PT99299A

PT99299A - Processo de preparacao de esteres de piperidino-4-ol n-substituidos e de composicoes farmaceuticas que os contem

Info

Publication number: PT99299A
Application number: PT99299A
Authority: PT
Inventors: Richard Bawden Barlow; Mark Anthony Veale
Original assignee: Nat Res Dev
Priority date: 1990-10-23
Filing date: 1991-10-22
Publication date: 1992-08-31
Also published as: GB9023023D0; EP0506903A1; FI922903A0; AU8714991A; GB9122083D0; GB2249093A; JPH05504578A; WO1992006958A1; ZA918381B; FI922903L; CA2072598A1; FI922903A7

Description

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MEMÓRIA DESCRITIVA 0 presente invento refere-se ao processo de preparação de ésteres de piperidin-4-ol, N-substituídos e ao processo de utilização destes compostos como agentes terapêuticos. A literatura refere alguns estudos sobre a actividade de um grande número de ésteres de piperidin-4-ol N-substituídos, como drogas antimuscarínicas. Existem diversos receptores muscaríni-cos, classificando-se, agora, aqueles relacionados com as acções nos átrios como M2 e os relacionados com a contracção do ileo como M3. Existe uma necessidade particular de compostos que exibam uma actividade selectiva entre os receptores M2 e M3, de forma a proporcionar drogas que possuam actividade no receptor M3, mas que apresentem uma actividade significativamente inferior no receptor M2, reduzindo assim o nível de efeitos secundários indesejáveis, no coração. A pesquisa de antagonitas selectivos adequados nos receptores M2 e M3 foi desenvolvida durante vários anos, como indicado por Barlow e Shepherd, Br. J. Pharmac., 1986, 89, 837-843, que descrevem diversas tentativas para a produção de antagonistas alternativos ao metabrometo de 4-difenilacetoxi-N-metilpiperidina (4-DAMP). No entanto, verificou-se agora que um grupo de ésteres de piperidin-4-ol N-substituídos possuem níveis perfeitamente aceitáveis de actividade antimuscarínica e apresentam uma actividade melhorada para os receptores M3, relativamente aos receptores M2, com um nível de selectividade que é geralmente superior ao do metabrometo de 4-DAMP. Este grupo de compostos nunca foi estudado anteriormente, como drogas antimuscarínicas, apesar de um composto ser referido como apenas um intermediário, num pedido de patente relativo a este tipo de drogas.

Encontrar num composto esta selectividade tem maior valor do que encontrar actividade melhorada mas não selectiva para o receptor antimuscarínico para um novo composto. Assim, a literatura de interesse sobre ésteres de piperidin-4-ol N-substituídos, antimuscarínicos, inclui os estudos referidos 73 259 133628 -4-

por Sugai et al (Chem. Pharm. Buli., 1984, 32(3) . 967 e 977 e Pedido de Patente Japonesa Número 27570/1979), sobre bases terciárias e sais de amónio quaternário contendo um grupo l,3-dioxolano-4-ilmetilo, substituído ou não substituído, no átomo de azoto do anel piperidina.

Assim, o presente invento compreende um composto de fórmula (i)

(I) em que e R2 são, cada um, seleccionados separadamente entre um grupo fenilo está não substituído ou substituído com um ou mais grupos seleccionados entre alquilo, alcoxi, alquilenodioxi, halogéneo, alquilo substituído com halogéneo, hidroxi e nitro, R3 e R4 são cada um hidrogénio ou formam em conjunto um grupo oxo e R5 é um grupo aromático, encontrando-se o composto opcionalmente na forma de um sal de adição de ácido, ou sal de amónio quaternário, fisiologicamente aceitável, para uso em terapia.

Estes compostos são novos, com excepção da descrição de hidrocloreto de l-benzil-4-difenilacetoxipiperidina, como intermediário no Exemplo 5 do Pedido de Patente Europeia A-0309424. 0 presente invento compreende ainda um composto de fórmula (I)

(I) em que R^ e R2 são, cada um, seleccionados separadamente de entre um grupo fenilo que se está não substituído ou substituído com um ou mais grupos seleccionados de entre alquilo, alcoxi, alquilenodioxi, halogéneo, alquilo substituído com halogéneo, hidroxi e nitro, r3 e R4 são, cada um, hidrogénio ou formam em conjunto um grupo oxo e R5 é um grupo aromático, encontrando-se o composto 73 259 133628 -5-

opcionalmente na forma de um sal de adição de ácido, ou sal de amónio quaternário, fisiologicamente aceitável, mas excluindo o composto em que R1=R2=R5=fenilo e R3=R4=hidrogénio e os seus sais de adição de ácido fisiologicamente aceitáveis.

Os substituintes particularmente adequados num grupo fenilo substituído, R<l ou R2, são os grupos alquilo Ci_g, por exemplo metilo, etilo, propilo e isopropilo, os grupos alcoxi C-^g, por exemplo metoxi e etoxi, os grupos alquilenodioxi por exemplo metilenodioxi, os grupos fluoro, cloro, bromo e iodo, os grupos alquilo C^-β substituídos com um ou mais grupos halogéneo, por exemplo três grupos fluoro como em trifluorometilo, hidroxi e nitro. Apesar de poderem estar presentes diversos substituintes, por exemplo 1, 2 ou 3 substituintes monovalentes, estes grupos fenilo substituídos não contêm, de preferência, mais do que um substituinte (incluindo um grupo alquilenodioxi) e, convenientemente, os grupos R^_ e R2 são idênticos, especialmente sendo cada um, um grupo fenilo não-substituído.

Apesar de o grupo -C(R3)(R4)-R5 poder ser um grupo acilo, é preferível que R3 e R4 sejam cada um hidrogénio, em vez de formarem, em conjunto, um grupo oxo. O grupo aromático R5 pode ser carbocíclico ou heterocíclico e não substituído ou substituído, consistindo os grupos heterocíclicos adequados em sistemas de anel de 5 ou 6 membros contendo um ou dois heteroátomos, seleccionados de entre o grupo constituído por oxigénio, azoto, e enxofre. Apesar de os grupos carbocíclicos R5 adequados serem ambos fenilo e naftilo, é geralmente preferido que R5 seja monocíclico. Além disso, é ainda preferido que R5 seja um grupo aromático não básico, de forma que de entre os grupos heterocíclicos, o grupo tienilo é de maior interesse do que os grupos básicos como piridilo, pirimidilo, oxazolilo e tiazolilo, apesar de esses grupos poderem ser usados como evidenciado pelos dados apresentados no presente invento no composto contendo um grupo R5 2-piridilo. Os grupos R5 preferidos são assim 2- ou 3-tienilo (tienilo indica o radical univalente

derivado de tiofeno) e, especialmente, fenilo.

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Estes grupos aromáticos R5, podem estar substituídos com um ou mais substituintes mas de preferência com não mais do que um substituinte, especialmente no caso de grupos naftilo e, particularmente, fenilo. Os substituintes adequados são vários, como descrito acima para os grupos fenilo substituídos, ^ e r2, por exemplo metilo, metoxi, fluoro e nitro. No entanto, no caso de Rg, os substituintes halogéneo e especialmente fluoro, são de maior interesse. A substituição pode ocorrer em várias posições no anel mas, no caso dos grupos fenilo substituídos há um interesse particular na substituição nas posições orto e, especialmente, para, sendo menos preferidas as substituições na posição meta, especialmente no caso de um grupo nitro. Os grupos r5 não substituídos são no entanto, geralmente preferidos.

Os compostos específicos (I), de acordo com o processo do presente invento são 4-difenilacetoxi-l-fenacilpiperidina (R^=R2=R5=C6H5, R3+R4=0), l-benzil-4-difenilacetoxipiperidina (R1=R2=R5=C6H5, R3=R4=H), 4-difenilacetoxi-l-(2-tienilmetil)-piperidina (R1=R2=sC6H5, R3=R4=H, R5=2-C4H3S) e 4-difenilacetoxi--l-(3-tienilmetil)piperidina (R1=R2=C6H5, R3=R4=H, R5=2-C4H3S).

Como indicado, as bases terciárias (I), podem ser usadas na forma de sais fisiologicamente aceitáveis, que podem ser formados com diversos ácidos inorgânicos e orgânicos adequados. Exemplos desses ácidos inorgânicos incluem ácido fosfónico, ácido nítrico, ácido sulfúrico, e particularmente os haloácidos, ácido clorídrico, ácido bromídrico e ácido iodídrico. Exemplos dos ácidos orgânicos incluem ácido cítrico, ácido oxálico, ácido fumárico, ácido maleico, ácido láctico, ácido succínico, ácido málico, ácido tartárico e ácido metanossulfónico. A formação desses sais de adição de ácido proporciona um processo particularmente adequado para a formulação dos compostos básicos (I). Adicionalmente, no entanto, é possível preparar sais de amónio quaternário em que o átomo de azoto do anel piperidina é substituído com um grupo R adicional, para proporcionar um sal, como apresentado abaixo, em que um catião (Ia) se encontra associado com um ou vários aniões X" fisiologicamente aceitáveis. 73 259 133628 -7-

\ / :chcoo

C(R3)(R4)-R5

R (Ia)

Os sais quaternários podem conter diversos grupos RX mas são particularmente preferidos aqueles que contêm um grupo R que é um grupo alquilo substituído com um grupo fenilo, o qual pode estar, opcionalmente, também substituído ele próprio, por exemplo como descrito em relação aos grupos e R2 e particularmente os que contêm um grupo R que é um grupo alquilo. Esses grupos alquilo R podem ser, convenientemente, como descrito aqui anteriormente, em relação a substituintes alquilo nos grupos fenilo substituídos R-l e R2, sendo por exemplo isopropilo, propilo, etilo ou particularmente metilo. o grupo X pode ser de diversos tipos, por exemplo correspondendo aos aniões presentes nos sais de adição de ácido aqui anteriormente descritos. Os grupos X preferidos são, no entanto, os grupos halogéneo, por exemplo bromo ou cloro.

Os compostos de fórmula (I) são preparados mais convenientemente , por reacção de um composto de fórmula (II).

(II) em que R·^ e R2 são como definidos para o composto de fórmula (I) ou são grupos neles convertíveis, com um composto de fórmula (III). (III)

Y— C —R5 I em que R3 e R4 são como definidos para o composto de fórmula (I) e R5 é como definido para o composto de fórmula (I) ou é um grupo nele convertível e Y é um grupo que se despede adequado, em particular um grupo halogéneo, por exemplo um grupo cloro ou, especialmente, bromo. A reacção é efectuada, convenientemente, em 73 259 133628 -8- JjSfiflÉM*'’ solução, num solvente orgânico adequado como clorofórmio, usando uma temperatura e tempo adequados, por exemplo, à temperatura ambiente durante um período de até 24 horas.

Uma via alternativa para os compostos de fórmula (I) envolve a reacção de um composto de fórmula (IV)

RK

CHCOY r2 7 em que % e R2 são como definidos para o composto de fórmula (I) ou são grupos neles convertíveis e Y é um grupo que se despede adequado, com um composto de fórmula (V) r—\ ^3 H0Q-?“R5 (V) R4 em que R3 e R4 são como definidos para o composto de fórmula (I) e R5 é como definido para o composto de fórmula (I) ou é um grupo neles convertível. Y é em particular um grupo halogéneo, por exemplo um grupo bromo ou, especialmente cloro, ou alternativamente um grupo alcoxi, por exemplo um alcoxi contendo um grupo alquilo, como descrito anteriormente, em relação aos substitu-intes alquilo nos grupos fenilo substituídos R^ e R2, tal como metoxi. A reacção é efectuada convenientemente em solução num solvente orgânico adequado, tal como tolueno, usando uma temperatura e tempo apropriados, por exemplo a 80°C, durante um período de até 24 horas.

As bases livres (I) não formam frequentemente sólidos cristalinos e é portanto, em geral, conveniente isolar o composto I na forma de um sal de adição de ácido por reacção com um ácido, por exemplo um ácido monobásico. É também usualmente preferível formular o composto (I) como um sal, por exemplo com um dos ácidos aqui descritos anteriormente, por exemplo HBr ou HC1 e, nesse caso, o composto pode de forma adequada ser isolado directamente na forma do sal de adição de ácido que será usado para fins terapêuticos.

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Como alternativa à utilização dos compostos (I) como a base livre ou um sal de adição de ácido, eles podem ser formulados como um sal de amónio quaternário contendo um catião (Ia), como indicado anteriormente, apesar de este tipo de sais apresentar desvantagens em termos de absorção oral e capacidade para atravessar barreira sangue-cérebro. Estes sais podem ser formados convenientemente por diversas vias. Primeiramente, o composto (I) pode ser feito reagir com um composto RX em que R é o grupo adicional presente no átomo de azoto no sal de amónio quaternário e X” é o anião aí presente. Em alternativa, um composto de fórmula (lia) R\ yv CHCOO—(na) r2x em que R-l e R2 são como definidos acima para a fórmula (II) e R é o grupo adicional presente no sal de amónio quaternário, pode ser feito reagir com um composto de fórmula (Illa) i (IIIa)

X —C—R5 I R4 em que R3, R4 e R5 são como definidos acima para a fórmula (III) e X proporciona o anião presente no sal de amónio quaternário.

Particularmente, quando os sais de amónio quaternário contêm um anião que não é um anião halogéneo, pode ser conveniente preparar o sal por reacção de um sal de amónio quaternário contendo esse anião halogéneo, com um sal de metal alcalino, por exemplo um sal de sódio ou potássio, contendo o anião alternativo que se deseja introduzir.

Mais vulgarmente, R1# R2 e R5 nos compostos de fórmulas (II), (IV), (V), (III), (Ha) e (Illa) são idênticos a esses grupos no composto de fórmula (I) mas, nalguns casos, pode ser conveniente que não seja esse o caso, em particular quando estes grupos são grupos substituídos e os compostos (II) a (V), (lia) e (Illa), contêm um substituinte ou substituintes convertíveis nos

73 259 133628 presentes em (I).

Deverá entender-se que o invento engloba os compostos (I) nas diversas formas estereoquimicas em que eles existem, algumas das quais podem ser particularmente valiosas em virtude do seu nível de actividade terapêutica e/ou propriedades físicas tais como maior solubilidade aquosa, etc.. Em particular, quando R]_ e R2 são diferentes, os compostos conterão pelo menos um átomo de carbono assimétrico e serão resolúveis em isómeros opticamente activos. Além disso, os sais de amónio quaternário podem existir sob diferentes formas estereoisoméricas, dependendo da orientação relativa dos grupos -C(R3)(R4)-R5 e R, em relação ao resto da molécula. Essa estereoquímica é descrita em detalhe por Sugai êt al. ibid. particularmente no pedido de patente japonesa. Enten-der-se-á, no entanto, que a ausência de estereoisomerismo num composto (I) pode simplificar os processos de síntese e, por esta razão, as bases livres e os sais de adição de ácido (I) em que R-^ e R2 são idênticos e que não contêm outros átomos de carbono assimétricos, apresentam vantagens. A actividade antagonista dos compostos do presente invento contra os receptores muscarínicos, particularmente contra o re-ceptor M3, torna-os valiosos como espasmolíticos (ou antiespasmó-dicos) que podem ser usados no tratamento de pacientes sofrendo de diversas condições em que o músculo liso se encontra em espasmo. Essas condições incluem perturbações da motilidade gastrintestinal tais como condição espástica dos intestinos, diarreia funcional, sindrome do cólon irritável, espasmo cardíaco, espasmo do piloro, refluxo gastro-esofágico, úlceras gástricas e duode-nais e também espasmo dos tractos biliar e, particularmente urinário e incontinência urinária. Adicionalmente, os compostos têm interesse no controlo do broncoespasmo já que os receptores M3 estão envolvidos na broncoconstricção induzida por colinérgi-cos. 0 maior valor dos compostos reside na sua capacidade para bloquear os efeitos nos receptores M3, em concentrações que não provocam efeitos significativos sobre o batimento cardíaco. Os 11- 73 259 133628 compostos têm ainda interesse pela sua actividade anti-secretória e, em adição aos seus efeitos sob a secreção gástrica e intestinal apresentam portanto a potencialidade de poderem ser usados na redução da secreção nasal nas constipações, na redução da sudação e na redução de excreções excessivas em conjugação com procedimentos operatórios. Assim, há uma perspectiva de utilização destes compostos como substitutos para a atropina, na salvaguarda cardíaca, como medicação pré-operatória, particularmente em pacientes de idade avançada e em preparações para a supressão das secreções nasais e para a redução da sudação.

Deverá também notar-se que foi já demonstrado o valor de outros antimuscarínicos devido a um efeito de actuação central no tratamento de defeitos do sistema nervoso central, em que se verifica uma disfunção dos mecanismos colinérgicos e muscarínicos, por exemplo nas doenças de Parkinson e de Alzheimer e noutras condições que envolvam deficiências cognitivas. Os compostos do presente invento têm portanto também potencialidades nesta área.

Os compostos (I) podem ser formulados com um diluente ou veículo fisiologicamente aceitável, para uso como composições farmacêuticas no campo da veterinária, por exemplo num contexto aviário ou, especialmente, mamífero e particularmente para uso humano, por diversos processos. Por exemplo, os compostos podem ser aplicados como uma composição incorporando um diluente ou veículo líquido, por exemplo uma suspensão ou emulsão aquosa ou oleosa, que pode frequentemente ser empregue sob forma injectável para administração parentérica e em consequência pode ser, convenientemente, estéril e isenta de pirogénios. A administração oral pode também ser usada, particularmente no caso das bases livres e dos seus sais de adição de ácido e, de facto, é mesmo preferida. Apesar de as composições para este fim poderem incorporar um diluente ou veículo líquido, é mais usual utilizar um sólido, por exemplo um material veículo sólido convencional tal como amido, lactose, dextrina ou estearato de magnésio. Essas composições sólidas podem ser convenientemente de um tipo moldado, por exemplo comprimidos, cápsulas (incluindo cápsulas expansíveis ("spansules"), etc.

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Podem ser consideradas outras formas de administração, além da injecção e da via oral, quer no contexto humano quer no veterinário, como por exemplo o uso de supositórios ou pessários. Outra forma de composição farmacêutica é uma destinada a administração bucal ou nasal, por exemplo pastilhas, gotas nasais ou um pulverizador de aerossol ou, em alternativa gotas para administração ocular, as quais podem conter convenientemente um diluente ou veículo líquido estéril.

Assim, o invento inclui ainda uma composição farmacêutica compreendendo um composto (X) como definido anteriormente, em conjunto com um diluente ou veículo fisiologicamente aceitável.

As composições podem ser formuladas em forma de dosagem unitária, isto é, na forma de porções discretas compreendendo cada uma, uma dose unitária ou um múltiplo ou sub-múltiplo duma dose 'unitária. Apesar de a dosagem do composto activo utilizado depender de vários factores, incluindo do composto particular empregue na composição e da condição a tratar, pode estabelecer-se como orientação geral que se alcançará geralmente um efeito espasmolítico satisfatório usando uma dosagem diária de cerca de 0,05 a 40 mg/kg, particularmente de cerca de 0,1 a 10 ou 20 mg/kg, por exemplo de cerca de 1 a 1,5 mg/kg. No entanto, deverá entender-se que poderá ser apropriado, sob certas circunstâncias, administrar dosagens diárias inferiores ou superiores a estes níveis. Quando desejado, pode administrar-se mais do que um composto (I) na composição farmacêutica ou, ainda, podem incluir-se outros compostos activos na composição. 0 presente invento inclui portanto um composto de fórmula (I), como descrito anteriormente, para uso em terapia e também um processo para o tratamento de um paciente necessitado de tratamento anti-espasmódico, processo esse que compreende a administração ao referido paciente de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de fórmula (I), como definido anteriormente. 0 invento é ilustrado pelos Exemplos seguintes.

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EXEMPLOS

Exemplo 1; preparação de compostos (I) (A) Os compostos são preparados por reacção de quantidades equimolares da base livre 4-difenilacetoxipiperidina

R-^CHCOO

NH apropriada, não substituída ou substituída e / do composto de bromo Br-C(R3)(R4)-R5 apropriado. Os reagentes são dissolvidos em clorofórmio e agitados à temperatura ambiente durante a noite. A solução é seguidamente lavada com solução aquosa saturada de carbonato de sódio e a fase de clorofórmio é seca com sulfato de magnésio. Após filtração, o solvente é removido por destilação, removendo-se os últimos vestígios de clorofórmio por evaporação com etanol. o resíduo é triturado com éter e este procedimento origina frequentemente a base como um pó branco. O produto resultante da trituração é dissolvido numa mistura de acetona e éter (3:1 em volume) e adiciona-se um ligeiro excesso de HBr aquoso a 50% com agitação. A agitação da mistura é prolongada durante a noite, surgindo frequentemente o hidrobrometo da base como um sólido branco, apenas cerca de 5 minutos mais tarde. A mistura é então filtrada e o sólido é lavado com éter e recristalizado, usualmente em butanona ou misturas de butanona e etanol, com a adição de éter se necessário.

Os detalhes acerca do solvente de cristalização e ponto de fusão para catorze compostos (I) preparados desta forma são apresentados na Tabela 1. Estes contêm como R5 um grupo fenilo substituído ou não substituído, um grupo a- ou β-naftilo ou um grupo 2- ou 3-tienilo. Adicionalmente, apresentam-se também na tabela os dados semelhantes sobre um décimo quinto composto, contendo um grupo 2-piridilo R5, preparado como descrito em (B) abaixo. No caso do composto 7, a base livre foi obtida por cristalização em etanol/água, do produto obtido por trituração do resíduo reaccional. No caso do composto 2, o metabrometo foi formado por reacção da base livre em butanona, com um excesso (>1 equivalente) de brometo de metilo. (B) 0 procedimento acima pode ser ligeiramente alterado de

73 259 133628 14- forma que no caso do composto contendo um grupo 2-piridilo R5, o reagente 2-clorometilpiridina possa ser usado como se segue.

Submete-se a agitação uma mistura de 4-(difenilacetoxi)pipe-ridina (2,37 g, 8,03 mmol), carbonato de potássio (2,222 g, 16,1 mmol), hidrocloreto de 2-(clorometil)piridina (1,31 g, 7,99 mmol) e iodeto de sódio catalítico (65 mg) em acetonitrilo ebuliente (30 ml), durante 15 horas. 0 solvente é evaporado sob pressão reduzida. O resíduo é submetido a partição entre água (30 ml) e clorofórmio (3x50 ml). As porções orgânicas combinadas são secas sobre sulfato de sódio e o solvente é evaporado sob pressão reduzida. O resíduo é submetido a cromatografia "flash" sobre sílica, eluindo com acetona-éter de petróleo (p.e. 40-60°C) 1/1, para originar a base livre como um sólido amarelo pálido. Este é dissolvido em acetona (20 ml) e tratado com solução aquosa de HBr a 48% (1 ml). Os solventes são evaporados sob pressão reduzida e o resíduo é co-evaporado sob pressão reduzida com tolueno (30 ml). 0 resíduo é recristalizado em etanol para originar o sal bis-hidrobrometo de 4-(difenilacetoxi)-1-(2-piridilmetil)piperi-dina, como um pó branco (2,15 g).

Pode usar-se uma variação semelhante com outros compostos. (segue Tabela 1) 73 259 133628 -15- Tabela 1 -15-

Compostos de fórmula i3 (C6H5)2CHC00^N-C-R5 r4

Com posto R3'R4 R5 Sal P.f. solvente de cristalização 1 H,H C6H5 HBr 194,2 butanona/etanol/ /éter 2 H,H C6H5 CH3Br 195,5 II 3 H,H a~C10H7 HBr 189,6 II 4 H,H P“C10H7 HBr 220,4 butanona/etanol 5 H,H 2-C4H3S HBr 192,8-193,2 II 6 H,H 3-C4H3S HBr 175,5-176,2 butanona 7 H,H p-ch3-c6h4 base 99,1 etanol/água 8 H,H o-f-c6h4 HBr 176,3 butanona/etanol/ /éter 9 H,H m-F-C6H4 HBr 197,6 butanona/etanol 10 H,H p-F-C6H4 HBr 186,5 II 11 H,H m-N02-CgH4 HBr 185,2 II 12 H,H p-no2-c6h4 HBr não determinado butanona/etanol/ /éter 13 0= <=6% HBr não determinado butanona/etano1 14 0= m-CH30-C6H4 HBr 206,7 II 15 H,H 2-C5H4N 2HBr 199,6-201,0 etanol Exemolo 2: comoaracão da actividade dos compostos (1) em relação a átrios e íleo isolados de porquinhos da índia

Os procedimentos seguidos foram no essencial os descritos por Barlow e Shepperd, Br. J. Pharmac., 1986, 89l, 837-843, como indicado baixo. (a) íleo isolado de porquinho da índia

As respostas do ileo de porquinho da índia foram registadas isotonicamente com uma carga de cerca de 0,5 g. 0 agonista, car-

73 259 133628 -16- bacol, foi deixado actuar durante 30 segundos e vez, a cada 90 segundos por meio de relés controlados a partir de um microcomputador PET. 0 tecido foi suspenso em solução de Krebs arejada com uma mistura de 95% 02 e 5% C02, contendo usualmente norfenilefrina 5 μΜ e as experiências foram conduzidas a 29,8 ± 0,3 °C.

Obtiveram-se alternadamente respostas de controlo reduzidas e elevadas, usualmente para carbacol 0,1 e 0,2 μΜ. Quando estas se tornaram regulares, o tecido foi exposto a uma solução do antagonista e a concentração de agonista foi aumentada para tentar obter respostas que se assemelhassem grosseiramente às dos controlos. Quando estas se tornaram regulares, a razão de dose aproximada era dada pela razão das concentrações de agonista utilizadas na presença e na ausência do antagonista e calculou-se uma razão de dose exacta, a partir da dimensão das respostas, por meio de um cálculo semelhante a um ensaio de 4 pontos. (b) Átrios isolados de porquinhos da india

Os átrios foram colocados em solução de Krebs, arejada com uma mistura de 95% 02 e 5% C02, contendo usualmente norfenilefrina 5 μΜ (a mesma solução usada para o ileo). A temperatura era 29,8 ± 0,3 °C e as contracções espontâneas foram registadas isometricamente, com uma carga de cerca de 0,2 g, registando-se também os potenciais de acção. 0 agonista, carbacol, foi adicionado por meio de relés, operados a partir de um microcomputador Commodore 128 e deixado actuar durante 5 minutos. Administraram-se doses, uma vez, a cada 15 minutos, com uma segunda lavagem 10 minutos após o início do ciclo. Os efeitos do agonista foram expressos como a percentagem de inibição da força de contracção. Tal como nas experiências com ileo, as respostas de controlo foram obtidas usualmente com carbacol 0,1 e 0,2 μΜ. 0 tecido foi então exposto ao antagonista e a experiência prosseguiu tal como com o ileo. 0s resultados obtidos para os catorze compostos (I) do Exemplo 1 são apresentados na Tabela 2. As razões de dose obtidas, -17- -17- 73 259 133628 juéLm, são utilizadas para calcular as constantes de afinidade que são apresentadas sob forma logarítmica. Nalguns casos, a estimativa média do logaritmo da constante de afinidade, K, é apresentada (± e.p.), com o número de experiências efectuadas indicado entre pa-renteses. Nos outros casos, apenas foi efectuada uma experiência. Verificar-se-á que, para cada composto, há um efeito antagonista selectivo no receptor M3, sendo o efeito nos átrios inferior ao verificado em relação ao ileo. Com base nestes resultados, o maior nível de selectividade foi demonstrado por hidrobrometo de l-benzil-4-difenilacetoxipiperidina, mas obtiveram-se níveis muito semelhantes com os hidrobrometos de 1-(3-tienilme-til)-4-difenilacetoxipiperidina e, particularmente, l-(2-tie-nilmetil)-4-difenilacetoxipiperidina (compostos 1, 6 e 5, respectivamente).

Tabela 2

Logaritmos das constantes de afinidade para Átrios e ileo. para os compostos (I)

Composto Átrios Ileo 1 5,65 ± 0,18 (4) 7,65 ± 0,07 (5) 2 6,64 ± 0,02 (4) 7,82 ± 0,03 (5) 3 4,30 5,74 4 4,78 6,75 5 5,69 ± 0,21 (2) 7,47 ± 0,06 (3) 6 5,96 ± 0,08 (3) 7,50 ± 0,06 (3) 7 5,54 6,68 8 - 7,17 9 5,90 7,22, 7,46 10 5,48 7,07 11 5,70 6,48 12 5,87 7,07 13 6,03 6,87 14 5,26 6,12 15 5,07 7,10

Claims

73 259 133628 -18- REIVINDICACÕES

1 - Processo de preparação de um composto de fórmula (I) R] _v R3 \hcoo-^ N—Ç— r5 (D R2 R4 em que R-^ e R2 é, cada um, seleccionado separadamente de entre um grupo fenilo que está não substituído ou substituído com um ou mais grupos seleccionados de entre alquilo, alcoxi, alquilenodio-xi, halogéneo, alquilo substituído com halogéneo, hidroxi e nitro, R3 e R4 são cada um hidrogénio ou, em conjunto, são um grupo oxo e R5 é um grupo aromático, estando o composto opcionalmente na forma de um sal de adição de ácido, ou de um seu sal de amónio quaternário, fisiologicamente aceitável, mas excluindo o composto em que Ri = R2 “ R5 = fenilo e R3 = R4 = hidrogénio e dos seus sais de adição de ácido fisiologicamente aceitáveis, caracterizado por compreender: (1) a reacção de um composto de fórmula (II) R1 CHCOO -O-'· (II) R2 em que R-l e R2 são como definidos para o composto de fórmula (I), ou são grupos neles convertíveis, com um composto de fórmula (III) ?3 Y—C —R5 (111) I R4 em que R3 e R4 são como definidos para o composto de fórmula (I), R5 é como definido para o composto de fórmula (I) ou é um grupo nele convertível e Y é um grupo que se despede adequado e, sempre que apropriado, por qualquer ordem, a conversão de um ou mais de entre R-l, R2 e R5 nos grupos presentes no composto (I) e/ou a conversão do composto num sal de adição de ácido ou num sal de amónio quaternário; (IV) -19- 73 259 133628 (2) a reacção de um composto de fórmula (IV) Ri R2' \ / CHCOY em que e R2 são como definidos para o composto de fórmula (I) ou são grupos neles convertíveis e Y é um grupo que se despede adequado, com um composto de fórmula (V) R3 «°-( )-ç-«5 m «4 em que R3 e R4 são como definidos para o composto de fórmula (I) e R5 é como definido para o composto de fórmula (I) ou é um grupo nele convertivel e, sempre que apropriado, por qualquer ordem, a conversão de um ou mais de entre R1# R2 e R5 nos grupos presentes no composto (I) e/ou a conversão do composto num sal de adição de ácido ou num sal de amónio quaternário; ou no caso da preparação de um sal de amónio quaternário: (3) a reacção de um composto de fórmula (lia) RK _^ CHCOO—( '^-R (Ha) / '-' em que R-l e R2 são como definidos acima para a fórmula (II) e R é o grupo adicional presente no sal de amónio quaternário, com um composto de fórmula (Illa): Γ (11Ia) x—c—R5 1 r4 em que R3, R4 e R5 são como definidos acima para a fórmula (III), e X proporciona o anião presente no sal de amónio quaternário e, sempre que apropriado, a conversão de um ou mais de entre R1# R2 e R5 nos grupos presentes no composto (I); ou (4) a reacção de um sal de amónio quaternário produzido em qualquer de (1), (2) ou (3), com um sal de metal alcalino para substituir o anião presente no sal de amónio quaternário pelo que

73 259 133628 -20- se encontra presente no sal de metal alcalino e, sempre que apropriado, a conversão de um ou mais de entre R1# R2 e R5 nos grupos presentes no composto (I).
2 - Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por R5 ser um grupo fenilo ou tienilo que está não substituído ou substituído com um ou mais grupos seleccionados de entre alquilo, alcoxi, alquilenodioxi, halogéneo, alquilo substituído com halogéneo, hidroxi e nitro.
3 - Processo de acordo com a reivindicação 2, caracterizado por R5 ser fenilo, 2-tienilo ou 3-tienilo.
4 - Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 1, 2 e 3, caracterizado por R^ e R2 serem cada um fenilo.
5 - Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizado por R3 e R4 serem cada um hidrogénio.
6 - Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por se preparar l-(2-tienilmetil)-4-difenilacetoxipiperidina ou 1-(3-tienilmetil)-4-difenilacetoxipiperidina.
7 - Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações precedentes, caracterizado por o composto de fórmula (I) preparado estar na forma de base livre ou de um sal de adição de ácido.
8 - Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado por o composto de fórmula (I) preparado estar na forma de um sal de amónio quaternário em que o grupo adicional substituído no átomo de azoto do anel é um grupo alquilo.
9 - Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por o composto de fórmula (I) preparado ser um sal de amónio quaternário de l-benzil-4-difenilacetoxipiperidina, 4-difenil-acetoxi-l-(2-tienilmetil)piperidina ou 4-difenilacetoxi-l-(3-tienilmetil )piperidina, possuindo um grupo metilo adicional substituído no átomo de azoto do anel. -21- 73 259 133628
10 - Processo para a preparação de uma composição farmacêu tica, caracterizado por se misturar um composto de fórmula (I)

(D em que R-l e R2 é, cada um, seleccionado separadamente de entre um grupo fenilo que está não substituído ou substituído com um ou mais grupos seleccionados entre alquilo, alcoxi, alquilenodioxi, halogéneo, alquilo substituído com halogéneo, hidroxi e nitro, R3 e R4 são cada um hidrogénio ou, em conjunto, são um grupo oxo e Rg é um grupp aromático, encontrando-se o composto opcionalmente na forma de um sal de adição de ácido, ou de um sal de amónio quaternário, fisiologicamente aceitável, com um diluente ou veículo fisiologicamente aceitável.
11 - Processo de acordo com a reivindicação 10, caracterizado por se usar um composto de fórmula (I) de acordo com qualquer uma das reivindicações 2 a 9. Lisboa, iLOU, b Por NATIONAL RESEARCH DEVELOPMENT CORPORATION =0 AGENTE OFICIAL=