PT2328414E

PT2328414E - Derivados de triazol-piridazina substituídos

Info

Publication number: PT2328414E
Application number: PT98106859T
Authority: PT
Inventors: Scott Harbeson
Original assignee: Concert Pharmaceuticals Inc
Priority date: 2008-08-29
Filing date: 2009-08-28
Publication date: 2014-03-17
Also published as: EP2328414A4; EP2328414A1; KR20110063479A; DK2328414T3; CN102176826A; JP2014058518A; CA2735549A1; CN104098578A; EA020071B1; JP2012501346A; US8921366B2; BRPI0912928A2; JP5373982B2; MX2011002278A; JP5183808B2; US20130225590A1; US20100056529A1; US20120004236A1; WO2010025407A1; US20150111895A1

Description

ΕΡ2328414Β1

DESCRIÇÃO "DERIVADOS DE TRIAZOL-PIRIDAZINA SUBSTITUÍDOS"

Esta invenção refere-se a novas triazol-piridazinas substituídas, seus derivados e sais farmaceuticamente aceitáveis das mesmas. Esta invenção também proporciona composições que compreendem um composto desta invenção e, divulga o uso de ditas composições em métodos de tratamento de doenças e de condições que são tratadas beneficamente pela administração de um antagonista do recetor al-GABA-A. L-838417, também conhecido como 7-terc-butil-3-(2,5-difluorfenil)-6-(1-metil-lH-1,2,4-triazol-5-ilmetoxi)[1,2,4]tiazol[4,3-b]piridazina, atua no local benzodiazepínico do recetor GABA-A como um antagonista de subtipos al, e como um agonista alostérico funcionalmente seletivo dos subtipos α2, a3 e a5. L-838417 é atualmente um candidato pré-clínico para distúrbios do sistema nervoso central. Apesar das atividades benéficas de L-838417, existe uma necessidade contínua de novos compostos que sejam antagonistas do recetor al-GABA-A.

Breve descrição dos desenhos A figura 1 ilustra a estabilidade de compostos da invenção em microssomas de fígado humano ao longo do tempo. A figura 2 ilustra a estabilidade de compostos da invenção em microssomas de fígado de rato ao longo do tempo. 1 ΕΡ2328414Β1 A figura 3 ilustra a alteração na concentração dos compostos da invenção no plasma depois da administração intravenosa a ratos. A figura 4 ilustra a alteração na concentração dos compostos da invenção no plasma depois da administração oral a ratos.

Definições 0 termo "tratar" significa diminuir, suprimir, atenuar, diminuir, parar ou estabilizar o desenvolvimento ou a progressão de uma doença (por exemplo, uma doença ou distúrbio aqui delineado). "Doença" significa qualquer condição ou distúrbio que danifique ou interfira com a função normal de uma célula, tecido ou órgão.

Será reconhecido que ocorra alguma variação de abundância isotópica natural num composto sintetizado, dependendo da origem dos materiais químicos utilizados na síntese. Portanto, uma preparação de L-838417 conterá, inerentemente, pequenas quantidades de isotopólogos deuterados. A concentração de isótopos de hidrogénio e carbono estáveis naturalmente abundantes, não obstante esta variação, é pequena e imaterial quando comparada com o grau de substituição isotópica estável dos compostos desta invenção. Veja-se, por exemplo, Wada, E et al., Seikagaku, 1994, 66:15, Gannes, LZ et al., Comp Biochem Physiol Mol Integr Physiol, 1998, 119:725. Num composto desta invenção, quando uma posição em particular é designada como possuindo deutério, é compreendido que a abundância de deutério naquela posição é substancialmente maior do que a abundância natural de deutério, que é de 0,015%. Uma 2 ΕΡ2328414Β1 posição designada como possuindo deutério tem, tipicamente, um fator de enriquecimento isotópico minimo de pelo menos 3000 (45% de incorporação de deutério) em cada átomo designado como deutério no dito composto. O termo "fator de enriquecimento isotópico", como utilizado aqui, significa a proporção entre a abundância isotópica e a abundância natural de um isótopo especificado.

Em outras realizações, um composto desta invenção tem um fator de enriquecimento isotópico para cada átomo de deutério designado de pelo menos 3500 (52,5% de incorporação de deutério em cada átomo de deutério designado) , pelo menos 4000 (60% de incorporação de deutério), pelo menos 4500 (67,5% de incorporação de deutério), pelo menos 5000 (75% de incorporação de deutério), pelo menos 5500 (82,5% de incorporação de deutério), pelo menos 6000 (90% de incorporação de deutério), pelo menos 6333,3 (95% de incorporação de deutério), pelo menos 6466,7 (97% de incorporação de deutério), pelo menos 6600 (99% de incorporação de deutério) ou pelo menos 6633,3 (99,5 % de incorporação de deutério).

Nos compostos desta invenção, qualquer átomo não designado especificamente como um isótopo em particular é pretendido representar qualquer isótopo estável daquele átomo. A menos que especificado de outra maneira, quando uma posição é designada especificamente como "H" ou "hidrogénio", a posição é entendida como tendo hidrogénio na sua composição isotópica de abundância natural. Também, a menos que especificado de outra maneira, quando uma posição é designada especificamente como "D" ou "deutério", a posição é entendida como tendo deutério numa abundância 3 ΕΡ2328414Β1 que é pelo menos 3340 vezes maior do que a abundância natural de deutério, que é de 0,015% (isto é, pelo menos 50,1% de incorporação de deutério). O termo "isotopólogo" refere-se a uma espécie que difere de um composto específico desta invenção apenas na composição isotópica da mesma. O termo "composto", tal como aqui utilizado, refere-se a uma coleção de moléculas que possuem estrutura quimica idêntica, exceto que pode haver variação isotópica entre os átomos constituintes das moléculas. Portanto, será claro para os peritos na tecnologia, que um composto representado por uma estrutura química em particular que contenha átomos de deutério indicados, também conterá quantidades menores de isotopólogos que possuem átomos de hidrogénio em uma ou mais das posições designadas de deutério naquela estrutura. A quantidade relativa de tais isotopólogos num composto desta invenção dependerá de vários fatores, incluindo a pureza isotópica de reagentes deuterados utilizados para fazer o composto e, a eficiência da incorporação de deutério nas várias etapas da síntese utilizadas para preparar o composto. No entanto, tal como descrito anteriormente, a quantidade relativa de ditos isotopólogos será menor do que 49,9% do composto. A invenção também inclui sais dos compostos aqui divulgados.

Um sal de um composto desta invenção é formado entre um ácido e um grupo básico do composto, tal como um grupo amino funcional, ou uma base e um grupo ácido do composto, tal como um grupo carboxilo funcional. De acordo com outra realização, o composto é um sal de adição ácida farmaceuticamente aceitável. 4 ΕΡ2328414Β1 0 termo "farmaceuticamente aceitável", tal como aqui utilizado, refere-se a um componente que é, dentro do âmbito do julgamento médico, adequado para uso em contato com os tecidos de humanos e outros mamíferos sem toxicidade indesejada, irritação, resposta alérgica e semelhantes, e é provido com uma relação benefício/risco razoável. Um "sal farmaceuticamente aceitável" significa qualguer sal não tóxico que, depois da administração a um recetor, é capaz de proporcionar, tanto diretamente quanto indiretamente, um composto desta invenção. Um "contra-ião farmaceuticamente aceitável" é uma porção iónica de um sal que não é tóxica quando libertada do sal, depois da administração a um recetor.

Os ácidos comummente empregues para formar sais farmaceuticamente aceitáveis incluem ácidos inorgânicos, tais como bissulfeto de hidrogénio, ácido hidroclórico, ácido hidrobrómico, ácido hidroiódico, ácido sulfúrico, e ácido fosfórico, assim como ácidos orgânicos tais como ácido para-toluenosulfónico, ácido salicílico, ácido tartárico, ácido bitartárico, ácido ascórbico, ácido maleico, ácido besílico, ácido fumárico, ácido glicónico, ácido glicurónico, ácido fórmico, ácido glutâmico, ácido metanosulfónico, ácido etanosulfónico, ácido benzenosulfónico, ácido lático, ácido oxálico, ácido para-bromofenilsulfónico, ácido carbónico, ácido succínico, ácido cítrico, ácido benzoico e ácido acético, assim como ácidos inorgânicos e orgânicos relacionados. Ditos sais farmaceuticamente aceitáveis incluem portanto, sulfato, pirosulfato, bisulfato, sulfito, bissulfito, fosfato, fosfato mono-hidrogenado, fosfato di-hidrogenado, metafosfato, pirofosfato, cloreto, brometo, iodeto, acetato, propionato, decanoato, caprilato, acrilato, formato, isobutirato, caprato, heptanoato, propiolato, oxalato, malonato, succinato, suberato, sebacato, fumarato, 5 ΕΡ2328414Β1 maleato, butino-1,4-dioato, hexino-1,6-dioato, benzoato, clorobenzoato, metilbenzoato, dinitrobenzoato, hidroxibenzoato, metoxibenzoato, ftalato, tereftalato, sulfonato, xilenosulfonato, fenilacetato, fenilpropionato, fenilbutirato, citrato, lactato, β-hidroxibutirato, glicolato, maleato, tartrato, metanosulfonato, propanosulfonato, naftaleno-l-sulfonato, naftaleno-2-sulfonato, mandelato e outros sais. Numa realização, os sais de adição ácida farmaceuticamente aceitáveis incluem aqueles formados com ácidos minerais, tais como ácido hidroclórico e ácido hidrobrómico, e especialmente aqueles formados com ácidos orgânicos tais como o ácido maleico.

Os compostos da presente invenção (por exemplo, compostos com a fórmula I) , podem conter um átomo de carbono assimétrico, por exemplo, como resultado da substituição de deutério ou outro. Como tal, os compostos desta invenção podem existir tanto como enantiómeros individuais ou como misturas dos dois enantiómeros. Consequentemente, um composto da presente invenção pode existir tanto como uma mistura racémica ou como uma mistura escalémica, ou como os respetivos estereoisómeros individuais que são substancialmente livres de qualquer outro estereoisómero possível. 0 termo "substancialmente livre de outros estereoisómeros", como utilizado aqui, significa que estão presentes menos do que 25% de outros estereoisómeros, preferencialmente menos do que 10% de outros estereoisómeros, mais preferencialmente menos do que 5% de outros estereoisómeros e o mais preferencialmente menos do que 2% de outros estereoisómeros, ou menos do que "X"% de outros estereoisómeros (onde X é um número entre 0 e 100, inclusive). São conhecidos na tecnologia métodos para obtenção ou síntese de um enantiómero individual para um dado composto e, podem ser aplicados como praticáveis para os compostos finais ou para o material de partida ou 6 ΕΡ2328414Β1 intermediários . A menos que esteja indicado de alguma outra maneira, quando um composto divulgado é denominado ou ilustrado por uma estrutura sem especificar a estereoquímica, e tem um ou mais centros quirais, é entendido representar todos os estereoisómeros possíveis do composto. 0 termo "compostos estáveis", tal como aqui utilizado, refere-se a compostos que possuem suficiente estabilidade para permitir o seu fabrico, e que mantêm a integridade do composto por um periodo de tempo suficiente para ser útil para os propósitos detalhados aqui (por exemplo, formulação em produtos terapêuticos, intermediários para uso na produção de compostos terapêuticos, compostos intermediários isoláveis ou armazenáveis, tratamento de uma doença ou condição que responde a agentes terapêuticos). "D" refere-se a deutério. "Estereoisómero" refere-se tanto aos enantiómeros como aos diastereoisómeros. "Terc", "tw e "t-" referem-se, cada um, a terciário. "US" refere-se aos Estados Unidos da América.

Ao longo desta especificação, uma variável pode ser referida genericamente (por exemplo, "cada R"), ou pode ser referida especificamente (por exemplo, R1, R2, R3, etc.) . A menos que indicado de outra maneira, quando uma variável é referida genericamente, é pretendido incluir todas as realizações especificas daquela variável em particular.

Compostos terapêuticos A presente invenção proporciona um composto com a fórmula I: 7 ΕΡ2328414Β1

ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: R1 é CH3, CDH2, CD2H, ou CD3, R2 é um grupo t-butilo que tem 0-9 átomos de deutério, cada Y é independentemente hidrogénio ou deutério, e quando R1 é CH3 e cada Y é hidrogénio, então R2 tem 1-9 átomos de deutério.

Uma realização desta invenção proporciona um composto com a fórmula I, em que R1 é CH3 ou CD3. Num aspeto desta realização, Yla e Ylb são hidrogénio. Em outro aspeto, Yla e Ylb são deutério. Em outro aspeto, Y2 é hidrogénio. Em outro aspeto, Y2 é deutério. Em outro aspeto, R2 é -C(CH3)3 ou -C(CD3)3. Como um exemplo deste aspeto, R2 é -C(CD3)3.

Outra realização proporciona compostos em que R2 é -C (CH3) 3 ou -C(CD3)3. Como um exemplo, R2 é -C(CD3)3. Num aspeto desta realização, Yla e Ylb são hidrogénio. Em outro aspeto, Yla e Ylb são deutério. Em outro aspeto, Y2 é hidrogénio. Em outro aspeto, Y2 é deutério.

Outra realização proporciona compostos em que Yla e Ylb são iguais. Num aspeto desta realização, Yla e Ylb são deutério. Num aspeto desta realização, R2 é -C(CD3)3.

Em ainda outra realização, o composto é selecionado a partir de qualquer um dos compostos descritos na tabela 1 8 ΕΡ2328414Β1 em seguida.

Tabela 1: Exemplos de compostos com a fórmula I

Composto R1 R2 yla ylb Y2 101 cd3 -C(CH3)3 D D H 102 ch3 -C(CD3)3 D D H 103 ch3 -C(CD3)3 H H H 104 cd3 -C(CD3)3 H H H 105 cd3 -C(CD3)3 D D H 106 cd3 -C(CH3)3 H H H 107 ch3 -C(CH3)3 D D H 108 cd3 -C(CH3)3 D D D 109 ch3 -C(CD3)3 D D D 110 ch3 -C(CD3)3 H H D 111 cd3 -C(CD3)3 H H D 112 cd3 -C(CD3)3 D D D 113 cd3 -C(CH3)3 H H D 114 ch3 -C(CH3)3 D D D

Em determinadas realizações, o composto é selecionado entre qualquer um dos compostos 102, 103, 104, 105, 109, 110, 111 e 112, ou sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos. Em outras realizações, o composto é selecionado entre qualquer um dos compostos 102, 103 e 105 ou sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos. Num aspeto, o composto é selecionado entre o composto 103 ou o composto 105, ou sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.

Em outro grupo de realizações, qualquer átomo não designado como deutério em qualquer uma das realizações descritas anteriormente, está presente na sua abundância isotópica natural. A sintese dos compostos com a fórmula I pode ser 9 ΕΡ2328414Β1 rapidamente alcançada por químicos de síntese com conhecimentos comuns, seguindo a síntese exemplificativa e os exemplos aqui divulgados. São divulgados outros procedimentos relevantes e intermediários, por exemplo, na publicação de patente PCT Nos WO 98/04559 e WO 00/44752.

Ditos métodos podem ser executados para sintetizar os compostos aqui delineados, utilizando os reagentes deuterados correspondentes e, opcionalmente, outros reagentes que contêm isótopos e/ou intermediários, ou invocando protocolos de síntese conhecidos na tecnologia, para introduzir átomos isotópicos numa estrutura química. Certos intermediários podem ser utilizados com ou sem purificação (por exemplo, filtração, destilação, sublimação, cristalização, trituração, extração em fase sólida e cromatografia). Síntese Exemplificativa

Os compostos com a fórmula I podem ser preparados de acordo com os esquemas mostrados em seguida. 10 ΕΡ2328414Β1

Esquema 1. Via geral para compostos com a fórmula I

ΕΡ2328414Β1 ElvNfu * N ci {NH4)2S20a

AgNOs, HjSG» HzO. to*C a 12

r*-go2h + 10 H

m F 13

R1 y<a y ib f Y2 M» 15 B13N«HCI xileno

NaH, DMF A síntese de compostos com a fórmula I pode ser alcançada, geralmente, como mostrado no esquema 1. 0 intermediário 12 é preparado pela alquilação do radical de 3,6-dicloropiridazina 11 com o ácido piválico 10 apropriadamente deuterado. 0 ácido D9-piválico está disponível comercialmente para a preparação daqueles compostos nos quais R2 é -C(CD3)3. A 3,6-dicloro-4-t-butilpiridazina apropriadamente deuterada 12 é então condensada com 2,5-difluorbenzohidrazida 13 para se obter 14. 0 deslocamento do cloro com o anião gerado a partir de (2-metÍ1-2H-1,2,4-triazol-3-il)metanol apropriadamente deuterado 15 e NaH, proporciona os compostos com a fórmula I. Alternativamente, a conversão de 14 para os compostos com a fórmula I é obtida através do uso de n-BuLi em THF, ou carbonato de césio em DMSO, ou sob outras condições similares conhecidas por aqueles com qualificações. 11 ΕΡ2328414Β1

Esquema 2. Síntese do composto 15.

ΕΡ2328414Β1 N *****í/> *N.

R1-! Na, MeOH

HjO ou O2O

0 esquema 2 ilustra a preparação de análogos deuterados de 15. Como descrito por Dallacker F et ai., Chemiker-Zeitung 1986, 110:101-108 e Dallacker F et al., Chemiker-

Zeitung 1986, 110, pág. 275-281, o 1,2,4-triazol (16) reage com R1-! para se obter o metil triazol apropriadamente deuterado 17, que é então tratado com formaldeido ou formaldeído deuterado para se obter 15. Um perito na tecnologia apreciará que a troca de deutério pode ocorrer potencialmente sob estas condições, para proporcionar compostos nos quais Y2 é deutério.

As abordagens especificas e os compostos mostrados anteriormente não pretendem ser limitativos. As estruturas químicas aqui nos esquemas, ilustram variáveis que são definidas aqui proporcionalmente com as definições dos grupos químicos (porções, átomos, etc.) da posição correspondente nas fórmulas do composto aqui, quer identificadas, ou não, pelo mesmo nome da variável (isto é, R1, R2, R3, etc.) . A adequabilidade de um grupo químico numa estrutura de um composto para uso na síntese de outro composto, está dentro do conhecimento daqueles com qualificações na tecnologia.

Os métodos adicionais para sintetizar os compostos com a fórmula I e os seus precursores de síntese, incluindo aqueles dentro de vias não mostradas aqui explicitamente nos esquemas, estão dentro dos recursos dos químicos com conhecimentos comuns na tecnologia. São conhecidas na 12 ΕΡ2328414Β1 tecnologia as transformações de química de síntese e as metodologias de proteção de grupos (proteção e desproteção), úteis na síntese dos compostos aplicáveis e, incluem, por exemplo, aquelas descritas em Larock R, Comprehensive organic transformations, VCH Publishers (1989), Greene TW et al., Protective groups in organic synthesis, 3rd Ed., John Wiley and Sons (1999), Fieser L et al., Fieser and Fieser's reagents for organic synthesis, John Wiley and Sons (1994), e Paquette L, ed., Encyclopedia of reagents for organic synthesis, John Wiley and Sons (1995), e edições subsequentes dos mesmos.

As combinações de substituintes e variáveis previstas por esta invenção, são apenas aquelas que resultam na formação de compostos estáveis.

Composições A invenção também proporciona composições isentas de pirogénio, que compreendem uma quantidade eficaz de um composto com a fórmula I (por exemplo, incluindo qualquer das fórmulas aqui), ou um sal farmaceuticamente aceitável do dito composto, e um transportador aceitável. Preferencialmente, uma composição desta invenção é formulada para o uso farmacêutico ("uma composição farmacêutica"), na qual o transportador é um transportador farmaceuticamente aceitável. 0(s) transportador(es) é(são) "aceitável (aceitáveis)" no sentido de ser(em) compatível (compatíveis) com os outros ingredientes da formulação e, no caso de um transportador farmaceuticamente aceitável, não prejudicial para o recetor do mesmo, na quantidade utilizada no medicamento.

Um transportador farmaceuticamente aceitável inclui adjuvantes e, veículos que podem ser utilizados nas 13 ΕΡ2328414Β1 composições farmacêuticas desta invenção. Um transportador farmaceuticamente aceitável inclui um ou mais sais, eletrólitos, agentes de solubilização, solventes, tampões, agentes emulsificantes, aromatizantes, corantes, adoçantes, enchimentos, agentes lubrificantes, diluentes, agentes de suspensão, agentes espessantes, agentes de dispersão, agentes de humidificação, intensificadores da biodisponibilidade e promotores da absorção. Um transportador farmaceuticamente aceitável especifico inclui, mas não está limitado a, 1,3-butanodiol, 2-octildodecanol, acácia, alumina, estearato de alumínio, cera de abelha, álcool benzílico, fosfatos, substâncias baseadas em celulose, álcool cetearílico, cera de ésteres cetílicos, manteiga de cacau, sílica coloidal, amido de milho, hidrogeno fosfato dissódico, cera emulsificante, blocos de copolímeros de óxido de etileno - óxido de propileno, gelatina, glicerina, glicina, albumina sérica humana, permutadores de iões, cloreto de sódio isotónico, lactose, lecitina, petróleo líquido, álcool de cadeia longa, LUTROL™, estearato de magnésio, trisilicato de magnésio, manitol, óleo mineral, ácido oléico e os seus derivados de glicerídeo, azeite ou óleo de castor especialmente nas suas versões polioxietiladas, misturas parciais de glicerídeos de ácidos gordos vegetais saturados, PLURONIC™, poliacrilatos, polietileno glicol, blocos de polímeros de polietileno - polioxipropileno, polisorbato 60, polivinil pirrolidona, hidrogeno fosfato de potássio, sorbato de potássio, propileno glicol, sulfato de protamina, solução de Ringer, proteínas séricas, carboximetilcelulose de sódio, cloreto de sódio, ácido sórbico, monoestearato de sorbitano, sacarose, tragacanto, Tween 80, água, ceras, petróleo branco, lanolina e sais de zinco.

As composições farmacêuticas da invenção incluem 14 ΕΡ2328414Β1 aquelas adequadas para a administração oral, retal, nasal, tópica (incluindo bucal e sublingual), vaginal, parentérica (incluindo subcutânea, intramuscular, intravenosa e intradérmica) e transdérmica. É bem conhecida na tecnologia a escolha do transportador farmaceuticamente aceitável apropriado para ser empregue com cada tipo de composição. De forma semelhante, também são bem conhecidos na tecnologia os métodos para combinar o(s) ingrediente(s) ativo(s) e os transportadores, para criar formas de dosagem unitária das várias composições farmacêuticas desta invenção. Veja-se, por exemplo, Remington: The Science and practice of pharmacy, Lippincott Williams & Wilkins, Baltimore, MD (20th ed. 2000) .

Em outra realização, uma composição desta invenção pode compreender adicionalmente um segundo agente terapêutico. O segundo agente terapêutico pode ser selecionado de entre qualquer composto, ou agente terapêutico, conhecido por ter, ou que demonstra, propriedades vantajosas quando administrado com um composto que possui o mesmo mecanismo de ação que o L-838417.

Preferencialmente, o segundo agente terapêutico é um agente útil no tratamento ou prevenção de uma doença ou condição, selecionada entre os distúrbios do sistema nervoso central, incluindo a ansiedade e convulsões, e dor neuropática, inflamatória e associada à enxaqueca.

Em outra realização, a invenção proporciona formas de dosagem separadas de um composto desta invenção e um ou mais de qualquer um dos segundos agentes terapêuticos descritos anteriormente, em que o composto e o segundo agente terapêutico estão associados um com o outro. O termo "associados um com o outro" como utilizado aqui, significa que as formas de dosagem separadas estão embaladas juntas 15 ΕΡ2328414Β1 ou acopladas de outra maneira uma à outra, de tal modo que é facilmente percetível que as formas de dosagem separadas são pretendidas serem vendidas e administradas juntas (dentro de menos do que 24 horas uma da outra, consecutivamente ou simultaneamente).

Nas composições farmacêuticas da invenção, o composto da presente invenção está presente numa quantidade eficaz. Tal como aqui utilizado, o termo "quantidade eficaz", refere-se a uma quantidade que, quando administrada num regime de dosagem apropriado, é suficiente para reduzir ou melhorar a gravidade, a duração ou a progressão do distúrbio a ser tratado, prevenir o avanço do distúrbio a ser tratado, induzir a regressão do distúrbio a ser tratado ou intensificar ou melhorar o(s) efeito(s) profilático(s) ou terapêutico(s) de outra terapia. A inter-relação de dosagens para animais e humanos (baseada em miligramas por metro guadrado de superfície corporal) está descrita em Freireich et al., (1966) Câncer Chemother. Rep 50: 219. A área da superfície corporal pode ser determinada aproximadamente a partir da altura e do peso do paciente. Veja-se, por exemplo, Scientific tables, Geigy Pharmaceuticals, Ardsley, N.Y., 1970, 537.

Em uma realização, uma quantidade eficaz de um composto desta invenção pode variar entre aproximadamente 0,01 e aproximadamente 5000 mg por tratamento. Em realizações mais específicas, o intervalo é de entre aproximadamente 0,1 a 2500 mg, ou de 0,2 a 1000 mg, ou mais especificamente entre aproximadamente 1 e 500 mg. O tratamento é administrado, tipicamente, uma a três vezes por dia.

As doses eficazes também variarão, como reconhecido por peritos na tecnologia, dependendo da doença tratada, da 16 ΕΡ2328414Β1 gravidade da doença, da via de administração, do sexo, idade e condição geral de saúde do paciente, da utilização de excipiente, da possibilidade de co-utilização com outros tratamentos terapêuticos, tais como o uso de outros agentes, e do julgamento do médico assistente. Por exemplo, a orientação para selecionar uma dose eficaz pode ser determinada por referência à informação da prescrição para o L-838417.

Para as composições farmacêuticas que compreendem um segundo agente terapêutico, uma quantidade eficaz do segundo agente terapêutico está entre aproximadamente 20 % e 100 % da dosagem utilizada normalmente num regime de monoterapia, utilizando exatamente aquele agente. Preferencialmente, uma quantidade eficaz está entre aproximadamente 70 % e 100 % da dose monoterapêutica normal. São bem conhecidas na tecnologia as dosagens monoterapêuticas normais destes segundos agentes terapêuticos. Veja-se, por exemplo, Wells et al., eds., Pharmacotherapy handbook, 2nd edition, Appleton and Lange, Stamford, Conn.(2000), PDR Pharmacopoeia, Tarascon pocket pharmacopoeia 2000, Deluxe Edition, Tarascon Publishing, Loma Linda, Califórnia (2000) . É esperado que alguns dos segundos agentes terapêuticos referenciados atuem sinergicamente com os compostos desta invenção. Quando isto ocorre, irá permitir que a dosagem eficaz do segundo agente terapêutico e/ou do composto da invenção seja reduzida a partir daquela requerida numa monoterapia. Isto tem a vantagem de minimizar os efeitos secundários tóxicos quer do segundo agente terapêutico de um composto desta invenção, aperfeiçoamentos sinérgicos na eficácia, facilidade aumentada de administração ou uso e/ou custo global reduzido da preparação ou formulação do composto. 17 ΕΡ2328414Β1 Métodos de tratamento

Noutra realização, a invenção proporciona um composto da invenção para uso num método para inibir o subtipo a-1 do recetor GABA-A numa célula, que compreende pôr em contato a célula com um ou mais compostos com a fórmula I aqui. Noutra realização, a invenção proporciona um composto da invenção para uso num método de ativação de um ou mais dos subtipos 0,2, a.3 e a5 do recetor GABA-A numa célula.

De acordo com outra realização, a invenção proporciona um composto da invenção para uso num método de tratamento de um paciente, que sofre ou é suscetível a uma doença que é beneficamente tratada por L-838417, o qual compreende a etapa de administração ao dito paciente de uma quantidade eficaz de um composto com a fórmula I, ou sal do mesmo, ou uma composição desta invenção. Ditas doenças são bem conhecidas na tecnoloqia e são divulqadas em, mas não limitadas, às seguintes patentes e pedidos publicados: WO 1998004559, WO 2000044752, WO 2006061428. Ditas doenças incluem, mas não estão limitadas a, distúrbios do sistema nervoso central, incluindo a ansiedade e convulsões, e dor neuropática, inflamatória e associada à enxaqueca.

Os métodos aqui delineados também incluem aqueles em que o paciente é identificado como necessitando de um tratamento especificado em particular. Identificar um paciente que necessite de tal tratamento pode estar no julgamento de um paciente ou de um profissional de saúde e, pode ser subjetivo (por exemplo, opinião) ou objetivo (por exemplo, mensurável por um teste ou um método de diagnóstico).

Noutra realização, qualquer um dos métodos de tratamento anteriores compreende a etapa adicional de co- 18 ΕΡ2328414Β1 administração ao dito paciente de um ou mais dos segundos agentes terapêuticos. A escolha do segundo agente terapêutico pode ser feita a partir de gualguer segundo agente terapêutico, conhecido por ser útil para a co-administração com o L-838417. A escolha do segundo agente terapêutico também é dependente da doença ou condição em particular a ser tratada. Exemplos de segundos agentes terapêuticos gue podem ser empregues nos métodos desta invenção, são aqueles descritos anteriormente para uso em composições de combinação que compreendem um composto desta invenção e um segundo agente terapêutico. 0 termo "co-administração" tal como aqui utilizado, significa que o segundo agente terapêutico pode ser administrado juntamente com um composto desta invenção, como parte de uma forma de dosagem única (tal como uma composição desta invenção que compreende um composto da invenção e um segundo agente terapêutico como descrito anteriormente), ou como formas de dosagem múltiplas, separadas. Alternativamente, o agente adicional pode ser administrado antes, consecutivamente ou depois da administração de um composto desta invenção. Em dito tratamento de terapia de combinação, ambos os compostos desta invenção e o(s) segundo(s) agente(s) terapêutico(s) são administrados por métodos convencionais. A administração de uma composição desta invenção, compreendendo tanto um composto da invenção como um segundo agente terapêutico, a um paciente, não exclui a administração separada do mesmo agente terapêutico, qualquer outro segundo agente terapêutico ou qualquer composto desta invenção ao dito paciente em outro momento durante o decorrer do tratamento.

As quantidades eficazes destes segundos agentes terapêuticos são bem conhecidas pelos peritos na 19 ΕΡ2328414Β1 tecnologia, e a orientação para a dosagem pode ser encontrada em patentes e pedidos de patente referenciados aqui, assim como em Wells et ai., eds., Pharmacotherapy handbook, 2nd edition, Appleton and Lange, Stamford, Conn. (2000), PDR Pharmacopoeia, Tarascon pocket pharmacopoeia 2000, Deluxe edition, Tarascon Publishing, Loma Linda, Califórnia (2000), e outros textos médicos. No entanto, está dentro do alcance daquele com qualificações, determinar o intervalo da quantidade eficaz ótima do segundo agente terapêutico.

Numa realização da invenção, onde é administrado um segundo agente terapêutico a um indivíduo, a quantidade eficaz do composto desta invenção é menor do que a sua quantidade eficaz seria quando não é administrado o segundo agente terapêutico. Em outra realização, a quantidade eficaz do segundo agente terapêutico é menor do que a sua quantidade eficaz seria quando não é administrado o composto desta invenção. Desta maneira, podem ser minimizados os efeitos secundários indesejados associados com elevadas doses de qualquer um dos agentes. Outras vantagens potenciais (incluindo sem limitação, regimes de dosagem aperfeiçoados e/ou custo reduzido do fármaco) ficarão aparentes para os peritos na tecnologia.

Em ainda outro aspeto, a invenção proporciona o uso de um composto com a fórmula I, sozinho ou em conjunto com um ou mais dos segundos agentes terapêuticos descritos anteriormente, no fabrico de um medicamento, tanto como uma composição isolada ou como formas de dosagem separadas, para o tratamento ou prevenção de uma doença, distúrbio ou sintoma num paciente, como descrito anteriormente. Outro aspeto da invenção é um composto com a fórmula I, ou uma composição farmacêutica que compreende um composto com a fórmula I, para o uso no tratamento ou prevenção de uma 20 ΕΡ2328414Β1 doença, distúrbio ou sintoma aqui delineados, num paciente. Kits farmacêuticos A presente invenção também proporciona kits para uso no tratamento de distúrbios do sistema nervoso central, incluindo a ansiedade e convulsões, e dor neuropática, inflamatória e associada à enxaqueca. Estes kits compreendem (a) uma composição farmacêutica que compreende um composto com a fórmula I ou um sal do mesmo, em que a dita composição farmacêutica está num recipiente, e (b) instruções que descrevem um método para usar a composição farmacêutica no tratamento de distúrbios do sistema nervoso central, incluindo a ansiedade e convulsões, e dor neuropática, inflamatória e associada à enxaqueca. 0 recipiente pode ser qualquer frasco ou outro dispositivo lacrado ou capaz de ser lacrado, que possa conter a dita composição farmacêutica. Os exemplos incluem garrafas, ampolas, garrafas divididas ou com múltiplas câmaras, em que cada divisão ou câmara compreende uma dose única da dita composição, uma embalagem de alumínio dividida em que cada divisão compreende uma dose única da dita composição, ou um distribuidor que dispense doses únicas da dita composição. 0 recipiente pode estar em qualquer configuração ou forma, tal como conhecida na tecnologia, que é feita de um material farmaceuticamente aceitável, por exemplo, uma caixa de papel ou de cartão, uma garrafa ou frasco de vidro ou plástico, uma bolsa capaz de ser novamente lacrada (por exemplo, para conter uma "recarga" de comprimidos para colocação num recipiente diferente), ou uma embalagem alveolar com doses individuais para serem pressionadas para fora da embalagem de acordo com um regime terapêutico. 0 recipiente empregue pode depender da forma de dosagem exata envolvida, por exemplo, 21 ΕΡ2328414Β1 uma caixa de cartão convencional não será geralmente utilizada para conter uma suspensão liquida. É possível que possa ser utilizado mais do que um recipiente numa embalagem única, para comercializar uma forma de dosagem unitária. Por exemplo, os comprimidos podem estar contidos numa garrafa que, por sua vez, está contida numa caixa. Numa realização, o recipiente é uma embalagem alveolar.

Os kits desta invenção também podem compreender um dispositivo para administrar ou medir uma dose unitária da composição farmacêutica. Tal dispositivo pode incluir um inalador se a dita composição é uma composição inalável, uma seringa e agulha se a dita composição é uma composição injetável, uma seringa, colher, bomba ou um recipiente com ou sem marcações de volume se a dita composição é uma composição oral líquida, ou qualquer outro dispositivo de medida ou libertação apropriado para a formulação da dosagem da composição presente no kit.

Em determinadas realizações, os kits desta invenção podem compreender num reservatório separado do recipiente, uma composição farmacêutica que compreende um segundo agente terapêutico, tal como um daqueles listados anteriormente, para uso na co-administração com um composto desta invenção.

EXEMPLOS

Exemplo 1. Síntese de 7-(terc-butil-d9) -3-(2,5- difluorfenil)-6-((1-metil-lH-1,2,4-triazol-5-il)metoxi)-[1,2,4]triazol[4,3~b]piridazina (composto 103). 0 composto 103 foi preparado a partir de intermediários apropriadamente deuterados, tal como ilustrado de forma geral no esquema 1 anteriormente. 22 ΕΡ2328414Β1

Etapa 1. 4-(terc-butil-d9) -3, 6-dicloropiridazina (12a). Foi adicionado ácido sulfúrico concentrado (5,7 ml, 108 mmol) a uma suspensão de 3,6-dicloro-piridazina 11 recém purificada (5,4 g, 33,5 mmol), em água destilada (130 ml). A mistura foi aguecida a 65 °C e foi adicionado ácido trimetilacético-dg 10a (6,0 g, 54 mmol, CDN Isotopes, 99 % de átomo D), seguido por nitrato de prata (1,1 g, 7 mmol). Foi adicionada à mistura uma solução de peroxidisulfato de amónia (12,3 g, 54 mmol) em água destilada (35 ml), durante um período de 10-15 minutos, enguanto se mantinha a temperatura da reação a 65 °C - 75 °C. A mistura foi agitada durante 30 minutos e arrefecida até à temperatura ambiente. A mistura foi vertida sobre gelo (100 g) e o pH da mistura foi ajustado para pH = 9-10 com hidróxido de amónia concentrado. A mistura aquosa foi extraída com diclorometano (2 x 30 ml) . Os extratos combinados foram lavados com hidróxido de sódio a 1 N (10 ml), secos sobre Na2S04, filtrados e concentrados sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica, eluindo com acetato de etilo a 10 % / heptanos, para se obter 6,1 g (80 %) de 12a como um óleo incolor.

Etapa 2. 7-(terc-butil-dg)-6-cloro-3-(2,5-difluofenil)-[1,2,4]-triazol[4,3~b]piridazina (14a) ♦ Uma mistura de 12a (6 g, 28 mmol), 13 (7,2 g, 42 mmol, disponível comercialmente) e cloridreto de trietilamina (5,8 g, 42 23 ΕΡ2328414Β1 mmol) em xileno (30 ml) foi aquecida a 150 °C com agitação, durante 36 horas. Depois de arrefecida até à temperatura ambiente, a mistura foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi triturado com diclorometano (40 ml), filtrado, e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia em gel de sílica, eluindo com 20-50 % de acetato de etilo / heptanos, para se obter 5,6 g (60 %) de 14a como um sólido esbranquiçado.

Etapa 3. 7-(terc-butil-dg)-3-(2,5-difluorfenil)-6-((1- metil-lH-1,2,4-triazol-5-il)metoxi)-[l,2,4]triazol[4,3-b]piridazina (composto 103). A uma solução de (1-metil-lH-1,2,4-triazol-5-il)metanol 15a (0,45 g, 4,0 mmol, disponível comercialmente) em DMF (20 ml) foi adicionado hidreto de sódio a 60 % em óleo mineral (0,17, 4,3 mmol). A mistura foi agitada durante 15 minutos e foi adicionado 14a (1,2 g, 3,6 mmol). A mistura foi agitada durante 3 horas à temperatura ambiente, depois diluída com água (100 ml) . O precipitado foi recolhido por filtração e lavado várias vezes com água. O produto bruto foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica, eluindo com 5 % de metanol / diclorometano. O produto foi purificado adicionalmente por recristalização a partir de acetato de etilo - heptanos (1:1) para dar 1,25 g (78 %) do composto 103 como um sólido branco. 1H-RMN (300 MHz, CDC13) : δ 3, 91 (s, 3H), 5,55 (s, 2H) , 7,23-7,28 (m, 2H) , 7, 62-7, 68 (m, 1H), 7,93 (s, 1H) , 8,00 (s, 1H) . 13C-RMN (75 MHz, CDC13) : δ 34,55, 35, 66, 59, 37, 115, 58 (dd, Ji = 16,6, J2 = 9,2), 117,63 (dd, Ji = 25,8, J2 = 6,6), 117,72 (dd, Ji = 24,5, J2 = 12,2), 118,72 (dd, Ji = 24,0, J2 = 8,5), 121,74, 137,85, 143,47, 145,00, 149,49, 151,13, 155,70 (d, J = 160,9),

159,01 (d, J = 155,9), 158,70. HPLC (método: coluna C18-RP

Water Atlantis T3 2,1x50 mm 3 pm - gradiente do método 5-95 % ACN + ácido fórmico a 0,1 % em 14 min (1,0 ml/min) com 4 24 ΕΡ2328414Β1 min de espera em ACN a 95 %, comprimento de onda: 254 nm), tempo de retenção: 5,41 min, 99,3 % de pureza. MS (M+H) : 409,2. Análise elementar (C19H10D9F2N7O) : calculada: C = 55,88. H = 4,69, N = 24,01, encontrada: C = 55,98, H = 4,53, N = 23,98.

Exemplo 2. Síntese de (l-(metil-d3)-lH-l,2,4-triazol-5-il)-1, l-d2~metanol (15b) . O intermediário 15b foi preparado a partir de intermediários apropriadamente deuterados, como ilustrado em geral no esquema 2 anteriormente. cd3

15b 25 ΕΡ2328414Β1

Etapa 1. 1-(metil-ch)-1H-1,2,4-triazol (17a). Num

frasco equipado com um agitador mecânico sob atmosfera de nitrogénio, foi adicionado 1,2,4-triazol 16 (6,0 g, 87 mol) a THF anidro (60 ml), seguido pela adição de iodometano-d3 (6,5 ml, 1,05 mol, Cambridge Isotopes 99 % de átomo D). A mistura turva foi arrefecida até 0 °C e foi adicionado 1,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno "DBU" (13,2 ml, 0,87 mol) durante 20 minutos. A mistura foi deixada aquecer lentamente até à temperatura ambiente, e foi agitada durante a noite. A mistura foi então filtrada através de uma almofada de Celite, e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para dar 7,3 g (> 100 %) de 17a bruto como um óleo amarelo. GCMS mostrou uma pureza de 90 %. A proporção de regioisómeros era de 12:1.

Etapa 2. (1- (metil-d3) - lH-l,2,4-triazol-5-il)-l, l-d2- metanol (15b). Uma mistura de 17a (5 g, 58 mmol) e paraformaldeído-d2 (10 g, 333 mmol, Cambridge Isotopes, 99 % de átomo D) foi aquecida num tubo lacrado a 170 °C, durante 5 horas. A mistura foi arrefecida até à temperatura ambiente, e diluída com diclorometano (20 ml). O sólido foi removido por filtração, e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia sobre uma coluna curta de gel de sílica, eluindo com 75 % de THF / heptanos para dar 4,8 g (71 %) de 15b como um sólido esbranquiçado.

Exemplo 3. Síntese de 7-(terc-butil-d$) -3-(2,5-difluorfenil)-6-( (1- (metil-d3) -1H-1, 2,4-triazol-5-il)-1,1-d2-metoxi)-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazina (composto 105). O composto 105 foi preparado a partir de intermediários apropriadamente deuterados, como ilustrado em geral no esquema 1 anteriormente. 26 ΕΡ2328414Β1

7-(terc-butil-dg) -3-(2,5-difluorfenil)-6-((1-(metil-d3-lH-l,2,4-triazol-5-il)-l,l-d2-metoxi)-[l,2,4]-triazol [4,3-b]piridazina (composto 105). Foi adicionado a uma solução de 15b (0,24 g, 2,0 mmol) em DMF (20 ml), hidreto de sódio a 60 % em óleo mineral (0,08, 2,1 mmol) . A mistura foi

agitada durante 15 minutos, e foi adicionado 14a (0,6 g, 1,8 mmol, veja-se o exemplo 1) . A mistura foi agitada durante 3 horas à temperatura ambiente, e depois diluída com água (100 ml). O precipitado foi recolhido por filtração e lavado várias vezes com água. O produto bruto foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica, eluindo com 5 % de metanol / diclorometano. O produto foi purificado adicionalmente por recristalização a partir de acetato de etilo / heptanos (1:1) para dar 0,52 g (70 %) de composto 105 como um sólido branco. 1H-RMN (300 MHz, CDC13) : δ 7,23-7,28 (m, 2H) , 7, 63-7, 67 (m, 1H) , 7,92 (s, 1H) , 8,00 (s, 1H) . 13C-RMN (75 MHz, CDC13) : ausência de sinais em 35,66 e 59,37. HPLC (método: coluna C18-RP Waters Atlantis T3 2,1x50 mm 3 μπι - gradiente do método 5-95 % de ACN + ácido fórmico a 0,1 % em 14 min (1,0 ml/min) com espera de 4 min em ACN a 95 %, comprimento de onda: 254 nm) , tempo de retenção: 5,40 min, 99,0% de pureza. MS (M+H) : 414,3. Análise elementar (C19H5D14F2N7O) : calculada: C = 55,20, H = 4,63, N = 23,72, F = 9,19. Encontrada: C = 54,88, H = 4,45, N = 23, 46, F = 9,59.

Exemplo 4. Síntese de (1-(metil-d3)-1H-1,2,4-triazol-5- 27 ΕΡ2328414Β1 il)-metanol (15c). 0 intermediário 15c foi preparado a partir de intermediários apropriadamente deuterados, como ilustrado em geral no esquema 2 anteriormente. ΕΡ2328414Β1 cd3

15c (1-(metil-d3)-1H-1,2,4-triazol-5-il)-metanol (15c) . Uma mistura de 17a (5 g, 58 mmol, veja-se o exemplo 2) e paraf ormaldeido (10 g, 333 mmol) foi aquecida num tubo lacrado a 170 °C, durante 5 horas. A mistura foi arrefecida até à temperatura ambiente, e diluída com diclorometano (20 ml) . O sólido foi removido por filtração, e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia sobre uma coluna curta de gel de sílica, eluindo com 5 % de metanol / diclorometano para dar 5,0 g (75 %) de 15c como um sólido esbranquiçado

Exemplo 5. Síntese de 7-(terc-butil-d9) -3-(2,5- difluorfenil)-6-((1-(metil-d3) -1H-1,2,4-triazol-5-il)-metoxi)-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazina (composto 104). O composto 104 foi preparado a partir de intermediários apropriadamente deuterados, como ilustrado em geral no esquema 1 anteriormente. çd3

28 104 ΕΡ2328414Β1

7- (terc-butil-dg) - (2,5-difluorfenil) -6- ( (1- (metil-d3) -lH-l,2,4-triazol-5-il)-metoxi)-[l,2,4]triazol[4,3-bjpiridazina (composto 104). Foi adicionado a uma solução de 15c (0,46 g, 4,0 mmol) em DMF (20 ml), hidreto de sódio a 60 % em óleo mineral (0,17 g, 4,3 mmol) . A mistura foi agitada durante 15 minutos, e foi adicionado 14a (1,2 g, 3, 6 mmol, veja-se o exemplo 1) . A mistura foi agitada durante 3 horas à temperatura ambiente, e depois diluida com água (100 ml). O precipitado foi recolhido por filtração, e lavado várias vezes com água. O produto bruto foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica, eluindo com 5 % de metanol / diclorometano. O produto foi purificado adicionalmente por recristalização a partir de acetato de etilo / heptanos (1:1) para dar 1,31 g (88 %) de composto 104 como um sólido branco. 1H-RMN (300 MHz, CDC13) : δ 5,55 (s, 2H) , 7,23-7,28 (m, 2H) , 7, 62-7, 67 (m, 1H) , 7,93 (s, 1H) , 8,00 (s, 1H) . 13C-RMN (75 MHz, CDC13) : δ 34,55, 59,36, 115,53 (dd, Ji = 16,6, J2 = 8,8), 117,63 (dd, Ji = 24,4, J2 = 12,8), 117,71 (dd, Jx = 24,1, J2 = 8,0), 118,77 (dd, J2 = 23,9, J2 = 8,5), 121,75, 137,85, 143,48, 145,00, 149,50, 151,15, 155,76 (d, J = 163,5), 159,08 (d, J = 156,9), 158,71. HPLC (método: coluna C18-RP Waters Atlantis T3 2,1x50 mm 3 pm - gradiente do método 5-95 % de ACN + ácido fórmico a 0,1 % em 14 min (1,0 ml/min) com espera de 4 min em ACN a 95 %, comprimento de onda: 254 nm), tempo de retenção: 5,40 min, 99,6% de pureza. MS (M+H) : 412,2. Análise elementar (Ci9H7Di2F2N70) : calculada: C = 55,47, H = 4,67, N = 23,83. Encontrada: C = 55,49, H = 4,76, N = 23,87.

Exemplo_6^_Síntese_de_7-terc-butil-3- (2,5- difluorfenil)-6-((1- (metil-d3) -1H-1,2,4-triazol-5-il)-1,1-d2-metoxi)-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazina (composto 101). O composto 101 foi preparado a partir de intermediários apropriadamente deuterados, tal como ilustrado em geral no 29 ΕΡ2328414Β1 esquema 1 anteriormente.

7-terc-butil-3-(2,5-difluorfenil)-6-((1-(metil-d3) -1H-l,2,4-triazol-5-il)-l,l-d2-metoxi)[l,2,4]triazol[4,3-b]piridazina (Composto 101). Foi adicionado a uma solução de 15b (0,24 g, 4,0 mmol, veja-se o exemplo 2) em DMF (10 ml), hidreto de sódio a 60 % em óleo mineral (0,08 g, 2,1 mmol) . A mistura foi agitada durante 15 minutos, e foi adicionado o composto conhecido 7-terc-butil-6-cloro-3-(2,5-difluorfenil)-[l,2,4]triazol[4,3-b]piridazina, 14b (0,58 g, 1,8 mmol, preparado como descrito no pedido de patente WO1998004559). A mistura foi agitada durante 3 horas à temperatura ambiente, e depois foi diluída com água (100 ml) . O precipitado foi recolhido por filtração, e lavado várias vezes com água. O produto bruto foi purificado por cromatografia de coluna em gel de sílica, eluindo com 75 % de THF / heptanos. O produto foi purificado adicionalmente por recristalização a partir de acetato de etilo / heptanos (1:1) para dar 0,53 g (72 %) de composto 101 como um sólido branco. 1H-RMN (300 MHz, CDC13) : δ 1,41 (s, 9H) , 7,23-7,28 (m, 2H) , 7, 62-7, 68 (m, 1H) , 7,92 (s, 1H) , 8,00 (s, 1H) . 13C-RMN (75 MHz, CDC13) : aparecimento de sinal em 28, 96, ausência de sinal em 35, 66 e 59,36. HPLC (método: coluna C18-RP Waters Atlantis T3 2,1x50 mm 3 pm - gradiente do método 5-95 % de ACN + ácido fórmico a 0,1 % em 14 min (1,0 ml/min) com espera de 4 min em ACN a 95 %, comprimento de onda: 254 nm) , tempo de retenção: 5,42 min, 99,7 % de pureza. MS (M+H) : 405,3. 30 ΕΡ2328414Β1

Análise elementar (C19H14D5F2N7O) : calculada: C = 56,43, H = 4,74, N = 24,25 F = 9,40. Encontrada: C = 56,22, H = 4,73, N = 23,87, F = 9,35.

Exemplo 7. Avaliação da estabilidade metabólica. Foram obtidos microssomas de fígado humano (20 mg/ml) e microssomas de fígado de rato (20 mg/ml) da Xenotech, LLC (Lenexa, KS) . Foram comprados na Sigma-Aldrich o fosfato de β-nicotinamida adenina dinucleotideo, forma reduzida (NADPH), o cloreto de magnésio (MgCl2) e o dimetilsulfóxido (DMSO) .

Determinação da estabilidade metabólica: Foram preparadas em DMSO soluções stock a 7,5 mM de compostos de teste (L-838417, composto 101, composto 103, composto 104 e composto 105) . As soluções stock a 7,5 mM foram diluídas para 12,5 μΜ em acetonitrilo (ACN). Os 20 mg/ml de microssomas de fígado (tanto humano quanto de rato) foram diluídos para 2,5 mg/ml em tampão de fosfato de potássio a 0,1 M, pH 7,4, contendo MgCl2 a 3 mM. Os microssomas diluídos (375 μΐ) foram adicionados em triplicado a poços de uma placa de polipropileno com 96 poços fundos. Foram adicionados 10 μΐ do composto de teste a 12,5 μΜ aos microssomas, e a mistura foi pré-aquecida durante 10 minutos. As reações foram iniciadas pela adição de 125 μΐ de solução de NADPH pré-aquecida. O volume final da reação era de 0,5 ml, e continha 0,5 mg/ml de microssomas de figado humano, 0,25 μΜ de composto de teste e 2 mM de NADPH em 0,1 M de tampão de fosfato de potássio, pH 7,4 e MgCl2 a 3 mM. As misturas de reação foram incubadas a 37 °C, e foram removidas alíquotas de 50 μΐ aos 0, 5, 10, 20 e 30 minutos, e adicionadas a placas de 96 poços rasos, que continham 50 μΐ de ACN gelado com padrão interno para parar as reações. As placas foram armazenadas a 4 °C durante 20 minutos, depois dos quais foram adicionados 100 μΐ de água 31 ΕΡ2328414Β1 aos poços da placa antes da centrifugação para formar precipitados das proteínas precipitadas. Os sobrenadantes foram transferidos para outra placa de 96 poços, e analisados quanto às quantidades parentais remanescentes por LC-MS/MS, utilizando um espectrómetro de massa API 4000 da Applied Biosystems. A 7-etoxicumarina (1 μΜ) foi utilizada como controlo positivo.

Análise dos dados: As ti/2 in vitro para os compostos de teste foram calculadas a partir da relação das inclinações da regressão linear da % de parental remanescente (ln) vs o tempo de incubação, utilizando a fórmula: 11/2 in vitro = 0, 693/k, onde k = -[inclinação da regressão linear da % de parental restante (ln) vs tempo de incubação] A análise dos dados foi executada utilizando o programa Excel da Microsoft.

Os resultados destas experiências são mostrados nas figuras 1 (microssomas de fígado humano) e 2 (microssomas de fígado de rato) . Como mostrado na figura 1, aproximadamente 70 % de L-838417 permaneceu intacto depois de 30 minutos de incubação com os microssomas de fígado humano. A meia-vida de L-838417 foi calculada ser de 54,4 minutos. Em contrapartida, cada um dos compostos 101, 103, 104 e 105 foram estáveis em microssomas de fígado humano (mais de 80 % do composto parental permaneceu intacto depois de 30 minutos de incubação).

Nos microssomas de fígado de rato, aproximadamente 70 %, tanto de L-838417 como do composto 101, permaneceram intactos depois de 30 minutos de incubação (fig. 2) . As meias-vidas calculadas foram de 50,5 minutos para o L- 32 ΕΡ2328414Β1 838417 e de 52,7 minutos para o composto 101. Mais do que 80 % de cada um dos compostos 103, 104 e 105 permaneceram intactos depois de 30 minutos de incubação e, cada um foi considerado estável em microssomas de rato.

Exemplo 8. Análise da farmacocinética e da biodisponibilidade dos compostos 103 e 105 depois da administração oral e intravenosa a ratos. Três ratos machos Sprague-Dawley (200-250 g cada) foram canulados na veia jugular, e foram administrados com uma dose única contendo 2 mg/kg de cada um de L-838417, composto 103 e composto 105 (como uma mistura 1:1:1 contendo 2 mg/ml de cada um dos três compostos em dimetilsulfóxido a 10 % (DMSO) , N,N-dimetilacetamida a 10 % (DMA) e polietileno glicol a 60 % (PG) ) através da cânula da jugular. Três ratos machos Sprague-Dawley adicionais (200-250 g cada) foram administrados com uma dose única contendo 2 mg/kg de cada um de L-838417, composto 103 e composto 105 (como uma mistura 1:1:1 contendo 1 mg/ml de cada um dos três compostos em dimetilsulfóxido a 10 % (DMSO), N,N-dimetilacetamida a 10 % (DMA) e polietileno glicol a 60 % (PG)) por sonda oral. O sangue (0,25 ml) dos ratos de teste tratados por via intravenosa foi recolhido retro-orbitalmente aos 2, 5, 15 e 30 minutos e 1, 2, 4 e 6 horas depois da dosagem. O sangue (0,25 ml) dos ratos de teste tratados oralmente foi recolhido retro-orbitalmente aos 5, 15, 30 e 45 minutos e 1, 2, 4 e 6 horas depois da dosagem. O sangue foi recolhido em tubos contendo K2EDTA como anticoagulante nos pontos de tempo mencionados anteriormente. As amostras de sangue foram armazenadas em gelo e depois centrifugadas para obter plasma. O plasma (~ 0,125 pL) foi aliquotado em placas de 96 poços fundos, e armazenado a - 80 °C até a análise por LC-MS/MS utilizando um espectrómetro de massa API4000 da 33 ΕΡ2328414Β1

Applied Biosystems.

Os resultados da porção intravenosa deste estudo são mostrados na figura 3 e na tabela 2 que se segue.

Tabela 2. Farmacocinética de L-838417, composto 103 e composto 105 depois da administração intravenosa a ratos

Sprague-Dawley. L-838417 Composto 103 % Alteração em relação a L-838417 Composto 105 % Alteração em relação a L-838417 tl/2 (h) 0,7 ± 0,04 1,25 ± 0,14 + 79 1,27 ± 0,14 + 81 CL (1/h/kg) 1,1 ± 0,11 0,48 ± 0,05 - 62 0,46 ± 0,05 - 60 auc0_6 (h*ng/ml) 831 ± 86 1920 ± 200 + 131 1957 ± 190 + 136

Estes resultados demonstram que os compostos 103 e 105 têm cada um uma meia-vida aproximadamente 80 % mais longa, e produzem uma AUCo-6 maior do que duas vezes mais do que o L-838417 não deuterado, depois da administração por via intravenosa a ratos. Adicionalmente, ambos os compostos 103 e 105 são cada um depurados aproximadamente 60 % mais lentamente do que o L-838417.

Os resultados da porção da administração oral deste estudo são mostrados na figura 4 e na tabela 3 que se segue.

Tabela 3. Farmacocinética de L-838417, composto 103 e composto 105 depois da administração oral a ratos Sprague- _Dawley.__ L-838417 Composto 103 % Alteração em relação a L-838417 Composto 105 % Alteração em relação a L-838417 Cmáx (ng/ml) 128 ± 40 277 ± 76 + 116 280 ± 80 + 119 auc0_6 (h*ng/ml) 491 ± 95 1258 ± 289 + 156 1248 ± 272 + 154

Estes resultados mostram que os compostos 103 e 105 34 ΕΡ2328414Β1 demonstram uma CmáX maior do que duas vezes mais do que o L-838417 depois da administração oral a ratos. Adicionalmente, os resultados mostram que os compostos 103 e 105 produzem uma AUCo-6 maior do que duas vezes e meia mais do que o L-838417 não deuterado depois da administração oral.

Sem uma descrição adicional, acredita-se que aquele com qualificações na tecnologia pode, utilizando a descrição precedente e os exemplos ilustrativos, fazer e utilizar os compostos da presente invenção e praticar os métodos reivindicados. Deve ser entendido que a discussão mencionada anteriormente e os exemplos, apresentam meramente uma descrição detalhada de certas realizações preferidas. 35 ΕΡ2328414Β1

DOCUMENTOS REFERIDOS NA DESCRIÇÃO

Esta lista de documentos referidos pelo autor do presente pedido de patente foi elaborada apenas para informação do leitor. Não é parte integrante do documento de patente europeia. Não obstante o cuidado na sua elaboração, o IEP não assume qualquer responsabilidade por eventuais erros ou omissões.

Documentos de patente referidos na descrição • WO 9804559 A [0032] • WO 0044752 A [0032] • WO 1998004559 A [0053] [0078] • WO 2000044752 A [0053] • WO 2006061428 A [0053]

Literatura não relacionada com patentes referida na descrição • WADA, E et al. Seikagaku, 1994, vol. 66, 15 [0010] • GANNES, LZ et al. Comp Biochem Physiol Mol Integr Physiol, 1998, vol. 119, 725 [0010] • DALLACKER F et al. Chemiker-Zeitung, 1986, vol. 110, 101-108 [0036] • DALLACKER F et al. Chemiker-Zeitung, 1986, vol. 110, 275-281 [0036]

• LAROCK R. Comprehensive Organic Transformations. VCH

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Organic Synthesis. John Wiley and Sons, 1994 [0038] • Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis. John Wiley and Sons, 1995 [0038] 36 ΕΡ2328414Β1 REMINGTON. The Science and Practice of Pharmacy. Lippincott Williams & Wilkins, 2000 [0042] FREIREICH et al. Câncer Chemother. Rep, 1966, vol. 50, 219 [0047]

Scientific Tables, Geigy Pharmaceuticals. Ardsley, 1970, 537 [0047]

Pharmacotherapy Handbook. Appleton and Lange, 2000 [0050] [0057] PDR Pharmacopoeia, Tarascon Pocket Pharmacopoeia. Tarascon Publishing, 2000 [0050] PDR Pharmacopoeia. Tarascon Publishing, 2000 [0057]

Lisboa, 10 de Março de 2014 37

Claims

ΕΡ2328414Β1 REIVINDICAÇÕES 1. Um composto com a fórmula I:

ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: R1 é CH3, CDH2, CD2H, ou CD3, R2 é um grupo t-butilo que tem 0-9 átomos de deutério, cada Y é independentemente hidrogénio ou deutério, e quando R1 é CH3 e cada Y é hidrogénio, então R2 tem 1-9 átomos de deutério.
2. O composto da reivindicação 1, em que R1 é CH3 ou CD3.
3. O composto de qualquer uma das reivindicações 1 a 2, em que Yla e Ylb são iguais.
4. O composto de qualquer uma das reivindicações 1 a 3, em que R2 é -C(CD3)3.
5. O composto da reivindicação 1, selecionado a partir de qualquer um dos compostos indicados na tabela que se segue: Composto R1 R2 yla ylb Y2 101 cd3 -C (CH3) 3 D D H 102 ch3 -c (CD3) 3 D D H 103 ch3 -C(CD3)3 H H H 104 cd3 -c (CD3) 3 H H H 1 ΕΡ2328414Β1 105 cd3 -C(CD3)3 D D H 106 cd3 -c(ch3)3 H H H 107 ch3 -c(ch3)3 D D H 108 cd3 -C(CH3)3 D D D 109 ch3 -c(cd3)3 D D D 110 ch3 -c(cd3)3 H H D 111 cd3 -c(cd3)3 H H D 112 cd3 -c(cd3)3 D D D 113 cd3 -C(CH3)3 H H D 114 ch3 -c(ch3)3 D D D ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
6. 0 composto de qualquer uma das reivindicações 1 a 5, em que qualquer átomo não desiqnado como deutério em qualquer uma das realizações indicadas anteriormente, está presente na sua abundância isotópica natural.
7. 0 composto da reivindicação 5 tendo a fórmula

ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que qualquer átomo não designado como deutério no dito composto, está presente na sua abundância isotópica natural.
8. 0 composto da reivindicação 5 tendo a fórmula 2 ΕΡ2328414Β1 cd3

F 104 ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que qualquer átomo não desiqnado como deutério no dito composto, está presente na sua abundância isotópica natural.
9. 0 composto da reivindicação 5 tendo a fórmula

105 * ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que qualquer átomo não designado como deutério no dito composto, está presente na sua abundância isotópica natural.
10. Uma composição isenta de pirogénio, que compreende um composto de qualquer uma das reivindicações de 1 a 9, e um transportador aceitável, em que a composição está formulada para a administração farmacêutica, em que o transportador é um transportador farmaceuticamente aceitável.
11. A composição da reivindicação 10, que compreende 3 ΕΡ2328414Β1 adicionalmente um segundo agente terapêutico útil no tratamento ou na prevenção de uma doença ou uma condição, selecionada entre distúrbios do sistema nervoso central, dor neuropática, dor inflamatória, e dor associada à enxagueca.
12. Uma composição da reivindicação 10 ou 11, para utilização no tratamento de uma doença ou uma condição, selecionada dos distúrbios do sistema nervoso central, dor neuropática, dor inflamatória, e dor associada com à enxagueca.
13. Uma composição da reivindicação 10 ou 11, para utilização no tratamento de uma doença ou uma condição selecionada entre a ansiedade ou convulsões.
14. Um composto de qualquer uma das reivindicações de 1 a 9, para utilização no tratamento de uma doença ou uma condição, selecionada dos distúrbios do sistema nervoso central, dor neuropática, dor inflamatória, e dor associada com à enxaqueca.
15. Um composto de qualquer uma das reivindicações de 1 a 9, para utilização no tratamento de uma doença ou uma condição selecionada entre a ansiedade ou convulsões. Lisboa, 10 de Março de 2014 4