PT87753B

PT87753B - Processo para a preparacao de uma composicao farmaceutica para o desenvolvimento da cura de tecido de menisco possuindo como ingrediente activo um factor angiogenico

Info

Publication number: PT87753B
Application number: PT87753A
Authority: PT
Original assignee: Harvard College
Priority date: 1987-06-19
Filing date: 1988-06-17
Publication date: 1992-10-30
Also published as: PT87753A; JPH0311785B2; EP0295721B1; ES2027728T3; GR3004229T3; KR910005886B1; AU1811788A; DK333788A; DE3867328D1; JPS6486974A; KR890000101A; DK333788D0; AU605599B2; EP0295721A3; CA1326817C; US4952403A; EP0295721A2

Description

PRESIDENT AND FELLOWS OF HARVARD COLLEGE, associação de caridade norte-americana, com sede em 17 Quincy Street, Cambridge, Massachusetts 02158, Estados Unidos da América, pretende obter em Portugal para PROCESSO PARA A PREPARAÇÃO DE UMA COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA PARA 0 DESENVOLVIMENTO DA CURA DE TECIDO DE MENISCO POSSUINDO COMO INGREDIENTE ACTIVO UM FACTOR ANGIOGÊNICO presente invento refere-se a um método para o desen volvimento da cura de tecido normalmente não vascular ferido e diz mais especificamente respeito à aplicação de um factor angiogénico na proximidade do ferimento para acelerar a cura.

Sabe-se há muito tempo que o tecido normalmente não vascular, em particular fibrocartilagem como os meniscos do joelho ou do pulso, da extremidade da clavícula ou da união temporomandibular é resistente a vascularização e cura excepto no perímetro vascularizado, depois de um ferimento acidental, por exemplo laceração ou dilaceração, ou depois de uma incisão cirúrgica deliberada. King, J. Bone Joint Surg., Vol. 18, pp. 553-542 (1936) mostrou que um menisco de cão dilacerado pode ser curado por meio de tecido conjuntivo, desde que a dilaceração esteja ligada lateralmente com a membrana sinovial, e esta indicação

11. JO.Bó

59.917

REF: USSN 064.215 RWF:MS foi confirmada por Cabaud et al., Am. J. Sports Med.,

Vol. 9(5), pp. 129-154 (1981). Este último autor mostrou que se produzia a cura de meniscos lacerados de cães e macacos por intermédio de tecido de cicatriz vascular contíguo ao tecido sinovial periférico e prolongado até ao fundo da laceração. Heatley, J. Bone Joint Surg., Vol. 6z-B, 397-402 (1980) descreveram a cura de meniscos de coelho incisos, por meio da sutura da incisão e mostraram que a invasão de células sinoviais, e nao o tecido vascular, era o prelúdio da cura, de que resultava uma cicatriz que não era muito vascular. Arnoczky et al., Am. J. Sports Med., Vol. 10(2), pp. 90-95 (1982) mostraram que só se encontram vasos sanguíneos no quarto periférico do menisco do joelho humano e concluíram que o abastecimento vascular é demasiadamente escasso para apoiar uma resposta inflamatória que desenvolva a cura espontânea depois de laceração da fibrocartilagem.

Conhecem-se factores angiogénicos que desempenham um papel importante na cura de feridas, Rettura et al., resumo FASEB N« 4509, 61« reunião anual, Chicago (1977), que foram derivados de células de tumores e fluido de ferida, Banda et al., Proc. Natl. Acad. Sei., EUA, Vol. 79, pp. 7775-7777 (1982), Patente E.U. N° 4.505.038; e de células retínicas, D'Amore, Proc. Natl. Acad. Sei., EUA,

Vol. 78, pp. 3068-3072 (1981). Folkman et al., J. Exp. Med., Vol. 133, pp. 275-288 (1971), isolaram um factor de angiogénese de tumor a partir de tumor ascite no rato Walker 256. 0 factor era mitogénico para células endoteliais capilares e foi inactivado por RNase. Tuan et al., Biochemistry, Vol. 12, pp. 3159-3165 (1973) encontraram actividades mitogenica e angiogénica nas proteínas não hístonas do tumor Walker 256. A fraeção activa era uma mistura de proteínas e hidrato de carbono. Observou-se que

-258.917

REF: USSN 064.215 RWF:MS uma variedade de tumores animais e humanos produzem factor(es) de angiogénese, Phillips e Kumar, Int. J. Câncer, Vol. 23, pp. 82-88 (1979), mas a natureza química do(s) factor(es) não foi determinada. Também se observou que um componente não-proteína com pequeno peso molecular proveniente de tumores Walker 256 era angiogénico e mitogénico, Weiss et al., Br. J. Câncer, Vol. 40, pp. 493-496 (1979). Um factor angiogénese com um peso molecular de 400-800 daltons foi purificado até homogeneidade por Fenselau et al., J. Biol. Chem., Vol. 256, pp. 9605-9611 (1981), mas não se prosseguiu a sua caracterização. Observou-se que células de tumor do pulmão humano segregam um factor de angiogénese que compreende um portador com grande peso molecular e um componente activo com pequeno peso molecular, possivelmente nao-proteína, Kumar et al., Int. J. Câncer, Vol. 32, pp. 461-464 (1983).

Vallee et al., Experientia, Vol. 41, pp. 1-15 (1985) encontraram actividade angiogénica associada com três fracções provenientes de tumores Walker 256. Tolbert et al., Patente E.U. N² 4.229.531, descreveram a produção de factor angiogénese proveniente da linha HT-29 de célula de adenocarcinoma humano. Factores de Crescimento Ligantes-Heparina, Factor Alfa de Crescimento de Transformação, e Factor Beta de Crescimento de Transformação são também factores angiogenicos conhecidos. Uma proteina angiogénica denominada angiogenina foi isolada e caracterizada a partir de células de carcinoma humano, Fett et al., Biochem., Vol. 24, pp. 5480-5486 (1985) e é o material preferido para aplicação no presente invento.

Assim, o peptídeo da formula

-559.917

REF: USSN 064.215 RWF:MS

17. Jló. ivráo

15 <Glu-Asp-Asn-Ser-Arg-Tyr-Thr-His-Dhe-Leu-Thr-Gln-His-Tyr-Asp50

Ala-Lys-Pro-Gln-Gly-Arg-Asp-Asp-Arg-Tyr-Cys-Glu-Ser-Ile-Met45

Arg-Arg-Arg-Gly-leu-Thr-Ser-Pro-Cys-lys-Asp-Ile-Asn-Thr-Phe60

Ile-His-Gly-Asn-Dys-Arg-Ser-Ile-Lys-Ala-Ile-Cys-Glu-Asn-Lys75

Asn-Gly-Asn-Pro-His-Arg-Glu-Asn-Leu-Arg-Ile-Ser-Lys-Ser-Ser

Phe-Gln-Val-Thr-Thr-Cys-Lys-Leu-His-Gly-Gly-Ser-Pro-Trp-Pro105

Pro-Cys-Gln-Tyr-Arg-Ala-Thr-Ala-Gly-Phe-Arg-Asn-Val-Val-Val120

Ala-Cys-Glu-Asn-Gly-Leu-Pro-Val-His-Leu-Asp-Gln-Ser-Ile-Phe125

Arg-Arg-Pro-OH.

e fragmentos ou porções angiogénicos do mesmo ou seus derivados peptídeos que têm um ou mais aminoácidos anulados ou substituídos ao mesmo tempo que mantêm essencialmente a mesma actividade angiogénica que o peptídeo da fórmula atrás indicada, são apropriados para a aplicação do presente invento. Utiliza-se o símbolo Glu para representar uma metade de ácido piroglutâmico.

Os técnicos especializados em engenharia genética poderão identificar diversos peptídeos relacionados com a estrutura peptídica indicada acima, que podem ser preparados por meio de técnicas de engenharia genética. Aqueles peptídeos podem ter segmentos orientadores como os que são codificados pelo codão de iniciação met, etc. Desta maneira, é fácil preparar, por meio de técnicas de engenharia genética convencionais, uma ampla variedade de peptídeos equivalen-459.917

REF: USSN 064.215 RWF:MS

17.

tes a estrutura atras indicada.

Descobriu-se agora um método para o desenvolvimento da cura de tecido normalmente avascular de um menisco depois de ferimento ou ruptura como laceração, dilaceração ou incisão, que compreende proporcionar uma dose eficaz de factor angiogénico na proximidade do referido tecido atingido. Para se obterem os melhores resultados, o factor angiogénico é aplicado ou implantado na proximidade ou imediatamente contíguo ao lugar atingido, preferivelmente em contacto directo com o tecido ferido, por exemplo na forma de composição que compreende o factor angiogénico e um portador não tóxico fisiologicamente aceitável. 0 portador pode ser líquido ou sólido e pode ser, por exemplo, um polímero como metil celulose ou um copolimero de etileno e acetato de vinilo ou outra composição polimérica que proporciona a libertação lenta do factor angiogénico durante um período de tempo prolongado, encontrando-se neste último caso o factor angiogénico na forma de uma implantação de libertação controlada. 0 método de acordo com o presente invento tem aplicação particular na fibrocartilagem como por exemplo nos meniscos atrás descritos.

A dose necessária para utilização eficaz varia numa gama ampla, conforme a identidade e pureza do factor angiogénico utilizado. No caso de angiogenina pura, a dose pode variar desde 500 até 900 ng por cada 2 a 4 mm de comprimento de ferioa a curar, quando é administrada num portador como metil celulose a partir do qual é liberta rapidamente. Em qualquer caso específico, a dimensão óptima da dose eficaz pode ser determinada por meio de experimentação de rotina. Visto que a cura pelo presente método se completa normalmente em 6 a 10 semanas, podem empregar-se implantações de libertação controlada que proporcionam um abastecimento de factor angiogénico que se prolonga duran-5k JlftUSSÔ

59.917

REF: USSN 064.215 RWE:MS te aproximadamente o mesmo período de tempo, isto é, 6 a 10 semanas.

factor angiogénico após implantação ou administração contígua ao ferimento na porção central avascular de um menisco induz neovascularizaçao, seguida por cura do ferimento, mesmo sem o emprego de suturas.

exemplo específico que se segue destina-se a descrever o invento e não a limitar o seu âmbito.

Alimentaram-se 97 coelhos machos brancos da Nova Zelândia com peso entre 5 e 7 quilogramas cada um, colocados em gaiolas individuais, com uma dieta normal, excepto no que diz respeito à adição de tetraciclina à água para beber, antes e depois de cirurgia, como meio profiláctico.

Os coelhos foram anestesiados com a aplicação de uma injecção intramuscular de maleato de Âcepromazina (Tech America Group, Inc., Elwood, KS: maleato hidrogénio de 2-acetil-10-(5-dimetilamino-propil)fenotiazina) de 1,5 mg/kg de peso corporal e cetamina (3ristol Laboratories, Syracuse, NY: (cloridrato de LL-2-(o-clorofenil)-2-(metilamino )ciclo-humana de 25 mg/kg de peso corporal, e uma injecção subcutânea local de 2 cc de xilocaína a 1% (Astra Rharmaceutical Products, Inc., Westborough, MA: acetamida, monocloridrato de 2-(dietilamino)-N-(2,6-dimetilfenil). Raspou-se toda a extremidade inferior direita, preparada com solução de álcool a 70% e envolvida com toalhas esterilizadas. A união do joelho foi exposta por meio de uma incisão na pele parapatelar e retinacular. A patela foi deslocada medialmente, a origem do tendão peroneal foi dividida e o joelho foi dobrado. Sob um microscópio de dissecção binocular, utilizando uma ampliação de lOx, colocou-se um micro gancho de pele dentro da porção anterior

-611. JM8859.917

REF: USSN 064.215 RWE:MS do menisco. Puxou-se o menisco anteriormente, e observou-se o terço anterior do menisco lateral. Empregou-se um bisturi pequeno para abrir uma bolsa horizontal com aproximadamente 0,8 mm por 2,5 mm dentro do corpo do menisco, começando a 2 mm de distância da orla meniscal. A bolsa foi prolongada posteriormente, imediatamente abaixo da superfície visível do tecido dentro do terço a meio do cor po meniscal. Teve-se o cuidado de minimizar o trauma ao sinóvio.

Manteve-se metil celulose (4000 Cp) em autoclave e em seguida dissolveu-se (1% p/v) em água esterilizada por meio de agitação até ao dia seguinte a 4⁵ C. Preparou-se uma suspensão de amostras liofilizadas e isentas de sal de angiogenina por meio de agitação moderada em metil celulose durante 2 horas a 4^e C. Colocaram-se volumes de 10 microlitros numa folha mylar limpa e seca e secou-se ao ar em condições de fluxo laminar para formar um grão ou disco límpido com 5 mm de diâmetro, que continham cada um 100 ng de angiogenina. Colocou-se a folha que continha os grãos num prato Petri quadrado, o qual foi posto num dessecador, e liofilizou-se durante mais 60 minutos para assegurar que os grãos secassem completamente. Prepararam-se discos de metil celulose de controlo que não continham angiogenina. Em condições de esterilização, os discos foram retirados individualmente da folha de plástico com fórceps, dobrados e inseridos cada um separadamente na extremidade aguçada de uma agulha medida 20.

A ponta aguçada da agulha medida 20 que retinha a amostra foi inserida na bolsa do menisco de cada coelho e utilizou-se uma agulha espinal medida 20 para ejectar o disco da agulha, colocar a amostra de maneira rigorosa e fixar a amostra no interior do tecido meniscal. Pez-se

-717.Μ8-- 59.917

REF: USSN 064.215 RWF:MS a seguir um corte de faca vertical de 1 mm medianamente à bolsa para simular uma laceração longitudinal.

Alongou-se o joelho, diminuiu-se a patela e irrigaram -se os tecidos com solução de cloreto de sódio a 0,9% que continha 500 mg de Gentamicina por litro. Fechou-se o retináculo com oito suturas de sutura absorvível 3-0 Vicryl e fechou-se a pele com uma sutura subcuticular contínua de 4-0 Vicryl. Deixou-se que os coelhos corressem livremente nas suas gaiolas e forneceu-se-lhes uma dieta normal. Adicionou-se tetraciclina à água para beber pré-e post-operatoriamente.

Sacrificaram-se grupos de coelhos com intervalos de 3, 6, 8, 9, 12 e 26 semanas, utilizando uma injecção intravenosa letal de 3 mg/kg de maleato de Acepromazina e 50 mg/kg de Cetamina. Examinou-se de maneira geral a articulaçao do joelho, utilizando o microscópio de dissecção e registaram-se ss observações. 0 observador não podia ter conhecimento da identidade da amostra implantada. Cias sificaram-se os resultados de acordo com a presença ou ausência de neovascularização. Quanto às amostras classificadas positivamente em neovascularização, registou-se uma segunda observação a respeito da presença ou ausência da bolsa e corte de faca (cura).

Guardaram-se amostras para exame histológico em solução de formalina com tampão neutra a 10%. Secções transver sais através do menisco e osso subjacente foram descalcificadas, implantadas e manchadas com hematoxilina e eosina para microscópia luminosa.

Observou-se neovascularização em 39 de 75 (52%) meniscos que tinham sido implantados com angiogenina. A neovascularização era caracterizada como um pannus de teci-859.917

REF: USSN 064.215 RWF:MS

11. JUN. !S88 do conjuntivo com vasos sanguíneos proeminentes que cresciam a partir do sinóvio contíguo sobre o gancho e corpo anteriores do menisco na direcção da bolsa de implantação. 0 fecho (cura) do intróito e corte de faca ocorreram em oito destes 39 (21%) meniscos neovascularizados. A cura afigurou-se secundária para uma formação de pannus de tecido conjuntivo que foi suficientemente vigorosa para cobrir a bolsa e obliterar o intróito. 0 estreitamento do gancho anterior do menisco acompanhou frequentemente esta vigorosa resposta, como se tivesse havido alguma contracção de cura de tecido de cicatriz.

Os joelhos angiogenina sem neovascularização estavam claramente isentos de qualquer alteração post-operatória e o seu aspecto era o que tinham tido no dia de implantação com nenhuma formação de pannus ou vaso sanguíneo.

A bolsa e o corte de faca não tiveram alteração e nao se encontrou metil celulose.

No grupo de controlo, 20 de 22 (91%) joelhos apresentaram-se exactamente como se tinham apresentado no dia de cirurgia, com nenhuma neovascularização e nenhuma alteração na bolsa ou corte de faca. Em dois joelhos (9%) encontrou-se um pannus de tecido conjuntivo que crescia sobre o gancho anterior em direcção à bolsa e corte de faca. Nao se viam vasos sanguíneos proeminentes e o tecido conjuntivo não atingia a bolsa ou corte de faca. Não obstante, estes casos foram classificados como observações positivas.

A diferença estatística entre os grupos angiogenina e de controlo foi significativa.

No grupo angiogenina, observou-se neovascularização em 27% (três em oito) dos sacrificados antes de quatro

-959.917

REF: USSN 064.215 RWEíMS semanas, em 57% (30 em 53) nos sacrificados entre seis e dez semanas e em 43% (6 em 14) dos sacrificados depois de dez semanas. Uma análise dos tempos de cura está apresentada no Quadro 1.

No grupo de controlo, as duas respostas positivas foram observadas depois de seis semanas e oito semanas.

QUADRO 1

Implantação de Angiogenina e Tempo Decorrido até Colheita

N² de semanas N^e de decorridas

6 8 9

26 coelhos N2 de resultados positivos

8	3	(27%)
14	5	(35%)
23	12	(52%)
16	13	(81%)
8	4	(50%)
6	2	(33%)

Cortes histológicos manchados com bematoxilina e eosina mostraram canais vasculares espaçosos rodeados por um tecido fibroelástico solto que invadia a fibrocartilagem do menisco a partir da periferia. Havia tecido sinovial com vasos proeminentes que aderia à superfície do menisco. Além disso, identificou-se um aspecto histológico invulgar com o que pareciam ser novos condrócitos na entreface entre o tecido invasor e a fibrocartilagem normal.

-1059.917

REF: USSN 064.215 RWF:MS

17. Mt. 1388^'

Resultados semelhantes foram obtidos utilizando copolímero de etileno: acetato de vinilo (60:40) em conjunto com albumina de coelho como o veículo para angiogenina. Optimização do Conteúdo de Albumina de Coelho de Esferas

Elvax

Uma série de grãos que incorporam varias quantidades de albumina de coelho e o copolímero (Elvax 40P) foram; preparados de forma a determinar a relação óptima de copolímero para albumina para libertação da angiogenina incorporada. Albumina de soro de coelho, 50 mg, e a quantidade desejada de angiogenina marcada com / 1/ foram dissolvidas em 1 ml de água e esterilizadas por filtração mediante um filtro de 0,22 micron para um tubo esterilizado. A solução estéril foi depois congelada e liofilizada. A albumina de coelho serve como um veículo de carga e como consequência da libertação de angiogenina, e sendo originária de coelho não poderá produzir qualquer reacção imunológica após a implantação em coelhos. A albumina angiogenina liofilizada sólida foi misturada sob condições estéreis para produzir um pó homogéneo. A uniformidade do tamanho da partícula é importante para a eficácia da preparação. Deste modo, 1 ml de solução à 10% de copolímero em diclorometano (100 mg de copolímero) foi adicionado ao tubo que contém a quantidade desejada de pó, o tubo foi selado e o conteúdo agitado num misturador a uma velocidade elevada durante 10 minutos para produzir uma suspensão uniforme. Esta suspensão foi retirada para uma seringa descartável de 5 ml calibrada com uma agulha de aço de medida 18. A suspensão foi depois expulsa através da agulha, gota a gota para 20 ml de etanol absoluto numa proveta de 50 ml arrefecida até -78² C num banho de gelo seco/etanol. As gotas solidificaram em contacto com o etanol frio na forma de esferas que desceram para o fundo da proveta. Após 10 minutos a proveta foi removida do banho

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REF: USSN 064.215 RWF:!V;S frio e deixou-se aquecer à temperatura ambiente. As gotículas ficaram brancas quando se extraiu o diclorometano lentamente para o etanol. Após uma incubação durante a noite numa solução fresca de etanol, os grãos foram secos ao ar numa cobertura de fluxo laminar. Os grãos (aproximadamente 50) produzidos deste modo possuíam cerca de 1 mm^ de volume. A velocidade de libertação de angiogenina a partir destes grãos foi medida por incubação em solução salina fisiológica a 37? C e mediu-se a libertação da angiogenina £~ ⁷l7 ao longo do tempo. Os grãos contendo a 10% em peso de albumina libertaram uma pequena percentagem de angiogenina no primeira dia e nenhuma quantidade a seguir. Presumivelmente o material libertado estava sobre a superfície dos grãos. Os grãos contendo 40 e 50% em peso de albumina libertaram numa grande percentagem de angiogenina no primeira dia (58 e 77% respectivamente) enquanto os grãos com 30% de albumina apresentaram apenas velocidades de libertação moderadas. A partir desta informação uma composição que consiste em duas partes em peso de copolímero e uma parte em peso de albumina de coelho foi utilizada para preparar grãos contendo entre 10 nanogramas a 10 microgramas de angiogenina por grão.

A eficiência desses grãos foi testada seguindo essencialmente o processo cirúrgico descrito atrás, utilizando em vez de grãos de metil celulose como implante na bolsa meniscal, peças em forma de pirâmide cortadas a partir dos grãos de copolímero:albumina 2:1; uma ou duas partes contendo um total de 100 mg de angiogenina foram colocadas em cada bolsa utilizando fórceps. Os controles não continham angiogenina. Uma sutura simples de prolina 6/0 ou vicrilo 4/0 numa agulha P-3 foi utilizada para fechar a bolsa. Os animais foram recolhidos de 8 em 8 semanas e o menisco examinado para curativo e neovascularização.

Os resultados obtidos encontram-se no quadro 2 a seguir:

-1259.917

REF: USSN 064.215 RWF:MS

17.

Ν5 de coelhos o

>

I -H CD -P P -H fx ra co o

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55.917

REF: USSN 064.215 RWF:MS . 11 >1088

As misturas de albumina com outros polímeros podem também ser utilizadas como veículos para angiogenina em implantes de libertação periódica. Em cada caso, as proporções para a eficácia óptima podem ser determinadas mediante um teste simples.

Claims

!&.- Processo para a preparação de uma composição farmacêutica destinada ao desenvolvimento de cura de tecido normalmente avascular datam menisco depois de ferimento caracterizado por se mistura angiogenina pura numa dose compreendida entre 500 a 900 ng para cada 2 a 4 mm de comprimento de ferimento com um veículo farmacêuticamente aceitável, como por exemplo metil celulose, a partir do qual se liberta rapidamente.
2§.- Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por o ingrediente activo ser um factor angiogénico que pode ser representado por um polipeptídeo de fórmula geral

1 15 <Glu-Asp-Asn-Ser-Arg-Tyr-Thr-His-Phe-Leu-Thr-Gln-His-Tyr-Asp50

Ala-Lys-Pro-Gln-Gly-Arg-Asp-Asp-Arg-Tyr-Cys-Glu-Ser-Ile-Met45

Arg-Arg-Arg-Gly-Leu-Thr-Ser-Pro-Cys-Lys-Asp-Ile-Asn-Thr-Phe60

Ile-His-Gly-Asn-Lys-Arg-Ser-Ile-Lys-Ala-Ile-Cys-Glu-Asn-Lys-1459.917

REF: USSN 064.215 RWF:MS

Asn-Gly-Asn-Pro-His-Arg-Glu-Asn-Leu-Arg-Ile-Ser-Lys-Ser-Ser90

Phe-Gln-Val-Thr-Thr-Cys-Lys-Leu-His-Gly-Gly-Ser-Pro-Trp-Pro105

Pro-Cys-Gln-Tyr-Arg-Ala-Thr-Ala-Gly-Phe-Arg-Asn-Val-Val-Vaí120

Ala-Cys-Glu-Asn-Gly-Leu-Pro-Val-His-Leu-Asp-Gln-Ser-Ile-Phe125

Arg-Arg-Pro-OH.

ou porções angiogénicas ou seus derivados que têm essencialmente a mesma actividade angiogénica que o peptídeo com a formula indicada.

5-.- Processo de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado por se obter uma composição farmacêutica sob a forma de um implante do referido factor com um veículo fisiologicamente aceitável.
4^.- Processo de acordo com a reivindicação 5, caracterizado por a quantidade do referido factor de implante variar de 10 nanogramas a 10 microgramas.
5-.- Processo de acordo com a reivindicação 5, caracterizado por o veículo fisioiogícamente aceitável ser um veículo polimérico sólido.
6§.- Processo de acordo com a reivindicação 5, caracterizado por o veículo fisiologicamente aceitável ser uma mistura de um polímero sólido e albumina.
7^â.- Processo de acordo com a reivindicação 5, caracterizado por o veículo fisiologicamente aceitável ser uma mistura de copolimero de acetato de vinilo-etileno e albumina.