PT87895B

PT87895B - Processo para a preparacao de esteres e glicosidos derivados de castanospermina ({1s-(1 alfa, 6 beta, 7 alfa, 8 beta, 8a beta)}-octahidro-1,6,7,8-indolizinotetrol) e de composicoes farmaceuticas que os contem

Info

Publication number: PT87895B
Application number: PT87895A
Authority: PT
Inventors: Paul Saiho Liu; Barry Lee Rhinehart; John K Daniel
Original assignee: Merrell Dow Pharma
Priority date: 1987-07-02
Filing date: 1988-07-01
Publication date: 1995-03-01
Also published as: EP0297534A2; GR3015303T3; CN1065066A; JP2683915B2; CN1030418A; KR970002636B1; ATE116318T1; FI87072C; EP0297534A3; IL86928A; DE3852579D1; KR890002147A; NO167664B; FI883164A; HUT47572A; IL86928A0; EP0297534B1; CN1020609C; JPS6479179A; CA1315276C

Description

DESCRIÇÃO

DA

PATENTE DE INVENÇÃO

N.° 87 895

REQUERENTE: MERRELL DOW PHARMACEUTICALS INC.,uma socieda de organizada e existindo segundo as leis do Estado de Delaware, Estados Unidos da América.

EPIGRAFE: PROCESSO PARA A PREPARAÇÃO DE ÉSTERES E OI

COSIDOS DERIVADOS DE CASTANOSPERMINA (/1S-(ltk, 6/, 7<3 , 83, 8a^ )/-OCTAHIDRO- 1, 6,7,8-INDOLIZINOTETROL) E DE COMPOSIÇQES FARMACÊUTICAS QUE OS CONTEM

INVENTORES: Paul S.Liu, John K. Daniel e Barry L. Rhinehart.

Reivindicação do direito de prioridade ao abrigo do artigo 4.° da Convenção de Paris de 20 de Março de 1883.

Estados Unidos da América, em 02 de Ju lho de 1987, sob o n«. 069,351.

INPl. MOO. 113 R F 16732

MERRELL DOW PHARMACEUTICALS INC.

PROCESSO PARA A PREPARAÇÃO DE ÉSTERES E GLICOSIDOS DE RIVADOS DE CASTANOSPERMINA ([ IS-( 1 0(., 6 /3 , 7 oC , φ , 8a ^0) ]-OCTAHIDRO-1,6,7,8-INDOLIΖINOTE TROL) E DE COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS QUE OS CONTÊM

ANTECEDENTES_DA_INVENÇÃO

A castanospermina é um alcaloide isolado das sementes de Çastranospermum_austrape e que apresenta a seguinte fórmula:

Sistematicamente pode-se designar este composto de diversos modos: [IS-(1oC, 6 yõ , 7 Ok, 8 , 8ayQ)]-octa-hidro-1,6,7,8-indolizinotetrol ou (IS,6S,7R,8R,8aR)-1 , 6 , 7 , 8-tetra-hidroxi — indolizidina ou 1,2,4,8-tetradeoxi-l,4,8-nitro-L-glicero-D-galacto-₀ctitol. Na presente invenção utili2 zar-se-á a designação castanospermina ou o primeiro nome sistemáico.

L.D. Hohenshutz et al,. em Phytocheraistry, 20,

811 (1981) descreveram a separação deste composto e a determinação da sua estrutua. Ainda fazendo parte do estudo da castanospermina Hohenshutz obteve tetracetato de castanospermina fazendo reagir a castanospermina com anidrido acético em excesso, mas o mesmo trabalho não sugere outros ésteres de castanospermina.

DESCRIÇÃO DA INVENÇÃO

A presente invenção diz respeito a diversos ésteres e glicosidos derivados de castanospermina. Mais especialmente diz respeito a compostos de fórmula geral:

na qual

R, R' e R representam, cada um, independentemente, um átomo

naftalenocarbonilo comportando, eventualmente, como substi3 tuinte um átomo de halogéneo ou um grupo metilo; fenil-alcanoílo C comportando, eventualmente, como substituinte no radical fenilo um átomo de halogéneo ou um grupo metilo; cinamoílo; piridinocarbonilo comportando, eventualmente, como substituinte um átomo de halogéneo ou um grupo metilo; tiofenocarbonilo comportando, eventualmente, como substituinte um grupo metilo; furanocarboni1o comportando, eventualmente, como substituinte um grupo metilo; glicosilo, O-metilglicosilo ou Ac-glicosilo acilado, comportando 1 a 3 moléculas de hexose ou pentose ligadas à posição 1 do radical glicosilo; R’ representa um átomo de hidrogénio, um grupo alcanoilo (C-^-C ), ciclo-hexano carbonilo, um grupo de fórmula geral

naftaleno-carbonilo eventualmente substituído por um átomo de halogéneo ou por um grupo metilo, fenil-alcanoílo em que o grupo fenilo é eventualmente substituído por um átomo ^;de halogéneo ou um grupo metilo; cinamoílo, piridino-carbonilo eventualmente substituído por um átomo de halogéneo ou um grupo metilo; tiofeno-carbonilo eventualmente substituído por um grupo metilo; furan-carbonilo eventualmente substituído por um grupo metilo; Y representa um átomo de hidrogénio ou de halogéneo cu-um grupo alquilo C^_₄ , alcoxi C^_₄ , trifluorometilo , alquil (C^_₄)-sulfonilo , alquil (C^_₄)-mercapto, ciano ou dimetilamino; Y’ representa um átomo de hidrogénio, um grupo alquilo ₄ ou alcoxi C

1-4 ou considerado conjuntamente com um átomo ou grupo representado pelo símbolo Y, forma um grupo 3,4-metilenodioxi e Y representa um átomo de hidrogénio ou halogénio , alquilsulfonilo um grupo alquilo ou alcoxi C^_^; Ac representa um grupo benzoílo ou alcanoílo (C-C ) com a condição de R, R', R e 2 b

R' representarem, pelo menos dois mas não mais do que três deles, um átomo de hidrogénio; ou aos seus sais aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico.

Exemplos de grupos alcanoílo citados antes, de cadeia linear ou ramificada são os grupos formilo, acetilo, propionilo, butirilo, isobutirilo, hexanoilo, octanoílo e decanoílo. Os halogéneos citados antes são, por exemplo, os átomos de flúor, cloro, bromo ou iodo. Os grupos alcanoílo C citados antes e representados pelo símbolo (Ac) — 6 são por exemplo os grupos acetilo, propionilo, butirilo, isobutirilo e hexanoilo. Os grupos alquilo C^_^ citados antes individualmente ou em associação com um grupo alcoxi ou alquilmercapto são grupos de cadeia linear ou ramificada comportando até quatro átomos de carbono. Exemplos destes grupos são os grupos metilo, etilo, propilo, butilo, metoxi, etoxi, butoxi', metilsulf onil , etilsulf onil , me ti Imer capto e etilmercapto. Grupos fenil-alcanoílo C„ citados antes são por exempio os grupos benzeno-acetilo e benzenopropionilo. Os diversos grupos naftalenocarbonilo, piridinocarbonilo, tiofenocarbonilo e furanocarboni1 o citados antes incluem os diversos isómeros de posição e são por exemplo os grupos naftaleno-1-carbonilo, naftaleno-2-carbonilo, nicotinoílo, isonicotinoílo, tiofeno-2-carbonilo, tiofeno-3-carbonilo, furano-2-carbonilo e furano-3-carbonilo. Os grupos naftaleno, piridino_f tio5 feno e furano podem ainda comportar eventualmente substituintes como se indicou antes.

Exemplos específicos de diversos radicais glicosilo são os grupos glucosilo, galactosilo, fucosilo, ribosilo, 2-dioxiglucosilo, 3-O-meti1glucosi1 o , celobiosilo, maltobiosilo, ma1totriosilo, celotriosilo , arabinosilo e xilosilo. Especia1mente preferidos são os compostos em que R representa um grupo 1-glucosilo, 1-L-fucosilo ou 1-celobiosilo.

Para os objectivos da presente invenção os sais de adição de ácido resultantes da reacção com ácidos aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico, citados antes, são equivalentes a aminas. Exemplos destes sais são aqueles que se obtêm mediante reacção com ácidos inorgânicos como, por exemplo, o ácido clorídrico, o ácido bromidrico, o ácido sulfúrico, o ácido fosfórico ou outros ácidos similares. Com ácidos carboxílicos orgânicos como, por exemplo, o ácido acético, o ácido propiónico, o ácido glicólico, o ácido láctico, o ácido pirúvico, o ácido malónico, o ácido succínico, o ácido fumárico, o ácido málico, o ácido tartárico, o ácido cítrico, o ácido ascórbico, o ácido maleico, o ácido hidroximaleico e o ácidó di-hidroximaleico, o ácido benzóico, o ácido fenilacético, o ácio-4-aminobenzóico, o ácido 4-hidroxibenzóico, o ácido atranílico, o ácido cinâmico, o ácido salicílico, o ácido 4-aminosalicílico, o ácido 2-fenoxibenzóico, o ácido 2-acetoxibenzóico, o ácido mandélico ou outros ácidos similares; e com ácidos sulfónicos orgânicos como, por exemplo, o ácido metano-sulfónico e o ácido £-tolueno-sulfónico. Estes sais podem obter-se por técnicas convencionais a partir de uma amina de acordo com a presente invenção e de um ácido apropriado .

Os compostos preferidos de acordo com a presente invenção são aqueles em que R' representa um átomo de hidrogénio. Ainda um outro grupos de compostos preferidos são aqueles em que R, R' e R representam um ou dois grupos alcanoílo ou benzoilo comportando o grupo benzoilo substituintes representados pelo símbolo Y, Y' ou Y de acordo com o citado antes .

Os ésteres de acordo com a presente invenção preparam-se fazendo reagir a castanospermina com um anidrido ou cloreto de ácido apropriado no seio de um solvente inerte.

O halogeneto pode ser um cloreto ou um brometo e o anidrido inclui anidridos mistos. A quantidade relativa do anidrido ou do halogeneto de ácido utilizado, a quantidade relativa do solvente,a temperatura e o tempo reaccional, são elementos que se controlam para minimizar o número de grupos hidroxi que serão acilados. Assim, utiliza-se somente um excesso limitado do derivado de ácido, isto é, até cerca de um excesso triplo do agente de acilação. A utilização de um solvente em quantidades relativamente abundantes permite diluir os reagentes- e manter concentrações baixas dos produtos mais acilados que se formam. Como solvente a utilizar prefere-se um que dissolva os reagentes sem reagir com eles. É ainda preferível realizar esta reacção na presença de uma amina terciária que reagirá com qualquer ácido formado durante a reacção permitindo assim a sua eliminação. Esta amina terciária pode adicionar-se à mistura ou pode utilizar-se em excesso como solvente apropriado. Como se referiu antes,o tempo e a temperatura são também controlados para limitar a acilação que ocor-

re. Esta reacção realiza-se de preferência com arrefecimento num banho de gelo durante cerca de 16 horas obtendo-se monoésteres; quando se pretende obter diésteres prolonga-se o tempo reaccional durante, por exemplo, 7 dias. Actualmente esta reacção pode realizar-se a temperaturas superiores, pois o aquecimento pode utilizar-se desde que os diversos factores envolvidos sejam correctamente controlados. 0 problema é que quando a reacção se realiza como se descreveu a mistura reaccional final conterá ainda uma quantidade razoável de castanospermina que não reagiu. Este material que não reagiu pode separar-se da mistura reaccional e re-uti1izar-se em reacções subsequentes e assim aumentar a quantidade total de castanospermina convertida em éster. Esta re-uti1ização é particularmente importante quando as reacções se realizam sob condições que favorecem a separação de monoésteres.

As técnicas descritas antes fornecem geralmente

6- ou 7-monoésteres ou 6,7-. ou 6 , 8-diésteres. Utilizando de um modo apropriado grupos bloqueadores podem obter-se outros isómeros. Assim, por exemplo, a castanospermina pode reagir com o cloreto de 2-(dibromometil)-benzoilo obtendo-se um 6 , 7-diéster . Faz-se depois reagir este diéster com um anidrido ou halogeneto de ácido apropriado obtendo-se o correspondente 8-éster. Eliminam-se depois facilmente dois grupos protectores os dois grupos dibromometilo num grupo formilo (utilizando perclorato de prata e 2 , 4,6-colidina em acetona aquosa) e hidrolizando depois o éster do ácido formilbenzóico resultante, utilizando morfolina e ião hidróxido. A técnica descrita pode utilizar-se de um modo semelhante obtendo-se os isómeros de diéster.

Para obter os derivados glicosídicos de acordo com a presente invenção faz-se reagir a castanospermina ou uma castanospermina esterificada com um halogeneto de glicosilo apropriado ou um acetimidato de glicosilo apropriado em que se protegem os grupos hidroxi do radical glicosilo sob a forma de íC-ésteres ou com grupos benzílicos no seio de um solvente inerte e depois, eventualmente, por hidrogenação catalítica para eliminar qualquer um dos grupos benzílicos. Como solvente inerte pode utilizar-se um hidrocarboneto hidrogenado como,por exemplo, o cloreto de metileno. 0 halogeneto de glicosilo pode ser um cloreto ou um brometo; um acetimidato preferido é a tricloro-acetimidato.

Quando se utiliza uma castanospermina esterificada no processo glicosídico esta serve para bloquear qualquer grupo hidroxi esterificado de modo a que a reacção ocorra num outro grupo hidroxi livre. Assim que ocorrer a ligação do éster da castanospermina com o derivado de glicosilo pode eliminar-se qualquer grupo éster quer no núcleo do glicosido quer no núcleo da castanospermina por hidrólise com uma base, por exemplo, com uma base forte tal como metóxido de sódio em metanol. Esta hidrólise realiza-se normalmente antes do processo catalítico de desbenzilação citado antes.

Os compostos de acordo com a presente invenção são úteis no tratamento de diabetes. Mais especificamente, podem utilizar-se para impedir o aparecimento de hiperglicémia excessiva que se pode observar em certas situações diabéticas quando é ingerido um precursor da glicose. Assim, quando se ingerem hidratos de carbono quer sob a forma de glicose, quer sob a forma de maltose, sacarose ou amido nos alimentos /

f ” ou nos líquidos o nível de glicose no soro eleva-se até concentrações elevadas. Nos indivíduos saudáveis o estado hiperglicémico regressa rapidamente ao normal, sendo a glicose no sangue rapidamente metaboli zada ou armazenada e/ou utilizada no organismo. Contudo na diabetes mellitus a tolerância do paciente em relação à glicose está diminuída e os níveis de glicose no soro anormalmente elevados que surgem permanecem elevados durante longos períodos de tempo. Uma resposta similar a esta que se observa no homem podem também observar-se em outros animais incluindo animais domésticos, animais de estimação e animais utilizados em experiências laboratoriais.

Esta situação pode descrever-se como uma hiperglicémia pós-prandial. Um método para tratar esta situação consiste em administrar alguns agentes susceptíveis de impedir a conversão de açucares complexos em glicose e assim impedir o aparecimento de níveis de glicose excessivos. Na presente invenção observou-se que quando os níveis elevados de glicose resultam da hidrólise de açucares complexos a administração dos derivadosda castanospermina de acordo com a presente invenção inibem a formação inicial de glicose no sangue e assim evitam·'os problemas que apareceriam associadcs:con níveis-é-^evados prolongados de glicose no soro.

mecanismo que permite atingir este resultado é o que a seguir se descreve embora a utilidade descrita antes não seja limitada por detalhes definidos neste mecanismo.

Os enzimas que catalisam a hidrólise dos hidratos de carbono complexos convertem hidratos de carbono não absorvíveis em açucares absorvíveis. A rápida acção destes enzimas conduz a elevações indesejáveis e agudas da glicose do soro na diabe10 tes. Os compostos de acordo com a presente invenção são inibidores patentes enzimas e quando co-administrados com uma refeição de hidratos de carbono impedem desvios hiperglicémicos indesejáveis deste tipo. Pretende-se contudo que a inibição deste enzimas hidroliticos se limite aos enziamas presentes no intestino o que é possível utilizando os compostos de acordo com a presente invenção. De outro modo a inibição de glicohidrolases sistémicas pode conduzir a dificuldades na utilização de hidratos de carbono intracelulares como fonte de energia e assim provocar problemas metabólicos. O primeiro enzima descrito antes é a sucrase enquanto o segundo enzima é a oC-glucosidase lisosomal intracelular. Utilizando as técnicas seguintes ensaiaram-se os compostos de acordo com a presente invenção quanto à sua acção contra estes enzimas.

Sucrase_Int.es ti na 1

A sucrase intestinal isolou-se do intestino de um rato sob a forma de um homogeneisado bruto utilizando a técnica de extracção com um sal de Kolinsk t hiochem_;_

Bio£hys^_.__Ac t a , 2 , 23 5 ( 1 984 )]. As misturas de incubação que continham 100 yil da preparação enzimática mais o composto em ensaio foram incubadas durante 1 hora antes da adição de 6,6 yrmoles de sacarose em 100 ^ul de maleato de sódio 0,1 M, pH 5,9. Incubaram-se estas misturas durante mais 30 minutos e depois inactivaram-se pelo calor a uma temperatura compreendida entre 80° - 100°C durante 3 minutos. Eliminou-se a proteína desnaturada por centrifugação. A glicose determinou-se pelos reagentes da glucose de hidrogenase (Seragen

Diagnostics).

fA^Glucos

Α ot-glucosidase lisosomal isolou-se e purificou-se parcialmente a partir do fígado do rato utilizando o método de Dissous [Ana 1^__Biochem^^ 11£, 3 5 ( 1 9 81)] através das fases de fraccionamento com sulfato de amónio. Incubou-se o enzima com o composto em ensaio durante 1 hora à temperatura de 37°C antes de se adicionar o p-nitrofenil-°C-D-glucosido num vol ume final de 0,6 ml de acetato de sódio 0,1 M, 25 irM de cloreto de potássio, pH 4,2. Incubaram-se estas misturas durante mais 30 minutos à temperatura de 37°C inactivaram-se depois pelo calor à temperatura de 90°C. Adicionou-se 1 ml de carbonato de sódio 0.1 M à fracção sobrenadante e determinou-se o nitrofenol libertado pela sua absorção a 410 nm.

No quadro seguinte podem observar-se os resultados das técnicas citadas antes e respeitantes aoscompostos de acordo com a presente invenção:

QUADRO I

CI

Derivados de

Çastanospermina

Sucrase Lisosomal _<-Ξθί1 ucos idase (Μ) (M)

6-benzoato

6- (4-fluorobenzoato)

-(4-metilbenzoato)

- ( 4-me to x ibenzoato)

7- be nzoato

7-(4-fluorobenzoato)

7- (2 ,4-diclorobenzoato) ,7-dibenzoato

6,7-bis(fluorobenzoato) , 8-dibutirato

8- ^ -D-glucopiranosido

- 8	-4
8 x 10	8 x 10
- 7	-6
2 x 10	4x10
- 7	, -3
3x10	1x10
-6	-3
2 x 10	1 x 10
-6	-4
2 x 10	2 x 10
-7	-6
4 x 10	6 x 10
-7	, -4
4 x 10	1x10
-6	-3
2 x 10	y ¹⁰
-6	- 3
4x10	> ¹⁰
-7	-3
2x10	> io
-8	-4
5 x 10	3 x 10

A partir destes resultados pode observar-se que os,, compostos incluídos exibem uma ΟΙ^θ menor contra a sucarase intestinal do que contra a oC-glucosidase lisosomal.

Os compostos de acordo com a presente invenção submeteram-se ainda a um ensaio de carga de sacarose para determinar a sua capacidade para inibir a elevação de glicose no soro. Esta técnica pode resumir-se do seguinte modo:

A murganhos ICR Suiços em jejum durante 18 - 20 horas administrou-se por via oral o composto em ensaio mais sacarose na dose de 2,0 g/kg. Trinta minutos depois de se administrar a sacarose sacrificaram-se os animais e determinaram-se as concentrações de glicose no soro. A quantidade do composto em ensaio necessária para inibir significativamente a elevação de glicose no soro foi determinada mediante comparação com a concentração de glicose no soro dos animais a que se administrou unicamente sacarose. Para avaliar a duração da acção trataram-se os murganhos 2 x por via oral.

Como dose inicial administrou-se o composto em ensaio ou o veículo. Uma, duas ou três horas depois administrou-se aos murganhos sacarose na concentração de 2,0 g/kg.

Decorridos 30 minutos depois da administração da sacarose sacrificar am-se os animais e determinaram-se as concentrações de glicose no soro. A diferença significativa da concentração de glicose no soro relativamente ao controlo correspondente indicou a acção do composto em ensaio.

No quadro II pode observar-se um resumo da actividade observada:

2UADROII

Derivado de	Duração da acção
'Castanospermina	Dose eficaz
benzoato	(mg/kg) 1	1 hora
(4-fluorobenzoato)	5	--
benzoato	5	--
(4-fluorobenzoato)	5	2 horas
(2 ,4-diclorobenzoato)	2 0	--
7-dibenzoato	2 0	--
=4-D-glucopiranosido	1	^3 horas

/' !

Para aplicar na prática o método de acordo com a presente invenção administra-se a um mamífero doente, utilizando uma via de administração apropriada, uma quantidade susceptível de inibir a hiperglicémia que aparece depois da ingestão de alimentos de um dos compostos de acordo com a presente invenção. Para realizar o objectivo da presente invenção prefere-se a administração por via oral.

A quantidade eficaz de um composto isto é a quantidade suficiente para inibir a hiperglicémia que se observa depois da ingestão de alimentos depende de vários factores tais como a dimensão, o tipo e a idade do animal a tratar, do composto particular ou do seu sal aceitável sob o ponto de vista farmacêutico que se utiliza, da frequência da administração, da gravidade da situação e do tempo durante o qual se admi nistra. Falando de um modo geral estes compostos podem administrar-se por via oral em doses compreendidas entre 0,1 mpk e mpk, preferindo-se uma dose compreendida entre 0,5 mpk e mpk. Mais especificamente os compostos de acordo com a presente invenção devem administrar-se ao homem em doses unitárias contendo entre 35 mg e 350 mg de ingrediente activo com o material a administrar e vezes por dia, às refeições.

Na prática quando se aplica o método de acordo com a presente invenção incorpora-se o ingrediente activo de preferência numa composição constituída por um veículo aceitável em farmácia e 5 a 90% em peso de um composto de acordo com a presente invenção ou de um seu sal aceitável sob o ponto de vista farmacêutico. A expressão veículo farmacêutico diz respeito a excipientes farmacêuticos conhecidos úteis na for15 mulação de compostos activos sob o ponto de vista farmacêutico para adminitrar internamente a animais, e são substancialmente não tóxicos e não sensibil izadorec nas condições de utilização .

Estas composições podem preparar-se utilizando técnicas convencionais para a preparação de comprimidos, cápsulas, elixires, xaropes, emulsões e dispersões e pós efervescentes e molháveis e podem conter excipientes apropriados conhecidos úteis na preparaçao do tipo particular de composição pretendida. Veículos farmacêuticos apropriados e técnicas de formulação podem encontrar-se em obras clássicas tais como

Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company,

Easton, Pennsy1vania.

Os exemplos seguintes ilustram a presente invenção. Contudo não a limitam.

exemplo_i

À temperatura ambiente agitou-se durante 30 minutos uma pasta de 4,0 g de castanospermina em 140 ml de piridina até à dissolução de todos os sólidos. Arrefeceu-se a solução até à temperatura de 0°C num banho de água gelada e adicionou-se, gota a gota, duranete 15 minutos e sob atmosfera de azoto uma solução de 5,85 ml de cloreto de benzoilo em 15 ml de piridina. Concluída a adição agitou-se a mistura reaccional à temperatura de 8°C durante toda a noite .

Partilhou-se a mistura reaccional entre 225 ml de cloreto de metileno e 300 ml de água. Separou-se a fase orgânica e extraiu-se a fase aquosa com 2 vezes 225 ml de cloreto de metileno. Lavaram-se as fases orgânicas reunidas suces1 6

sivamente com 150 ml de ácido clorídrico 0,5 N, solução saturada de carbonato de sódio, e soluções saturadas de cloreto de sódio depois do que se secou sobre sulfato de sódio. A evaporação dos solventes sob pressão reduzida forneceu 2,9 g de um resíduo vítreo de cor castanha.

Com este material formou-se uma pasta com clorofórmio e obteve-se um precipitado branco. Separaram-se os sólidos resultantes obtendo-se 910 mg de um pó branco. Uma cromatografia em camada fina utilizando como agente de eluição uma mistura de acetato de eti1o/metano 1 ¢85:15), mostrou que o composto citado antes era constituído por dois componentes (Rf 0,33 e Rf 0,26). Formou-se uma pasta com a mistura sólida e 45 ml de uma mistura de acetato de eti1 o/meta η o 1 (4:1) e filtrou-se. Secou-se o resíduo no vácuo obtendo-se 350 mg de 6-benzoato de 1S - ( 14/, 6 7 0/, 8 , 8 a ) _7-o c t a-h i d ro - 1 , 6,7 , 8 - i ndo 1 i z i η o t re t o 1 sob a forma de um pó branco. P.F. 233°-236°C aproximadamente (com decomposição). Este correspondeu ao componente menos polar da mistura.

RMN(DMSO-d^) ta: 1,5-2,2 (ra,5H), 2,9-3,6 (m,4H), 4,1 (m, ΙΗ,^-Η), 4,3 (d, 1H, -OH) 4,7 (d, 1H, -OH), 4,8 (sexteto, 1H, Οθ-Η), 5,1 (d, 1H, -OH), 7,6-8,1 (m, 5H, arilo).

E.M. (Cl-CH.) 294 (MH⁺), 276 (MH⁺-H O), 172 ** + (MH -PhCO₂H).

Condensou-se o filtrado resultante e fracciοη ou-se por cromatografia preparativa em camada fina sobre gel de silica utilizando como agente de eluição uma mistura de acetato de etilo/ /metanol (80:20) para se obterem 120 mg do composto mais polar, o 7-benzoato de /7 1 S-( 1&C, 6^, 7<^, 8 ,8ap )_7-oc t o-h id ro - 1 , 6,7,8-indolizinotretol sob a forma de um pó branco. P.F. 200°-202°C aproximadamante. RMN(DMS0-d^+ D₂0):

1,5 - 2,2 (m, 5H), 2,9 - 3,1 (m, 2H), 3,6 - 3,8 (m, 2H), 4,1 (m, 1H, C^-H), 4,8 (t, ΙΗ, C_?-H), 7,4 - 8,1 (m, 5H, arilo). EM (CI-CH ) 294 (MH⁺), 276 (MH⁺-H₂O), 172 (MH⁺-PhCO^H). Este composto exibe a seguinte fórmula de estrutura:

EXEMPL02

A uma solução agitada de 10 ml de piridina e arrefecida até à temperatura de 0°C num banho de gelo adicionaram-se 1,89 g de castanospermina. Gota a gota adicionaram-se à mistura 3,0 g de cloreto de benzoílo e conservou-se a suspensão resultante a uma temperatura compreendida entre 0° e 4°C durante 7 dias. Adicionaram-se 10 ml de água e evaporou-se a mistura até à secura no vácuo. Redissolveu-se o resíduo resultante em 100 ml de uma mistura de água/acetato de etilo (1:1) e separaram-se as fases. Extraiu-se a fase aquosa outra vez com 100 ml de acetato de etilo. Reuniram-se os extractos orgânicos e concentraram-se até à formação de um xarope que se demonstrou ser uma mistura dos dois componentes prin cipais por cromatografia em camada fina sobre gel de sílica e utilizando como agente de eluição uma mistura de acetato de

etilo/hexano (1:1), Rf 0,42 e Rf = 0,11. Separou-se a mistura por HPLC preparativa sobre gel de sílica e utilizando como agente de eluição uma mistura de acetato de etilo/hexano (1:1).

Obtiveram-se 1,9 g (Rendimento 48%) do ccnçosto mais polar, 6,7-dibenzoato de [15-(1^,6 /3,7 c<, 8 j3,8a j3)]-octa-hidro-l, 6,7,8-indolizinotetrol sob a forma de uma espuma anidra. P.F. 79° - 81°C aproximadamente. RMN ( DMSO-d /D O) çf 1,5 - 2,3 (m, 5H),

3,0 - 3,4 (m, 2H),3,9 (t, ÍH), 4,2 (m, ÍH, C -H), 5,15 (m, ÍH,

C.-H), 5,3 (t, ÍH, C_-H), 7,4 - 8,0 (m, 10H, arilo). EM (FABD — / —

-Xe) 3 98 (MH⁺), 3 80 (MH ⁺ -H2O), 2 76 (MH ⁺ -PhCO2H ) .

Isolou-se o componente menos polar isto é o

6,7,8-tribenzoato de [lS-(lo<,6fi,7eií.,6jí,8a/)]-octa-hidro-1,6,7,8-indo1izinotetro1 sob a forma de uma espuma anidra. Rf 0,42. P.F. 75° - 78°C aproximadamente,

EXEMPLO3

Repetindo a técnica descrita no exemplo 1 e utilizando como compostos inciais castanospermina e um cloreto de ácido apropriado obtiveram-se os compostos seguintes:

6-( 4-f luorobenzoato ) de [ IS-( 1 oC , 6 Jò , 7 ,

8,8a j3) ]-octa-hidro-1,6,7,8-indolizinotetro1. P.F. 216° - 218°C aproximadamente;

O 7-( 4-f luorobenzoato) de [ 1S — ( 1 o*-,6 , 7 <=>*. ,

8^3,8a/3 ) ]-octa-hidr o-1 , 6 , 7 , 8-indol i z inotetrol . P.F. 190° - 193°C aproximadamente;

O 7 - ( 2 , 4-dic 1 or obe n zoa to ) de [lS-(lc<,6 J3,7°C, o fi ,8aβ)]-octa-hidro-1,6,7,8-indolizinotetrol. P.F. 179

- 181°C aproximadamente;

O 6 - ( 4-bromobenzoat o ) de [1S-(1 °* , 6 β ,. 7 < , o

j3 , 8ajê> )1 -octa-hidro-1,6 , 7,8-indolizinotetrol . P.F. 234

- 235°C aproximadamente;

7-(4-bromobenzoato) de [ IS-( 1 oó , 6 , Ί °C ,

8j3,8aj3)]-octa-hidro-l,6,7,8-indolizinotetrol. P.F. 199° -202°C aproximadamente;

6-(4-metoxibenzoato) de [ IS-( 1 , 6/3,7 o< ,

J3,8aj3)]-octa-hidro-l,6,7,8-indolizinotetrol. P.F. 221° 224°C aproximadamente.

EXEMPL04

Repetindo a técnica descrita no exemplo 2 e utilizando como compostos iniciais a castanospermina e o cloreto de 4-f1uorobeηzοί1o , obteve-se o 6 ,4-bis(4-fluorobenzoato) de [ IS - ( 1 6 j3 , 7 °<-, 8 J3, 8a J3 ) ] - octa-hidr o-l , 6 , 7,8 - i ndol izinotetrol. P.F. 82° - 84°C

EXEMPL0_5

À temperatura de 0°C adicionou-se , gota a gota, uma solução de 3 g de cloreto de 4-metilbenzoílo a uma solução de 3 g de castanospermina. Concluída a adição, a mistura permaneceu à temperatura ambiente até equilibrar a sua temperatura depois do que se aqueceu durante 24 horas à temperatura de 55°C. Dilui-se a mistura reaccional com 10 ml de água e evaporou-se até à secura no vácuo. Agitou-se o resíduo resultante em 150 ml de uma mistura de água e cloreto de metileno a 1:2. Separo-se por filtração o material insolúvel obtendo-se um sólido esbranquiçado amorfo que se dissolveu em 60 ml de metanol quente, se tratou com 0,5 g de carvão activado e se filtrou. Arrefeceu-se o filtrado incolor obtendo-se 580 mg, (Rendimento 12%) de cristais incolores de 6-(4-metilbenzoato) de [ 1S - ( 1, 6 já , 7 °< ,8 J3 ,8a j3> ) ]-octa-hidro-l ,6 ,7 , 8-indolizino20 tetrol. P.F. 255° - 258°C aproximadamente (com decomposição).

Evaporou-se a mistura obtida antes das duas fases água/cloreto de metileno até à secura e dissolveu-se o resíduo resultante em 50 ml de uma mistura de metanol/acetato de etilo (1:2). Fraccionou-se a solução por HPLC preparativa sobre gel de sílica utilizando como agente de eluição uma mistura de acetato de etilo/metanol (9:1). Reuniram-se as fracções contendo o componente mais polar (isto é mais polar do que o

6- éster obtido no parágrafo anterior) e evaporaram-se no vácuo obtendo-se 210 mg (Rendimento 4%) de um sólido incolor, o

7- (4-metilbenzoato) de ílS-(loC,6j3,7e<,8j3,8aj3)]-octa-hidro-1 , 6,7,8-indolizinotetro1. P.F. 22 0° - 223°C (com decomposição ) .

EXEMPLO_6

Repetindo a técnica descrita no exemplo 5 e utilizando como compostos iniciais a castanospermina e um cloreto de ácido apropriado obtiveram-se os ésteres seguintes:

O 6-(2-metilbenzoato). P.F. 213° - 215°C aproximadamente;

O 6-(3-metilbenzoato). P.F. 212°C aproximadamente (com decomposição ) ;

7-(3-metilbenzoato);

O 6-(3-trifluorometilbenzoato);

6-(4-metilsulfonilbenzoato);

O 6-(4-metilmercaptobenzoato);

O 6-(3-cianobenzoato);

O 6-(4-dimetilaminobenzoato);

O 6-(3 , 4-metilenodioxibenzoato) ;

O 6-(3,4,5-triclorobenzoato);

O 7-(3,4 , 5-triclorobenzoato) ;

Ο 6-(2,4-dimetilbenzoato)

Ο 6-(2-naftalenocarboxilato) ;

7-(2 - naftalenocarboxilato) ;

6-(4-metil-2-naftalenocarboxilato) ;

6-(benzenoacetato) ;

7-(benzenoacetato) ;

6-(4-clorobenzenoacetato ) ;

6-(benzenopropionato) ;

6 - (cin a ma t o ) ;

7 - ( cimmato ) ;

O 6-(ciclo-hexanocarboxilato);

6-nicotionato

6-isonicotionato;

6-(2-tiofenocarboxilato ) . P.F. 214° - 215°C aproximadamente; 0 6-(2-furanocarboxi1 ato) . P.F. 2 0 9° - 212°C aproximadamente.

EXEMPLO7

À temperatura ambiente e sob atmosfera de azoto adicionaram-se 3 5 0 mg de castanos permi na a 5 ml de piridina.

Adicionou-se, gota a gota, 0,97 g de anidrido butírico e conservou-se a mistura à temperatura ambiente durante 24 horas. Evaporou-se a mistura reaccional até à secura no vácuo obtendo-se um resíduo xaroposo. Dissolveu-se este resíduo no éter observando-se a precipitação de um sólido incolor quando se adicionou pentano. A recristalização deste sólido numa mistura de éter e éter de petróleo forneceu 22 mg (Rendimento 4%) de agulhas incolores de 6 ,8-dibutanoato de [1S-(1 oí,6j3,7 o(₍ ,8aJÓ ) ]-octa-hidro-1,6,7,8-indolizinotetrol. P.F. 110° - 111°C aproximadamente. RMN (CDCl^)^!,? (t, 1H, C^-H), 4,1 (m,lH, C-H), 4,85 (t, IH, C_o-H), 5,0 ( m, IH, C,-H). EM (CI1 — o — b —

-CH ) 330 (MH⁺), 312 (MH⁺-H₂O).

Repetindo a técnica descrita no exemplo 7 mas utilizando anidrido acético, anidrido propiónico ou anidrido capróico em vez de anidrido butírico obtêm-se os correspondentes 6,8-diésteres .

EXEMPLO9

Sob atmosfera de azoto adicionaram-se a uma solução agitada e arrefecida à temperatura de -30°C de 1,7 g de 6 ,7-dibenzoato de [lS-(lot,6J3,7c<,8j3,8aJ3)]-octa-hidro-1 ,6 , 7 , 8-indolizinotetrol em 60 ml de cloreto de metileno,

3,8 g de tricloro-acetimidato de 2 , 3 , 4 , 6-tetra-O-(fenilmetil)-(⁰^ -D-glucopiranosi1o) [preparar de acordo com a técnica descrita por R.R. Schimdt e J. Michel , em Ange Wj__Che γπ^__Ι nt _Λ_Ε<Ε Eng^., 19, 731 - 32 (1980)]. Adicionaram-se depois, gota a gota, 1,4 g de esterato de trifluoreto de boro. Conservou-se

X o esta mistura durante 72 horas a temperatura de -10 C depois do que se lavou sucessivamente con 60 ml de uma solução aquosa de hidrogeno carbonato de sódio e 60 ml de uma solução concentrada de cloreto de sódio. Concentrou-se o extracto orgânico no vácuo obtendo-se um xarope espesso. Uma cromatografia em camada fina utilizando gel de sílica e como agente de eluição uma mistura de acetato de etilo/hexano (4:6) indicou a formação de um material menos polar de Rf 0,31. Fraccionou-se a mistura utilizando uma HPLC preparativa sobre gel de sílica e como agente de eluição uma mistura de acetato de etilo/hexano (4:6) obtendo-se 810 mg (Rendimento 21%) do glu23 cosido protegido e 670 mg (Rendimento 39%) do diéster inicial recuperado. Uma recristalização do produto na mistura éter/metanol forneceu cristais incolores de 6 , 7-di-O-be nzoil - 8 - 0-( 2 , 3 , ,6-tetra-0-( fenilmetil)- <*.-D-glucopiranosil) - [ 1S-Í 1 oC, 6 j3 , 7 d. ,

8a) ]-octa-hidro-1 , 6,7 , 8-indolizinotetrol. P.F. 145° - 147°C aproximadamente. RMN (DMSO-d_r) 0165,4 e 165,0 (2 x PhC=O), 95,9 (Ç ). EM (CI-CH₄) 920 (MH⁺).

exemploio

Sob atmosfera de azoto adicionaram-se 460 mg do glucosido protegido preparado no exemplo 9 a uma solução agitada de 20 ml de metanol. Adicionaram-se 5 gotas de uma solução 4,4M de metóxido de sódio em metanol depois do que se agitou a mistura à temperatura ambiente durante 18 horas. Evaporou-se a mistura até à secura e dissolveu-se o resíduo resultante em ml de acetato de etilo. Lavou-se a solução com 2 x 20 ml de uma solução concentrada de cloreto de sódio e evaporou-se no vácuo até à obtenção de um xarope que se tratou com 8 ml de ácido acético glacial contendo 100 mg de paládio a 10% sobre carvão e se hidrogenou num dispositivo de Parr durante 72 horas sob 3,5 atmosferas de hidrogénio. Separou-se o catalisador por filtração e adicionaram-se 100 mg de paládio a 10% sobre carvão preparado recentemente. Continuou-se a hidrogenação da mistura sob uma atmosfera de hidrogénio e a temperatura de 70°C durante 6 horas. Separou-se o catalisador por filtração, evaporou-se o filtrado até à secura e redissolveu-se o resíduo espesso resultante em 15 ml de água. Lavou-se a solução aquosa com 2 x 50 ml de éter, concentrou-se no vácuo até um volume próximo de 3 ml e submeteu-se a uma coluna trocadora de aniões (Bio-Rad2 4

AG-1-X8, 200-400 malhas, forma OH , 11 cm x 2,5 cm-id). Eluiuse esta coluna com água destilada e recolheram-se fracções de ml. Reuniram-se as fracções contendo o glucosido desprotegido e 1iofi1izaram-se um sólido branco pulvurulento que se dissolveu em metanol e se triturou com acetona obtendo-se 147 mg (Rendimento 83%) de cristais incolores de 8-0-(o( -D-glucopiranosil)-[lS-(lc<,6j3,7 ,8 β , 8a /3 ) ]-octa-hidro-l,6,7,8-indolizinotetrol. P.F. 208° - 210°C aproximadamente. RMN (D O)Jl,7 (m, 1H), 2,0 - 2,4 ( m , 4 H ) , 3,0 - 3,2 (m, 2H), 3,4 (t, 1H),

3,5 - 3,9 (m, 8H),4,4 (m, 1H, C^-H), 5,4 (d, 1H, , ₂,=3,9 Hz,

C -H, protão anomérico. EM (CI-CH₄ ) 3 52 (MH⁺) , 3 34 (MH ⁺ -H₂O).

Este composto exibe a seguinte fórmula de estrutura:

EXEMPLOll

Repetindo as técnicas descritas nos exemplos 9 e 10 e utilizando como compostos iniciais a castanospermina e um tricloro-acetimidato de glicosilo apropriado (obtido de acordo com as indicações do exemplo 9) , obtêm-se os seguintes compostos:

8-0-( y7-D-glucopiranosil)-[lS-(l «X ,6 -β ,7 , 8 β ,

Qaji ) ]-octa-hidro-l ,6 ,7 ,8-indolizinotetrol.

8-0-( -/^-D-galactopiranosilJ-tlS-tlc/ , 6 jj ,7 , /3,8 a j3 ) ]-octa-hidro-l,6,7,8-indolizinotetrol.

8-0- ('-b-j-galactopí ranos i 1 ) - [ 1S - ( 1 I θ J 3 t 7 αζ , θ , 8 a )]-octa-hidro-l,6,7,8-indolizinotetrol.

8-0-( 6-deoxi-b·^ -L-galactopiranosil )-[lS-( 1 °< , jò , 7 cxf,8 J 3,8 a J3 ) ]-octa-hidro-l ,6 ,7,8-indolizinotetrol.

8-0 - ( 6-deoxi-e^-L-galactopiranosi 1 ) - [ IS - ( 1 , β ,1 c=<,8j3,8aJ3 ) ]-octa-hidro-l, 6, 7, 8-indolizinotetrol.

8-0-(j3-D-_ribofuranosil)-[lS-(lo/ , 6 ^/3,7o/, 8 , a J3 ) ]-octa-hidro-l,6,7,8-indolizinotetrol .

8-0- (cx -D-ribofuranosil ) - [ lS-( lc/ ,6 ji ,7 cx , 8j3 , a Jl)]-octa-hidro-l,6,7 ,8-indolizinotetrol.

8-0-[o< -D-glucopiranosil-( 1—*4 )-0-73-o-glucopiranosil]-[lS-(l©< , 6j3 ,7 cx ,8JÍ8aj3)]-octa-hidro-l,6,7,8-indolizinotetrol.

8-0- [ »< -D-glucopiranosil-( 1 -* 4 ) - 0- <-D-glucopiranosil ] - [lS-( 1 o< ,6 ;3,7 , 8 J3,8aj3 ) ]-octa-hidro-l ,6,7,8-indo1i z i notetrol .

8- 0- [ o/ -D-glucopiranosil-(l-> 4 ) - 0- o(-D-glucopiranosil]-[lS-(lo< ,6 jS^^fS^jea^H-octa-hidro-lje^jS-indolizinotetrol.

8-0-[j3-D-glucopiranosil-(l->4)-0-v3-D-glucopiranosill-tlS-ll^ ,6 ji ,7 cx , 8 j3 , 8 a j3 ) ]-octa-hidro-l,6,7,8-indolizinotetrol .

EXEMPL012

A uma suspensão agitada de 1,5 g de castanospermina em 15 ml de piridina arrefecida à temperatura de 0°C num banho de gelo adicionou-se, gota a gota, 1,0 g de cloreto de butirilo. Agitou-se a mistura à temperatura ambiente durante dias depois do que se adicionaram 400 ml de uma mistura de água/cloreto de metileno (1:1). Concluída a partilha concentrou-se a fase aquosa no vácuo até à obtenção de um resíduo oleoso que se fraccionou por cromatografia em camada fina radial sobre gel de sílica utilizando uma placa com 2 mm de espessura e como agente de eluição uma mistura de metanol/clorofórmio (2:8). Obtiveram-se 68 mg de 6-butanoato de [1S-(1 ,

A,7 «,8 j3,8ah ) ]-octa-hidro-l ,6,7,8 ,-indolizinotetrol que se verificou ser um produto homogéneo por cromatografia em canada fina sobre gel de sílica utilizando como agente de eluição uma mistura de metanol/clorofórmio (2:8). Rf 0,5. A recristalização deste produto na mistura isopropanol/hexano (5:95) forneceu um sólido incolor. P.F. 113° - 114°C. RMN (CDCl^)cT3,5 - 3,8 (2t, 2H, C-H e C-H), 4,4 (m, 1H, C-H), 4,95 (m, 1H, / — o — -L

C -H). EM (CI-CH.) 260 (MH⁺), 242 (MH⁺-H_O), 172 (MH⁺-C_ΊH_CO_H).

Ό — 4 z J / z

De um modo semelhante, repetindo a técnica citada antes e utilizando cloreto de acetilo ou cloreto de propionilo obtiveram-se os monoésteres seguintes:

6- acetato de [lS-(lo<,6/3,7o/,8/3,8aj3)]-octa-hidro-1,6 , 7 , 8-indolizinotetrol. P.P. 188° - 189 C aproximadamente .

7- propionato de [lS-(lo/,6/3,7w,8/3,8a/3)]-octa-hidro-1 , 6 , 7,8-indo1izinotetrol. P.F. 153° - 155°C aproximadamente .

EXEMPLO 13

A uma mistura de 1,0 g de castanospermina e ml de piridina à temperatura de 0°C e sob atmosfera de azoto adicionaram-se 12,2 g de cloridrato de cloreto de isoni27 cotinoilo.

Aqueceu-se a solução amarela resultante à temo peratura de 55 C durante 41 horas.

Adicionaram-se 6 mg de 4-dimetilaminopiridina e continuou-se o aquecimento a refluxo durante mais 24 horas.

Concentrou-se a solução reaccional e cromatografou-se sobre gel de sílica 60 utilizando uma coluna com 7 00 ml de volume e como agente de eluição uma mistura de clorofórmio/metanol/hidróxido de amónio (80:20:1). Depois de se recolher a primeira fraeção de 300 ml recolheram-se as fracções seguintes de 100 ml .

Concentraram-se as fracções 11-21 obtendo-se

180 mg de um material que se cromatografou sobre uma placa de gel de sílica 60 PF-254 com 2 mm de espessura utilizando como agente de eluição uma mistura de clorofórmio/metanol (9:1). Concluída a eluição de três bandas reuniram-se as fracções contendo uma quarta banda e concentraram-se, obtendo-se o

7-isonicotinoato de [ 1S — ( 1 7 , 6 ji ,7 z ,8 J3,8aj3 ) ]-octa-hidro-1,6,7,8-indolizinotetro1 sob a forma de um sólido branco.

RMN (DMSO-d-) 6 Ό	8 ,	81 ( d ,	J=5,9 Hz,	2H ,	protões piridilo orto
relativamente a	N)	, 7,87	(d , J = 5,9	Hz ,	2H, protões piridilo
meta relativamente	a N ) ,	4,85 (dd,	J = 9	,2 Hz, J=9,2 Hz, 1H,

C7-H ) .

EXEMPLO_14

A uma solução agitada de 5 ml de piridina e arrefecida em um banho de gelo adicionou-se 0,38 g de castanospermina. Adicionou-se 0,96 g de cloreto de benzoilo, gota a gota, à mistura e conservou-se a suspensão resultante a uma temperatura compreendida entre 0° - 4°C durante 18 horas. Adicionaram-se 5 ml de água gelada e diluiu-se a mistura com 50 ml de éter. Separou-se a solução estérea e lavou-se com 2 x 50 ml de ácido clorídrico IN, 50 ml de uma solução aquosa saturada de hidrogeno carbonato de sódio e 50 ml de uma solução saturada de cloreto de sódio. Secou-se a fase orgânica sobre sulfato de magnésio anidro e evaporou-se até à secura no vácuo. Redissolveu-se o resíduo resultante em 3 ml de éter e por cromatografia em camada fina sobre gel de sílica e utilizando como agente de eluição uma mistura de éter/hexano (6:4) demonstrou-se que esse resíduo era uma mistura dos dois componentes principais (Rf 0,35 e 0,20). Separou-se a mistura por cromatografia em camada fina e preparativa sobre gel de sílica e utilizando como agente de eluição uma mistura de éter/hexano (6:4) obtendo-se 0,30 g (Rendimento 30%) do composto menos polar (Rf 0,35), o 1 , 6 , 8-tribenzoato de [ IS-(1 cW , 6 ,7 c< , 8 J3 ,

8a f) ]-octa-hidro-l,6,7,S-indolizinotetrol , sob a forma de

Z o o um solido espumoso anidro. P.F. 85 - 87 C aproximadamente.

RMN (CDC1₃/D₂O) cf 1,7 - 2,6 (m, 5H), 3,0 - 4,1 ( m , 3H), 5,1 - 5,7 (m, 3H), 7,1 - 8,2 (m, 15H, arilo). EM (CI-NH ) 502 (MH )/380 (MH -PhCC>₂H). Isolou-se o componente mais polar, o 6,7,8-tribenzoato de [lS-(l^<^,6j3.,7o/,8i/3_r8a/3)]-octa-hidro-1 ,6 ,7 , 8-indolizinotetrol sob a forma de uma espuna anidra

Rf 0,20. P.F. 75° - 78°C.

EXEMPLO15

A uma solução agitada sob atmosfera de azoto de 5,2 g de 1,6,8-tribenzoato de [lS-(lc<,6j3,7c><,8/3,8a>S)]-octa-hidro-1,6,7,8-indolizinotetrol em 150 ml de cloreto de metileno e arrefecida à temperatura de -20°C adicionaram-se 8,5 g de tricloro-acetimidato de 2 , 3,4,6-tetra-0-(fenilmetil)-íx. -D-glucopiranosilo. Adicionou-se depois, gota a gota, 3,0 ml de esterato de trifluoreto de boro. Conservou-se a mistura à temperatura de -10°C durante 96 horas. Depois da sua temperatura atingir o valor da temperatura ambiente esta lavou-se sucessivamente com 200 ml de uma solução aquosa de hidrogeno carbonato de sódio e 200 ml de uma solução saturada de cloreto de sódio. Secou-se a fase orgânica sobre sulfato de magnésio e evaporou-se no vácuo obtendo-se um xarope espesso. Uma cromatografia em camada fina sobre gel de sílica e utilizando como agente de eluição uma mistura de acetato de etilo/hexano (1:3) mostrou que se tinha formado um material menos polar. Rf 0,44. Fraccionou-se a mistura utilizando uma

HPLC preparartiva sobre gel de sílica e como agente de eluição uma mistura de acetato de etilo/hexano (1:3) obtendo-se

5,7 g (Rendimento 54%) de 1 ,6 , 8-1ri-O-beηzoi1-7-O-(2 ,3 ,4 ,6 -tetra-O-( fenilmetil )-» -D-glucopiranosil)-[lS-(lo< , 6 jó ,1 ,

8j3,8a,P)]-octa-hidro-l,6,7,8-indolizinotetrol sob a forma 13 de um xarope incolor espesso. RMN C (CDCl^) c5 166,0,

5 , 9 , 16 5 , 5 ( 3 x PhC = O), 99,4 (C , -J ¹³C-¹H = 168 Hz).

EM (CI-CH,) 1024 (MH⁺), 902 (MH⁺ - PhCO„H).

2

EXEMPLO_16

A uma suspensão de 5,6 g de 1 ,6 ,8-tri-O-benzoíl-7-0-(2 ,3 ,4 ,6-tetra-0-{fenilmetil) - ‘/-D-glucopiranosil) - [ IS - ( 1 o<: ,6 j3, 7 e>< ,8 ,8a j3) ]-octa-hidro-l ,6 ,7,8-indolizinotetrol em 100 ml de metanol adicionaram-se 30 gotas de uma solução 4,4 M de metóxido de sódio em metanol e agitou-se a mis30 tura à temperatura ambiente durante 18 horas. Adicionaram-se à mistura 3 gotas de hidróxido de potássio e 5 ml de água e aqueceu-se a solução resultante a refluxo durante 3 dias.Arrefeceu-se a mistura e evaporou-se até àsecura no vácuo. Dissolveu-se o resíduo resultante em uma mistura de 50 ml de acetato de etilo e 10 ml de água. Separaram-se as fases depois do que se extraiu a camada aquosa com 2 x 30 ml de acetato de etilo. Reuniram-se os extractos orgânicos e evaporaram-se obtendo-se um resíduo gomoso amarelado. A recristalização do produto no éter forneceu 3,42 g (88%) de cristais leves e incolores de 7-0- (2 ,3 ,4 ,6-tetra-0-( fenil metil ) -o<- D-glucopiranosil )-[lS-( 1 , , 7 o/ , 7 ,8a J3 ) ]-octa-hidro-l ,6 , 7 , 8-indolizinotetrol .

P.F. 119° - 120°C. RMN ¹H (CDC1 ) 1,5 - 2,5 (m, 5H), 2,8 - 4,0 (m, 12H), 4,1 - 5,0 (m, 12H),7,0 - 7,4 (m, 20H, arilo).

EXEMPLO17

Dissolveram-se 250 mg do produto preparado no exemplo 16 em 4 ml de ácido acético glacial e adicionaram-se 50 mg de paládio a 10% sobre carvão. Hidrogenou-se a mistura à pressão de uma atmosfera de hidrogénio e à temperatura de »

55°C durante 4 horas. Depois de se eliminar o catalisador evaporou-se a solução de ácido acético até à secura no vácuo. Redissolveu-se o resíduo resultante em 10 ml de uma mistura metanol/água (1:1) e agitou-se durante uma hora com 2,0 g de uma resina trocadora de aniões [Bio-Rad AG1-X8 (200-400 malhas, fórmula OH )]. Evaporou-se a solução aquosa até à secura obtendo-se um pó branco que se dissolveu no metanol e se triturou com acetaona obtendo-se 92 mg de cristais incolores de 7-0- W)-glucopiranosil )-[ lS-( lc^ ,6 β ,Ίc* 8ajá ) ]-octa-hidro31 h₂o) .

-1,6 , 7 , 8-indolizinotetrol. P.F. 184° - 187°C (com decomposição). EM (CICH ). 352 (MH⁺), 334 (MH⁺ -

Claims

REIVINDICAÇÕES

1.- Processo para a preparação de compostos de fórmula geral na qual

R, R' e R representam, cada um, independentemente, um átomo de hidrogénio, um grupo alcanoilo

-33ciclohexanocarboniloj. naftalenocarbonilo comportando, eventualmente, como substituinte um átomo de halogéneo ou um grupo metilo; fenil-alcanoílo C^_g comportando, eventualmente, como substituinte no núcleo fenllico um átomo de halogéneo ou um grupo metilo; cinamoílo; piridinocarbonilo comportando, eventualmente, como substituinte um átomo de halogéneo ou um grupo metilo; tiofenocarbonilo comportando, eventualmente, como substituinte um grupo metilo; furanocarbonilo comportando, eventualmente, como substituinte um grupo metilo; glicosilo, O-metilglicosilo ou glicosilo Ac-acilado, em que Ac representa um grupo benzoilo ou alcanoilo ttf-è' ^comP^ortando 1 a 3 moléculas de hexose ou pentose ligadas em posição 1 ao radical glicosilo; ou um grupo de fórmula geral v 0 \\- é- , na qual Y representa um átomo de hidrogé

Y nio ou de halogéneo ou um grupo alquilo , alcoxi C^_₄, trifluorometilo, alquil(C^_₄)-sulfonilo, alquil(C^_₄)-mercapto, ciano ou dimetilamino; Y' representa um átomo de hidrogénio ou de halogéneo, um grupo alquilo C^_₄ ou alcoxi ou, considerado conjuntamente com um átomo ou grupo representado pelo símbolo Y, forma um grupo 3,4-metilenodioxi e, Y representa um átomo de hidrogénio ou de halogéneo ou um grupo alquilo C₁_₄ ou alcoxi C₁_₄; com a condição de R, R' e R representarem, pelo menos

-34um mas não mais do que dois deles, um átomo de hidrogéneo;

ou dos seus sais aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico, caracterizado pelo facto de se fazer reagir o alcaloide castanospermina ( £ IS- (lot , 6 β , 7oC , 8y3 , 8ayôi7^-octahidro-l, 6,7,8-indolizinotetrol) com

a) um anidrido ou um halogeneto de ácido apropriado, no seio de um dissolvente inerte;

ou

b) com um acetamidato ou um halogeneto de glicosilo O-benzilado ou Ac-acilado no seio de um dissolvente inerte, e de se hidro genar depois cataliticamente para eliminar os grupos benzilo ou, eventualmente, de se tratar com uma base para eliminar os grupos representados pelo símbolo Ac ou outros grupos éster.
2.- Processo de acordo com a reivindicação 1 para a preparação de compostos de fórmula geral na qual R, R' e R representam, cada um, independentemente, um átomo de hidrogénio, um grupo alcanoílo , ciclohexar.ocarboni-35lo, naftalenocarbonilo comportando, eventualmente, como substituin te um ãtomo de halogéneo ou um gruDO metilo; fenil-alcanoílo C_ ~ comportando o núcleo fenílico, eventualmente, como substituinte um ãtomo de halogéneo ou um grupo metilo; cinamoílo; piridinocarbonilo comportando, eventualmente, como substituinte um ãtomo de halogéneo ou um grupo metilo; tiofenocarbonilo comportando, eventualmente, como substituinte um grupo metilo; furanocarbonilo grupo de fórmula geral na qual Y representa comportando, eventualmente, como substituinte um grupo metilo; ou

Y ,-- 0 ’Λ ^(l

A - c - um ãtomo de hidrogénio ou de halogéneo ou um grupo alquilo C^_₄' alcoxi trifluorometilo, alquil (C₁_₄)-sulfonilo, alquil (C^ )-mercapto, ciano ou dimetilamino; Y' representa um átomo de hidrogénio ou de halogéneo, um grupo alquilo C^_₄ ou alcoxi C^_₄ou, considerado conjuntamente com um ãtomo ou grupo representado pelo símbolo Y, formam um grupo 3,4-metilenodioxi e Y representa um ãtomo de hidrogénio ou de halogéneo ou um grupo alquilo

C^_₄ ou alcoxi com a condição de R, R' e R representarem, pelo menos um mas não mais de dois deles, um ãtomo de hidrogénio; ou dos seus sais aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico, caracterizado pelo facto de se fazer reagir o alcaloide castanospermina com um anidrido ou um halogeneto de ãcido apropriado no seio de um dissolvente inerte.
3.- Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de compostos de fórmula geral na qual R, R' e R representam, cada um, independentemente, um átomo de hidrogénio, um grupo alcanoilo ^ou um grupo de f na qual Y representa um átomo de grupo alquilo C. ., alcoxi C. , , hidrogénio ou de halogéneo ou um trifluorometilo, alquil (C^_^)-sulfonilo, alquil (C^_^)-mercapto, ciano ou dimetilamino; Y' representa um átomo de hidrogénio ou de halogénio, um grupo alquilo ou alcoxi ou, considerado conjuntamente com um átomo ou grupo representado pelo símbolo Y, representa um grupo 3,4-metilenodioxi e Y representa um átomo de hidrogénio ou de halogéneo ou um grupo alquilo ou alcoxi ; com a condição de R, R' e R representarem, pelp_menos_ um mas não mais do que dois deles, um átomo de hidrogéneo; ou dos seus sais aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico, caracterizado pelo facto de se fazer reagir o alcaloide castanospermina com um anidrido ou um halogeneto de ãcido apropriado no seio de um dissolvente inerte.

-374.- Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de compostos de fórmula geral na qual R, R' e R representam, cada um, independentemente, um átomo de hidrogénio ou um grupo de fórmula geral 0 _ C na qual Y representa um ãtomo de hidrogénio

Y ou de halogéneo ou um grupo alquilo C^_₄, alcoxi C^_₄, trifluorometilo, alquil(C^_4)-sulfonilo, alquil (C^_^)-mercapto, ciano ou dimetilamino; Y¹ representa um ãtomo de hidrogénio ou de halogéneo, um grupo alquilo ou alcoxi C^_₄ ou, considerado conjuntamente com um ãtomo ou grupo representado pelo símbolo Y, representa um grupo 3,4-metilenodioxi e Y representa um ãtomo de hidrogénio ou de halogéneo ou um grupo alquilo ou alcoxi C^_^; com a condição de R, R' e R representarem, pelo menos um mas não mais do que dois deles, um ãtomo de hidrogénio; ou dos seus sais aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico, caracterizado pelo facto de se fazer reagir o alcaloide castanospermina com um anidrido ou halogeneto apropriado no seio de um dissolvente inerte.

-385,- Processe de acordo com a reivindicação 1, .para a preparação de compostos de fórmula geral na qual R e R' representam, cada um, independentemente, um ãtomo Y de hidrogénio ou um grupo de fórmula geral

Y' na qual Y representa um ãtomo de hidrogénio ou de halogéneo ou um grupo alquilo C^_^, alcoxi , trifluorometilo, alquil(C^_₄)-sulfonilo, alquil(C^_4)-mercapto, ciano ou dimetilamino; Y' representa um ãtomo de hidrogénio ou de halogéneo, um grupo alquilo ^ou alcoxi ou, considerado cojuntamente com um ãtomo ou grupo representado pelo símbolo Y, representa um grupo 3,4-metilenodioxi e Y representa um ãtomo de hidrogénio ou de halogéneo ou um grupo alquilo ou alcoxi com a condição de pelo menos um dos símbolos R e R' não representar um átomo de hidrogénio; ou dos seus sais aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico, caracterizado pelo facto de se fazer reagir o alcaloide castanospermina com um anidrido ou halogeneto de ácido apropriado no seio de um dissolvente inerte.
6.- Processo de acordo com a reivindicação 1 para a preparação de compostos de fórmula geral na gual R e R' representam, cada um, independentemente, um átomo γ representa um atomo de hidrogénio ou de ^A ‘ halogéneo ou um grupo alquilo alcoxi , trifluorometilo, alquil (C^_4)-sulfonilo, alquil (C^ ^J-mercapto, ciano ou dimetilamino e Y’ representa um átomo de hidrogénio ou de halogéneo, um grupo alquilo ou alcoxi ou, em associação com um átomo ou grupo representado pelo símbolo Y, representa um grupo 3,4-metilenodioxi; com a condição de pelo menos um dos símbolos R e R' não representar um átomo de hidrogénio; ou dos seus sais aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico, caracterizado pelo facto de se fazer reagir o alcaloide castanospermina com um anidrido ou um halogeneto de ãcido apropriado no seio de um dissolvente inerte.
7.- Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de compostos de fórmula geral na qual R e R' representam, cada um, independenternente, um átomo de hidrogénio ou um grupo de fórmula geral -à- , na qual

Y representa um átomo de hidrogénio ou de halogênio e Y' representa um átomo de hidrogénio ou de halogênio, com a condição de pelo menos um dos símbolos R e R' não representar um átomo de hidrogénio; ou dos seus sais aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico, caracterizado pelo facto de se fazer reagir o alcaloide castanospermina com um anidrido ou um halogeneto de ãcido apropriado no seio de um dissolvente inerte.
8. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação do 6-benzoato de £ IS- (Ιού, 6 0, 7 ού , 8©, 8a 0 ) J-octahidro-1,6,7,8-indolizinotetrol, caracterizado pelo facto de se fazer reagir o alcaloide castanospermina com cloreto de benzoílo.
9. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação do 7-benzoato de £ IS- (1°4. 6 0, 7 oL, 8 0, 8a 0 ) J-octahidro-1,6,7,8-indolizinotetrol, caracterizado pelo facto de se fazer reagir o alcaloide, castanospermina com cloreto de ben-41- zoilo.
10.- Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação do 6-(4-fluorobenzoato) de /* lS-(la£., 6 Ρ, 7©í , 8P, 8a£)_7 -octahidro-1,6,7,8-indolizinotetrol, caracterizado pelo facto de se fazer reagir o alcaloide castanospermina com cloreto de 4-fluorobenzoilo.
11.- Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação do 7-(4-f luorobenzoato) de /” lS-(lo£ , 6 /3 , 7 oC ,

8 , 8a )/octahidro-l, 6, 7, 8— indolizinotetrol, caracterizado pelo facto de se fazer reagir o alcaloide castanospermina com cloreto de 4-fluorobenzoílo.
12.- Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação do 6,3-dibutanoato de £ IS- (1 aí , 6 β , 7 oí , 8 β , 8a f)J-octahidro-1, 6,7,8-indolizinotetrol, caracterizado pelo facto de se fazer reagir o alcaloide castanospermina com anidrido butírico.
13.- Processo de acordo com a reivindicação 1 para a preparação de compostos de fórmula geral na qual R, R' e R representam, cada um, independentemente um átomo de hidrogénio ou um grupo glicolisilo, O-metilglicosilo ou glicosilo Ac-acetilado, em que Ac representa um grupo benzoilo ou alcanoílo 0₂_θ, comportando 1 a 3 moléculas de hexose ou de pentose ligadas em posição 1 ao grupo glicosilo, com a condição de R, R’ e R representarem, pelo menos um, mas não mais do que dois deles, um ãtomo de hidrogénio; ou dos seus sais aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico, caracterizado pelo facto de se fazer reagir o alcaloide castanospermina, eventualmente esterificado, com um acetimidato ou um halogeneto de glicosilo O-benzilado ou Ac-acilado apropriado no seio de um dissolvente inerte e de se realizar depois uma hidrogenação catalítica para eliminar os grupos benzilo ou de se tratar, eventualmente, com uma base para eliminar os grupos Ac ou outros grupos éster.
14.- Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação do 8-0- -D-glucopiranosil)IS- (1 oó ,6 β , 7ού ,8 β ,

8a £) _7-octahidro-l,6,7,8-indolizinotetrol, caracterizado pelo facto de se fazer reagir o 6,7-dibenzoato de IS-(1 có , 6 β , 7 oó ,

-438p,8a^) _/-octahidro-l, 6,7,8-indolizinotetrol com 2,3,4,6-tetra-0-(fenilmetil)-(o4-D-glucopiranosil)-tricloroacetimidato e de se tratar depois com uma base e de se hidrogenar, seguidamente, através de paládio sobre carvão.
15.- Processo para a preparação de composições farmacêuticas apropriadas para o tratamento da diabetes ou da hiperglicêmia em indivíduos diabéticos, caracterizado pelo facto de se misturar, como ingrediente activo, uma quantidade eficaz de um composto de fórmula geral preparado pelo processo de acordo com a reivindicação 1, ou de um seu sal aceitável sob o ponto de vista farmacêutico com um veículo aceitável em farmácia,