PT93017A

PT93017A - Processo e dispositivo para recolher e separar particulas de liquidos corporais para diagnostico medico

Info

Publication number: PT93017A
Application number: PT93017A
Authority: PT
Original assignee: Remedia Ag
Priority date: 1989-02-17
Filing date: 1990-01-31
Publication date: 1990-08-31
Also published as: EP0382905A2; EP0382905A3; JPH02248836A; DE3904872A1; US5160704A

Description

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Descrição do Cbjeeto do invento que REU.IEDIA AG., suiça, industrial com sede em IValdenburgerstrasse 1, 4006 Rasíleia, Suiça» pretende obter em Portugal, para: "PROCESSO E DISPOSITIVO PARA RECOLHEU E SEPARAR PARTÍCULAS Dl LÍQUIDOS CORPORAIS PARA 0 DIAGNÓSTICO IlÉDICO". A presente invenção refere-se a um processo para recolher e separar células ou semelhantes de um líquido para o diagnostico médico, om especial, para o diagnostico microscópico.

Os processos conhecidos de separação de células do líquidos corporais realisam-se em geral por filtraç~ao, centrifugação, ou sedimentação. Para esse efeito desenvolveram-se «ma série de processos e aparelhos. A maior parte destes processos tem censo objectívo limpar líquidos de partículas {preparação de líquidos aquosos) e seguidemente utilizar líquido. Nesse caso, utiliza-se posteriormente o líquido purifieádc e rejeitam-se as partículas. Nestes processos» também não 4 possível recuperar as partículas dos filtros utilizados» por exemplo um filtro de várias camadas on um filtro espesso.

Nos laboratórios médicos, no ensaio do líquidos corporais, trabalha-se usando métodos muito diferentes que se empregam re s pe e 11varaen te para finalidades de diagnóstico ou para a detece“ao de doenças. Sabe-se como centrifugar amostras de líquidos para a obtenç"ao de células. 0 sedimento é estudado em seguida num suporte de objectos.

De acordo com o estado da técnica, utiliza-se de preferencia um tipo especial de centrifugação no qual o material constituído pelas células o-btidas a partir de uma determinada amostra são depostas directaraent© nura suporte de objectos. Neste processo, o líquido corporal é separado das partículas por meio de ura processo d© centrifugação e colectado num veio de papel que em conjunto cosi o suporte para objectos e é tratado na centrífuga.

Juntamente com os métodos de centrifugação, utilizam-se para a recuperação de células métodos de filtraç“ao que se ser- 35 1 5 10 15

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Peí. - 15 Λ - 64 497 61.760 βψ'<.....7‘/ vem principalmente da técnica de filtração através de membrana. Se, a partir de líquidos corporais, por exemplo, de urina, se pretender detectar processos patológicos como por exemplo neoplasias, as células relevantes para o diagnóstico citológico devem ser isoladas da amostra total em grande número e sem selecção. Λ ci tolo-gia baseia-se no material de ensaio e exigem-se requisitos sepecialmen-te apertados relativamente ao método de recuperação das células. Neste caso, é muito importante que, depois da recuperação das células, o seu estado de partida se mantenha completamente, isto é, que a morfologia fina das células corresponda ao que estas tinham já ao separar-se do tecido e entrar no líquido. No caso das amostras de líquidos corporais, trata-se em geral de material de composição muito diferente. Os ascites são frequentemente ricos em células, sangue e proteínas e têm uma elevada viscosidade. As urinas de mulheres são amis ricas em células e mais viscosas do que as urinas de homens. Os processos inflamatórios contaminam as amostras ccm erictrócitos e leucócitos e influenciar.! também a velocidade de escoamento. Podem-se também conseguir amestras com coágulos de proteínas, de fibrina e ds sangue. As bactérias destroem as células e originam a obtenção de amostras com detritos. Para a citologia d© líquidos corporais, e isto g \*álído para a urina e também para outros líquidos, para hemorregias, para ascites e para lavagens cavidades abdominais deve poder obtervse un bom material celular - independentemente da qualidade do líquido. Os processos conhecidos que se empregam para a recolha de partículas e/ou de células possuem ainda muitos inconvenientes. Assim, sabe-se que, nos processos de centrifugação, se pod© perder eompsrativsxsnte muito material de células junto da parede dos tubos de vidro de centrifugação, dependendo do comportamento de adesão das eélu-L as ·

Os filtros de membrana conhecidos possuem igual-mento consideráveis inconvenientes; de maneira espacial, não se podem utilizar com amostras muito ricas em células nem co® soluç“oes muitò-vis|-cos&s. As células sensíveis ou préviamente danificadas são nos dois métodos destruídas ou alteradas em grande proporção. São Igualmente desvantajosos os processos e os dispositivos de filtração em que as células -2- 35 1 5 10 15

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se perdem. Nesses casos, nome aclame n te o conjunto total do preparado eito·· lógico é falseado e existe o perigo de os carcinomas de células pequenas serem seleccionados negativamente. Os métodos d® diagnóstico médico estabelecem os seguintes requisitos relativamente aos processos e dispositivos de recuperação de células que, era geral, não podem ser satisfeitos ou apenas o podem se? incompletamente s - separação de todas as células importantes para o diagnóstico sem a selecção nem a perda de células; - nenhuma limitação relativamente às dimensões das partículas; células com diâmetros iguais a 7//m e menores devem ser alcançadas exactamente nas mesmas proporções que os conglomerados de células com um diâmetro maior do que ΙΟϋ,/Ίη; - a viscosidade de uaa solução (proveniente do líquido corporal) não deve ter qualquer influência sobre as taxas de recuperação das células; - o processo deve funcionar rápida, eficaz e re-prcdutivelir.ente e também ser apropriado para ensaios em série; - para a protecç“ao do utente deve garantir-se que o contacto com o líquido a ensaiar por uma pessoa que realiza o ensaio seja mais possível excluído (profilaxia da iníecção); - a amostra de líquido, depois da separação das partículas deve ser arranjado de maneira segura mas também deve poder ser guardado de maneira segura num sistema fechado; - finalmente, as partículas (células) separadas do líquido devem poder: ser fixadas ou conservadas directamente depois da recuperação num líquido apropriado, por exemplo, álcool. A invenção tem como objectivo de base proporcionar um processo e um dispositivo para colectar e separar partículas de um líquido para o diagnóstico médico que possibilitem fazer de maneira simples e favorável do ponto de vista de custos diagnósticos médicos seguros. 0 processo de acordo com a presente invenção que permite alcançar esse objectivo caracteri?a-se pelo facto de o líquido ser aspirado por meio de um material absorvente através de uma superfície -3- i 5 10 15

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Ref.- ISA - 64 497 61.760 ti $ 1 ^v'SÍ»590' na qual as partículas ficam aderentes. Um primeiro dispositivo de acordo com a presente invenç“ao para alcançar o referido objectivo caracteriza-se pelo facto de compreender - um primeiro reservatório no qual se coloca o material que absorve o líquido e - uma superfície colocada no caminho de aspira» ç~ao do líquido que é permeável ao líquido mas n~ao é permeável às partículas.

Um segundo dispositivo de acordo com a presente invenç"ao para atingir o mencionado objectivo caracteriza-se pelo facto de compreender - um reservatório que está em posiç~ao de espontaneamente aumentar de vouume para aspirar o líquido e - uma superfície colocada no caminho de aspira-ç~ao do líquido que é permeável ao líquido mas n~ao é permeável às partículas. De acordo com um aperfeiçoamento preferido deste dispositivo prevê-se que o recipiente aumente o seu volume per acç~ao de uma mola ou..por aeção da sua elasticidade própria. 0 processo cie acordo com a presente invenção e o dispositivo para a realizaç~ao desse processo possuem uma sórié de vnnta· gens. Podem-se obter amostras avaliáveis com precisão sem que sejam necessários dispositivos dispendiosos e de custos intensivos. 0 processo pode realizar-se de maneira simples e de maneira a durar pouco tempo sem necessidade de empregar pessoal com frequência escolar especial. Além disso, o processo de acordo cora a presente invenção e o dispositivo para a sua realização prática são relativamente pouco selectivos relativamente aos tamanhos e espécies diferentes das partículas (células), isto 4, a distribuição das partículas recuperadas reflecte as proporções efecti-vas que se encontram na amostra de líquido a ensaiar. 0 processo de acordo com n presente invenção é também relativamente cuidadoso, quer dizer, o material de células a ensaiar mantém-se o raais possível não destruído. A invenção também possibilita ma adaptaç~ao re- 35

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Mod. 71 -10000 ex. - 89/07 20 25 lativamonte simples a diversos métodos de diagnóstico, por exemplo, à re·* cuperaç~ao de células do canal urogeni tal. O termo "líquido" tal como é utilizado na presente memória descritiva deve ser considerado no sentido lato. Ele abrange todos os tipos de líquidos corporais, isto á, os líquidos produzidos pelos organismos humanos e d© animais e ainda os liquides obtidos por processamento de líquidos corporais, como por exemplo soluç~oes derivadas de líquidos corporais. 0 termo "partículas" no sentido utilizado na pre * sente invenção deve entender-se no sentido lato e significa de maneira especial aas não apenas células. De acordo cora um aperfeiçoamento sspecialmento preferido do processo da presente invenção e do dispositivo para a realização de um tal processo, preve-se que o líquido seja aspirado por intermédio de acção capilar através da superfície· sm que as partículas (es * poeialnente, as células) permanecem captadas. Sm vez de ser provocada por a-oção capilar, a capacidade* de absorção do material absorvente pode também ser- obtida de ou-tra maneira, por exemplo, por meio de ma roacç~ao química (material hi~ drofílíco) ou por um processo de expans~ao espontâneo em que se produz lima depressão num lado da superfície. Pr©fer©-sa que a superfície n~ao seja formada ia* togralmonte com o material absorvente mas qu© constitua ma camada separada. Deram resultados especialmente bons os tecidos de plástico e do &-cetato. Um tecido de acetato possibilita ma mediç~ao especialmente digna ds confiança, A invenção possibilita obter- um material de células sobre uma superfície (superfície de preparação) cem pequena despesa, caso seja necessário, fixá-lo em seguida, aplicá-lo sobre um suporte para objeetos· Como os ensaios mostraram, realiza-se uma separação do todas as células importantes para o diagnóstico sem práticamente perda de poso do material dag células. Um aperfeiçoamento vantajoso do processo consiste em, antes de passar o material das células para um suporte do objeetos se eliminarem partes essenciais do líquido» absorvido -5- 35

Roí. - 15A - 64 497 61.760 1 ao colher a amostra. Isso favorece n~ao só usa trabalho mais limpo com correspondenteme nte menor perigo de infecção para o pessoal mas também possibilita o envio do material das células assim obtido por exemplo pelo correio. 5 Um aperfeiçoamento vantajoso do processo de acor do coai a presente invenç“ao no facto de se reforçar a aspiração do material de células a ensaiar com o auxílio de um segmento filtrante que aumenta consideravelmente de volume. Medi ante este aumento especial de volume do segmento do filtro, aumenta-se a acção de aspiração durante o 0 carregamento da superfície de preparaç^ao de maneira tão intensa que se favorece fortemente uma boa separação de todas as células importantes para o diagnóstico com uma rápida e eíectiva maneira de proceder do processo. 15

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Da acordo com um aperfeiçoamento adicional do processo, torna-se o material de células a ensaiar colectado na superfície susceptível de ser transportado de tal forma qu®, eventualmente depois da fixação, é introduzido num recipiente fechado, por exemplo, depois de o líquido em excesso ter sido eliminado. 0 material de células a ensaiar encontra-se então, protegido contra influências exteriores, num recipiente fechado, susceptível de ser transportado. Pode pretender-se que adicionalmonte ao material celular que já se encontra sobre a superfície de preparação, se pretenda conservar ou cotransportai* com a amostra mais líquido de ensaio. Bíesse caso, é vantajoso que se introduza adicionalmente líquido a ensaiar no interior de um recipiente que recebe a superfície de preparação, de preferência, do recipiente fechado. Um aperfeiçoamento preferido do dispositivo de acordo com a presente invenção para um tal dispositivo consiste no facto de possuir um recipiente de filtraçãe dotado com uma abertura superior e com uma abertura inferior, cuja abertura inferior é tapada com um elemento de suporte de células permeável a líquidos mas ^impermeável a células em que no recipiente de filtração - um depois do outro de baixo para cima - estão colocados pelo menos um segmento de filtração e em seguida ua dispositivo de aspiração. A superfície acima referida está colocada no elemento de suporte das células. -β- 35 1 5 10 15

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Quando a extremidade inferior deste dispositivo dotada com o elemento de suporte das células é mergulhada num recipiente por exemplo cheio com urina, uma correspondente quantidade de líquido é aspirada pelo dispositivo de aspiração e passa através do elemento de suporte e do segmento de filtração sem que seja necessária a utilização a-dicional de quaisquer outras medidas auxiliares de qualquer tipo que seja. As células, partículas ou semelhantes que se separam do líquido para obtenção de material celular a investigar aderem ao elessento de suporte de células em que o processo de recolha e separação s© realiza cuidadosa-mente e não obstante rápidamente. Especialmente no caso de o material celular separado deve ser expedido, é vantajoso que o dispositivo tenha um recipiente fechado para a extremidade inferior do recipiente de filtração que contém o elemento de suporte das células. Especialmente no caso desta última forma de realização do dispositivo e vantajoso que entre o recipiente fechado e o recipiente de filtração preve-se uma vedação de líquido de preferência caracterizada pelo facto de, na extremidade inferior d o recipiente de filtração, pelo menos, uma vedação de líquido. Quando o recipiente fechado, crao é usual para o caso de transporte, está em ligação com o recipiente de filtração na sua extremidade que fica em frente do elemento de suporte das células e com a sua outra zona da extremidade e a sua zona intermédia de maneira vedada a líquido, utiliza-se uma caixa que envolve o elemento de suporte das células de maneira a ficar vedado. Esta caixa protege o material celular a ensaiar contra influencias indesejadas. Um aperfeiçoamento vantajoso do dispositivo de acordo ccs a presente invenção consiste em o recipiente de filtração, na sla extremidade superior, isto é, voltada para o elemento de suporte das células, tem una tampa perfurada ou uma ligação superior e esta perfuração de preferência tem a forma de uma abertura para inserir ou retirar o dispositivo de aspiração. Isso permite rima fácil separação deste dispositivo de aspiração e. por consequência, a eliminação de uma parte considerável do líquido corporal ou de líquido semelhante de que se separou o material celular. Um aperfeiçoamento especialmente vantajoso do -7- 1 5 10 15

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Iteí. - 15A - S4 497 61.760 ; 3ί.4«90 dispositivo consiste era, pelo menos, ura segmento de filtração próximo do suporte de células feito de um material desdobrado do tipo esponjoso em contacto cora o líquido, de preferência, de celulose prensada regenerada. Se esse segmento de filtração aumentar de volume ao contactar com o líquido, a acção de aspiração do dispositivo é fortalecida. Coroo material para um segmento da filtração esponjoso desdobrado espacialmente a-propriado verificou-se ser celulose regenerada prensada. Ela possui também uma estabilidade própria aperta fixamente de maneira suficiente tão grande que o elemento de suporte das células de tecido, feito de especialmente de tecido de acetato impermeável no interior do recipiente de filtração e pode vedar completamsnte a parede. Isso contribui para que a construção do dispositivo completo não só seja muito simples mas que também nSo soja necessário utilizar suportes adicionais indesejados para este tecido de acetato ou semelhante que podem estorvar o processo para a recolha © separação de células. !3m seguida, descreve-se m&is pormenorizada a presente invenção por meio de exemplos de formas de realização e em ligação com os desenhos anexos. Nestas, representa-se esquemáticaraente na Figura 1, um corte longitudinal de um dispositivo para colectar células ou semelhantes, em cuja extremidade inferior está inserido ura recipiente de obturação; na Figura 2, o recipiente de obturação de acordo com a Figura 1; na Figura 3, o recipiente de filtração de acordo com a Figura 1, vazio; na Figura 4, o conteódo do recipiente de filtração a colocar no recipiente de filtração vazio de acordo com a Figura 3, no entanto, sem um elemento d® suporte de células; na Figura 4a, & manga a assentar nura dispositivo de aspiração de acordo cora a Figura 4; na Figura 5, uma haste de obturação, qu® © introduzida no recipiente de filtração depois da separação do respectivo dispositivo de aspiração; na Figura β, o conteúdo do recipiente de filtração, nomeadamente, um dis-XíXvlx positivo de aspiraç“ao , assim como um elemento de suporte das células numa representação aberta cora as partes separa- -3- 35 1 5 10 15

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Hef ·* 13Λ - 64 497 61,760 3U$J90 v/v fj ? - -í-í- das «mas das outras; na Figura 7, a parte inferior do conteúdo do recipiente de filtração se» melhante à Figura 6, igualmente numa representação aberta com as partes separadas umas das outras; e na Figura S, um outro exemplo de uma forma de realização de um dispôs!ti = vo de acordo com a presente invenção. Un dispositivo designado globalments com 1 possui uib recipiente de filtração 2 assim como um recipiente de obturação 3 (Figuras 3 e 2). Sste dispositivo 1 serve para coleetar e separar células e partículas de líquidos corporais ou semelhantes para o diagnóstico microscópico. 0 recipiente de filtração 2 tem «ma abertura superior 4 o uma abertura inferior 5. Tem essencialmente a forma de tubo (Figura 3). Como se pode ver claramente nas Figuras 1» 6 e 7, a abertura inferior 5 é obttkrada por un elemento de suporte de células 10 de tecido do acetato iaporpoável. No recipiente de filtração 2 encontram-se, colocados de bni-xo para cima © depois un do outro, m segmento de filtração 11 e, depcia dele, um dispositivo de aspiração 12. 0 recipiente de filtração (vazio) 2 S representado no exemplo da forma de realização de acordo com a Figura 2 em comparação cem ma forma de realizaçãc prática possível apenas ligeiramonto »sfds pequena. Coso se esclarece em seguida ainda rnais ponaenorizadamente tem a forma de um aparelho manual; ccs correspondentes dimensões e pegas auxiliares. Ilsste caso, o recipiente de filtração 2 & de preferência de polietileno e o sou comprimento total L é por exemplo igual a 110 r>m o o seu diâmetro interno T) ®, por exemplo, igual a IG,5 nm. 0 roservatéric dc filtração 2 tem uma vedação contra líquido com a forme de anilha 13 que é colocada porto da extremidade inferior 5. A extremidade inferior 5 do recipiente de filtração 2 possui um estreitamento cónico 14, de tal maneira que na extremidade inferior 5 do recipiente de filtração 2 uma abertura interior 5 cora um diâmetro d com, por exemplo, 6,5 mm. Na extre-midado superior 4, o recipiente inferior está dotado cem uma pega 15 com ua diâmetro exterior D 1 aumentado. AÍ prevSem-se nervuras radiais 16 ou um conjunto de esneluras. Tanto o aumento de diâmetro como também as nor» vuras 16 devem facilitar a manipulação. No estreitamento cónico 14 do recipiente de fil- 30 1 5 10 15

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V tração 2 é montado u® segmento de filtração 11, ecsao se vê bem na Figura 1 e ampiiadamente nas Figuras 6 e 7, por exemplo tem um comprimento igual a cerca de 20 milímetros. Como se pode ver bem na Figura δ, o segmento di filtração 11 consiste num material muito íortemente absorvente fibroso com as fibras orientadas na direcção longitudinal. As peças colocadas no recipiente de filtração, ou soja, o elemento de suporte das fibras 10 quí consiste em tecido de acetato impermeável, o segmento de filtro 11 e o dispositivo de absorção estão fixados era posição dentro do recipiente de filtração 2.

Com o recipiente de filtração 2 anteriormente des crito 2 pede realizar-se um processo para colectar e separar células e partículas de um líquido para diagnóstico microscópico, se por exemplo entre a operação que consiste em colectar e separar as células do líquido e a aplicação das células e partículas colectadas sobre um suporte para objectos não tiver de decorrer um intervalo de tempo longo e/ou não tiver de se realizar um transporte a grande distância. Pode-se então, por exemplo, inserir o recipiente de filtração 2 num tubo de ensaio com mim, e esperar até que o dispositivo de aspiração tenha absorvido suficiente líquido, Esta condiç"ao é tornada opticamente visível quando ura disco de celulose 41 que se encontra na manga superior que é colocado em íntimo contacto com a superfície superior do dispositivo de aspiração fica desdobrado para cima (veja-se a posiç“ao 41 na Figura 1). 0 disco de celulose 41 I embebido com o líquido corporal filtrado através do dispositivo de aspiração 12 e mostra a possibilidade de absorção do sistema. 0 processo de inehamento do disco de celulose 41 é tornado visível d® modo que as paredes da manga 20 são transparentes. A celulose pode ser caracterizada com um corante de sinalização amarelo ou encarnado. Em vez do disco de celulose 41 que serve como indicador pode também incluir-se uma camada corada que consiste num corante solúvel era água. Neste caso, de preferência, a extremidade do dispositivo de aspiração ê impregnada com um corante. 0 corante aplicável em húmido e ligado ao dispositivo de aspiraç~ao por um processo de secagem é recoberto cora ura disco cortado de um velo de papel. Quando o líquido a ensaiar tiver impregnado o dispositivo de aspiração até à sua extre- -10- 1 5 10 15

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- / raidade superior, o corante dissolve-se e penetra através do disco de velo do papel de maneira que este é corado. A coloração é visível através da superfície transparente ou perfurada da manga 26. Dessa forma verifica-se também que se encontra eolectada uma quantidade suficiente de material de células a superfície 17 do elemento de suporte das células 10. 3ste material de células pode ser transferido para us> suporte de objectos. Caso isso seja necessário, depois do processo de colheita, pode fazer-se a fixação do material das células com agentes de fixação correntes, por exemplo, com álcool e na realidade antes da transferência para o suporte de objectos. Isto é possível se o líquido corporal, por exemplo, de usa pessoa a observar for obtido numa clínica e também puder ser realizada imediatamente a observa* ção do material das células no laboratório da clínica. No entanto, frequentemente a obtenção das células do líquido corporal realiza-se antes e/ou a urna grande distância do local de ensaio. Muitas vezes também se pretende dispor da possibilidade de se efectuar un segundo ensaio da amostra. De maneira correspondente, o dispositivo 1 é constituído de tal maneira que, em caso de necessidade, possui um recipiente de obturação 3 para a extremidade inferior 5 do recipiente de filtração (vejam-se espscialraeníe as Figures 1 a 3). Melas í5st~ao representados o recipiente de obturação 3 e o recipiente de filtração 2 com as suas dimensões es entre eles prevê-se a já mencionada vedação ;le líquido 13. Ssta vedação de líquido é formada de modo que na extremidade inferior do recipiente de flltraç~a© 2 se prevê um rebordo de vedação 13 cosa a forma de anel. Como se pode reconhecer fácilmente na Figura 2, na extremidade superior 19 do recipiente de obturação, prevê-se um anel de retirar 20 que, de preferência, é feito de un material absorvente. Para esse efeito, o recipiente de obturação 3 tem na sua extremidade superior um rebordo de suporte 21 cuja secção transversal tem uma forma quase de U encurvada para fora e que é aberto para o interior do recipiente de obturação 3. Ma concavidade anelar assim formada é inserido o anel de retirar 20 que consiste nura material absorvente e, quando o recipiente de filtração está inserido no recipiente de obturação (Figura 1) contacta a parede exterior do recipiente de filtração. Isso tem a vantagem de, ao -li· 1 5 10 15

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L i inserir-se ou ao retirar-se o recipiente de filtração 2 do recipiente de obturação 3, & parede exterior do recipiente da filtração é automática-mente limpa e a pessoa que o utiliza fica práticamente ccmplotamente protegida contra o contacto com o líquido e dessa forma se diminui consideravelmente o perigo de infecção. Isto é também favorecido ainda pela pega 15 ou pala canelura para servir de pega 15. De maneira espscialmente vantajosa, evita-se a contaminação das mãos do utente pelo facto de que o recipiente de filtração e o recipiente de obturação 3 sejam de pequenas dimensões. Na figura 3 reconhece-se que o recipiente de filtração 2 tem, perto da sua extremidade inferior, um rebordo d© vedação 13 periférico. Um outro rebordo de vedação 13a está colocado na metade superior do recipiente de filtração. Além disso, no recipiente 2, por baixo da zona da tampa de tampa d© obturação, prevê-se uni rebordo que serve de batente 70 periférico. 0 recipiente de filtração 2 tem a parede inclinada a partir do ponto médio até à extremidade inferior. 0 recipiente de obturação 3 tem igualmente a parede inclinada.estreitando igualmente até à extremidade inferior, de modo que o rebordo de vedação 13 no estado das duas partes unidas fica a vedar nesta zona. A abertura superior do recipiente de obturação permite uma inserção simples do recipiente de filtração no tubo. A parte contaminada do recipiente de filtração 2 desaparece dessa forma no recipiente de obturação 3, em que a zona impurifi-cada fica completamente vedada entre os rebordos de vedação 13 e 13a. 0 sistema total pode então ser manipulado sem psrigq em utilização e ser utilizado pois que as tampas de obturação 23 e 37 também fecham os recipientes de ofturação 3. Para a transferência de células da superfície 17 para o suporte de objectos, retira-se a tampa de obturação do recipiente de obturação 3. 0 recipiente de filtração é inserido no tubo até ao anel de batente 70, em que o elemento de suporte das células 10 é deslocado para fora do recipiente de obturação 3 de tal maneira que o material das células pode ser transferido sem problemas da superfície 17 para o suporte dos objectos (não;> representado). Na Figura 1 vê-se que o recipiente de filtração 2 tem uma tampa perfurada 24 na sua extremidade superior 4. A correspon- -12- 1 5 10 15

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dento perfuração 25 tem a forma tis abertura para inserir © retirar o dispositivo de aspiração 12. Tanto o recipiente de filtração 2 como também a tampa qtie limita este superiormente devem ter uma abertura superior 4 on a mencionada perfuração 25 para que a acçãotcapilar pretendida no dispositivo de aspiração possa funcionar para aspirar o líquido, o dispositivo do aspiraçao 12 do recipiente de filtração 2 tem a forma de hasteto t©M n foras do contraforte para as peças 10 o 11 em frente dele. o dispositivo da aspir-açtx; 12 e ainda envolvida por uma manga 23 colada o qual 'tem uma. abertura para fora que é realizada por um furo 37 na parto antoricr superior da manga 26. Mesta manga 26 está colocado m disco de celulose 41 por cima do dispositivo do aspiração 12 e em contacto com este. disco de celulose pode dilatar-se depois da recepção de humidade na manga até à abertura de arejamento. No dispositivo 1, cono se pode reconhecer elara.-xentíi na Figura 1» es tá colocada uma haste de obturação 30 (veja-se a Fi+ gura 5). lista tem as dimensões determinadas pela abertura de retirada 25 para o dispositivo de aspiração 12 ou da manga 26 que aí se encontra. Depois de so retirar o dispositivo d© aspiração 12 do recipiente de filtra-* çSo 2, pode inserir-se a haste de obturação 30 na abertura de saída 25. Neste caso, a haste de obturação 30 é dotada com usa tampa 31 de tal maneira que tsg pode fixar no recipiente de filtração. Na forma de realização representada no exemplo isso faz-se de tal maneira que a taaipa 31 assenta polo menos nm segmento na perfuração 25 da tampa 24 de forma que a haste de obturação fique aí fintada firmemente. A haste ds obturação 30 cem a sua extremidade interior 30 tem umas dimensões tais que esta extremidade interior forma um contraforte para o segmento de filtro 11 no recipiente de filtração 2 (veja-se as Figuras 4 e 5). Por meio da haste de obturação 30 formada desta maneira e fixada axi&lmente no recipiente de filtração consegue-se fazer uma. fixação axial das partes que ainda ficam dentro do recipiente de filtração 2 depois da separação do dispositivo do aspiração 12, especialmente, as partes 10 e 11 ou da parte 11b ainda a esclarecer, 0 segmento de filtro 11b 6 feito de um material dilatado do tipo de esponja por contacto com líquido. Os ensaios mostraram que a celulose regenerada comprimida 6 especialmente bem apropriada —13— 35 1 5 10 15

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Ref. - ISA “ 64 497 31.760 CLm/ .. / / como material, 3e por exemplo um segmento de filtro parcial com pontos representado na Figura 7 consistir em celulose regenerada comprimida e contactar com líquido (corporal) experimenta-se uma dilatação em proporção considerável, por exemplo, até à superfície frontal de filtro 11a (Figura 9). Por esta dilatação ® deslocação axial reforça-se a aeç“ao de aspiração. A possibilidade de dilatação da parte 11b que se dilata axial·· mente do segmento de fitlro 11 é por ura lado limitada pela extremidade cónica inferior do recipiente de filtração 2 em ligação coe o elemento de suporte de células 10 que aí se encontra e, por outro lado para cima por meio do mencionado contraforte 32, formado pelas partes 11a e 12. 0 segmento do filtro 11 e eventualmente também o seu segmento parcial 11b que consiste em celulose regenerada comprimida são feitos de maneira a serem saicroporosas e possui essencialmente poros com a dimensão máxima dos poros igual a 5 m. Esta dimensão máxima dos poros favorece que quantidade mais pequena possível de material de células possa penetrar dentro do recipiente de filtração 2 ou do seu dispositivo de aspiração 12 per elevada aspiração de líquido. 0 dispositivo de aspiração 12 consiste em fibras de poliéster ou de celulose comprimidos e, de preferência, dispostas na direcção longitudinal. Este dispositivo de aspiração 12 não tem práticamente qualquer acção de filtração mas uma intensa acção de aspiração. Como s© vê claramente nas Figuras 1 e 2, o recipiente de obturação 3 tem i gualmente a forma de tubo e 6 dotado com uma abertura superior e outra inferior 35 e 36. Com a abertura superior 35, pode assentar-se o recipiente de obturação 3 na extremidade inferior 5 tio recipiente de filtração que depois forma a obturação da abertura superior. Na extremidade inferior 36 do recipiente de obturação 3 prevê-se uma tampa de obturação 37 retirável. Esta tampa de obturação possibilitai entre outras, assentar livremente a superfície 17 do recipiente de filtração 2, se este recipiente de filtração 2 se encontra dentro do recipiente de obturação 3. Fode-se por exemplo colocai' agente de fixação posterior no recipiente de obturação 3 e por consequência também na superfície 1? e em seguida fecha-se o recipiente de obturação 3 por sua vez por meio da tampa de obturação 37. Pode-se também produzir um espaço vazio a-dicional 33 que se forma entre a tampa de obturação 37 e a extremidade -14- 1 5 10 15

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inferior 5 do recipiente d© filtração 2 norecipiente de obturação 3 adicional para o líquido corporal a ensaiar, 0 tamanho do espaço vazio pode ser escolhida dentro de certos limites porque o recipiente de filtração 2 está colocado telescópicamente móvel no recipiente de obturação. 0 recipiente de obturação 3 í igualmsnte de preferência feito de polietimen© e tem a forna de tubo e tem por exemplo um comprimento LI igual a 11C mm, Por baixo da do chumaço de suporte 21 colocado na extremidade superior 35 do recipiente de obturação 3 encontra-se o anel para retirar 20 que» de preferência á de espuma, 0 chumaço de suporte 21 é fácilmente prepara» vel por alargamento do corpo do recipiente de obturação e o rebordamento da sua extremidade superior para dentro (figura 2). A parte 11b que consiste em celulose regenerada com» prinida do segmento de filtro 11 possui - como já se referiu - por contacto com água» líquido corporal ou semelhante tsa comportamento de incha· mento muito intenso e, por consequência, também uma muito intensa capaei» dacle de absorves líquido. Por exemplo, para o material utilizado no esta» do comprimido, mediu-se um peso volúraico igual a 0,58 g/cm~ ®, no estado , 3 soco, depois do inchamonto, un peso volunioo -do 7,06 g/cra · S& a celulose comprimida que se indica para a construção da parte 11b do segmento do filtro 11 na Figura 7 4 feita contactar ccm água ou com líquido corporal, doconvolva-s® no material comprimido uma estrutura de grelha. A porosidade ou o seu tamanho é determinada pela possibilidade de dilatação da parte 11b do segmento do filtro 11. Mo exenplo de realização da acordo com as Figuras 1 e 7, a possibilidade de alongamento da peça 11b do segmento de filtro 11 s limitada de tal forma que a própria celulose comprimida empurra para cima contra o segmento do filtro 11a, que 4 mantido por meio de um chumaço anelar 33 (Figura 1). De acordo com o processo da presente invenção, trabalha- se com o dispositivo 1 da seguinte maneira. Um recipiente de filtração 2» que primeiramente se encontra ainda com a sua extremidade inferior 5 num recipiente de obtura» ção 3 e em conjunto com este numa embalagem fechada, possui o elemento de suporte das células 10, o segmento do filtro 11» o disi)ositiirQ de aspiração 12 o a tampa 24, No estado do recipiente de filtração 2 e do recipiente de obturação 3 unidos, representado na Figura 1, este último -15- 35 1 5 10 15

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protegertombém de maneira espacial ainda a superfície 17 assim come a parte inferior do suporte do filtro 2 que depois se mergulha no líquido corporal ou semelhante. Sm seguida, aíasta-se o recipiente de filtração do recipiente de obturação 3 e mergulha-se este recipiente de filtração com a sua extremidade inferior 5 num recipiente em que se encontra líquido corporal (por exemplo, urina) a partir do qual se colecta e se separa o material das células constituídos pelas células, partículas ou semelhante. 0s líquidos a tratar podem também ser de outra proveniência por exemplo, podem derivar da lavagem da cavidade abdominal. Mo recipiente de filtração 2, o líquido I aspirado por acção da capilaridade através da superfície 17 & as células e partículas a investigar são retidas sobro a superfície 17 que é formada pelo elemento de suporte das células 10 do tecido de acetato. 0 segmento do filtro formado por uma ou várias partes 11 ou 11a e 11b assim como o dispositivo de aspiração aspiram o líquido através do tecido de acetato. Quando por exemplo se encontra um segmento parcial 11b de celulose regenerada comprimida no recipiente de filtração, esta começa a dobrar-se limitada pelo espaço que tem à dispo-sição» 0 espaço que está à disposição e o material têm a forma tal que se formara apenas poros cujo tamanho é em geral menor do que 5/Jm. 0 líquido sobe muito rapidamente até uma certa altura dentro do recipiente de filtração o que é ainda facilitado pela acção de aspiração da parte de celulose 11b primeiramente comprimida 11b. Finalmente, este líquido, pelo menos, na sua maior parte, é absorvido pelo dispositivo de aspiração e pelo disco de celulose colocado por cima dele e aí armazenado. Messe caso, verifica-se também como efeito especialmente vantajoso que o material das células a investigar @ que sobe juntamente com o líquido sejs colectsdo quantitativa e cuidadosamente na camada exterior do elemento de suporte das células 10, ou seja, na superfície 17. Por "quantitativa-Esnte"entende-se que ccmoarativaeente grandes quantidades de material das células se colecta na superfície 17. Posteriorrrente, o material das células a investigar pode ser transferido daí impressão para um suporte de objoctos ou também para um líquido por enxaguajaento. A superfície 17 pode portanto ser considerada como superfície de· preparaçãô. Antes de se tirar o material das células a investigar, retira-se o dispositivo de aspiração 12 conjunt assente com a manga -16- 35 1 5 10 15

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20. Sa vez destas partes 12# 23» no recipiente cl© filtração 2 insere-se n. haste do obturação 30 (?ígura 5). TJsta haste <3$ obturação 50 realiza ':-τ*Λ fixação da posição kíísI do sebento do filtro 11 e oc-nstitui assim isíírôstmsnte un contraforte para o ©1 «reate d* suporte-daí, células 10 0.Ϊ mostraram que# alguns minutes depois da imersão do recipiente άύ filtração 3 ;io líquido a investigar, cerca de c mililitros de líquido da amostra atravessaram o segmento dc filtro 11 tendo cubldc por- acçãc io diapositivo de aspiração 12. A correspondente quantidade de material de células sc-parou-se então sobre a supsrficie 17 3 pode então ser d iro*· ctumente transferido para m suporte ds objecmoa, corado o examinado microscópio one ate. 3o o material de células a investigar não pode sor directaiaente transferido para ura suporte cie objectos de acordo com o prc cesso descrito e corrospoadenteaenie tratado mas sím deve ser enviado ps-ra ura laboratório de citologia (laboratório de diagnóstico) para ensaio» podo proceder-se da seguinte maneira. O recipiente de filtraçao 2 á inserido no recipiente de obturação 3. Sntão, tira-se líquido que tenha contaminado a parede exterior do recipiente de filtração pelo anel d© dascarga 20 do recipien te de obturação 3. Dessa maneira, evita-se que as mãos da pessoa que realiza o trabalho se sujem. 0 dispositivo d© aspiração 12 e agora retirado do recipiente de filtração e rejeitado. Se 0 material do células que aderiu à superfície do preparação 17 tiver de ser conservado para expedição, a tcnpa de obturação 37 do recipiente de vedação 3 pode ser retirado e uraa solução de fixação apropriada é introduzida no recipiente de obturação 3 e eventualmente também a superfície 17 é pulverizada com uma solução de fixação apropriada. 0 material das células a investigar ó assim molhado pelo meio de fixação e dessa maneira evita-se que, durante a expedição do dispositivo 1, se realize uma lise qus danifique as células. Além disso, hg recipiente de filtração insere-se uma haste de obturação. Uaa tal haste de obturação é fechada no seu lado anterior 40 e, de preferência, e feita de poliestireno. A haste de obturação 30 evita que o segmente de filtro 11 ou um segmento parcial Ha e 11b se desloque» além disso, c. haste da obturação 30 evita que o líquido ou outros componentes indesejável3 saiam do segmento do filtro 11 ou das partes 11a e 11b ou -17- 15 10 15

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possam entrar por meio deste segmento do filtro ou partes 11a e 11b» O dispositivo 1 pode então ser convenientemente utilizado. Se a obtenção das células o tornar necessário, o espaço livre 38 que fica antes cia superfície 17 do recipiente do obturação pode ser aumentado por na corregpondentemente posicionamento para trás do recipiente de filtração 2, por exemplo, até uma capacidade de cerca de 10 ml. Esta capacidade vazia 38 pode então ser cheia com raais líquido adicional de ensaio do mesmo paciente, 0 dispositivo 1 4 colocado com o segmento do filtro 11 dirigido para cima e pode proceder-se da seguinte maneira. A haste de vedação 30 é trocada por um dispositivo de aspiração 12 ® o acima mencionado líquido de amostra adicionado é aspira» do de ciraa para baixo polo filtro e as células que se encontram neste líquido de ensaio adicional podem ser separadas sobre a superfície 17, por exemplo, em adição às já préviamente existentes. Deste modo, pode-se aumentar a quantidade de material de células posta à disposição para a realização do ensaio. Em seguida, realiza-se a transferencia do material das células para o suporte dos objectos procedendo de acordo com a maneira d€ proceder corrente. Na Figura 5, reconhece-se na extremidade inferior da haste de obturação 30 o dispositivo coe capacidade aspiração 60 numa parto limitada da periferia. A haste de obturação 30 tem essencialmente a forna de tubo, em que o segmento de tubo ê designado por 30'. Parto da sua extremidade interior, a haste de obturação 30 te® um chumaço de si -porte 61 cosi a forma anelar saliente radialmente para dentro que fixa o dispositivo 60 no sentido axial. Correspondentemente, o lado anterior livro 40 do dispositivo de aspiração 50 com a forna de contraforte pode tan-bém servir como um contraforte para as partes 11 ou 11a e 11b (vejam-se Figuras 5, 1 e 6 e 7). Fode acontecer que s® pretenda que ainda depois da inserção da haste de obturação 30 no recipiente de filtração se tenha do afastar uma pequena quantidade de líquido do segmento do filtro 11 ou das suas correspondentes partes 11a e 11b. Neste caso, a forma de realização da haste de obturação 30 com o dispositivo de aspiração limitado 60 é essencialmente vantajosa. Num outro caso, em que os acima mencionados proces- -18- 15 10 15

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Itef. - ISA - 64 497 Cl.760 íi rt sccs de aspiraçao não são necessários ou não são pretendidos» ° tubo de ooturaçSo 30 pode ter inferiormente uma chapa anterior não absorvente. Na figura 6 está representado o seu conteúdo numa representação sequencial cem supressão do recipiente de -filtração 2, Re*· oonnece-so, vendo-se de cima para baixo na Figura S, o dispositivo cie as·· piração 12, o segmento de filtro 11 e, a raa certa distância, \m ©lomento de suporte das células 10 de tecido de acetato impermeável« Na Figura 7, está representada a parte inferior- do coucaudc do recipiente de filtração 2 numa realização tnn tanto alterada, anual®ente em representação consecutiva. Reconhece-se um sermnto do fíl*· trc- 11a encurtado assim como o segmento dõ filtro 11b que é feito de um material que pode enrugai5 de maneira semelhante a esponja por contacto com líquido corao celulose regenerada comprimida, Na forma d© realização de acordo eor a Figura 7, na extremidade interior do recipiente de fil-traç^ac-, as proporçãos são escolhidas d© tal forma que o segmento da filtro llb possa também aumentar voluraétricamente nina proporção previ «mente estabelecida. Isso pode, por exemplo, conseguir-se por meio de um cor*· rsspondonte espaço livre ou por una determinada compressibilidads do se-©cento do filtro 11a. A capacidade de recepção de- líquido do conteúdo do recipiente de filtração e eventualmente do disco 41 do conjunto 26 numa realização do dispositivo 1 preferida ê determinada- em relação ao líquido a investigar d® tal modo que, se a capacidade de aspiração das partes no recipiente cie filtração © ©vsntualmente do disco 41 na manga 26 é esgotada, então se tenha colsctado material ou células a investigar sufi-ciente para o ensaio no elemento de suporte das células 10 ou na sua superfície 17. A capacidade de absorção anteriormente mencionada das partes que se encontram no recipiente de filtração espeeialmente é determinada pelo dispositivo do absorção, c segmento de filtro 11 ou os segmentos parciais 11a e llb do segmento de filtro que aí sa encontram e eventual-mente pela capacidade de aspiração do disco de celulose 41 que s© encon tra na manga 26. Todas as característicac específicas anteriorment< descritas e/ou referidas nas reivindicações podem ser individuais ou as· soei. adas eir. qualquer combinação umas com as outras de acordo com a preseil- -19-

Claims

nef. — 15A — 64 497 61.760 / 1 te invenção. 5 10 15 0 Depósito do primeiro pedido para o invento acima descrito foi efectuaclo na República Federal da Alemanha eis 17 d© Feverei = ro de 19S0 sob ο η® P 39 04 872.1. Mod. 71 -10000 ex. - 89/07 20 25 30 -REIVINDICAÇÕES» !£.«· Processo para recolher e separar partículas de usn líquido corporal para o diagnóstico médico, caractsrizado pelo fa» cto de se aspirar o líquido por meio de ua material com propriedades a-baorventes «através de uma superfície na qual as partículas permanecem agarradas. 2S„- Processo de acordo com a reivindicação 1, ca» racterizado pelo facto de o líquido ser aspirado através da superfície por meio de acção capilar. 3£.- Dispositivo para recolher e separar partículas de um líquido corporal para o diagnóstico médico, caracterízado pelo facto de possuir - um pri- eiro recipiente (2) em que se encontra montado um depósito de aspiração que aspira o líquido (12) e - uma superfície (17) instalada no caminho de aspiração do líquido, a qual J permeável ao líquido mas não às partículas. 4-.» Dispositivo de acordo com a reivindicação 3, caracterízado pelo facto de o deposito de aspiração (12) aspirar o líquido cssencialmente por acção da capilaridade. 52,- Dispositivo de acordo com qualquer das reivindicações 3 ou 4, caracterízado pelo facto de a superfície (17) ser formada sobre ma camada separada do depósito de aspiração, sspecialmente, de ira tecido de plástico, seda e/ou acetato. 62,- Dispositivo de acordo com qualquer das reivindicações 3 a 5, caracterízado pelo facto de o primeiro recipiente (2) se;* inserivel num segundo recipiente (3) de sodo a vedar. 72,- Dispositivo de acordo com qualquer das reivindicações 3 a 6, caracterízado pelo facto d®, no primeiro recipiente (2),

35 10 15 Mod. 71 -10000 ex. - 89/07 20 25 30 Hef. - 15 Λ - 64 =497 01.700 >/ / se prever um elemento (50) qus indica se o líquido atinge o depósito de as piração (12). 8*.- Dispositivo de acordo com a reivindicação 6, caracterizado pslo facto de o segundo dispositivo (3) ser dotado de um elemento (20, 21) para absorve®;?© excesso de líquido. 92,- Dispositivo parai recolher e separar partículas de um líquido para diagnóstico nétíico, caracterizado pelo facto de possuir - Uí;i recipiente que t--m a possibilidade de automaticamente aumentar o ..,eu volume par-a absorver o líquido e - umq superfície (17) colocada no caminho de aspiração do líquido a qual é peiYtierve! ao líquido mas não às partículas. IO*.- Dispositivo de acordo coi,i a reivindicação 9, c&raúterizado pelo facto de o recipiente aumentar o asu volume por acçãc do uraa íaoiu ou cia sua elasticidade própria. Lisbaa, 3;j^i990 Por H3K3DIA AG.

VASCO MASQUES ΙΒΠ Agente Oticiol d· Proptíeded* InduVriol , ______ C*rlórlo·Arw o· Conçeiçio, 3, (,·-ι(<ΪΟ LfflIQn “21“ 35