PT698612E - Promotor da osteogenese e tratamento para a osteoporose - Google Patents

Description

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EP 0 698 612/PT DESCRICÀO “Promotor da osteogénese e tratamento para a osteoporose”

Campo técnico O presente invento refere-se a um novo promotor da osteogénese e também a um tratamento para a osteoporose.

Arte anterior

Nos últimos anos, a incidência da osteoporose tem mostrado um aumento drástico, paralelo ao envelhecimento da população e, consequentemente, as fracturas do colo do fémur ou similares causadas pela osteoporose aumentaram, originando uma ameaça crescente para a nossa saúde. A osteoporose é uma condição na qual a massa óssea diminui enquanto os componentes do osso se mantêm normais, e é distinta do fenómeno de envelhecimento normal. O que se toma problemático, no entanto, é que quando a osteoporose progride até um certo grau ou superior, toma-se difícil para o doente suportar o seu próprio peso, surgindo problemas tais como dores lombares, deformação da coluna vertebral e, além disso, susceptibilidade a fracturas em diversas partes do corpo por traumatismo mínimo. A condição denominada “osteoporose” refere-se a uma condição ou síndrome provocada por diversas causas e surge como um dos sintomas de diversas doenças.

Verifica-se que particularmente as mulheres tendem a sofrer de osteoporose dado que ocorre uma redução drástica nas suas quantidades ósseas após a menopausa. Especificamente, considera-se que a osteoporose é induzida pela deficiência em estrogénio.

Os ossos protegem o corpo humano da força exterior e suportam o corpo como fulcros para os músculos, de modo que se encontram sempre expostos a forças físicas tais como pressão, tensão e similares. Suportar essas forças físicas é o significado da existência dos ossos. Presume-se consequentemente que sem os referidos estímulos físicos, os ossos perderiam mesmo a sua resistência para além de apresentarem uma redução drástica na sua massa, tendo como consequência a ocorrência de osteoporose. Em resumo, a redução na

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ΕΡ0 698 612/PT massa óssea é ocasionada quando são perdidos os estímulos físicos sobre os ossos. A osteoporose caracterizada pela referida causa é denominada osteoporose por imobilização. A osteoporose é, por outro lado. cnnsiHe.rnd?. como sendo uma representação do disbolismo do cálcio como um aspecto do fenómeno de envelhecimento. Os ossos quantificam 99% do cálcio de todo o corpo, o que significa que uma redução na massa óssea conduz a uma diminuição no cálcio de todo o organismo. A deficiência continuada em cálcio com o envelhecimento exacerba a secreção de hormonas paratiróides, reduz a massa óssea devido a um aumento na reabsorção óssea e provoca a deposição do cálcio libertado dos ossos nos tecidos moles, especialmente nos vasos sanguíneos e no cérebro, o que por sua vez induz a osteoporose, a hipertensão, a arteriosclerose, ou a demência senil. A osteoporose é, por conseguinte, não só uma doença dos ossos mas também uma representação do envelhecimento do corpo humano e do disbolismo do cálcio associado com o mesmo e verifica-se igualmente ser um índice representando a distribuição anormal de cálcio in vivo.

Consequentemente, a importância da osteoporose reside no facto de se converter num índice de diversas doenças da velhice e de representar o grau de deficiência em cálcio, conduzindo inversamente a prevenção da osteoporose e a normalização do metabolismo do cálcio à prevenção do envelhecimento e também das doenças da velhice.

Exemplos de tratamentos para a osteoporose actualmente utilizados na clínica incluem preparações de cálcio, derivados da vitamina D, calcitonina, ipriflavona e similares. Estas preparações apresentam, como seu efeito principal, o controlo da reabsorção óssea. Para a osteoporose pós-menopausa são administradas preparações de estrogénios. O seu efeito baseia-se no mecanismo de actuação por controlo da exacerbação da reabsorção óssea, a qual se associa a uma renovação óssea elevada.

Por outro lado, na osteoporose senil, na osteoporose por imobilização e na osteoporose induzida por glucocorticóides, a formação óssea reduzida é uma condição mórbida grave. Na Europa e na América, o fluoreto de sódio foi administrado como um promotor da osteogénese na referida formação óssea reduzida. Apresenta, no entanto, muitos efeitos adversos e consequentemente não é actualmente utilizado com frequência.

Um esteróide anabólico foi anteriormente utilizado para a osteoporose tendo em conta a descrição de que promovia a formação óssea. O referido esteróide, no entanto, apresenta efeitos adversos tal como efeito virilizante e, além disso, o seu próprio efeito contra a osteoporose não é claro, de modo que não é clinicamente utilizado na actualidade. 86 048

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Apenas o estrogénio demonstrou apresentar um efeito curativo evidente sobre a redução na massa óssea de um animal ovariectomizado. No entanto, o estrogénio só é eficaz na osteoporose pós-menopausa e, além disso, apresenta efeitos adversos graves tais como metorragia, a ocorrência de cancros da mamo e do útero, c similares. A biiuação acmai e que não existe qualquer tratamento para a osteoporose que seja relativamente isento de efeitos adversos e que seja capaz de promover a formação óssea e de aumentar a massa óssea. Existe uma descrição de que entre os esteróides endógenos in vivo, a di-hidro-epiandrosterona (DHEA) apresenta um efeito de melhoria na massa óssea, mas os seus efeitos em animais ovariectomizados são extremamente fracos.

As preparações de cálcio, os derivados da vitamina D, a calcitonina, a ipriflavona e similares, os quais são actualmente utilizados como tratamentos para a osteoporose, apresentam dificuldade na recuperação da própria massa óssea perdida, e na melhor das hipóteses, podem prevenir uma redução na massa óssea, dado que a prevenção da reabsorção óssea é considerada como sendo o seu efeito principal. Por outro lado, foi descrito que a utilização combinada de fluoreto de sódio promotor da osteogénese e de um esteróide anabólico aumenta a massa óssea. No entanto, estes produtos químicos envolvem tantos efeitos colaterais que eles dificilmente podem ser utilizados.

Existe consequentemente o desejo de desenvolvimento de um produto químico capaz de promover a própria formação de osso sem efeitos adversos substanciais.

Um objectivo do presente invento é, por conseguinte, fornecer um medicamento para a osteoporose, o qual apresente efeitos de promoção da osteogénese e de aumento da massa óssea, com efeitos adversos, tais como virilização, extremamente minimizados.

Descrição do invento

Os presentes inventores desenvolveram uma ampla investigação no sentido do referido tratamento eficaz para a osteoporose. Verificou-se que um derivado androgénico representado pela fórmula (1) descrita abaixo, ou um seu sal, apresenta efeitos de promoção da osteogénese e de aumento da massa óssea, é altamente seguro e é útil como. tratamento para a osteoporose, conduzindo à conclusão do presente invento. O presente invento, por conseguinte, refere-se a um promotor da osteogénese e/ou um medicamento para a osteoporose compreendendo, como um ingrediente activo, um derivado androgénico representado pela fórmula (1) seguinte:

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na qual cada linha tracejada indica que a ligação carbono-a-carbono pertinente é uma ligação simples ou uma ligação dupla; ou um seu sal. O presente invento também se refere a um produto para o tratamento correctivo do osteodisbolismo e/ou da osteoporose, a ser administrado a um doente sofrendo de osteodisbolismo e/ou de osteoporose, numa quantidade eficaz de um derivado androgénico representado pela fórmula (l) acima ou de um seu sal. O presente invento refere-se adicionalmente à utilização de um derivado androgénico representado pela fórmula (1) acima ou de um seu sal para o fabrico de um medicamento para a promoção da osteogénese e/ou para o tratamento da osteoporose. O presente invento ainda se refere adicionalmente a uma composição promotora da osteogénese e/ou para o tratamento da osteoporose compreendendo um derivado androgénico representado pela fórmula (1) acima ou um seu sal; e um veículo farmacêutico

No promotor da osteogénese e no tratamento para a osteoporose proporcionados por este invento, o derivado androgénico ou um seu sal, como o seu ingrediente activo, activa os osteoblastos, promove a osteogénese e aumenta a massa óssea, de modo que é utilizado para o tratamento de uma condição mórbida de osteogénese reduzida devida a envelhecimento, imobilização, administração de glucocorticóides e assim por diante. Mais, pode aumentar a massa óssea pelo seu efeito promotor da osteogénese, de modo que é útil para o tratamento da osteoporose associada à condição mórbida anterior ou ocorrendo após ovariectomia ou menopausa.

Breve descrição dos desenhos A FIG.l ilustra os efeitos dos compostos do invento sobre a actividade da fosfatase alcalina dos osteoblastos. A FIG.2 ilustra os efeitos dos compostos do invento sobre a

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ΕΡ 0 698 612/PT ο capacidade de formação de FCFU após ovariectomia. As FIGS.3-6 ilustram os efeitos do composto do invento sobre o aumento do mineral no osso, respectivamente a nível da epífise proximal do fémur, da diáfise do fémur, da epífise distai do fémur e de todo o fémur. A FIG.7 ilustra os efeitos dos compostos <in invente ccbrc o aurãcuiu do sai ósseo a nível da epífise proximal do fémur. As FIGS.8-10 ilustram os efeitos de virilização e sobre a assimilação proteica do composto do invento. As FIGS. 11-12 ilustram a acçào estrogénica do composto do invento.

Melhores formas de executar o invento

Os derivados androgénicos (1) úteis como ingredientes activos nos medicamentos de acordo com o presente invento incluem, dependendo da presença ou da ausência das ligações indicadas pelas linhas tracejadas, quatro tipos de compostos, os quais são Ιΐβ-hidroxi-androstano-3,17-diona, 11 β-hidroxi-1 -androsteno-3,17-diona, 11 β-1ύ0ΓθΧΪ-4-3η0Γθ5ΐεηο- 3,17-diona e 11 β-hidroxi-l,4-androstadieno-3,17-diona. De entre eles, são particularmente preferidas a 1 ^-hidroxi-4-androsteno-3,17-diona (daqui em diante abreviada como “11 β-ΟΗ-Δ4-Α”) e a 11 β-hidroxi-l,4-androstadieno-3,17-diona (daqui em diante abreviada como “11β-ΟΗ-Δ'·4-Α”). No presente invento, consequentemente, são especialmente preferidos um promotor da osteogénese contendo 11β-ΟΗ-Δ4-Α ou 11β-ΟΗ-Δ'·4-Α como um ingrediente activo, e um medicamento para a osteoporose contendo 11β-ΟΗ-Δ4-Α ou 11β-ΟΗ-Δ’·4-Α como um ingrediente activo. Não existe qualquer limitação particular quanto aos sais destes derivados androgénicos (1) desde que sejam farmaceuticamente aceitáveis e sejam formados no grupo 1 l-hidroxilo. O derivado androgénico (1) ou o seu sal pode, cada um deles, ser preparado a partir da androstenodiona (4-androsteno-3,17-diona) com o auxílio do enzima de hidroxilação 11β existente no córtex da glândula supra-renal in vivo. Também pode ser formado pela exclusão da cadeia lateral 17 do cortisol, um dos glucocorticóides. A síntese química também pode ser empregue para a preparação. No que se refere à 11 β-ΟΗ-Δ1,4-A, existe uma descrição em J. Steroid Biochem. Mol. Biol. 40, 731-733 (1991) que no caso de uma doente sofrendo de osteoporose, a sua concentração média no sangue era de 1,75 ng/ml, enquanto que no caso de uma mulher normal, a concentração era de 2,20 ng/ml.

Nessa literatura, no entanto, não existe qualquer descrição a respeito de a 11 β-ΟΗ-Δ4-A apresentar efeitos promotores da osteogénese ou efeitos sobre o aumento da massa óssea.

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Os derivados androgénicos (1) e os seus sais (daqui em diante denominados “compostos do invento”), cada um dos quais é um ingrediente activo no presente invento, promovem a diferenciação e a proliferação dos osteoblastos, incrementam a osteogénese do osso, e aumentam a massa óssea, desse modo melhorando os sintoiVuts ua osceoporose. Além disso, foi provado que a sua acçào como hormona sexual é extremamente fraca. A seguir estão os resultados dos testes dos compostos do invento sobre os efeitos de melhoria do metabolismo ósseo, os efeitos de melhoria da osteoporose, a acção como hormona sexual, os efeitos sobre a assimilação proteica e a acção estrogénica.

Teste 1:

Efeitos sobre o número de células precursoras osteogénicas na medula óssea

Depois do composto do invento ter sido administrado a uma ratazana Wistar ou Lewis com 7 semanas de idade, intraperitonealmente (Experiência l) ou subcutaneamente a nível do dorso (Experiência 2) durante 7 dias sucessivos, foram excisados os fémures e as tíbias. As células da medula óssea foram recolhidas a partir dos ossos obtidos deste modo, seguido por incubação num balão de cultura de 25 cm2 durante 7 dias. Para a incubação foi utilizado meio aMEM contendo 15% de soro de vitelo fetal. Após coloração com giemsa ou fosfatase alcalina, foi contado o número de unidades formadoras de colónias de fibroblastos no balão de cultura. Sabe-se que o número de unidades formadoras de colónias de fibroblastos (=FCFU) se correlaciona com a osteogénese in vitro. O número total de FCFU e 0 número de FCFU positivas para a fosfatase alcalina encontram-se representados na Tabela 1 e na Tabela 2, respectivamente.

Experiência 1:

Tabela 1

Influência da administração intraperitoneal do composto do invento a 1 mg/kg durante 7 dias sucessivos sobre a formação de FCFU: Número de FCFU (após 7 dias) (ratazanas Wistar N=4)

Número total de Número de FCFU positivas para a fosfatase alcalina FCFU

Controlo 36 ± 7 7 ±2 11β-ΟΗ-Δ4-Α 160 ±35 40 ±11

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Experiência 2:

Tabela 2

Influência da administração subcutânea dos composto do invento e de testosterona durante 7 dias sucessivos soKrp ? formação dc FCFU. Número de FCFU (após 7 dias) (ratazanas Levvis N=4) Número total de FCFU Número de FCFU positivas para a fosíãtase alcalina Controlo 111 ± 48 25 ± 11 11β-ΟΗ-Δ4-Α (0,1 mg/kg) 180 ±9 96 ± 16 11β-ΟΗ-Δ4-Α(1 mg/kg) 189 ±26 128 ± 19 11 β-ΟΗ-Δ1’4-A (0,1 mg/kg) 178 = 20 85 ± 11 11 β-ΟΗ-Δ 1 >4-A (1 mg/kg) 217 ± 22 117 ± 12 Testosterona (1 mg/kg) 149 ±5 62 ±5 A partir dos resultados do teste acima, considera-se que os compostos do invento exibem efeitos promotores da osteogénese por aumentarem significativamente o número de células precursoras osteogénicas na medula óssea. Os seus efeitos são potentes comparados com os da testosterona, uma hormona androgénica.

Teste 2:

Efeitos sobre a osteocalcina sérica A uma ratazana Wistar com 7 semanas de idade foi administrada intraperitonealmente 11β-ΟΗ-Δ4-Α a 0,1 mg/kg durante 7 dias sucessivos e a concentração de osteocalcina no soro foi medida por radio-imuno-ensaio.

Os resultados encontram-se representados na Tabela 3.

Tabela 3

Concentração de osteocalcina sérica (ng/ml) Controlo 67,5 ± 0,8 11 β-ΟΗ-Δ4-A 0,1 mg/kg 72,6 ±2,7 5 mg/kg 75,5 ± 1,0

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ΕΡ 0 698 612/PT 8 A partir dos resultados acima, foi reconhecido que a administração sucessiva de 11β-ΟΗ-Δ4-Α aumenta a concentração de osteocalcina, desse modo sugerindo a promoção da osteogénese.

Teste 3:

Efeitos de osteoblastos de ratinho determinados, MC3T3-E1, sobre a actividade da fosfatase alcalina

Numa placa de cultura de 24 alvéolos, osteoblastos derivados de calote craniana de ratinho determinados, MC3T3-E1, foram incubados durante 2 dias com o meio aMEM contendo 5% de soro de vitelo fetal. Quando os osteoblastos se tomaram semi-confluentes, o meio foi substituído por um meio contendo 1% de soro de vitelo fetal, seguido por incubação durante 3 dias adicionais. O meio foi de seguida substituído pelo meio aMEM (meio isento de soro) contendo 0,1% de albumina sérica bovina, seguido por incubação durante um dia. O composto em teste foi de seguida adicionado ao meio incubado e a incubação foi conduzida durante mais 2 dias. As células foram raspadas a partir do meio e de seguida rompidas por aparelho de ultra-sons, seguido pela medição da actividade da fosfatase alcalina na solução rompida. Descrita especificamente, a actividade da fosfatase alcalina foi medida por reacção de um substracto (um tampão contendo p-nitrofenilfosfato dissódico em 2-amino-2-metil-l-propanol) e da solução rompida durante 30 minutos e de seguida por comparação da absorvância com aquela de uma solução padrão de p-nitrofenol.

Como composto em teste, foram utilizados separadamente a 11β-ΟΗ-Δ4-Α e a 11β-ΟΗ-Δι,4-Α, enquanto foi empregue a androstendiona como um composto comparativo. Os resultados encontram-se representados na FIG.l. A partir dos resultados, verificou-se que os compostos do invento apresentam efeitos promotores da osteogénese dado que eles exacerbaram a actividade da fosfatase alcalina dos osteoblastos e apresentaram efeitos de activação dos osteoblastos.

Teste 4:

Efeitos de melhoria sobre a depressão da osteogénese na osteoporose pós- ovariectomia A uma ratazana Wistar fêmea com 7 semanas de idade, foram excisados ambos os ovários e três meses depois foi iniciada a administração de uma droga. Como droga foi administrada 11 β-ΟΗ-Δ4-A subcutaneamente a nível do dorso três vezes por semana, cada

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86 048 ΕΡ0 698 612/PT uma, a 0,1 mg/kg ou 1 mg/kg. Após a administração da droga durante 1 mês, foram recolhidos os fémures e as tíbias. Foram recolhidos os osteoblastos do fémur direito e de ambas as tíbias, e foi observada a formação de colónias (FCFU) de células precursoras osteogénicas. Os resultados encontram-se representados na FIG. 2.

Tal como se toma aparente a partir do gráfico, foi observada uma queda significativa na capacidade de formação de FCFU após a ovariectomia, em comparação com aquela de um grupo simuladamente operado, o que sugere osteogénese reduzida no grupo ovariectomizado (OVX). No grupo ao qual a 11β-ΟΗ-Δ4-Α foi administrada a 0,1 mg/kg, por outro lado, foi observado um aumento marcado na formação de FCFU. A partir destes resultados, tomou-se evidente que a administração de 11 β-ΟΗ-Δ4-Α mesmo numa quantidade tão pequena como 0,1 mg/kg três vezes por semana durante um mês, normalizou outra vez com sucesso a depressão da osteogénese observada após a ovariectomia. Tal como será aqui descrito subsequentemente, a acção como hormona sexual da 11β-ΟΗ-Δ4-Α nesta pequena quantidade é considerada como sendo muito fraca.

Teste 5:

Efeitos de melhoria sobre a redução da massa óssea na osteoporose pós-ovariectomia A uma ratazana Wistar fêmea com 7 semanas de idade, foram excisados ambos os ovários. Três meses depois foi iniciada a administração de uma droga. Como droga foi administrada 11β-ΟΗ-Δ4-Α ou di-hidro-epiandrosterona (DHEA) subcutaneamente a nível do dorso três vezes por semana, cada uma, a 1 mg/kg. Após a administração da droga ter prosseguido durante 3 meses, foram recolhidos os fémures e as tíbias, e a quantidade de sal ósseo foi medida em três locais, isto é, na extremidade proximal, na diáfise e na extremidade distai. As medições da quantidade de sal ósseo foram conduzidas utilizando um modelo Aloka DCS-600 por absorciometria de raios X de energia dupla (DXA). Os resultados encontram-se representados nas FIGS.3-6.

Tal como se toma aparente a partir destes gráficos, a quantidade de sal ósseo do grupo ovariectomizado (OVX) diminuiu em cada um dos locais do fémur, mas pela administração de 11β-ΟΗ-Δ4-Α, recuperou para níveis semelhantes àqueles das ratazanas simuladamente operadas em cada um dos locais, respectivamente. Os efeitos do composto do invento acima foram mais potentes do que aqueles da di-hidro-epiandrosterona, a qual já foi descrita como apresentando efeitos de melhoria do sal ósseo na ratazana ovariectomizada.

comparação com a nandrolona

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Os resultados obtidos de forma semelhante em encontram-se representados na FIG.7. A partir dos resultados, verificou sc que a llp-GH-Ã-A apresenta efeitos de aumento do sal ósseo na extremidade proximal do fémur semelhantes aos da nandrolona.

Teste 6:

Accão androgénica e accão anabólica (1) De acordo com o método de Hershberge, a uma ratazana Wistar macho com 4 semanas de idade castrada (6 ratazanas por grupo), foi administrada subcutaneamente 11 β-ΟΗ-Δ1 2 3-Α a 0,1-0,3 mg/ratazana/dia durante 10 dias sucessivos. De forma semelhante, foi administrado um veículo (óleo de sésamo) ao grupo simuladamente operado e a um grupo de controlo, e foi administrado propionato de testosterona (T.P.) a 0,1 mg/ratazana/dia como um controlo positivo. No dia a seguir à conclusão da administração, foram excisados e pesados o lobo anterior da próstata e o músculo elevador do ânus. A acção androgénica e a acção anabólica foram estudadas a partir de uma alteração no peso do lobo anterior da próstata e do músculo elevador do ânus.

Os resultados encontram-se representados na FIG.8.

Verificou-se o seguinte a partir dos resultados representados no gráfico: - Acção androgénica: considera-se que a 11 β-ΟΗ-Δ3-Α apresenta acção androgénica, dado que foi observado um aumento significativo no peso da próstata quando foi administrada a 0,1-0,3 mg/ratazana/dia (0,6-1,8 mg/kg/dia). A sua acção foi, no entanto, muito fraca e comparada com a testosterona, a proporção foi de cerca de 1:0,07. - Acção anabólica: um aumento no peso do músculo elevador do ânus, o qual é um índice da acção anabólica, foi observado na administração de 11β-ΟΗ-Δ3-Α a 0,3 mg/ratazana/dia.

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De acordo com o método de Hershberge, a uma ratazana SD macho com 4 2 semanas de idade castrada (6 ratazanas por grupo), foi administrada subcutaneamente a 1 ou 3 10 mg/kg/dia durante 7 dias sucessivos. De forma semelhante, foi administrado um veículo (óleo de sésamo) ao grupo simuladamente operado e a um grupo de controlo (castração); foi 11 86 048

ΕΡ 0 698 612/PT administrado propionato de testosterona a 0,1 ou 1 mg/kg/dia como um controlo positivo; e foi administrada nandrolona a 0,1, 1 ou 10 mg/kg/dia como um composto comparativo. A acção androgénica e a anr.no anabélica foram estudadas duma maneira semelhante à de (1) acima e os resultados encontram-se representados nas FIGS.9 e 10.

Considerando os resultados, o composto do invento apresenta acção androgénica e efeitos sobre a assimilação proteica, embora muito fracos. A sua acção androgénica e a sua acção anabólica são extremamente fracas, mesmo comparadas com a nandrolona ou a testosterona, de modo que se verificou ser uma droga isenta do perigo de provocar efeitos adversos quando administrada como um tratamento para doenças ósseas.

Teste 7:

Accão estrogénica (1) De acordo com o método de Louson, a uma ratazana Wistar fêmea com 21 dias de idade (6 ratazanas por grupo), foi administrada subcutaneamente 11β-ΟΗ-Δ4-Α a 0,1-0,3 mg/ratazana/dia, duas vezes ao dia durante 3 dias. De forma semelhante, foi administrado um veículo (óleo de sésamo) a um grupo de controlo, e foi administrado benzoato de estradiol a 0,1 pg/ratazana/dia como um controlo positivo. No dia a seguir à conclusão da administração final, foram excisados os úteros. A acção estrogénica foi estudada por pesagem dos úteros excisados deste modo.

Os resultados encontram-se representados na Fig. 11. (2) A uma ratazana SD fêmea com 3 semanas de idade, foram excisados ambos os ovários. Depois da ratazana ovariectomizada ter sido alimentada durante 11 dias, foi administrada subcutaneamente com 11β-ΟΗ-Δ,4-Α a l ou 10 mg/kg/dia durante 3 dias sucessivos.

De forma semelhante, foi administrado um veículo (óleo de sésamo) a um grupo de controlo, foi administrado ΙΤβ-estradiol como um controlo positivo e foi administrada nandrolona como um composto comparativo. Após o tratamento duma maneira semelhante à de (1) acima, foi estudada a acção estrogénica. 12 86 048

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Os resultados encontram-se representados na FIG.12. A partir dos resultados, verifica-se que o composto do invento dificilmente exibe efeitos sobre o peso do útero, o qual é um índice da acção estrogénica, e apresentou apenas ' fraca acçao estrogénica comparada com o estradiol ou a nandrolona.

Teste 8:

Teste de toxicidade

Um teste de toxicidade aguda do composto do invento 11 β-ΟΗ-Δ4-Α foi conduzido da seguinte maneira. A uma ratazana Wistar, foi administrada subcutaneamente 11β-ΟΗ-Δ4-Α numa quantidade considerada como sendo uma dose intoxicante. As condições da ratazana foram observadas e, ao mesmo tempo, foi determinado o valor da LD50.

Como resultado, verificou-se que o valor LD50 da 11β-ΟΗ-Δ4-Α era de 1000 mg/kg ou superior.

Tal como é evidente a partir dos resultados do teste acima, o composto do invento apresenta excelentes efeitos promotor da osteogénese e de aumento da massa óssea, mas reduzidos efeitos adversos devido às fracas acção androgénica, efeitos sobre a assimilação proteica e acção estrogénica, de modo que pode ser utilizado para o tratamento do disbolismo do cálcio e da osteoporose. O composto do invento pode ser administrado a seres humanos, em conjunto com um veículo farmacêutico utilizado convencíonalmente, como uma composição farmacêutica. Exemplos da forma de preparação de uma tal composição farmacêutica incluem preparações para administração oral tais como comprimidos, cápsulas, pós, trociscos, preparações líquidas e similares. Também pode ser administrada como uma injecção. As preparações para administração oral podem ser formuladas duma maneira conhecida até esta data. Por exemplo, o composto do invento 11β-ΟΗ-Δ4-Α, 1 Ιβ-ΟΗ-Δ^-Α ou o seu sal, pode ser formulado em comprimidos, cápsulas, pós, grânulos ou similares por utilização em combinação com um excipiente tal como amido, manitol ou lactose; um ligante tal como carboximetilcelulose de sódio ou hidroxipropilcelulose; um desintegrador tal como celulose cristalina ou carboximetilcelulose de cálcio; um lubrificante tal como talco ou estearato de 13 13

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ΕΡ 0 698 612 / PT magnésio; e/ou um aperfeiçoador da fluidez tal como anidrido silícico leve, quando necessário. A dose do promotor da osteogénese e/ou do medicamento para a cstcopoiuse de acordo com o presente invento para humanos pode variar dependendo da idade, sintomas e similares. Desejável é, no entanto, a administração a 0,1-10 mg/dia, preferencialmente a 0,1-5 mg/dia, como um ingrediente actívo do derivado androgénico (1) ou do seu sal, em 1-3 porções.

Exemplos Os seguintes são exemplos de formulação. Comorimidos Composição: Composto do invento 3g Lactose 140 g Celulose cristalina 26 g Amido de milho 26 g Hidroxipropilcelulose a 3% 100 ml Estearato de magnésio 2 g

Processo: O composto do invento, lactose, celulose cristalina e amido de milho foram passados através de um crivo de malha 60 e uniformemente misturados. A mistura uniforme resultante foi carregada num amassador, para o qual foi vertida uma solução aquosa a 3% de hidroxipropilcelulose, e foi executada a mistura. A massa obtida deste modo foi submetida a filtração e granulação através de um molde de malha 16, seguida por secagem por ventilação a 50°C. Após a secagem, os grânulos foram peneirados através de um crivo de malha 16, seguido por mistura com estearato de magnésio. A mistura resultante foi moldada em comprimidos, cada um com o peso de 200 mg, por uma máquina para produção de comprimidos.

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ΕΡ 0 698 612 / PT Cápsulas

Composição:

Composto do invento 3 g

Lactose 145 g

Amido de milho 50 g

Estearato de magnésio 2 g

Processo:

Os ingredientes acima foram pulverizados em pó, seguido por agitação suficiente para obter uma mistura uniforme. A mistura em pó resultante foi colocada dentro de cápsulas de gelatina, em porções de 0,2 g, a fim de formar cápsulas.

Capacidade de exploração industrial O promotor da osteogénese e/ou o medicamento para a osteoporose fornecido pelo presente invento é útil para o tratamento de uma condição mórbida de depressão da osteogénese, tal como a depressão da osteogénese causada pelo envelhecimento, a imobilização ou a administração de um glucocorticóide, dado que o seu ingrediente activo, isto é, o derivado androgénico (1) ou o seu sal, em particular 11β-ΟΗ-Δ4-Α, 11β-ΟΗ-Δ'·4-Α ou o seu sal, activa os osteoblastos, promove a osteogénese e aumenta a massa óssea. Também é útil no tratamento da osteoporose associada à condição mórbida anterior e igualmente da osteoporose após ovariectomia ou menopausa.

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rtUMIO

Eng.° ANTÔNIO JOÂO DA CUNHA FERREIRA Ag. Of. Pr. Ind. Rua das Flores, 74-4.® 1200-195 LISBOA

Claims (4)

1. « 86 048 ΕΡ0 698 612/PT 1/2 ^ REIVINDICAÇÕES 1. Promotor da osteogénese e/ou um medicamento para a osteoporose que compreende, como um ingrediente activn um derivado androgénico icpicseniado pela fórmula (1) seguinte:

   na qual cada linha tracejada indica que a ligação carbono-a-carbono pertinente é uma ligação simples ou uma ligação dupla; ou um seu sal.
2. 2. Promotor da osteogénese e/ou um medicamento para a osteoporose de acordo com a reivindicação 1, em que o derivado androgénico (1) é 11 P-hidroxi-4-androsteno-3,17-diona ou 11 β-hidroxi-1,4-androstadieno-3,17-diona.
3. 3. Utilização de um derivado androgénico representado pela fórmula (1) seguinte:

   na qual cada linha tracejada indica que a ligação carbono-a-carbono pertinente é uma ligação simples ou uma ligação dupla, ou um seu sal, para a produção de um medicamento para a promoção da osteogénese e/ou para o tratamento da osteoporose.

   i

   86 048 ΕΡ 0 698 612/PT 2/2
4. 4. Composição promotora da osteogénese e/ou para o tratamento da osteoporose, que compreende um derivado androgénico representado pela fórmula (1) seguinte: 0 HG

   0 na qual cada linha tracejada indica que a ligação carbono-a-carbono pertinente é uma ligação simples ou uma ligação dupla, ou um seu sal; e um veículo farmacêutico. Lisboa, 21 í~3. 20¾¾ Eng.° ANTÓNIO JOÂO DA CUNHA FERREIRA Ag. Of. Pr. Ind. Rua das Flores, 74-4.° 1200-195 LISBOA

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