel acetoksy, ;eller en substituert karbamoylgruppe med formelen NHCO-Z hvor Z er alkyl, aryl eller aralkyl som eventuelt er substituert med ;en eller flere av sulfonyl, amino, karbamoyl eller halogen; R<6>er hydrogen eller alkyl, forutsatt at når X er oksygen og R , R , R dg k er hydrogen, er R ikke amino eller metylamino når R 5 er hydrogen eller hydroksy, eller et salt derav. ;Den klasse forbindelser som er representert ved ovenstående formel, og farmasøytisk godtagbare syreaddisjonsalter derav, er angitt å ha anti-virus-aktivitet. Se også Tetrahedron Letters, 21, 327 - 30 (1980), US-patent 4.323.573 og europeisk patent-ansøkning 49.072. ;Det er nu funnet at 1-monofosfatestere, 1,3-bisfosfatestere og cykliske fosfatestere av 9-(1,3-dihydroksy-2-propoksymetyl)-guanin og saltene derav er særlig aktive som anti-virus-midler. ;Foreliggende oppfinnelse angår fremstilling av forbindelser med den følgende formel ; hvor W er hydrogen eller Wa er eller W sammen med Wa er ; hvor hver B uavhengig av hver- ;andre er hydrogen eller et farmasøytisk godtagbart motion ( det vil si et ion med motsatt ladning av resten av molekylet), og x er 0, 1 eller 2. ;Forbindelsene med formel (I) kan innarbeides som aktiv bestanddel i farmasøytiske preparater. ;Virusinfeksjoner i varmblodige og kaldblodige dyr kan behandles ved anvendelse av forbindelsene med formel (I) eller et ;preparat inneholdende disse som aktiv bestanddel.;En foretrukket gruppe forbindelse med formel (I) er den hvor W er hydrogen og Wa er ; ; Innen denne gruppe foretrekkes at x er 0.;Særlig foretrekkes forbindelser hvor minst én B er et far-masøytisk godtagbart motion, særlig et natriumion, et kaliumion, et ammoniumion eller et morfoliniumion. ;Hvis ikke annet er angitt har de følgende uttrykk overalt de nedenfor angitte betydninger. ;"Faramasøytisk godtagbare motioner" viser til både uorganiske og organiske motioner. Uorganiske motioner omfatter ammonium, ionene av natrium, kalium, litium, kalsium, magnesium og lignende. Særlig foretrekkes et kaliumion, et natriumion og ammonium. Morioner avledet fra organiske, ugiftige baser omfatter motioner av primære, sekundære og tertiære aminer, substituerte aminer innbefattet naturlig forekommende substituerte aminer og cykliske aminer så-som isopropylamin, trimetyl-amin, dietylamin, trietylamin, tripropylamin, etanolamin, 2-dimetylaminoetanol, morfolin, 2-dietylaminoetanol, trometamin, dicykloheksylamin, etylendiamin, glukosamin, N-metylglukamin, piperazin, piperidin, N-etylpiperidin, og lignende. Foretrukne organiske ugiftige motioner er de som er avledet fra N-metylglukamin, dietylamin, piperazin, morfolin og dicykloheksylamin. Andre egnede aminer er de som er angitt i J. Pharm Sei, 6_6, 1 ;(1977). ;Når den følgende gruppe er bundet til oksygenet i forbindelsene med formel (I): ; betegnes den her som en "monofosfatester" når x er 0, som en "difosfatester" når x er 1, og som en "trifosfatester" når x er 2. Når bare en av W eller Wa er en fosfatester, betegnes forbindelsen med formel (I) som en (mono-, di- eller trifosfatester) ;og når både W og Wa er fosfatestere, betegnes forbindelsen med formel (I) som en bis(mono-, di- eller trifosfatester). Forbindelsen med formel (I) hvor W er hydrogen og Wa er den ovenstående fosfatgruppe hvor B er hydrogen og x er 0, betegnes for eksempel som 1 -(monofosfatester) av 9-(1,3-dihydroksy-2-propoksymetyl)guanin. Når W og Wa begge er den ovennevnte fosfatgruppe hvor B er hydrogen og x er 1, betegnes forbindelsen med formel (I) som 1,3-bis(difosfatester) av 9-(1,3-dihydroksy-2-propoksymetyl)guanin. ;Når gruppen ; ; er bundet til oksygenatomene i forbin- ;delsene med formel (I), betegnes den som en "cyklisk fosfatester". ;Forbindelsene med formel (I) oppviser kraftig anti-virus-aktivitet når de administreres til varmblodige og kaldblodige dyr, særlig pattedyr, fugler og fisker, men særskilt mennesker. For eksempel har forbindelsene fremstilt ifølge oppfinnelsen meget god aktivitet mot Herpes Simplex-virus I og II og beslek-tede virustyper så som cytomegalovirus, Epstein-Barr virus og varicella Zoster virus så vel som virushepatitt så som hepatitt ;B. ;Farmasøytiske preparater, både veterinærmedisinske og for mennesker, som inneholder de nye forbindelser med formel (I) for anti-virus bruk, fremstilles ved metoder og inneholder hjelpe-stoffer som er i og for seg kjente. En generelt anerkjent over-sikt over slike metoder og komponenter er Remington' s Pharma-ceutical Sciences av E.W. Martin, (Mark Publ. Co., 15th Ed., 1975). Liposomer kan også anvendes i farmasøytiske preparater inneholdende forbindelsene med formel (I), under anvendelse av i og for seg kjente metoder for eksempel som beskrevet i Szoka, F. Jr. et al, Ann . Rev . Biophys . Bioeng. 9_:467-508 (1 980), Schullery, S.E. et al, Biochemistry 19: 3919-3923 (1980) og Gregoriadis, G. et al, "Liposomes in Biological Systems", John Wiley and Sons ;(1980) . ;Forbindelsene fremstilt ifølge oppfinnelsen kan administreres parenteralt (for eksempel ved intravenøs, subkutan, intra-peritoneal eller intramuskulær injektsjon), oralt, lokalt, intra-nasalt eller rektalt. ;Preparatene administreres oralt eller parenteralt i doser;på ca. 0,1 til 300 mg/kg av forbindelsen med formel (I), for trinnsvis 1,0 til 30 mg/kg av pattedyrets kroppsvekt, og anvendes for mennesker i enhetsdose-form, administrert en til fem ganger daglig i en mengde på 10 til 500 mg pr. enhetsdose. For oral administrering kan fine pulvere eller granuler inneholdende for-tynnings-, dispergerings- og/eller overflateaktive midler, og kan tilberedes i et flytende preparat, i vann eller i en sirup; i kapsler eller poser i tørr tilstand eller i en ikke-vandig opp-løsning eller suspensjon, hvor suspenderingsmidler kan være tilstede; i tabletter hvor bindemidler og smøremidler kan være tilstede; eller i en suspensjon i vann eller en sirup. Når det ønskes eller er nødvendig kan smakstoffer, konserveringsstoffer, suspenderingsmidler, fortykningsmidler eller emulgeringsmidler være tilstede. Tabletter og granuler foretrekkes, og disse kan belegges. Mengden av forbindelse med formel (I) i preparatet kan variere fra 0,1 vekt% til 99 vekt% eller mer av forbindelsen basert på det totale preparat, og hjelpestoffmengden kan være fra ca. 99,9 til 1 vekt%. Fortrinnsvis er forbindelsen tilstede i en mengde på 10 til 95 vekt%. ;For parenteral administrering eller for administrering som dråper, for eksempel for øyeinfeksoner, kan forbindelsene tilberedes i vandig oppløsning i en konsentrasjon fra ca. 0,1 til 10%, særlig ca. 0,1 til 7%. Oppløsningen kan inneholde antioksy-dasjonsmidler, buffere og andre egnede tilsetningsstoffer. ;Alternativt for infeksjoner i øyet eller annet utvendig vev, for eksempel munnen og huden, påføres preparatene fortrinnsvis på den infiserte del av pasientens kropp lokalt som en salve, krem, aerosol eller pulver, fortrinnsvis en salve eller krem. Forbindelsene kan tilberedes i en salve, for eksempel med et vannløselig salvegrunnlag, eller en krem, for eksempel med et olje-i-vann kremgrunnlag, i en konsentrasjon fra ca. 0,01 til 10%, fortrinnsvis 0,1 til 7%, særlig foretrukket ca. 4,0% vekt/ volum. Dessuten kan virusinfeksjoner behandles ved anvendelse av et leveringsystem med langvarig frigjøring, som beskrevet i US-patent 4.217.898. ;For aerosol-administrering foreligger det aktive stoff fortrinnsvis i findelt form sammen med et overflateaktivt middel og et drivmiddel. Typiske prosentmengder aktiv bestanddel er 0,01 til 20 vekt%, fortrinnsvis 0,04 til 1,0%. ;Overflateaktive midler må selvsagt være ugiftige og for trinnsvis oppløselige i drivmidlet. Representative for slike midler er estrene eller partialestrene av fettsyrer inneholdende fra 6 til 22 karbonatomer så som kapronsyre, oktansyre, laurin-syre, palmitinsyre, stearinsyre, linolsyre, linolensyre, elaidin-syre og oljesyre med en alifatisk, flerverdig alkohol eller dens cykliske anhydrid, som for eksempel etylenglykol, glycerol, erytritol, arabitol, mannitol, sorbitol, og heksitol-anhydridene avledet fra sorbitol,(sorbitanestere som selges under varemerket "Span") og polyoksyetylen- og polyoksypropylen-derivatene av disse estere. Blandede estere så som blandede eller naturlige glycerider, kan anvendes. De foretrukne overflateaktive midler er oleatene eller sorbitan, for eksempel de som selges under varemerkene "Arlacel C" (sorbitanseskioleat), "Span 80" (sorbi-tanmonooleat) og "Span 85" (sorbitantrioleat). Det overflateaktive middel kan utgjøre 0,1 til 20% av preparatets vekt, fortrinnsvis 0,15 til 5%. ;Resten av preparatet er vanligvis drivmiddel. Flytendegjorte drivmidler er typisk gasser med normale betingelser og kondenseres under trykk. Blandt egnede flytendegjorte drivmidler er de lavere alkaner inneholdende opptil fem karbonatomer, ;så som butan og propan; og fortrinnsvis fluorerte eller fluor-klorerte alkaner så som de som selges under varemerket "Freon". Blandinger av disse kan også anvendes. ;Ved fremstilling av en aerosol, fylles en beholder utstyrt med en egnet ventil, med et passende drivmiddel som inneholder den findelte, aktive bestanddel og overfalteaktivt middel. ;Disse bestanddeler holdes således ved forhøyet trykk inntil trykket frigjøres ved å betjene ventilen. ;Forbindelsene fremstilt ifølge oppfinnelsen eller preparater inneholdende disse er også nyttige for behandling av andre pattedyr enn mennesker, til behandling av fugler, for eksempel høner og kalkuner, og kaldblodige dyr, for eksempel fisk. Forbindelsene fremstilt ifølge oppfinnelsen og preparater inneholdende disse har anti-virus aktivitet for eksempel mot de følgende ikke-humane virustyper: ;Sciruid herpesvirus 1;Cavlid herpesvirus 1 ;Lagomorph herpesvirus 1 ;Phasianid herpesvirus 1 ;Phasianid herpesvirus 2 (Marek's sykdom) ;Turkey herpesvirus 1 ;Anatid herpesvirus 1 ;Catfish herpesvirus 1 ;Equid herpesvirus 3;Bovid herpesvirus 1 ;Bovid herpesvirus 2 ;Bovid herpesvirus 3 ;Bovid herpesvirus 4 ;Pig herpesvirus 1 ;Pig herpesvirus 2 ;Murid herpesvirus 1 ;Cebid herpesvirus 1 ;Cebid herpesvirus 2 ;Tupaiid herpesvirus 1 ;Canine herpesvirus 1 ;Feline herpesvirus 1 ;Equid herpesvirus 1 ;Equid herpesvirus 2 ;Fuglevirussykdommer så som Marek's sykdom og lignende for-hindres og/eller behandles ved hjelp av forbindelser fremstilt ifølge oppfinnelsen, ved metoder som er velkjente innen veteri-nærmedisinen, som for eksempel ved å injisere fuglene med preparatet inneholdende forbindelsen eller ved å sette forbindelsen fremstilt ifølge oppfinnelsen til for eller drikkevann. ;Fisk som er i et begrenset område så som en dam, et akva-rium eller en oppbevaringstank, kan også behandles mot virus-infeksjoner så som herpeslignende virus, for eksempel "channel catfish virus" (CCV), herpes-virus salomones, Nerka virus og lignende ved at forbindelsen settes direkte til vannet i dammen, akvariet eller oppbevaringstanken eller ved å innarbeide for-findelsene i foret. ;Det nøyaktige administreringsopplegg for forbindelsene og preparatene inneholdende dem vil nødvendigvis være avhengig av behovene til det individ som behandles, behandlingstype og selvsagt den praktiserende leges bedømmelse. ;Forbindelsene med formel (I) kan fremstilles fra en forbindelse med formel (X) som fremstilles ved reaksjonsforløp (II). Forbindelsen med formel (V), som er et mellomprodukt som anvendes i reaksjonsforløp (II), fremstilles ifølge reaksjonsforløp (I). ; I reaksjonsforløp (I) fremstilles forbindelsen med formel (III) ved at epiklorhydrin (II) settes dråpevis til en oppløsning av et alkalimetallsalt, fortrinnsvis natriumsaltet, av eventuelt substituert benzylalkohol i et oppløsningsmiddel så som dimetylformamid, dimetylacetamid, heksametylfosforamid, dimetylsulfoksyd, sulfolan, tetrahydrofuran eller dioksan, ved en temperatur på ;ca. 0 - 100°C, fortrinnsvis ved ca. 15 - 40°C. Reaksjonsblandingen omrøres fra ca. 10 til 24 timer, fortrinnsvis fra ca. 12 til 18 timer, ved en temparetur fra ca. 0 - 100°C, fortrinnsvis fra ca. 20 - 50°C. ;Forbindelsen med formel (III) klormetyleres til en forbindelse med formel (IV) ved å boble tørr hydrogenkloridgass inn i en oppløsning av forbindelsen og paraformaldehyd oppløst i et halogenert hydrokarbon-oppløsningsmiddel så som i kloretan, kloroform, diklormetan eller 1,1,2-trikloretan, avkjølt til en temperatur fra ca. 0 til 25°C, fortrinnsvis ca. 0°C. Hydrogen-kloridgassen tilsettes i løpet av 30 minutter til 3 timer, fortrinnsvis fra 1 til 2 timer, inntil paraformaldehydet er oppløst. Oppløsningen holdes ved en temperatur fra ca. 0 til 10 oC i ca. 12 til 48 timer, fortrinnsvis ved fra ca. 0 til 5°C i ca. 16 til 24 timer. ;Forbindelsen med formel (V) fremstilles ved at et alkali-metallacetat så som natriumacetat, omsettes med en forbindelse med formel (IV) oppløst i et oppløsningsmiddel så som dimetylformamid, tetrahydrofuran, dimetylacetamid, heksametylfosforamid, dimetylsulfoksyd, sulfolan eller dioksan, ved en temperatur fra ca. 0 til 45°C, fortrinnsvis fra ca. 0 til 25°C. Opp-løsningen omrøres fra ca. 5 til ca. 24 timer, fortrinnsvis fra ca. 10 til ca. 18 timer, ved en temperatur fra ca. 10 til ca. 30°C, fortrinnsvis ca. 15 til 25°C. ;I reaksjonsforløp (II) fremstilles en forbindelse med formel (VII) ved at guanin (VI) oppvarmes med ufortynnet eddiksyrean-hydrid ved tilbakeløpstemperatur i ca. 10 til 24 timer, fortrinnsvis ca. 12 til 18 timer. ;N 2, 9-diacetylguanin med formel (VII) omsettes med en forbindelse med formel (V) for å danne en forbindelse med formel (VIII) i ufortynnet tilstand eller i et oppløsningsmiddel så som dioksan, sulfolan eller lignende, i nærvær av en katalytisk mengde av en syre så som bis(p-nitrofenyl)fosfat, toluensulfon-syre, metylfosfonsyre eller dikloreddiksyre, fortrinnsvis bis-(p-nitrofenyl)fosfat ved en temperatur fra ca. 75 til 200°Cf fortrinnsvis ca. 110 til 180°C. Omsetningen utføres vanligvis under anvendelse av 0,8 til 1,2 mol forbindelse med formel (V) til et mol av forbindelsen med formel (VII). ;De beskyttende benzylgrupper fjernes fra forbindelsen med formel (VIII) ved katalytisk hydrogenering for å danne forbindelsen med formel (IX). En katalysator så som palladium-på-kull i en oppslemming, settes til en oppløsning av forbindelsen med formel (VIII) oppløst i et oppløsningsmiddel så som vandig metanol. Hydrogen settes til oppløsningen ved et trykk på 1,0 til 14 kg/cm 2 , fortrinnsvis ved et trykk på o 2,1 til 5,6 kg/cm 2. ;Forbindelsen med formel (X) fremstilles ved deacetylering;av forbindelsen med formel (IX) med en base så som ammoniak opp-løst i en alkohol så som metanol. En oppløsning av forbindelsen med formel (IX) og basen omrøres i ca. 5 til 36 timer, fortrinnsvis i ca. 10 til 24 timer, ved en temperatur fra ca. 10 til 30°C, fortrinnsvis ca. 15 til 25°C. ;Forbindelse med formel (I) hvor W er hydrogen og Wa er ;-P(0)(OH>2, kan fremstilles ifølge reaksjonsforløp (III). hvor Bz er benzoyl eller en trifenylmetyl-gruppe. ;Ifølge reaksjonsforløp (III) omsettes en forbindelse med formel (X) med en beskyttende silyl-forbindelse så som t-butyldimetylsilylklorid, i et oppløsningsmiddel så som trimetylfor-mamid, N-metylpyrrolidon, pyridin og lignende. Reaksjonsblandingen omrøres ved en temperatur fra -5°C til romtemperatur, fortrinnsvis ved 0°C i 1/2 til 4 timer, fortrinnsvis 2 timer. Den resulterende sirupaktige rest settes til vann, hvorpå en forbindelse med formel (XI) utfelles. Forbindelsen med formel (XI) oppløst i et oppløsningsmiddel så som pyridin, lutidin, diklormetan inneholdende trietylamin, og lignende, omsettes med benzoylklorid ved en temperatur fra -5 til 10°C, fortrinnsvis 0°C. Blandingen får oppvarmes til romtemperatur. Etter 18 til 36 timer, fortrinnsvis 24 timer, avdampes oppløsningsmidlet og den rå forbindelse med formel (XII) renses delvis på vanlig måte så som ved kromatografi. Forbindelsen med formel (XIII) fremstilles ved at forbindelsen med formel (XII) behandles med en syre så som 80% eddiksyre ved 50 til 100°C, fortrinnsvis 80°C i 1 til 6 timer, fortrinnsvis 3 til 4 timer, hvorved den beskyttende silylgruppe fjernes. ;Forbindelsen med formel (XIV) fremstilles fra forbindelsen med formel (XIII) ved behandling med et fosforylerende middel så som pyrofosforylklorid. Forbindelsen med formel (XIII) i et oppløsningsmiddel så som etylacetat, acetonitril, kresol og lignende, fortrinnsvis etylacetat, avkjøles til -5 til 10°C, fortrinnsvis 0°C. Det fosforylerende middel så som pyrofosforylklorid, tilsettes. Reaksjonen stanses ved tilsetning av is etter 1 til 4 timer, fortrinnsvis etter 1 1/2 til 3 timer. Reaksjonsblandingen nøytraliseres ved tilsetning av en base så som natriumhydrogenkarbonat. Forbindelsen med formel (XIV) utvinnes og hydrolyseres med en base så som ammoniumhydroksyd, natriumhydroksyd og lignende, for å danne forbindelsen med formel (I). Forbindelsen med formel (I) hvor W er hydrogen og Wa er -P(0)(0H)2, utvinnes som sitt salt på i og for seg kjent måte, for eksempel ved kromatografi. ;En annen fremgangsmåte for fremstilling av en forbindelse med formel (I) omfatter at en forbindelse med formel (X) omsettes med et trifenylmetyl-beskyttelsesmiddel så som trifenylmetyl-klorid (tritylklorid), 4-metoksyfenyl(difenyl)-metylklorid og lignende, for å danne en forbindelse med formel (XIII) hvor R ;er en trifenylmetyl-gruppe. En oppløsning av forbindelsen med formel (X), beskyttelsesmidlet og en katalytisk mengde av et amin så som 4-dimetylaminopyridin eller trietylamin, i et opp-løsningsmiddel så som dimetylformamid, pyridin og lignende, omsettes i 1/2 til 4 timer, fortrinnsvis i 1 til 3 timer ved 25 til 60°C, fortrinnsvis 30 til 50°C. Forbindelsen med formel (XIII) utvinnes ved eluering på en kolonne av silikagel. ;Forbindelsen med formel (XIV) hvor R er en trifenylmetyl-gruppe, fremstilles ved at en forbindelse med formel (XIII) hvor R er en trifenylmetyl-gruppe, omsettes med et fosforylerende middel så som cyanoetylfosfat. Reaksjonskomponentene, i et opp-løsningsmiddel så som pyrridin, lutidin og lignende, omsettes i nærvær av et kondenseringsmiddel så som dicykloheksylkarbodiimid, ved 15 til 30°C, fortrinnsvis fra 20 til 30°C, i 1 til 5 dager, fortrinnsvis 1 1/2 til 3 dager, fulgt av inndampning og behandling av residuet med ammoniumhydroksyd i 1 til 12 timer, fortrinnsvis 1 1/2 til 8 timer, ved ca. 40 til 90°C, fortrinnsvis 50 til 80°C. Forbindelsen med formel (XIV) hvor R er en trifenylmetyl-gruppe, kan også fremstilles ved at en forbindelse med formel (XIII) hvor R er en trifenylmetyl-gruppe, omsettes med et fosoksylerende middel så som bis(p-nitro-fenyletyl)fos-forklorid fremstilt ifølge fremsgangsmåten beskrevet i Tetra. Lett. 23, 4793 (1982) i et oppløsningsmiddel så som pyridin, lutidin og lignende, ved romtemperatur i ca. 1/2 time til 3 dager, fortrinnsvis 18 til 36 timer. Produktet fra denne reaksjonen omsettes med 1 , 5-diazabicyklo [5 , 4 , o] undecen-5 i et oppløsnings-middel så som pyridin, ved romtemperatur i ca. 1/2 time til 3 dager, fortrinnsvis 18 til 36 timer. Forbindelsen med formel (XIV) hvor R er en trifenylmetyl-gruppe, utvunnet ved kromatografi, omdannes til monoamoniumsaltet av en forbindelse med formel (I) ved å fjerne beskyttelsesgruppene med en syre så som eddiksyre, fulgt av en base så som ammoniumhydroksyd. ;Forbindelser med formel (I) hvor W og Wa er -P(0)(0~Na<+>)2kan fremstilles i henhold til det følgende reaksjonsforløp. hvor W og Wa er som angitt ovenfor. ;Ifølge reaksjonsforløp (IV) kan en forbindelse med formel (I) hvor W og Wa er som angitt ovenfor, fremstilles ved at en forbindelse med formel (X) omsettes med et fosforylerende middel så som pyrofosforylklorid. Forbindelsen med formel (X) i et oppløsningsmiddel så som etylacetat, azetonitril, dioksan og lignende, fortrinnsvis etylacetat, avkjøles til -5 til 10°C, fortrinnsvis til 0°C. Det fosforylerende middel tilsettes dråpevis i løpet av 2 til 5 minutter, fortrinnsvis 3 minutter. Efter 1 til 4 timer, fortrinnsvis efter 2 timer, bråkjøles reaksjonsblandingen ved tilsetning av is, fulgt av nøytralise-ring med en base så som natriumhydrogenkarbonat. Forbindelsen med formel (I) utvinnes på vanlig måte så som kromatografi fulgt av omkrystallisering. ;Forbindelser med formel (I) hvor W sammen med Wa er en cyklisk fosfatester, fremstilles ved ringslutning av forbindelse med formel (I) hvor W er hydrogen og Wa er P(0)(0~Na<+>)2. Denne forbindelse omdannes til den frie syre ved at en oppløsning som inneholder forbindelsen, føres gjennom en ionebytterharpiks så som "Dowex" 50-X8. Den frie syre omdannes til et ikke-polart salt ved behandling med et lipofilt amin så som 4-morfolin-N,N<1>-dicykloheksyl-karboksamidin fremstilt ved fremsgangsmåten beskrevet i J. Am. Chem Soc., 83:649 (1961) i en oppløsningsmid-delblanding så som pyrridin/vann. Det resulterende mellomprodukt i et oppløsningsmiddel så som pyrridin, lutidin og lignende, settes dråpevis til en tilbakeløpskokende oppløsning av et kondenseringsmiddel så som dicykloheksylkarbodiimid, i et oppløsnings-middel så som pyrridin, lutidin og lignende. Når tilsetningen er fullført, tilbakeløpsbehandles blandingen i 1 1/2 til 4 timer, fortrinnsvis 2 til 3 timer. Den cykliske fosfatester utvinnes som saltet, så som kalium eller trialkylammoniumsaltet, efter preparativ høytrykk-væskekromatografi ved eluering med for eksempel en kaliumfosfatbuffer eller en trialkylammoniumkarbo-nat-oppløsning. ;Forbindelser med formel (I) hvor W sammen med Wa er en cyklisk fosfatester, fremstilles ved at en oppløsning av et fosoksylerende middel så som pyrofosfoksylklorid i et oppløs-ningsmiddel så som vannfritt acetonitril i 30 til 90 minutter, fortrinnsvis ca. 60 minutter, settes til en omrørt suspensjon av en forbindelse med formel (X) i et oppløsningsmiddel så som vannfritt acetonitril ved ca. romtemperatur. Efter fullførelse av tilsetningen omrøres reaksjonsblandingen, bråkjøles med is og omrøres derefter ved omtrentlig romtemperatur i ca. 10 til 60 minutter, fortrinnsvis 20 til 45 minutter. Konsentrert base, så som ammoniumhydroksyd, tilsettes, og derefter konsentreres oppløsningen i vakuum. Residuet, oppløst i ca. 50 ml vann, absorberes på en kolonne med aktivt kull, vaskes med vann og elueres derefter med en vann/etanol-blanding inneholdende ammoniumhydroksyd. Elueringsmidlet inndampes til tørrhet, og residuet omkrystalliseres fra vann/etanol for å gi den cykliske fosfatester av 9-(1,3-dihydroksy-2-propoksymetyl)guanin som monoammoniumsaltet. Forbindelsen har smeltepunkt 230 til 233°C med dekomponering. ;For å fremstille forbindelsene med formel (I) hvor x er 1 fremstilles morfolinofosfatderivatet av forbindelser med formél (I) ved omsetning av en forbindelse med formel (X) eller en forbindelse med formel (XIII) med morfolino-di-benzotriazolfosfat som beskrevet i Nucl. Ac. Res. 10, 2337 (1982). Benzotriazol-ringen fjernes ved fremgangsmåten beskrevet på side 2347 i nevnte artikkel. Denne forbindelse omsettes med 0,5M tributylammonium-fosfat i dimetylformamid ved 50°C i 16 timer som beskrevet i J. Org. Chem., 46, 2246 (1981) for å danne forbindelser med formel (I) hvor x er 1, for eksempel 1-mono(difosfatester) av 9-(1,3-dihydroksy-2-propoksymetyl)guanin. Trifosfatet av forbindelsene med formel (I) (forbindelse hvor x er 2), for eksempel 1,3-bis (trifosfatester) av 9-(1,3-dihydroksy-2-propoksymetyl)guanin, fremstilles ved at den ovennevnte morfolinofosfatforbindelse omsettes med 0,5M tributylammoniumpyrofosfat i dimetylformamid ved 40°C i 6 timer. Trifosfatet av forbindelser med formel (I) kan også fremstilles fra monofosfatet ved fremgangsmåtene beskrevet i J. Am. Chem. Soc. , 87, 1785 (1 965) og Nuc. Ac. Res. , 2003 (1981). ;Forbindelser med formel (I) hvor B er hydrogen, det vil si den frie syre, kan fremstilles ved at en oppløsning av en forbindelse med formel (I) hvor B er et motion så som et alkali-metallion, for eksempel et natrium- eller kaliumion, føres gjennom en ionebytterharpiks som beskrevet ovenfor. ;Forbindelser med formel (I) hvor B er et motion, særlig alkalimetallionene eller et ammoniumion, kan fremstilles in situ som illustrert i reaksjonsforløp (III) og (IV) eller ved ionebytting av kalsiumionet med det ønskede motion. Kalsiumsaltet fremstilles ved å blande en alkoholisk, for eksempel etanolisk, oppløsning av kalsiumklorid med en forbindelse med formel (I) hvor B er et motion, så som natrium- eller kaliumionet oppløst i en alkohol så som etanol. Det resulterende kalsiumsalt utfelles. Kalsiumsaltet omdannes til andre ønskede salter ved ionebytting ved at en oppløsning inneholdende kalsiumsaltet føres gjennom en passende kationebytterharpiks så som en "Dowex" 50 harpiks som inneholder det ønskede motion. ;Alternativt kan forbindelser med formel (I) hvor B er et farmasøytisk godtagbart motion, fremstilles ved først å danne den frie syre som beskrevet ovenfor, og derefter omsette den frie syre med den passende motion-kilde. ;De følgende Fremstillinger illustrerer fremstilling av forskjellige utgangsmaterialer, mens Eksemplene illustrerer fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen. ;FREMSTILLING I;Fremstilling av 1, 3- di- 0- benzylglycerol;Natriumhydrid (100 g (50% dispersjon i mineralolje), 2,08 mol) ble vasket to ganger med 1 1 heksan og derefter tørket under nitrogen. Tørt dimetylformamid (1,5 1) ble tilsatt. Benzylalkohol (400 ml) ble derefter tilsatt med en slik hastig-het at temperaturen ble holdt under 50°C. Tilsetningen tok 2 timer. Epiklorhydrin (92,5 g, 1 mol) ble derefter tilsatt dråpevis i løpet av 1/2 time under isavkjøling for å holde temperaturen under 40°C. Oppløsningen ble derefter omrørt i 16 timer ved 21°C og derefter i 2,5 timer ved 50°C. Dimetyl-formamidet ble derefter fjernet ved avdampning ved redusert trykk. Den oljeaktige rest ble oppløst i 2,5 1 dietyleter. Den organiske oppløsning ble vasket med 2 1 vann, 2 12% salt-syre, 2 11% natriumbikarbonat og 1 1 saltvann, tørket over natriumsulfat og konsentrert til en brun olje. Destillasjon ga 147,8 g 1,3-di-O-benzylglycerol (kp 170-180°C/1 torr). ;FREMSTILLING II;Fremstilling av 1, 3- di- 0- benzyl- 2- 0- klormetylglycerol ;Tørr hydrogenkloridgass ble i 1,5 timer boblet inn i en oppløsning av 1,3-di-O-benzylglycerol fra Fremstilling I (15 g, 55 mmol) og paraformaldehyd (3,3 g, 110 mmol) i 175 ml 1,2-di-kloretan ved 0°C. Oppløsningen ble derefter lagret i en lukket kolbe i 21 timer ved 4°C. Derefter ble oppløsningen tørket over magnesiumsulfat med oppvarmning til 21°C og derefter filtrert og konsentrert for å gi 17,5 g 1,3-di-0-benzyl-2-0-klormetylglycerol. ;FREMSTILLING III;Fremstilling av 2- 0- acetoksymetyl- 1, 3- di- O- benzylglycerol ;Til en oppløsning av 1,3-di-0-benzyl-2-0-klormetylglycerol fra Fremstilling II (17,5 g, 55 mmol) i 400 ml dimetylformamid ved 0°C under et tørrerør ble satt natriumacetat (6 g). Opp-løsningen ble derefter oppvarmet til 21°C og magnetisk omrørt i 15 timer. Oppløsningsmidlet ble fjernet ved avdampning ved redusert trykk, og den oljeaktige rest ble oppløst i 450 g dietyleter. Eteroppløsningen ble vasket én gang med 750 ml vann, to ganger med 250 ml vann, og én gangs med 250 ml saltoppløsning, tørket over natriumsulfat og konsentrert for å gi 19 g 2-0-acetoksymetyl-1,3-di-O-benzylglycerol som en olje. ;FREMSTILLING IV;Fremstilling av N_2, 9- diacetylguanin;Guanin (20 g, 0,132 mol) ble blandet med 300 ml eddiksyre-anhydrid, og blandingen ble oppvarmet under tilbakeløpskjøling i 16 timer. Blandingen ble avkjølt, og overskudd av eddiksyre-anhydrid ble fjernet ved avdampning ved redusert trykk. Residuet ble omkrystallisert fra dimetylsulfoksyd for å gi 25,6 g N 2,9-diacetylguanin. ;FREMSTILLING V;A. Fremstilling av N 2- acetyl- 9-( 1, 3- dibenzyloksy- 2-propoksymetyl) guanin ;N 2,9-diacetylguanin fra Fremstilling IV (15,61 g>66 mmol), 2-0-acetoksymetyl-1,3-di-O-benzylglycerol fra Fremstilling III (19 g, 55 mmol), og bis(p-nitrofenyl)-fosfat (0,5 g) ble omrørt sammen med 150 ml dietyleter. Oppløsningsmidlet ble fjernet ved avdampning, og residuet ble oppvarmet i 175°C oljebad i 1,5 timer under en nitrogenstrøm. Kolonnekromatografi med eluering med 1 :9 metanol/metylenklorid fulgt av omkrystallisering fra etylacetat ga 4,76 g N 2-acetyl-9-(1,3-dibenzyloksy-2-propoksymetyl) guanin smp 145 - 146°C. ;B. Fremstilling av N2- acetyl- 9-( 1, 3- dihydroksy- 2-propoksymety1) guanin ;Til en oppløsning avN<2->acetyl-9-(1,3-dibenzyloksy-2-propoksymetyl)guanin (4,62 g, 9,67 mmol) i 150 ml metanol pluss 40 ml vann ble satt 20% palladiumhydroksyd-på-kull som en oppslemming i 10 ml vann. Blandingen ble hydrogenert på en Parr hydrogenator ved 4,2 kg/cm 2 hydrogentrykk i 38 timer og ble derefter filtrert gjennom "Celite" og konsentrert til et hvitt, fast stoff. Omkrystallisering fra metanol/etylacetat ga 1,4 g N 2-acetyl-9-(1,3-dihydroksy-2-propoksymetyl)guanin, smp 205 - 208°C. ;Moderluten ble redusert ytterligere med 10% palladium-på-kull (1 g) i 150 ml metanol pluss 50 ml vann ved 4,2 kg/cm 2 i 47 timer. Det totale utbytte av N 2acetyl-9-(1,3-dihydroksy-2-propoksymetyl)guanin var 2,11 g. ;C. Fremstilling av 9-( 1, 3- dihydroksy- 2- propoksymetyl) guanin ;N 2-acetyl-9-(1,3-dihydroksy-2-propoksymetyl)guanin (721,9 mg, 2,4 mmol) ble omrørt med 50 ml metanolisk ammoniakoppløsning (metanol mettet med ammoniak ved 0°C) i 17 timer ved 21°C. Opp-løsningen ble konsentrert til et hvitt, fast stoff, og residuet ble omkrystallisert fra metanol for å gi 582,3 mg 9-(1,3-dihydroksy-2-propoksymetyl)guanin, smp 250°C dekomp. ;FREMSTILLING VI;A. 9-(1,3-dihydroksy-2-propoksymetyl)guanin (3,0 g), imidazol (2,0 g), t-butyldimetylsilylklorid (2,13 g)<p>g tørt dimetylformamid (40 ml) ble omrørt sammen ved 0°C i 2 timer og derefter inndampet i vakuum. Den sirupaktige rest ble opptatt i vann, hvilket forårsaket utfelling av et råprodukt. Det faste stoff ble frafiltert, skyllet med vann, derefter med toluen og derefter tørket i vakuum. ;B. Til en 0°C oppløsning av det tørkede, urensede mono-t-butyl-dimetylsilylderivat fremstilt i del (A) i pyrridin (100 ml) ble satt benzoylklorid (5 ml). Blandingen fikk komme til romtemperatur (21°C) og ble holdt i 24 timer før inndamping i vakuum. Residuet ble kromatografert på en kolonne av silikagel (300 g) under anvendelse av gradient-eluering med 2 1 diklormetan og 2 1 5% metanol i diklormetan. En grovseparering ga 3,5 g ravfarvet skum bestående hovedsakelig av 9-(1-benzoyloksy-3-t-butyldimetyl-silyloksy-2-propoksymetyl)-N 2-benzoylguanin. ;C. Råproduktet fremstilt i del (B) ble behandlet direkte med 80% eddiksyre (50 ml) ved 80°C i 3,5 time. Efter avdampning av oppløsningsmidlet ble den resulterende rest kromatografert på ;en silikagelkolonne (500 g) under anvendelse av 8% metanol i diklormetan som oppløsningsmiddel. Inndampning av passende fraksjoner ga rent 9-(1-benzoyloksy-3-hydroksy-2-propoksymety1)-N 2benzoyl-guanin (611 mg) som et skum. ;FREMSTILLING VII;En oppløsning av 9-(1,3-dihydroksy-2-propoksymetyl)guanin (8,18 g), monometoksytritylklorid (21,7 g) trietylamin (13,3 ml) og 4-dimetylaminopyrridin (0,08 g) i dimetylformamid (100 ml) ble omrørt under vannfrie betingelser i 2 timer ved 40°C, brå-kjølt med metanol og derefter inndampet i vakuum. Råproduktet ble oppløst i etylacetat (500 ml), og oppløsningen ble vasket med vandig natriumbikarbonat (500 ml, 300 ml) og vann (300 ml), tørket over magnesiumsulfat og derefter inndampet i vakuum. Råproduktet ble oppvarmet i etanol (800 ml), avkjølt og filtrert. Filtratet ble inndampet i vakuum og derefter kromatografert på en silikagelkolonne (500 g) med eluering med 1:14 metanol/diklormetan (volum/volum). Produktet ble krystallisert fra etanol for å gi 11,2 g N 2-monometoksytrityl-9-(1-monometoksy-trityloksy-3-hydroksy-2-propoksymetyl)guanin, smp 159 - 160°C. ;EKSEMPEL 1;Til en omrørt suspensjon av 9-(1-benzoyloksy-3-hydroksy-2-propoksymetyl)-N 2-benzoylguanin (463 mg) fremstilt i Fremstilling VI i etylacetat (10 ml) avkjølt til 0°C, ble satt pyrofosforylklorid (0,75 ml). Efeter 2 timer ble reaksjonsblandingen brå-kjølt ved tilsetning av is og derefter bragt til pH 5 ved tilsetning av fast natriumhydrogenkarbonat, slik at det fosforylerte produkt kom ut av oppløsningen som en olje. Væsken på toppen ble avdenkantert, og den gjenværende rest ble oppløst i vann og ekstrahert med 10% butanol i diklormetan (volum/volum). Den vandige fase ble inndampet i vakuum for å gi nesten rent, fullstendig beskyttet fosforylert produkt. Dette produkt ble behandlet direkte med konsentrert ammoniumhydroksyd (10 ml) i 16 timer ved 40°C. Oppløsningen ble derefter inndampet i vakuum til et vått, fast stoff som ble oppløst i vann og ekstrahert med 10% butanol i diklormetan (volum/volum). Den vandige fase ble derefter påført på en kolonne av "Sephadex" G-10 harpiks (2,5 cm x 75 cm) og eluert med vann. Rene produktholdige fraksjoner ble samlet, konsentrert ved inndampning og derefter lyofilisert for å gi 1 -(monofosfatester) av 9-(1,3-dihydroksy-2-propoksymetyl)guanin-natrium-ammoniumsalt (276 mg) sm.p. 215 - 220°C som et amorft, fast stoff. ;EKSEMPEL 2;Til en 0°C omrørt suspensjon av 9-(1,3-dihydroksy-2-propoksymetyl)guanin (500 mg) i etylacetat (20 ml) ble satt pyrofosforylklorid (1,5 ml) dråpevis i løpet av 3 minutter. Efter 2 timer ble den nu klare reaksjonsblanding bråkjølt ved tilsetning av is (10 g) og derefter nøytralisert med fast natriumhydrogenkarbonat. Den vandige fase ble isolert og renset på en kolonne av "Sephadex" G-10 harpiks under anvendelse av vann som elueringsmiddel. Inndampning av de passende fraksjoner ga en sirupaktig rest som krystalliserte fra dimetylformamid. Vasking av krystallene med metanol og tørking i vakuum ga 725 mg ren 1,3-bis(monofosfatester) av 9-(1,3-dihydroksy-2-propoksymetyl)guanin som tetra-natriumsaltet. ;EKSEMPEL 3;1-mono(monofosfatester) av 9-(1,3-dihydroksy-2-propoksymetyl) ;-guanin-dinatriumsalt (180 mg) ble omdannet til den frie syre ved å bli ført gjennom en kolonne av "Dowex" 50-X8 kationebytterharpiks (10 ml) under anvendelse av vann som elueringsmiddel. Avdampning av vannet efterlot den frie syre som et farveløst glass (170 mg). Dette residum ble oppløst i blanding av pyrridin (10 ml) og vann (5 ml) inneholdende 4-morfolino-N,N<1->dicyklo-heksylkarboksamidin (138 mg) og ble derefter inndampet i vakuum. Residuet ble derefter medinndampet tre ganger med 10 ml porsjoner pyrridin. Den oppløsning av det resulterende skum i pyrridin (60 ml) ble satt dråpevis over 45 minutter til en tilbakeløps-kokende oppløsning av dicykloheksylkarbodiimid (194 mg) i pyrridin (50 ml). Da tilsetningen var fullstendig, ble blandingen tilbake-løpsbehandlet i ytterligere 2,75 timer før den ble inndampet i vakuum til et hvitt, fast stoff. En oppløsning av det faste stoff i vann (30 ml) ble ekstrahert tre ganger med et likt volum eter og ble derefter konsentrert i vakuum til ca. 1 ml. Den konsen- ;trerte oppløsning ble renset ved preparativt høytrykk-væskekro-matografi under anvendelse av flere injeksjoner i en kolonne (1 cm x 25 cm) av "Partisil" SAX-10 harpiks. Kolonnen ble eluert med en buffergradient bestående av 0,02M til 0,08M kalium-dihydrogenfosfat (pH 6,8) i løpet av 20 minutter. Eluatene som inneholdt rent cyklisk fosfat av forbindelsen med formel (I), ;ble samlet og inndampet til et fast stoff (535 mg) som ble av-saltet ved å bli ført ned gjennom en kolonne (5 cm x 60 cm) av "Sephadex" G-10 harpiks under anvendelse av vann som elueringsmiddel. Det rene, avsaltede produkt ble oppsamlet og lyofilisert fra vann for å gi den cykliske fosfatester av 9-(1 ,3-dihydroks.y-2-propoksymetyl)guanin som monokaliumsaltet (82 mg), sm.p.: dekomp. ca. 2 50°C. ;EKSEMPEL 4;A. En blanding av N monometoksytrityl-9-(1-monometoksytrityloksy -3-hydroksy-2-propoksymetyl)guanin (1,70 g) og dicykloheksylkarbodiimid (2,68) i 0,13 M cyanoetylfosfat i pyrridin (50 ml) ble om-rørt ved 21°C i 2,5 dager før bråkjøling ved tilsetning av vann (10 ml). Oppløsningen ble inndampet i vakuum, og residuet ble behandlet med konsentrert ammoniumhydroksyd (80 ml) i 2 timer ved 60°C og derefter inndampet på ny i vakuum. Residuet ble opp-løst i 80% (volum/volum) eddiksyre og oppvarmet ved 80°C i 2 timer og fikk derefter stå ved 21°C i 16 timer før inndampning i vakuum. Residuet ble tatt i vann (80 ml), og oppløsningen ble ekstrahert med diklormetan (3 x 50 ml). Den vandige fase ble filtrert, konsentrert til ca. 10 ml, gjort basisk med konsentrert ammoniumhydroksyd og tatt på en kolonne (5,5 cm x 40 cm) av "Sephadex" G-10 gel. Eluering med vann og inndampning av frak-sjonene inneholdende det rene produkt ga 520 mg amorft 9-(1-monofosfat-3-hydroksy-2-propoksymetyl)guanin som deammoniumsaltet. ;B. 1 -(monofosfatester) av 9-(dihydroksy-2-propoksymetyl)guanin som diammoniumsaltet (520 mg) ble omdannet til den frie syre ved å bli ført gjennom en kolonne av "Dowex" 50-X8 kationebytterharpiks (45 ml) under anvendelse av vann ( 11) som elueringsmiddel. Residuet som var tilbake efter avdampning av vannet, ;ble oppløst i en blanding av pyrridin (25 ml) og vann (10 ml) inneholdende 4-morfolino-N,N'-dicykloheksylkarboksamidin (350 mg) ;og ble derefter inndampet i vakuum. Residuet ble medinndampet tre ganger med 10 ml porsjoner av pyrridin. En oppløsning av det resulterende skum i pyrridin (150 ml) ble satt dråpevis i løpet av 1 time til en tilbakeløpskokende oppløsning av dicykloheksylkarbodiimid (500 mg) i pyrridin (120 ml). Da tilsetningen var fullstendig, ble blandingen tilbakeløpsbehandlet i ytterligere 2,5 timer før den ble inndampet i vakuum til et hvitt, ;fast stoff. En oppløsning av det faste stoff i vann (100 ml) ble ekstrahert tre ganger med 10% butanol i diklormetan (volum/ volum) (30 ml) og derefter en gang med dietyleter (30 ml). Den vandige oppløsning ble konsentrert i vakuum til 5 ml og påført på en kolonne (2,5 cm x 40 cm) av DEAE "Sephadex" A-25 gel i karbonatform. Kolonnen ble eluert med en lineær gradient bestående av 1 1 vann og 1 1 0,6M trietylammoniumbikarbonat (pH 7,6). Eluatet inneholdende rent produkt ble lyofilisert for å gi ;282 mg amorft, fast stoff. Det faste stoff ble oppløst i vann (2 ml) og påført på en kolonne av "Dowex" 50-8X kationebytterharpiks (5 ml) som derefter ble vasket med vann inntil eluatet var uten UV absorbsjon (ca. 200 ml). Vaskevæskene ble gjort basisk med konsentrert ammoniumhydroksyd og derefter inndampet 1 vakuum. Residuet ble krystallisert fra vann/etanol for å gi 203 mg 1,3-cyklisk fosfatester av 9-(1,3-dihydroksy-2-propoksymetyl)guanin som monoammoniumsaltet. ;EKSEMPEL 5;En forbindelse med formel (I), fremstilt ifølge Eksempel 1, 2 eller 3 oppløses i metanol, og en lik molar mengde av kalsiumklorid i etanol settes til blandingen ved romtemperatur og om-røres. Det resulterende kalsiumsalt utfelles. Kalsiumsaltet omdannes derefter til andre tilsvarende salter ved å føre saltet som en oppløsning gjennom "Dowex" 50 harpiks med det tilsvarende ønskede motion på harpiksen. ;Tilsvarende, under anvendelse av ovennevnte fremsgangsmåte, får man for eksempel de følgende forbindelser: 1 -(monofosfatester) av 9-(1,3-dihydroksy-2-propoksymetyl)-guanin-diammoniumsalt; 1 -(monofosfatester) av 9-(1,3-dihydroksy-2-propoksymetyl)-guanin-di(trimetylammonium)salt; 1 -(monofosfatester) av 9-(1 ,3-dihydroksy-2-propoksymetyl)-guanin di(dietylammonium)salt; 1 -(monofosfatester) av 9-(1,3-dihydroksy-2-propoksymetyl)-guanin di(cykloheksylammonium)salt; 1 -(monofosfatester) av 9-(1,3-dihydroksy-2-propoksymetyl)-guanin-dimorfoliniumsalt; 1 -(difosfatester) av 9-(1,3-dihydroksy-2-propoksymetyl)-guanin.triammoniumsalt; ;1-(trifosfatester) av 9-(1,3-dihydroksy-2-propoksymetyl)-guanin-tetra(trimetylammonium)salt; ;1,3-bis(monofosfatester) av 9-(1,3-dihydroksy-2-propoksymetyl)guanin-tetra(trietylammonium)salt. ;cyklisk fosfatester av 9-(1,3-dihydroksy-2-propoksymetyl)-guanin ammoniumsalt; ;cyklisk fosfatester av 9-(1,3-dihydroksy-2-propoksymetyl)-guanin-trimetylammoniumsalt; ;cyklisk fosfatester av 9-(1,3-dihydroksy-2-propoksymetyl)-guanin-dietylammoniumsalt; ;cyklisk fosfatester av 9-(1,3-dihydroksy-2-propoksymetyl)-guanin-dicykloheksylammoniumsalt; og ;cyklisk fosfatester av 9-(1,3-dihydroksy-2-propoksymetyl)-guanin-morfoliniumsalt. ;Den meget gode anti-virus-aktivitet for forbindelsene fremstilt ifølge oppfinnelsen illustreres ved den følgende under-søkelse : ;Herpes simplex virus 2 stamme G for infeksjon fremstilles;i HEp-2 cellekulturer. Virus adsorberes i 1 time, friskt medium anbringes på cellene, og de inkuberes ved 35°C inntil alle celler er infisert. Cellesuspensjonen fryses ved -70°C, tines og sent-rifugeres for å fjerne celleavfall. Væsken på toppen tas ut i passende porsjoner og lagres i frossen tilstand ved -70°C til den skal brukes. En 10 ' fortynning av væsken på toppen fører til en dose hvor cellekulturen er 50% ineffektiv (CCIDI-n) med hensyn til HEp-2 celler, og en 10 3 ' 7 fortynning gir 50% dødlig angrep (LC5Q) hos mus. ;Grupper på 20 sveitsiske Webster hun-mus (15 - 17 g) infi-seres intraperitonialt under anvendelse av 0,2 ml EMEM inneholdende 10 LC50/mus av virus. Mus infisert med 10^'^ mer eller mindre virus enn 10 LD^q infeksjonen tjener som en kontroll på alvorligheten av angrepet, for å være sikker på at modellen virker tilfredsstillende. ;Behandling med prøveforbindelsene begynner 6 timer efter infisering. Musene, delt i grupper på 20, gis forbindelsene oralt i mengder på 5 mg/kg, 10 mg/kg og 20 mg/kg. En gruppe på 20 mus anvendes som kontrollgruppe og får saltvann oralt. Be-handlingen gjentas 24 timer efter infiseringen. ;Ved den ovenfor beskrevne undersøkelse oppviser forbindelsene fremstilt ifølge oppfinnelsen anti-virus-aktivitet som vist i den følgende tabell *

Claims (10)

1. Fremgangsmåte for fremstilling av forbindelser med formelen

hvor W er hydrogen eller

Wa er

eller W sammen med Wa er 0 II BO-PCT hvor B er hydrogen eller et faramsøytisk godtagbart motion, og x er 0, 1 eller 2, karakterisert ved at(a) en forbindelse med formelen

hvor R er benzoyl eller en trifenylmetyl-gruppe, omsettes med en sterk base for å danne en forbindelse med formel (I) hvor W er hydrogen og Wa er

hvor B er et natriumion og x er 0, 1 eller 2; eller (b) en forbindelse med formelen omsettes med et fosforylerende middel for å danne en forbindelse med formel (I) hvor W og Wa er

hvor B er et natriumion og x er 0; eller (c) en forbindelse med formelen

hvor M er 4-morfolino, omsettes med t-butylammoniumfosfat for å danne en forbindelse med formel (I) hvor W og Wa er

hvor B er hydrogen og x er 1; eller (d) en forbindelse med formelen hvor M er 4-morfolino, omsettes med tributylammonium pyrofosfat for å danne en forbindelse med formel (I) hvor W og Wa er

hvor B er hydrogen og x er 2; eller (e) en forbindelse med formelen

hvor Y er en lipofil amin-gruppe, omsettes med et kondenseringsmiddel for å danne en forbindelse med formel (I) hvor W sammen med Wa er

hvor B er kalium eller trialkylammonium; eller (f) en forbindelse med formelen omsettes med et fosfoksylerende middel for å danne en forbindelse med formel (I) hvor W sammen med Wa er

hvor B er hydrogen eller et farmasøytisk godtagbart motion; eller (g) eventuelt omdannes saltet til den frie syre; eller (h) eventuelt omdanneset salt til et annet salt.

2. Fremgangsmåte ifølge krav 1, karakterisert ved at det fremstilles en forbindelse hvor W er hydrogen og Wa er som angitt ovenfor, og x er 0.

3. Fremgangsmåte ifølge krav 2, karakterisert ved at det fremstilles en forbindelse hvor B er hydrogen, det vil si 1 -(monofosfatester) av 9-(1,3-dihydroksy-2-propoksymetyl)guanin.

4. Fremgangsmåte ifølge krav 2, karakterisert ved at det fremstilles en forbindelse hvor B er et natriumion, det vil si 1 -(monofosfatester) av 9-(1,3-dihydroksy-2-propoksymetyl)guanin-dinatriumsalt.

5. Fremgangsmåte ifølge krav 1, karakterisert ved at det fremstilles en forbindelse hvor både W og Wa er

hvor B er som angitt i krav 1, og x er 0.

6. Fremgangsmåte ifølge krav 5, karakterisert ved at det fremstilles en forbindelse hvor B er hydrogen, det vil si 1,3-bis(monofosfatester) av 9-(1 ,3-dihydroksy-2-propoksymety1)guanin.

7. Fremgangsmåte ifølge krav 5, karakterisert ved at det fremstilles en forbindelse hvor B er et natriumion, det vil si 1,3-bis(monofosfatester) av 9-(1,3-dihydroksy-2- propoksymetyl)guanin-tetranatriumsalt.

8. Fremgangsmåte ifølge krav 1 , karakterisert ved at det fremstilles en forbindelse hvor W sammen med Wa er

hvor B er som angitt i krav 1 .

9. Fremgangsmåte ifølge krav 8, karakterisert ved at det fremstilles en forbindelse hvor B er hydrogen, det vil si 1,3-cyklisk fosfatester av 9-(1,3-dihydroksy-2-propoksymety1)guanin.

10. Fremgangsmåte ifølge krav 8, karakterisert ved at det fremstilles en forbindelse hvor B er et kaliumion, det vil si 1,3-cyklisk fosfatester av 9-(1,3-dihydroksy-2-propoksymetyl)guanin-kaliumsalt.