RO59686B1 - PROCEDEU DE OBȚINERE A UNUI PRODUS ANALOG ANTICORPILOR IgG - Google Patents
PROCEDEU DE OBȚINERE A UNUI PRODUS ANALOG ANTICORPILOR IgG Download PDFInfo
- Publication number
- RO59686B1 RO59686B1 RO81305A RO8130575A RO59686B1 RO 59686 B1 RO59686 B1 RO 59686B1 RO 81305 A RO81305 A RO 81305A RO 8130575 A RO8130575 A RO 8130575A RO 59686 B1 RO59686 B1 RO 59686B1
- Authority
- RO
- Romania
- Prior art keywords
- precipitate
- igg
- reagent
- preparing
- extraction
- Prior art date
Links
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims abstract description 14
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 8
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims abstract description 8
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims abstract description 7
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 claims abstract description 6
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims abstract description 6
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 claims abstract description 6
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims abstract description 6
- 235000006040 Prunus persica var persica Nutrition 0.000 claims abstract description 5
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 claims abstract description 5
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 5
- 244000144730 Amygdalus persica Species 0.000 claims abstract description 4
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 claims abstract description 4
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims abstract description 4
- 244000018633 Prunus armeniaca Species 0.000 claims abstract description 3
- 235000009827 Prunus armeniaca Nutrition 0.000 claims abstract description 3
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 claims description 3
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 2
- 230000000984 immunochemical effect Effects 0.000 claims description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 abstract description 3
- FTOAOBMCPZCFFF-UHFFFAOYSA-N 5,5-diethylbarbituric acid Chemical compound CCC1(CC)C(=O)NC(=O)NC1=O FTOAOBMCPZCFFF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229940027941 immunoglobulin g Drugs 0.000 description 4
- 241000894007 species Species 0.000 description 4
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 3
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 3
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 229960002319 barbital Drugs 0.000 description 2
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 241001474033 Acar Species 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 240000005809 Prunus persica Species 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 125000004177 diethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 1
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 description 1
- 235000004252 protein component Nutrition 0.000 description 1
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 1
- RGHFKWPGWBFQLN-UHFFFAOYSA-M sodium;5,5-diethylpyrimidin-3-ide-2,4,6-trione Chemical compound [Na+].CCC1(CC)C([O-])=NC(=O)NC1=O RGHFKWPGWBFQLN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
: Invenția se referă ia un procedeu
de obținere a· unui -reactiv Imunocbimic
destinat identificării și dozării imunoglobuiinalor
serice IgG umane șl de la alte
specii animale. Procedeul conform invenției
constă în aceea că folosește ca materie
primă coaja sâmburilor de piersică sau
caisă, care se usucă în curent de aer cald,
se macină, se-supun extracției ou o soluție
apoasă tamponată la pH~8, -după care extractul
obținut se centrifughează. supernatantui
se precipită cu ascool etilic ia 50°C,
Iar precipitatul sa resoiubliurează în soluție
tampon.
Description
Invenția de față se referă ia un reactiv imunochimic destinat identificării și dozării imuncglobulinelcr serice IgG umane și de ia alte specii animale.
In prezent, în scopul identificării și dozării îmunoglobulinelor de ta om și animale, se folosesc seruri monospeciflce. Aceste seruri se obțin prin hîperimunizarea unor animale potrivite pentru acest scop. cate sunt hiperimunizate cu antlgenul respectiv după o anumită schemă, sângerarea animalului făcându-se când sa obținut un titru de anticorpi corespunzător.
Deoarece în diferite afecțiuni virotlce și bacteriene umane și animale, imunoglobulinele normale - y globuiinele polivalențe - suferă modificări mari din punct de vedere cantitativ, determinarea lor oferă un spectru larg de indicații în scopul punerii diagnosticului Folosirea ca reactivi a serurilor animale monespeciflce prezintă dezavantaje, datorită faptului că acești reactivi sunt scumpi, specifici de specie, iar procedeul lor de obținere este lung și laborios.
Invenția de față elimină dezavantajele arătate, prin aceea că, în scopul detectării și determinării cantitative a imuncgiobuiinei G (IgG) ia om șl animale, folosește un reactiv obținut prin extragere din cojite sâmburilor de piersică, -izolate, uscate și măcinate, extracția făcându-se cu ajutorul unei soluții apoase aduse ia pH alcalin. între 8 șl 9, cu veronal sodic (ester dietilmaienio al acidului barblturlc - sarea sodică a esteruiui dietil maionlc al acidului Parblturic). după care extractul abținut se centrifugh-eazâ, supernatantul se precipită în alcool etilic la 50’, iar precipitatul se resolubilizează în soluție tampon ia pH~ circa €
Se dă mas departe, un exemplu de realizare a invenției.
Sâmburi de piersici (Piersica veri gans Wri se recoltează prin procedee mecanice, apoi se sparg, se aduc sub formă de făină, prin măcinare într-o moară cu ciocănele. în vederea extragerii reactivului, făina din coji de sâmburi se încarcă într-un ex.tractor prevăzut cu mijloace de agitare și se toarnă soiuți© tampon veronal - veronal sodic cu pH~8<6. cu tăria ionică Intre 0,05 șl 0,025, folosind pentru fiecare gram de făină de ia 5 la 20 ml soluție tampon, După extracție, reziduul Insolubil se sedimentează ușor sau este separat prin centrifugare. Reziduul se supune ia circa
2,.,3 extracții efectuate în aceleași condiții ca extracția anterioară. Supernatantele obținute se unifică șl reprezintă reactivul brut.
Pentru extragerea componentelor active din reactivul brut, se face precipitarea în gradient de alcool etiiic, separarea precipitatului prin centrifugare, apoi, depozitul s® resolubilizează în soluție tampon de veronal - veronal sodic cu pH~3, ia volum calculat în funcție de standardizarea fixată. Extractul final se clarifică prin centrifugare timp de 15 mm, ia 3000 ture, apoi este verificat electroferetic.
în același fel se lucrează șl în cazul când în locul sâmburilor de piersică se folosesc sâmburii de caisă.
Modul de folosire ai reactivului este următorul,·
0,3 mi extract se încorporează în 3 mi gel de acar ia 50cC șt se toarnă la aceeași temperatură pe o iarnă de microscop. în stratul Pe gel, după răcire, se practica 4.,,5 godeuri cu diametrul de 2 mm și se încarcă cu ser sangvin uman și de la alte specii, câte o specie într-un godeu.
Lama, astfel preparată, se Introduce in aparatul de electroforezâ ca la Imunodozârite de tip rachetă anodică șl se stabilește circuitul electric: imunoglobulinele G, de la toate speciile, migrează spre catod, în condițiile date, ele precipitând, selectiv, cu componentele corespunzătoare din reactiv, care migrează spre anod. Reacția formează câte o rachetă cu mai multe trepte pentru fiecare probă de ser, rachetă realizată prin precipitarea unor sufofuncțiuni de imunoglobulrne G eu reactanții corespunzători din reactivul conform invenției.
Reactivul se standardizează în funcție de întinderea dorita a rachetei, pentru o cota dată din proba de ser sangvin analizată și în funcție de separarea cea mai potrivită a subfracțiuniior care realizează treptele rachetei.
Reactivul obținut, conform Invenției, poate fi folosit și pentru identificarea și dozarea unor componente prateinic© extrase din vegetale, semințe de mere și din alte fructe.
Invenția prezintă următoarele avantaje:
- realizează un reaci-v nou. de utili zare largă în biologia șl clinica umană, în biologia șl oilnlca veterinară, în biologia vegetală și în industria alimentară, pentru identificarea onor componente proteinice.
Claims (1)
- RevendicareProcedeu de obținere a unui reactiv imunochimic destinat identificării șl dozării imunoglobulinelor serice G umane și animale, caracterizat prin aceea că se folosește ca materie primă coaja sâmburilor de piersică sau caisă, care se usucă în curent de aer cald, se macină, se supune extracției cu o soluție apoasă tamponată ia pH-8, după care extractul obținut se centrifughează, supernatantul se precipită cu alcoolul etilic la SO°C, Iar precipitatul se resoiubitizeazâ In soluție tampon.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RO81305A RO59686B1 (ro) | 1975-01-31 | 1975-01-31 | PROCEDEU DE OBȚINERE A UNUI PRODUS ANALOG ANTICORPILOR IgG |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RO81305A RO59686B1 (ro) | 1975-01-31 | 1975-01-31 | PROCEDEU DE OBȚINERE A UNUI PRODUS ANALOG ANTICORPILOR IgG |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RO59686B1 true RO59686B1 (ro) | 2002-06-28 |
Family
ID=40902936
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RO81305A RO59686B1 (ro) | 1975-01-31 | 1975-01-31 | PROCEDEU DE OBȚINERE A UNUI PRODUS ANALOG ANTICORPILOR IgG |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RO (1) | RO59686B1 (ro) |
-
1975
- 1975-01-31 RO RO81305A patent/RO59686B1/ro unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Vogel | Controversy in human genetics. ABO blood groups and disease | |
| Leaver et al. | [43] Protein synthesis by isolated plant mitochondria | |
| Matthews | Plant virus serology | |
| Kilshaw et al. | Gastrointestinal allergy to soyabean protein in preruminant calves. Allergenic constituents of soyabean products | |
| NL8000536A (nl) | Bepaling van met tumor gepaard gaande glycobrug en kankerdiagnose. | |
| Yemm et al. | The amino acids of cytoplasmic and chloroplastic proteins of barley | |
| CN115368481B (zh) | 一种具有多功效的松露多糖的制备方法及应用 | |
| Kałuża et al. | The content of immunomodulatory glycoepitopes in seminal plasma glycoproteins of fertile and infertile men | |
| Chay et al. | Purification of maize pollen exines and analysis of associated proteins | |
| Newman et al. | Synthesis of two chromoplast-specific proteins during fruit development in Capsicum annuum | |
| US2793203A (en) | Process of preparing stable, highly purified gamma globulin preparations | |
| CN110346479A (zh) | 一种牡蛎内源肽的提取和鉴定方法 | |
| ABEL | RESEARCHES ON INSULIN¹ I. IS INSULIN AN UNSTABLE SULPHUR COMPOUND? JOHN J. ABEL AND EMK GEILING WITH THE ASSISTANCE OF G. ALLES AND A. RAYMOND | |
| CN106124760A (zh) | 一种新的cmv、pvy快速检测方法 | |
| CN113341036B (zh) | 一种评价天然蜂花粉与酶法破壁蜂花粉致敏性的方法 | |
| RO59686B1 (ro) | PROCEDEU DE OBȚINERE A UNUI PRODUS ANALOG ANTICORPILOR IgG | |
| Vickery | The proteins of plants | |
| RO59685B1 (ro) | PROCEDEU DE OBȚINERE A UNUI PRODUS ANALOG ANTICORPILOR lgG | |
| SU686732A1 (ru) | Способ получени комплемента | |
| EP0015755B1 (en) | Recognins, their chemoreciprocals, target attaching globulins and processes for producing these products; methods of detecting cancer tumors | |
| Randles et al. | Changes in polysomes in Nicotiana glutinosa L. leaves infected with lettuce necrotic yellows virus | |
| RO59684B1 (ro) | PROCEDEU DE OBTINERE A UNUI PRODUS ANALOG ANTICORPILOR IgG | |
| Faris et al. | Pathological and molecular study of mycotic abortion in ewes | |
| CN107219288B (zh) | 一种采用蛋白质比对鉴定栝楼籽的方法 | |
| RU2167673C1 (ru) | Набор для определения антител к вирусу синдрома снижения яйценоскости-76 кур |