PT2305244T - Tratamento de doenças associadas à utilização de antibióticos - Google Patents

Description

DESCRIÇÃO

TRATAMENTO DE DOENÇAS ASSOCIADAS À UTILIZAÇÃO DE

ANTIBIÓTICOS

CAMPO DA INVENÇÃO A invenção refere-se ao tratamento ou à prevenção de uma doença num paciente causada pela presença de Staphylococcus aureus resistente à meticilina (MRSA), conforme definido nas reivindicações. 0 assunto aqui divulgado que não está relacionado com o âmbito das reivindicações é fornecido a título de referência.

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO

As doenças de diarreia associada a antibióticos (ADD) são causadas por estirpes produtoras de toxinas de Clostridium difficile (C, difficile), Staphylococcus aureus (S. aureus) incluindo MRSA e Clostridium perfringens (C. perfzdngens) , A AAD representa um grande encargo económico para o sistema de saúde que é estimado moderadamente em 3 a 6 mil milhões de dólares por ano em custos hospitalares excessivos só nos Estados Unidos.

Os enterococos resistentes à vancomicina, que resultam mais geralmente em colonização intestinal, também emergiram como um grande agente patogénico nosocomial associado a uma maior mortalidade e custos de saúde mais elevados. Os VRE podem aparecer como coinfeção em pacientes infetados com C. difficile, ou mais geralmente causam infeção em certos pacientes de alto risco, tais como pacientes de hematologia e oncologia, pacientes em unidades de cuidados intensivos e pacientes que recebem transplantes de órgãos sólidos. A predominância de Staphylococci resistente à meticilina, tal como Staphylococcus aureus resistente à meticilina (MRSA), está a aumentar nos ambientes tanto hospitalares como comunitários. Staphylococci encontra-se na pele e dentro dos tratos digestivo e respiratório, mas pode infetar ferimentos abertos e queimaduras e pode progredir para uma infeção sistémica séria. 0 surgimento de Staphylococci resistente a múltiplos fármacos, especialmente no hospital onde a utilização de antibióticos é frequente e esta pressão seletiva para o organismo resistente aos fármacos é elevada, mostrou ser um desafio para o tratamento destes pacientes. A presença de MR5A na pele de pacientes e profissionais de saúde provoca a transmissão dos organismos resistentes a múltiplos fármacos.

As doenças semelhantes, incluindo, mas não se limitando a, enterocolite por clostridia, diarreia neonatal, enterocolite associada a antibióticos, enterocolite esporádica e enterocolite nosocomial, são igualmente problemas significativos em algumas espécies animais. A AAD é um problema significativo nos hospitais e serviços de saúde de longo prazo e na comunidade. C. dífficile é a principal causa de AAD no ambiente hospitalar, representando aproximadamente 20 % dos casos de AAD e a maioria dos casos de colite associada a antibióticos (AAC). A crescente incidência de diarreia associada a Clostridium dífficile (CDAD) foi atribuída à frequente prescrição de antibióticos de largo espetro a pacientes hospitalizados. A forma mais séria da doença é colite pseudomembranosa (PMC), que se manifesta histologicamente através de colite com placas da mucosa, e clinicamente através de diarreia severa, cólicas abdominais e toxicidade sistémica. A taxa de mortalidade total de CDAD é baixa, mas é muito maior em pacientes que desenvolvem colite severa ou toxicidade sistémica. Um estudo recente mostrou que mesmo quando não se atribui diretamente a morte C. difficile, a taxa de mortalidade em pacientes CDAD em comparação com controlos de caso correspondente é muito superior. A diarreia e a colite são causadas através da elaboração de uma ou mais toxinas C. difficile. 0 organismo prolifera no cólon dos pacientes que receberam antibióticos de largo espetro ou, menos geralmente, quimioterapia para cancro. A CDAD é diagnosticada em aproximadamente 20 % de pacientes hospitalizados que desenvolvem diarreia após tratamento com esses agentes.

Atualmente, existem duas terapias dominantes para CDAD: vancomicina e metronidazol. A vancomicina não é recomendada para o tratamento de primeira linha de CDAD principalmente porque se trata do único antibiótico ativo contra algumas bactérias graves resistentes a múltiplos fãrmacos que podem ser fatais. Por conseguinte, num esforço para minimizar o surgimento de Enterococcus resistente à vancomicina (VRE) ou Staphylococcus aureus resistente à vancomicina (VRSA), a comunidade médica desencoraja a utilização deste fármaco exceto quando absolutamente necessário. 0 metronidazol é recomendado como terapia inicial numa preocupação pelo desenvolvimento e pela seleção de flora intestinal resistente à vancomicina, especialmente enterococos. Apesar dos relatórios de que a frequência de resistência a C. difficile pode ser >6 % em alguns países, o metronidazol mantém-se quase tão eficaz quanto a vancomicina, é consideravelmente menos dispendioso; e pode ser utilizado por via oral ou intravenosa. 0 metronidazol é associado a efeitos adversos significativos, incluindo náuseas, neuropatia, leucopenia, convulsões e uma reação tóxica ao álcool. Além disso, não é seguro para a utilização em crianças ou mulheres grávidas. A recorrência clínica ocorre no máximo em 20 % dos casos após tratamento com vancomicina ou metronidazol. A terapia com metronidazol foi relatada como sendo um importante fator de risco para a infeção e colonização VRE. Além disso, o atual regime de tratamento é bastante incómodo, necessitando de até 500 mg qid durante 10 a 14 dias. Deste modo, é necessário um melhor tratamento para casos de CDAD, bem como para casos de outras AAD e AAC. O composto 1 contém Tiacumicina B, que pertence a um membro de uma família de macrociclos com 18 membros, Tiacumicinas. As Tiacumicinas são produzidas por bactérias, incluindo Dactylosporangium aurantiacum subespécie hamdenensis, que pode ser obtida a partir da Coleção de Patentes ARS do Northern Regional Research Center, Departamento de Agricultura dos Estados Unidos, 1815 North University Street, Peoria, IL 61604, número de registo NRRL 18085. As características da estirpe AB 718C-41 são fornecidas em J. Antibiotics, 1987, 567 a 574 e Patente de Estados Unidos M.° 4.918.174.

As Tiacumicinas, especifícamente a Tiacumicina B, mostram atividade contra uma variedade de agentes patogénicos bacterianos e, em particular, contra Clostridium difficile, uma bactéria Gram-positiva (Antímicrob. Agents Chemother. 1991, 1108 a 1111). Clostridium difficile ê uma bactéria anaeróbia de formação de esporos que causa uma infeção do intestino. A diarreia é o sintoma mais comum, mas também podem ocorrer dor abdominal e febre. Clostridium difficile é um principal agente causador de colite (inflamação do cólon) e diarreia que podem ocorrer após a ingestão de antibióticos. Esta bactéria é sobretudo adquirida em hospitais e serviços de cuidados crónicos. Uma vez que a Tiacumicina B mostra uma atividade promissora contra C. difficile, parte-se do princípio de que a mesma é útil no tratamento de infeções bacterianas, especialmente as do trato gastrointestinal, em mamíferos. Os exemplos desses tratamentos incluem, mas não se limitam ao tratamento de colite e ao tratamento de síndrome do intestino irritável. As Tiacumicinas podem igualmente ser utilizadas no tratamento de cancros gastrointestinais . 0 documento US 5583115Ά descreve utilizações de determinados compostos de tiacumicina. 0 documento WO 2004/014295A descreve métodos, processos e materiais para a produção e recuperação de tiacumicinas. 0 documento WO 98/02447 AI descreve determinados compostos de bromotiacumicina.

Sumário da invenção A presente invenção refere-se ao composto que tem a fórmula (II) para a utilização no tratamento ou na prevenção da doença, conforme definido nas reivindicações.

As doenças de exemplo são diarreia associada a antibióticos, colite, colite pseudomembranosa, infeção na corrente sanguínea e autismo.

Num aspeto relacionado, a invenção inclui o composto da fórmula (II) para a utilização num método de inibição do início de uma condição associada a antibióticos num paciente que necessite do mesmo. A condição associada a antibióticos pode ser diarreia associada a antibióticos, colite ou colite pseudomembranosa, ou pode ser outra doença causada pela presença de C. difficile, C. perfz'ingens, espécie Staphylococcus ou Enterococcus toxigénicos incluindo enterococos resistentes à vancomicina (VRE).

Noutro aspeto relacionado, a invenção inclui o composto da fórmula (II) para a utilização num método de inibição da recorrência de diarreia associada a antibióticos no paciente. A invenção inclui igualmente o composto da fórmula (II) para a utilização num método de tratamento de uma doença causada por uma infeção bacteriana do cólon (p. ex., diarreia associada a antibióticos ou colite pseudomembranosa) através da administração a um paciente que necessite do mesmo de uma quantidade eficaz do Composto I numa formulação farmacêutica que permite a libertação do

Composto I no trato gastrointestinal do paciente. Esta formulação farmacêutica pode tratar infeções gastrointestinais causadas por estirpes toxigénicas de C. difficile, C. perfringens ou espécie Staphylococcus ou Enterococcus incluindo enterococos resistentes à vancomicina (VRE). A invenção inclui igualmente o composto da formula (II) para a utilização num método de tratamento ou prevenção de uma doença bacteriana associada à utilização de quimioterapias para cancro e terapias antivirais num paciente que necessite do mesmo. A doença pode ser causada, por exemplo, pela presença de uma bactéria, tais como estirpes produtoras de enterotoxinas ou C. difficile, C. perfringens ou Staphylococcus sp., ou Enterococcus incluindo enterococos resistentes à vancomicina (VRE). A invenção inclui igualmente o composto da fórmula (II) para a utilização numa doença causada ou exacerbada pela infeção bacteriana do trato gastrointestinal num subconjunto de crianças autistas.

Em qualquer uma das divulgações anteriores, o Composto I é habitualmente administrado numa quantidade entre 10 mg e 1 g, embora possam ser necessárias doses superiores ou inferiores. A administração pode ser diária (p. ex., uma a quatro vezes por dia) ou pode ser menos frequente (p. ex., uma vez de dois em dois dias ou uma ou duas vezes por semana). Numa forma de realização desejada, o Composto I é administrado numa quantidade entre 50 e 400 mg uma ou duas vezes por dia. Embora a duração da terapia do Composto I seja determinada caso a caso, habitualmente a administração é durante três a quinze dias. As durações de tratamento mais curtas do que as terapias normais podem ser garantidas com o Composto I. É preferida a administração oral. A invenção inclui igualmente um composto da fórmula (II) para a utilização num método para a prevenção de infeções na pele, no tecido mole ou na corrente sanguínea, ou o tratamento de infeções na pele nos pacientes. A doença pode ser causada pela presença de uma bactéria, tal como S. aureus incluindo MRSA. No método anterior, o Composto I é habitualmente administrado como uma formulação tópica, tal como um elixir ou um creme, utilizada habitualmente entre uma e quatro vezes por dia, mas pode ser mais ou menos frequente. A administração do Composto I pode ser efetuada em conjunção com outras terapias. Por exemplo, o paciente pode igualmente receber uma bioterapia (p. ex. , (Saccharomyces boulardii), ou iogurte oral (p. ex. , preparações Lactobacillus), ou Lactobacillus GG, ou uma imunoterapia (p. ex., imunoglobulina humana, vacina toxoide de C. diffícile) ou um segundo antibiótico (p. ex., vancomicina, bacitracina ou metronidazol). 0 Composto I pode ser coformulado com qualquer um dos apresentados anteriormente, ou pode ser administrado em separado. É igualmente divulgado um método de tratamento ou prevenção de infeção de não humanos através de Clostridium spp., incluindo, mas não se limitando a, C. difficile, C. perfringens, C. botulinum, C. septicum, C. sordelli, C. cadaveris, C, paraputrificum, C. spiroforme e C. butyricum, ou através da espécie Enterococcus. É igualmente divulgado um método de tratamento de uma doença causada por uma infeção bacteriana do trato gastrointestinal de não humanos através da administração a um paciente que necessite do mesmo de uma quantidade eficaz do Composto I numa formulação farmacêutica que permita a libertação do Composto I no trato gastrointestinal do paciente. A infeção pode envolver Clostridium spp., incluindo, mas nao se limitando a, C. d±fficile, C. perfringens, C. botulinum, C. septicum, C. sordelli, C. cadaveris, C. paraputrificum, C. spiroforme e C. butyricum ou a espécie Enterococcus.

Num aspeto relacionado, a invenção inclui um composto da fórmula (II) para a utilização no método de inibição do início de uma condição associada a antibióticos num não humano. A condição associada a antibióticos pode ser diarreia associada a antibióticos, colite ou colite pseudomembranosa, ou pode ser outra doença causada pela presença de C. dífficile, C. perfringens, espécie

Staphylococcus ou Enterococcus toxigénicos incluindo enterococos resistentes à vancomicina (VRE). É igualmente divulgado um método para o tratamento de uma doença relacionada com o tratamento ou a prevenção de infeção de não humanos através de Clostridium spp., incluindo, mas não se limitando a, C. dífficile, C. perfringens, C. botulinum, C. septicum, C. sordelli, C. cadaveris, C. paraputrificum, C. spiroforme e C. butyricum, ou através da espécie Enterococcus quando os não humanos tratados são animais domésticos. É igualmente divulgado um método para o tratamento ou a prevenção de infeção de não humanos através de Clostridium spp., incluindo, mas não se limitando a, C. dífficile, C. perfringens, C. botulinum, C. septicum, C. sordelli, C. cadaveris, C. paraputrificum, C. spiroforme e C. butyricum, ou através da espécie Enterococcus, quando os não humanos são animais domésticos, incluindo, mas não se limitando a, cavalos e outros equinos, cães e gatos. É igualmente divulgado um método para o tratamento ou a prevenção de infeção de não humanos através de Clostridium spp., incluindo, mas não se limitando a, C. dífficile, C. perfringens, C. botulinum, C. septicum, C. sordelli, C. cadaveris, C. paraputrificum, C. spiroforme e C. butyricum, ou através da espécie Enterococcus, quando os não humanos são cavalos ou outros equinos, e a condição tratada ou prevenida é diarreia neonatal ou de potro, enterocolite por clostridia, enterocolite associada a antibióticos, enterocolite esporádica ou enterocolite nosocomial. 0 tratamento da presente invenção permite o tratamento eficaz de doenças de diarreia associadas a estirpes enterotoxigénicas de C. difficile, S. aureus e C. perfringens sem comprometer os antibióticos sistémicos e sem aumentar os enterococos resistentes à vancomicina (VRE) no intestino. A presente invenção reduz igualmente a presença de VRE no intestino. Outras características e vantagens serão evidentes a partir da descrição.

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DaD V yAv LtAg Γ JÍ 1.7UrLW.u A Figura 1 é um gráfico que ilustra a eficácia comparativa do Composto I, vancomicina ou metronidazol na CDAD induzida por clindamicina em hamsters sírios. A Figura 2 é um Diagrama ORTEP da Estrutura do principal componente do Composto I. nTFQPPTPKn DTPT&T.WÀDÂ Ή& TKfVPTtfPSn

Abreviaturas e Definições AAC = colite associada a antibióticos AAD = diarreia associada a antibióticos ATCC = Coleção Americana de Culturas Celulares iJC = carbono 13 CDAD = diarreia associada a Clostridium difficile EC = colecistite enfisematosa ED50 = dose eficaz 50 HPLC = cromatografia líquida de alto desempenho IR = espetroscopia infravermelha LLOQ = limite inferior de quantificação MIC = concentração inibitória mínima MIC50 = concentração inibitória mínima para inibir 50 % de estirpes bacterianas testadas MICgo = concentração inibitória mínima para inibir 90 % de estirpes bacterianas testadas MRSA = Staphylococcus aureus resistente à meticilina NCCLS = Comité Nacional para Normas de Laboratório Clínico NMR = ressonância magnética nuclear ORTEP = programa Oak Ridge Thermal Ellipsoid Plot PMC = colite pseudomembranosa UV-vis = ultravioleta/visual VRE = enterococos resistentes à vancomicina VRSA = Staphylococcus aureus resistente à vancomicina 0 termo "condição associada a antibióticos" refere-se a uma condição resultante quando a antibioticoterapia perturba o equilíbrio da flora microbiana do intestino, permitindo o desenvolvimento de organismos patogénicos, tais como estirpes produtoras de enterotoxinas de C. difficile, S. aureus e C. perfringens. Estes organismos podem causar diarreia, colite pseudomembranosa e colite, e manifestam-se através de diarreia, urgência, cólicas abdominais, tenesmo e febre entre outros sintomas. A diarreia, quando severa, causa desidratação e as complicações médicas associadas à desidratação. 0 termo "autismo" refere-se a um espetro de distúrbio de desenvolvimento complexo da infância, caracterizado por deficiências pervasivas na interação social, défices na comunicação verbal e não verbal, e padrões comportamentais repetitivos, que se desenvolvem nos primeiros 3 anos de vida. 0 termo "Composto I" refere-se a uma preparação que contém aproximadamente 90 % (em relação a toda a substância antibiótica, através de ensaio HPLC) de Tiacumicina B com uma variação entre 80 e 100 %. As porções restantes consistem essencialmente em pequenas quantidades de compostos relacionados com Tiacumicina B. As preparações deste tipo são descritas em detalhe no pedido PCT PCT/US03/21977, com um número de publicação internacional de WO 2004/014295 A2. Contudo, o Composto I destinado exclusivamente para a utilização em não humanos pode conter menos de 80 % de Tiacumicina B (em relação a toda a substância antibiótica, através de ensaio HPLC). 0 termo "revestimento entérico" refere-se a um revestimento que encapsula uma composição farmacêutica, e previne a ocorrência da libertação e degradação no estômago, ao mesmo tempo que se dissolve rapidamente no ambiente ligeiramente ácido ou de pH neutro do intestino delgado. Outros revestimentos semelhantes incluem erosão dependente do tempo, dependente de pH e enzimática de revestimentos de matriz de polímero. 0 termo "excipiente" refere-se a uma substância inerte adicionada a uma composição farmacológica para facilitar mais a administração de um composto. Os exemplos de excipientes incluem, mas não se limitam a, carbonato de cálcio, fosfato de cálcio, vários açúcares e tipos de amido, derivados de celulose, gelatina, óleos vegetais e polietilenoglicóis. 0 termo "halogéneo" inclui F, Cl, Br e I. 0 termo "macrociclos" refere-se a moléculas orgânicas com grandes estruturas de anel que contêm normalmente mais de 10 átomos. 0 termo "macrociclos com 18 membros" refere-se a moléculas orgânicas com estruturas de anel que contêm 18 átomos. 0 termo "anel com membros" pode abranger qualquer estrutura cíclica, incluindo carbociclos e heterociclos conforme descrito acima. 0 termo "com membros" pretende denotar o número de átomos do esqueleto que constituem o anel. Deste modo, por exemplo, a piridina, o pirano e o tiopirano são anéis com 6 membros e o pirrol, o furano e o tiofeno são anéis com 5 membros. 0 termo "MIC" ou "concentração inibitória mínima" refere-se à concentração mais baixa de um antibiótico que é necessária para inibir o crescimento de um isolado bacteriano in vitro. Um método comum para a determinação da MIC de um antibiótico é preparar diversos tubos com diluições em série do antibiótico, que são depois inoculados com o isolado bacteriano de interesse. A MIC de um antibiótico pode ser determinada a partir do tubo com a concentração mais baixa que não apresenta nenhuma turvação (nenhum crescimento). 0 termo "MIC5o" refere-se à concentração mais baixa de antibiótico necessária para inibir o crescimento de 50 % das estripes bacterianas testadas numa determinada espécie bacteriana. 0 termo "MIC90" refere-se à concentração mais baixa de antibiótico necessária para inibir o crescimento de 90 % das estripes bacterianas testadas numa determinada espécie bacteriana. 0 termo "ORTEP" refere-se ao programa de computador Oak Ridge Thermal Ellipsoid Plot, escrito em Fortran, para desenhar ilustrações de estrutura cristalina. As ilustrações de tipo bali-anã-stick (esfera e vareta) de uma qualidade adequada para publicação são produzidas com esferas ou elipsoides de probabilidade de movimento térmico, derivados de parâmetros anisotrópicos de fator de temperatura, nos sítios atómicos. 0 programa produz igualmente pares estereoscópicos de ilustrações que ajudam na visualização de disposições complexas de átomos e respetivos padrões de movimento térmico correlacionado. 0 termo "paciente" refere-se a um ser humano ou animal que necessita de tratamento médico. Para efeitos desta invenção, os pacientes humanos são habitualmente institucionalizados num serviço de cuidados médicos primários, tal como um hospital ou uma casa de repouso. Contudo, o tratamento de uma doença associada à utilização de antibióticos ou quimioterapias para cancro ou terapias antivirais pode ocorrer numa base de paciente não internado, após a alta de um serviço de cuidados primários, ou pode ser prescrito por um médico para cuidados domiciliares, não em associação com um serviço de cuidados médicos primários. Os animais que necessitam de tratamento médico encontram-se normalmente ao cuidado de um veterinário. 0 termo "portador farmaceuticamente aceitável" refere-se a um portador ou diluente que é farmaceuticamente aceitável. 0 termo "sais farmaceuticamente aceitáveis" refere-se aos derivados de bases orgânicas e inorgânicas farmaceuticamente aceitáveis. Os sais derivados de bases apropriadas incluem metal alcalino (p. ex. , sódio ou potássio), metal alcalinoterroso (p. ex., magnésio), amónio e sais N (Ci-C4 alquil)4+, e afins. Os exemplos ilustrativos de alguns destes incluem hidróxido de sódio, hidróxido de potássio, hidróxido de colina, carbonato de sódio e afins. 0 termo "composição farmacêutica" refere-se a uma mistura de uma ou mais das Tiacumicinas aqui descritas, ou sais fisiologicamente aceitáveis das mesmas, com outros componentes químicos, tais como portadores e/ou excipientes fisiologicamente aceitáveis. A finalidade de uma composição farmacêutica é facilitar a administração de um composto a um organismo. 0 termo "portador fisiologicamente aceitável" refere-se a um portador ou diluente que não cause irritação significativa a um organismo e não anule a atividade biológica e as propriedades do composto administrado. 0 termo "colite pseudomembranosa" ou "enterite" refere-se à formação de material pseudomembranoso (isto é, material composto por fibrina, células epiteliais mucosas e necróticas e leucócitos) devido a inflamação da membrana mucosa do intestino tanto delgado como grosso. 0 termo "açúcar" refere-se geralmente a mono-, di- ou oligossacáridos. Um sacárido pode ser substituído, por exemplo, por glucosamina, galactosamina, acetilglicose, acetilgalactose, N-acetilglucosamina, N-acetil-galactosamina, galactosil-N-acetilglucosamina, ácido N-acetilneuramínico (ácido siálico), etc., bem como por açúcares sulfatados e fosforilados. Para efeitos desta definição, os sacãridos encontram-se na respetiva forma piranose ou furanose. 0 termo "Tiacumicina" conforme aqui utilizado refere-se a uma família de compostos, em que todos compreendem o macrociclo com 18 membros ilustrado abaixo na Fórmula I:

0 termo "Tiacumicina B" conforme aqui utilizado refere-se ao macrociclo com 18 membros ilustrado abaixo na Fórmula II:

A presente invenção refere-se à descoberta inesperada de que as condições associadas a utilização de antibióticos ou quimioterapias para cancro ou terapias antivirais, tais como a diarreia associada a C. difficile, S. aureus ou C. perfringens, podem ser tratadas ou prevenidas através da administração de uma quantidade eficaz do Composto I nos pacientes. As condições associadas a antibióticos do sujeito incluem, mas não se limitam a, diarreia associada a antibióticos, colite pseudomembranosa, colite, prevenção da infeção na corrente sanguínea. Esta descoberta pode ser particularmente relevante nos pacientes em risco de infeções por enterococos, incluindo enterococos resistentes à vancomicina (VRE). A presente invenção inclui compostos e composições úteis para o tratamento e a prevenção de doenças e condições semelhantes em espécies não humanas, incluindo, mas não se limitando a, cavalos e outros equinos, cães e gatos. A presente invenção fornece igualmente terapias de combinação para o tratamento e a prevenção das condições associadas a antibióticos do sujeito. Ao adicionar uma quantidade eficaz do Composto I aos cursos normais de antibióticos de largo espetro, os tratamentos da presente invenção previnem o crescimento de C. diffícile e outras bactérias conhecidas por causarem doenças diarreicas associadas a antibióticos. Os antibióticos utilizados em conjunção com o Composto I nas terapias de combinação da presente invenção incluem, mas não se limitam a, vancomicina, bacitracina e metronidazol. 0 Composto I pode ser coformulado com qualquer um dos apresentados anteriormente, ou pode ser administrado em separado. A presente Invenção fornece igualmente terapias de combinação para o tratamento e a prevenção das condições associadas a antibióticos do sujeito adicionando uma quantidade eficaz do Composto I com uma bioterapia. As bioterapias utilizadas em conjunção com o Composto I da presente invenção incluem, mas não se limitam a, Saccharomyces boulardii e iogurte oral, preparações de Lactobacillus ou Lactobacillus GG. 0 Composto I pode ser coformulado com qualquer um dos apresentados anteriormente, ou pode ser administrado em separado. A presente invenção fornece igualmente terapias de combinação para o tratamento e a prevenção das condições associadas a antibióticos do sujeito adicionando uma quantidade eficaz do Composto I com uma imunoterapia. As imunoterapias utilizadas em conjunção com o Composto I da presente invenção incluem, mas não se limitam a, imunoglobulina humana ou vacina toxoide de C. difficile. 0 Composto I pode ser coformulado com qualquer um dos apresentados anteriormente, ou pode ser administrado em separado. A presente invenção contempla igualmente composições úteis para o tratamento de sintomas associados a condições associadas a antibióticos, que resultam quando os antibióticos permitem o desenvolvimento de determinadas bactérias, tais como estirpes toxigénicas de C. difficile, S. aureus e C. perfringens no intestino. Uma quantidade eficaz do Composto I pode ser combinada com preparações para tratar a desidratação resultante de diarreia crónica, incluindo, mas não se limitando a, fluidos intravenosos ou bebidas de venda livre que contêm eletrõlitos. A presente invenção contempla igualmente composições para a prevenção de infeção na corrente sanguínea, que resulta quando os antibióticos permitem o desenvolvimento de determinadas bactérias, tais como estirpes toxigénicas de C. difficile, C. perfringens, espécie Staphylococcus ou Enterococcus, incluindo enterococos resistentes à vancomicina (VRE) no intestino. A presente invenção contempla igualmente formulações úteis para a prevenção de infeções na pele, no tecido mole e na corrente sanguínea, causadas por organismos resistentes a múltiplos fármacos, tais como, espécie Staphylococcus, incluindo MRSA, que proliferam em condições de utilização e seleção de antibióticos. A presente invenção contempla igualmente composições úteis para o tratamento de sintomas associados a autismo. A flora gastrointestinal anormal pode contribuir para alguns casos de autismo. 0 tratamento com antibióticos, p. ex., vancomicina, resultou num melhoramento nos sujeitos cujos sintomas apareceram depois de os mesmos desenvolverem diarreia crónica a partir do tratamento com antibióticos de largo espetro. A comparação da flora GI entre crianças de controlo e crianças autistas demonstrou números significativos de bactérias anaeróbias, incluindo a espécie Clostridium, nas crianças autistas em oposição às crianças de controlo.

Clostridium difficile C. difficile é um bacilo de formação de esporos anaeróbio gram-positivo e corresponde ao agente patogénico que causa colite/diarreia associada a antibióticos, e quase todos os casos de colite pseudomembranosa. Estas condições desenvolvem-se como um resultado do crescimento excessivo de C. difficile toxigénico que produz uma ou mais toxinas, toxina A e toxina B, no cólon. A toxina A é uma enterotoxina potente e parte-se do princípio de que causa a maioria dos sintomas gastrointestinais. Igualmente, indícios indicaram que as toxinas A e B atuam sinergicamente causando danos nos tecidos. Os efeitos combinados da toxina A e toxina B iniciam uma resposta inflamatória na mucosa do cólon, depois de estabelecida a infeção por C. difficile.

Sintomaticamente, o paciente sofre de cólicas/dores abdominais, tenesmo, urgência, diarreia (incluindo diarreia com sangue) e febre entre outros sintomas. A progressão da doença resulta na morte total da célula da mucosa e no aparecimento de pseudomembranas. É possível a ocorrência de dilatação do cólon, perfuração, peritonite, sépsis e até mesmo a morte. Tal pode ocorrer quando a flora bacteriana normal no cólon é suprimida, p. ex., após o tratamento com agentes antibacterianos de largo espetro. A utilização excessiva de antibióticos, especialmente penicilina, ampicilina, clindamicina e cefalosporina, altera a flora intestinal normal e aumenta o risco de desenvolvimento de infeções por C. difficile, muitas vezes endémicas, em hospitais e ambientes de casas de repouso. A utilização de antibióticos é o principal fator de risco para CDAD. Igualmente, a idade parece ser um fator de risco, uma vez que a maioria dos casos surge em pacientes com 65 ou mais anos de idade. Outros pacientes em risco incluem pacientes pós-operatórios, pacientes que estão a ser submetidos a quimioterapia, pacientes com transplantes de medula óssea e pacientes com o sistema imunitário comprometido. Estas condições imunológicas podem incluir, mas não se limitam a, cancro, malnutrição, infeção com vírus da imunodeficiência humana e distúrbios de tecido conjuntivo (p. ex., lúpus eritematoso, Síndrome de Sjogren). Além disso, estes pacientes encontram-se igualmente em risco relativamente a infeção e colonização VRE (Fry, Pharmanual: Emerging Pathogens and Implícations for the Future (1999) pãgs. 50 a 75) . Deste modo, estas populações podem igualmente beneficiar dos métodos de tratamento e das composições aqui descritos.

Clostridium oerfrincrens C. perfringens é uma bactéria anaeróbia de formação de esporos gram-positiva que pode causar intoxicação alimentar caracterizada por cólicas abdominais intensas e diarreia. A morte pode ocorrer devido a desidratação e outras complicações. C. perfringens pode causar outra condição grave conhecida como enterite necrõtica, igualmente conhecida como síndrome pig-bel, que é muitas vezes fatal. A doença começa como resultado da ingestão de grandes quantidades de C. perfringens em alimentos contaminados. As mortes derivadas de enterite necrótica são causadas pela infeção e necrose dos intestinos e da septicemia resultante .

Outra doença grave que é causada por C. perfringens é colecistite enfisematosa (EC) . Esta é uma forma rara e perigosa de colecistite aguda, caracterizada radiograficamente pela presença de gás dentro da vesícula biliar, da parede da vesícula biliar ou no espaço pericolecístico. A EC é mais comum nos homens e significativamente é diagnosticada com mais frequência em pacientes diabéticos, debilitados e mais idosos. Parte-se do princípio de que a EC é causada pela isquemia subjacente resultante do compromisso vascular, que origina a semeadura secundária da vesícula biliar isquémica com flora intestinal, predominantemente grupo clostridia.

Espécie Staphylococcus A espécie S. aureus coagulase positiva é um agente patogénico nosocomial estabelecido. Este organismo pode causar infeções agudas e piogénicas que, se não forem tratadas, pode espalhar-se para o tecido circundante ou através de bacteriemia para outros órgãos. Algumas das infeções mais graves causadas por S. aureus incluem: bacteriemia, pneumonia, osteomielite, endocardite aguda, miocardite, pericardite, cerebrite, meningite, infeções na pele, tais como síndrome da pele escaldada, e formação de abcessos. S. aureus, incluindo estirpes resistentes à meticilina (MRSA), pode igualmente causar diarreia associada a antibióticos semelhante à causada por C. difficile. A enterocolite estafilocócica pode envolver o íleo terminal e o ceco mais frequentemente em comparação com outras causas de diarreia associada a antibióticos, e ocorre geralmente no ambiente de administração de tetraciclina e cloranfenicol. A espécie Staphylococcus coagulase negativa faz parte da flora normal humana. Estes organismos, especialmente S. epidermidis, foram estabelecidos como causadores de infeções nosocomiais. A hospitalização e a utilização de antibióticos podem

originar infeções, tal como bacteriemia, com a espécie Staphylococcus coagulase negativa em pacientes debilitados. Enterococcus incluindo VRE

Os enterococos são organismos gram-positivos com resistência intrínseca a diversos antibióticos geralmente utilizados, incluindo cefalosporinas, penicilinas resistentes a penicilinase, co-trimoxazol e clindamicina. Além disso, têm a capacidade de adquirir resistência a todos os antibióticos atualmente disponíveis. Até há alguns anos, a vancomicina era o único fármaco que podia ser utilizado para o tratamento de infeções devido a Enterococci resistente a múltiplos fármacos. Com o aparecimento de estirpes VRE, o tratamento com antibióticos de combinação tornou-se difícil e o VRE emergiu como um agente patogénico nosocomial importante causando infeções, tais como bacteriemia, infeções no trato urinário e infeções de ferimentos. A bacteriemia de enterococos nosocomial tem sido associada a uma elevada taxa de mortalidade e uma permanência hospitalar mais prolongada. A utilização de antibióticos, tal como metronidazol, cefalosporinas e fluoroquinolonas de terceira geração, é identificada como um fator de risco para VRE (Carmeli Y, Emerging Infect Dis 2002, 8:802 a 7, Gerding, Clin Infect. Dis 1997, 25 Supl 2:S206 a 10, Lautenbach, Infect Conrol Hosp Epidemiol 1999, 20:318 a 23).

Composto I 0 Composto I é uma preparação que contém aproximadamente 90 % (em relação a toda a substância antibiótica, através de ensaio HPLC) de Tiacumicina B com uma variação entre 80 e 100 %. As porções restantes consistem essencialmente em pequenas quantidades de compostos relacionados com Tiacumicina B. As Tiacumicinas são uma família de compostos relacionados (Tiacumicinas A a F) que contêm os anéis de macrociclos com 18 membros ilustrados na Tabela 1.

As Tiacumicinas A a F têm sido caracterizadas através de espetroscópio e outros métodos físicos. As estruturas químicas das Tiacumicinas baseiam-se na espetroscopia: UV-vis, IR e 1H e 13C NMR. Determinadas características estereoquímicas foram determinadas utilizando experiências NMR homonucleares e heteronucleares 1D e 2D, consulte por exemplo J. Antibiotics, 1987, 575 a 588. No caso da

Tiacumicina B, a estrutura molecular foi confirmada através de difração de raios X (Figura 2) . A estrutura cristalina de raios X da Tiacumicina B foi obtida a partir de um cristal incolor em forma de paralelepípedo (0,08 x 0,14 x 0,22 mm) que cresceu em metanol.

Tabela 1. Tiacumicinas A a F

Dosagens 0 Composto I é administrado oralmente numa quantidade e durante um período de tempo suficientes para tratar CDAD, colite pseudomembranosa ou outras doenças associadas à utilização de antibióticos ou quimioterapias para cancro. Embora a dosagem exata do Composto I suficiente para tratar um determinado paciente possa ser diferente, a dosagem pode ser facilmente determinada por um perito na técnica. Habitualmente, a quantidade do Composto I que é administrada é uma quantidade que mantém a concentração de fezes do antibiótico pelo menos igual à MIC para o organismo-alvo.

Preferencialmente, a quantidade do Composto I que é administrada mantém a concentração de fezes equivalente a duas, três, quatro ou mais vezes a MIC para o organismo-alvo. Deste modo, o regime de tratamento específico pode variar para cada paciente, dependendo da espécie e do padrão de resistência das bactérias gram-positivas identificadas e dos fatores biológicos exclusivos de cada paciente incluindo a comorbidade, etiologia da doença, idade do paciente (pediátrico, adulto, geriátrico), e o estado nutricional e imunitário. A dosagem oral sugerida do Composto I é pelo menos de cerca de 25, 50, 100, 200, 300, 400 ou 500 mg/dia até um máximo de 600, 700, 800, 900 ou 1000 mg/dia durante três a quinze dias. 0 Composto I pode ser fornecido diariamente (p. ex. , uma, duas, três ou quatro vezes por dia) ou menos frequentemente (p. ex., uma vez de dois em dois dias, ou uma ou duas vezes por semana) . Uma dose particularmente adequada é entre 50 e 400 mg BID (duas vezes por dia) . 0 antibiótico pode estar contido em qualquer quantidade apropriada em qualquer substância de portador adequada, e encontra-se geralmente presente numa quantidade de 1 a 99 % em peso do peso total da composição. A composição é fornecida numa forma de dosagem que é adequada para a administração oral e distribui uma quantidade terapeuticamente eficaz do antibiótico ao intestino delgado e grosso, conforme descrito abaixo. 0 Composto I encontra-se disponível como grânulos para solução oral, fornecido, por exemplo, em embalagens que contêm 100 mg do Composto I, juntamente com excipientes farmaceuticamente aceitáveis (p. ex., manitol, hidroxipropilmetilcelulose, estearato de magnésio). 0 conteúdo da embalagem pode ser reconstituído com aproximadamente 15 a 30 mL de água, e a solução resultante consumida diretamente, ou ainda diluída em água, sumo de arando, sumo de maçã ou 7-Up antes de ser bebida. Após o consumo, ao fãrmaco podem seguir-se quantidades subsequentes destas bebidas ou alimentos (p. ex., bolacha salgada, pão). 0 Composto I encontra-se igualmente disponível como um comprimido que contém excipientes farmaceuticamente aceitáveis que são geralmente considerados como sendo seguros. 0 comprimido pode encontrar-se disponível como títulos de 25 mg, 50 mg, 100 mg, 200 mg ou 400 mg.

Em alternativa, o Composto I encontra-se igualmente disponível como cápsulas que contêm excipientes farmaceuticamente aceitáveis que são geralmente considerados como sendo seguros. A formulação de cápsula pode encontrar-se disponível como títulos de 25 mg, 50 mg, 100 mg, 200 mg ou 400 mg. O regime de dosagem necessário para tratar CDAD, colite pseudomembranosa ou outras doenças associadas à utilização de antibióticos ou quimioterapias para cancro ou terapias antivirais pode ser alterado durante o período de tempo da terapia. Por exemplo, o paciente pode ser monitorizado periodicamente ou em intervalos regulares para medir a carga bacteriana do paciente, e a dosagem ou a frequência da antibioticoterapia pode ser ajustada em conformidade. 0 Composto I pode ser doseado para uma duração mais curta ou semelhante à dos tratamentos normalmente utilizados. Ρ’ΠΠΠ'ίΙ Ί 1?SS Υ'ΤΓί£9 Γ* Ê*Ή t* ϊ «5

As composições farmacêuticas do Composto I, de acordo com a invenção, podem ser formuladas para libertar um antibiótico substancialmente e de forma imediata na administração ou em qualquer momento ou período de tempo predeterminado após a administração.

Os últimos tipos de composições são geralmente conhecidos como formulações de libertação modificada, o que inclui formulações que criam uma concentração substancialmente constante do fãrmaco dentro do trato intestinal durante um período de tempo prolongado, e formulações que têm características de libertação modificada com base nos critérios temporais ou ambientais conforme descrito em Modified-Release Drug Delivery Technology, ed. M. J. Rathbone, J. Hodgraft e M. S. Roberts. Mareei Dekker, Inc. Nova Iorque.

Qualquer forma de dosagem oral biologicamente aceitável, ou combinação da mesma, pode ser utilizada nos métodos da invenção. Os exemplos dessas formas de dosagem incluem, sem limitação, comprimidos mastigáveis, comprimidos de dissolução rápida, comprimidos efervescentes, pós de reconstituição, elixires, líquidos, supositório, cremes, soluções, suspensões, emulsões, comprimidos, comprimidos de múltiplas camadas, comprimidos de duas camadas, cápsulas, cápsulas moles de gelatina, cápsulas duras de gelatina, comprimidos osmóticos, cápsulas osmóticas, pílulas pastilhas, pastilhas mastigáveis, esferas, pós, grânulos, partículas, micropartícuias, grânulos solúveis, substâncias que podem ser ingeridas, infusões, barras saudáveis, confeções, alimentos para animais, cereais, revestimentos de cereais, alimentos, alimentos nutritivos, alimentos funcionais e combinações dos mesmos. A preparação de qualquer uma das formas de dosagem acima é bem conhecida dos peritos na técnica. Adicionalmente, as formulações farmacêuticas podem ser concebidas para fornecer uma libertação imediata ou controlada do antibiótico ao alcançar o sítio-alvo. A seleção de composições de libertação imediata ou controlada depende de uma variedade de fatores incluindo a espécie e a suscetibilidade do antibiótico das bactérias Gram-positivas que estão a ser tratadas e das características bacteriostáticas/bactericidas da terapêutica. Os métodos bem conhecidos na técnica para a criação de formulações encontram-se, por exemplo, em Remington: The Science and Practice of Pharmacy (20a ed.), ed. A.R. Gennaro, 2000, Lippincott Williams & Wilkins, Filadélfia, ou em Encyclopedia of Pharmaceutical Technology, eds. J. Swarbrick e J. C. Boylan, 1988 a 1999, Mareei Dekker, Nova Iorque.

As formulações de libertação imediata para utilização oral incluem comprimidos ou cápsulas que contêm o(s) ingrediente(s) ativo(s) numa mistura com excipientes não tóxicos farmaceuticamente aceitáveis. Estes excipientes podem ser, por exemplo, diluentes inertes ou enchimentos (p. ex. , sacarose, sorbitol, açúcar, manitol, celulose microcristalina, amidos, incluindo amido de batata, carbonato de cálcio, cloreto de sódio, lactose, fosfato de cálcio, sulfato de cálcio ou fosfato de sódio); agentes de granulação e desintegração (p. ex., derivados de celulose incluindo celulose microcristalina, amidos, incluindo amido de batata, sódio de croscarmelose, alginatos ou ácido algínico) ,· agentes de união (p. ex., sacarose, glicose, manitol, sorbitol, acácia, ácido algínico, alginato de sódio, gelatina, amido, amido pré-gelatinizado, celulose microcristalina, silicato de alumínio de magnésio, sódio de carboximetilcelulose, me tilcelulose, hidroxipropilmetilcelulose, etilcelulose, polivinilpirrolidona ou polietilenoglicol); e agentes lubrificantes, substâncias deslizantes e antiadesivos (p. ex., estearato de magnésio, estearato de zinco, ácido esteárico, sílicas, óleos vegetais hidrogenados ou talco). Outros excipientes farmaceuticamente aceitáveis podem ser corantes, agentes aromatizant.es, plastif icantes, substâncias humectantes, agentes de tamponamento e afins e são encontrados, por exemplo, em The Handbook of Pharmaceutical Excipients, terceira edição, editado por Authur H. Kibbe, Americal Pharmaceutical Association Washington DC. A libertação controlada por dissolução ou difusão pode ser alcançada através do revestimento apropriado de um comprimento, uma cápsula, um pélete ou uma formulação granulada de compostos, ou incorporando o composto numa matriz apropriada. Um revestimento de libertação controlada pode incluir uma ou mais das substâncias de revestimento mencionadas acima e/ou, p. ex., goma-laca, cera de abelhas, cera de glicose, cera de rícino, cera de carnaúba, álcool estearílico, monoestearato de glicerilo, diestearato de glicerilo, palmitoestearato de glicerol, etilcelulose, resinas acrílicas, ácido dl-polilático, butirato de acetato de celulose, policloreto de vinilo, acetato de polivinilo, vinilpirrolidona, polietileno, polimetacrilato, metilmetacrilato, 2-hidroximetacrilato, hidrogeles de metacrilato, 1,3 butilenoglicol, metacrilato de etilenoglicol e/ou polietilenoglicõis. Numa formulação de matriz de libertação controlada, o material de matriz pode igualmente incluir, p. ex. , metilcelulose hidratada, cera de carnaúba e álcool estearílico, carbopol 934, silicone, triestearato de glicerilo, acrilato de metilo-metacrilato de metilo, policloreto de vinilo, polietileno e/ou fluorocarbono halogenado.

Uma composição de libertação controlada pode igualmente encontrar-se na forma de um comprimido ou cápsula flutuante (isto é, um comprimido ou uma cápsula que, na administração oral, flutue por cima do conteúdo gástrico durante um determinado período de tempo). Uma formulação de comprimido flutuante do(s) composto(s) pode ser preparada através da granulação de uma mistura do antibiótico com excipientes e 20 a 75 % p/p de hidrocoloides, tais como hidroxietilcelulose, hidroxipropilcelulose ou hidroxipropilmetilcelulose. Os grânulos obtidos podem depois ser compactados em comprimidos. No contacto com o suco gástrico, o comprimido forma uma barreira de gel substancialmente impermeável à água em torno da respetiva superfície. Esta barreira de gel participa na manutenção de uma densidade inferior a um, permitindo assim que o comprimido se mantenha flutuante no suco gástrico. Outras composições de libertação controlada úteis são conhecidas na técnica (consulte, por exemplo, as Patentes de Estados Unidos N.° 4.946.685 e 6.261.601).

Uma composição de libertação modificada pode ser compreendida por um núcleo revestido por compressão cuja configuração geométrica controla o perfil de libertação do antibiótico encapsulado. Ao alterar a geometria do núcleo, o perfil da libertação do antibiótico pode ser ajustado para seguir a ordem zero, a primeira ordem ou uma combinação destas ordens. 0 sistema pode igualmente ser concebido para distribuir mais agentes benéficos ao mesmo tempo, cada um deles tendo um perfil de libertação diferente (consulte, por exemplo, as Patentes de Estados Unidos N.° 4.111.202 e 3.279.995).

As formulações que direcionam a libertação do Composto I para zonas específicas do trato intestinal podem igualmente ser preparadas. 0 Composto I pode ser encapsulado num revestimento entérico que previne a degradação da libertação e a ocorrência da libertação no estômago, mas que se dissolve rapidamente no ambiente ligeiramente ácido ou de pH neutro do intestino delgado. Uma formulação direcionada para a libertação do antibiótico no cólon, utilizando tecnologias, tais como erosão dependente do tempo, dependente do pH ou enzimãtica da matriz de polímeros ou do revestimento, pode igualmente ser utilizada.

Em alternativa, pode ser preparada uma formulação de múltiplas camadas com características de libertação diferentes entre as camadas. Estas formulações podem resultar na libertação do antibiótico em zonas diferentes do trato intestinal.

Uma formulação de múltiplas camadas deste tipo pode ser particularmente útil para a manutenção de uma concentração de antibiótico mais constante em todo o comprimento do trato intestinal.

Num aspeto desta forma de realização, a camada protetora é compreendida por um ou mais componentes, o que inclui uma camada de libertação imediata e uma camada de modificação. A camada de modificação é preferencialmente compreendida por um polímero semipermeãvel à água. Os requerentes descobriram surpreendentemente que um revestimento de polímero semipermeãvel utilizado em conjunto com um revestimento de camada de libertação imediata forneceu um perfil de distribuição de antibiótico de libertação pulsada atrasada quando colocado em camadas sobre o revestimento entérico.

Deste modo, nesta forma de realização, a camada protetora compreende um polímero semipermeável e uma camada de revestimento de libertação imediata. Numa forma de realização preferida, a camada de modificação compreende uma primeira camada de um polímero semipermeável que é adjacente à camada de revestimento entérico e uma segunda camada de revestimento sobre a camada de revestimento de polímero semipermeável compreendendo uma camada de revestimento de polímero de libertação imediata.

Num aspeto desta forma de realização, um polímero semipermeável, que pode compreender um polímero não sensível ao pH pouco permeável à água, é colocado em camadas na superfície exterior da camada entérica, para obter um tempo de libertação atrasada prolongada. Este revestimento de polímero semipermeável controla a erosão do polímero entérico sensível ao pH num ambiente de pH alcalino no qual um polímero sensível ao pH irá dissolver-se rapidamente. Outra camada sensível ao pH pode ser aplicada na superfície de uma camada de baixa permeabilidade à água para atrasar mais o tempo de libertação.

Num outro aspeto ainda da invenção, além de uma camada protetora, a composição compreende um ácido que é incorporado na camada ativa farmacêutica ou revestido na superfície da camada ativa para reduzir o valor pH do ambiente em torno da camada de polímero entérico. A camada ácida pode igualmente ser aplicada na camada exterior da camada de polímero entérico sensível ao pH, seguida por uma camada de polímero de baixa permeabilidade à água. A libertação da camada ativa pode assim ser atrasada e a taxa de dissolução pode ser aumentada num ambiente alcalino.

Numa outra forma de realização, o revestimento protetor pode ser utilizado tanto sobre o antibiótico como sobre o revestimento entérico.

As propriedades de distribuição visadas do Composto I que contêm a formulação podem ser modificadas através de outros meios. Por exemplo, o antibiótico pode ser complexado por inclusão, associação iónica, ligação de hidrogénio, ligação hidrófoba ou ligação covalente. Além disso, os polímeros ou complexos suscetíveis a lise enzimática ou microbiana podem igualmente ser utilizados como um meio para a distribuição do fãrmaco. 0 encapsulamento de microesferas do Composto I é outra formulação farmacêutica útil para a libertação de antibiótico direcionada. As microesferas que contêm o antibiótico podem ser utilizadas sozinhas para a distribuição de antibiótico, ou como um componente de uma formulação de libertação de duas fases. As formulações de libertação faseada adequadas podem consistir em microesferas estáveis ácidas, que encapsulam o Composto I a ser libertado posteriormente no trato intestinal inferior misturado com uma formulação de libertação imediata para a distribuição do antibiótico no estômago e no duodeno superior.

As microesferas podem ser feitas através de qualquer método apropriado ou a partir de qualquer material farmaceuticamente aceitável. As microesferas proteinoides (consulte, por exemplo, as Patentes de Estados Unidos N.° 5.601.846 ou 5.792.451) e as microesferas que contêm PLGA (consulte, por exemplo, as Patentes de Estados Unidos N.° 6.235.224 ou 5.672.659) são particularmente úteis. Outros polímeros geralmente utilizados na formação de microesferas incluem, por exemplo, poli-ε-caprolactona, poli(e~caprolactona-Co-DL-ácido lático), poli(DL-ácido lático), poli(DL-ácido lático-Co-ácido glicólico) e poli(s-caprolactona-Co-ácido glicólico) (consulte, por exemplo, Pitt et al. , J. Pharm. Sei., 68:1534,1979). As microesferas podem ser feitas através de procedimentos bem conhecidos na técnica incluindo secagem por pulverização, coacervação e emulsificação (consulte, por exemplo, Davis et al. Microsphere and Drug Therapy, 1984, Elsevier; Benoit et al.

Biodegradable Microspheres: Advances in Production

Technologies, Capítulo 3, ed. Benita, S, 1996, Dekker, Nova Iorque; Microencapsulatíon and Related Drug Processes, Ed. Deasy, 1984, Dekker, Nova Iorque; Patente de Estados Unidos N. 0 6.365.187) .

Os põs, os põs solúveis ou os grânulos adequados para a preparação de soluções aquosas ou suspensões do Composto I através da adição de água são formas de dosagem convenientes para a administração oral. A formulação como uma suspensão fornece o ingrediente ativo numa mistura com um agente de dispersão ou humedecimento, agente de suspensão, e um ou mais conservantes. Os agentes de dispersão ou humedecimento adequados são, por exemplo, fosfatidos que ocorrem naturalmente (p. ex. , lecitina ou produtos de condensação de óxido de etileno com um ácido gordo, um álcool alifático de cadeia longa, ou um éster parcial derivado de ácidos gordos) e um hexitol ou um anidrido de hexitol (p. ex. , estearato de polioxietileno, monooleato de sorbitol de polioxietileno, monooleato de sorbitano de polioxietileno e afins). Os agentes de suspensão adequados são, por exemplo, carboximetilcelulose de sódio, metilcelulose, alginato de sódio e afins.

Breve Descrição das Tabelas Tabela 1. Tiacumicinas A a F

Tabela 2. Resumo da atividade do Composto I contra estirpes de laboratório da Coleção Americana de Culturas Celulares ATCC)

Tabela 3. Resumo da atividade do Composto I contra os isolados clínicos das bactérias

Tabela 4. Resumo da atividade do Composto I e da vancomicina contra 207 isolados clínicos de C. difficile Tabela 5. Resumo da atividade do Composto I e da vancomicina contra 102 isolados clínicos da espécie Clostridium

Tabela 6. Resumo da atividade do Composto I e da vancomicina contra 322 isolados clínicos do trato gastrointestinal

Tabela 7. Meio geométrico, variações MIC, MICSo e valores MICgo para o Composto I contra 110 isolados clínicos de C. difficile, vancomicina e metronidazol, em pg/mL.

Tabela 8. Dados MIC em bruto para o Composto I, a vancomicina (VAN) e o metronidazol (MTZ) versus 110 isolados clínicos de C. difficile, em pg/mL.

EXEMPLOS A invenção será mais ilustrada através da referência aos seguintes Exemplos não limitativos. Os Exemplos que não se relacionam com o âmbito das reivindicações são fornecidos a título de referência. EXEMPLO 1

Atividade in vitro do Composto I contra estirpes de laboratório e clínicas de bactérias. A atividade do Composto I foi testada contra estirpes de laboratório de espécies diferentes de bactérias utilizando diretrizes de testes de suscetibilidade antimicrobiana NCCLS. 0 Composto I demonstrou uma excelente atividade contra Clostridium sp. , Micrococcus sp. e atividade moderada contra Staphyloccccus sp. incluindo MRSA e Enterococcus sp. incluindo VRE (Tabela 2).

Tabela 2, Atividade do Composto I contra estirpes de laboratório da Coleção Americana de Culturas Celulares ATCC)

0 Composto I foi adicionalmente testado contra isolados clínicos anaeróbios e contra bactérias aeróbias. Um painel de 207 isolados clínicos C. difficile mostrou ser muito sensível ao Composto 1. 0 composto foi igualmente ativo contra estirpes clínicas de Staphylococcus sp. e Enterococcus sp. Estes resultados demonstram o espetro antimicrobiano estreito deste composto contra determinados organismos patogénicos gram-positivos (Tabelas 3 e 4).

Tabela 3. Atividade do Composto I contra isolados clínicos

Tabela 4. Atividade do Composto I e da Vancomicina contra _207 isolados clínicos de C. difficile_

Noutro estudo, vários isolados clínicos da espécie Clostridium e mais de 300 isolados GI clínicos foram testados versus o Composto I. 0 Composto I foi mais ativo contra C. difficile, C. perfringens e C. sordellii com o MICgo entre 0,062 e 0,25 pg/mL (Tabelas 5 e 6). 0 Composto I foi igualmente ativo contra Staphylococcus e Enterococcus com MICgo em 1 e 8 pg/mL, respetivamente.

Tabela 5. Atividade do Composto I e da Vancomicina contra isolados clínicos da espécie Clostridium

Tabela 6. Atividade do Composto I e da Vancomicina contra isolados gastrointestinais clínicos

EXEMPLO 2

Eficácia Comparativa do Composto I, do Metronidazol e da Vancomicina no modelo de hamster de Diarreia Associada a Clostridium-difficile.

Para avaliar a eficácia in vivo do Composto I no tratamento de colite associada a Clostridium difficile, o Composto I foi testado num modelo de hamster de colite induzida por clindamicina em comparação tanto com a vancomicina como com o metronidazol. Os animais foram tratados com duas doses orais de clindamicina em 100 mg/kg. Três dias após a segunda dose de clindamicina, os mesmos foram inoculados com esporos toxigénicos de C. difficile. Oito horas após a infeção, os animais receberam o Composto I oral, a vancomicina ou o metronidazol durante 7 dias. Os animais foram observados diariamente relativamente à presença ou ausência de diarreia. As necropsias foram efetuadas em alguns animais que morreram durante a experiência, e os conteúdos do ceco foram analisados relativamente à toxina A C. difficile. Os hamsters foram monitorizados durante 20 dias, e a mortalidade cumulativa durante este período de tempo foi registada (Fig. 1). Todos os três antibióticos testados protegeram os animais contra a infeção, o que, na ausência de tratamento, foi de outra forma uniformemente fatal entre os dias dois e seis pós-infeção. 0 ED50 para o Composto I era inferior a 0,3 mg/kg. 0 tratamento com o Composto I em concentrações de 0,8 e 2,5 mg/kg foi tão eficaz como o tratamento com vancomicina (5 mg/kg) ou metronidazol (100 mg/kg). EXEMPLO 3

Administração Oral do Composto I em Seres Humanos A tolerabilidade e a farmacocinética do Composto I após a administração da dose única foram investigadas em 16 sujeitos voluntários saudáveis. 0 ensaio clínico foi um estudo de dose única, com dupla ocultação, aleatório, controlado por placebo, de escalada de dose. 0 Composto I foi administrado oralmente após o pequeno-almoço dos sujeitos voluntários. 0 plasma, a urina e as concentrações fecais do Composto I foram determinados para avaliação farmacocinética.

Após a administração oral, foi detetado pouco Composto 1 no sangue; as concentrações encontravam-se próximas do limite inferior de quantificação (LLOQ = 5 ng/mL). Apenas um sujeito no grupo de dose de 450 mg apresentou concentrações de plasma que foram detetáveis no máximo em 8 horas. 0 nível de plasma mais elevado observado foi de 37,8 ng/mL (na dose mais elevada, grupo de 450 mg). A recuperação fecal do Composto I inalterado como uma percentagem de dose administrada foi de cerca de 20 % nos grupos de dosagem de 200 e 300 mg com os valores médios para a concentração fecal máxima correspondente de 157 e 248 pg/g, respetivamente. EXEMPLO 4

Atividade In Vitro do Composto I A eficácia in vitro do Composto I, metronidazol e vancomicina foi avaliada versus 110 isolados clínicos geneticamente distintos de C. ãifficile através de diluição em ágar. Os dados MIC são apresentados nas Tabelas 7 e 8. Tabela 7. Meio geométrico, variações MIC, valores MIC50 e MICgo para o Composto I contra 110 isolados clínicos de C. difficile, vancomicina e metronidazol, em pg/mL,

Tabela 8. Dados MIC em bruto para o Composto I, a vancomicina (VAN) e o metronidazol (MTZ) versus 110 _isolados clínicos de C. difficile, em pg/mL._

0 apresentado em seguida é igualmente aqui divulgado: 1. Um método de tratamento de uma doença associada à utilização de antibióticos ou. quimioterapias pana cancro ou terapias antivirais num paciente que necessita do mesmo, o referido método compreendendo a administração no referido paciente do Composto I numa quantidade e durante um período de tempo eficazes para tratar a referida doença. 2. 0 método do parágrafo 1, em que a referida doença é causada pela presença de uma bactéria selecionada a partir do grupo que consiste em C. difficile, C. perfringens, espécie Staphylococcus incluindo MRSA, e Enterococcus incluindo VRE. 3. 0 método do parágrafo 1, em que a referida doença é selecionada a partir do grupo que consiste em diarreia associada a antibióticos, colite, colite pseudomembranosa, infeção na corrente sanguínea e autismo. 4. 0 método do parágrafo 1, em que o referido Composto I é administrado numa quantidade entre 25 mg e 1 g.

5. 0 método do parágrafo 4, em que o referido Composto I é administrado numa quantidade entre 100 mg e 400 mg uma ou duas vezes por dia.

6. 0 método do parágrafo 1, em que o referido Composto I é administrado uma a quatro vezes por dia durante três a quinze dias. 7. 0 método do parágrafo 1, em que o referido Composto I é administrado oralmente. 8. Um método de tratamento ou prevenção do início de uma condição associada a antibióticos num paciente que necessita do mesmo, o referido método compreendendo a administração no referido paciente do Composto I numa quantidade e durante um período de tempo suficientes para inibir o início da referida condição associada a antibióticos. 9. 0 método do parágrafo 8, em que a referida condição associada a antibióticos é causada pela presença de uma bactéria selecionada a partir do grupo que consiste em C. difficile, C. perfringens, espécie Staphylococcus incluindo MRSA, e Enterococcus incluindo VRE. 10. 0 método do parágrafo 8, em que a referida condição associada a antibióticos é selecionada a partir do grupo que consiste em diarreia associada a antibióticos, colite e colite pseudomembranosa. 11. 0 método do parágrafo 8, em que o referido Composto I é administrado numa quantidade entre 25 mg e 1 g. 12. 0 método do parágrafo 11, em que o referido Composto I é administrado numa quantidade entre 100 mg e 400 mg uma ou duas vezes por dia. 13. 0 método do parágrafo 8, em que o referido Composto I é administrado uma a quatro vezes por dia durante três a quinze dias. 14. 0 método do parágrafo 8, em que o referido Composto I é administrado oralmente. 15. Um método de tratamento ou prevenção da recorrência de uma condição associada a antibióticos selecionada a partir do grupo que consiste em diarreia associada a antibióticos, colite, colite pseudomembranosa, infeção na corrente sanguínea e autismo, o referido método compreendendo a administração no referido paciente do Composto I numa quantidade e durante um período de tempo eficazes para inibir a recorrência da referida condição associada a antibióticos. 16. 0 método do parágrafo 15, em que a referida condição é diarreia associada a antibióticos, colite ou colite pseudomembranosa. 17. 0 método do parágrafo 16, em que o referido paciente tem sido tratado com vancomicina ou metronidazol dentro dos sessenta dias da referida recorrência. 18. 0 método do parágrafo 16, em que o referido Composto I é administrado numa quantidade entre 25 mg e 1 g. 19. 0 método do parágrafo 18, em que o referido Composto I é administrado numa quantidade entre 100 mg e 400 mg uma ou duas vezes por dia. 20. 0 método do parágrafo 16, em que o referido Composto I é administrado uma a quatro vezes por dia durante três a quinze dias. 21. 0 método do parágrafo 16, em que o referido Composto I é administrado oralmente. 22. 0 método do parágrafo 15, em que a referida condição associada a antibióticos é uma infeção na corrente sanguínea. 23. 0 método do parágrafo 22, em que o referido Composto I é administrado numa quantidade entre 25 mg e 1 g. 24. 0 método do parágrafo 23, em que o referido Composto I é administrado numa quantidade entre 200 mg e 800 mg uma ou duas vezes por dia. 25. 0 método do parágrafo 22, em que o referido Composto I é administrado uma a quatro vezes por dia durante três a qu inze dias. 26. 0 método do parágrafo 15, em que a referida condição é autismo. 27. 0 método do parágrafo 26, em que o referido Composto I é administrado numa quantidade entre 25 mg e 1 g. 28. 0 método do parágrafo 27, em que o referido Composto I é administrado numa quantidade entre 50 mg e 400 mg uma ou duas vezes por dia. 29. 0 método do parágrafo 26, em que o referido Composto I é administrado uma a quatro vezes por dia durante três a qu inze dias. 30. 0 método do parágrafo 26, em que o referido Composto I é administrado oralmente. 31. Uma terapia de combinação compreendendo (i) o Composto I, (ii) um segundo composto que é útil para o tratamento ou a prevenção de doenças associadas à utilização de antibióticos ou quimioterapias para cancro ou terapias antivirais, e (iii) instruções para a administração do referido Composto I e o referido segundo composto num paciente diagnosticado como tendo uma doença associada à utilização de antibióticos ou quimioterapias para cancro ou terapias antivirais. 32. 0 método do parágrafo 31, em que a doença é diarreia associada a antibióticos ou colite pseudomembranosa ou infeção na corrente sanguínea ou autismo. 33. 0 método do parágrafo 31, em que a infeção bacteriana é uma espécie C. difficile, C. perfringens, Staphylococcus incluindo MRSA ou Enterococcus incluindo infeção VRE. 34. 0 método do parágrafo 31, em que o paciente pode igualmente receber uma bioterapia (p. ex., Saccharomyces boulardii), ou iogurte oral (p. ex., preparações Lactobacillus), ou Lactobacillus GG, ou uma imunoterapia (p. ex., imunoglobulina humana, vacina toxoide de C. difficile) ou um segundo antibiótico (p. ex., vancomicina, bacitracina ou metronidazol). 35. 0 método do parágrafo 31, em que o Composto I pode ser coformulado com qualquer um dos apresentados anteriormente, ou pode ser administrado em separado. 36. 0 método do parágrafo 31, em que o referido Composto I é administrado numa quantidade entre 25 mg e 1 g. 37. 0 método do parágrafo 36, em que o referido Composto I é administrado numa quantidade entre 200 mg e 800 mg uma ou duas vezes por dia. 38. 0 método do parágrafo 31, em que o referido Composto I é administrado uma a quatro vezes por dia durante três a quinze dias. 39. 0 método do parágrafo 31, em que o referido Composto I é administrado oralmente.

40. Um método de tratamento ou prevenção de uma doença causada por uma infeção bacteriana do cólon, o referido método compreendendo a administração a um paciente que necessita do mesmo de uma quantidade eficaz do Composto I numa formulação farmacêutica que mantenha a integridade da formulação durante a passagem pelo trato gastrointestinal e permita a libertação do referido

Composto I no cólon ou outra porção do trato gastrointestinal. 41. 0 método do parágrafo 40, em que a infeção bacteriana é uma espécie C. difficile, C. perfringens,

Staphylococcus incluindo MRSA ou Enterococcus incluindo VRE. 42. 0 método do parágrafo 40, em que a doença é selecionada a partir do grupo que consiste em diarreia associada a antibióticos, colite pseudomembranosa, infeção na corrente sanguínea e autismo. 43. 0 método do parágrafo 40, em que o referido Composto I é encapsulado num revestimento entérico. 44. 0 método do parágrafo 40, em que o referido Composto I é administrado numa quantidade entre 25 mg e 1 g. 45. 0 método do parágrafo 44, em que o referido Composto I é administrado numa quantidade entre 50 mg e 800 mg uma ou duas vezes por dia. 46. 0 método do parágrafo 40, em que o referido Composto I é administrado uma a quatro vezes por dia durante três a quinze dias. 47. 0 método do parágrafo 40, em que o referido Composto I é administrado oralmente. 48. Um método de tratamento ou prevenção de uma doença causada por uma infeção bacteriana da pele, o referido método compreendendo a administração num paciente que necessita do mesmo de uma quantidade eficaz do Composto I numa formulação farmacêutica que mantenha a integridade da formulação para a aplicação tópica. 49. 0 método do parágrafo 48, em que a infeção bacteriana é uma espécie Staphylococcus incluindo MRSA ou Enterococcus incluindo VRE. 50. 0 método do parágrafo 48, em que a doença é uma infeção na pele ou no tecido mole. 51. 0 método do parágrafo 48, em que o referido Composto I é formulado como uma solução ou um creme para a aplicação tópica. 52. 0 método do parágrafo 48, em que o referido composto I é administrado entre uma e quatro vezes por dia. 53. 0 método do parágrafo 48, em que o referido Composto I é administrado topicamente. 54. Um método para o tratamento ou a prevenção de infeção de não humanos através de Clostridium spp., incluindo, mas não se limitando a, C. difficile, C. perfringens, C. botulinum, C, septicum, C, sordelli, C, cadaveris, C. paraputrificum, C, spiroforme e C. butyricum, ou através da espécie Enterococcus, quando os não humanos são animais domésticos, incluindo, mas não se limitando a cavalos e outros equinos, cães e gatos. 55. 0 método do parágrafo 56, em que a referida doença é causada pela presença de uma bactéria selecionada a partir do grupo que consiste em C. difficile, C. perfringens, espécie Staphylococcus ou Enterococcus incluindo enterococos resistentes à vancomicina (VRE). 56. 0 método do parágrafo 54, em que a referida doença é selecionada a partir do grupo que consiste em diarreia associada a antibióticos e colite. 57. 0 método do parágrafo 54, em que o referido Composto I pode conter menos de 80 % de Tiacumicina B.

DOCUMENTOS REFERIDOS NA DESCRIÇÃO

Esta lista de documentos referidos pelo autor do presente pedido de patente foi elaborada apenas para informação do leitor. Não é parte integrante do documento de patente europeia. Não obstante o cuidado na sua elaboração, ο IEP não assume qualquer responsabilidade por eventuais erros ou omissões.

Documentos de patente referidos na descrição • US 4918174 A [0012] • US 5583115 A [0014] • WO 2004014295 A [0015] • WO 9802447 AI [0016] • US 0321977 W [0038] • WO 2004014295 A2 [0038] • US 4946685 A [0089] • US 6261601 B [0089] • US 4111202 A [0090] • US 3279995 A [0090] • US 5601846 A [0101] • US 5792451 A [0101] • US 6235224 B [0101] • US 5672659 A [0101] • US 6365187 B [0101]

Documentos de não patente citados na descrição • J. Antibiotics, 1987, 567-574 [0012] • Antimicrob. Agents Chemother, 1991, 1108-1111 [0013] • FRY. Pharmanual: Einerging Pathogens and Implications for the Future, 1999, 50-75 [0069] • CARMELI Y. Emerging Infect Dis, 2002, vol. 8, 802-7 [0074] • GERDING. Clín Infect. Dis, 1997, vol. 25 (2) , 206-10 [0074] • LAUTENBACH. Infect Conrol Hosp Epídemiol, 1999, vol. 20, 318-23 [0074] • J. Antibiotics, 1987, 575-588 [0076] ® Modified-Release Drug Delivery Technology. Mareei Dekker, Inc, [0085] ® Remington: The Science and Practice of Pharmacy. Lippincott Williams & Wilkins, 2000 [0086] ® Encyclopedia of Pharmaceutical Technology. Mareei Dekker, 1988 [0086] ® The Handbook of Pharmaceutical Excipients. Americal Pharmaceutical Association Washington DC [0087] • PITT et al. J. Pharm. Sei., 1979, vol. 68, 1534 [0101] • DAVIS et al. Microsphere and Drug Therapy. Elsevier, 1984 [0101] • BENOIT. Biodegradable Microspheres: Advances in

Production Technologies. Dekker, 1996 [0101] ® Microencapsulation and Related Drug Processes. Dekker, 1984 [0101]

Claims (13)

REIVINDICAÇÕES

1. Um composto tendo a fórmula (II):

para a utilização no tratamento ou na prevenção de uma doença num paciente causada pela presença de Staphylococcus aureus resistente à meticilina (MRSA), em que (a) a doença é associada à utilização de antibióticos, ou (b) a doença é associada à utilização de quimioterapia ou (c) a doença é associada à utilização de terapia antiviral.

2. 0 composto para a utilização de acordo com a reivindicação 1, em que o paciente é um mamífero.

3. 0 composto para a utilização de acordo com a reivindicação 1, em que o paciente é um ser humano.

4. 0 composto para a utilização de acordo com a reivindicação 1 (a), em que a doença é diarreia associada a antibióticos.

5. 0 composto para a utilização de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, em que a doença é colite.

6. 0 composto para a utilização de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, em que a doença é colite pseudomembranosa.

7. 0 composto para a utilização de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, em que o composto se destina à administração numa quantidade de cerca de 10 mg a cerca de 1 g.

8. 0 composto para a utilização de acordo com a reivindicação 7, em que o composto se destina à administração numa quantidade de cerca de 50 mg a cerca de 400 mg uma ou duas vezes por dia.

9. 0 composto para a utilização de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 7, em que o composto se destina à administração entre uma e quatro vezes por dia.

10. 0 composto para a utilização de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9, em que a utilização compreende 80 a 100 %, relativamente a toda a substância antibiótica, do composto e as porções restantes consistem em tiacumicinas A e C a F tendo as seguintes fórmulas:

11. 0 composto para a utilização de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 10, em que o composto se destina à administração por via oral ao paciente.

12. 0 composto para a utilização de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 11, em que o composto se destina à administração entre uma e quatro vezes por dia durante três a quinze dias.

13. 0 composto para a utilização de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 12, em que o composto é uma preparação compreendendo 90 % ou 100 %, relativamente a toda a substância antibiótica, do composto.