RS58258B1 - Dermalna matrica i njen postupak proizvodnje sa sinergističkim efektima sa mikročesticama za popravku tkiva - Google Patents

Dermalna matrica i njen postupak proizvodnje sa sinergističkim efektima sa mikročesticama za popravku tkiva

Info

Publication number
RS58258B1
RS58258B1 RS20190100A RSP20190100A RS58258B1 RS 58258 B1 RS58258 B1 RS 58258B1 RS 20190100 A RS20190100 A RS 20190100A RS P20190100 A RSP20190100 A RS P20190100A RS 58258 B1 RS58258 B1 RS 58258B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
dermal matrix
mixture
microparticles
collagen
resveratrol
Prior art date
Application number
RS20190100A
Other languages
English (en)
Inventor
Kevser Ozgen Ozer
Evren Homan Gokce
Ipek Eroglu
Sakine Tuncay Tanriverdi
Original Assignee
Abdi Ibrahim Ilac Sanayi Ve Ticaret A S
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Abdi Ibrahim Ilac Sanayi Ve Ticaret A S filed Critical Abdi Ibrahim Ilac Sanayi Ve Ticaret A S
Publication of RS58258B1 publication Critical patent/RS58258B1/sr

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/045—Hydroxy compounds, e.g. alcohols; Salts thereof, e.g. alcoholates
    • A61K31/05—Phenols
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/14—Macromolecular materials
    • A61L27/22—Polypeptides or derivatives thereof, e.g. degradation products
    • A61L27/24—Collagen
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/14—Macromolecular materials
    • A61L27/26—Mixtures of macromolecular compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/50—Materials characterised by their function or physical properties, e.g. injectable or lubricating compositions, shape-memory materials, surface modified materials
    • A61L27/54—Biologically active materials, e.g. therapeutic substances
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/50—Materials characterised by their function or physical properties, e.g. injectable or lubricating compositions, shape-memory materials, surface modified materials
    • A61L27/56—Porous materials, e.g. foams or sponges
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/50—Materials characterised by their function or physical properties, e.g. injectable or lubricating compositions, shape-memory materials, surface modified materials
    • A61L27/60—Materials for use in artificial skin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2300/00—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices
    • A61L2300/40—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices characterised by a specific therapeutic activity or mode of action
    • A61L2300/428—Vitamins, e.g. tocopherol, riboflavin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2300/00—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices
    • A61L2300/60—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices characterised by a special physical form
    • A61L2300/62—Encapsulated active agents, e.g. emulsified droplets
    • A61L2300/622—Microcapsules

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Oral & Maxillofacial Surgery (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Materials For Medical Uses (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Cosmetics (AREA)

Description

Opis
Tehnička oblast
[0001] Ovaj pronalazak odnosi se na dermalne matrice kao što je definsano u patentnom zahtevu 10 i njihov postupak proizvodnje kao što je definsano u patentnom zahtevu 1, korišćene u lečenjima hroničnih rana, što omogućava brzi oporavak dermalnog tkiva, i koji obuhvata u okviru svoje strukture mikročestice koje imaju antioksidanse sa sinergističkim efektima.
Stanje tehnike
[0002] Konvencionalni proizvodi kao što su kreme, gelovi, losioni i masti koriste se u lečenju hroničnih rana u današnje vreme. Kako bi pomenuti proizvodi bili efikasni u lečenju, oni moraju često da se nanose. Štaviše, primenjene doze takođe moraju da budu standardizovane. Postoje, međutim, aktuelni tretmani koji bi mogli eliminisati ove probleme koji su deo uobičajenog pristupa. U takvim primenama tretmana, koriste se postupci transfera ksenografta i grafta kako bi se zamenila nova tkiva na područjima sa velikim gubicima tkiva. Ovi postupci su i bolni i, u isto vreme, mogu da imaju nedostatke bazirane na donoru.
[0003] Do danas najpoznatija završna faza lečenja hroničnih rana obuhvata inovativne formulacije. Sistemi mikročestica i sistemi matrica obezbeđuju povoljne postupke lečenja u poređenju sa postupcima stanja tehnike. Kao rezultat pretraživanja literature, primećeno je da su matrice koje obuhvataju agense koji pomažu zarastanju područja, i koje obezbeđuju neophodnu mehaničku podršku, koje nadoknađuju i okluzivno deluju na područje gubitka tkiva kao rezultat različitih povreda, razvijene. Uočene su dermalne matrice pripremaju se tako što naročito obuhvataju kombinacije kolagen-hitozan, kolagen-želatin, kolagen-glikozaminoglikani, i kolagen-hijaluronska kiselina i inkubacijom fibroblasta sa njima i zarastanjem oštećenog tkiva.
[0004] Dermalne matrice su sistemi pripremljeni sa prirodnim ili sintetičkim polimerima kako bi se efikasno podržao ćelijski rast i razvoj, a njihova upotreba u lečenju rana otvorila je novi horizont. Glavni cilj ovih struktura je da ponovo razvije tkivo koje je oštećeno i da nosi različite biomaterijale i bioaktivne molekule u ovaj region.
[0005] Današnji komercijalni proizvodi koji leče epitel koji ima različite karakteristike su poznati. U pomenutim proizvodima koriste se flasteri za rane pripremljeni sa hitozanom koji je prirodni polimer, ili se koriste polimeri kao što su sintetički poliuretani i PLGA i obezbeđena je podloga gde keratinociti obrazuju male kolonije u epidermisu, a time se dobija brže obrazovanje epitela. U pomenutim proizvodima gde je epitel zamenjen, obezbeđena je dvodimenzionalna struktura. Ova dimenzija poželjna u obrazovanju epitela, međutim, nije dovoljna u tretmanima supstituentima koji zahtevaju trodimenzionalne strukture.
[0006] Područje rane otvoreno je za infekciju i slične komplikacije, a najefikasniji pristup u sprečavanju infekcija je da se obezbedi efikasni tretman što je pre moguće. Prvih šest sati je važniji vremenski period u smislu obrazovanja bakterijskih kolonija nakon ranjavanja. Najefikasniji postupak u sprečavanju infekcija je da se zapečati rana upotrebom sterilnih flastera preko rana i čišćenje rane pod aseptičnim uslovima pre nego što se zatvori sterilnim flasterom, pri čemu su ovi uslovi čak efikasniji od tretmana antibiotikom. Zbog ovoga, neodložno pokrivanje rane, povećanje samo-popravke dermalnog sloja, i razvoj potpuno slojevitih tkiva koji treba da zamene područje tkiva su neki od ključnih predmeta kojima se treba pozabaviti u trenutnim ispitivanjima.
[0007] Konvencionalni pristupi (masti, kreme, gelovi, losioni) korišćeni u lečenju rana, ne mogu da prevaziđu osnovne probleme kao što su infekcije rana, dehidratacija, gubitak toplote, za živo tkivo da ostane nezaštićeno, gubici proteina, eritrocita, leukocita, imunoloških agenasa i oligoelemenata.
[0008] Jedan od najvažnijih nedostataka uobičajenih formulacija, je da naneta količina može da se menja ili varira a, kao rezultat, naneta doza ne može da bude standardizovana i potrebno je da se često sprovodi nanošenje. Svaki put kada se izvodi nanošenje, pacijent oseća bol i ovo otežava proceduru tretmana. Štaviše, alergijske reakcije mogu da se jave zbog površinski aktivnog agensa, ili komponenata kao što su konzervansi i parfem korišćeni u ovim formulacijama. Pored konvencionalne terapije, transfer grafta, koji je drugi tretman koji se izvodi u slučajevima velikog gubitka tkiva, takođe ima mnogo nedostataka. Ovi nedostaci mogu da budu bolesti koje se prenose od donora, ili formiranje novih rana na području donora sa kog je graft uzet. Iako su autografti materijali koji su poželjni, u nekim slučajevima može da ne postoji bilo kakvo odgovarajuće kožno tkivo koje može da se prenese kod pacijenata. Pored toga, nova rana je prisutna u području gde je tkivo grafta uzeto. Drugi nedostatak je da ove procedure mogu da zahtevaju hirurške operacije. Inovativni pristupi smatrani su neophodnim da bi se skratilo vreme lečenja, kako bi se sprečile komplikacije kao što su infekcije i kako bi se prevazišli pomenuti nedostaci.
[0009] Formulacije koje se pripremaju kako bi se postigli ovi ciljevi, koje imaju kolagen, hitozan i želatin, su dvodimenzionalni sistemi, a pomenuti dvodimenzionalni sistemi nisu dovoljni da obezbede fizičku podršku. Kako bi se prevazišao ovaj problem, i postupci korišćeni da se osigura da su dermalne matrice pripremljene upotrebom kolagena trodimenzionalne koje obuhvataju hemijske materijale, uništavaju uslove koji moraju da budu prisutni za ćelijski rast. U ovoj tehnici, proizvodi razvijeni da se postignu pomenuti ciljevi ne obuhvataju mikročestice i deluju poput flastera za rane pri čemu ćelije mogu da rastu malo brže.
Kratak opis pronalaska
[0010] Cilj ovog pronalaska je da obezbedi dermalnu matricu, koja povećava efikasnost lečenja hroničnih rana i smanjuje vreme zarastanja i osigurava popravku tkiva.
[0011] Drugi cilj ovog pronalaska je da obezbedi dermalnu matricu koja ne samo da obuhvata kolagen i laminin već obuhvata i mikročestice koje nose antioksidanse koji pomažu ubrzavanje popravke tkiva pokazujući sinergističke efekte.
[0012] Drugi cilj ovog pronalaska je da se obezbedi postupak proizvodnje dermalne matrice koji omogućava popravku tkiva, pri čemu se koriste agensi formirani od proteina smeštenih unutar prirodne strukture dermisa i druge komponente.
[0013] Drugi cilj ovog pronalaska je da se obezbedi postupak proizvodnje dermalne matrice koji podržava ćelijski rast i popravku tkiva, upotrebom postupka umrežavanja koji nije hemijski postupak.
[0014] Drugi cilj ovog pronalaska je da se obezbedi postupak proizvodnje dermalne matrice koji omogućava popravku tkiva i sprečava razgradnju toplotno osetljivih biomaterijala primenom procedure liofilizacije.
[0015] Postupak proizvodnje dermalne matrice koji obezbeđuje popravku tkiva proizveden kako bi se postigao cilj ovog pronalaska, prikazan je na priloženoj slici, pri čemu pomenuta slika ilustruje sledeće; Fig.1 - je dijagram toka postupka koji je predmet ovog pronalaska.
[0016] Postupak (10) proizvodnje dermalne matrice okarakterisan je time što obuhvata faze:
- pripreme sistema (11) dermalne matrice,
- pripreme sistema (111) rastvora kolagena,
- dodavanja laminina na rastvor kolagena i mešanje (112),
- zamrzavanja i čuvanja mešavine (113),
- liofilizacije čuvane mešavine (114),
- umrežavanja liofilizata (115),
- obrazovanja mikročestica (12),
- pripreme vodenog rastvora polimera (121), pri čemu je hijaluronska kiselina (HA) rastvorena u čistoj vodi,
- pripreme mešavine (122) fosfolipida, antioksidansa i alkohola, pri čemu se dipalmitoilfosfatidilholin (DPPC) i resveratrol umešavaju u alkoholu i rastvaraju,
- dodavanja vodenog rastvora na alkoholnu mešavinu i mešanje (123),
- sušenja raspršavanjem cele dobijene mešavine (124),
- kombinovanja mikročestica sa sistemom (13) dermalne matrice, pri čemu se resveratrolnapunjene mikročestice hijaluronske kiseline (HA) - dipalmitoilfosfatidilholina (DPPC) raspršuju raspršavanjem suvog praha na dermalnu matricu (11).
[0017] Postupak (10), predmet ovog pronalaska, u principu se zasniva na pripremi sistema dermalne matrice i sistema mikročestica odvojeno i, nakon toga, raspršivanju mikročestica na dermalnu matricu čime se fizički kombinuju ova dva sistema.
[0018] Prema postupku (10), predmet ovog pronalaska, kao prvo rastvor kolagena se priprema (111) dodavanjem kolagena rastvoru sirćetne kiseline kako bi se pripremio sistema (11) dermalne matrice. U poželjnoj primeni ovog pronalaska, goveđi kolagen se dodaje (111) u koncentraciji od 0,1 % do 0,1 M rastvora sirćetne kiseline.
[0019] Nakon ovoga, dodaje se laminin na rastvor (112) kolagena. U poželjnom primeru izvođenja ovog pronalaska, uzima se 2,5ml rastvora kolagena koji je pripremljen i dodaje se 20µl laminina, i sve to se meša u ledenom kupatilu (112). Kada se koristi ledeno kupatilo, cilj je da se spreči pogoršanje strukture proteina koji su prisutni u mešavini. U poželjnom primeru izvođenja ovog pronalaska, mešanje se izvodi brzinom od 3000 ciklusa/minuti, za 1 minut, upotrebom 10-G sonde.
[0020] Mešavina koja obuhvata kolagen i laminin ostavljena je da odstoji tokom 12 sati na temperaturi -20±1 °C i zamrznuta je (113). Nakon ovoga, pomenuta mešavina koja je zamrznuta podvrgnuta je liofilizaciji tokom 24 sata (114). Na ovaj način osigurano je da je sprečeno pogoršanje toplotno osetljivih biomaterijala unutar pomenute mešavine.
[0021] Struktura liofilizata koji obuhvata kolagen i laminin koja je dobijena, je umrežena (115) talasnom dužinom od 254nm upotrebom uređaja za umrežavanje ultraljubičastim zračenjem (UV-kroslinker). Na drugom mestu, vodeni rastvor polimera je pripremljen (121) kako bi se obezbedilo obrazovanje mikročestica (12). Kako bi se osiguralo da se iskoristi ovo 0,2g natrijumove soli hijaluronske kiseline (HA) rastvara se u 150ml čiste vode. U međuvremenu, dipalmitoilfosfatidilholin (DPPC) i resveratrol umešavaju se u alkohol i rastvaraju se (122). U poželjnom primeru izvođenja ovog pronalaska, 0,7-0,75 g DPPC i 0,05-0,1 g resveratrola 350 ml dodaje se u etanol i umešava se (122). Upotreba resveratrola (antioksidans) pokazuje sinergističke efekte sa kolagenom i lamininom koji formira proteinsku strukturu, a, kao rezultat, povećana je efikasnost krajnjeg proizvoda kada je u pitanju popravka tkiva. Pored ovoga, osigurano je da je integritet matrice krajnjeg proizvoda zadržan duže vreme.
[0022] HA rastvor (121}, koji je pripremljen, dodaje se na rastvor (122) DPPC i resveratrola u alkoholu i meša se na 40 ± 1°C (123). Cela mešavina koja je pripremljena stavlja se u sušač raspršivanjem i mikročestice se dobijaju raspršivanjem (124). U poželjnom primeru izvođenja ovog pronalaska; sušač raspršivanjem podešava se tako da je početna temperatura 180°C, a brzina raspršivanja je 400 L/h.
[0023] HA mikročestice napunjene sa resveratrolom i pripremljene sušačem raspršivanjem raspršuju se na prethodno pripremljenu dermalnu matricu (11) kao suvi prah, i pomenuta dva sistema se kombinuju (13). Prema poželjnom primeru izvođenja ovog pronalaska, raspršene mikročestice obuhvataju 50 µM resveratrola. Ove matrice koje su dobijene, naročito se koriste u lečenju hroničnih rana i one značajno povećavaju brzinu lečenja rana.
[0024] Kako bi se odredio prečnik i debljina dermalnih matrica dobijenih upotrebom postupka, koji je predmet ovog pronalaska, koristi se automatski kompas, i prečnik i debljina matrica se procenjuju. Kao rezultat analize koja se izvodi, prosečan prečnik dobijene dermalne matrice je 2,24 ± 0,05 cm, a njihova debljina izmerena je kao 0,23 ± 0,04 cm.
Određeno je da su veličine pora dermalnih matrica koje su dobijene upotrebom skenirajućeg elektronskog mikroskopa i konfokalnog mikroskopa kako bi se odredila morfologija površine, bile oko najviše 100 µm. "Pored ovoga, primećeno je da su prisutna trodimenzionalna vlakna kolagena i umrežene su mikročestice.
[0025] Matrice koje se pripremaju za kapacitet zadržavanja vode, ostavljene su da odstoje u vodi od 37 ± 1°C, tokom 20sekundi nakon čega su određene njihove mase. Izračunavanjem procentne stope početne mase i njenim poređenjem sa masom izmerenom nakon završetka testa, određeno je da je kapacitet zadržavanja vode 84 % ± 1,5.
[0026] TA-XT plus uređaj za analizu teksture koristi se kako bi se odredile mehaničke karakteristike dermalne matrice. Kao rezultat analize, tvrdoća 26-21 N, kompresija 23-18 N/mm, kohezija 0,93-1 i vrednosti elastičnosti 0,8-1, izračunate su preko snage, vremenskih krivih koje pripadaju matrici. Kao rezultat određivanja sadržaja vlage, količina vlage dermalne matrice, koja je predmet ovog pronalaska, izračunata je kao 0,2%. Veličine mikročestica koje se nalaze unutar dermalne matrice, izračunato je da su između 15-30 µm upotrebom postupka laserske difrakcije.
[0027] Kao što se može videti na slikama dobijenim pomoću SEM, formulacije su sferične i imaju glatke površine. Veličine čestica primećene pomoću SEM upoređene su sa rezultatima prethodno izvedenog postupka distribucije laserske difrakcije, i otkriveno je da su veličine konzistentne.
[0028] Kapacitet punjenja mikročestica, koje su pripremljene, lekom izračunat je kao 0,5-lmg i efikasnost enkapsulacije izračunato je da je između 97 %-98,7 %.
[0029] Kako bi se odredila količina oslobađanja resveratrola iz mikročestica, studije oslobađanja aktivnih agenasa izvedene su sa formulacijama mikročestica pripremljenim sa različitim koncentracijama resveratrola. Rezultati analize pokazali su da su količine oslobođenog resveratrola iz formulacija za 24 sata bile između 73-85 %.
[0030] Ispitivan je efekat enzima hijaluronidaze, kolagenaze, lipaze i fosfolipaze u vezi sa oslobađanjem resveratrola iz mikročestica. Odvojene studije enzimske razgradnje izvedene su sa enzimima hijaluronidazom i kolagenazom kako bi se ispitao efekat enzima na dermalnu matricu. Dok je dermalna matrica koja nije obuhvatala mikročestice bila enzimski razgrađena sa kolagenazom za 30 minuta, razgradnja dermalne matrice koja je obuhvatala resveratrol-napunjene mikročestice trajala je dva puta duže. Resveratrol ne samo da je bio povoljan jer je podržao zarastanje rana već je bio povoljan i zato što je zaštitio integritet matrice od kolagenaze za duže vreme.
[0031] 3D softverski program konfokalnog mikroskopa korišćen je kako bi se odredilo da li su mikročestice bile homogeno distribuirane u dermalnoj matrici i gde su lokalizovane. Konfokalna studija je obnovljena i podaci su procenjeni u ovom programu. Izvedena ispitivanja morfologije pokazala su da su mikročestice distribuirane mnogo više homogeno na gornjoj površini dermalne matrice i da su pomenute mikročestice bile u potpunom kontaktu sa matricom.
[0032] Humane dermalne fibroblastne ćelije, (Invitrogen C-013-5C) kultivisane su u vlažnim uslovima koji obuhvataju 37±0,5 °C i 5% CO2prema instrukcijama proizvođača. Rastvor resveratrola inkubiran je sa formulacijama koje nisu obuhvatale resveratrol i formulacijama mikročestica koje su obuhvatale resveratrol tokom 24 sata i ispitani su efekti svih uzoraka koji se odnose na vitalnost ćelija. Kako je primećeno da rastvor resveratrola, ili formulacije koje su prazne ili ne sadrže aktivne agense nemaju citotoksični potencijal, i pokazale su efekte porasta ćelijske proliferacije u koncentracijama koje odgovaraju sadržaju resveratrola od 50 µM. Parametri oksidativnog stresa kao što su ukupan glutation, malondialdehid, i superoksid dismutaza i glutation peroksidaza ispitivani su unutar ćelija koje su analizirane. Dobijeni rezultati bili su indikacija da je tip doziranja razvijen za resveratrol obuhvatao oksidativnu aktivnost na molekulskom nivou.
[0033] Zaključno, ispitivanja izvedena poslednjih godina, pokazala su da je zarastanje rana zavisilo od komponenata odabranih unutar formulacije i da su inovativne formulacije koje su obuhvatale proteine koji obrazuju prirodnu strukturu dermisa obezbedile efikasni tretman i da se vreme trajanja tretmana moglo skratiti. Očigledno je da novi sistemi za nošenje leka treba da se pripreme za dugotrajne tretmane rana.
[0034] Nema formulacija nove generacije koje obuhvataju odabranu kombinaciju. Sinergistički efekat dermalnih matrica sa resveratrolom u vezi sa popravkom tkiva je ocenjen prvi put ovim pronalaskom.

Claims (13)

Patentni zahtevi
1. Postupak (10) proizvodnje dermalne matrice, n a z n a č e n t i m e, što obuhvata faze:
- pripreme sistema (11) dermalne matrice,
- pripreme sistema (111) rastvora kolagena,
- dodavanja laminina na rastvor kolagena i mešanje (112),
- zamrzavanja i čuvanja mešavine (113),
- liofilizacije čuvane mešavine (114),
- umrežavanja liofilizata (115),
- obrazovanja mikročestica (12),
- pripreme vodenog rastvora polimera (121), pri čemu je hijaluronska kiselina (HA)
- rastvorena u čistoj vodi,
- pripreme mešavine (122) fosfolipida, antioksidansa i alkohola, pri čemu se dipalmitoilfosfatidilholin (DPPC) i resveratrol umešavaju u alkohol i rastvaraju,
- dodavanja vodenog rastvora na alkoholnu mešavinu i mešanje (123),
- sušenja raspršavanjem cele dobijene mešavine (124),
- kombinovanja mikročestica sa sistemom (13) dermalne matrice, pri čemu se resveratrolnapunjene mikročestice hijaluronske kiseline (HA)-dipalmitoilfosfatidilholina (DPPC) raspršavaju raspršavanjem suvog praha na dermalnu matricu (11).
2. Postupak (10) proizvodnje dermalne matrice prema zahtevu 1, n a z n a č e n t i m e, što obuhvata fazu pripreme mešavine fosfolipida, antioksidansa i alkohola (122), pri čemu se 0,7-0,75 g dipalmitoilfosfatidilholina (DPPC) i 0,05-0,1 g resveratrola umešavaju u 350 mL alkohola i rastvaraju se.
3. Postupak (10) proizvodnje dermalne matrice prema zahtevu 1, n a z n a č e n t i m e, što se pomenuti vodeni rastvor dodaje u alkoholnu mešavinu i meša (123) na 40 ± 1° C.
4. Postupak (10) proizvodnje dermalne matrice prema zahtevu 1, n a z n a č e n t i m e, što obuhvata fazu pripreme rastvora (111) kolagena dodavanjem goveđeg kolagena u koncentraciji od 0,1% do 0,1 M sirćetne kiseline.
5. Postupak (10) proizvodnje dermalne matrice prema zahtevu 1, n a z n a č e n t i m e, što obuhvata fazu dodavanja laminina na rastvor (112) kolagena uzimanjem 2,5ml rastvora kolagena koji je pripremljen, dodavanjem 20 µl laminina u ovo, i njihovim mešanjem u ledenom kupatilu.
6. Postupak (10) proizvodnje dermalne matrice prema zahtevu 1, n a z n a č e n t i m e, što obuhvata fazu zamrzavanja i čuvanja mešavine (113}, pri čemu je mešavina kolagena i laminina ostavljena da odstoji tokom 12 sati preko noći na temperaturi od -20 ± 1 °C.
7. Postupak (10) proizvodnje dermalne matrice prema zahtevu 1, n a z n a č e n t i m e, što obuhvata fazu liofilizacije mešavine (114) koja je čuvana, pri čemu se mešavina, koja je zamrznuta i ostavljena da odstoji, podvrgava liofilizaciji tokom 24 sata a, kao rezultat, pri tom je sprečeno pogoršanje biomaterijala osetljivih na toplotu prisutnih unutar pomenute matrice.
8. Postupak (10) proizvodnje dermalne matrice prema zahtevu 1, n a z n a č e n t i m e, što obuhvata fazu umrežavanja liofilizata (115), pri čemu se struktura liofilizata podvrgava umrežavanju talasnom dužinom od 254 nm upotrebom uređaja za umrežavanje ultraljubičastim zračenjem (UV-kroslinker).
9. Postupak (10) proizvodnje dermalne matrice prema zahtevu 1, n a z n a č e n t i m e, što obuhvata fazu pripreme vodenog rastvora polimera (121), u kojoj se 0,2 g hijaluronske kiseline (HA) rastvara u 150 mL čiste vode.
10. Formulacija dermalne matrice proizvedena upotrebom postupka prema zahtevu 1, n a z n a č e n a t i m e, što obuhvata antioksidans-napunjene mikročestice hijaluronske kiseline (HA)-dipalmitoilfosfatidilholina (DPPC) u kolagen-laminin skafoldu.
11. Formulacija dermalne matrice prema zahtevu 10, kod koje antioksidans predstavlja resveratrol.
12. Formulacija dermalne matrice prema zahtevu 10, pri čemu je ta formulacija biorazgradiva.
13. Formulacija dermalne matrice prema zahtevu 10, za upotrebu u lečenjima hroničnih rana.
1
RS20190100A 2013-07-25 2014-07-07 Dermalna matrica i njen postupak proizvodnje sa sinergističkim efektima sa mikročesticama za popravku tkiva RS58258B1 (sr)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
TR2013/09048A TR201309048A2 (tr) 2013-07-25 2013-07-25 Doku onarımı sağlayan mikropartikül içeren sinerjik etkili dermal matriks ve üretim yöntemi.
PCT/TR2014/000251 WO2015012775A1 (en) 2013-07-25 2014-07-07 A dermal matrix and production method thereof having synergistic effects comprising microparticles which provides tissue repair
EP14772477.7A EP3024505B1 (en) 2013-07-25 2014-07-07 A dermal matrix and production method thereof having synergistic effects comprising microparticles which provides tissue repair

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS58258B1 true RS58258B1 (sr) 2019-03-29

Family

ID=51619260

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20190100A RS58258B1 (sr) 2013-07-25 2014-07-07 Dermalna matrica i njen postupak proizvodnje sa sinergističkim efektima sa mikročesticama za popravku tkiva

Country Status (20)

Country Link
US (1) US9517215B2 (sr)
EP (1) EP3024505B1 (sr)
JP (1) JP6530392B2 (sr)
CN (1) CN105492033B (sr)
AU (1) AU2014293717B2 (sr)
BR (1) BR112016001573B1 (sr)
CA (1) CA2919422C (sr)
DK (1) DK3024505T3 (sr)
ES (1) ES2707698T3 (sr)
HR (1) HRP20190132T1 (sr)
HU (1) HUE041810T2 (sr)
LT (1) LT3024505T (sr)
PL (1) PL3024505T3 (sr)
PT (1) PT3024505T (sr)
RS (1) RS58258B1 (sr)
RU (1) RU2673665C2 (sr)
SI (1) SI3024505T1 (sr)
TR (1) TR201309048A2 (sr)
WO (1) WO2015012775A1 (sr)
ZA (1) ZA201600594B (sr)

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US10802190B2 (en) 2015-12-17 2020-10-13 Covestro Llc Systems, devices, and methods for curved holographic optical elements
GB2566630A (en) * 2016-08-11 2019-03-20 Doku Byoteknoloji Ltd Sirketi Wound and burn material with herbal agent
CN115737887A (zh) * 2022-11-07 2023-03-07 河北大学 一种皮肤创面敷料及其制备方法

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR100271732B1 (ko) * 1998-08-12 2000-11-15 활 서 진피재생 유도용 다공성 교원질이중구조 창상보호막
JP2003325652A (ja) * 2002-05-16 2003-11-18 Gunze Ltd 細胞組込型培養皮膚
CN1232233C (zh) * 2003-09-02 2005-12-21 中国人民解放军第四军医大学口腔医学院 一种组织工程真皮的制备方法
CN101448474A (zh) * 2006-04-12 2009-06-03 麻省理工学院 抑制粘连的组合物和方法
KR101064518B1 (ko) * 2007-09-21 2011-09-19 주식회사 운화 저장근을 가지는 초본식물의 형성층 유래 식물줄기세포주 및 이의 분리방법
CA2613026A1 (en) * 2008-01-15 2009-07-15 Gerard Voon Added new stem cells processes/methods/techniques
US20100297040A1 (en) * 2009-05-20 2010-11-25 Candace Rose Keefe Cellular age advantage; nutrient reservoir cosmetic composition
CN101632841B (zh) * 2009-08-21 2012-10-03 暨南大学 含海藻酸盐、糖胺聚糖和胶原的组织工程支架及其制备方法
US20120064136A1 (en) * 2010-09-10 2012-03-15 Nanobio Corporation Anti-aging and wrinkle treatment methods using nanoemulsion compositions

Also Published As

Publication number Publication date
HRP20190132T1 (hr) 2019-03-22
BR112016001573B1 (pt) 2020-08-18
SI3024505T1 (sl) 2019-03-29
DK3024505T3 (en) 2019-02-18
CA2919422A1 (en) 2015-01-29
ZA201600594B (en) 2017-03-29
ES2707698T3 (es) 2019-04-04
AU2014293717B2 (en) 2017-06-15
TR201309048A2 (tr) 2015-02-23
CN105492033B (zh) 2019-01-18
EP3024505B1 (en) 2018-10-24
PL3024505T3 (pl) 2019-07-31
JP6530392B2 (ja) 2019-06-12
RU2016105242A (ru) 2017-08-30
EP3024505A1 (en) 2016-06-01
LT3024505T (lt) 2019-02-11
WO2015012775A1 (en) 2015-01-29
US9517215B2 (en) 2016-12-13
AU2014293717A1 (en) 2016-02-18
CN105492033A (zh) 2016-04-13
PT3024505T (pt) 2019-02-01
RU2673665C2 (ru) 2018-11-29
US20160151302A1 (en) 2016-06-02
HUE041810T2 (hu) 2019-05-28
JP2016525410A (ja) 2016-08-25
CA2919422C (en) 2021-07-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Yang et al. Exosome/antimicrobial peptide laden hydrogel wound dressings promote scarless wound healing through miR-21-5p-mediated multiple functions
Zhou et al. Enzyme catalyzed hydrogel as versatile bioadhesive for tissue wound hemostasis, bonding, and continuous repair
Pouliot et al. Development and characterization of a naturally derived lung extracellular matrix hydrogel
JP2021035976A (ja) 羊膜粉末ならびに創傷治癒および組織工学構築物におけるその使用
ES2955029T3 (es) Medicamento para la cicatrización de heridas
JP7543311B2 (ja) 創傷治療のための新規な多糖類をベースとしたヒドロゲルスキャフォールド
Tenci et al. Particulate systems based on pectin/chitosan association for the delivery of manuka honey components and platelet lysate in chronic skin ulcers
Li et al. A rapid interactive chitosan-based medium with antioxidant and pro-vascularization properties for infected burn wound healing
Polaka et al. Development and biological evaluation of smart powder bandage for wound healing and dressing applications
EP3494791B1 (en) Treatment of skin-related symptoms of ehlers-danlos syndrome with poly-n-acetylglucosamine nanofibers
RS58258B1 (sr) Dermalna matrica i njen postupak proizvodnje sa sinergističkim efektima sa mikročesticama za popravku tkiva
CA2805705A1 (en) Collagenous material
Lun et al. Fabrication of MnO2‐Modified decellularized tendon membrane for enhancing tendon repair
Tenci et al. Application of DoE approach in the development of mini-capsules, based on biopolymers and manuka honey polar fraction, as powder formulation for the treatment of skin ulcers
KR20240158909A (ko) 세포외 기질을 탈세포화하는 신규한 방법
Lan et al. Dual dynamic covalent hydrogel enabling pH-responsive release of carboxymethyl chitosan and caffeic acid for synergistic antibacterial activity and wound healing
CA3137987C (en) Novel polysaccharide-based hydrogel scaffolds for wound care
Li et al. A bioengineered vinpocetine-and menstrual blood stem cell-loaded neural conduit for treating peripheral nerve injury after bone fractures
Ulfa et al. Wound Healing Potential and Characterization of Sericin from Eri Silkworm (Samia cynthia ricini).
KR20240158910A (ko) 세포외 기질(ecm)을 탈세포화하고 탈세포화된 ecm 젤을 제조하기 위한 개선된 방법 및 이의 용도
CN121398859A (zh) 包含无细胞真皮基质微粒的分散液、包含其的填充剂及其用途