PT86755B

PT86755B - Processo para a preparacao de novos derivados peptidicos com estrutura policiclica azotada

Info

Publication number: PT86755B
Application number: PT86755A
Authority: PT
Inventors: Michel Vincent; Georges Remond; Claude Cudennec
Original assignee: Adir
Priority date: 1987-02-13
Filing date: 1988-02-12
Publication date: 1992-05-29
Also published as: EP0282374A1; DK74988A; GR1000079B; EP0282374B1; US4965250A; JPS63203698A; CA1331672C; JPH0649718B2; OA08715A; ZA88995B; IE60073B1; PT86755A; GR880100079A; AU604090B2; FR2610934A1; IE880382L; NZ223509A; DE3862596D1; DK74988D0; FR2610934B1

Description

PROCESSO PARA A PREPARAÇAO DE NOVOS DERIVADOS PETÍDICOS COM

ESTRUTURA POLICÍCLICA AZOTADA

A presente invenção diz respeito a um processo para a preparaçao de novos tetrapéptidos com estrutura policíclica azotada.

Conhecem-se numerosos tetrapéptidos naturais ou sintéticos e particularmente a tuftsina (Thr - Lys - Pro - Arg) modificadores da reposta biológica. Certos análogos da tuftsina particularmente compostos em que a treonina é substituída por um radical 4-carboxi-2-oxazolidinona foram descritos por Y: STABINSKY e colab. em Int. J. Peptide, Protein Research, 1978; 12; 130 - 138. Contju do, estes derivados só possuem metade aproximadamente da activida^ de da tuftsina e têm uma fraca actividade sobre a respostas anticorpos.

pedido de patente de invenção europeia n^e 0 190 058 descrje ve análogos das tuftsina em a que a prolina é substituída por uma estrutura policíclica azotada. Estes derivados, possuem, em geral, uma actividade superior à da tuftsina.

Os compostos obtidos pelo processo de acordo com a presente invenção são análogos da tuftsina em que a prolina está substitu_í da por uma estrutura policíclica azotada do mesmo tipo que a dos derivados do pedido de patente de invenção europeia n^a 0 190 058 e o resto treonilo está ciclizado. De um modo surpreendente, es

2.

•-Λ tes derivados possuem uma actividade superior a da tuftsina, pelo menos equivalente à dos derivados do pedido de patente de invenção europeia n^a 0 190 058 mas, por outro lado, apresentam a vanta gem suplementar de favorecer muito nitidamente a resposta anticojr pos. Esta caracteristica permite supor que os compostos obtidos pelo processo de acordo com a presente invenção actuam por um mecanismo de acção diferente da dos compostos de técnica anterior, propriedade particularmente interessante no domínio terapêutico em que estes derivados são utilizados.

Mais especificamente, a presente invenção diz respeito a um processo para a preparaçao de derivados tetrapeptídicos de fórmula geral

na qual

R representa

- um átomo de hidrogénio,

- um radical alquilo comportando 1 a 4 átomos de carbono, de cadeia linear ou ramificada,

- um radical arilo tal como fenilo ou heteroarilo tal como tienilo eventualmente substituído por um grupo hidroxi, am_i no, mercapto, metiltio ou alquilo inferior,

- um radical aralquilo inferior tal como benzilo;

R’ representa um	átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo com
portando 1 a 4	átomos de carbono de cadeia linear ou rami-

ficada,

3.

X representa um átomo de oxigénio ou um grupo NH

Y representa um átomo de oxigénio ou de enxofre quando X representa um grupo NH ou Y representa um grupo NH quando X representa um átomo de oxigénio, t representa Ó ou 1,

Lys e Arg representam, respectivauiente, os restos lisilo e arginilo associados em ligações peptídicas,

N-CH

3) representa uma estrutura bicíclica de fórmula geral — N----CH — / \ (CH₂)_m (CH,)_n

Ra-C-(CH₂)_P-C - R_b na qual representa 1 ou zero, e p representam, cada um,

Ra e Rb representam, cada um, um átomo de hidrogénio ou considerados em conjunto, podem formar uma ligaçáo directa quando p=0,

- B representa uma cadeia alquilénica de fórmula geral ((^2¼ na qual q representa um número igual a

2, ou * ou uma estrutura insaturada de fórmula (-CH=CH-)2 quando p=0 e Ra e Rb , considerados em conjunto, formam uma ligação , com a condição de a soma de m, n, p e q representar um número inteiro compreendido entre 3 e 6, ou * a 1,2,3,4—tetrahidro-betacarbolina,

dos seus enantiómeros, epímeros e diastesiosomeros, assim como dos seus sais de adiçao com um acido ou uma base aceitáveis sob o ponto de vista darmacêutico, caracterizado pelo facto de se condensar um derivado de fórmula geral t Boc- N - CH - COOH

II obtido de acordo com o processo descrito no pedido de patente de invenção europeia n^s 0 190 058, na qual t Boc representa um radical butoxiterc.-carbonilo e A, juntamente com os átomos de carbono e de azoto a que esta ligado, tem os significados definidos antes, ou de benzi com o -nitroarginato de metilo |_H-Arg(N02) OCH^ J ^ou de benzi lo Q Η-Arg (NO2) OCH2 CgHç. J para se obter um derivado de fórmula geral t Boc-N-CH-CO-Arg (N0₂)0D

III

na qual A, juntamente com os átomos de carbono e de azoto a que está ligado, tem os significados definidos antes, e D re presenta um radical metilo ou benzilo, que se desprotege, em seguida, com ácio trifluoroacético de acordo com o método descrito por B. GUTTE e K.B. MERRIFIELD (J.Am. Chem.Soc. 1969, 91, 501), para se obter um derivado de fórmula geral

5.

)0D

na qual A, juntamente com os átomos de carbono e azoto a que está ligado, tem os significados definidos antes, e D tem igualmente os significados definidos antes na fórmula geral

III, que se condensa, em seguida, com Nj^-butoxiterc.-carbonil-N^-benziloxi arbonil-lisina ou (t Boc )-Lys-(Z) para se obter um composto de fórmula geral

na qual

A, juntamente com os átomos de carbono e de azoto a que esta ligado tem^- os significados definidos antes na fórmu la geral

D têm os significados definidos antes na fórmula geral

III que se faz reagir com ácido trifluoroacético e se converte em um derivado de formula geral

Lys(Z)-N-CH-CO-Arg (NO )0D

VI na qual A, juntamente com os átomos de carbono e de azoto a que está ligado tem os significados definidos antes na fórm_u la geral I e D têm os significados definidos antes na fórmula geral III, que se condensa com um derivado de fórmula geral

6.

(CH₂)_t-COOH

II ο

VII na qual

R, R'j X, Y e t têm os significados definidos antes, para se obter um derivado de fórmula geral ^R\

R-} (CH₂)_t - CO - Lys (Z) - N - CH - CO - Arg (,m0₂) - OD

Y X VIII c

II na qual A, juntamente com os átomos de carbono e de azoto a que está ligado, R, R', X, Y e t têm os significados definidos antes na fórmula geral I e D têm os significados definji dos antes na fórmula geral III, que se pode, ou:

- desproteger mediante saponificaçao, quando o símbolo D re- presenta um radical CH , e submeter depois a uma hidrogena 3 çao catalítica;

- submeter a uma hidrogenação catalítica quando o símbolo D represente um grupo benzilo, para se obter um derivado de fórmula geral I que se pode eventual^ mente:

7.

- ou salificar com um ácido ou uma base aceitáveis sob o to de vista farmacêutico,

- ou separar nos seus isómeros e depois se necessário, salifji car com um ácido ou uma base aceitáveis sob o ponto de vis. ta farmacêutico.

Os derivados de fórmula geral VIII sao novos e o processo pa. ra a sua preparaçao faz parte da presente invenção assim como os derivados de fórmula geral I.

Actualmente entre os compostos de fórmula geral I prepara — dos pelo processo de acordo com a presente invenção prefere-se aqueles em que a estrutura cíclica N-CH representa:

a indolina, isoindolina, a tetrahidroquinoleína, a tetrahidroisoquinoleína, o perhidroindol, o perhidroisoindol, a perhidroisoquinolêína, a perhidroquinoleína rol, o 2-aza-biciélo

£.2,2,2, J , o perhidrociclopenta £ b J octano , o ' 2-azabicíclo f* 2 pir²’¹’ ] heptano, a

1,2, 3, 4 tetrahidro-betacarbolina.

Entre os ácidos que podem ser adicionados aos compostos de fórmula geral

I para se formar um sal de adiçao, pode-se citar, como exemplo os ácidos clorídrico , sulfúrico, fosfórico, tartarico, málico maleico, fumaríco, oxálico, metano-sulfonico etano-sulfonico canforico cítrico, etc

Como bases para a salificaçao dos compostos de fórmula geral I pode-se utilizar os hidróxidos de sódio, potássio, cálcio ou de alumínio, os carbonatos de metais alcalinos ou alcalino·terrosos ou bases orgânicas como a trietilamina, a benzilamina, a dietanjo lamina, a terc-butilamina, a diciclohexilamina, a arginina, etc..

8.

priedades farmacológicas.

Em particular, encontra-se, nestes compostos, a um nível superior ou, pelo menos comparável, as principais propriedades dos compostos do pedido de patente de invenção europeia n^s 0 190 058.

Particularmente, estes derivados aumentam a actividade das células N.K. Assassinas espontâneas. Administrados a murganhos-fêmeas portadores de um melonoma, inibem de um modo importante o crescimento desse melonoma. Asseguram uma promoção das defesas imunolõgicas nos animais infectados com estirpes bacterianas pat£ genicas e, de um modo inesperado em relaçao à técnica aumentam de um modo importante a resposta em anticorpos aos antigénios de car neiro no murganho, a fagocitose não específica e a hipersensibili dade retardada à oxazolona.

Estas actividades estão ligadas às propriedades imunomoduladoras dos compostos de acordo com a rpesente invenção que encon tram a sua aplicaçao em terapêutica animal ou humana, no tratamen to de cancros, das afecçoes de origem virai, bacteriana ou fúngica, das doenças auto-imunes com o lúpus eritematoso ou a artrite reumatóide e, de um modo mais geral; nas doenças que resultam de uma diminuição ou de uma perturbação das respostas imunolõgicas naturais do organismo animal ou humano.

Além disso, a actividade que possuem os derivados preparados pelo processo de acordo com a presente invenção sobre a resposta anticorpos aos glóbulos vermelhos de carneiro no murganho permitepensar que estes derivados, sendo úteis nas mesmas indicações terapêuticas que os compostos do pedido de patente de invenção eii ropeia n^e 0 159 058, actuam por um modo de acçao ao mesmo tempo

9.

/ ^Χ diferente e complementar do dos compostos da técnica anterior, o f que os torna particularmente interessantes no seu domínio de utilização terapêutico.

A presente invenção tem igualmente por objectivo a preparaçao de composiçoes farmacêuticas que contenham pelo menos um composto de fórmula geral I, ou um dos seus sais de adiçao com um ácido ou uma base aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico, só ou em associação com um ou vários excipientes ou veículos inertes nao tóxicos aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico.

Entre as composiçoes farmacêuticas a presente invenção, pode-se citar mais preparadas de acordo com paricularmente as que sao convenientes para a dministraçao parenteral, per- ou transcutânea, nasal, rectal, perlingual, ocular ou respiratória e, em especial, as composiçoes injectáveis, os aerossóis, as gotas oculares ou na sais, os comprimidos, os comprimidos sublinguais, os trociscos as pastilhas, os supositorios, os cremes, as pomadas, os geles dér micos, ciente posologia a via de útil varia de administraçao acordo com a idade e o , a natureza da indução e dos tratamentos eventualmente associados tre 1 micrograma e 1 grama por dose ou por peso do paterapêutica e está compreendida aplicaçao.

en

Os exemplos seguintes_; ilustram a presente invenção e não a limitam de modo nenhum.

Os produtos iniciais sào conhecidos da literatura.

Os pontos de fusão indicados sao medidos de acordo com a técnica de micro - Kofler. Os espectros de ressonância magnética

10.

nuclear de 13^ são registados utilizando o TMS como referencia :

interna, os espectros de 1^ RMN sáo geralmente registados utilizando clorofórmio deuterado como dissolvente. Os espectros de massa sao realizados de acordo com a técnica F.A.B.

Exemplo 1

Ciclo(S)Thr-(S)Lys-(S)ABO-(S)Arg-OH

Ciclo (S)Thr-OH = (trans L) 4-carboxi-5-metil-2-oxo-l, 3-oxazolid_i na ou (S) Ciclo-treonina descrita por Y.STABINSKI e colab. Int.

| J. Peptide Prot. Res. 1978, 12, 130-138.

Estádio A t Boc(S)ABO-OH ou ácido (butoxi-ter-2-carbonil-2-aza-biciclo [2.2.2. J octano )-3-carboxílico-(3S).

Preparado de acordo com o método descrito no pedido de patente de invenção europeia n^s 0 190 058 (exemplo n^a 8 - estádio A).

I

Estádio B t B_oc (S)AB0-(S)Arg(N0₂)-0B zl

Utilizando o método descrito por W.Kó'nig e R. GEIGER (Ber. 1970, 103, 788), combina-se 0,05 mole de t Boc(S)AB0-0H obtido no estádio anteior com 0,05 mole de (S)N^-nitroarginato de benzilo ou (S)H-Arg(N0₂)-0Bzl utilizando dimetilformamida como dissoJL vente.

11.

Obtém-se rendimento de deste modo o t Boc(S)ABO-(S)Arg (NO₂)-OBzl com um 98% sob forma de um óelo que se utiliza tal e qual

no estádio seguinte..

Características espectrais em I.V. (solução CHCl^)

VQ NH (amida) J : 3 400 cm y(CO) : 1 700 cm (largo)

Estádio C

I (S)ABO-(S)Arg(NO₂)-OBzl

Utilizando o processo de desprotecçáo com ácido trifluoroacjé tico em cloreto de metileno anidro descrito por B. GUTTE e R.B. MERRIFIELD (J. Am. Chem. Soc. 1969, 91, 501), obtém-se quantitativamente, a partir de 0,0475 mole de t Boc(S)AB0-(S)Arg(N0₂)-OBzl preparado no estádio anterior, o >(S)AB0-(S)Arg (N0₂)-0Bzl sob a forma de trifluoroacetato de (TFA) , cuja pureza e verifica, da meidante cromatografia em camada fina (dissolvente:CH₂Cl₂/MeOH ) a 9:1; RF : 0,19).

Estádio D t Bod(S)lys(Z)-(S)-AB0-(S)-Arg(N0₂)-0Bzl

Substituindo, no estádio B anterior, o t Boc(S)AB0-0H pela N^-butoxi terc.-carbonil-N^j-benziloxicarbonil (S) lisina {2 ou t oc(S)Lys(Z)-OH; 0,0475 mole J e o (S)H-Arg (N02)-0Bzl pelo (S)ABO-(S)Arg(N0₂)-0Bzl, TFA (0,0475 mole preparado no estádio an

12.

terior,obtém-se, do mesmo modo, otBoc(S)Lys(Z)-(S)ABO-(S)Arg (NO₂)-OBzl, com um rendimento de 68%.

Principais

características RMN (DMSOd^ /TMS)

em ppm

Lisina	: 50,2
C^ABO	: 59,6
C^Arg	: 51,8-

)

Estádio E (S)Lys(Z)-(S)AB0-(S)Arg(N0₂)-0Bzl

Desprotegendo o t Boc(S)Lys(Z)-(S)AB0-(S)Arg(N0₂)-0Bzl com ácido trifluoroacético, como se indica no estádio C anterior, obtém-se quantitativamente o (S)Lys(Z)-(S)ABO-(S)Arg (N0₂)-0Bzl sob a forma de trifluoroacetato, cuja pureza é verificada mediante cromatografia em camada fina (dissolvente diclorometano/metanol a 95:5).

Estádio F

Ciclo (S)Thr-(S)Lys(Z)ABO-(S)-Arg(NO₂)-OBzl

Combinando, de acordo com a técnica descrita no estádio B an terior, o (S)Lys-(Z)-(S)-ABO-(S)Arg-(NC>₂)-0Bzl, com a (S) ciclo-Treonina Qou ciclo (S)Thr-OHj, obtém-se, do mesmo modo, o ci cio (S) Thr-(S)Lys(Z)-(S)ABO-(S)Arg(NO₂)-OBzl, que é purificado mediante cromatografia sobre sílica (60-230 malhas) utilizando,

13.

como eluente, diclorometano / metanol a 96:4.

Principais característica

í 3

RMN(DMS0d₆/TMS) em ppm

Ciclo Thr	: 60,0
Cç£ Lys	: 49,0
ABO	: 59,7
Arg	: 51,5

Estádio G

Ciclo (S)Thr-(S)Lys-(S)ABO-(S)-Arg-OH

Submete-se 0,0012 mole de Ciclo (S)Thr-(S)Lys(Z)-(S)ABO-(S) Arg(N0£)-0Bzl, obtido no estádio anterior, a uma hidrogenação catalítica em 80 ml de ácido acético, sob uma pressão de hidrogénio de 3 bars, na presença de 400 mg de carvao paladiado a 10%. Após evaporação do dissolvente sob pressão reduzida, retoma-se o resíduo amorfo com 5 ml de água destilada e separa-se mediante mi_ crofiltraçao eliofiliza-se.

Obtém-se deste modo o monoacetato de Ciclo(S)Thr-(S)Lys-(S) ABO-(S)Arg-OH (rendimento 90%).

Características espectrais em

Infra-vermelho

V(CO): 1750 cnT¹

Espectrometrià de massa:

Espectro FAB + K (7 K ) v v ião molecular protonado Lm + h J a M/z : 567 f

14.

^(C25 ^H42 ^N ₈ 0 _? 5 PM : 556).

Exemplo 2

Ciclo (S)Thr-(S)Lys-(S)THIQ-(S)Arg - OH

Estádio A tBoc(S)THIQ-OH ou ácido (2-butoxi-terc-carbonil-l,2,3j4-tet rahidro-isoquinoleí na) —3-car boxi lico-(3S).

Preparado de acordo com o processo descrito no exemplo 1, es tádio.A do pedido de patente de invenção europeia n² 0 190 058 substituindo o ácido perhidroindol-2-carboxílico-¹· ( 2S , 3aS , 7aS ) pelo ácido 1,2,3,4 -tetrahidro-isoquinoleína-3-carboxílico-(3S) ou (S)THIQ-OH.

Estádio B t Boc(S)THIQ-(S)Arg(N0₂)-0CH₃

Utilizando o (S)N -Nitroarginato de metilo ou (S)H-Arg(N0₉)Hz z,

-OCH^ e o t Boc(S)THIQ-OH obtido no estádio anterior de acordo com o processo descrito no exemplo 1, estádio B, obtem-se o t Boc(S)THIQ-(S)Arg(N0₂)-0CH₃ sob a forma de um óleo cuja pureza é verificada mediante cromatografia em camada fina (dissolvente : acetato de etilo, R? : 0,2).

Características espectrais em I.V.:

V(CO) : 1740 cm

15.

Estádio C (S)THIQ-(S)-Arg(N0₉)-0CH·

Substituindo no estádio C do exemplo 1 o t Boc (S)AB0-(S)Arg (N0₂)-0Bzl pelo t Boc(S)THIQ-(S)Arg-(N0₂)“OCH₃ obitdo no estádio anterior, obtém-se do mesmo modo, o (S)THIQ-(S)Arg(N0₂)-0CH₃ sob a forma de trifluoroacetato.

Características espectrais em RMN (¼)

1,7	PP®	: 4H	(CH ) 2
3,2	PP®	•	4H	(ch₂n, ch₂-0 )
3,6	PP®	•	3H	(cooch₃)
4,3	ppm	*	4H	(N-CH-CO, N-CH₂-0)
7,3	PP®	•	4H	(fenilo)
7,4	a 10,0 ppm	• •	Protões permutáveis.

Estádio D t Boc(S)Lys(Z)-(S)lHIQ-(S)Arg(N0₂)-0CH₃

Substituindo no estádio D do exemplo 1 o (S)ABO-(S)Arg (N0₂)) -OBzl, TFA pelo (S)THIQ-(S)Arg(NO₂)-OCH₃, TFA obtido no estádio anterior, obtém-se o t Boe(S)Lys (Z)-(S)THIQ-(S)Arg(NO^-OCH^ , puri. ficado meidante cromatografia sobre gel de sílica (eluente: aceta. to de etilo, R : 0,16).

f

Rendimento: 66%.

Estádio E (S)Lys(Z)-(S)THIQ-(S)Arg(N0₂)-0CH₃

16.

Utilizando ό processo descrito no exemplo 1, estádio C,

-se a partir do tBoc(S)Lys(Z)-(S)THIQ-(S)Arg(N0g)-0CH₃, 0(S)Lys(Z)~ -THIQ-(S)Arg-(N0₂)-0CH₃ sob a forma de trifluoroacetato.

Cromatografia sobre camada fina (dissolvente : CI^C^/MeOH a 90:10; R :0,13)

Estádio F

Ciclo (S)Thr-(S)Lys(Z)-(S)THIQ-(S)Arg(N0₂)-0CH₃

Substituindo no estádio F do exemplo 1 o (S)Lys(Z)ABO-(S)Arg (N0₂)-0Bzl, TFA pelo (S)Lys-(Z)-(S)THIQ-(S)Arg(N0₂)-0CH3, TFA obtém-se o Ciclo-(S)Lys (S)THIQ-(S)Arg(N02)-0CH₃ sob a forma de um óleo espesso utilizado tal e qual no estádio seguinte.

Estádio G

Ciclo (S)Thr-(S)Lys(Z)THIQ-(S)Arg(NO₂)-OH

Dissolve-se 0,001 mole de Ciclo(S)Thr-(S)Lys(Z)-(S)THIQ-(S)Arg(NO₂)-OCH₃ obtido no estádio anterior em 20 ml de metanol, adiciona-se 10 ml de hidróxido de sódio 0,IN e mantém-se durante 24 horas à temperatura ambiente. Concentra-se sob pressão reduzida, retoma-se com 30 ml de água e neutraliza-se por adiçao de 10 ml de ácido clorídrico 0,lN, Filtra-se o precipitado , lava-se com água e depois com cloreto de metileno e seca-se.

Rendimento: 78%

Características espectrais:

Espectrometria de massa:

FAB⁺	m/z	FAB	m/z
[> + K =	806	Qfí-2H+Na =	788
LM-H+2NaJ⁺ =	812	C M-H 2“	766
£ M+Na J ⁺	790	[m-h-h₂o =	748
[M₊H	768	[m-h-co₂2 =	722
		[M-H-H NN0₂ 2=	704

Estádio Η

Ciclo (S)Thr-(S)Lys-(S)THIQ-(S)Arg-OH ►

Dissolve-se 0,0005 mole de Ciclo(S)Thr-(S)Lys(Z)-(S)THIQ-(S) Arg(N0₂)-0H, obtido no estádio anterior, em 50 ml de ácido acético. Submete-se a uma hidrogenação catalítica sob uma pressão de hidrogenio de 3Kg/cm' na presença de 200 mg de carvao paladiado a 10%. Após evaporação do dissolvente sob pressão reduzidaj retoma-se o resíduo com 5 ml de água destilada, separa-se mediante microfiltra. çao e liofiliza-se. Obtém-se deste modo o mono-acetato de Ciclo (S)Thr-(S)Lys-(S)THIQ-(S)Arg-OH.

Rendimento: 98%.

Características espectrais:

Espectrometria de massa:

FAB⁺	m/z	FAB	m/z
£m_i+h2⁺ :	589	[Mj - H]~ :	587
L M₁₊Na 2,⁺	611	£Mj-H-COj ] :	543

Exemplo 3:

Ciclo (S)Thr-(‘S)Lys-PHII -(S)Arg-OH

18.

Substituindo no exemplo 2, estádio A, o ácido 1,2,3,4-tetra» hidro-isoquinoleína-3-carboxílico-(3S) ou (S)THIQ-OH por ácido perhidroisoindol-l-carboxílico ou PHII-OH, obtém-se sucessivamente :

tBoc PHII - OH tBoc :PHII -(S)Arg(N0₂)-0CH₃

PHII-(S)Arg(NO₂)-OCH₃, TFA tBoc- (S)Lys(Z)-PHII-(S)Arg(NO₂)-OCH₃(S)Lys(Z)-PHII-(S)Arg(NO₂)-OCH₃, TFA Ciclo(S)Thr-(S)Lys(Z)-PHII-(S)Arg(N0₂)-0CH₃Ciclo(S)Thr-(S)Lys(Z)-PHII-(S)Arg(N0₂)-OH

Ciclo(S)Thr-(S)Lys-PHII-(S)Arg -OH liofilizado sob a forma de monoacetato.

Características espectrais:

Espectrometria de massa:

FAB⁺	m/z	FAB m/z
C Ml ₊ H ] ⁺	: 581	Q Μ -- H : 579
CO·]*	: 124	[.M₁-He-C0₂ : 535
Exemplo 4

Ciclo (2S, 3R)AHPA - (S)Lys-(S)ABO-(S)Arg-OH

Prepara-se o ciclo (2S, 3R)AHPA-0H ou ácido 2-oxo-4-benzil-1,3- oxazolidinil-5-carboxílico-(4R, 5S) descrito por H. UMEZAWA; Μ. OHNO, patente de invenção europeia n^e 0 156 279, de acordo com o processo descrito por Y, STABINSKY e colab. (”Int. J. Peptide Prot. Res, 1978, 12, 130-138) a partir do Z (2S, 3R)AHPA-OH ou

ácido 2-hidroxi-3-benziloxicarbonilamino-4-fenil-(2S

3R)-butanoji co descrito por T. TAKITA e colab. J.Med. Chem, 1977, 20, 510-515.

Substituindo no exemplo 1, estádio F o Giclo(S)Thr-0H pelo

Giclo (2S, 3R)AHPA-0H obtém-se , sucessivamente:

- Ciclo(2S, 3R)AHPA-(S)Lys(Z)-(S)AB0-(S)Arg(N0₂)-0Bzl

- Ciclo (2S, 3R)AHPA-(S)Lys-(S)AB0-(S)Arg-0H liofilizado sob a forma de monoacetato.

Características espectrais:

em I.V. : ò [c =0 (oxazolidinona) : 1760 cm em espectrometria de massa : espectro FAB** ião molecular protonado £ Μ + H J⁺ a M/Z : 643

Exemplo 5

Q (4R) 4-metil-2-oxo-l,3-oxazolidinil-5-carbonil J-(S)Lys-(S)ABO-(S)Arg-OH

Substituindo no exmeplo 4 o Z (2S, 3R)AHPA-0H pelo ácido 2-hidroxi-3-benziloxicarbonilamino-(3R)-butanóico descrito por T. TAKITA e colab. (J. Med, Chem”, 1977, 20 , 510-515), obtém-se sucessivamente.

- Ácido 2-oxo-4-metil-l,3-oxazolidinil-5-carboxílico-(4R) descrito por Y: SHIMOHIGASHI e colab., Buli. Chem. Soc. Jpm., 1979, 52, (3), 949-950.

- C (4R)-4-Metil-2-oxo-l,3-oxazolidinil-3-carbonil J-(S)Lys20.

- C (4R)-4-Metil-2-oxo-l,3-oxazolidinil-5-carbonil J-(S)Lys-

-(Z)-(S)AB0-(S)Arg(N0₂)-0Bzl

-(S)AB0-(S)Arg-0H.

liofilizado sob a forma de monoacetato.

Características espectrais:

em I.V. :

[) &0 (oxazolidinona) J : 1750 cm s

em espectrometria de massa m/z : espectro FAB⁺

Qm + HJ ⁺	: 567
Q M + Na J ⁺	: 589
Qí-H+2Na J ⁺	: 611

Exemplo 6

Ciclo GABOB-(S)Lys-(S)ABO-(S)Arg-OH

Estádio A:

N-Z GABOB —-OH ou ácido 3-hidroxi-4-benziloxicarbonilamino-butanóico.

Preparado de acordo com o método de BERGMANN e ZERVAS (Ber.

1932, 65, 1192) a partir do ácido 3-hidroxi-4-amino-butanóico (GABOB-OH).

Estádio B:

Ciclo GABOB-OH ou 5-carboximetil-2-oxo-l,3-oxazolidina.

21.

Utilizando o processo descrito por Y. STABINSKY e colab.

(Int. J. Peptide Prot. Res.”, 1978, 12, 130-138)^ obtém-se o ciclo GABOB-OH a partir do NZ GABOB-OH preparado no estádio anterior.

Estádio C:

Ciclo GABOB-(S)-Lys-(S)ABO-(S)Arg-OH

Substituindo no exemplo 1, estádio F, a Ciclo(S)Thr pelo ciclo GABOB-OH obtêm-se, sucessivamente:

- Ciclo GAB0B-(S)Lys(Z)-(S)AB0-(S)Arg(N0₂)-0Bzl

- Ciclo GABOB-(S)Lys-(S)ABO-(S)Arg-OH liofilizado sob a forma de monoacetato.

EXEMPLO 7

Ciclo Stat-(S)Lys-(S)ABO-(S)Arg-OH

Substituindo no exemplo 6, estádio A, o ácido 3-hidroxi-4-amino-butanóico ou GABOB-OH pelo ácido 3-hidroxi-4-amino-6-metil-6-heptanóico ou estatina (Stat-OH), obtem-se, sucessivameii te:

- Estádio A : N-Z-Stat-OH ou ácido 3-hidroxi-4-benziloxi- carbohilàmino-6-metil-heptanóico.

22.

X *ϋ

- Estádio Β : Ciclo Stat-OH ou 2-oxo-4-isobutil-5-carboxime- til-l,3-oxazolidina.

- Estádio C : Ciclo Stat-(S)-Lys-(S)ABO-(S)Arg-OH liofilizado sob a forma de monoacetato.

EXEMPLO 8:

TZC-(S)Lys-(S)ABO-(S)Arg-OH

Substituindo no exemplo lj estádio F a (S) Ciclo-treomina p_e lo ácido (+-tiazolidinona)~4-carboxílico (TZC-OH), obtém-se suce^ sivamente:

TZC-(S)Lys(Z)-(S)ABO-(S)Arg(NO₂)-OBzl

- TZC-(S)Lys(S)ABO-(S)Arg-OH liofilizado sob a forma de monoacetato.

Caracteristicas espectrais:

Espectrometria de massa m/z

espectro	FAB⁺ :	M+H	: 569
espectro	FAB :	M+H	: 567 M-H-H₂S : 533

Exemplo 9:

Ciclo (S)Thr-(S)Lys-(S)PHI-(S)Arg-OH

Substituindo no exemplo 1, estádio B, o t Boc (S)ABO-OH pelo

23.

ácido (1-butoxi terc.-carbonil-perhidroindol)-2-carboxílico(2S, 3aS> 7aS) ou t Boc (S) PHI-OH preparado de acordo com o processo descri^ to no pedido de patente de invenção europeia n^e 0 190 058 (exem pio 1 - estádio A) e procedendo de acordo com a técnica descrita no exemplo 1 da presente invenção, do estádio B ao estádio G, obtém-se o derivado:

Ciclo(S)Thr-(S)Lys-(S)PHI-(S)Arg-OH liofilizado sob a forma de monoacetato.

EXEMPLO 10:

DMT-(S)Lys-(S)ABO-(S)Arg-OH

Substituindo no exemplo 1, estádio F, a ciclotreonina pela

5,5-dimetil-4-carboxi-2-tiazolidinona ou DMT-OH preparada de acordo com a técnica descrita por F.P. DOYLE, D.O. HOLLAND, P. MAMALIS e A. NORMAN (J.C.S.” 1958, 4605 - 4614),obtém-se, sucessivamente:

DMT-(S)Lys(Z)-(S)AB0-(S)Arg(N0₂)-0Bzl

DMT-(S)Lys(S)ABO-(S)Arg-OH.

liofilizado sob a forma de monoacetato

EXEMPLOS 11 a 13

De acordo com o processo descrito no exmplo 1, estádio B, mas substituindo o ácido (2-butoxl terc.-carbonil-2-aza-bieiclo £2.2. 2. 2 “ octano)-3-carboxílico-(3S) ou t Boc(S)ABO-OH pelo ácido (2-butoxi’terc.-carbonil-isoindolino)-l-carboxílico-(IS) ou t Boc (S)I.S.I.-OH ou pelo ácido (2-butoxi terc.-carbonil-2-aza-biciclo £2.2.1. J-heptano)-3-carboxílico ou t Boc ABH-OH ou jje

24.

lo ácido (2-butoxi terc.-carbonil-1,2,3,4-tetrahidro-betacarbolino)-3-carboxílico-(3S) ou ,t Boc (S)THC-OH, obtém-se os seguintes compostos:

Exemplo 11: Ciclo(S)Thr-(S)Lys-(S)ISI-(S)Arg-OH liofilizado sob a forma de monoacetato.

Exemplo 12: Ciclo(S)Thr-(S)Lys-ABH-(S)Arg-OH liofilizado sob a forma de monoacetato.

Exemplo 13: Ciclo (S)Thr-(S)Lys-(S)THC-(S)Arg-OH liofilizado sob a forma de monoacetato.

EXEMPLOS 14 e 15:

De acordo com o processo descrito no exemplo 9, e substituLn do o t Boc(S)PHI-OH pelo ácido (2-butoxi terc.-carbonil-perhidroisoquinoleino)-3-carboxílico ou t Boc-PHIQ-OH ou pelo ácido (1-butoxi terc.-carbonil-perhidrociclopenta Dl pirrol)-2-carboxílico ou t Boc-PCP-OH, obtém-se os seguintes compostos:

Exemplo 14: Ciclo (S)Thr-(S)Lys-PHIQ-(S)Arg-OH liofilizado sob a forma de monoacetato.

Exemplo 15; Ciclo(S)Thr-(S)Lys-PCP-(S)Arg-OH liofilizado sob a forma de monoacetato.

25.

EXEMPLOS 16, 17 e 18:

( ’

Substituindo no exemplo 4, o Ciclo(2S, 3R) AHPA-OH por:

- ácido 2-oxo-4-fenil-1,3-oxazolidina-5-carboxílico ou PH ciclo AHPA-OH

- ácido 2-oxo-4-(2-tienil)-l,3-oxazolidina-5-carboxílico ou

Thi ciclo AHPA-OH obtém-se os seguintes compostos:

Exemplo 16: PH ciclo AHPA-(S)Lys-(S)ABO-(S)Arg-OH liofilizado sob a forma de monoacetato.

Exemplo 17: Thi Ciclo AHPA-(S)Lys-(S)ABO-(S)Arg-OH liofilizado sob a forma de monoacetato.

Exemplo 18: OHPh Ciclo AHPA-(S)Lys-(S)ABO-(S)Arg-OH liofilizado sob a forma de monoacetato.

EXEMPLO19: Promoção da actividade N.K.

Os compostos de acordo com a presente invenção foram ensaiados para avaliaçao do seu poder promotor da actividade Assassina espontânea” (Natural Killer). As células dotadas deste poder constituem a primeira linha de defesa do organismo face a invasao séptica, virai ou tumoral.

Para apreciar o seu poder estimulante, os compostos de acordo

26, ρ

com a presente invenção foram estudados de acordo com a técncia de

REYNOLDS e colab. [J.Immunol 127, 282, (1981) J.

Os compostos de acordo com a presente invenção sao injectados por via intravenosa na dose compreendida entre 20 e 50 ^cg/Kg em murganhos de estirpe B6D2F1.

Três dias após o tratamento, os animais sao sacrificados, o fígado é colhido e dissociado nas suas células constituintes que são semeadas em cultura na presença de células tumorais YAC-1 prje viamente mascadas com crómio radioactivo.

I

No final da incubaçao, o poder destruidor dos compostos de acordo com a rpesente invenção é medido pela quantidade de crómio libertada.

título de exemplo, o composto do exemplo 1, na dose de 25 yíCg/Kg crómio , induz de 15%, pedido em relaçao à testemunha, um aumento da libertação do idêntico ao provocado de invenção europeia n^s 0 190 dose de 40 apenas provoca uma pelo

058, composto enquanto libertação de do exemplo 8 do a tuftsina, na

10%.

EXEMPLO 20:

Inibição do crescimento do melanoma B16.

Os melanomas sao tumores cancerosos sensíveis à reacçao do sistema imunológico do doente. Constituem portanto um modelo de escolha para apreciar qualquer estimulação da defesa antitumoral.

Por exemplo, o composto de acordo com o exemplo 9, mostrou27 .

-se capaz de retardar de 45% o crescimento do melanoma B16 do murganho, quando o produto á administrado à razao de 20 vezes por semana, por via intraperitoneal. Nas mesmas condiçoes a percentagem obtida com o composto do exemplo 1 de acordo com o pq dido de patente de invenção europeia n^s 0 190 058 é apenas de 40% e a tuftsina mostrou-se incapaz de favorecer o retardamento do crescimento do tumor enxertado.

EXEMPLO 21:

Aumento da resistência dos animais a infecçao

Certas estirpes hacterianas patogénicas sao capazes de matar o hospedeiro sao no qual são inoculadas. É o caso por exemplo, de Klebsiella pneumoniae , agente responsável pela pneumonia £Parent, M; e colab. Proc. Natl, Acad. Sei. USA”, 75, n⁹ 7, 3395 (1978) J.

composto do exemplo 1, de modo idêntico ao composto do exem pio 8 do pedido de patente de invenção europeia n^s 0 190 058', é capaz, na dose de 60 por animal, de proteger da morte por in-

fecçao todos os murganhos swiss, fêmeas, de 20 a 25 g, em que se inoculou a estirpe ”Klebsiella peneumoniae” 7823 por via intraperitoneal, quando administrado 48 horas antes da infecçao. Nas mesmas condições, a tuftsina nao é capaz de salvar mais de 20% dos animais.

Exemplo 22;

Medida da resposta anticorpos.

Os compostos de acordo com a presente invenção foram ensaiados pelo seu poder de aumentar a resposta anticorpos aos glóbulos vermelhos de carneiro no murganho.

A resposta em anticorpors é medida in vitro de acordo com a técnica descrita por JERNE Science, 140, 405 (1963)

Murganhos C57 BI/6 machos, com um peso médio de 23 g, foram tratados por via intravenosa com os compostos de acordo com a pre.

sente invenção 48 horas antes da inoculação intraperitoneal de glóbulos vermelhos de carneiro. Cinco dias mais tarde, a produção de anticorpos específicos dirigidos contra os glóbulos vermelhos de carneiro é detectada em uma suspensão de células de fígado des.

tes animais.

A título de exemplo, o composto de acordo com o exmeplo 1, mostrou-se ser capaz, quando administrado na dose de mg/kg, de aumentar de 50% a resposta em anticorpos aos glóbulos vermelhos de carneiro no murganho.

A título de comparaçao, o derivado de Y.STABINSKI e colab., tuftsina apenas foi capaz, nas mesmas coii dições,

35%. 0 de aumentar esta resposta em anticorpos de um valor de derivado correspondente do pedido de patente de inven çao europeia n^e 0 190 058, exemplo 8, revelou-se inactivo neste ensaio.

EXEMPLO 23:

invenção foram ensaiaEnsaio de fagocitose nao específica.

Os compostos de acordo com a presente dos para avaliar o seu poder de aumentar a fagocitose nao especíEste ensaio consiste em avaliar; após tratamento em citome tria de fluxo, a capacidade dos polinúcleares presentes no sangue total de cao para fagocitar esferas de latex de 1,8 de diâmetro por um lado na ausência (testemunha), por outro lado na pre sença de um composto de acordo com a presente invenção.

A título de exemplo, o composto de acordo com o exemplo mostrou-se capaz de aumentar de 19% em relaçao à testemunha, a ca pacidade de fagocitose nao específica dos polinúcleares enquanto a tuftsina, nas mesmas condiçoes, nao dá resposta significativa.

EXEMPLO 24:

Hipersensibilidade retardada a oxazolona.

Este ensaio consiste em sensibilizar um animal com oxazolona, sete dias mais tarde efectua-se um ensaio de hipersensibilidade · retardada por um lado na ausência (testmeunha), por outra lado após administraçao de um composto de acordo com a presente infecçao , e efectua-se nos dois casos a pesagem da orelha do animal sacrificado. A orelha é a sede de uma reacçao inflamatória e o seu peso é função da intensidade desta reacçao.

Verifica-se que, após um tratamento com o composto do exem30.

pio 1, o aumento do peso da orelha dos animais em experiência é superior a 11% ao lote dos animais testemunhas

A tuftsina não dá resposta significativa neste ensaio.

EXEMPLO 25; Composiçoes farmacêuticas.

Soluto injectável

Ciclo(S)Thr-(S)Lys-(S)PHI-(S)Arg-OH: água para preparaçao injectável;

0,050 g o 3 cm

Creme dérmico;

Ciclo (S)Thr -(S)Lys-(S)AB0-(S)Arg-0H polipropilenoglicol gvaselina branca g

álcool a 95° g

água purificada

q.b.p. 100 g

Claims

Reivindicaçoes

1.- Processo para a preparação de compostos de fórmula geral

R'

R (CH₂) _t-CO-Lys-N-CH-CO-Arg-OH

Y X S/ I ã

na qual

R representa

- um átomo de hidrogénio,

- um radical alquilo com 1 a 4 átomos de carbono, de cadeia linear ou ramificada,

- um radical arilo tal como fenilo ou heteroarilo tal como tienilo eventualmente substituído por um grupo hidroxi, amino, mercapto, metiltio ou alquilo inferior,

- um radical aralquilo inferior tal como benzilo,

R' representa um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo com 1 a 4 átomos de carbono de cadeia linear ou rami-32- ρ = 0 e R^ e , considerados em conjunto, formam uma ligação, com a condição de a soma de m, n, p e q representar um número inteiro compreendido entre 3 e 6, ou * a 1,2,3,4-tetrahidro-betacarbolina, dos seus enantiómeros, epímeros e diasterioisómeros, assim como dos seus sais de adição de ácido com um ácido ou uma base aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico, caracterizado pelo facto de se condensar um derivado de fórmula geral tBoc-N-CH-COOH

II na qual tBoc representa um radical butoxi terc.-carbonilo e A, conjuntamente com os átomos de carbono e de azoto a que está ligado, tem os significados definidos antes, para a fórmula geral I, com N^- nitroarginato de metilo / H-Arg(NOg)OCHg 7 ou de benzilo /“ H-Arg(NOg)OCHgCgHg J para se obter um derivado de fórmula geral tBoc

CO -Arg(NOg)OD

III na qual A, conjuntamente com os átomos de carbono e de azoto a que está ligado, tem os significados definidos antes para a fórmula geral I e D representa um radical metilo ou benzilo, que se desprotege em seguida com ácido trifluoroacêtico para se obter um derivado de fórmula geral

IV na qual A, conjuntamente com os átomos de azoto a que está ligado, tem os significados definidos antes para a fórmula geral I e

D tem os significados definidos antes para a fórmula geral III, que se condensa em seguida com a

N oó -butoxi-terc.-carbonil-N

-benziloxicarbonil-lisina ou (tBoc)-Lys-(Z) para se obter um composto de fórmula geral tBocLys(Z)-N-CH-CO-Arg(N0„)OD na qual A, conjuntamente com os ãtomos de azoto e de carbono a que está ligado, tem os significados definidos antes para a fórmula geral I e D tem os significados de finidos antes para a fórmula geral III, que se faz reagir com ácido trifluoroacético para se obter um derivado de fórmula geral

VI os ãtomos de carbono e de azoto a que está ligado, tem os significados definidos antes para a fórmula geral I e D tem os significados definidos antes para a fórmula geral III, que se condensa com um derivado de fórmula geral’ (CH₂)_t~COOH

VII na qual R, R', X, Y e t têm os significados definidos antes, para se obter um derivado de fórmula geral

R'

R... (CH₂) _t-CO-Lys (

Y X

II na qual A, conjuntamente com os átomos azoto a que está ligado, R, R¹, X, Y e ficados definidos antes para a fórmula • os significados definidos antes para a que se pode:

- ou desproteger mediante saponificação, quando o símbolo

i) -N-CH-CO- Arg (NOà ) -0D

V ²

A

VIII de carbono e de t têm os signigeral I e D tem fórmula geral III,

D representa um grupo metilo, e submeter depois a uma hidrogenação catalítica,

- ou submeter a uma hidrogenação catalítica quando o símbolo D representa um grupo benzilo, para se obter um derivado de fórmula geral I que, eventualmente, se pode:

- ou salificar com um ácido ou uma base aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico,

- ou separar nos seus isómeros e, depois, se necessário, salificar com um ácido ou uma base aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico.
2.- Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de derivados de fórmula geral I, na qual a estrutura cíclica de fórmula geral -N - CH- representa a in dolina, a isoindolina, a tetrahidroquinoleína, a tetrahidroisoqui noleína, o perhidroindo1, o perhidroisoindol, a perhidroquinoleína, a perhidroisoquinoleína, o perhidrociclopenta-/ b .7-pirrol, o 2-azo-biciclo-/ 2.2.2. _/-octano, o 2-azo-biciclo-/^-2.2.1. J-heptano, a 1,2,3,4-tetrahidro-betacarbolina, dos seus enantiómeros, epímeros e diasderioisómeros, assim como dos seus sais de adição com um ácido ou uma base aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
3.- Processo de acordo com uma qualquer das reivindicações 1 ou 2, para a preparação de derivados de fórmula geral I, na qual a estrutura cíclica de fórmula geral -N-CH- representa o perhidroindol ou o azabiciclo-/*2.2.2._7-octano, dos seus enantiõmeros, epímeros e diasterioisómeros, assim como dos seus sais de adição com um ácido ou uma base aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.

-36ÍSfcfcfB- / *
4. - Processo de acordo com uma qualquer das reivindicações 1 ou 2, para a preparação do ciclo (S)-Thr-(S)-Lys-(S)ABO-(S)Arg-OH e dos seus sais de adição com um ácido ou uma base aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
5. - Processo de acordo com uma qualquer das reivindicações 1 ou 2, para a preparação do ciclo (S)1hr-(S)Lys-(S)PHI-(S)Arg-OH e dos seus sais de adição com um ácido ou uma base aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
6. - Processo de acordo com uma qualquer das reivindicações 1 ou 2, para a preparação do ciclo (S)1hr-(S)-Lys-(S)THIQ-(S)Arg<H e dos seus sais de adição com um ácido ou uma base aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
7. - Processo de acordo com uma qualquer das reivindica- ções 1 ou 2, para a preparação do ciclo (S)Ihr-(S)Lys-PHIl-(S)-Arg-OH, dos seus enantiõmeros e diasterioisõmeros, assim como dos seus sais de adição com um ácido ou uma base aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.

ficada,

X representa um átomos de oxigénio ou um grupo -NH-,

Y representa um átomo de oxigénio ou de enxofre quando

X representa um grupo -NH- ou Y representa um grupo -NH- quando X representa um átomo de oxigénio, t representa 0 ou 1,

Lys e Arg representam, respectivamente, os restos lisilo e arginilo associados em ligações peptídicas,

N - CH

A representa * uma estrutura bicíclica de fórmula geral

- n -----CH — (CH,)

I n na qual

- m representa 1 ou zero,

- n e p representam, cada um, 1 ou 2,

- R e R, representam, cada um, um átomo de hidrogénio

a. o ou, considerados conjuntamente, podem formar uma ligação directa quando p = 0,

- B representa uma cadeia alquilénica de fórmula geral (CH₂)g, na qual q representa um numero igual a 2,3 ou 4, * ou uma estrutura insaturada de fórmula (.-CU=CU-) quando

-38'
8. - Processo de acordo com uma qualquer das reivindicações 1 ou 2, para a preparação do ciclo(2S,3R)-AHPA-(S)Lys-

-(S)ABO-(S)Arg-OH e dos seus sais de adição com um acido ou uma base aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.

I
9. - Processo de acordo com uma qualquer das reivindicações 1 ou 2, para a preparação do £ (4R)-4-Metil-2-oxo-l,3-oxa zolidinil-5-carbonilJ-(S)Lys-(S)ABO-(S)Arg-OH, dos seus enantiõmeros e dos seus sais de adição com um ácido ou uma base aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
10 - Processo de acordo com uma qualquer das reivindicaI çoes 1 ou 2, para a preparaçao do ciclo GABOB--(S)-Lvs-(S)ABO(S)Arg-OH, dos seus enantiomeros e dos seus sais de adição com um ácido ou uma base aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos,

Lisboa, 12 de Fevereiro de 1988

O Agenfe Oficial da r.cprbdade Industrial (

RESUMO

Processo para a preparação de novos derivados peptídicos com estrutura policíclica azotada

Descreve-se um processo para a preparaçao de compostos de fórmula geral

I dos seus enantiõmeros, epímeros e diasterioisõmeros, assim como dos seus sais de adição com um ácido ou uma base aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico, caracterizado pelo facto de se conden sar um derivado de fórmula geral tBoc-N-CH-COOH

I II com N^-nitroarginato de metilo f Η-Arg(N0₂)OCH^ 7 ou de benzilo /*Η-Arg(N0₂)OCH^CgH^ J para se obter um derivado de fórmula geral tBoc-N-CH-CO-Arg(N0_o)OD

V que, em seguida, se desprotege com ácido trifluoroacético para se obter um derivado de fórmula geral

HN-CH-CO-Arg(N0_o)OD

V IV que se condensa depois com NQú-butoxiterc.-carbonil-N^-benziloxi-40- carbonil-lisina ou (tBoc)-Lys-(Z) , para se obter um composto de fórmula geral tBoc-Lys- (Z) -N - CH-CO-Arg(NO )OD

V J 2 que se faz reagir com ácido trifluoroacêtico para se obter um derivado de fórmula geral

VI que se condensa com um derivado de fórmula geral (CH₂)_t-COOH

VII para se obter um derivado de fórmula geral

VIII que se pode:

- ou desproteger mediante saponificação, quando o símbolo

D representa um grupo metilo, e submeter depois a uma hidrogenação catalítica,

- ou submeter a uma hidrogenação catalítica quando o símbolo D representa um grupo benzilo, para se obter um derivado de fórmula geral I que, eventualmente, se pode:

- ou salificar com um ácido ou uma base aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico,

- ou separar nos seus isômeros e, depois, se necessário, salificar com um ácido ou uma base aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico.

Os compostos preparados pelo processo de acordo com a presente invenção são úteis como medicamentos.