PT2069303E - Inibidores de protease antiviral - Google Patents

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PT2069303E
PT2069303E PT07810622T PT07810622T PT2069303E PT 2069303 E PT2069303 E PT 2069303E PT 07810622 T PT07810622 T PT 07810622T PT 07810622 T PT07810622 T PT 07810622T PT 2069303 E PT2069303 E PT 2069303E
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mmol
compound
reaction mixture
inhibitors
concentrated
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PT07810622T
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Swaminathan Sundaramoorthi
M Chen James
C Desai Manoj
Yang Zheng-Yu
Xu Lianhong
L Mitchell Michael
E Cannizzaro Carina
Original Assignee
Gilead Sciences Inc
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Description

DESCRIÇÃO
INIBIDORES DE PROTEASE ANTIVIRAL CAMPO DA INVENÇÃO
Esta invenção refere-se a novos inibidores de protease do VIH, composições farmacêuticas dos mesmos, e sua utilização em métodos para inibir e tratar uma infeção por VIH.
ANTECEDENTES DA INVENÇÃO
Nos últimos anos, os inibidores de protease do VIH converteram-se numa classe importante de agentes terapêuticos para a inibição e o tratamento das infeções por VIH em seres humanos. Os inibidores de protease do VIH são especialmente eficazes quando são administrados em combinação com outras classes de agentes terapêuticos do VIH, em especial com inibidores da transcritase reversa do VIH, por exemplo em "coquetéis" de dois ou mais agentes terapêuticos do VIH. 0 tratamento contínuo de pessoas infetadas com VIH com compostos que inibem a protease do VIH tem levado ao desenvolvimento de vírus mutantes que possuem proteases que são resistentes ao efeito inibidor de agentes terapêuticos do VIH disponíveis comercialmente aprovados atualmente em utilização clínica. Portanto, para serem eficazes, os novos inibidores de protease do VIH devem ser eficazes não somente contra as estirpes de tipo selvagem do VIH, mas que também devem demostrar eficácia contra as estirpes mutantes de recente aparição que são resistentes aos inibidores de protease disponíveis comercialmente. Consequentemente, continua a haver uma necessidade de novos inibidores de protease do VIH, por exemplo, os quais têm como alvo a protease do VIH no tipo selvagem e as estirpes mutantes do VIH.
SUMÁRIO DA INVENÇÃO A invenção é definida nas reivindicações anexas. Especificamente, os compostos da invenção são definidos nas reivindicações 1 e 2. É proporcionada por referência uma divulgação no presente documento que se estende além do âmbito das reivindicações. São revelados novos compostos inibidores de protease do VIH de Fórmula (I):
ou um sal farmaceuticamente aceitável, solvato, e/ou éster do mesmo, em que, X é H, alquilo, alquilo substituído, -C(0)-, -S(0)2-, ou -S (0)-; n é 0 quando X é H, alquilo, ou alquilo substituído; n é 1 quando X é -C(0)-, -S(0)2~, ou -S(0)-; L1 e L3 são alquileno; L2 e L4 são independentemente selecionados a partir do grupo que consiste numa ligação covalente, -0-, -NH-, -0-alquileno-, e alquileno;
Ar1, Ar2, Ar3, e Ar4 são independentemente arilo, arilo substituído, heteroarilo, ou heteroarilo substituído, em que o dito arilo substituído ou o dito heteroarilo substituído de Ar1, Ar2, Ar3 e Ar4 é independentemente substituído por um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo que consiste em alquilo, alquilo substituído, haloalquilo, halo, nitro, ciano, hidroxi, amino, alcoxi, haloalcoxi, -NH-alquilo, -NH-(alquil) 2, -NH-acilo, -N(alquil)-acilo, -NRa-S (0)2-Rb, -C(0)-Rc, - S(0)2Rb, — S (0) 2NHRa, —C (0) -NH-Ra, -NRaC (0) 0Rb, NRaS (0) 2NRaRb, -C (0) 0Ra, e -Z^alquileno- R7;
Ra é H, alquilo, ou alquilo substituído;
Rb é alquilo, arilo, ou arilo substituído; R7 é arilo, heterociclilo, arilo substituído, substituído heterociclilo, -Z2-L5-R7b ou -0-P03R7cR7d; L5 é -C (0)-, -0(0)0-, —C (0) NR7e-, -S(02)-, -S (0)-, -S (02) NR7e-, ou —S (0) NR7e-; Z1 e Z2 são independentemente 0 ou NR7a; R7a, R7c, R7d, e R7e são independentemente H, alquilo, ou alquilo substituído; R7b é alquilo, alquilo substituído, heterociclilo, ou substituído heterociclilo; p e q são independentemente 0 ou 1; R1 é -NRlaRlb, -0Rlc, -C (RldRle) -NRlt_L6-R15, arilo, arilo substituído, heteroarilo, ou heteroarilo substituído;
Rla é H, alquilo, ou alquilo substituído;
Rlb e Rlc são independentemente selecionados a partir de alquilo, alquilo substituído, arilo, arilo substituído, heterociclilo, substituído heterociclilo, arilalquilo, arilalquilo substituído, heterociclil alquilo, e heterociclil alquilo substituído, em que o dito arilalquilo substituído é substituído na fração arilo e o dito heterociclil alquilo substituído é substituído na fração heterociclilo;
Rld e Rle são independentemente selecionados a partir do grupo que consiste em H, alquilo, e alquilo substituído; ou
Rld e Rle tomados juntamente com o átomo de carbono to que são unidos formam um cicloalquilo, um cicloalquilo substituído, um heterociclilo não aromático, ou um heterociclilo não aromático substituído; L6 é —C (0) —, —C (0) —0—, ou -C(0)-NRlh-, -S(0)2, -S(0)2-0-, -S (0) 2-NRlh-, -S (0) -, -S(0)-0-, OU -S(0)-NRlh-; R1 f e Rlh são independentemente H, alquilo, ou alquilo substituído; R1^ é alquilo ou alquilo substituído; R2, R4, e R5 são cada independentemente selecionado a partir do grupo que consiste em H, alquilo, e alquilo substituído; R3 é selecionado a partir do grupo que consiste em H, -CH2-OC (0)-R3a, -CH2-OC (0) 0R3a, -CH2O-PO3-2, -PO3-2, e - PO3CH2CF3-1; R3a é H, alquilo, ou alquilo substituído; R6 é selecionado a partir do grupo que consiste em -0R6a, -NR6bR6c, -C (R6dR6e) R6f, alquilo, alquilo substituído, arilo, arilo substituído, heterociclilo, e heterociclilo substituído; R6a e R6b são independentemente selecionados a partir do grupo que consiste em alquilo, alquilo substituído, arilo, arilo substituído, heterociclilo, heterociclilo substituído, arilalquilo, arilalquilo substituído, heterociclil alquilo, heterociclil alquilo substituído, em que o dito arilalquilo substituído é substituído na fração arilo e o dito heterociclil alquilo substituído é substituído na fração heterociclilo; R6c é H, alquilo, ou alquilo substituído; R6d e R6e são independentemente selecionados a partir do grupo que consiste em H, alquilo, e alquilo substituído; ou R6d e R6e tomados juntamente com o átomo de carbono to que são unidos formam um cicloalquilo, um cicloalquilo substituído, um heterociclilo não aromático, ou um heterociclilo não aromático substituído; R6f é selecionado a partir do grupo que consiste em heterociclilo, heterociclilo substituído, -Z3-arilo, -Z3-(arilo substituído), -Z3-heteroarilo, -z3- (heteroarilo substituído) , -Z3-L7-R6f2, e -Z3-L8-R6f3; Z3 é 0 ou NR6fl; L7 é selecionado a partir do grupo que consiste em - C (0)-, -c (0)-0-, e -C (0) -NR6f1-; L8 é selecionado a partir do grupo que consiste em -S(02) - ou -S(0)-, -S (02) -0-, e -S(0)-0-; R6f 1 é H, alquilo, ou alquilo substituído; R6f2 é alquilo, alquilo substituído, arilalquilo, arilalquilo substituído, heteroarilalquilo, substituído heteroarilalquilo, em que o dito arilalquilo substituído é substituído na fração arilo e o dito heteroarilalquilo substituído é substituído na fração heteroarilo; e R6f3 é alquilo, alquilo substituído, -0-alquilo, -0-(alquilo substituído), -NH-alquilo, -N(alquil)2, -NH-(alquilo substituído), ou -N(alquilo substituído)2; e com as seguintes condições: (1) quando X é -C(0)- e n é 1, então R1 e R6 não são ambos -CH (Rc)-NH-C (0)-0-Rd, em que Rc é -C(CH3)3, CH(CH3)2, ou -CH (CH3) CH2CH3 e Rd é -CH3 ou -CH2CH3; (2) quando p e q são ambos 0, então Ar1 e Ar3 não são ambos fenilo ou ambos fluorofenilo; (3) quando p e q são ambos 0; e Ar3 é fenilo; então
Ar1 não é fluorofenilo, cianofenilo, metoxifenilo, hidroxifenilo, tolilo, trifluorometilfenilo, trimetoxifenilo, ou tienilo; e (4) quando p e q são ambos 0; Ar3 é fenilo; e R1 é 0Rlc; então Rlc não é aril metileno ou heterociclil metileno.
Numa outra forma de realização, a presente invenção proporciona uma composição farmacêutica que compreende um veículo farmaceuticamente aceitável e uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da invenção ou sal farmaceuticamente aceitável, solvato, e/ ou éster do mesmo.
Numa outra forma de realização, o presente pedido proporciona pelo menos um composto definido na reivindicação 1 ou 2, ou um sal farmaceuticamente aceitável, solvato, e/ou éster do mesmo, para utilização num método para tratar Infeções por VIH.
Numa outra forma de realização, o presente pedido proporciona um ou mais compostos definidos na reivindicação 1 ou 2 para utilização num método para tratar infeções por VIH, o dito método compreende administrar a um paciente em necessidade de tal tratamento uma combinação terapeut icamente eficaz de (a) um ou mais compostos de acordo com a reivindicação 1 ou 2 e (b) um outro agente terapêutico (por exemplo, um ou mais compostos selecionados a partir de inibidores da transcritase reversa do VIH e inibidores de protease do VIH).
Numa outra forma de realização, a presente invenção proporciona um composto de acordo com a reivindicação 1 ou 2 para utilização num método de tratamento de infeção por VIH, o dito método compreende administrar a um paciente em necessidade do mesmo uma quantidade terapeuticamente eficaz de: (a) um composto de acordo com a reivindicação 1 ou 2; e, (b) pelo menos um composto selecionado a partir do grupo que consiste em compostos gue inibem a protease do VIH, inibidores não nucleosidicos do VIH de transcritase reversa, inibidores nucleosidicos do VIH de transcritase reversa, inibidores nucleotidicos do VIH de transcritase reversa, inibidores da integrase do VIH, inibidores não nucleosidicos do VHC, e inibidores de CCR5.
Também se revela um kit ou recipiente que compreende um composto de Fórmula (I) numa quantidade eficaz para utilização como um padrão ou reagente num teste ou ensaio para determinar a capacidade de um composto farmacêutico potencial para inibir a protease do VIH e/ou o crescimento de VIH.
DESCRIÇÃO PORMENORIZADA
Referência será agora feita em detalhes a certas reivindicações da invenção, exemplos das quais são ilustrados nas estruturas e fórmulas de acompanhamento. Embora a invenção seja descrita juntamente com as reivindicações enumeradas, será entendido que a invenção não está limitada a estas reivindicações. Pelo contrário, a invenção pretende incluir todas as alternativas, modificações e equivalentes, que podem ser incluídas dentro do âmbito da presente invenção como se define pelas reivindicações.
DEFINIÇÕES A não ser que de outro modo estabelecido, pretende-se que os seguintes termos e frases como aqui utilizados tenham os seguintes significados:
Quando os nomes comerciais são utilizados no presente documento, os requerentes pretendem independentemente incluir o produto de nome comercial e o(s) ingrediente(s) farmacêutico(s) ativo(s) do produto de nome comercial.
Como é usado no presente documento, "um composto da invenção" ou "um composto de fórmula (1)" significa um composto de fórmula (I) ou um sal farmacêuticamente aceitável, solvato, ou derivado fisiologicamente funcional do mesmo. De forma análoga, com relação aos intermediários isoláveis, tais como, por exemplo, os compostos de fórmula (IX), a expressão "um composto de fórmula (número)" refere-se a um composto dessa fórmula e sais farmaceuticamente aceitáveis, solvatos e derivados fisiologicamente funcionais do mesmo. "Alquilo" é hidrocarboneto contendo átomos de carbono normais, secundários, terciários ou cíclicos. Por exemplo, um grupo alquilo pode ter 1 a 20 átomos de carbono (isto é, C1-C20 alquila) , 1 a 10 átomos de carbono (isto é, C1-C10 alquila), ou 1 a 6 átomos de carbono (isto é, C1-C6 alquila). Exemplos de grupos alquilo adequados incluem, mas não se limitam a, metilo (Me, -CH3), etilo (Et, -CH2CH3) , 1-propilo (n-Pr, n-propilo, -CH2CH2CH3) , 2-propilo (i-Pr, i-propilo, -CH (CH3) 2) , 1-butilo (n-Bu, n-butilo, CH2CH2CH2CH3) , 2- metil-l-propilo (_i-Bu, _i-butilo, CH2CH (CH3) 2) , 2-butilo (s-Bu, s-butilo, -CH (CH3) CH2CH3) , 2- meti1-2-propilo (t-Bu, t-butilo, -C(CH3)3), 1-pentilo (n-pentilo, -CH2CH2CH2CH2CH3) , 2-pentilo (-CH (CH3) CH2CH2CH3) , 3- pentilo (-CH (CH2CH3) 2) , 2-metil-2-butilo (-C (CH3) 2CH2CH3) , 3-metil-2-butilo (-CH (CH3) CH (CH3) 2) , 3-metil-l-butilo (- CH2CH2CH (CH3) 2) , 2-metil-l-butilo (-CH2CH (CH3) CH2CH3) , 1- hexilo (-CH2CH2CH2CH2CH2CH3) , 2-hexilo (-CH (CH3) CH2CH2CH2CH3) , 3- hexilo (-CH (CH2CH3) (CH2CH2CH3) ) , 2-metil-2-pentilo (- C (CH3) 2CH2CH2CH3) , 3-meti 1-2-pentil (-CH (CH3) CH (CH3) CH2CH3) , 4- meti 1-2-pentil (-CH (CH3) CH2CH (CH3) 2), 3-metil-3-pentilo (- C (CH3) (CH2CH3) 2) , 2-metil-3-pentilo (-CH (CH2CH3) CH (CH3) 2) , 2,3-dimetil-2-butilo (-C (CH3) 2CH (CH3) 2) , 3,3-dimetil-2- butilo (—CH (CH3) C (CH3) 3, e octilo (-(CH2) 7CH3) . "Alcoxi" significa um grupo que tem a fórmula —0-alquilo, em que um grupo alquilo, como definido acima, é ligado à molécula origem por meio de um átomo de oxigénio. A fração alquilo de um grupo alcoxi pode ter 1 a 20 átomos de carbono (isto é, Ci-C20 alcoxi), 1 a 12 átomos de carbono (isto é, C1-C12 alcoxi), ou 1 a 6 átomos de carbono (isto é, C1-C6 alcoxi). Exemplos de grupos alcoxi adequados incluem, mas não se limitam a, metoxi (-0-CH3 ou -OMe) , etoxi (-OCH2CH3 ou -OEt), t-butoxi (-0-C(CH3)3 ou - OtBu) e semelhantes. "Haloalquilo" é um grupo alquilo, como definido acima, em que um ou mais átomos de hidrogénio do grupo alquilo é substituído com um átomo de halogénio. A fração alquilo de um grupo haloalquilo pode ter 1 a 20 átomos de carbono (isto é, C1-C20 haloalquilo), 1 a 12 átomos de carbono (isto é, C1-C12 haloalquilo) , ou 1 a 6 átomos de carbono (isto é, Ci-Cê alquilo). Exemplos de grupos haloalquilo adequados incluem, mas não se limitam a, -CF3, -CHF2, -CFH2, -CH2CF3, e semelhantes. "Alquenilo" é um hidrocarboneto contendo átomos de carbono normais, secundários, terciários ou cíclicos com pelo menos um local de insaturação, isto é, uma ligação dupla sp2, carbono-carbono. Por exemplo, um grupo alquenilo pode ter 2 a 20 átomos de carbono (isto é, C2-C20 alquenilo), 2 a 12 átomos de carbono (isto é, C2-C12 alquenilo) , ou 2 a 6 átomos de carbono (isto é, C2-C6 alquenilo). Exemplos de adequados alquenilo grupos incluem, mas não se limitam a, etileno ou vinilo (-CH=CH2) , alilo (-CH2CH=CH2) , ciclopentenilo (-C5H7) , e 5-hexenilo (-CH2CH2CH2CH2CH=CH2) . "Alquinilo" é um hidrocarboneto contendo átomos de carbono normais, secundários, terciários ou cíclicos com pelo menos um local de insaturação, isto é, uma ligação tripla sp, carbono-carbono. Por exemplo, um grupo alquinilo pode ter 2 a 20 átomos de carbono (isto é, C2-C20 alquinilo) , 2 a 12 átomos de carbono (isto é, C2-C12 alquinilo) , ou 2 a 6 átomos de carbono (isto é, C2-C6 alquinilo). Exemplos de grupos alquinilo adequados incluem, mas não se limitam a, acetilênicos (-C=CH), propargilo (-CH2C=CH), e semelhantes. "Alquileno" refere-se a um radical de hidrocarboneto saturado, de cadeia ramificada ou linear ou cíclico tendo dois centros de radical monovalentes derivados pela remoção de dois átomos de hidrogénio do mesmo ou dois diferentes átomos de carbono de um alcano origem. Por exemplo, um alquileno grupo pode ter 1 a 20 átomos de carbono, 1 a 10 átomos de carbono, ou 1 a 6 átomos de carbono. Radical alquileno típicos incluem, mas não se limitam a, metileno (-CH2-), 1, 1-etilo (-CH(CH3)-), 1,2-etilo (-CH2CH2-) , 1,1- propilo (-CH (CH2CH3)-) , 1,2-propilo (-CH2CH (CH3)-) , 1,3-propilo (—CH2CH2CH2—) , 1,4—butilo (— CH2CH2CH2CH2—) , e semelhantes. "Alquenileno" refere-se a um radical hidrocarboneto insaturado, de cadeia linear ou ramificada ou cíclico tendo dois centros de radical monovalentes derivados pela remoção de dois átomos de hidrogénio do mesmo ou dois diferentes átomos de carbono de um alceno origem. Por exemplo, o grupo alquenileno pode ter 1 a 20 átomos de carbono, 1 a 10 átomos de carbono, ou 1 a 6 átomos de carbono. Os radicais alquenileno típicos incluem, mas não se limitam a, 1,2-etileno (-CH=CH-). "Alquinileno" refere-se a um radical hidrocarboneto insaturado, de cadeia linear ou ramificada ou cíclico tendo dois centros de radical monovalente derivados pela remoção de dois átomos de hidrogénio do mesmo ou dois diferentes átomos de carbono de um alcino de origem. Por exemplo, um grupo alquileno pode ter 1 a 20 átomos de carbono, 1 a 10 átomos de carbono, ou 1 a 6 átomos de carbono. Radicais alquinileno típicos incluem, mas não se limitam a, acetileno (-C=C-), propargilo (-CH2C=C-), e 4- pentinilo (-CH2CH2CH2C=CH-) . "Arilo" significa um radical de hidrocarboneto aromático derivado pela remoção de um átomo de hidrogénio de um único átomo de carbono de um sistema de anel aromático origem. Por exemplo, um grupo arilo pode ter 6 a 20 átomos de carbono, 6 a 14 átomos de carbono, ou 6 a 12 átomos de carbono. Os grupos arilo típicos incluem, mas não se limitam a, radicais derivados de benzeno (por exemplo, fenilo), substituído benzeno, naftaleno, antraceno, bifenilo, e semelhantes. "Arilalquilo" refere-se a um radical alquilo acíclico em que um dos átomos de hidrogénio ligado a um átomo de carbono, tipicamente um átomo de carbono terminal ou sp3, é substituído com um radical arilo. Os grupos arilalquilo típicos incluem, mas não se limitam a, benzilo, 2-feniletan-1 -ilo, naftilmetilo, 2-naftiletan-l-ilo, naftobenzilo, 2-naftofeniletan-1- ilo e semelhantes. O grupo arilalquilo pode compreender 6 a 20 átomos de carbono, por exemplo, a fração alquilo é 1 a 6 átomos de carbono e a fração arilo é 6 a 14 átomos de carbono. "Arilalquenilo" refere-se a um radical alquenilo acíclico em que um dos átomos de hidrogénio ligado a um átomo de carbono, tipicamente um átomo de carbono terminal ou sp3, porém também um átomo de carbono sp2, é substituído com um radical arilo. A fração arilo da arilalquenilo pode incluir, por exemplo, quaisquer dos grupos arilo descritos no presente documento, e a fração alquenilo da arilalquenilo pode incluir, por exemplo, qualquer dos grupos alquenilo descritos no presente documento. 0 grupo arilalquenilo pode compreender 6 a 20 átomos de carbono, por exemplo, a fração alquenilo é 1 a 6 átomos de carbono e a fração arilo é 6 a 14 átomos de carbono. "Arilalquinilo" refere-se a um radical alquinilo acíclica em que um dos átomos de hidrogénio ligado a um átomo de carbono, tipicamente um átomo de carbono terminal ou sp3, porém também um átomo de carbono sp, é substituído com um radical arilo. A fração arilo da arilalquinilo pode incluir, por exemplo, qualquer dos grupos arilo descritos no presente documento, e a fração alquinilo da arilalquinilo pode incluir, por exemplo, qualquer dos grupos alquinilo descritos no presente documento. O grupo arilalquinilo pode compreender 6 a 20 átomos de carbono, por exemplo, a fração alquinilo é 1 a 6 átomos de carbono e a fração arilo é 6 a 14 átomos de carbono. O termo "substituído" em referência a alquilo, alquileno, arilo, arilalquilo, heterociclilo, etc., por exemplo, "alquilo substituído", "alquileno substituído", "arilo substituído", "arilalquilo substituído", "heterociclilo substituído", e "carbociclilo substituído" refere-se a alquilo, alquileno, arilo, arilalquilo, heterociclilo, carbociclilo respetivamente, nos quais um ou mais átomos de hidrogénio são substituídos independentemente cada um com um substituinte distinto de hidrogénio. Os substituintes típicos incluem, mas sem limitação, -X, -R, -O-, =0, -OR, -SR, -S~, -NR2, -NR3, =NR, -CX3, -CN, -OCN, -SON, -N=C=0, -NCS, -NO, -NO2, =N2, -N3, NC(=0)R, - C(=0)R, —C(=0)NRR -S (=0) 20", -S(=0)20H, -S(=0)2R, -0S(=0)20R, -S(=0),NR, - S(=0)R, -0P (=0) 02RR,-P (=0) 02RR - P (=0)(0-)2, -P(=0)(0H)2, -C(=0)R, -C(=0)X, -C(S)R, -C(0)0R, -0(0)0-, -C (S) OR, -C (0) SR, -C (S) SR, -C(0)NRR, -C(S)NRR, -C (NR) NRR, onde cada X é independentemente um halógeno: F, Cl, Br ou I; e cada R é independentemente H, alquilo, arilo, arilalquilo, um heterociclo, ou um grupo de proteção ou resíduo de pró-fármaco. Os grupos alquileno, alquenileno e alquinileno também podem estar substituídos de forma análoga. "Biodisponibilidade" é o grau em que o princípio farmaceuticamente ativo se torna disponível para o tecido alvo depois da introdução do agente no corpo. A potenciação da biodisponibilidade de um princípio farmaceuticamente ativo pode proporcionar um tratamento mais eficaz e eficiente para os pacientes devido a que, para uma dada dose, estará disponível mais princípio farmaceuticamente ativo nos locais dos tecidos que tem como alvo. "Heteroalquilo" refere-se a um grupo alquilo onde um ou mais átomos de carbono foram substituídos com um heteroátomo, tal como, 0, N, ou S. Por exemplo, se o átomo de carbono do grupo alquilo que é unido à molécula original for substituído com um heteroátomo (por exemplo, 0, N, ou S) os grupos heteroalquilo resultantes são, respetivamente, um grupo alcoxi (por exemplo, -OCH3, etc.), uma amina (por exemplo, -NHCH3, -N(CH3)2, etc.), ou um grupo tioalquilo (por exemplo, -SCH3) . Se um átomo de carbono não terminal do grupo alquilo que não é unido à molécula original for substituído com um heteroátomo (por exemplo, 0, N, ou S) e os grupos heteroalquilo resultantes são, respetivamente, um alquil éter (por exemplo, -CH2CH2-O-CH3, etc.), uma alquil amina (por exemplo, -CH2NHCH3, -CH2N(CH3)2, etc.), ou um tioalquil éter (por exemplo, CH2-S-CH3) . Se um terminal átomo de carbono do grupo alquilo for substituído com um heteroátomo (por exemplo, 0, N, ou S) , os grupos heteroalquilo resultantes são, respetivamente, um grupo hidroxialquilo (por exemplo, -CH2CH2-OH) , um grupo aminoalquilo (por exemplo, -CH2NH2) , ou um grupo alquil tiol (por exemplo, -CH2CH2-SH). Um grupo heteroalquilo pode ter, por exemplo, 1 a 20 átomos de carbono, 1 a 10 átomos de carbono, ou 1 a 6 átomos de carbono. Um grupo C1-C6 heteroalquilo significa um grupo heteroalquilo que tem 1 a 6 átomos de carbono. "Heterociclo" ou "heterociclilo" Como utilizado no presente documento inclui a titulo de exemplo e não de limitação daqueles heterociclos descritos em Paquette, Leo A.; Principles of Modern Heterocyclic Chemistry (W.A. Benjamin, Nova Iorque, 1968), particularmente Capítulos 1, 3, 4, 6, 7, e 9; The Chemistry of Heterocyclic Compounds. A Series of Monoqraphs" (John Wiley & Sons, Nova Iorque, 1950 até o presente), em particular os Volumes 13, 14, 16, 19, e 28; e J. Am. Chem. Soc. (1960) 82:5566. Numa forma de realização específica da invenção "heterociclo" inclui um "carbociclo" como no presente documento definido, em que um ou mais (por exemplo 1, 2, 3, ou 4) átomos de carbono foram substituídos com um heteroátomo (por exemplo O, N, ou S). O termo "heterociclo" ou "heterociclilo" inclui anéis saturados, anéis parcialmente insaturados, e anéis aromáticos (isto é, anéis heteroaromáticos). Heterociclilos substituídos incluem, por exemplo, anéis heterocíclicos substituídos com qualquer dos substituintes descritos no presente documento incluindo grupos carbonilo. Um exemplo não-limitante de uma carbonil heterociclilo substituído é: n
^N^NH
O
Exemplos de heterociclos incluem a título de exemplo e não limitação piridilo, diidroxipiridilo, tetrahidropiridilo (piperidilo), tiazolilo, tetrahidrotiofenilo, tetrahidrotiofenilo oxidada com enxofre, pirimidinilo, furanilo, tienilo, pirrolilo, pirazolilo, imidazolilo, tetrazolilo, benzofuranilo, tianaftalenilo, indolilo, indolnilo, quinolinilo, isoquinolinilo, benzimidazolilo, piperidinilo, 4-piperidonilo, pirrolidinilo, 2-pirrolidonilo, pirrolinilo, tetrahidrofuranilo, tetrahidroquinolinilo, tetrahidroisoquinolinilo, decaidroquinolinilo, octahidroisoquinolinilo, azocinilo, triazinilo, 6H-1,2,5-tiadiazinilo, 2H,6H-1,5,2-ditiazinilo, tienilo, tiantrenilo, piranilo, isobenzofuranilo, cromenilo, xantenilo, fenoxatinilo, 2H- pirrolilo, isotiazolilo, isoxazolilo, pirazinilo, piridazinilo, indolizinilo, isoindolilo, 3H-indolilo, 1 H-indazolilo, purinilo, 4H-quinolizinilo, ftalazinilo, naftiridinilo, quinoxalinilo, quinazolinilo, cinolinilo, pteridinilo, 4aH-carbazolilo, carbazolilo, (3-carbolinilo, fenantriidinilo, acridinilo, pirimidinilo, fenantriolinilo, fenazinilo, fenotiazinilo, furazanilo, fenoxazinilo, isocromanilo, cromanilo, imidazolidinilo, imidazolinilo, pirazolidinilo, pirazolinilo, piperazinilo, indolinilo, isoindolinilo, quinuclidinilo, morfolinilo, oxazolidinilo, benzotriazolilo, benzisoxazolilo, oxindolilo, benzoxazolinilo, isatinoilo, e
bis-tetrahidrofuranilo: A título de exemplo e não limitação, heterociclos ligados por carbono são ligados na posição 2, 3, 4, 5, ou 6 de uma piridina, posição 3, 4, 5, ou 6 de uma piridazina, posição 2, 4, 5, ou 6 de uma pirimidina, posição 2, 3, 5, ou 6 de uma pirazina, posição 2, 3, 4, ou 5 de uma furano, tetrahidrofurano, tiofurano, tiofeno, pirrol ou tetrahidropirrol, posição 2, 4, ou 5 de um oxazol, imidazol ou tiazol, posição 3, 4, ou 5 de um isoxazol, pirazol, ou isotiazol, posição 2 ou 3 de uma aziridina, posição 2, 3, ou 4 de uma azetidina, posição 2, 3, 4, 5, 6, 7, ou 8 de uma quinolina ou posição 1, 3, 4, 5, 6, 7, ou 8 de um isoquinolina. Ainda mais tipicamente, heterociclos ligados por carbono incluem 2-piridilo, 3-piridilo, 4-piridilo, 5-piridilo, 6-piridilo, 3-piridazinilo, 4- piridazinilo, 5-piridazinilo, 6-piridazinilo, 2-pirimidinilo, 4- pirimidinilo, 5- pirimidinilo, 6-pirimidinilo, 2-pirazinilo, 3-pirazinilo, 5-pirazinilo, 6-pirazinilo, 2-tiazolilo, 4-tiazolilo, ou 5-tiazolilo. A título de exemplo e não limitação, os heterociclos ligados a azoto são ligados na posição 1 de uma aziridina, azetidina, pirrol, pirrolidina, 2-pirrolina, 3-pirrolina, imidazol, imidazolidina, 2-imidazolina, 3-imidazolina, pirazol, pirazolina, 2-pirazolina, 3-pirazolina, piperidina, piperazina, indol, indolina, lH-indazol, posição 2 de um isoindol, ou isoindolina, posição 4 de uma morfolina, e posição 9 de um carbazol, ou β-carbolina. Ainda mais tipicamente, heterociclos ligados a azoto incluem 1-aziridilo, 1-azetedilo, 1- pirrolilo, 1 imidazolilo, 1-pirazolilo, e 1 -piperidinilo. "Heterociclilalquilo" refere-se a um radical alquilo acíclico em que um dos átomos de hidrogénio ligado a um átomo de carbono, tipicamente um átomo de carbono terminal ou sp3, é substituído com um radical heterociclilo (isto é, uma fração heterociclil-alquileno). Grupos heterociclil alquilo típicos incluem, porém não limitados a heterociclil-Cfb-, heterociclil- CH(CH3)-, heterociclil-CH2CH2-, 2-(heterociclil)etan-l-ilo, e semelhantes, em que a fração "heterociclilo" inclui quaisquer dos grupos heterociclilo descritos acima, incluindo aqueles descritos em Principles of Modern Heterocyclic Chemistry. Alguém perito na especialidade também entenderá que o grupo heterociclilo pode ser ligado a uma fração alquilo da heterociclil alquilo por meio de uma ligação carbono-carbono ou uma ligação carbono-heteroátomo, com a condição de que o grupo resultante seja quimicamente estável. 0 grupo heterociclil alquilo compreende 6 a 20 átomos de carbono, por exemplo, a porção alquilo do grupo arilalquilo é de 1 a 6 átomos de carbono e a fração heterociclilo é de 5 a 14 átomos de carbono. Exemplos de heterociclilalquilos incluem a titulo de exemplo e não limitação enxofre, oxigénio, e/ou azoto de 5 membros, contendo heterociclos tais como tiazolilmetilo, 2-tiazoliletan-l-ilo, imidazolilmetilo, oxazolilmetilo, tiadiazolilmetilo, etc., enxofre, oxigénio, e/ou azoto de 6 membros que contêm heterociclos tais como piperidinilmetilo, piperazinilmetilo, morfolinilmetilo, piridinilmetilo, piridizilmetilo, pirimidilmetilo, pirazinilmetilo, etc. "Heterociclilalquenilo" refere-se a um radical alquenilo aciclico em que um dos átomos de hidrogénio ligado a um átomo de carbono, tipicamente um átomo de carbono terminal ou sp3, porém também um átomo de carbono sp2, é substituído com um radical heterociclilo (isto é, uma fração heterociclil-alquenileno). A fração heterociclilo do grupo heterociclil alquenilo inclui qualquer dos grupos heterociclilo descritos no presente documento, incluindo aqueles descritos em Principles of Modern Heterocyclic Chemistry, e a fração alquenilo do grupo heterociclil alquenilo inclui qualquer dos grupos alquenilo descritos no presente documento. Alguém perito na especialidade também entenderá que o grupo heterociclilo pode ser ligado à fração alquenilo da heterociclil alquenilo por meio de uma ligação de carbono-carbono ou uma ligação de carbono- heteroátomo, com a condição de que o grupo resultante é quimicamente estável. 0 grupo heterociclil alquenilo compreende 6 a 20 átomos de carbono, por exemplo, a porção alquenilo do grupo heterociclil alquenilo é 1 a 6 átomos de carbono e a fração heterociclilo é 5 a 14 átomos de carbono. "Heterociclilalquinilo" refere-se a um radical alquinilo acíclica em que um dos átomos de hidrogénio ligado a um átomo de carbono, tipicamente um átomo de carbono terminal ou sp3, porém também um átomo de carbono sp, é substituído com um radical heterociclilo (isto é, uma fração de heterociclil-alquinileno). A fração heterociclilo do grupo heterociclil alquinilo inclui qualquer dos grupos heterociclilo descritos no presente documento, incluindo aqueles descritos em Principles of Modern Heterocyclic Chemistry, e a fração alquinilo do grupo heterociclil alquinilo inclui qualquer dos grupos alquinilo descritos no presente documento. Alguém perito na especialidade também entenderá que o grupo heterociclilo podem ser ligado a uma fração alquinilo da heterociclil alquinilo por meio de uma ligação de carbono-carbono ou uma ligação carbono-heteroátomo, com a condição de que o grupo resultante seja quimicamente estável. 0 grupo heterociclilalquinilo compreende 6 a 20 átomos de carbono, por exemplo, a fração alquinilo do grupo heterociclilalquinilo é de 1 a 6 átomos de carbono e a fração heterociclilo é 5 a 14 átomos de carbono. "Heteroarilo" refere-se a um heterociclilo aromático tendo pelo menos um heteroátomo no anel. Exemplos não limitativos de heteroátomos adequados que podem ser incluídos no anel aromático incluem oxigénio, enxofre, e azoto. Exemplos não limitativos de anéis heteroarilo incluem todos aqueles listados na definição de "heterociclilo", incluindo piridinilo, pirrolilo, oxazolilo, indolilo, isoindolilo, purinilo, furanilo, tienilo, benzofuranilo, benzotiofenilo, carbazolilo, imidazolilo, tiazolilo, isoxazolilo, pirazolilo, isotiazolilo, quinolilo, isoquinolilo, piridazilo, pirimidilo, pirazilo, etc. "Carbociclo" ou "carbociclilo" refere-se a um anel aromático ou saturado, parcialmente insaturado tendo 3 a 7 átomos de carbono como um monociclo, 7 a 12 átomos de carbono como um biciclo, e até cerca de 20 átomos de carbono como um policiclo. Carbociclos monocíclicos têm 3 a 6 átomos do anel, ainda mais tipicamente 5 ou 6 átomos do anel. Carbociclos biciclicos têm 7 a 12 átomos do anel, por exemplo, dispostos como um sistema biciclo [4,5], [5,5], [5,6] ou [6,6], ou 9 ou 10 átomos do anel dispostos como um sistema biciclo [5,6] ou [6,6]. Exemplos de carbociclos monociclicos incluem ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, 1-ciclopent-l-enilo, l-ciclopent-2-enilo, 1-ciclopent-3-enilo, cicloexilo, 1-cicloex-l-enilo, 1- cicloex-2-enilo, l-cicloex-3-enilo, fenilo, e naftilo. "Arilheteroalquilo" refere-se a uma heteroalquilo como no presente documento definido, em que um átomo de hidrogénio (que podem ser ligados ou a um átomo de carbono ou um heteroátomo) foi substituído com um grupo arilo como no presente documento definido. Os grupos arilo podem ser ligados a um átomo de carbono do grupo heteroalquilo, ou a um heteroátomo do grupo heteroalquilo, contanto que o grupo arilheteroalquilo resultante proporciona uma fração quimicamente estável. Por exemplo, um grupo arilheteroalquilo pode ter as fórmulas gerais -alquileno-O-arilo, -alquileno-O-alquileno-arilo, -alquileno-NH-arilo, -alquileno-NH-alquileno-arilo, -alquileno-S-arilo, alquileno-S-alquileno-arilo, etc. Além disso, quaisquer das frações de alquileno nas fórmulas gerais acima podem ser também substituídas com qualquer dos substituintes definidos ou exemplificados no presente documento. "Heteroarilalquilo" refere-se a um grupo alquilo, como no presente documento definido, em que um átomo de hidrogénio foi substituído com um grupo heteroarilo como foi definido no presente documento. Exemplos não limitativos de heteroarilalquilo incluem -CH2-piridinilo, -CH2-pirrolilo, -CH2-oxazolilo, -CH2-indolilo, -CH2- isoindolilo, -Cth-purinilo, -CH2-furanilo, -CH2-tienilo, CH2-benzofuranilo, -Cth-benzotiofenilo, -CH2-carbazolilo, CH2-imidazolilo, -Cth-tiazolilo, -Cth-isoxazolilo, -CH2- pirazolilo, -Cth-isotiazolilo, -CH2-quinolilo, -CH2- isoquinolilo, -CH2-piridazilo, -CH2-pirimidilo, -CH2-pirazilo, -CH (CH3) -piridinilo, -CH (CH3) -pirrolilo, -CH (CH3) -oxazolilo, -CH (CH3)-indolilo, -CH (CH3)-isoindolilo, CH (CH3)-purinilo, -CH (CH3)-furanilo, -CH (CH3)-tienilo, CH (CH3)-benzofuranilo, -CH (CH3) -benzotiofenilo, -CH(CH3)-carbazolilo, -CH (CH3)-imidazolilo, -CH (CH3)-tiazolilo, CH (CH3)-isoxazolilo, -CH (CH3) -pirazolilo, -CH(CH3)- isotiazolilo, -CH(CH3)-quinolilo, -CH(CH3)-isoquinolilo, -CH(CH3)-piridazilo, -CH (CH3) -pirimidilo, -CH (CH3) -pirazilo, etc . 0 termo "opcionalmente substituído" em referência à uma fração particular do composto de fórmula I (por exemplo, um grupo arilo opcionalmente substituída) refere-se a uma fração tendo 0, 1, 2, ou mais substituintes. O termo "quiral" refere-se a moléculas que têm a propriedade de não sobreposição do parceiro de imagem de espelho, enquanto que o termo "aquiral" refere-se às moléculas que podem ser sobrepostas sobre seus parceiros de imagem de espelho. O termo "estereoisómeros" refere-se a compostos que têm constituição química idêntica, porém diferem com respeito à disposição dos átomos ou grupos no espaço. "Diastereómero" refere-se a um estereoisómero com dois ou mais centros de quiralidade e cujas moléculas não são imagens de espelho uma da outra. Diastereómeros têm diferentes propriedades físicas, por exemplo, pontos de fusão, pontos de ebulição, propriedades espetrais, e reatividades. Misturas de diastereómeros podem separar-se sob procedimentos analíticos de alta resolução tais como eletroforese e cromatografia. O termo "heteroarilo," como é usado no presente documento, refere-se a um anel aromático de cinco ou seis membros onde pelo menos um átomo é selecionado a partir do grupo que consiste em N, O, e S, e os átomos restantes são carbono. O termo "heteroarilo" também inclui sistemas bicíclicos onde um anel heteroarilo é fusionado a um grupo fenilo, um grupo cicloalquilo monocíclico, como foi definido no presente documento, um grupo heterociclo, como foi definido no presente documento, ou um grupo heteroarilo adicional. 0 termo "heteroarilo" também inclui sistemas triciclicos onde um sistema biciclico é fusionado a um grupo fenilo, um grupo cicloalquilo monocíclico, como foi definido no presente documento, um grupo heterociclo, como foi definido no presente documento, ou um grupo heteroarilo adicional. Os grupos heteroarilo são ligados à fração molecular original através de qualquer átomo de carbono ou azoto substituível nos grupos. Exemplos de grupos heteroarilo incluem benzotienilo, benzoxazolilo, benzimidazolilo, benzoxadiazolilo, dibenzofuranilo, dihidrobenzotiazolilo, furanilo (furilo) , imidazolilo, imidazopiridinilo, indazolilo, indolilo, isoindolilo, isoxazolilo, isoquinolinilo, isotiazolilo, oxadiazolilo, oxazolilo, tiazolilo, tienopiridinilo, tienilo, triazolilo, tiadiazolilo, tetrazolilo, piridoimidazolilo, piridilo, piridazinilo, pirimidinilo, pirazinilo, pirazolilo, pirrolilo, quinolinilo, tetrahidroquinolinilo, tetrahidropiranilo e triazinilo. Os grupos heteroarilo da presente invenção podem ser substituídos ou não substituídos. Além disso, os heteroátomos de azoto podem ser opcionalmente quaternizados ou oxidados ao N-óxido. Também, os anéis que contêm azoto podem ser opcionalmente N-protegidos. "Enantiómeros" referem-se a dois estereoisómeros de um composto que não imagens de espelho que não se sobrepõem uma à outra.
Definições estereoquímicas e convenções usadas no presente documento de modo geral seguem S. P. Parker, Ed., McGraw-Hill Dictionary of Chemical Terms (1984) McGraw-Hill Book Company, Nova Iorque; e Eliel, E. e Wilen, S., Stereochemistry of Organic Compounds (1994) John Wiley &
Sons, Inc., Nova Iorque. Muitos compostos orgânicos existem em formas oticamente ativas, isto é, eles têm a capacidade de girar o plano de luz de plano polarizado. Na descrição de um composto oticamente ativo, os prefixos D e L ou R e S são utilizados para denotar a configuração absoluta da molécula em torno de seu(s) centro(s) quirais. Os prefixos d e I ou ( + ) e (-) são utilizados para designar o sinal de rotação de luz de plano polarizado pelo composto, com (-) ou 1 significando que o composto é levorotatório. Um composto com prefixo de ( + ) ou d é dextrorotatório. Para uma determinada estrutura química, estes estereoisómeros são idênticos exceto que eles são imagens de espelho um do outro. Um estereoisómero específico pode também ser referido como um enantiómero, e uma mistura de tais isómeros é frequentemente chamada uma mistura enantiomérica. Uma mistura 50:50 de enantiómeros é referida como uma mistura racémica ou um racemato, que pode ocorrer onde não existe nenhuma estereosseleção ou estereoespecificidade num processo ou reação química. Os termos "mistura racémica" e "racemato" referem-se a uma mistura equimolar de duas espécies enantioméricas, desprovidas de atividade ótica. "Ligante" ou "ligação" refere-se a uma fração química que compreende uma ligação covalente ou uma cadeia ou grupo de átomos que unem covalentemente um grupo fosfonato a um fármaco. Os ligantes incluem porções de substituintes A1 e A3, que incluem frações tais como: unidades repetidas de alquiloxi (por exemplo, polietilenoxi, PEG, polimetilenooxi) e alquilamino (por exemplo, polietilenoamino, Jeffamine™); e éster diácido e amidas que incluem sucinato, sucinamida, diglicolato, malonato e caproamida.
Os termos "fosfonato" e "fosfonato grupo" incluem grupos funcionais ou resíduos numa molécula que compreende um fósforo que está 1) unido de forma individual a um carbono, 2) unido duplamente a um heteroátomo, 3) unido de forma simples a um heteroátomo, e 4) unido de forma individual a outro heteroátomo, onde cada heteroátomo pode ser o mesmo ou diferente. Os termos "fosfonato" e "grupo fosfonato" também incluem grupos ou residuos funcionais que compreendem um fósforo no mesmo estado de oxidação como o fósforo que foi descrito anteriormente, assim como grupos ou residuos funcionais que compreendem um resíduo de pró-fármaco que pode ser separado de um composto de maneira que o composto conserve um fósforo que tem as caraterísticas que foram descritas anteriormente. Por exemplo, os termos "fosfonato" e "grupo fosfonato" incluem grupos funcionais de ácido fosfónico, monoéster fosfónico, diéster fosfónico, fosfonamidato e fosfontioato. Numa forma de realização específica da invenção, os termos "fosfonato" e "grupo fosfonato" incluem grupos ou resíduos funcionais numa molécula que compreende um fósforo que está 1) unido de forma simples a um carbono, 2) unido duplamente a um oxigénio, 3) unido de forma simples a um oxigénio, e 4) unido de forma simples a outro oxigénio, assim como grupos ou resíduos funcionais que compreendem um resíduo pró-fármaco que pode ser separado de um composto de maneira que o composto conserve um fósforo que tem as ditas caraterísticas. Noutra forma de realização específica da invenção, os termos "fosfonato" e "grupo fosfonato" incluem grupos ou resíduos funcionais numa molécula que compreende um fósforo que está 1) unido de forma simples a um carbono, 2) unido duplamente a um oxigénio, 3) unido de forma simples a um oxigénio ou azoto, e 4) unido de forma simples a outro oxigénio ou azoto, assim como grupos ou resíduos funcionais que compreendem um resíduo de pró-fármaco que pode ser separado de um composto de maneira que o composto conserve um fósforo que tem as ditas caraterísticas. 0 termo "pró-fármaco", como é usado no presente documento, refere-se a qualquer composto que, quando se administra a um sistema biológico, gera a substância de fármaco, isto é o principio ativo, como resultado de uma reação ou reações guimicas espontâneas, uma reação ou reações químicas catalisadas por enzimas, uma reação ou reações químicas de fotólise e/ou metabólicas. Portanto, um pró-fármaco é um análogo modificado covalentemente ou forma latente de um composto terapeuticamente ativo. "Fração de pró-fármaco" refere-se a um grupo funcional lábil que separa do composto ativo durante o metabolismo, sistematicamente, no interior de uma célula, por hidrólise, clivagem enzimática, ou por algum outro processo (Bundgaard, Hans, "Design and Application of Prodrugs" em A Textbook of Drug Design and Development (1991), P. Krogsgaard-Larsen e H. Bundgaard, Eds. Harwood Academic Publishers, pp. 113-191). As enzimas que são capazes de um mecanismo de ativação enzimática com os compostos de pró-fármaco de fosfonato da invenção incluem, mas não são limitados a, amidases, esterases, enzimas microbianas, fosfolipases, colinesterases, e fosfases. Frações de pró-fármacos podem servir para aumentar a solubilidade, absorção e lipofilicidade para otimizar administração de fármacos, biodisponibilidade e eficácia. Uma fração de pró-fármaco pode incluir um metabolito ativo ou o próprio fármaco.
Frações de pró-fármacos exemplares incluem os ésteres hidroliticamente sensíveis ou de aciloximetilo lábeis CH20C(=0)R99 e carbonatos de aciloximetil -CH2OC (=0) OR99 onde R99 é Ci-Ce alquilo, Ci-Ce alquilo substituído, C6-C20 arilo ou C6-C20 arilo substituído. 0 éster aciloxialquílico foi primeiro usado como uma estratégia de pró-fármaco para os ácidos carboxílicos e, em seguida, aplicado a fosfatos e fosfonatos por Farquhar et al. (1983) J. Pharm. Sei. 72: 324; também Patente US N° 4816570, 4968788, 5663159 e 5792756. Subsequentemente, o éster aciloxialquílico foi usado para administrar ácidos fosfónicos através de membranas celulares e para aumentar a biodisponibilidade oral. Uma variante próxima do éster aciloxialquílico, o éster alcoxicarboniloxialquilico (carbonato), pode também aumentar a biodisponibilidade oral como uma fração de pró-fármaco nos compostos das combinações da invenção. Um éster aciloximetilico exemplar é pivaloiloximetoxi, (POM) CH2OC(=0)C(CH3)3. Uma fração de carbonato de aciloximetilo exemplar de pró-fármaco é pivaloiloximetilcarbonato (POC) -CH2OC (=0) OC (CH3) 3. 0 qrupo fosfonato pode ser uma fração de pró-fármaco fosfonato. 0 fração de pró-fármaco pode ser sensível à hidrólise, tal como, mas sem limitação, um qrupo carbonato de pivaloiloximetilo (POC) ou POM. Como alternativa, a fração de pró-fármaco pode ser sensível à clivaqem enzimática potenciada, tal como um grupo éster de lactato ou um grupo fosfonamidato-éster. 0 perito na especialidade reconhecerá que substituintes e outras frações dos compostos de fórmula I devem ser selecionados a fim de fornecer um composto que é suficientemente estável para fornecer um composto f armaceuticamente útil que pode ser Formulado numa composição farmacêutica aceitavelmente estável. Os compostos de fórmula I que têm tal estabilidade são contemplados como incluídos no âmbito da presente invenção. Grupos de Proteção
No contexto da presente invenção, grupos de proteção incluem frações de pró-fármaco e grupos químicos de proteção.
Grupos de proteção são disponíveis, comumente conhecidos e utilizados, e são opcionalmente utilizados para prevenir reações colaterais com o grupo protegido durante procedimentos sintéticos, isto é, rotinas ou métodos para preparar os compostos da invenção. Em geral a decisão como a quais grupos proteger, quando fazer isso, e a natureza do grupo de proteção químico "GP" será dependente da química da reação a ser protegida contra (por exemplo, condições acídicas, básicas, oxidativas, redutivas ou outras) e a direção pretendida da síntese. Os grupos GP não precisam ser, e de modo geral não são, iguais se o composto for substituído com múltiplos GP. Em geral, os GP serão utilizados para proteger grupos funcionais tais como grupos carboxilo, hidroxilo, tio, ou amino e para desse modo prevenir reações secundárias ou para de outro modo facilitar a eficiência sintética. A ordem de desproteção para produzir grupos desprotegidos, livres é dependente da direção pretendida da síntese e as condições de reação a serem encontradas, e pode ocorrer em qualquer ordem como determinado pelo técnico. Vários grupos funcionais dos compostos da invenção podem ser protegidos. Por exemplo, grupos de proteção para grupos -OH (seja hidroxilo, ácido carboxílico, ácido fosfónico, ou outras funções) incluem "grupos formadores de éter ou éster". Grupos formadores de éter ou éster são capazes de funcionar como grupos químicos de proteção nos esquemas sintéticos mencionados no presente documento. Entretanto, alguns grupos de proteção hidroxilo e tio não são grupos formadores nem de éter nem de éster, como será entendido pelos peritos na especialidade, e são incluídos com amidas, descritas a seguir.
Um número muito grande de grupos de proteção hidroxilo e grupos formadores de amida e as correspondentes reações de clivagem química são descritos em Protective Groups in Organic Synthesis, Theodora W. Greene (John Wiley & Sons, Inc., Nova Iorque, 1991, ISBN 0-471-62301-6) ("Greene"). Veja-se também Kocienski, Philip J.; Protecting Groups (Georg Tieme Verlag Stuttgart, Nova Iorque, 1994) . Em particular o capítulo 1, Protecting Groups: An Overview, páginas 1-20, Capítulo 2, Hydroxyl Protecting Groups, páginas 21-94, Capítulo 3, Diol Protecting Groups, páginas 95-117, Capítulo 4, Carboxyl Protecting Groups, páginas 118-154, Capítulo 5, Carbonyl Protecting Groups, páginas 155-184. Para os grupos de proteção para ácido carboxilico, ácido fosfónico, fosfonato, ácido sulfónico e outros grupos de proteção para ácidos, veja-se Greene como mencionado a seguir. Tais grupos incluem a título de exemplo e não limitação, ésteres, amidas, hidrazidas, e semelhantes. Grupos de proteção formadores de Éter e Éster
Grupos formadores de éster incluem: (1) grupos formadores de éster de fosfonato, tais como ésteres fosfonamidato, ésteres fosforotioato, ésteres fosfonato, e fosfon-bis-amidatos; (2) grupos formadores de éster de carboxilo, e (3) grupos formadores de éster de enxofre, tais como sulfonato, sulfato, e sulfinato.
Metabólitos dos compostos da invenção
Também revelados estão os produtos metabólicos in vivo dos compostos descritos no presente documento. Tais produtos podem resultar, por exemplo, da oxidação, redução, hidrólise, amidação, esterificação e similares do composto administrado, primeiramente devido a processos enzimáticos. Consequentemente, a revelação inclui compostos produzidos por um processo que compreende contatar um composto desta invenção com um mamífero durante um período de tempo suficiente para produzir um produto metabólico deste. Tais produtos tipicamente são identificados preparando um composto da invenção radiomarcado (por exemplo, Cu ou H3), administrando-o parentericamente numa dose detetável (por exemplo, maior do que cerca de 0,5 mg/kg) a um animal tal como rato, ratinho, cobaia, macaco, ou ao homem, permitindo suficiente tempo para o metabolismo ocorrer (tipicamente cerca de 30 segundos a 30 horas) e isolando seus produtos de conversão da urina, sangue ou outras amostras biológicas. Estes produtos são facilmente isolados, visto que eles são rotulados (outros são isolados pelo utilização de anticorpos capazes de ligar epítopos que sobrevivem no metabólito). As estruturas de metabólito são determinadas de modo convencional, por exemplo, por análise de MS ou RMN. Em geral, análise de metabólitos é feita da mesma maneira de estudos de metabolismo de fármaco convencional bem conhecido pelos peritos na especialidade. Os produtos de conversão, contanto que eles não sejam de outro modo encontrados in vivo, são úteis nos ensaios diagnósticos para dosagem terapêutica dos compostos da invenção mesmo se eles não possuírem nenhuma atividade anti-infeciosa em si próprios.
Numa forma de realização, o composto da invenção tem uma das seguintes estruturas:
e
ou um sal farmaceuticamente aceitável, solvato, e/ou éster do mesmo, e também incluindo estereoisómeros ou misturas de estereoisómeros do mesmo. 0 perito na especialidade reconhecerá que estereoisómeros ou misturas de estereoisómeros dos compostos do presente pedido incluem enantiómeros, diastereómeros, e outros estereoisómeros. Por exemplo, para:
bem como misturas de dois ou mais destes estereoisómeros. Formulações Farmacêuticas
Os compostos desta invenção são formulados com veiculos e excipientes convencionais, que serão selecionados de acordo com a prática ordinária. Comprimidos conterão excipientes, deslizantes, cargas, aglutinantes e semelhantes. Formulações aquosas são preparadas em forma estéril, e quando pretendidas para libertação por exceto a administração oral, de modo geral serão isotónicas. Todas as Formulações conterão opcionalmente excipientes tais como aqueles mencionados no Handbook of Pharmaceutical Excipients (1986). Excipientes incluem ácido ascórbico e outros antioxidantes, agentes quelantes tal como EDTA, hidratos de carbono tais como dextrina, hidroxialquilcelulose, hidroxialquilmetilcelulose, ácido esteárico e semelhantes. 0 pH das Formulações varia de cerca de 3 a cerca de 11, porém é ordinariamente em torno de 7 a 10.
Ao mesmo tempo que é possível para os ingredientes ativos serem administrados sozinhos, pode ser preferível apresentá-los como formulações farmacêuticas. As Formulações da invenção, tanto para utilização veterinário quanto para humano, compreendem pelo menos um ingrediente ativo, como é definido acima, juntamente com um ou mais veículos aceitáveis e opcionalmente outros ingredientes terapêuticos. 0(s) veículo (s) devem ser "aceitáveis" no sentido de ser compatíveis com os outros ingredientes da Formulação e fisiologicamente inócuo ao recebedor do mesmo.
As Formulações incluem aquelas adequadas para as rotinas de administração anteriores. As Formulações podem convenientemente ser preparadas por qualquer dos métodos bem conhecidos na técnica de farmácia. Técnicas e Formulações de modo geral são encontradas em Remington's Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing Co., Easton, Pa.). Tais métodos incluem a etapa de por em associação o ingrediente ativo com o veiculo que constitui um ou mais ingredientes acessórios. Em geral as formulações são preparadas por uniformemente e intimamente por em associação o ingrediente ativo com veículos líquidos ou veículos sólidos finamente divididos ou ambos, e então, se for necessário, dar forma ao produto.
As formulações da presente invenção adequadas para administração oral podem ser apresentadas como unidades diferenciadas tais como cápsulas, cachets ou comprimidos cada um dos quais contendo uma quantidade predeterminada do ingrediente ativo; como um pó ou grânulos; como uma solução ou uma suspensão num líquido aquoso ou não aquoso; ou como uma emulsão líquida de óleo-em-água ou uma emulsão líquida de água-em-óleo. 0 ingrediente ativo pode também ser administrado como um bolus, eletuário ou pasta.
Um comprimido é preparado compressão ou moldagem, opcionalmente com um ou mais ingredientes acessórios. Comprimidos comprimidos podem ser preparados ao comprimir numa máquina adequada o ingrediente ativo numa forma de fluxo livre tal como um pó ou grânulos, opcionalmente misturado com um aglutinante, lubrificante, diluente inerte, conservante, tensioativo ou agente de dispersão. Comprimidos moldados podem ser feitos por meio de moldagem numa máquina adequada uma mistura do ingrediente ativo em pó humedecido com um diluente líquido inerte. Os comprimidos podem opcionalmente ser revestidos ou marcados e opcionalmente são formulados de modo a fornecer libertação lenta ou controlada do ingrediente ativo.
Para administração ao olho ou outros tecidos externos, por exemplo, boca e pele, as formulações são preferentemente aplicadas como uma pomada tópica ou creme que contém os ingredientes ativos numa quantidade de, por exemplo, 0,075 a 20 % p/p (que inclui ingredientes ativos num intervalo entre 0,1% e 20 % em incrementos de 0,1 % p/p tal como 0,6 % p/p, 0,7 % p/p, etc.), preferentemente de 0,2 a 15 % p/p e o mais preferentemente de 0,5 a 10 % p/p. Quando formulados numa pomada, os ingredientes ativos podem ser utilizados com uma base de pomada parafínica ou um miscivel água. Alternativamente, os ingredientes ativos podem ser formulados num creme com uma base de creme de óleo-em-água.
Se for desejado, a fase aquosa da base de creme pode incluir, por exemplo, por exemplo, pelo menos 30 % p/p de um álcool polihidrico, isto é, um álcool que tem dois ou mais grupos hidroxilo tais como propileno glicol, butano 1,3-diol, manitol, sorbitol, glicerol e polietileno glicol (que inclui PEG 400) e misturas dos mesmos. As formulações tópicas podem desejavelmente incluir um composto que melhora a absorção ou penetração do ingrediente ativo através da pele ou outras áreas afetadas. Exemplos de tais melhoradores de penetração dérmica incluem sulfóxido de dimetilo e análogos relacionados. A fase de óleo das emulsões desta invenção pode ser constituída de ingredientes conhecidos numa maneira conhecida. Embora a fase possa compreender meramente um emulsionante (de outro modo conhecido como um emulgente), desejavelmente compreende uma mistura de pelo menos um emulsionante com uma gordura ou um óleo ou com tanto uma gordura como um óleo. Preferentemente, um emulsionante hidrofílico é incluído juntamente com um emulsionante lipofílico que age como um estabilizante. É também preferido incluir tanto um óleo como uma gordura. Juntamente, os emulsionantes com ou sem estabilizantes compõem a denominada cera emulsionante, e a cera juntamente com o óleo e a gordura compõem a denominada base de pomada emulsionante que forma a fase dispersa oleosa das formulações de creme.
Emulgentes e estabilizantes de emulsão adequados para a utilização na formulação da invenção incluem Tween® 60, Span® 80, álcool cetoestearilico, álcool benzilico, álcool miristilico, mono-estearato de glicerilo e lauril sulfato de sódio. A escolha de óleos ou gorduras adequadas para a formulação baseia-se em conseguir as propriedades cosméticas desejadas. O creme deve preferentemente ser um produto não gorduroso, não colorido e lavável com consistência adequada para evitar o vazamento de tubos ou outros recipientes. Ésteres alquílicos de cadeia linear ou ramificada, mono- ou dibásicos tais como di-isoadipato, estearato de isocetilo, propileno glicol diéster de ácidos gordos de coco, miristato de isopropilo, oleato de decilo, palmitato de isopropilo, estearato de butilo, palmitato de 2-etilhexilo ou uma mistura de ésteres de cadeia ramificada conhecidos como Crodamol CAP podem ser utilizados, os últimos três sendo ésteres preferidos. Estes podem ser utilizados em separado ou em combinação dependendo das propriedades requeridas. Alternativamente, lipidos com alto ponto de fusão tais como parafina branca macia e/ou parafina liquida ou outros óleos minerais são utilizados.
As formulações farmacêuticas de acordo com a presente invenção compreendem um ou mais compostos da invenção juntamente com um ou mais veículos ou excipientes farmaceuticamente aceitáveis e opcionalmente outros agentes terapêuticos. As formulações farmacêuticas que contêm o ingrediente ativo podem estar em qualquer forma adequada para o método pretendido de administração. Quando utilizadas para a utilização oral podem ser preparados, por exemplo, comprimidos, trociscos, pastilhas, suspensões aquosas ou oleosas, pós ou grânulos dispersáveis, emulsões, cápsulas duras ou moles, xaropes ou elixires. As composições destinadas para utilização oral podem ser preparadas de acordo com qualquer método conhecido à especialidade para o fabrico de composições farmacêuticas e tais composições podem conter um ou mais aqentes que incluem agentes adoçantes, agentes aromatizantes, agentes corantes e agentes conservantes, de forma a proporcionar uma preparação palatável. Comprimidos que contêm o ingrediente ativo em mistura com excipiente farmaceuticamente aceitável não tóxico que são adequados para o fabrico de comprimidos são aceitáveis. Estes excipientes podem ser, por exemplo, diluentes inertes, carbonato de cálcio ou de sódio, lactose, lactose monohidratada, croscarmelose de sódio, povidona, fosfato de cálcio ou sódio; agentes de granulação e de desintegração, tal como amido de milho, ou ácido alginico; agentes ligantes, tais como celulose, celulose microcristalina, amido, gelatina ou acácia; e agentes lubrificantes, tais como estereato de magnésio, ácido esteárico ou talco. Os comprimidos podem ser não revestidos ou podem ser revestidos através de técnicas conhecidas incluindo microencapsulação para atrasar a desintegração e adsorção no trato gastrointestinal e proporcionando assim uma ação continua durante um período mais longo. Por exemplo, um material retardador tal como o monoestearato de glicerilo ou diestearato de glicerilo podem ser empregues isoladamente ou com uma cera.
As formulações para utilização oral podem também ser apresentadas como cápsulas de gelatina duras, em que o ingrediente ativo está misturado com um diluente sólido inerte, por exemplo, fosfato de cálcio ou caulino, ou como cápsulas de gelatina moles em que o ingrediente ativo está misturado com água ou um meio oleoso, tal como óleo de amendoim, parafina líquida ou azeite.
Suspensões aquosas da invenção contêm os materiais ativos em mistura com excipientes adequados para o fabrico de suspensões aquosas. Tais excipientes incluem um agente de suspensão, tal como carboximetilcelulose de sódio, metilcelulose, hidroxipropilmetilcelulose, alginato de sódio, polivinilpirrolidona, goma tragacanto e goma acácia, e agentes dispersantes ou humectantes tais como um fosfátido de ocorrência natural (por exemplo, lecitina), um produto da condensação de um óxido de alquileno com um ácido gordo (por exemplo, estearato de polioxietileno) , um produto da condensação de óxido de etileno com um álcool alifático de cadeia longa (por exemplo, heptadecaetilenooxicetanol), um produto da condensação de óxido de etileno com um éster parcial derivado a partir de um ácido gordo e anidrido de hexitol (por exemplo, monooleato de polioxietileno sorbitano). A suspensão aquosa pode também conter um ou mais conservantes tais como p-hidroxi-benzoato de etilo ou n-propilo, um ou mais agentes colorantes, um ou mais agentes aromatizantes e um ou mais agentes adoçantes, tais como sacarose ou sacarina.
Suspensões oleosas podem ser formuladas por meio da suspensão do ingrediente ativo num óleo vegetal, tal como óleo de amendoim, óleo de oliva, óleo de sésamo ou óleo de coco, ou num óleo mineral tal como parafina liquida. As suspensões orais podem conter um agente espessante, tal como cera de abelha, parafina sólida ou álcool cetilico. Agentes adoçantes, tais como aqueles indicados no presente documento, e agentes aromatizantes podem ser adicionados para fornecer uma preparação oral palatável. Estas composições podem ser conservadas pela adição de um antioxidante tal como ácido ascórbico. Pós e grânulos dispersiveis da invenção adequados para preparação de uma suspensão aquosa pela adição de água fornecem o ingrediente ativo em mistura com um agente dispersante ou humectante, um agente de suspensão, e um ou mais conservantes. Agentes dispersantes ou humectantes e agentes de suspensão adequados são exemplificados por aqueles revelados acima. Excipientes adicionais, por exemplo, agentes adoçantes, aromatizantes e colorantes, podem também estar presentes.
As composições farmacêuticas da invenção podem também estar na forma de emulsões de óleo-em-água. A fase oleosa podem ser um óleo vegetal, tal como azeite ou óleo de amendoim, um óleo mineral, tal como parafina liquida, ou uma mistura destes. Agentes emulsificantes adequados incluem gomas que ocorrem naturalmente, tais como goma acácia ou goma tragacanto, fosfatideos de ocorrência natural, tais como lecitina de soja, ésteres ou ésteres parciais derivados de ácidos gordos e anidridos de hexitol, tais como monooleato de sorbitano, e produtos da condensação destes ésteres parciais com óxido de etileno, tais como monooleato de polioxietileno sorbitano. A emulsão pode conter também agentes edulcorantes e aromatizantes. Xaropes e elixires podem ser formulados com agentes edulcorantes, tais como glicerol, sorbitol ou sacarose. Tais formulações podem conter também um demulcente, um conservante, um agente aromatizante ou corante.
As composições farmacêuticas da invenção podem estar sob a forma de uma preparação injetável estéril, tais como uma suspensão aquosa ou oleaginosa injetável estéril. Esta suspensão pode ser formulada de acordo com o estado da técnica utilizando aqueles agentes dispersantes ou humectantes e agentes de suspensão adequados que forma mencionado no presente documento. A preparação injetável estéril pode também ser uma solução ou suspensão injetável estéril num diluente ou solvente não tóxico parentericamente aceitável, tal como uma solução em 1,3-butano-diol ou preparado como um pó liofilizado. Entre os veículos e solventes aceitáveis que podem ser empregues estão água, solução de Ringer e solução de cloreto de sódio isotónica. Adicionalmente, óleos fixos estéreis podem ser convencionalmente empregues como um solvente ou meio de suspensão. Para este propósito, qualquer óleo fixo suave pode ser empregue, incluindo mono- ou diglicéridos sintéticos. Adicionalmente, ácidos gordos tais como ácido oleico podem igualmente ser utilizados na preparação de injetáveis. A quantidade de ingrediente ativo que pode ser combinada com o material veiculo para produzir uma forma farmacêutica individual variará dependendo do hospedeiro tratado e o modo particular de administração. Por exemplo, uma formulação de libertação no tempo pretendido para administração oral a seres humanos pode conter aproximadamente 1 até 1000 mg de material ativo composto com uma quantidade apropriada e conveniente de material veiculo que pode variar de cerca de 5 a cerca de 95 % das composições totais (peso:peso). A composição farmacêutica pode ser preparada para fornecer quantidades facilmente mensuráveis para administração. Por exemplo, uma solução aquosa destinada a infusão intravenosa pode conter de cerca de 3 a 500 pg do ingrediente ativo por mililitro de solução com a finalidade de que infusão de um volume adequado numa taxa de cerca de 30 ml/h pode ocorrer.
Formulações adequadas para administração ao olho incluem gotas oculares em que o ingrediente ativo é dissolvido ou suspenso num veículo adequado, especialmente um solvente aquoso para o ingrediente ativo. O ingrediente ativo é preferentemente presente em tais formulações numa concentração de 0,5 a 20 %, vantajosamente 0,5 até 10 %, particularmente cerca de 1,5 % p/p.
As formulações adequadas para administração tópica na boca incluem pastilhas que compreendem o ingrediente ativo numa base aromatizada, normalmente sacarose e acácia ou tragacanto; pastilhas que compreendem o ingrediente ativo numa base inerte tal como gelatina e glicerina ou sacarose e acácia; e colutórios que compreendem o ingrediente ativo num veículo líquido adequado.
Formulações para administração rectal podem estar presentes como um supositório com uma base adequado que compreende, por exemplo, manteiga de cacau ou um salicilato.
Formulações adequadas para administração intrapulmonar ou nasal têm um tamanho de partícula, por exemplo, no intervalo de 0,1 a 500 pm (incluindo tamanhos de partícula num intervalo entre 0,1 e 500 pm em incrementos tais como 0,5 pm, 1 pm, 30 pm, 35 pm, etc.), que é administrado por rápida inalação através da passagem nasal ou por inalação através da boca, a fim de alcançar os sacos alveolares. Formulações adequadas incluem soluções aquosas ou oleosas do ingrediente ativo. Formulações adequadas para administração por aerossol ou pó seco podem ser preparadas de acordo com métodos convencionais e podem ser libertadas com outros agentes terapêuticos tais como compostos até agora utilizados no tratamento ou profilaxia de infeções como descrito no presente documento.
As formulações adequadas para administração vaginal podem ser apresentadas como pessários, tampões, cremes, géis, pastas, espumas ou formulações em pulverização contendo em adição ao ingrediente ativo tais veículos como são conhecidos na técnica como sendo apropriados.
Formulações adequadas para administração parentérica incluem soluções de injeção aquosas e não aquosas estéreis que podem conter antioxidantes, tampões, bacteriostáticos e solutos que tornam a formulação isotónica com o sangue do recebedor pretendido; e suspensões estéreis aquosas e não aquosas que podem incluir agentes de suspensão e agentes espessantes.
As formulações são apresentadas em recipientes de dose unitária ou multidose, por exemplo, ampolas e frascos vedados, e podem ser armazenadas numa condição seca por congelamento (liofilizado) que requer somente a adição do veículo líquido estéril, por exemplo, água para injeção, imediatamente antes de utilização. Soluções e suspensões de injeção extemporâneas são preparadas a partir de pós, grânulos e comprimidos estéreis do tipo previamente descrito. Formulações farmacêuticas unitárias preferidas são aquelas que contêm uma dose diária ou subdose diária unitária, conforme no presente documento acima recitada, ou uma fração apropriada da mesma, do ingrediente ativo.
Deve ser entendido que para além dos ingredientes particularmente mencionados acima das formulações desta invenção podem incluir outros agentes convencionais na especialidade que tem relação com o tipo de formulação em questão, por exemplo, aqueles adequados para administração oral podem incluir agentes aromatizantes. A invenção ainda fornece composições veterinárias que compreendem pelo menos um ingrediente ativo como acima definido juntamente com um veiculo veterinário.
Veículos veterinários são materiais úteis para o propósito de administrar a composição e podem ser materiais sólidos, líquidos ou gasosos que são de outro modo inertes ou aceitáveis no campo veterinário e são compatíveis com o ingrediente ativo. Estas composições veterinárias podem ser administradas por via oral, parentericamente ou por qualquer outra via desejada.
Os compostos da invenção podem também ser formulados para fornecer libertação controlada do ingrediente ativo para permitir dosagem menos frequente ou para melhorar o farmacocinético ou perfil de toxicidade do ingrediente ativo. Consequentemente, a invenção também proporciona composições que compreendem um ou mais compostos da invenção formulados para libertação sustentada ou controlada. A dose eficaz de um ingrediente ativo depende pelo menos da natureza da condição que está a ser tratada, toxicidade, se o composto está a ser utilizado profilaticamente (doses menores) ou contra uma doença ou condição ativa, método de libertação, e a Formulação farmacêutica, e será determinada pelo médico utilizando estudos de escala de dose convencional. A dose eficaz pode ser esperada ser de cerca de 0,0001 a cerca de 100 mg/kg de peso corporal por dia. Tipicamente, de cerca de 0,01 a cerca de 10 mg/kg de peso corporal por dia. Mais tipicamente, de cerca de 0,01 a cerca de 5 mg/kg de peso corporal por dia. Mais tipicamente, de cerca de 0,05 a cerca de 0,5 mg/kg de peso corporal por dia. Por exemplo, a dose candidata diária para um humano adulto de aproximadamente 7 0 kg de peso corporal variará de 1 mg a 1000 mg, ou entre 5 mg e 500 mg, e pode tomar a forma de dose única ou múltiplas doses.
Numa outra forma de realização, o presente pedido proporciona uma composição farmacêutica gue compreende uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da presente invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável, solvato, e/ou éster do mesmo, e um veiculo farmaceuticamente aceitável.
Numa outra forma de realização, o presente pedido proporciona uma composição farmacêutica que compreende uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da presente invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável, solvato, e/ou éster do mesmo, em combinação com pelo menos um agente terapêutico ativo adicional e um veiculo farmaceuticamente aceitável.
Numa outra forma de realização, o presente pedido proporciona uma composição farmacêutica que compreende uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da presente invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável, solvato, e/ou éster do mesmo, em combinação com pelo menos um agente terapêutico ativo adicional e um veiculo farmaceuticamente aceitável; em que o dito pelo menos um agente terapêutico ativo adicional é selecionado a partir do grupo que consiste em compostos que inibem a protease do VIH, inibidores não nucleosidicos do VIH de transcritase reversa, inibidores nucleosidicos do VIH de transcritase reversa, inibidores nucleotidicos do VIH de transcritase reversa, inibidores da integrase do VIH, inibidores de gp4, inibidores de CXCR4, inibidores de entrada, inibidores de gpl20, inibidores de G6PD e NADH-oxidase, inibidores de CCR5, outros fármacos para tratar VIH, e misturas dos mesmos .
Numa outra forma de realização, o presente pedido proporciona uma composição farmacêutica que compreende uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da presente invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável, solvato, e/ou éster do mesmo, em combinação com pelo menos um agente terapêutico ativo adicional e um veiculo farmaceuticamente aceitável; em que o dito pelo menos um agente terapêutico ativo adicional é selecionado a partir do grupo que consiste em (1) inibidores da protease do VIH são selecionados a partir do grupo que consiste em amprenavir, atazanavir, fosamprenavir, indinavir, lopinavir, ritonavir, nelfinavir, saquinavir, tipranavir, brecanavir, darunavir, TMC-126, TMC-114, inozenavir (DMP-450), JE-2147 (AG1776), L-756423, RO0334649, KNI-272, DPC-681, DPC-684, GW640385X, DG17, PPL-100, DG35, e AG 1859; (2) inibidores não nucleosidicos do VIH de transcritase reversa são selecionados a partir do grupo que consiste em capravirina, emivirina, delaviridina, efavirenz, nevirapina, (+) calanolida A, etravirina, GW5634, DPC-083, DPC-961, DPC-963, MIV-150, TMC- 120, TMC-278 (rilpivireno), efavirenz, BILR 355 BS, VRX 840773, UK-453061, e RDEA806; (3) inibidores nucleosidicos do VIH de transcritase reversa são selecionados a partir do grupo que consiste em zidovudina, emtricitabina, didanosina, estavudina, zalcitabina, lamivudina, abacavir, amdoxovir, elvucitabina, alovudina, MIV-210, racivir (±-FTC), D-d4FC, emtricitabina, fosfazida, fozivudina tidoxil, apricitibina (AVX754), GS- 7340, amdoxovir, KP-1461, e fosalvudina tidoxil (anteriormente HDP 99.0003); (4) inibidores nucleotidicos do VIH de transcritase reversa são selecionados a partir do grupo que consiste em tenofovir e adefovir; (5) inibidores da integrase do VIH são selecionados a partir do grupo que consiste em curcumina, derivados de curcumina, ácido chicórico, derivados de ácido chicórico, ácido 3,5-dicafeoilquinico, derivados de ácido 3,5-dicafeoilquínico, ácido aurintricarboxilico, derivados de ácido aurintricarboxilico, éster fenetilico de ácido cafeico, derivados de éster fenetilico de ácido cafeico, tirfostina, derivados de tirfostina, quercetina, derivados de quercetina, S-1360, zintevir (AR-177), elvitegravir, L-870812, e L-870810, MK-0518 (raltegravir), BMS-538158, GSK364735C, BMS-707035, MK-2048, e BA 011; (6) inibidor de gp41 é selecionado a partir do grupo que consiste em enfuvirtida, sifuvirtida, FB006M, e TRI-1144; (7) inibidor de CXCR4 é AMD-070; (8) inibidor de entrada é SP01A; (9) inibidor de gpl20 é BMS-488043 ou BlockAide/ CR; (10) inibidor de G6PD e NADH-oxidase é imunitina; (11) inibidores de CCR5 são selecionados a partir do grupo que consiste em aplaviroc, vicriviroc, maraviroc, PRO-140, INCB15050, PF-232798 (Pfizer), e CCR5mAb004; e (12) outros fármacos para tratar VIH são selecionados a partir do grupo que consiste em BAS-100, SPI-452, REP 9, SP-01A, TNX-355, DES6, ODN-93, ODN-112, VGV-1, PA-457 (bevirimat), Ampligen, HRG214, Cytolin, VGX-410, KD-247, AMZ 0026, CYT 99007A-221 VIH, DEBIO- 025, BAY 50-4798, MDX010 (ipilimumab), PBS 119, ALG 889, e PA-1050040 (PA-040).
Numa outra forma de realização, o presente pedido proporciona um produto farmacêutico de combinação ou kit que compreende: uma primeira composição farmacêutica que compreende um composto da presente invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável, solvato, ou éster do mesmo; e uma segunda composição farmacêutica que compreende pelo menos um agente ativo adicional selecionado a partir do grupo que consiste em compostos que inibem a protease do VIH, inibidores não nucleosidicos do VIH de transcritase reversa, inibidores nucleosidicos do VIH de transcritase reversa, inibidores nucleotídicos do VIH de transcritase reversa, inibidores da integrase do VIH, inibidores de gp4, inibidores de CXCR4, inibidores de entrada, inibidores de gpl20, inibidores de G6PD e NADH-oxidase, inibidores de CCR5, outros fármacos para tratar VIH, e misturas dos mesmos.
Numa outra forma de realização, combinações adequadas incluem combinações de um ou mais compostos da presente invenção com um ou mais compostos que inibem a protease do VIH, inibidores não nucleosidicos do VIH de transcritase reversa, inibidores nucleosidicos do VIH de transcritase reversa, inibidores nucleotídicos do VIH de transcritase reversa, inibidores da integrase do VIH, inibidores de gp4, inibidores de CXCR4, inibidores de entrada, inibidores de gpl20, inibidores de G6PD e NADH-oxidase, inibidores de CCR5, outros fármacos para tratar VIH, e misturas dos mesmos.
Numa outra forma de realização, um ou mais compostos da presente invenção podem ser combinados com um ou mais compostos selecionados a partir do grupo que consiste em (1) inibidores da protease do VIH são selecionados a partir do grupo que consiste em amprenavir, atazanavir, fosamprenavir, indinavir, lopinavir, ritonavir, nelfinavir, saquinavir, tipranavir, brecanavir, darunavir, TMC-126, TMC-114, mozenavir (DMP-450), JE-2147 (AG1776), L-756423, ROO334 64 9, KNI-272, DPC-681, DPC-684, GW640385X, DG17, PPL-100, DG35, e AG 1859; (2) inibidores não nucleosidicos do VIH de transcritase reversa são selecionados a partir do grupo que consiste em capravirina, emivirina, delaviridina, efavirenz, nevirapina, (+) calanolida A, etravirina, GW5634, DPC-083, DPC-961, DPC-963, MIV-150, TMC-120, TMC- 278 (rilpivireno), efavirenz, BILR 355 BS, VRX 840773, UK-453061, e RDEA806; (3) inibidores nucleosidicos do VIH de transcritase reversa são selecionados a partir do grupo que consiste em zidovudina, emtricitabina, didanosina, estavudina, zalcitabina, lamivudina, abacavir, amdoxovir, elvucitabina, alovudina, MIV-210, racivir (+-FTC), D-d4FC, emtricitabina, fosfazida, fozivudina tidoxil, apricitibina (AVX754), GS-7340, amdoxovir, KP-1461, e fosalvudina tidoxil (anteriormente HDP 99.0003); (4) inibidores nucleotidicos do VIH de transcritase reversa são selecionados a partir do grupo que consiste em tenofovir e adefovir; (5) inibidores da integrase do VIH são selecionados a partir do grupo que consiste em curcumina, derivados de curcumina, ácido chicórico, derivados de ácido chicórico, ácido 3,5-dicafeoilquinico, derivados do ácido 3,5-dicafeoilquinico, ácido aurintricarboxilico, derivados do ácido aurintricarboxilico, éster fenetilico de ácido cafeico, derivados do éster fenetilico de ácido cafeico, tirfostina, derivados de tirfostina, quercetina, derivados de quercetina, S-1360, zintevir (AR-177), elvitegravir, L-870812, e L-870810, MK-0518 (raltegravir), BMS- 538158, GSK364735C, BMS-707035, MK-2048, e BA 011; (6) inibidor de gp41 é selecionado a partir do grupo que consiste em enfuvirtida, sifuvirtida, FB006M, e TRI-1144; (7) inibidor de CXCR4 é AMD-070; (8) inibidor de entrada é SP01A; (9) inibidor de gpl20 é BMS-488043 ou BlockAide/ CR; (10) inibidor de G6PD e NADH-oxidase é imunitina; (11) inibidores de CCR5 são selecionados a partir do grupo que consiste em aplaviroc, vicriviroc, maraviroc, PRO-140, INCB1505 0, PF-232798 (Pfizer), e CCR5mAb004; e (12) outros fármacos para tratar VIH são selecionados a partir do grupo que consiste em BAS-100, SPI-452, REP 9, SP-01A, TNX-355, DES6, ODN-93, ODN-112, VGV-1, PA-457 (bevirimat), Ampligen, HRG214, Cytolin, VGX- 410, KD-247, AMZ 0026, CYT 99007A-221 VIH, DEBIO-025, BAY 50-4798, MDX010 (ipilimumab), PBS 119, ALG 889, e PA-1050040 (PA-040).
Em ainda uma outra forma de realização, o presente pedido proporciona um ou mais compostos da presente invenção, ou sais farmaceuticamente aceitáveis, solvatos, e/ou ésteres do mesmo, para utilização no tratamento de VIH e/ou HCV.
Em ainda uma outra forma de realização, o presente pedido proporciona para utilização de um ou mais compostos da presente invenção, ou sais farmaceuticamente aceitáveis, solvatos, e/ou ésteres do mesmo, em combinação com um ou mais compostos inibidores de protease do VIH, inibidores não nucleosidicos do VIH de transcritase reversa, inibidores nucleosidicos do VIH de transcritase reversa, inibidores nucleotidicos do VIH de transcritase reversa, inibidores da integrase do VIH, inibidores de gp4, inibidores de CXCR4, inibidores de entrada, inibidores de gpl20, inibidores de G6PD e NADH-oxidase, inibidores de CCR5, outros fármacos para tratar VIH, e misturas dos mesmos.
Vias de Administração
Um ou mais compostos da invenção (no presente documento referidos como os ingredientes ativos) são administrados por qualquer rotina apropriada à condição a ser tratada. As rotinas adequadas incluem oral, retal, nasal, tópica (incluindo bucal e sublingual), vaginal e parentérica (incluindo subcutânea, intramuscular, intravenosa, intradérmica, intratecal e epidural), e semelhantes. Será apreciado que a rotina preferida possa variar com, por exemplo, a condição do recebedor. Uma vantagem dos compostos desta invenção é que eles sejam oralmente biodisponíveis e possam ser dosados oralmente. Terapêutica de Combinação
Numa forma de realização, os compostos da presente invenção podem ser administrados em separado, por exemplo, sem outros ingredientes ou agentes terapêuticos ativos.
Numa outra forma de realização, os compostos da presente invenção são usados em combinação com outros ingredientes ou agentes terapêuticos ativos. Preferentemente, os outros ingredientes ou agentes terapêuticos ativos são compostos que inibem a protease do VIH, inibidores não nucleosidicos do VIH de transcritase reversa, inibidores nucleosidicos do VIH de transcritase reversa, inibidores nucleotidicos do VIH de transcritase reversa, inibidores da integrase do VIH, inibidores de gp4, inibidores de CXCR4, inibidores de entrada, inibidores de gpl20, inibidores de G6PD e NADH-oxidase, inibidores de CCR5, outros fármacos para tratar VIH, e misturas dos mesmos.
As combinações dos compostos da presente invenção são tipicamente selecionadas com base na condição a ser tratada, as reatividades cruzadas dos princípios ativos e as farmacopropiedades da combinação. Por exemplo, quando se trata uma infeção (por exemplo, VIH ou VHC), as composições da invenção são combinadas com agentes ativos (tais como aqueles descritos no presente documento).
Exemplos não limitativos de agentes ativos adequados para combinar com os compostos da presente invenção incluem compostos que inibem a protease do VIH, inibidores não nucleosidicos do VIH de transcritase reversa, inibidores nucleosidicos do VIH de transcritase reversa, inibidores nucleotidicos do VIH de transcritase reversa, inibidores da integrase do VIH, inibidores de gp4, inibidores de CXCR4, inibidores de entrada, inibidores de gpl20, inibidores de G6PD e NADH-oxidase, inibidores de CCR5, outros fármacos para tratar VIH, e misturas dos mesmos.
Mais especificamente, um ou mais compostos da presente invenção podem ser combinados com um ou mais compostos selecionados a partir do grupo que consiste em (1) inibidores da protease do VIH são selecionados a partir do grupo que consiste em amprenavir, atazanavir, fosamprenavir, indinavir, lopinavir, ritonavir, nelfinavir, saquinavir, tipranavir, brecanavir, darunavir, TMC-126, TMC-114, mozenavir (DMP-450), JE-2147 (AG1776), L-756423, RO0334 64 9, KNI-272, DPC-681, DPC-684, GW640385X, DG17, PPL-100, DG35, e AG 1859; (2) inibidores não nucleosidicos do VIH de transcritase reversa são selecionados a partir do grupo que consiste em capravirina, emivirina, delaviridina, efavirenz, nevirapina, (+) calanolida A, etravirina, GW5634, DPC-083, DPC-961, DPC-963, MIV- 150, TMC-120, TMC-278 (rilpivireno), efavirenz, BILR 355 BS, VRX 840773, UK-453061, e RDEA806; (3) inibidores nucleosidicos do VIH de transcritase reversa são selecionados a partir do grupo que consiste em zidovudina, emtricitabina, didanosina, estavudina, zalcitabina, lamivudina, abacavir, amdoxovir, elvucitabina, alovudina, MIV-210, racivir (±-FTC), D-d4FC, emtricitabina, fosfazida, fozivudina tidoxil, apricitibina (AVX754), GS-7340, amdoxovir, KP-1461, e fosalvudina tidoxil (anteriormente HDP 99.0003); (4) inibidores nucleotidicos do VIH de transcritase reversa são selecionados a partir do grupo que consiste em tenofovir e adefovir; (5) inibidores da integrase do VIH são selecionados a partir do grupo que consiste em curcumina, derivados de curcumina, ácido chicórico, derivados de ácido chicórico, ácido 3,5-dicafeoilquínico, derivados de ácido 3,5-dicafeoilquinico, ácido aurintricarboxilico, derivados de ácido aurintricarboxilico, éster fenetilico de ácido cafeico, derivados de éster fenetilico de ácido cafeico, tirfostina, derivados de tirfostina, quercetina, derivados de quercetina, S-1360, zintevir (AR-177), elvitegravir, L-870812, e L-870810, MK-0518 (raltegravir), BMS-538158, GSK364735C, BMS-707035, MK-2048, e BA 011; (6) inibidor de gp41 é selecionado a partir do grupo que consiste em enfuvirtida, sifuvirtida, FB006M, e TRI-1144; (7) inibidor de CXCR4 é AMD-070; (8) inibidor de entrada é SP01A; (9) inibidor de gpl20 é BMS-488043 ou BlockAide/ CR; (10) inibidor de G6PD e NADH-oxidase é imunitina; (11) inibidores de CCR5 são selecionados a partir do grupo que consiste em aplaviroc, vicriviroc, maraviroc, PRO-140, INCB1505 0, PF-232798 (Pfizer), e CCR5mAb004; e (12) outros fármacos para tratar VIH são selecionados a partir do grupo que consiste em BAS-100, SPI-452, REP 9, SP-01A, TNX-355, DES6, ODN-93, ODN-112, VGV-1, PA-457 (bevirimat), Ampligen, HRG214, Cytolin, VGX-410, KD-247, AMZ 0026, CYT 99007A-221 VIH, DEBIO- 025, BAY 50-4798, MDX010 (ipilimumab), PBS 119, ALG 889, e PA-1050040 (PA-040). É também possível combinar qualquer composto da invenção com um ou mais outros agentes terapêuticos ativos numa forma farmacêutica unitária para administração simultânea ou sequencial a um paciente. A terapêutica de combinação pode ser administrada como um regime simultâneo ou sequencial. Quando administrada sequencialmente, a combinação pode ser administrada em duas ou mais administrações.
Coadministração de um composto da invenção com um ou mais outros agentes terapêuticos ativos de modo geral refere-se à administração simultânea ou sequencial de um composto da invenção e um ou mais outros agentes terapêuticos ativos, de modo que as quantidades terapeuticamente eficazes do composto da invenção e um ou mais outros agentes terapêuticos ativos estejam ambos presentes no corpo do paciente. A coadministração inclui administração de dosagens unitárias dos compostos da invenção antes ou após a administração de dosagens unitárias de um ou mais outros agentes terapêuticos ativos, por exemplo, administração dos compostos da invenção dentro de segundos, minutos, ou horas da administração de um ou mais outros agentes terapêuticos ativos. Por exemplo, uma dose unitária de um composto da invenção pode ser administrada primeiro, seguido dentro de segundos ou minutos pela administração de uma dose unitária de um ou mais outros agentes terapêuticos ativos.
Alternativamente, uma dose unitária de um ou mais outros agentes terapêuticos pode ser administrada primeiro, seguido por administração de uma dose unitária de um composto da invenção dentro de segundos ou minutos. Em alguns casos, pode ser desejável administrar uma dose unitária de um composto da invenção primeiro, seguida, após um período de horas (por exemplo, 1 a 12 horas) , pela administração de uma dose unitária de um ou mais outros agentes terapêuticos ativos. Noutros cases, pode ser desejável administrar uma dose unitária de um ou mais outros agentes terapêuticos ativos primeiro, seguido, após um período de horas (por exemplo, 1 a 12 horas) , pela administração de uma dose unitária de um composto da invenção. A terapêutica de combinação pode fornecer "sinergia" e "efeito sinérgico", isto é, o efeito obtido quando os ingredientes ativos utilizados juntos é maior do que a soma dos efeitos que resultam da utilização dos compostos separadamente. Um efeito sinérgico pode ser obtido quando os ingredientes ativos são: (1) co-formulados e administrados ou libertados simultaneamente numa formulação combinada; (2) libertado por alternação ou em paralelo como formulações separadas; ou (3) por alguns outros regimes. Quando libertado em terapêutica de alternação, um efeito sinérgico pode ser alcançado quando os compostos são administrados ou libertados sequencialmente, por exemplo, em comprimidos separados, pílulas ou cápsulas, ou por diferentes injeções em seringas separadas. Em geral, durante a terapêutica de alternação, uma dosagem eficaz de cada ingrediente ativo é administrada sequencialmente, isto é, serialmente, ao passo que em terapêutica de combinação, dosagens eficazes de dois ou mais ingredientes ativos são administradas juntas.
Numa outra forma de realização, a presente invenção proporciona um composto da presente invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável, solvato, ou éster do mesmo para utilização num método para inibir VIH protease.
Numa outra forma de realização, o método acima para inibir VIH protease, compreende ainda coadministrar uma quantidade terapêutica de pelo menos um agente ativo adicional selecionado a partir do grupo que consiste num ou mais compostos que inibem a protease do VIH, inibidores não nucleosídicos do VIH de transcritase reversa, inibidores nucleosídicos do VIH de transcritase reversa, inibidores nucleotídicos do VIH de transcritase reversa, inibidores da integrase do VIH, inibidores de gp4, inibidores de CXCR4, inibidores de entrada, inibidores de gpl20, inibidores de G6PD e NADH-oxidase, inibidores de CCR5, outros fármacos para tratar VIH, e misturas dos mesmos.
Numa outra forma de realização, a presente invenção proporciona um composto da presente invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável, solvato, e/ou éster do mesmo para utilização num método para tratar SIDA ou Complexo Relacionado com a SIDA.
Numa outra forma de realização, o método acima para tratar SIDA ou Complexo Relacionado com a SIDA compreende coadministrar uma quantidade terapeuticamente eficaz do composto da presente invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável, solvato, e/ ou éster do mesmo e uma quantidade terapêutica de pelo menos um agente ativo adicional selecionado a partir do grupo que consiste num ou mais compostos que inibem a protease do VIH, inibidores não nucleosídicos do VIH de transcritase reversa, inibidores nucleosídicos do VIH de transcritase reversa, inibidores nucleotídicos do VIH de transcritase reversa, inibidores da integrase do VIH, inibidores de gp4, inibidores de CXCR4, inibidores de entrada, inibidores de gpl20, inibidores de G6PD e NADH-oxidase, inibidores de CCR5, outros fármacos para tratar VIH, e misturas dos mesmos.
Numa outra forma de realização, a presente invenção proporciona um composto da presente invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável, solvato, e/ ou éster do mesmo para utilização num método de inibição da replicação de um retrovirus.
Numa outra forma de realização, a presente invenção proporciona um composto da presente invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável, solvato, e/ou éster do mesmo e pelo menos um agente ativo adicional selecionado a partir do grupo que consiste em compostos que inibem a protease do VIH, inibidores não nucleosídicos do VIH de transcritase reversa, inibidores nucleosídicos do VIH de transcritase reversa, inibidores nucleotídicos do VIH de transcritase reversa, inibidores da integrase do VIH, inibidores de gp4, inibidores de CXCR4, inibidores de entrada, inibidores de gpl20, inibidores de G6PD e NADH-oxidase, inibidores de CCR5, outros fármacos para tratar VIH, e misturas dos mesmos para utilização num método de inibição da replicação de um retrovirus.
Exemplos
Preparação dos Exemplos A, B, C, D, E, e F
Reagentes e Condições: i. NaOH, dioxano, cloroformato de metilo, 60 °C; ii. EDC, HOBT, NMM, EtoAc, carbazato de t-butilo; iii. HCI/dioxano; iv. i-PrOH, 80 °C; v. a. NaCNBH3, THF, K-TsOH; b. H20, THF, Na2B407; vi. p-PrOH, 80 °C; vii. a. TFA, D CM; b. DMAP, DIPEA, tetrahidrofurano-3-il carbonato de (R)-4-nitrofenilo, CH3CN.
Composto 1 L-terc-leucina (12,251 g, 93,4 mmol) foi dissolvido numa mistura de NaOH (2N, 154 ml) e dioxano (50,5 ml) . Cloroformato de metilo (14,30 ml, 185,84 mmol) foi adicionado lentamente (por exemplo, gota a gota) à solução à temperatura ambiente ("t.a."). A mistura de reação resultante foi aquecida até 60 °C e agitada durante 20 horas ("h"). A mistura de reação foi arrefecida até a t.a. e lavada com diclorometano ("DCM.") A camada aquosa foi acidificada até o pH 2 usando HC1 concentrado. A camada aquosa foi, em seguida, extraída com acetato de etilo, e as camadas orgânicas combinadas foram secas em Na2SC>4, e concentradas. O óleo resultante foi cristalizado a partir de hexano para dar o Composto 1 como um sólido branco (13,354 g, 70,6 mmol, 76 %) . TLC Rf (placa de sílica gel 60, metanol/DCM, 1:19) = 0,78.
Composto 2 EDC (cloridrato de 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida) (13,530 g, 77,6 mmol), HOBT (N-hidroxi-benzotriazol) (10,805 g, 77,6 m mol), e 4-metilmorfolina (9,3 ml 84,7 mmol) foram adicionados a uma solução do Composto 1 (13,354 g, 70,6 mmol) em acetato de etilo (177 ml) e a mistura de reação resultante foi agitada à t.a. durante 45 min. Então, DMF (" dimetil formamida") (6 ml) foi adicionada seguido de carbazato de terc-butilo (9,328 g, 77,6 mmol). A mistura de reação foi agitada durante 18 h e, em seguida, foi diluída com acetato de etilo. A solução diluída foi lavada com solução de NaHCCh saturado aquoso, água, e salmoura, sequencialmente. As camadas aquosas combinadas foram extraídas com acetato de etilo e as camadas orgânicas combinadas foram secas em Na2SC>4 e concentradas para dar o Composto 2 como um sólido branco (21,417 g, 70,6 mmol, 100 %) . TLC Rf placa de sílica gel 60, acetato de etilo/hexano, 1:1, coloração de ninhidrina) = 0,50.
Composto 3 O Composto 2 (21,417g, 70,6 mmol) numa solução de HC1 a 4 M em dioxano (180 ml) foi agitado à t.a. durante 2 h. A solução de reação foi diluída com solução de NaHCCh saturado aquoso e levada até o pH 9 usando solução de NaOH concentrado. A mistura de reação foi extraída quatro vezes com DCM e duas vezes com THF ("tetrahidrofurano") . As camadas orgânicas combinadas foram secas em Na2S04 e concentradas para dar o Composto 3 como um sólido branco pérola (14,349 g, 70,6 mmol, 100 %) . TLC Rf (placa de sílica gel 60, acetato de etilo/hexano, 1:1, coloração de ninhidrina) = 0,96.
Composto 4 O Composto 3 (14,349 g, 70,6 mmol) e 4-(2-piridil)- benzaldeído (9,960 g, 0,77) foram dissolvidos em isopropanol (214 ml) e a solução foi aquecida até 80 °C e agitada durante 24 h. O produto foi retirado por precipitação da solução por meio da adição de gelo, então foi filtrado e seco sob vácuo a 50 °C para dar o Composto 4 como um sólido branco pérola (20,043 g, 70,6 mmol, 100 %) . Espetro de massa: (M+H)+ = 369,2.
Composto 5
Cianoborohidreto de sódio (4,147 g, 66,0 mmol) e o Composto 4 (20,043 g, 54,4 mmol) foram dissolvidos em THF (100 ml) e arrefecidos até 0 °C. Uma solução de ácido p-toluenossulfónico (12,205 g, 64,2 mmol) em THF (100 ml) foi adicionada gota a gota. A mistura de reação foi aquecida até a t.a. e agitada durante 22 h antes de ter sido diluída com H2O e extraída três vezes com acetato de etilo. A camada orgânica foi lavada com solução de NaHCCh saturado aquoso e salmoura, e, em seguida, concentrada. O resíduo restante foi dissolvido numa mistura de THF (180 ml) e H2O (180 ml) . Na2B407 (51, 952 g) foi adicionado e a mistura de reação resultante foi agitada à t.a. durante 16 h. A reação foi diluída com acetato de etilo e lavada com solução de NaHCCb saturado aquoso. A camada aquosa foi extraída três vezes com acetato de etilo e as camadas orgânicas combinadas foram secas em Na2SC>4 e concentradas. A purificação em sílica gel (30-100 % de acetato de etilo/hexano) produziu o Composto 5 (12,173 g, 32,9 mmol, 60 %). Espetro de massa: (M+H)+ = 371,1.
Composto 6 (S)-1-((R)-Oxiran-2-il)-2-feniletilcarbamato de terc-butilo (177,0 mg, 0,7 mmol), comprado de Kaneka Corporation e o Composto 5 (248,2 mg, 0,7 mmol) foram dissolvidos em isopropanol. A solução foi aquecida até 80 °C e agitada durante 18 h. Então a mistura de reação foi arrefecida até a t.a., concentrada, e purificada usando cromatografia em sílica gel (acetato de etilo/hexano, 30-50 %) para dar o Composto 6 (75,4 mg, 0,12 mmol, 18 %) . TLC Rf (placa de sílica gel 60, acetato de etilo/hexano, 1:1) = 0,83.
Espetro de massa: (M+Na)+ = 656,2.
Exemplo A TFA (" ácido trifluoroacético") (1,82 ml) foi adicionado ao Composto 6 (69,1 mg, 0,11 mmol) em DCM (5,5 ml) e a mistura foi agitada à t.a. durante 1,5 h. A solução foi concentrada e co-evaporada três vezes com DCM e três vezes com acetonitrilo. O resíduo resultante foi dissolvido em acetonitrilo anidro (1,8 ml) e arrefecido até 0 °C. DMAP ("dimetilaminopiridina") (1,3 mg, 0,011 mmol) foi adicionada seguido de diisopropiletilamina ("DIPEA") (160 pL, 0, 92 mmol) até que a solução alcançasse o pH 9. Tetrahidrofurano-3-il carbonato de (R) -4-nitrofenilo (27,6 mg, 0,11 mmol) foi adicionado. A mistura de reação foi agitada durante 2 h a 0 °C e durante 16 h à t.a. A mistura de reação foi concentrada e purificado por meio de HPLC de fase reversa (coluna Phenomenex Synergi®, 25-100 % de acetonitrilo/H20 + 0,1 % de TFA) para dar o Exemplo A (6,8 mg, 0, 009 mmol, 8 %) . Ή RMN (300 MHz, CD30D) : δ 8,73 (d, j = 6,0 Hz, 1 H) , 8,48 (m, 1H) , 8,24 (d, j = 7,5 Hz, 1 H) , 7,84 (m, 3H) , 7,67 (d, j = 8,1 Hz, 2H) , 7,10-7,21 (m, 5 H) , 4,95 (m, 1 H) , 3,40-4,15 (m, 10 H) , 3,54 (s, 3H) , 2,70-2,90 (m, 5 H), 0,68 (s, 9H). Espetro de massa: (M+Na)+ = 670,3.
Exemplo B TFA (1,0 ml) foi adicionado a uma solução de Composto 6 (120,0 mg, 0,19 mmol) em DCM (3,0 ml) e a mistura foi agitada à t.a. durante 1,5 h. A solução foi concentrada e co-evaporada três vezes com DCM e três vezes com acetonitrilo. Num balão separado, uma solução de ácido 3-hidroxi-2-metil benzoico (15 mg, 0,1 mmol) e EDC (39,9 mg, 0,21 mmol), HOBT (31,9 mg, 0,21 mmol), e 4-metilmorfolina (145 pL, 1,32 mmol) em DMF (2,6 ml) foi agitada durante 45 minutos ("min"). O resíduo do primeiro balão foi dissolvido em DMF (2,4 ml) e adicionado ao segundo balão após o tempo de agitação assignado. A mistura resultante foi agitada à t.a. durante 24 h. A solução de reação foi diluída com acetato de etilo, lavada com solução de NaHCCp saturado aquoso e salmoura. As camadas aquosas combinadas foram extraídas com acetato de etilo e as camadas orgânicas combinadas foram secas em Na2S04 e concentradas. O resíduo resultante foi purificado por meio de HPLC de fase reversa (coluna Phenomenex Synergi®, 25-100 % de acetonitrilo/H20 + 0,1 % de TFA) para dar o Exemplo B como um sólido branco (30,9 mg, 0, 040 mmol, 21 %) . Ή RMN (300 MHz, CD3OD) : δ 8,73 (d, j = 5,1 Hz, 1 H) , 8,48 (m, 1H) , 8,22 (d, j = 8,1
Hz), 7,88 (m, 1H) , 7,81 (d, j = 8,4 Hz, 2H) , 7,68 (d, J = 8.1 Hz, 2 H),7,10-7,20 (m, 5 H), 6,83 (m, 1H) 6,66 (d, J = 8.1 Hz, 1 H) , 6,42 (d, J = 7,2 Hz), 4,40 (m, 1 H) , 4,06 (s, 2 H) , 3,84 (m, 1H) , 3,68 (m, 1 H) , 3,55 (s, 3H) , 2,80-3,00 (m, 4 H) , 1,80 (s, 3 H) , 0,75 (s, 9 H) . Espetro de massa: (M+H)+ = 668,2.
Composto 7a TEA ("t riet ilamina") (4,3 ml, 30,6 mmol) foi adicionada a uma solução de (R) - (-)-Pantolactona (1,991 g, 15.3 mmol), comprada de Aldrich, e bis (4-nitrofenil) carbonato em DCM (77 ml) e a reação foi agitada à t.a. durante 2 h. A mistura de reação foi concentrada e, em seguida, diluída com acetato de etilo, lavada quatro vezes com uma solução de NaOH aquoso (1 N), uma vez com uma solução de NaHCCb saturado, e uma vez com salmoura antes de ter sido seca em Na2SC>4 e concentrada. O resíduo bruto foi purificado usando cromatografia em sílica gel (10-30 % de acetato de etilo em hexano) para dar o Composto 7a (3,83 g, 12.4 mmol, 81 %) . Espetro de massa: (M+H)+ = 310,9.
Composto 7b O Composto 7b (1,080 g, 4,04 mmol, 41 %) foi preparado a partir de (S)-(-)-alfa-hidroxi-gama-butirolactona, comprado de Aldrich, usando procedimentos similares a aqueles usados para preparar o Composto 7a.
Composto 7c O Composto 7c (715 mg, 2,68 mmol, 26 %) foi preparado a partir de (R)-(+)-alfa-hidroxi-gama-butirolactona, comprado de Aldrich, usando procedimentos similares a aqueles usados para preparar o Composto 7a.
Composto 7d O Composto 7d foi preparado a partir de 3-hidroxisulfolano (disponível junto à Maybridge) usando procedimentos similares a aqueles usados para preparar o Composto 7a.
Exemplo C O Exemplo C foi preparado a partir do Composto 6 usando procedimentos similares a aqueles usados para preparar o Exemplo A, exceto que Composto 7a foi usado ao invés de tetrahidrofurano-3-il carbonato de (R)-4-nitrofenilo. O produto formou um precipitado que foi retirado por filtração e seco sob vácuo para dar o Exemplo
C como um sólido branco (46,5 mg, 0,067 mmol, 50 %). ΤΗ RMN (300 MHz, CD3OD) : δ 8,54 (d, J = 4,5 Hz, 1 H) , 7,75-7,90 (m, 4 H) , 7,50 (d, J = 5,4 Hz, 2 H) , 7,30 (m, 1 H) , 7,05- 7,25 (m, 5 H) , 5,12 (s, 1H) , 3,85-4,15 (m, 3 H) , 3,78 (m, 1 H) , 3,64 (s, 1 H) , 3,55 (s, 3 H) , 2,75-3, 05 (m, 4 H) , 0,92 (d, J = 4,5 Hz, 6 H) , 0,65 (s, 9 H) . Espetro de massa:
(M+H)+ = 690,2 Exemplo D O Exemplo D (27,7 mg, 0,036 mmol, 29 %) foi preparado a partir do Composto 6 usando procedimentos similares a agueles usados para preparar o Exemplo A, exceto que
Composto 7b foi usado ao invés de tetrahidrofurano-3-il carbonato de (R)-4-nitrofenilo. ΤΗ RMN (300 MHz, CD3OD) : δ 8,72 (d, J = 5,7 Hz, 1 H), 8,42 (m, 1 H), 8,21 (d, J = 8,1
Hz), 7,87 (m, 3 H) , 7,71 (d, J = 8,4 Hz, 2 H) , 7,10-7,30 (m, 5 H) , 4,79 (m, 1 H) , 4,39 (m, 1 H) , 4,05-4,25 (m, 3 H) , 3,66 (s, 1 H) , 3,58 (s, 3 H) , 2,85-3,55 (m, 8 H) , 0,71 (s, 9 H). Espetro de massa: (M+H)+ = 662,2, (M+Na)+ = 684,3.
Exemplo E O Exemplo E (36,4 mg, 0,047 mmol, 38 %) foi preparado a partir do Composto 6 usando procedimentos similares a aqueles usados para preparar o Exemplo A, exceto que o
Composto 7c foi usado ao invés de tetrahidrofurano-3-il carbonato de (R)-4-nitrofenilo. ΤΗ RMN (300 MHz, CD3OD): δ 7,76 (d, J = 6,0 Hz, 1 H) , 8,57 (m, 1 H) , 8,29 (d, J = 8,1
Hz, 1 H) , 7,93 (m, 1 H) , 7,86 (d, J = 8,4 Hz, 2 H) , 7,74 (d, J = 8,4 Hz, 2 H) , 7,10-7,30 (m, 5 H) , 4,69 (m, 1 H) , 4,36 (m, 1 H) , 4,05-4,25 (m, 3 H) , 3,65 (s, 1 H) , 3,59 (s, 3 H) , 2,85-3,30 (m, 8 H), 0,71 (s, 9 H) . Espetro de massa:
(M+H)+ = 662,2, (M+Na)+ = 684,2 Exemplo F O Exemplo F (177,5 mg, 0,22 mmol, 65 %) foi preparado a partir do Composto 6 usando procedimentos similares a aqueles usados para preparar o Exemplo A, exceto que o
Composto 7d foi usado ao invés de tetrahidrofurano-3-il carbonato de (R)-4-nitrofenilo. ΤΗ RMN (300 MHz, CD3OD) : δ 8,71 (m, 1 H) , 8,41 (m, 1 H) , 8,19 (m, 1 H) , 7, 67-7, 86 (m, 3 H) , 7, 60-7, 65 (m, 2 H) , 7,05-7,24 (m, 5 H) , 5,17 (m, 1 H) , 3,65-4,15 (m, 4 H) , 3,63 (m, 1 H) , 3,55 (m, 3 H) , 2,70-3,35 (m, 8 H) , 2,20-2,30 (m, 2 H) , 0,70 (m, 9 H) . Espetro de massa: (M+H)+ = 696,2, (M+Na)+ = 718,2.
Preparação dos Exemplos G e H
Reagentes e Condições i. i-PrOH, 80 °C; ii. a. NaCNBHR THP, p-TsOH; b. H20, THP, NaíB^Oy; íii. i-PrOH, 80 °C; iv. a. TFA, DCM; b. DIViAP, DIPEA, (3R,3aS,6aR)-tetrahidro-2H-furo[2t3-b]furan-3-il carbonato de 4-nítrofenilo, CH3CN; v. Pd/C, H2, Me OH, i-PrOH; vi. DMAP, DIPEA, tíazol-4-ilmetí! carbonato de 4-nitrofenilo , CH3CN
Composto 8
Carbazato de benzilo (17,3195 g, 104,2 mmol) e 4-(2-piridil)benzaldeído (20,047 g, 109,4 mmol) foram dissolvidos em isopropanol (315 ml) e agitados a 80 °C durante 16 h. O produto, isto é, Composto 8, foi retirado por precipitação de solução por meio da adição de gelo, filtrado e seco sob vácuo a 40 °C para dar um sólido (34,529 g, 104,2 mmol, 100 %) . Espetro de massa: (M+H)+ = 332,1.
Composto 9
Cianoborohidreto de sódio (3,894 g, 62,0 mmol) e o Composto 8 (19,555 g, 59,0 mmol) foram dissolvidos em THF (100 ml) e arrefecidos até 0 °C. Uma solução de ácido p- toluenossulfónico (11,449 g, 60,2 mmol) em THF (100 ml) foi adicionada gota a gota. A mistura de reação resultante foi aquecida até a t.a. e agitada durante 22 h antes de ter sido diluída com H2O e extraída três vezes com acetato de etilo. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com NaHC03 saturado e salmoura, e, em seguida, concentradas. O resíduo restante foi dissolvido em THF (200 ml) e H2O (200 ml) seguido da adição de Na2B4C>7 (43, 840 g) e a mistura de reação foi agitada à t.a. durante 16 h. A mistura de reação foi diluída com acetato de etilo e lavada com NaHCCb saturado. A camada aquosa foi extraída três vezes com acetato de etilo e as camadas orgânicas combinadas foram lavadas com NaHC03 saturado, secas em Na2S04 e concentradas. A purificação usando cromatografia em sílica gel (30-60 % de acetato de etilo/hexano) produziu o Composto 9 como um sólido (16, 975 g, 50,9 mmol, 86 %) . Espetro de massa: (M+H)+= 334, 1.
Composto 10 O Composto 9 (248,2 mg, 0,7 mmol) e (S)-1-((R)-oxiran-2-il)-2-feniletilcarbamato de terc-butilo comprado de
Kaneka Corporation (177,0 mg, 0,7 mmol) foram dissolvidos em isopropanol e aquecidos até 80 °C. A mistura de reação foi agitada durante 27 h antes de ter sido arrefecida até a t.a. e concentrada. O sólido resultante foi cristalizado em hexano e purificado usando cromatografia em sílica gel (20- 50 % de acetato de etilo/hexano) para dar o Composto 10 como um sólido amarelo (18,815g, 31,5 mmol, 68 %) . Espetro de massa: (M+H)+ = 597,1.
Composto 11 TFA (27,0 ml) foi adicionado a uma solução do Composto 10 (20,063 g, 27,6 mmol) em DCM (125 ml) e a mistura resultante foi agitada à t.a. durante 3 h. A solução foi, em seguida, concentrada e co-evaporada três vezes com DCM e três vezes com acetonitrilo. 0 resíduo resultante foi dissolvido em acetonitrilo anidro (125 ml) e arrefecido até 0 °C. DMAP (342 mg, 2,8 mmol) foi adicionado seguido de DIPEA (37,0 ml, 212 mmol) até que o pH 9 tenha sido alcançado. Então, (3R,3aS,6aR)-tetrahidro-2H-furo[2,3-b]furan-3-il carbonato de 4- nitrofenilo, preparado de acordo com Miller et al Bioorg. Med. Chem. Lett. 2005,15, 3496-3500, (6,90 g, 27,6 mmol) foi adicionado. A reação foi agitada durante 2 h a 0 °C e durante 16 h à t.a. A reação foi concentrada e dissolvida em acetato de etilo. A camada orgânica foi lavada três vezes com H2O, três vezes com NaOH (1 N) , e uma vez com salmoura antes de ter sido seca em Na2SC>4 e concentrada. Cristalização em acetato de etilo deu o Composto 11 como um sólido (9,631 g, 54 %) . Espetro de massa: (M+H)+ = 653,1.
Exemplo G
Metanol (59 ml) a 60 °C foi usado para dissolver o Composto 11 (526, 3 mg, 0,8 mmol). Isopropanol (50 ml) foi adicionado e a mistura de reação foi arrefecida até a t.a. O balão de reação foi purgado com gás hidrogénio três vezes após a adição de paládio a 10 % em carbono (200 mg) e o balão foi agitado sob hidrogénio à temperatura ambiente durante 2 h. O catalisador foi retirado por filtração e o filtrado foi concentrado. O resíduo resultante foi purificado por meio de HPLC de fase reversa (coluna
Phenomenex Synergi®, 25-100 % de acetonitrilo/ H2O) e produziu o Exemplo G como um sólido (14,2 mg, 0,09 mmol, 11 %) . !H RMN (300 MHz, CD3OD) : δ 8,56 (d, J = 4,8 Hz, 1 H) , 7, 80-7, 89 (m, 4 H) , 7,45 (d, J = 8,1 Hz, 2 H) , 7,32 (m, 1 H) , 7,05-7,205 (m, 5 H) , 5,53 (d, J = 5,4 Hz, 1 H) , 4,91 (m, 1 H) , 3,55-3, 95 (m, 8 H) , 2,50-2, 90 (m, 5 H) , 1,46 (m, 2 H). Espetro de massa: (M+H)+ = 519,1, (M+Na)+ = 541,2.
Exemplo H
Acetonitrilo anidro (1,5 ml) foi usado para dissolver o Exemplo G (49,1 mg, 0,07 mmol) e, em seguida, a solução foi arrefecida até 0 °C. D MAP (0,9 mg, 0, 007 mmol) foi adicionado seguido de DIPEA (42 pL, 0,24 mmol). Então, tiazol-4-ilmetil carbonato de 4-nitrofenilo, preparado de acordo com Kempf et al no documento EP486948A2, (28,4 mg, 0,10 mmol) foi adicionado. A mistura de reação foi agitada a 0 °C durante 2 h, e, em seguida, à t.a. durante 18 h. A mistura de reação foi diluida com acetato de etilo e lavada três vezes com H2O, três vezes com NaOH (1 N) , e uma vez com salmoura antes de ter sido seca em Na2SC>4 e concentrada. A purificação por meio de HPLC de fase reversa (coluna Phenomenex Synergi®, 25-100 % de acetonitrilo/H20 + 0,1 % de TFA) produziu o Exemplo H como um sólido (12,2 mg, 0,02 mmol, 26 %). ^ RMN (300 MHz, CD3OD): δ 8,90 (s, 1 H), 8,76 (d, J = 6,0 Hz, 1 H) , 8,54 (m, 1 H) , 8,31 (m, 1 H) , 7,84- 7,93 (m, 3 H) , 7,67 (d, J = 8,1 Hz, 2 H) , 7,10-7,35 (m, 6 H) , 5,53 (d, J = 5,1 Hz, 1 H) , 5,06 (s, 2 H) , 4,00 (m, 2 H), 3,55-3, 90 (m, 5 H) , 2,70-2, 95 (m, 5 H) , 1,40-1, 60 (m, 2 H). Espetro de massa: (M+H)+ = 660,1, (M+Na)+ = 682,3.
Exemplo I 0 Exemplo I (15,2 mg, 0,02 mmol, 22 %) foi preparado a partir do Exemplo G usando um procedimento similar a esse usado para preparar o Exemplo H, exceto que o Composto 7d foi usado ao invés de tiazol-4-ilmetil carbonato de 4-nitrofenilo. Ή RMN (300 MHz, CD3OD) : δ 8,72 (d, J = 5,7
Hz, 1 H), 8,43 (m, 1 H), 8,24 (m, 1 H), 7,81-7,92 (m, 3 H), 7,58-7, 66 (m, 2 H) , 7,12-7,24 (m, 5 H) , 5,54 (m, 1 H) , 5,20 (m, 1 H), 4,92 (m, 1 H) , 3, 63-4, 08 (m, 8 H) , 2,77-3,61 (m, 9 Η), 2,15 2,35 (m, 2 Η), 1,54 (m, 2 Η). Espetro de massa: (M+H)+ = 681,1, (M+Na)+ = 703,2.
Preparação dos Exemplos J, κ, L, e M
Reagentes e Condições : j. DMF, τρτυ, NMM; íí. a. TFA, DCM; b. H2O, ciorofcrmato de isopropilo/tolueno, NaHCOj
Composto 12 A uma solução de Boc-L-terc-leucina, comprada de Acros (360,6 mg, 1,56 mmol) em DMF (3 ml) à t.a. foi adicionado TPTU (tetrafluoroborato de 0-(1,2-dihidro-2-oxo-l-piridil)-Ν,Ν,Ν',Ν'-tetrametilurónio) (463, 1 mg, 1,56 mmol) , e a mistura de reação foi agitada durante 20 min. Uma solução do Exemplo G (404,3 mg, 0,78 mmol) em DMF (4 ml) foi adicionada à mistura de reação seguido de 4-metilmorfolina (0,26 ml, 2,34 mmol). A reação foi agitada à t.a. durante 1 h e, em seguida, diluida com H2O e extraída três vezes com DCM. As camadas orgânicas combinadas foram secas em Na2SC>4, e concentradas. A purificação por meio de HPLC de fase reversa (coluna Phenomenex Synergi®, 25-100 % acetontrile/tbO) produziu o Composto 12 como um sólido (95,0 mg, 0,13 mmol, 17 %) . Espetro de massa: (M+H)+ = 732,2, (M+Na)+ = 754,3.
Exemplo J TFA (0,1 ml) foi adicionado a uma solução do Composto 12 (20 mg, 0,028 mmol) em DCM (1,0 ml) e a reação foi agitada à t.a. durante 1,5 h. A mistura de reação foi concentrada seguido da adição de H2O (0,5 ml) e cloroformato de isopropilo (35,7 pL, 0,0357 mmol) em tolueno. A solução de reação foi agitada vigorosamente enquanto se adicionava a solução de NaHCC>3 saturado aquoso gota a gota até que o pH 8 tenha sido alcançado. A reação foi agitada à t.a. durante 2 h antes de ter sido diluída com acetato de etilo e lavada com salmoura e H2O. A camada orgânica foi seca em Na2SC>4, e concentrada. O resíduo bruto foi purificado por meio de HPLC de fase reversa (coluna Phenomenex Synergi®, 25-100 % de acetonitrilo/H20 +0,1 % de TFA) para produzir o Exemplo J como um sólido (17,6 mg, 0,02 mmol, 77 %) . Ή RMN (300 MHz, CD3OD) : δ 8,73 (d, J = 5,7 Hz, 1 H) , 8,47 (m, 1 H) , 8,25 (d, J = 7,8 Hz, 1 H) , 7,87 (m, 3 H) , 7,69 (d, J = 8,4 Hz, 2 H) , 7,11-7,21 (m, 5 H), 5,53 (d, J = 5,4 Hz, 1 H) , 4,86 (m, 1 H) , 3,61-4,09 (m, 10 H) , 2,78-2,85 (m, 5 H) , 1,47 (m, 2 H) , 1,11-1,17 (m, 6 H) , 0,69 (s, 9 H) . Espetro de massa: (M+H)+ = 718,3, (M+Na)+ = 740,3 .
Exemplo K O Exemplo K (11,5 mg, 0,014 mmol, 68 %) foi preparado a partir do Composto 12 usando procedimentos similares a aqueles usados para preparar o Exemplo J, exceto que cloroformato de etilo foi usado ao invés de cloroformato de isopropilo. Ή RMN (300 MHz, CD3OD): δ 8,74 (d, J = 4,8 Hz, 1 H) , 8,49 (m, 1 H) , 8,26 (d, J = 8,1 Hz, 1 H) , 7,84-7,91 (m, 3 H) , 7,69 (d, J = 8,4 Hz, 2 H) , 7,11-7,21 (m, 5 H) , 5,53 (d, J = 5,1 Hz, 1 H) , 4,88 (m, 1 H) , 3,58-4, 08 (m, 11 H) , 2,78-2,89 (m, 5 H) , 1,49 (m, 2 H) , 1,14 (t, J = 7,1 Hz, 3 H) , 0,70 (s, 9 H) . Espetro de massa: (M+H)+ = 704,3, (M+Na) + = 726, 3.
Exemplo L TFA (0,1 ml) foi adicionado a uma solução do Composto 12 (15,4 mg, 0,021 mmol) em DCM (1,0 ml) e a mistura de reação foi agitada à t.a. durante 1,5 h. A mistura de reação foi concentrada e o resíduo foi dissolvido em DCM (1,0 ml) . DIPEA (38 pL, 0,22 mmol) foi adicionado seguido de cloreto de etanossulfonilo (3,0 pL, 0,032 mmol) e a mistura de reação foi agitada à t.a. durante 2 h. A mistura de reação foi concentrada e o resíduo bruto foi purificado por meio de HPLC de fase reversa (coluna Phenomenex Synergi®, 25-100 % de acetonitrilo/H20 + 0,1 % de TFA) e produziu o Exemplo L como um sólido (1,7 mg, 0,002 mmol, 10 %) . 1H RMN (300 MHz, CD3OD) : δ 8,70 (d, J = 5,4 Hz, 1 H) , 8,36 (m, 1 H) , 8,16 (d, J = 7,8 Hz, 1 H) , 7,87 (d, J = 8,4
Hz, 2 H) , 7, 67-7,77 (m, 3 H) , 7,12-7,21 (m, 5 H) , 5,53 (d, J = 5,4 Hz, 1 H), 4,87 (m, 1 H) , 3,57-4, 07 (m, 9 H) , 3,36 (s, 1 H), 2,74-2,91 (m, 5 H) , 1,49 (m, 2 H) , 1,16 (t, J = 7,2 Hz, 3 H) , 0,76 (s, 9 H) . Espetro de massa: (M+H)+ = 724,2.
Exemplo M TFA (0,1 ml) foi adicionado a uma solução do Composto 12 (30,8 mg, 0,042 mmol) em DCM (1,0 ml) e a mistura de reação foi agitada à t.a. durante 1 h. A mistura de reação foi concentrada e co-evaporada três vezes com DCM e três vezes com acetonitrilo. O resíduo resultante foi dissolvido em acetonitrilo anidro e o balão de reação foi arrefecido até 0 °C. DMAP (0,5 mg, 0,005 mmol) foi adicionado seguido de DIPEA (66 pL, 0,38 mmol) . Seguiu-se a adição de tiazol-4-ilmetil carbonato de 4-nitrofenilo (6,90 g, 27,6 mmol). A mistura de reação foi agitada durante 2 h a 0 °C e durante 21 h à t.a. A mistura de reação foi diluida com acetato de etilo. A camada orgânica foi lavada três vezes com H2O, três vezes com NaOH (1 N), e uma vez com salmoura antes de ter sido seca em Na2SC>4 e concentrada. O resíduo foi purificado por meio de HPLC de fase reversa (25-100 % de acetonitrilo/fbO + 0,1 % de TFA) e produziu o Exemplo M como um sólido (19,2 mg, 0,02 mmol, 52 %) . 1H RMN (300 MHz, CD3OD) : δ 8,90 (s, 1 H) , 8,72 (d, J = 5,7 Hz, 1 H) , 8,46 (m, 1 H) , 8,23 (d, J = 8,1 Hz, 1 H) , 7,85 (m, 3 H) , 7,68 (d, J = 8,4 Hz, 2 H), 7,12-7,20 (m, 5 H), 5,53 (d, J = 5,4
Hz, 1 H), 5,12 (s, 2 H), 4,89 (m, 1 H), 3,63-4,84 (m, 9 H), 2,74-2,85 (m, 5 H) , 1,48 (m, 2 H) , 0,70 (s, 9 H) . Espetro de massa: (M+H)+ = 773,2.
Preparação do Exemplo N
Reagentes e Condições: : i. a. TFA, DCM; ii. D1PEA, DCM, Cloreto de etanosulfonilo;
Exemplo N O Composto 13 gerado in situ reagiu com o Composto 12, e a reação produziu o Exemplo N como um sólido (11,4 mg, 0,013 mmol, 64 %) após a purificação por meio de HPLC de fase reversa (coluna Phenomenex Synergi®, 25-100 % de acetonitrilo/água com 0,1 % de TFA. RMN (300 MHz, CD3OD) : δ 8,74 (d, J = 5,7 Hz, 1 H) , 8,47 (m, 1 H) , 8,24 (d, J = 7,8 Hz, 1 H) , 7,87 (m, 3 H) , 7,68 (d, J = 8,4 Hz, 2 H), 7,13-7,21 (m, 5 H) , 5,54 (d, J = 8,4 Hz, 1 H) , 4,89 (m, 1 H) , 3,59-4, 84 (m, 9 H) , 2,77-2,89 (m, 5 H) , 1,50 (m, 2 H) , 0,74 (s, 9 H) . Espetro de massa: (M+H)+ = 728,2, (M+Na)+ = 750,3.
Preparação do Exemplo O
Reagentes e Condições: : \ edc, HOBT, NMM, DMF, ii_ a. TFA, DCM; b hfeO, ctoroRwwo de metilo/toleeeo, NaHCOs
Composto 14 A uma solução de Boc-D-terc-leucina (121,7 mg, 0,526 mmol) , comprado de Bachem, em DMF (2 ml) à t.a. foram adicionados EDC (463, 1 mg, 1,56 mmol) e HOBT (71,1 mg, 0,526 mmol) e a mistura de reação foi agitada durante 30 min. Então uma solução do Exemplo G (210 mg, 0,40 mmol) em DMF (2 ml) foi adicionada à mistura de reação após a adição de 4-metilmorfolina ("NMM") (0,26 ml, 2,34 mmol). A reação foi agitada à t.a. durante 18 h e, em seguida, a reação foi diluída com acetato de etilo e lavada com NaHC03 saturado e salmoura antes de ter sido seca em Na2SC>4, e concentrada. 0 resíduo bruto foi purificado usando cromatografia em sílica gel (0-10 % de metanol/DCM), e de novo usando cromatografia em sílica gel (25-75 % de acetato de etilo/hexano) e produziu o Composto 14 como um sólido (189,9 mg, 0,260 mmol, 64 %) . Espetro de massa: (M+H)+ = 732,2.
Exemplo O TFA (0,1 ml) foi adicionado a uma solução do Composto 14 (30,9 mg, 0,0295 mmol) em DCM (1,0 ml) e a mistura de reação foi agitada à t.a. durante 2 h. A mistura de reação foi concentrada seguido da adição de H2O (0,5 ml) e cloroformato de metilo (2,9 pL, 0,038 mmol) em tolueno. A mistura de reação foi agitada vigorosamente enquanto NaHCCt saturado aquoso era adicionado gota a gota até que o pH 8 tenha sido alcançado. A mistura de reação foi agitada à t.a. durante 2 h antes de ter sido diluída com acetato de etilo e lavada com salmoura e H2O. A camada orgânica foi seca em Na2SC>4 e concentrada antes de ter sido purificada por meio de HPLC de fase reversa (coluna Phenomenex Synergi®, 25-100 % de acetonitrilo/fbO + 0,1 % de TFA) e produziu o Exemplo O como um sólido (8,4 mg, 0,01 mmol, 35 %) . iH RMN (300 MHz, CD3OD) : δ 8,74 (d, J = 5,1 Hz, 1 H) , 8,49 (m, 1 H) , 825 (d, J = 8,4 Hz, 1 H) , 7,81-7,88 (m, 3 H) , 7,65 (d, J = 8,4 Hz, 2 H) , 7,12-7,21 (m, 5 H) , 5,55 (d, J = 8,4 Hz, 1 H), 4,92 (m, 1 H) , 3,59-4,02 (m, 9 H) , 3,44 (s, 3H) , 2,75-2, 92 (m, 5 H) , 1,57 (m, 2 H) , 0,72 (s, 9 H) .
Espetro de massa: (M+H)+ = 690,2.
Preparação do Exemplo P
Reagentes e Condições: : j j-prOH, 80 SC; s, a, NaCNBHs, THP. s-TsOH; b. HjO. THP, Naj&amp;sO?; sit. i-PrOH, CHsCOOB, 80*0; sv. a. 7FA, ί'Χ,'Μ; 8. DMAP, DiPFA, !3R,33S,8aR} t8»ShK!na-2H-ftir<3f2,3-b'jfuf3r!'3'il «art»«8tO de 4>nibofeniio, CM-iCN
Composto 15 0 Composto 15 foi preparado usando o método descrito em Bold, G., et al. New Aza-Dipeptide Analogues as Potent and Orally Absorbed HIV-1 Protease Inhibitors: Candidates for Clinical Development. J. Med Chain. 1998, 41, 3387- 3401.
Composto 16
Uma suspensão do Composto 15 (1,320 g, 5,70 mmol) e o
Composto 3 (1,141 g, 5,60 mmol) em isopropanol foi aquecido até 80 °C durante 18 h. O produto foi precipitado pela adição de gelo, então filtrado e seco sob vácuo a 50 °C. O
Composto 16 foi obtido como um sólido (1,815 g, 33,3 mmol, 87 %). Espetro de massa: (M+H)+ = 374,2.
Composto 17 A redução do Composto 16 usando procedimentos similares aos que são usados para preparar o Composto 5 produziu o Composto 17 como um sólido (1,105 g, 2,94 mmol, 61 %). Espetro de massa: (M+H)+ = 376,0.
Composto _18 Ácido acético (11 pL, 0,19 mmol) foi adicionado a uma mistura do Composto 17 (98,6 mg, 0,26 mmol) e (S)—2—(4— metoxifenil)-1-((R)-oxiran-2-il)etilcarbamato de terc-butilo (70,1 mg, 0,24 mmol) em isopropanol (1,5 ml) e a mistura de reação foi aquecida até 80 °C durante 24 h. A mistura de reação foi concentrada e purificada usando cromatografia em sílica gel (50-100 % de acetato de etilo/hexano) e produziu o Composto 18 como um sólido (85,9 mg, 0,13 mmol, 49 %). Espetro de massa: (M+H)+ = 669,0.
Exemplo P TFA (0,15 ml) foi adicionado a uma solução do Composto 18 (85,9 mg, 0,128 mmol) em DCM (1,0 ml) e a mistura foi
agitada à t.a. durante 2,5 h. A solução foi concentrada e co-evaporada duas vezes com DCM e quatro vezes com acetonitrilo. O resíduo resultante foi dissolvido em acetonitrilo anidro (1,0 ml) e arrefecido até 0 °C. DMAP
(1,6 mg, 0,013 mmol) foi adicionado seguido de DIPEA (70 pL, 0,401 mmol) até que o pH 9 tenha sido alcançado. O Composto 70 (32,1 mg, 0,128 mmol) foi adicionado. A mistura de reação foi agitada durante 2 h a 0 °C e durante 13 h à t.a. A mistura de reação foi concentrada e dissolvida em acetato de etilo. A camada orgânica foi lavada quatro vezes com H2O, quatro vezes com NaOH (1 N), e uma vez com salmoura antes de ter sido seco em Na2S04 e concentrado. O produto bruto foi purificado por meio de HPLC de fase reversa (coluna Phenomenex Synergi®, 25-100 % de acetonitrilo/fbO) e produziu o Exemplo P como um sólido (29,0 mg, 0,04 mmol, 31 %) . ΤΗ RMN (300 MHz, CD3OD) : δ 7,96 (d, J = 8,4,2 H) , 7,52 (d, J = 8,1,2 H) , 7,11 (d, J = 8,4, 2 H) , 6,75 (d, J = 8-4, 2 H) , 5,53 (d, J = 5,4,1 1 H) , 4,89 (m, 1 H) , 4,36 (s, 3 H) , 3,56-4, 00 (m, 15 H) , 2,71-2,86 (m, 5 H), 1,40-1,60 (m, 2 H), 0,67 (s, 9 H). Espetro de massa: (M+H)+ = 725,1, (M+Na)+ = 747,2.
Preparação do Exemplo Q
Reagentes e Condições: i. i-PrOH, 80 °C; ii. Pd(OH)2, Hj, EtOH, CH-jCOOH iii. i-PrOH, CH3COOH, 80 CC; iv. a.
TFA, DCIW; b. DMAP, DÍPEA, (3R,3aS.6aR)tetrahidro-2H-furo[2,3-b]furan-3-il carbonato de 4-nitrofenilo. CH3CN
Composto 19 O Composto 19 (734,3 mg, 2,0 mmol, 91 %) foi preparado a partir de 4-(4-piridil)benzaldeído comercialmente disponível usando um procedimento similar a esse descrito para preparar o Composto 16. Espetro de massa: (M+H)+ = 369,2.
Composto 20
Pd (OH) 2 (146,8 mg) foi adicionado a uma solução do
Composto 19 (734,3 mg, 2,0 mmol) em etanol (20 ml) e ácido acético (0,23 ml, 4,0 mmol). O balão de reação foi purgado com hidrogénio e a reação foi agitada durante 2 h à t.a. sob hidrogénio. A remoção do catalisador por meio de filtração e purificação em sílica gel (25-100 % de acetato de etilo/hexano) proporcionou o Composto 20 (472,7 mg, 1,1 mmol, 64 %). Espetro de massa: (M+H)+ = 371,2.
Composto 21 0 Composto 21 (102,1 mg, 0,15 mmol, 14 %) foi preparado a partir do Composto 20 usando procedimentos similares a aqueles usados para preparar o Composto 18. Espetro de massa: (M+H)+ = 664,2.
Exemplo Q O Exemplo Q foi preparado a partir do Composto 21 usando procedimentos similares a aqueles usados para preparar o Exemplo P. Adicional purificação do resíduo bruto por meio de HPLC de fase reversa (coluna Phenomenex Synergi®, 25 - 100 % de acetonitrilo/lbO + 0,1 s de TFA) produziu o Exemplo Q como um sólido (68,5 mg, 0,08 mmol, 55 %) . !H RMN (300 MHz, CD3OD) : δ 8,76 (d, J = 6, 9, 2 H) , 8,27 (d, J = 6,9, 2 H) , 7,87 (d, J = 8,4, 2 H) , 7,65 (d, J = 8,1,2 H) , 7,11 (d, J = 8,4,2 H) , 6,75 (d, J = 8,4,2 H) , 5,55 (d, J = 5,4, 1 H) , 4,90 (m, 1 H) , 3, 55-4,06 (m, 15 H) , 2,70-2,84 (m, 5 H) , 1,53 (m, 2 H) , 0,68 (s, 9 H) . Espetro de massa: (M+H)+ = 720,3.
Preparação do Exemplo R
Reagentes e Condições: i-PrOH, 80 °C: ii. a. NaCNBHs. THP. p-TsOH; b. HcO, THP, NaB-íO/; iíi. í-PrOH,
CHaCOOH. 80 °C; ív. a. TF A. DCM; b. DMAR, dipea, (3R,3aS;6aR)-tetrahidro-2H-furo[2,3-b]furan-3-il carbonato de 4-nitrofemío, GH3CN; v. Me2/TFA, DCM; vi. Composto 1, EDC, HOBT, NMM: DMF
Composto 22
Carbazato de benzilo (1,475 g, 8,88 mmol) e 4 — [ 4 — (terc-butil)-1,3-tiazol-2-il]benzaldeído (2,175 g, 8,88 mmol) foram suspensos em isopropanol (27,0 ml) e aquecidos até 80 °C durante 18 h. A reação foi arrefecida até a t.a. e o precipitado que se formou foi retirado por filtração e seco sob vácuo a 40 °C para dar o Composto 22 como um sólido branco (3,467g, 8,81 mmol, 99 %) . Espetro de massa: (M+H)+ = 394,2.
Composto 23 A redução do Composto 22 usando um procedimento similar a esse usado para preparar o Composto 5 produziu o Composto 23 como um sólido (2, 608 g, 6,59 mmol, 75 %) . Espetro de massa: (M+H)+ = 396,1.
Composto 24 O Composto 24 (189,6 mg, 0,28 mmol, 80 %) foi preparado a partir do Composto 23 usando um procedimento similar a esse usado para preparar o Composto 18. Espetro de massa: (M+Na)+ = 711,1.
Composto 25 O Composto 25 foi preparado a partir do Composto 24 usando um procedimento similar a esse usado para preparar o Exemplo P. O produto bruto foi purificado usando cromatografia em sílica gel (20-70 % de acetato de etilo/hexano) proporcionando o Composto 25 como um sólido (86,5 mg, 0,12 mmol, 56 %) foi obtido. Espetro de massa: (M+H)+ = 745, 1 .
Composto 26 DCM (1,6 ml) foi usado para dissolver o Composto 25 e uma solução de sulfeto de metilo em TFA (1:4) foi adicionado. A reação foi agitada à t.a. durante 12 h então a reação foi concentrada. A reação foi dividida em partições entre acetato de etilo e NaHCCb saturado. A camada aquosa foi extraída duas vezes com acetato de etilo e as camadas orgânicas combinadas foram secas em Na2SC>4 e concentradas para dar o Composto 26 (67,2 mg, 0,11 mmol, 100 %) sem purificação adicional. Espetro de massa: (M+H)+ = 611,2.
Exemplo R
Uma solução de EDC (27,4 mg, 0,14 mmol), HOBT (19,3 mg, 0,14 mmol), e o Composto 1 (27,1 mg, 0,14 mmol) em DMF (2,0 ml) foi agitada durante 45 minutos antes de 4-metilmorfolina (41 pL, 0,37 mmol) e o Composto 26 (67,2 mg, 0,11 mmol) terem sido adicionados. A mistura de reação foi agitada à t.a. durante 1 h antes da reação foi concentrada. O resíduo foi purificado por meio de HPLC de fase reversa (coluna Phenomenex Synergi®, 25-100 % de acetonitrilo/H20) e produziu o Exemplo R como um sólido branco (22,4 mg, 0,02 mmol, 26 %). RMN (300 MHz, CD3OD): δ 7,81 (d, J = 8,4, 2 H), 7,45 (d, J = 8,1,2 H) , 7,09 (m, 3 H) , 6,75 (d, J = 8,4, 2 H), 5,53 (d, J = 5,4,1 H) , 4,87 (m, 1 H) , 3, 55-3, 94 (m, 15 H) , 2,70-2, 85 (m, 5 H) , 1, 05-1, 60 (m, 11 H) , 0,70 (s, 9 H). Espetro de massa: (M+H)+ = 782,2, (M+Na)+ = 804,3.
Preparação do Exemplo S
Reagentes e Condições: i a, TFA, DCM; b. DMAP, DiPEA, (3R,3aS,6aR)-Éetrahidro-2H-furo[2, 3-b]furan-3-il carbonato de 4-nitrofeni!o. CHsCN; ii. Mes/TFA, DCM; iii. Composto ί, EDC, HOBT. NMM, DMF
Composto 27 0 Composto 27 foi preparado a partir de 4- (3-piridil)benzaldeído comercialmente disponível usando um método similar a esse usado para preparar o Composto 24. Composto 28 0 Composto 28 foi preparado a partir do Composto 27 usando um método similar a esse usado para preparar o
Composto 25, e produziu o Composto 28 como um sólido (61,2 mg, 0,09 mmol, 77 %) . Espetro de massa: (M+H)+ = 683,1.
Composto 29 O Composto 29 foi preparado a partir do Composto 28 usando um método similar a esse usado para preparar o
Composto 26, e produziu o Composto 29 (48,9 mg, 0,09 mmol, 100 %). Espetro de massa: (M+H)+ = 549,2.
Exemplo S O Exemplo S (sólido branco, 12,0 mg, 0,017 mmol, 19 %) foi preparado a partir do Composto 29 usando um método similar a esse usado para preparar o Exemplo R. XH RMN (300 MHz, CD3OD) : δ 8,74 (m 1H), 8,47 (d, J = 4,8, 1H), 8,04 (m, 1 H), 7,45-7, 60 (m, 5 H), 714 (d, J = 8,4, 2 H) , 6,75 (d, J = 9,0, 2 H), 5,55 (d, J = 5,4, 1 H) , 4,90 (m, 1 H) , 3,55-4,01 (m, 15 H), 2,69-2, 90 (m, 5 H) , 1,50 (m, 2 H) , 0,67 (s, 9 H). Espetro de massa: (M+H)+ = 720,1.
Preparação dos Exemplos T, U, V
Reagentes e Condições: i. j-PrOH. 80 °C;». PfiiC i-PfOH; i. i-PrOH.. CH;COOH 80 *C·. iy. TBAP THP; v.e. 4-pirkScsibinoL PPh, OBAP, OCIA b. TTA, DCM; ¢. 0MAP; QFPBA, {SR,3sS,8aR}4etfí«dro-2H-f«f^S>S·^ íiif.sn-5-si caít«jBsto de'i-rifeofeníb. CHSCN
Composto 30
Uma mistura de composto 3 (3, 008 g, 14,8 mmol) e 4- (terc-butildimetilsililoxi) benzaldeído (3,50 g, 14,8 mmol) foi dissolvida em isopropanol (45 ml) e o balão de reação foi aquecido até 80 °C e deixado a agitar durante 24 h. A mistura de reação foi arrefecida até a temperatura ambiente, diluida com H2O (50 ml) e extraida com acetato de etilo (4 x 100 ml) . O extrato orgânico foi lavado com salmoura, seco em sulfato de sódio, concentrado para dar um resíduo bruto, que foi purificado usando cromatografia em sílica gel (30-100 % de acetato de etilo/hexano) para dar o Composto 30 (2, 996 g. 7,1 mmol, 48 %) . Espetro de massa: (M+H)+ = 422, 1.
Composto 31 O Composto 30 (2,818g, 6,68 mmol) foi dissolvido em isopropanol (55 ml) e Pd/C (845 mg) foi adicionado. O balão de reação foi purgado com gás hidrogénio três vezes e, em seguida, o balão foi preenchido com hidrogénio e deixado a agitar à temperatura ambiente durante uma hora e meia. A mistura de reação foi filtrada através de uma almofada de CELITE e o filtrado foi concentrado, proporcionando o Composto 31 como um óleo incolor (2,8298 g, 6,68 mmol, 100 %). Espetro de massa: (M+H)+ = 423,9.
Composto 32
Uma suspensão do Composto 31 (2,8298 g, 6,68 mmol) e (S)-2-(4-metoxifenil)-1-((R)-oxiran-2- il)etilcarbamato de terc-butilo (1,507 g, 5,14 mmol) em isopropanol (16 ml) e ácido acético glacial (0,24 ml, 4,11 mmol) foi aquecida até 80 °C durante 19 h. A mistura de reação foi arrefecida até a temperatura ambiente e concentrada. O resíduo bruto foi purificado usando cromatografia em sílica gel (0-35 %, então 35-50 % de acetato de etilo/hexano) e produziu o
Composto 32 como um sólido espumoso branco (2,563g, 3,57 mmol, 54 %) . Espetro de massa: (M+H)+ = 717,2, (M+Na)+ = 739, 4 .
Composto 33 0 Composto 32 (2,555 mg, 3,56 mmol) foi dissolvido em tetrahidrofurano anidro (11 ml) e o balão de reação foi arrefecido até 0 °C. Fluoreto de tetrabutilamónio em tetrahidrofurano (5,35 ml, 5,35 mmol) foi adicionado gota a gota e a reação foi deixada a agitar durante 15 minutos. A mistura de reação foi aquecida até a temperatura ambiente e diluído com H2O (10 ml) e extraída com cloreto de metileno (2 x 100 ml) . A camada orgânica foi lavada com salmoura, seca em Na2SC>4 e concentrada para proporcionar o Composto 33 como um sólido espumoso branco pérola (2,148 g, 3,56 mmol, 100 %) . Espetro de massa: (M+H)+ = 603,2, (M+Na)+ = 625,3.
Exemplo T O Composto 33 (80,0 mg, 0,13 mmol) e 4-piridilcarbinol (29,0 mg, 0,26 mmol) foram dissolvidos em cloreto de metileno anidro (2,6 ml). Trifenilfosfina (69,6 mg, 0,26 mmol) foi adicionado seguido de di-terc- butilazodicarboxilato (61,6 mg, 0,26 mmol) e a mistura de reação foi deixada a agitar à temperatura ambiente durante 2 h. A mistura de reação foi concentrada e parcialmente purificada usando cromatografia em sílica gel (25-75 % de acetato de etilo/hexano) para produzir um óleo amarelo. O óleo foi dissolvido em cloreto de metileno (1,2 ml) e ácido trifluoroacético foi adicionado (0,25 ml) e a mistura de reação foi deixada a agitar à temperatura ambiente durante 2 h. A mistura de reação foi concentrada e co-evaporada com cloreto de metileno (3 x) e acetonitrilo (4 x) . O resíduo resultante foi dissolvido em acetonitrilo anidro e arrefecido até 0 °C. Dimet ilaminopiridina (1,2 mg, 0,01 mmol) foi adicionada seguido de diisopropiletilamina (0,09 ml, 0,5 mmol) até que o pH = 8 fosse alcançado. Após adição de (3R,3aS,6aR)-tetrahidro-2H-furo[2,3-b]furan-3-il carbonato de 4-nitrofenilo (28,5 mg, 0,096 mmol), preparado de acordo com Miller et al Bioorg. Med. Chem. Lett. 2005,15, 3946-3500, a mistura de reação foi deixada a agitar a 0 °C durante 2 h e, em seguida, à temperatura ambiente durante 18 h. A mistura de reação foi diluída com acetato de etilo e lavada com H2O (3 x) , solução de NaOH (1 N, 3 x) , e salmoura (1 x) . A camada orgânica foi seca em Na2SC>4 e concentrada. O resíduo bruto foi purificado por meio de cromatografia em sílica gel (75-100 % de acetato de etilo/hexano) e, em seguida, por meio de HPLC de fase reversa (coluna Phenomenex Synergi®, 25-100 % de acetonitrilo/PbO) para dar o Exemplo T como um sólido branco (13,4 mg, 0,018 mmol, 19 %) . ΤΗ RMN (300 MHz, CD3OD): δ 8,47(d, J = 6,0, 2H), 7,46 (d, J = 3,0, 2H), 7,28 (d, J = 8,7, 2H), 7,09 (d, J = 8,7, 2H), 6,88 (d, J = 8,7, 2H) , 6,75 (d, J = 8,4, 2H) , 5,55 (d, J = 5,4,1H), 5,12 (s, 2H) , 4,90 (m, 1H), 3,58-3, 89 (m, 15H), 2,67-2,81 (m, 5H) , 1,46-1,58 (m, 2H), 0,67 (s, 9H). Espetro de massa: (M+H)+ = 750,3, (M+Na)+ = 772,4.
Exemplo U O Exemplo U foi preparado a partir do Composto 33 usando procedimentos similares a esse usado para preparar o Exemplo T, exceto que 2-piridalcarbinol foi usado ao invés de 4-piridilcarbinol. O Composto U (16,7 mg, 0,022 mmol, 17 %) . !H RMN (300 MHz, CD30D) : δ 8,49(d, J = 4,8,1H), 7,81 (m, 1H), 7,54 (d, J= 8,1, 1H) , 7,26-7,34 (m, 3H) , 7,27 (d, J = 8,4, 2H), 6,88 (d, J = 8,7, 2H) , 6,75 (d, J = 8,4, 2H) , 5,55 (d, J = 5,4, 1H) , 5,11 (s, 2H) , 4,90 (m, 1H) , 3,58-3,89 (m, 15H) , 2,67-2,81 (m, 5H) , 1,46-1,58 (m, 2H) , 0,67 (s, 9H). Espetro de massa: (M+H)+ = 750,3, (M+Na)+ = 772,4.
Exemplo V O Exemplo U foi preparado a partir do Composto 33 usando procedimentos similares a esse usado para preparar o Exemplo T, exceto que 3-furanametanol foi usado ao invés de 4-piridilcarbinol. O Exemplo V (13,9 mg, 0,019 mmol, H %) · !H RMN (300 MHz, CDCI3) : δ 7,45 (s, 1H), 7,38 (s, 1H), 7,20 (d, J = 9,3, 2H) , 7,07 (d, J = 8,4,2H), 6,84 (d, J = 8,7, 2H) , 6,74 (d, J = 8,4, 2H) , 6,43 (s, 1H) , 5,62 (d, J = 5, 1, 1H) , 4,98 (m, 1H), 4,87 (s, 2H) , 3, 54-3, 96 (m, 15H) , 2,79-2, 90 (m, 4H) , 2,60 (m, 1H) , 1,57-1, 63 (m, 2H) , 0,70 (s, 9H) . Espetro de massa: (M+H)+ = 739,2, (M+Na)+ = 761,4.
Preparação dos Exemplos W, X, Y
Reagentes e Condições: j. PPh3, azodicarboxilato do di-terc-butiio, DCM, éster terc-butílícodo ácido (2- hidroxi-e1ii)-carbámico; ii. TFA, DCM; iii. DCM, DEE A, 0 °C, cloreto do ácido
Composto 35
Num balão de fundo redondo de 25 ml, azodicarboxilato de di-terc-butilo (44 mg, 2,0 eq) foi adicionado ao
Composto 34 (67, 8 mg, 0, 096 mmol, 1,0 eq) , éster terc- butilico do ácido (2-hidroxi-etil)-carbámico (30 pL, 2,0 eq.) e trifenilf osf ano (50 mg, 2,0 eq.) em 1,2 ml de
diclorometano à temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 3 horas. A
conclusão da reação foi monitorizada por meio de TLC (sílica gel, 5 % de MeOH/DCM) . A mistura de reação foi concentrada, e o resíduo resultante foi purificado por meio de cromatografia em sílica gel, 40-100 % de EtOAc/hexano, a 2-10 % de MeOH /DCM) para dar o Composto 35 como uma espuma branca (59 mg, 0,069 mmol, 72 %). LC-MS do composto mostra 871,4 (M+Na)+.
Composto 36 A solução de TFA/DCM a 20 % (4 ml) foi adicionada ao
Composto 35 num balão de fundo redondo de 25 ml a 0 °C. A reação foi completada após agitação a 0 °C durante 40 minutos. A mistura de reação foi concentrada e extraída usando EtOAc (3X) /NaHCC>3 saturado. As camadas orgânicas foram combinadas, secas em Na2S04, concentradas para dar o Composto 36 como um óleo incolor (46 mg, 88 %) .
Exemplo W DIEA (9 uL, 0,05 mmol, 1,5 eq.) foi adicionado ao
Composto 36 (25 mg, 0,0334 mmol, 1,0 eq.) em 0,5 ml de DCM. Cloreto de metanossulf onilo (3,1 uL, 1,2 eq.) foi adicionado a 0 °C. A reação foi completada após agitação a 0 °C durante 30 minutos. A mistura de reação foi concentrada e purificada por meio de HPLC de fase reversa (coluna Phenomenex Synergi®, 0,05 % de TFA em MeCN/ 0,05 % de TFA em água) para dar o Exemplo W como um sólido branco (14,3 mg, 52 %) . LC-MS mostra 827,3 (M+H) + . Ή RMN (300 MHz, CDC13) : δ 8, 92 (s, 1 H) , 7,96 (d, 2 H) , 7,68(m, 2 H) , 7,44 (d, 2 H) , 7,10 (d, 2 H) , 6,88 (d, 2 H) , 6,70 (s, 1 H) , 5,68 (d, 1 H) , 5,42 (m, 2 H) , 5,08 (m, 1 H) , 3,44 - 4,16 (m, 14 H) , 2,84 (m, 7 H) , 2,52 (m, 1 H) , 1,80 (m, 2 H) , 0,65 (s, 9 H) .
Exemplo X O Exemplo X foi preparado usando um procedimento similar a esse usado para preparar o Exemplo W, exceto que cloroformato de metilo foi usado ao invés de cloreto de metanossulf onilo, para dar o Exemplo X como um pó branco (2,8 mg, 23 %) . LC- MS mostra 829, 4 (M+Na)+. RMN (300 MHz, CD3OD) : δ 8,22 (d, 1 H) , 8,30 (m, 1 H) , 8,12 (d, 1 H) , 7,90 (d, 2 H) , 7,65 (m, 3 H) , 7,15 (d, 2 H) , 6,80 (d, 2 H) , 5,58 (d, 1 H) , 4,96 (m, 1 H) , 3,32 - 4,40 (m, 19 H) , 2,80 (m, 5 H) , 1,50 (m, 2 H) , 0,65 (s, 9 H) .
Exemplo Y O Exemplo Y foi preparado usando um procedimento similar a esse usado para preparar o Exemplo W, exceto que cloreto de tiofeno- 2-carbonilo foi usado ao invés de cloreto de metanossulfonilo. O produto bruto foi purificado por meio de cromatografia em sílica gel (2-10 % de MeOH/DCM) para dar o Exemplo Y como um pó branco (13 mg, 45 %) . LC-MS mostra 859, 3 (M+H) + . *Η RMN (300 MHz, CDCI3) : δ 8,82 (s, 1 H), 7,76 (m, 2 H) , 7,58 (m, 1 H) , 7,42 (m, 3 H) , 7,25 (m, 1 H), 7,12 (d, 2 H) , 7,03 (m, 1 H) , 6,80 (d, 2 H) , 6,60 (s, 1 H), 5,62 (d, 1 H) , 5,38 (m, 2 H) , 5,03 (m, 1 H) , 3,44 - 4,16 (m, 14 H) , 2,84 (m, 4 H) , 2,52 (m, 1 H) , 1,70 (m, 2 H) , 0, 65 (s, 9 H) .
Preparação dos Exemplos Z e AA
Reagentes e Condições: í. PPh3, azodicarboxiiato de di-terc-buíilo, DCM âicooi
Exemplo Z
Num balão de fundo redondo de 25 ml, azodicarboxilato de di-terc-butilo (28 mg, 4,0 eq) foi adicionado ao Composto 34 (21,4 mg, 0,03 mmol, 1,0 eq) , (2-metil-tiazol- 4-il)-metanol (7,8 mg, 2,0 eq.) e trifenilfosfano (31,5 mg, 4,0 eq.), em diclorometano (1,5 ml) à temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. A mistura de reação foi concentrada, e o resíduo resultante foi purificado por meio de cromatografia em sílica gel (40-100 % de EtOAc/hexano, to 2-10 % de MeOH /DCM) para dar o Exemplo Z como um sólido branco (5,4 mg, 0,069 mmol, 22 %). LC-MS do composto mostra 839,3 (M+Na)+. 1H RMN (300 MHz, CDC13) : δ 8,78 (d, 1 H) , 8,0 (d, 2 H) , 7,88 (m, 1 H) , 7,80 (m, 1 H) , 7,50 (d, 2 H) , 7,38 (m, 1 H) , 7,12 (m, 2 H), 6,86 (d, 2 H) , 6,60 (s, 1 H) , 5,62 (d, 1 H) , 5,38 (m, 2 H) , 5,10 (s, 2 H) , 5,03 (m, 1 H) , 3,58 - 4,16 (m, 11 H), 2,84 (m, 3 H) , 2,70 (m, 4 H) , 1,70 (m, 2 H) , 0,72 (s, 9 H).
Exemplo AA 0 Exemplo AA foi preparado usando um procedimento similar a esse usado para preparar o Exemplo Z, usando Composto 34 (10,6 mg, 0,015 mmol, 1,0 eq) e (tetrahidro- furan-3-il)-metanol (3,1 mg, 2,0 eq.) para dar o Exemplo AA como um sólido branco (5,8 mg, 0,007 mmol, 49 %). LC-MS do composto mostra 790,2 (M+H)+. RMN (300 MHz, CDCI3): δ 8,78 (d, 1 H) , 8,0 (d, 2 H) , 7,88 (m, 1 H) , 7,78 (m, 1 H) , 7,48 (d, 2 H) , 7,35 (m, 1 H) , 7,12 (m, 2 H) , 6,80 (d, 2 H) , 6,56 (s, 1 H) , 5,62 (d, 1 H) , 5,30 (m, 2 H) , 5,05 (s, 2 H) , 5,03 (m, 1 H) , 3,58 - 4,16 (m, 15 H) , 2,84 (m, 4 H) , 2,70 (m, 2 H) , 2,40 (m, 1 H) , 2,07 (m, 2 H) 1,68 (m, 2 H) , 0,72 (s, 9 H) .
Preparação do Exemplo AB
Reagentes e Condições: i. IPA, 80 °C; ii. TFA, DCM; iii. TPTU, DCM, DlEA,Composto 1
Composto 39
Num balão de fundo redondo de 50 ml, isopropanol (6 ml) foi adicionado a uma mistura do Composto 37 (690 mg, 1,61 mmol, 1,0 eq.) e do Composto 38 (481 mg, 1,1 eq.)· A mistura de reação foi submetida a refluxo a 80 °C durante 15 horas. A mistura de reação foi concentrada e purificada por meio de cromatografia em silica gel (40-100 % de
EtOAc/hexano) para dar o Composto 39 como um sólido branco (916 mg, 78 %). LC-MS mostra 729,1 (M+H)+.
Exemplo 40 TFA (3,0 ml) foi adicionado ao Composto 39 (916 mg, 1,25 mmol.) em 6 ml de DCM anidro a 0 °C. A mistura de reação foi agitada a 0 °C durante 2 horas. Após a conclusão da reação, a mistura de reação foi concentrada, extraída usando EtOAc (3X) / solução de NaHCCb saturado. As camadas orgânicas foram combinadas, secas (Na2SC>4) , e concentradas para dar o Exemplo 40 como um óleo incolor (600 mg, 90 %). LC-MS mostra 529,1 (M+H)+.
Exemplo AB TPTU (1,01 g, 3,4 mmol, 3,0 eq.) foi adicionado ao Composto 1 (preparado seguindo o procedimento de Journal of Medicinal Chemistry, 1998, 41, 3399) (644 mg, 3,0 eq.) em 6 ml de D CM à temperatura ambiente e agitado durante 5 minutos. DIEA (1,19 ml, 3,0 eq.) foi adicionado à mistura a 0 °C. A mistura foi agitada a 0 °C durante 30 minutos. A mistura de reação foi adicionada a uma solução do Composto 40 (600 mg, 1,135 mmol, 1,0 eq.) em 5 ml de DCM a 0 °C. A mistura de reação foi agitada a 0 °C, e aquecida até a temperatura ambiente durante a noite. A mistura de reação foi então extraída usando DCM (3X)/ solução de NaHCCb saturado. A camada orgânica foi seca (Na2S04) e concentrada. O resíduo foi purificado usando cromatografia em sílica gel (4-8 % de MeOH/DCM) para dar um sólido branco (557 mg, 56 %). LC-MS mostra 871,1 (M+H)+. 1H RMN (300 MHz, CDC13) : δ 8,78 (d, 1 H) , 7,94 (d, 2 H) , 7,78 (m, 2 H) , 7,42 (d, 2 H) , 7,22 (m, 1 H) , 7,18 (d, 2 H) , 6,80 (d, 2 H) , 6,50 (d, 1 H), 5,52 (d, 1 H), 5,38 (d, 1 H), 4,20 (m, 6 H), 4,00 (m, 2 H) , 3,80 (m, 1 H) , 3,60 (m, 7 H) , 2,84 (m, 3 H) , 2,56
(m, 1 H) , 1,35 (dd, 6 H) , 0,82 (s, 9 H) , 0,78 (s, 9 H) . 31P RMN (300 MHz, CDCI3) : δ 19, 543.
Preparação dos Exemplos AC, AD, AE, e AF
Reagentes e Condições: i. Carbonato de di-succinimidilo, MeCn, TEA; ii. hidrazina, THF, 0 ÒC; íti. 4-piridin-2-ii-benzaldehido, EtOH; iv. a-cianoborabidreio de sódio THF, ácido toíueno-4-sulfónico; b. NaOH 1 N, THF, MeOH: v. IPA, epóxido, 65 °C; vi- HC11 N, 0 0C: vil MeCN, DlEA, DMAP, Composto 70; viii. TFA, DCM, 0 °C; viii a (para AC}- DMP, TEA, dicarbonato de di-terc-butilo; b (para AD y AE). MeCN, DlEA, DMAP, carbonato; c (paraAF), DCM, DlEA.cloreto de ácido
Composto 41 TEA (21,9 ml, 155,6 mmol, 3,0 eq.) foi adicionado a 2-trimetilsilanil-etanol (7,4 ml, 51,88 mmol, 1,0 eq.) em 260 ml MeCN, seguido de carbonato de di-succinimidilo (20 g, 1,5 eq.) . A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 3 horas. A mistura de reação foi concentrada e extraída usando EtOAc/NaHCCb saturado. A camada orgânica foi concentrada após secar em Na2SC>4. Éter
(100 ml) foi adicionado ao resíduo para formar um precipitado. O precipitado foi filtrado e seco para dar o Composto 41 como um sólido branco (11,1 g, 84 %) . 1H RMN (300 MHz, CDC13) : δ 4,42 (t, 3 H) , 2,82 (s, 4 H) , 1,16 (t, 2 H) , 0,1 (s, 9 H) .
Composto 42
Monoidrato de hidrazina (5,73 ml, 115,6 mmol, 5,0 eq.) foi adicionado ao Composto 41 (6 g, 23,13 mmol, 1,0 eq.) em 50 ml THF a 0 °C. Um precipitado formou-se. A reação foi monitorizada por ΤΗ RMN. A reação foi completada após 2
horas. A mistura de reação foi concentrada e extraída usando EtOAc/NaHCCç saturado (IX) e salmoura (IX). A camada orgânica foi concentrada e seca em Na2SC>4 para dar o Composto 42 como um sólido branco (3,23 g, 79 %) . RMN (300 MHz, CDCI3) : δ 5,84(b, 1 H) , 4,20 (t, 2 H) , 1,00 (t, 2 H) , 0,1 (s, 9 H) .
Composto 43 4-Piridin-2-il-benzaldeído (3,35 g, 18,3 mmol, 1,0 eq.) foi adicionado ao Composto 42 (3,23 g, 18,3 mmol, 1,0 eq.) em 30 ml de EtOH à temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 15 horas. A mistura de reação foi concentrada e extraída usando EtOAc/NaHCCb saturado (2X) e salmoura (IX). A camada orgânica foi concentrada após secar em Na2SC>4. O resíduo foi re-cristalizado (hexano/EtOAc) para dar o Composto 43 como um sólido branco (5,13 g, 82 %) . LC-MS mostra 342,1 (M+H)+.
Composto 44
Cianoborohidreto de sódio (990 mg, 15,75 mmol, 1,05 eq.) foi adicionado ao Composto 43 (5,13 g, 15,0 mmol, 1,0 eq.) em 30 ml de THF à temperatura ambiente, seguido de monoidrato de ácido tolueno-4-sulfónico (2,85 g, 1,0 eq.). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 15 horas. A mistura de reação foi concentrada. Uma mistura de THF (20 ml) e MeOH (4 ml) foi adicionada ao resíduo. NaOH a 1 N (82 ml, 5,5 eq.) foi adicionado à suspensão acima a 0 °C, gota a gota. A reação foi agitada a 0 °C durante 1 hora. A mistura de reação foi extraída usando EtOAc/ salmoura (2X) . A camada orgânica foi concentrada e seca em Na2SC>4. 0 resíduo foi purificado por meio de cromatograf ia em sílica gel (30-60 % de
EtOAc/hexano) para dar o Composto 44 como um sólido branco (4,4 g, 86 %). LC-MS mostra 343,9 (M+H)+.
Composto 45
Isopropanol (15 ml) foi adicionado ao Composto 44 (1,96 g, 5,72 mmol, 1,0 eq.) e o epóxido (éster terc- butílico do ácido [2-(4-benziloxi- fenil)-1-oxiranil-etil]-carbámico, comprado de Acme Bioscience) (2,11 g, 1,0 eq.). A mistura de reação foi aquecida até 65 °C durante 17 horas. A mistura de reação foi concentrada e purificada por meio de cromatograf ia em sílica gel (30-60 % de
EtOAc/hexano) para dar o Composto 45 como um sólido branco (1,5 g, 47 %). LC-MS mostra 735,2 (M+Na)+.
Composto 46
HC1 a 1 N em MeCN (acetonitrilo); 24 ml, excesso) foi adicionado ao Composto 45 (360 mg, 0,505 mmol) a 0 °C. A mistura de reação foi agitada a 0 °C durante 2,5 horas. A mistura de reação foi extinta por meio da adição de 22 ml de solução a 1 N de NaOH a 0 °C. A mistura de reação foi extraída usando Et0Ac/NaHC03 saturado. A camada orgânica foi concentrada e purificada por meio de cromatografia em sílica gel (2-10 % de MeOH/DCM) para dar o Composto 46 como um sólido branco (285 mg, 92 %) . LC- MS mostra 635,2 (M+Na)+.
Composto 47 DIEA (162 uL, 0,93 mmol, 2,0 eq.) foi adicionado ao Composto 46 (285 mg, 0,465 mmol, 1,0 eq.) em 10 ml de MeCN a 0 °C, seguido de carbonato de bis-furano (éster hexahidro-furo[2,3-b]furan-3-ίlico éster 4-nitro-fenílico do ácido carbónico, preparado de acordo com Miller et ai
Bioorg. Med. Chem. Lett. 2005, 15, 3496-3500) (144 mg, 1,05 eq.) e DMAP (11,5 mg, 0,2 eq.) . A mistura de reação foi agitada a 0 °C e aquecida até a temperatura ambiente durante a noite. A mistura de reação foi extraída usando EtOAc/NaHCCh saturado (3X) . A camada orgânica foi concentrada e purificada por meio de cromatografia em sílica gel (20-80 % de EtOAc/hexano) para dar o Composto 47 como um sólido branco (276 mg, 77 %) . LC-MS mostra 791,2 (M+Na)+.
Composto 48 TFA (3 ml) foi adicionado ao Composto 47 (268 mg, 0,37 mmol) em 10 ml de DCM a 0 °C. A mistura de reação foi agitada a 0 °C durante 3 horas. A mistura de reação foi
concentrada e extraída usando EtOAc/NaHCCh saturado (2X). A camada orgânica foi concentrada para dar o Composto 48 como o sólido branco (211 mg, 89 %). LC-MS mostra 625,2 (M+H)+. Exemplo AC TEA (14 uL, 0,10 mmol, 2,0 eq.) foi adicionado ao
Composto 48 (32 mg, 0,05 mmol) em 0,2 ml de DMF à temperatura ambiente, seguido de dicarbonato de di-terc-butilo (17 mg, 1,5 eq.) . A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas. A mistura de reação foi extraída usando EtOAc/NaHCCg saturado (2X) e salmoura (IX) . A camada orgânica foi concentrada e purificada por meio de cromatografia em sílica gel (2-10 % de MeOH/DCM) para dar o Exemplo AC como um sólido branco (9,6 mg, 89 %). LC-MS mostra 725,2 (M+H) + . *Η RMN (300 MHz, CDC13) : δ 8,70 (d, 1 H) , 8,0 (d, 2 H) , 7,78 (m, 2 H) , 7,40 (m, 7 H) , 7,24 (m, 1 H) , 7,15 (d, 2 H) , 6,84 (d, 2 H) , 5,62 (d, 1 H) , 5,36 (b, 2 H) , 5,02 (m, 4 H) , 3,65 - 4,16 (m, 8 H) , 2,84 (m, 1 H) , 2,57 (m, 2 H) , 1,68 (m, 2 H) , 1,38 (s, 9 H) .
Exemplo AD DIEA (12 uL, 0,07 mmol, 2,0 eq.) foi adicionado ao Composto 48 (22 mg, 0,035 mmol) em 0,2 ml de MeCN a 0 °C, seguido de 4-nitro-fenil éster tiazol-5-ilmetil éster do ácido carbónico (11 mg, 1,05 eq.) e DMAP (2 mg, 0,5 eq.)· A mistura de reação foi agitada a 0 °C e aquecido até a temperatura ambiente durante a noite. A mistura de reação foi extraída usando EtOAc/NaHCCb saturado (2X) e salmoura (IX) . A camada orgânica foi concentrada e purificada por meio de cromatografia em sílica gel (2-10 % de MeOH/DCM) para dar o Exemplo AD como um sólido branco (4,0 mg, 15 %). LC-MS mostra 766,2 (M+H) + . Ή RMN (300 MHz, CDC13) : δ 8,70 (m, 2 H) , 7,94 (d, 2 H) , 7,78(m, 3 H) , 7,40 (m, 7 H) , 7,24 (m, 1 H) , 7,15 (d, 2 H) , 6,84 (d, 2 H) , 5,62 (d, 1 H) , 5,22 (s, 2H) , 5,03 (m, 4 H) , 3,65 - 4,16 (m, 8 H) , 2,84 (m, 4 H) , 2,62 (m, 2 H) , 1,68 (m, 2 H) .
Exemplo AE DIEA (17 uL, 0,10 mmol, 2,0 eq.) foi adicionado ao Composto 48 (31 mg, 0,05 mmol) em 0,2 ml de MeCN a 0 °C, seguido de hexahidro-ciclopenta[b]furan-5-il éster 4-nitro-fenil éster do ácido carbónico (16 mg, 1,05 eq.), preparado de acordo com documento WO03/078438A1, e DMAP (1,2 mg, 0,2 eq.). A reação foi agitada a 0 °C, aquecido até a temperatura ambiente durante a noite. A mistura de reação foi extraída usando EtOAc/NaHCCb saturado (2X) e salmoura (IX) . A camada orgânica foi concentrada e purificada por meio de cromatografia em sílica gel (2-10 % de MeOH/DCM) para dar o Exemplo AE como um sólido branco (4,6 mg, 12 %). LC-MS mostra 779,2 (M+H) + . RMN (300 MHz, CD30D) : δ 8,78 (d, 2 H) , 8,40 (m, 1 H) , 8,23 (d, 1 H) , 7,94 (d, 2 H) , 7,80 (m, 1 H) , 7,63 (d, 2 H) , 7,40 (m, 5 H) , 7,18 (d, 2 H) , 6,84 (d, 2 H) , 5,62 (d, 1 H) , 5,06 (s, 2H) , 4,95 (m, 2 H) , 4,40 (m, 1 H) , 3,65 - 4,16 (m, 6 H) , 2,84 (m, 6 H) , 2,02 (m, 4 H) , 1,64 (m, 5 H) .
Exemplo AF DIEA (16 uL, 0,92 mmol, 2,0 eq.) foi adicionado ao Composto 48 (29 mg, 0, 046 mmol) em 0,6 ml de DCM a 0 °C,
seguido de cloroformato de isopropilo (16 uL, 1,06 eq.). A mistura de reação foi agitada a 0 °C durante 4 horas. A
mistura de reação foi concentrada e purificada por meio de HPLC de fase reversa (coluna Phenomenex Synergi®, 0,05 % de TFA em MeCN/água) para dar o Exemplo AF como um sólido branco (2,3 m9' 7 %) · LC-MS mostra 711,2 (M+H)+. *Η RMN (300 MHz CD3OD): δ 8,78 (d, 2 H), 8,40 (m, 1 H), 8,23 (d, 1 H) , 7,94 (d' 2 H) ' 7,80 (m' 1 ' 7'63 <d' 2 ' 7'40 5 H) , 7,18 (d' 2 H) ' 6,84 ^d' 2 H) ' 5'62 (d' 1 H) > 5,06 (s, 2H) , 4,98 (rn, 2 H) , 4,75 (m, 1 H) , 3,65 - 4,16 (m, 8 H) , 2,84 (m, 5 H) f 1,58 (m, 2 H) , 1,10 (m, 6 H) .
Pr.ppar jndos Exemplos AG, AH, AI, AJ, AK, e AL
Reagentes e condições: í. doroformato de metilo, NaOH 1 N, dioxano, 80 °C durante a noite ii. a.
Mel, Ag20 DMF; b. NaOH 1 N, MeOH; iii. DMF, DIEA, TPTU, ácido carboxíltco {descrito nos procedimentos)
Composto 49
Uma aolução aquosa de NaOH a 1 N (24 ml, 4,0 eq.) foi adicionada a uma suspensão de L-treonina (705 mg, 5,92 mmol, 1,0 eq.) em dioxano anidro (2 ml) à temperatura ambiente, seguido de cloroformato de metilo (0,91 ml, 2,0 eq.), gota a gota. A mistura de reação foi aquecida até 80 °C durante a noite. A mistura de reação foi acidificada até 0 pH 2. A mistura foi extraída por EtOAc (2X) . As camadas orgânicas foram combinadas e concentradas para dar o Composto 49 como o óleo incolor (460 mg, 54 %). XH RMN (300 MHz, CDsOD) : δ 4,71 (tt, 1 H) , 4,04 (d, 1 H) , 1,50 (d, 3 H) .
Composto 50 O Composto 50 foi preparado usando um procedimento similar a esse usado para preparar o Composto 49 usando ácido (2R,3S)—(—)— 2-amino-3-hidroxi-4-metilpentanoico (260 mg, 1,77 mmol). O Composto 50 foi isolado como um óleo incolor (304 mg, 99 %) . ΤΗ RMN (300 MHz, CD3OD) : δ 4,40 (dd, 1 H) , 4,32 (d, 1 H), 2,00 (m, 1 H), 1,02 (d, 6 H) .
Composto 51
Mel (265 μΐ, 8,0 eq.) foi adicionado ao Composto 50 (92 mg, 0,531 mmol, 1,0 eq.) em DMF (1,5 ml) à temperatura ambiente, seguido de óxido de prata (492 mg, 4,0 eq.) . A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 5 horas. A mistura de reação foi filtrada através de CELITE. Clorofórmio (100 ml) foi adicionado à mistura de reação e foi então extraído com água (2X). A camada orgânica foi seca em Na2SC>4 e concentrada para dar um sólido amarelo claro (91 mg, 85 %) . ΧΗ RMN (300 MHz, CD3OD) : δ 4,25 (m, 2 H) , 3,82 (s, 3 H) , 2,90 (s, 3 H) , 1,95 (m, 1 H), 1,10 (d, 6 H). O produto bruto foi dissolvido em
1 ml de MeOH. NaOH a 1 N (1 ml, 2,0 eq.) foi adicionado. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora. A mistura de reação foi liofilizada para dar o Composto 51 como um sólido branco (141 mg, sódio sal). !Η RMN (300 MHz, CD3OD) : δ 4,20 (t, 1 H) , 3,82 (d, 1 H), 2,86 (s, 3 H) , 1,95 (m, 1 H) , 1,00 (dd, 6 H) .
Exemplo AG TPTU (21 mg, 1,2 eq.) foi adicionado ao Composto 49 (10 mg, 1,2 eq.) em 0,5 ml de DMF a 0 °C. A mistura foi agitada a 0 °C durante 5 minutos. O Composto 52 (28 mg, 0,054 mmol, 1,0 eq.) e DIEA (20 pL, 2,0 eq.) foi adicionado. A mistura de reação foi agitada a 0 °C durante 1 hora. A mistura de reação foi purificada por meio de HPLC de fase reversa (coluna Phenomenex Synergi®, 0,05 % de TFA em MeCN/água) e cromatograf ia em sílica gel (2-8 % de MeOH/DCM) para dar o Exemplo AG como um sólido branco (10,5 mg, 30 %) . LC-MS mostra 646, 2 (M+H) + . ). *Η RMN (300 MHz, CD3OD) : δ 8,60 (d, 1 H) , 7,90 (m, 5 H) , 7,56 (d, 2 H) , 7,38 (m, 1 H) , 7,22 (m, 3 H) , 7,20 (m, 1 H) , 5,58 (d, 1 H) , 4,98 (m, 2 H) , 3,64-4,14 (m, 8 H) , 2,84 (m, 6 H) , 1,50 (m, 2 H) , 1,10 (d, 3 H) .
Exemplo AH O Exemplo AH foi preparado usando procedimentos similares a aqueles usados para preparar o Composto AG, usando o Composto 52 (27 mg, 0,052 mmol, 1,0 eq.) e o
Composto 50 para dar o Exemplo AH como um sólido branco (10,4 mg, 30 %) . LC-MS mostra 674,2 (M+H)+.). ΤΗ RMN (300 MHz, CD3OD) : δ 8,60 (d, 1 H), 7,90 (m, 5 H), 7,56 (d, 2 H) , 7,38 (m, 1 H) , 7,22 (m, 3 H) , 7,20 (m, 1 H) , 5,58 (d, 1 H) , 4,98 (m, 1 H) , 3,64-4,14 (m, 9 H) , 2,84 (m, 6 H) , 1,50 (m, 3 H), 0,88 (dd, 6 H).
Exemplo AI O Exemplo AI foi preparado usando procedimentos similares a aqueles usados para preparar o Composto AG, usando o Composto 52 (25 mg, 0,048 mmol, 1,0 eq.) e ácido 5,5-dimetil-2-oxo-oxazolidina-4-carboxílico para dar o
Exemplo AI como um sólido branco (8,5 mg, 27 %) . LC-MS mostra 660,2 (M+H)+. Ή RMN (300 MHz, CD3OD): δ 8,60 (d, 1 H) , 7,90 (m, 5 H) , 7,56 (d, 2 H) , 7,38 (m, 1 H) , 7,22 (m, 3 Η), 7,20 (m, 1 Η), 5,58 (d, 1 Η), 4,98 (m, 1 Η), 3,64-4,14 (m, 9 Η), 2,84 (m, 5 Η), 1,50 (m, 2 Η), 1,42 (s, 3 Η), 0,92 (s, 3 Η) .
Exemplo AJ O Exemplo AJ foi preparado usando procedimentos similares a aqueles usados para preparar o Composto AG, usando o Composto 52 (20 mg, 0,038 mmol, 1,0 eq.) e o
Composto 51 para dar o Exemplo AJ como um sólido branco (12,5 mg, 47 %) . LC-MS mostra 688,2 (M+H)+. Ή RMN (300 MHz, CD3OD) : δ 8,60 (d, 1 H) , 7,90 (m, 5 H) , 7,56 (d, 2 H) , 7,38 (m, 1 H) , 7,22 (m, 3 H) , 7,20 (m, 1 H) , 5,58 (d, 1 H) , 4,98 (m, 1 H) , 3,64-4,14 (m, 9 H) , 2,84 (m, 9 H) , 1,50 (m, 3 H), 0,88 (dd, 6 H).
Exemplo AK O Exemplo AK foi preparado usando procedimentos similares a aqueles usados para preparar o Composto AG, usando o Composto 52 (24 mg, 0,046 mmol, 1,0 eq.) e ácido 3,5,5-trimetil-2-oxo-oxazolidina-4-carboxílico (preparado de um modo similar a esse usado para preparar o Composto 51) para dar o Exemplo AK como um sólido branco (4,2 mg, 14 %) . LC-MS mostra 674,2 (M+H) + . RMN (300 MHz, CD3OD) : δ 8,60 (d, 1 H) , 7,90 (m, 5 H) , 7,56 (d, 2 H) , 7,38 (m, 1 H) , 7,22 (m, 3 H) , 7,20 (m, 1 H) , 5,58 (d, 1 H) , 4,98 (m, 1 H) , 3,64-4,14 (m, 9 H) , 2,84 (m, 8 H) , 1,50 (m, 2 H) , 1,42 (s, 3 H) , 0, 92 (s, 3 H) .
Exemplo AL O Exemplo AL foi preparado usando procedimentos similares a aqueles usados para preparar o Composto AG, usando o Composto 52 (28 mg, 0, 054 mmol, 1,0 eq. ) e ácido 5-metil-2-oxo-oxazolidina-4-carboxílico (preparado usando procedimentos similares a aqueles usados para preparar o Composto 49, usando L-alo-treonina) para dar o Exemplo AL como um sólido branco (12 mg, 34 %) . LC- MS mostra 646,2 (M+H) +. iH RMN (300 MHz, D6-DMSO) : δ 9,32(s, 1 H) , 8,60 (d, 1 H) , 8,02 (d, 2 H) , 7,83 (m, 3 H) , 7,42 (d, 2 H) , 7,35 (m, 1 Η), 7,15 (d, 2 Η), 5,58 (d, 1 Η), 4,82 (m, 1 Η), 3,54-4,14 (m, 10 Η), 2,80 (m, 5 Η), 1,40 (m, 2 Η), 0,86 (dd, 3 Η) .
Preparação dos Exemplos AM e AN
Reagentes e Condições: i.Cloreto de 2,2-dimetil-propano-1-sulfonilo, THP, NaHC03 sat., t.a.; ii. DMP, DIEA, TPTU, ácido
Exemplo AM
Cloreto de 2,2-dimetil-propano-l-sulfonilo foi adicionado ao Composto 52 (23 mg, 0,044 mmol, 1,0 eq.) numa mistura de THF: solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (0,7 ml : 0,7 ml). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi concentrada e extraída usando EtOAc/sat. NaHCC>3. A camada orgânica foi concentrada e purificada por meio de cromatografia em sílica gel (2-8 % de MeOH/DCM) para dar o Exemplo AM como um sólido branco (8 mg, 28 %). LC-MS mostra 653, 1 (M+H)+. !H RMN (300 MHz, CD3OD) : δ 8,70 (d, 1 H) , 8,18 (m, 1 H), 8,00 (m, 3 H) , 7,64 (d, 2 H) , 7,60 (m, 1 H) , 7,46 (m, 1 H), 7,26 (m, 4 H) , 5,58 (d, 1 H) , 4,98 (m, 1 H) , 3, 64-4,44 (m, 10 Η), 3,24 (m, 2 Η), 2,84 (m, 3 Η), 1,50 (m, 2 Η) , 1,20 (s, 9 Η) .
Exemplo AN TPTU (1,5 mg, 1,3 eq.) foi adicionado a ácido (2,6 — dimetil-fenoxi)- acético (9 mg, 1,3 eq.) em 0,5 ml de DMF a 0 °C. A mistura foi agitada a 0 °C durante 5 minutos. 0
Composto 52 (20 mg, 0,038 mmol, 1,0 eq.) e DIEA (14 pL, 2,0 eq.) foram adicionados. A mistura de reação foi agitada a 0 °C durante 1 hora. A mistura de reação foi purificada por meio de HPLC de fase reversa (coluna Phenomenex Synergi®, 0,05 % de TFA em MeCN/água) e cromatografia em sílica gel (2-8 % de MeOH/DCM) para dar o Exemplo AN como um sólido branco (6 mg, 23 %). LC-MS mostra 681,2 (M+H)+. Ή RMN (300 MHz, CD30D) : δ 8,60 (d, 1 H) , 7,90 (m, 4 H) , 7,60 (d, 2 H) , 7,38 (m, 1 H) , 7,24 (m, 4 H) , 7,18 (m, 1 H) , 6,90 (m, 3 H) , 5,58 (d, 1 H), 4,98 (m, 1 H) , 4,12 (m, 3 H) , 3,64-4,10 (m, 7 H) , 2,84 (m, 5 H) , 1,55 (m, 2 H) .
Preparação dos Exemplos AO, AP, e AO
Reagentes e Condições: j_ Tiazol-4-Nmetanol, PPh3, DCM, azodiearboxilato de cfi-terc-butilo; ii. PhCHO, IPA, 8 °C; Ni.a. NaCNBHa, p-TsOH, THP; b, NasBíO?, THP, água; iV. 54, IPA, HOAc 0,8equiv.; v. TFA. DCM; vi.
Composto 70, DCM, DIEA, DMAP
Composto 54
Azodicarboxilato de di-terc-butilo (280 mg, 1,2 mmol, 2,0 eq.) foi adicionado ao Composto 53, preparado por hidrogenação de carbamato de 2-(4-benziloxifenil)-1-(R)-oxiran-2-il) etilo de (S)-t-butilo, comprado de Acme
Bioscience, (170 mg, 0,6 mmol, 1/0 eq.) e tiazol-4-il-metanol (140 mg, 2,0 eq.) em 4 ml de DCM, seguido de trifenil-fosfano (320 mg, 2,0 eq·)· A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. A mistura de reação foi concentrada. O resíduo foi purificado por meio de cromat ograf ia em sílica gel (20-80 -s de
EtOAc/hexano) para dar o Composto 54 como um sólido branco (120 mg, 50 %) . *Η RMN (300 MHz, CDC13) : δ 8,82 (s, 1 H) , 7,40 (s, 1 H) , 7,20 (d, 2 H) , 6,92 (d, 2 H) , 5,24 (s, 2 H) , 4,44 (m, 1 H) , 4,06 (m, 1 H) , 3,0 (m, 1 H) , 2,84 (m, 2 H) , 2,58 (m, 1 H), 1,4 (s, 9 H).
Composto 56
Benzilaldeído (0,72 ml, 7,09 mmol, 1,0 eq.) foi adicionado ao Composto 55 (preparado seguindo o procedimento de Journal of Medicinal Chemistry, 1998, 41,
3399) (1,442 g, 7,09 mmol, 1,0 eq.) em 50 ml de IPA. A mistura de reação foi aquecida até 80 °C durante 15 horas. A mistura de reação foi arrefecida até a temperatura ambiente e concentrada. O resíduo foi re-cristalizado (6 ml EtOAc, 15 ml de hexano) para dar o Composto 56 como um sólido branco (1,67 g, 81 %). LC-MS mostra 292,2 (M+H)+. Composto 57
Cianoborohidreto de sódio (1,47 g, 23,3 mmol, 3,0 eq.) foi adicionado ao Composto 56 (2,26 g, 7,77 mmol, 1,0 eq.) em 250 ml de THF, seguido de monoidrato de ácido tolueno-4-sulfónico (4,43 g, 3,0 eq.) em 20 ml de THF, gota a gota. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 15 horas. A reação foi filtrada através de uma almofada de CELITE. O filtrado foi extraído por EtOAc/ NaHC03 sat. (IX) e salmoura (IX) . A camada orgânica foi concentrada. O resíduo foi dissolvido numa mistura de THF (100 ml) e água (100 ml) . Decahidrato de tetraborato de sódio (3,63 g, 4,2 eq.) foi adicionado à solução. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. A mistura de reação foi extraída com EtOAc/ NaHC03 sat. (2X) e salmoura (IX). A camada orgânica foi concentrada e purificada por meio de cromatografia em sílica gel (40-80 % de EtOAc/hexano) para dar o Composto 57 como um sólido branco (1,44 g, 63 %) . LC-MS mostra 294,0 (M+H)+.
Composto 58 Ácido acético (15 pL, 0,27 mmol, 0,8 eq.) foi adicionado ao Composto 57 (99 mg, 0,337 mmol, 1,0 eq.) e o
Composto 54 (127 mg, 1,0 eq.) em 2,5 ml de IPA. A mistura de reação foi aquecida até 80 °C durante 22 horas. A mistura de reação foi arrefecida até a temperatura ambiente e concentrada. O resíduo foi purificado por meio de cromatograf ia em sílica gel (40 - 80 % de EtOAc/hexano) para dar o Composto 58 como um sólido branco (146 mg, 65 %). LC-MS mostra 670,7 (M+H)+.
Composto 59 TFA (3 ml) foi adicionado ao Composto 58 (146 mg, 0,218 mmol) em 10 ml de DCM a 0 °C. A mistura de reação foi agitada a 0 °C durante 90 minutos. A mistura de reação foi concentrada e extraída com EtOAc/NaHCCb sat. (2X) . A camada orgânica foi seca em Na2SCh e concentrada para dar o Composto 59 como um sólido branco (117 mg, 94 %) . LC- MS mostra 570,7 (M+H)+.
Exemplo AO DIEA (107 pL, 0,61 mmol, 3,0 eq.) foi adicionado ao Composto 59 (117 mg, 0,205 mmol, 1,0 eq.) e o Composto 70 (67 mg, 1,1 eq.) em 2,5 ml de DCM, seguido de DMAP (5 mg, 0,2 eq.) . A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 15 horas. A mistura de reação foi concentrada e extraída com EtOAc/NaHCCb sat.. A camada orgânica foi concentrada e purificada por meio de cromatografia em sílica gel (4 -8 % de MeOH/DCM), seguido de HPLC prep (coluna Phenomenex Synergi®, 0,5 % de TFA em MeCN/água) para dar o Exemplo AO como um sólido branco (14 mg, 9 %) . LC-MS mostra 726,2 (M+H)+. ΤΗ RMN (300 MHz, CDC13) : δ 8, 96 (s, 1 H) , 8,42 (s, 1 H) , 7,32 (m, 5 H) , 7,12 (d, 2 H) , 6,84 (d, 2 H) , 5,63 (d, 1 H) , 5,38 (d, 2 H) , 5,22 (s, 2 H) , 5,02 (m, 1 H) , 3,58-4,16 (m, 10 H) , 2,84 (m, 4 H) , 2,62 (m, 1 H) , 1,65 (m, 2 H) , 0,78 (s, 9 H) .
Exemplo AP 0 Exemplo AP foi preparado usando procedimentos similares a aqueles usados para preparar exemplo AO, usando tiazol-5-il- metanol como um material de partida. LC-MS do produto mostra 726,1 (M+H)+. 1H RMN (300 MHz, CDCI3): δ 8, 96 (s, 1 H), 7,94 (s, 1 H) , 7,32 (m, 5 H) , 7,12 (d, 2 H) , 6,82 (d, 2H), 5,63 (d, 1 H) , 5,38 (m, 4 H) , 5,02 (m, 1 H) , 3,58-4,16 (m, 10 H) , 2,84 (m, 4 H) , 2,62 (m, 1 H) , 1,65 (m, 2 H), 0,78 (s, 9 H).
Exemplo AO O Exemplo AQ foi preparado usando procedimentos similares a aqueles usados para preparar exemplo AO, usando (2-metiltiazol-4-il)-metanol como um material de partida. LC-MS do produto mostra 740,2 (M+H)+. ^-H RMN (300 MHz, CDCI3) : δ 7,32 (m, 5 H) , 7,20 (s, 1 H) , 7,12 (d, 2 H) , 6,82 (d, 2 H), 5,63 (d, 1 H) , 5,34 (d, 2 H) , 5,16 (s, 2 H) , 5,02 (m, 1 H) , 3,58-4,16 (m, 10 H) , 2,84 (m, 4 H) , 2,75 (s, 3 H) , 2,62 (m, 1 H) , 1,65 (m, 2 H) , 0,78 (s, 9 H) .
Preparação dos Exemplos AR, COMO, AT, e AU
Reagentes e CondiçõesiQjQQj dCM, N-feniltrifíuorometanosuífonimida; ii. HOAc, IPA, 80 °C; iii. a, 2.2-dsmetoxi propano. ácido R-(-)-10-canforsulfónico, acetona; IV. ácido borónico, PcíCIsfdppf), DME,
Na2C03 ac.; v. TFA al 1 % en MeCN/HjO (1:1); vi TFA, DCM; vii. Composto 70, MeCN, DiEA, DMAP
Composto 60 N-feniltrifluorometanossulfonimida (3,336 g, 9,337 mmol, 1,1 eq.) foi adicionada ao Composto 53 (2,37 g, 8,488 mmol, 1,0 eq.) em 100 ml de DCM, seguido de CS2CO3 (3,04 g, 1,1 eq.) . A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 12 horas. A mistura de reação foi filtrada através de CELITE e concentrada. O residuo foi purificado por meio de cromatografia em sílica gel (30-60 % de
EtOAc/hexano) para dar o Composto 60 como o sólido branco (3,2 g, 92 %) . iH RMN (300 MHz, CDC13) : δ 7,37 (d, 2 H) , 7,20 (d; 2 H) , 4,50 (m, 1 H) , 4,18 (m, 1 H) , 3,03 (m, 1 H) , 2,98 (m, 2 H), 2,85 (m, 1 H) , 2,62 (m, 1 H) , 1,39 (s, 9 H) .
Composto 61 Ácido acético (0,23 ml, 4,6 mmol, 0,8 eq.) foi adicionado ao Composto 60 (2,088 g, 5,075 mmol, 1,0 eq.) e o Composto 57 (1,489 g, 1,0 eq.) em 45 ml de IPA (álcool isopropilico) . A mistura de reação foi aquecida até 80 °C durante 22 horas. A mistura de reação foi arrefecida até a temperatura ambiente e concentrada. O resíduo foi purificado por meio de cromatografia em sílica gel (20 - 80 % de EtOAc/hexano) para dar o Composto 61 como um sólido branco (2,5 g, 70 %). LC-MS mostra 705,1 (M+H)+.
Composto 62 2,2-Dimetilpropano (0,265 ml, 2,15 mmol, 10 eq.) e ácido R-(-)-10-canforsulfónico (55 mg, 0,237 mmol) foi adicionado ao Composto 61 (152 mg, 0,215 mmol) em 5 ml de acetona. A mistura de reação foi submetida a refluxo durante 5 horas. A mistura de reação foi arrefecida até a temperatura ambiente e concentrada. O resíduo foi purificado por meio de cromatografia em sílica gel (20 - 80 % de EtOAc/hexano) para dar o Composto 62 como um sólido branco (102 mg, 77 %). LC-MS mostra 745,1 (M+H)+.
Composto 63
Num tubo de reação de micro-ondas de 0,5 - 2 ml, o Composto 62 (43 mg, 0,057 mmol, 1,0 eq.), ácido 5- pirimidina borónico (18 mg, 2,5 eq.), Pd(dppf)2Cl2 (5 mg, 0,1 eq.), 0,144 ml de solução aquosa de Na2CC>3 a 2 M (5,0 eq.) e 0,7 ml de DME foi misturado e aquecido em micro-ondas a 120 °C durante 5 minutos. A mistura de reação foi diluída com acetato de etilo e lavada com solução de NaHCCb saturado e salmoura. A camada orgânica foi concentrada e purificada por meio de cromatografia em sílica gel (40 - 80 % de EtOAc/hexano) para dar o Composto 63 como um sólido de cor castanha (11 mg, 28 %) . LC-MS mostra 675,4 (M+H)+. Composto 64 2 ml de TFA a 1 % em MeCN: água (1:1) foram adicionados ao Composto 63 (11 mg, 0,0163 mmol) e agitados à temperatura ambiente durante 4 horas. A mistura de reação foi liofilizada para dar o Composto 64 como um sólido castanho claro. LC-MS mostra 635,4 (M+H)+.
Composto 65 1 ml de TFA foi adicionado ao Composto 64 (0,0163 mmol) em 2 ml de DCM. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora. A mistura de reação foi concentrada. O resíduo foi dissolvido em acetato de etilo e lavado com solução de NaHC03 saturado. A camada orgânica foi seca em Na2SC>4 e concentrada para dar o Composto 65 que foi usado sem purificação adicional na seguinte reação. LC-MS mostra 535,3 (M+H)+.
Exemplo AR DIEA (6,8 pL, 0,039 mmol, 3,0 eq.) foi adicionado ao Composto 65 (7 mg, 0,013 mmol, 1,0 eq.) e carbonato de bis-furano (5 mg, 1,3 eq.) em 0,6 ml de MeCN, seguido de DMAP (0,3 mg, 0,2 eq.) . A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. A mistura de reação concentrada e extraída com EtOAc/sat.NaHC03. A camada orgânica foi concentrada e purificada por meio de cromatografia em sílica gel (4 -8 % de MeOH/DCM), seguido de HPLC prep (coluna Phenomenex Synergi®, 0,5 % de TFA em MeCN/água) para dar o Exemplo AR como um sólido branco (5 mg, 55 %) . LC-MS mostra 691,3 (M+H)+. ΤΗ RMN (300 MHz, CD3OD) : δ 9, 14 (s, 1 H) , 9,06 (s, 2 H) , 7,62 (d, 2 H) , 7,42 (m, 4 H) , 7,24 (m, 3 H) , 5,58 (m, 1 H) , 4,96 (m, 1 H) , 3,58-4,16 (m, 11 H) , 2,84 (m, 5 H) , 1,52 (m, 2 H) , 0,78 (s, 9 H) .
Exemplo AS O Exemplo AS foi preparado usando procedimentos similares a aqueles usados para preparar o Exemplo AR, usando ácido 3-acetamidofenilborónico na etapa iv. LC-MS do produto mostra 747, 8 (M+H) + . ΧΗ RMN (300 MHz, CD3OD) : δ 7, 83 (s, 1 H) , 7,21-7,56 (m, 12 H) , 5,58 (m, 1 H) , 4,96 (m, 1 H) , 3,58-4,16 (m, 11 H) , 2,84 (m, 5 H) , 2,07 (s, 3 H) , 1,52 (m, 2 H), 0,78 (s, 9 H).
Exemplo AT O Exemplo AT foi preparado usando procedimentos similares a aqueles usados para preparar o Exemplo AR, usando ácido 3-furanborónico na etapa iv. LC-MS do produto mostra 679,3 (M+H)+. Ή RMN (300 MHz, CD3OD): δ 7,84 (s, 1 H) , 7,57 (s, 1 H) , 7,40 (m, 4 H) , 7,24 (m, 5 H) , 6,77 (s, 1 H) , 5,58 (m, 1 H) , 4,96 (m, 1 H) , 3,58-4,16 (m, 11 H) , 2,84 (m, 5 H) , 1,52 (m, 2 H) , 0,78 (s, 9 H) .
Exemplo AU O Exemplo AU foi preparado usando procedimentos similares a aqueles usados para preparar o Exemplo AR, usando ácido 4-piridinaborónico na etapa iv. LC-MS do produto mostra 690,3 (M+H) + . Ή RMN (300 MHz, CD3OD) : δ 8,68 (d, 2 H), 7,98 (d, 2 H), 7,76 (d, 2 H), 7,42 (m, 5 H), 7,23 (m, 4 H) , 5,58 (m, 1 H) , 4,96 (m, 1 H) , 3,58-4,16 (m, 11 H) , 2,84 (m, 5 H), 1,52 (m, 2 H), 0,78 (s, 9 H) .
Preparação dos Exemplos AV, AW, e AX
Reagentes e Condições:, a. 4-(2-piridil)- benzaldeído >, isopropanol, 80 °C; b. NaBHsCN, 88 %; ii. 68,
AcOH, isopropanol, 80 °C; iií. a. TFA, CH2CS2; b. 70, diisopropiletilannina, DMAP, ACN
Composto 67 0 Composto 66 (7,18 g, 35,3 mmol), preparado de acordo com Bold et al. J. Med. Chem. 1998, 41, 3387-3401, em isopropanol (106 ml) foi tratado com 4-(2-piridil)-benzaldeído comercialmente disponível (4,96 g, 271 mmol) a 80 °C durante 18 h. A mistura de reação foi arrefecida até a t.a., concentrada, e co-evaporada com ACN (acetonitrilo) (2x) e dietil éter (2x) deu um sólido branco pérola (26,1 g). 0 sólido foi dissolvido em THF (46 ml) e a solução foi arrefecida até 0 °C. Cianoborohidreto de sódio (1,72 g, 27,4 mmol) foi adicionado, seguido de adição gota a gota de uma solução de ácido p-toluenossulfónico (5,06g, 26,6 mmol) em THF (46 ml). A mistura de reação foi aquecida até a t.a. durante a noite, em seguida diluída com H2O e extraída com EtOAc (3x) . As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com solução de NaHCCh saturado (2x), salmoura, secas (MgSCb) , e concentradas para dar uma goma amarela. 0 resíduo foi dissolvido em THF (100 ml) e H2O (100 ml) e Na2B4O7-10H2O (21,6 g) foi adicionado. A mistura de reação foi agitada durante a noite, diluída com EtOAc e lavada com solução de NaHC03 saturado. A camada aquosa foi extraída de volta com EtOAc (3x) e a camada orgânica combinada foi seca (MgS04) , concentrada e purificada (sílica gel, 50 a 100 % de EtOAc/Hex) para dar o Composto 67 como uma espuma branca (8,50 g, 22,9 mmol, 88 %). Espetro de massa: 371,1 (M+H)+. Composto 69a A uma solução do Composto 68a, comprado de Kaneka America Corporation, (1,20 g, 4,56 mmol) em isopropanol (5,0 ml) a 80 °C foi adicionado o Composto 67 (0,563 g, 1,52 mmol) em duas porções ao longo de 4 h. Após agitação durante 8 h a 80 °C, mistura de reação foi concentrada e purificada (sílica gel, 50 a 100 % de EtOAc/Hex) para dar um produto impuro. O resíduo foi dissolvido em EtOAc em refluxo e hexano foi lentamente adicionado para dar uma solução turva. Deixada a arrefecer até a t.a. e o produto foi colhido por meio de filtração para dar o Composto 69a como um sólido branco (0,340 g, 0,536 mmol, 35 %). Espetro de massa: 634,3 (M+H)+.
Composto 69b A uma solução do Composto 68b , comprado de Acme Bioscience, Inc., (0,768 g, 2,08 mmol) em isopropanol (10,0 ml) a 80 °C foi adicionado o Composto 67 (l,54g, 4,16 mmol) . Após agitação durante 5 h a 80 °C, Composto 67 adicional (0,58 g, 0,784 mmol) foi adicionado e a reação foi continuada durante 3,5 h. A mistura de reação foi arrefecida, concentrada e purificada (cromatografia em sílica gel, 50 a 100 % de EtOAc/Hex) para dar o Composto 69b como um sólido branco (0, 800 g, 1,08 mmol, 52 %) .
Espetro de massa: 740,1 (M+H)+.
Composto 68c
Uma mistura de éster terc-butílico do ácido [ 2 — (4 — benziloxi-fenil)-1-oxiraniletil]-carbámico comercialmente disponível (0,99 g, 2,68 mmol) e 20 % em peso de hidróxido de paládio (0,15 g) em EtOH/EtOAc (1:4, 25 ml) foi agitada sob uma atmosfera de hidrogénio durante 5 h. A mistura foi filtrada através de uma almofada de CELITE, concentrada e purificada por meio de cromatografia flash (sílica gel, 25 a 60 % de EtOAc/Hex) para dar um sólido branco (0, 618 g, 2,21 mmol, 83 %). O produto acima (0,500g, 1,79 mmol) foi dissolvido em acetonitrilo (18 ml) e arrefecido até 0 °C. Carbonato de césio (0,875 g, 2,685 mmol) e iodometano (0,223 g, 3,58 mmol) foi adicionado e mistura de reação foi aquecida até a t.a. durante a noite. A mistura de reação foi concentrada, dissolvida em EtOAc/BbO e lavada com salmoura. A camada orgânica foi seca (MgSCg) , concentrada para dar 68c como um sólido de cor branca (0,589 g, 2,01 mmol, 83 %).
Composto 69c A uma solução do Composto 68c (0,589 g, 1,486 mmol) em isopropanol (14,0 ml) a 80 °C foi adicionado o Composto 67 (1,10 g, 2,97 mmol) em duas porções ao longo de 2,5 h. Após agitação durante 2 h a 80 °C, Composto 67 adicional (0,30 g, 0,45 mmol) foi adicionado e a mistura de reação foi agitada durante 2 h a 80 °C, então durante a noite à t.a. Composto adicional 67 (0,30 g, 0,45 mmol) foi adicionado e mistura de reação foi agitada durante 2 h a 80 °C, e, em seguida, a mistura de reação foi concentrada e purificada (cromatografia em sílica gel, 50 a 100 % de EtOAc/Hex) para dar um produto impuro. O resíduo foi dissolvido em EtOAc em refluxo e hexano foi lentamente adicionado para dar uma solução turva. A solução foi deixada a arrefecer até a t.a. e o produto foi colhido por meio de filtração para dar o
Composto 69c como um sólido branco (0,659 g, 0,993 mmol, 67 %). Espetro de massa: 664,3 (M+H)+.
Exemplo AV A uma solução do Composto 69a (0,340 g, 0,536 mmol) em CH2CI2 (10 ml) arrefecido até 0 °C foi adicionado TFA (5,0 ml) . A mistura de reação foi agitada a 0 °C durante 2 h, então concentrada e co-evaporada com CH2CI2 (2x) e ACN (3x) . O resíduo foi liofilizado a partir de ACN/H2O para dar um sólido que foi dissolvido em ACN (5,4 ml) e arrefecido até 0 °C. DMAP (6,6 mg, 0,054 mmol) e diisopropiletilamina (0,472 ml, 2,71 mmol) foram adicionados, seguido do Composto 70 (0,160 g, 0,542 mmol). A mistura de reação foi aquecida até a t.a. durante a noite, concentrada, dissolvida em EtOAc e lavada com H2O (4x) , NaOH a 0,5 M (2x) , salmoura e seca (MgSCh) , então concentrada e purificada (cromatografia em sílica gel, 0 a 5 % de MeOH/CH2CI2) para dar um produto impuro. O resíduo foi dissolvido em EtOAc em refluxo e hexano foi lentamente adicionado para dar uma solução turva. A solução foi deixada a arrefecer até a t.a. e o produto foi colhido por meio de filtração para dar o Exemplo AV como um sólido branco (0,282 g, 0,409 mmol, 75 %) . XH RMN (300 MHz, CD3OD) : δ 8,55 (d, J = 4,2 Hz, 1 H) , 7, 95-7,80 (m, 4 H) , 7,50 (d, J = 8,1 Hz, 2 H) , 7,35-7,05 (m, 6 H) , 5,53 (d, J = 5,4 Hz, 1 H) , 4, 99-4,82 (m, 1 H) , 4,05-3, 60 (m, 10 H) , 3,55 (s, 3 H) , 2, 95-3, 70 (m, 5 H) , 1, 60-1,40 (m, 2 H) , 0,68 (s, 9 H). Espetro de massa: 690,2 (M+H)+.
Exemplo AW A uma solução do Composto 69b (0,800 g, 1,08 mmol) em CH2CI2 (20 ml) foi adicionado TFA (6,0 ml). A mistura de reação foi agitada à t.a. durante 1 h, então concentrada e co-evaporada com ACN (3x). O resíduo foi dissolvido em ACN (11,0 ml) e arrefecido até 0 °C. DMAP (0,013 mg, 0,108 mmol) e diisopropiletilamina (1,764 ml, 10,1 mmol) foram adicionados, seguido do Composto 70 (0,319 g, 0,108 mmol). A mistura de reação foi aguecida até a t.a. durante a noite, concentrada, dissolvida em EtOAc e lavada com H2O (4x) , NaOH a 0,5 M (2x) , salmoura e seca (MgSCh) , em seguida concentrada e purificada (cromatografia em sílica gel, 50 a 100 % de EtOAc/Hex) para dar o Exemplo AW como um sólido branco (0, 664 g, 0, 834 mmol, 77 %) . XH RMN (300 MHz, CDCI3) : δ 8,64 (d, J= 4,8 Hz, 1 H) , 7,90 (d, J= 8,1 Hz, 2 H), 7, 80-7, 60 (m, 2 H) , 7,50-7,2 (m, 7 H) , 7,08 (d, J= 8,4 Hz, 2 H), 6,82 (d, J = 8,7 Hz, 2 H) , 6,64 (s, 1 H) , 5,61 (d, J = 5,1 Hz, 1 H) , 5,28 (s, 1 H) , 5,25 (s, 1 H) , 5,03-4,90 (m, 3 H) , 4,80 (s, 1 H) , 4,15-3,55 (m, 12 H) , 2,95-3,60 (m, 5 H) , 1, 60-1,40 (m, 2 H) , 0,69 (s, 9 H) . Espetro de massa: 796,2 (M+H)+.
Exemplo AX
A uma solução do Composto 69c (0,250 g, 0,394 mmol) em CH2CI2 (2,0 ml) foi adicionado TFA (1,0 ml). A mistura de reação foi agitada à t.a. durante 1 h, em seguida concentrada e co-evaporada com ACN (3x) . O resíduo foi dissolvido em ACN (5,4 ml) e arrefecido até 0 °C. DMAP (0,005 g, 0,039 mmol) e diisopropiletilamina (0,34 ml, 1,97 mmol) foram adicionados, seguido do Composto 70 (0, 116 g, 0,394 mmol) . A mistura de reação foi aquecida até a t.a. durante a noite, concentrada, dissolvida em EtOAc e lavada com H2O (3x) , NaOH a 0,5 M (3x) , salmoura e seca (MgSCh), em seguida concentrada e purificada (cromatografia em sílica gel, 50 a 100 % de EtOAc/Hex) para dar um produto impuro. O resíduo foi dissolvido em EtOAc em refluxo e hexano foi lentamente adicionado para dar uma solução turva. A solução foi deixada a arrefecer até a t.a. e o produto foi colhido por meio de filtração para dar o Exemplo AX como um sólido branco (0,154 g, 0,214 mmol, 54 %) . 1H RMN (300 MHz, CD30D) : δ 8,55 (d, J = 4,8 Hz, 1 H) , 7, 95-7,80 (m, 4 H) , 7,49 (d, J = 8,4 Hz, 2 H) , 7,35-7,25 (m, 1 H), 7,11 (d, J= 8,7 Hz, 2 H) , 6,75 (d, J= 8,4 Hz, 2 Η), 5,53 (d, J = 5,4 Hz, 1 Η), 4, 99-4,82 (m, 1 Η), 4,05- 3,60 (m, 12 Η), 3,55 (s, 3 Η), 2, 90-3, 65 (m, 5 Η), 1,60 — 1,40 (m, 2 Η), 0,68 (s, 9 Η). Espetro de massa: 796,2 (M+H)+.
Preparação dos Exemplos AY e AZ
Reagentes e Condições: i. Hs, Pd/C, AcOH, EtOH/EtOAc; 36 %; ii, 72, CS2CO3, ACN, 73 %; iii. 73, azodicarboxílato de dí-terc-butilo, PPhs, CH2CI2, 52 %
Composto 71
Uma mistura do Exemplo AW (0,664 g, 0,884 mmol) e paládio a 10 %/carbono (0,50 g) em EtOAc (15 ml) e EtOH (15 ml) foi agitada sob uma atmosfera de hidrogénio durante 24 h. A mistura de reação filtrada através de uma almofada de CELITE e concentrada. O resíduo foi purificado (cromatografia em sílica gel, 80 a 100 % de EtOAc/Hex) para dar o Composto 71 como um sólido branco (0,2146 g, 0,304 mmol, 36 %) . ΤΗ RMN (300 MHz, CD3OD) : δ 8,55 (d, J = 5,1
Hz, 1 Η), 7, 90-7,75 (m, 5 Η), 7,49 (d, J = 8,4 Hz, 2 H) , 7,35-7,30 (m, 1 H) , 7,00 (d, J= 8,1 Hz, 2 H) , 6,61 (d, J = 8,1 Hz, 2 H) , 5,32 (d, J = 5,1 Hz, 1 H) , 4, 97-4, 87 (m, 1 H) , 4,15-3,55 (m, 12 H) , 2, 95-2, 60 (m, 5 H) , 1, 60-1, 40 (m, 2 H), 0,68 (s, 9 H). Espetro de massa: 706,2 (M+H)+.
Exemplo AY A uma solução do Composto 71 (10 mg, 0,0142 mmol) em
ACN (1,0 ml) a 0 °C (0,5 ml) foi adicionado carbonato de césio (9,3 mg, 0,0283 mmol), seguido de uma solução do Composto 72 (4,3 mg, 0,0142 mmol) em THF (0,5 ml) . A mistura de reação foi aquecida até a t.a. durante a noite, concentrada e purificada por meio de HPLC de fase reversa (coluna Phenomenex Synergi®, 5 a 100 % de ACN/H2O + 0,1 % de TFA) para dar o Exemplo AY como um sólido branco após liofilização (10 mg, 0,0103 mmol, 73 %) . %) . XH RMN (300 MHz, CD3OD) : δ 8,73 (d, J = 4,8 Hz, 1 H), 8,55-8,425 (m, 1 H) , 8,24 (d, J = 8,1 Hz, 1 H) , 7, 90-7,850 (m, 1 H) , 7,85
(d, J= 8,4 Hz, 2 H) , 7,68 (d, J= 8,4 Hz, 2 H) , 7,15 (d, J = 8,7 Hz, 2 H) , 6,86 (d, J= 8,4 Hz, 2 H) , 5,53 (d, J= 5,1 Hz, 1 H), 4, 97-4, 87 (m, 1 H) , 4,30 (d, J= 10,2 Hz, 2 H) , 4,20-3, 60 (m, 14 H) , 3,54 (s, 3 H) , 2, 95-2, 60 (m, 5 H) , 1, 60-1,40 (m, 2 H) , 1,31 (t, J= 7,2 Hz, 6 H) , 0,68 (s, 9 H). Espetro de massa: 856,2 (M+H)+.
Exemplo AZ A uma solução do Composto 71 (22 mg, 0,031 mmol),
Composto 73 (8,0 mg, 0,0623 mmol) e trifenilfosfina (16,0 mg, 0,0623 mmol) em CI2CI2 (0,5 ml) foi adicionado azodicarboxilato de di-terc-butilo (14 mg, 0,0623 mmol). A mistura de reação foi agitada à t.a. durante 2 h, então carregada diretamente numa coluna e purificada (cromatografia em sílica gel, 60 a 100 % de EtOAc/Hex) para dar um produto impuro. O produto impuro foi purificado de novo por meio de HPLC de fase reversa (coluna Phenomenex Synergi®, 5 a 100 % de ACN/H20 + 0,1 % de TFA) e o produto liofilizado para dar o Exemplo AZ como um pó branco (15,0 mg, 0,0161 mmol, 52 %) . ϊΗ RMN (300 MHz, CD3OD): δ 8,76 (d, J= 5,7 Hz, 1 H) , 8, 60-8,50 (m, 1 H) , 8,30 (d, J= 8,1 Hz, 1 H), 7, 98-7, 90 (m, 1 H) , 7,85 (d, J= 8,4 Hz, 2 H) , 7,70 (d, J= 8,1 Hz, 2 H), 7,38 (s, 1 H), 7,14 (d, J= 8,4 Hz, 2 H) , 6,85 (d, J = 8,4 Hz, 2 H) , 5,53 (d, J = 5,1 Hz, 1 H) , 5,04 (s, 2 H) , 4, 98-4, 80 (m, 1 H) , 4,17-3,60 (m, 9 H) , 3,53 (s, 3 H), 2, 95-2, 68 (m, 5 H) , 2,68 (s, 3 H) , 1, 60-1, 40 (m,
2 H), 0,70 (s, 9 H). Espetro de massa: 817,2 (M+H)+. Preparação dos Exemplos BA e BB
Reagentes e Condições: i. 70, diisopropiletilamina, DMAP, ACN, 19 %; ii. ácido carboxílico, TPTU, NMM, DMF
Exemplo BA
Uma solução de N-(metoxicarbonil)-L-hidroxivalina (39 mg, 0,204 mmol) e TPTU (60,6 mg, 0,204 mmol) em DMF (0,3 ml) foi agitada durante 10 min à t.a. O Composto 74 (43 mg, 0,0927 mmol) e N-metilmorfolina (0,051 ml, 0,464 mmol) em DMF (0,3 ml) foi adicionado à mistura de reação e agitado durante 48 h à t.a. A mistura de reação foi diluída com H2O e extraída com CH2CI2 (3x) . A camada orgânica foi seca (MgSCt) , concentrada e purificada (cromatografia em sílica gel 0 a 10 % de MeOH/CH2Cl2) para dar um produto impuro, e purificada de novo por meio de HPLC de fase reversa (coluna Phenomenex Synergi®, 5 a 100 % de ACN/H20 + 0,1 % de TFA) e liofilizada para dar o Exemplo BA como um pó branco (17,0 mg, 0,024 mmol, 26 %) . XH RMN (300 MHz, CD3OD): δ 8,74 (d, J = 5,7 Hz, 1 H) , 8, 60-8,50 (m, 1 H) , 8,25 (d, J = 8,1 Hz, 1 H) , 7, 90-7,85 (m, 1 H) , 7,83 (d, J = 8,1 Hz, 2 H) , 7,65 (d, J = 8,4 Hz, 2 H), 7,30-7,05 (m, 5 H), 4,25-3,65 (m, 10 H) , 3,60 (s, 3 H) , 3,55 (s, 3 H) , 2, 95-2, 68 (m, 4 H) , 1,06 (s, 3 H) , 1,03 (s, 3 H) , 0,95 (s, 3 H) , 0,90 (s, 3 H) .
Espetro de massa: 709,2 (M+H)+.
Exemplo BB
Uma solução de ácido N-2-metoxicarbonilamino-tetrahidro-furan-2-carboxílico (35 mg, 0,282 mmol) e TPTU (84 mg, 0,282 mmol) em DMF (0,3 ml) foi agitada durante 10 min à t.a. O Composto 74 (60 mg, 0,128 mmol) e N-metil-morfolina (0,070 ml, 0,64 mmol) em DMF (0,4 ml) foi adicionado à mistura de reação e agitado durante 20 h à t.a. A mistura de reação foi diluída com H2O e extraída com CH2CI2 (3x) . A camada orgânica foi seca (MgSCg) , concentrada e purificada (cromatografia em sílica gel de 0 a 10 % de MeOH/CH2Cl2) para dar um produto impuro, e purificada de novo por meio de HPLC de fase reversa (coluna Phenomenex Synergi®, 5 a 100 % de ACN/H20 + 0,1 % de TFA) e liofilizada para dar o Exemplo BB como um pó branco (11,0 mg, 0,013 mmol, 11 %) . XH RMN (300 MHz, CD3OD) : δ 8,74 (d, J= 5,7 Hz, 1 H) , 8, 60-8,45 (m, 1 H) , 8,26 (d, J= 7,8 Hz, 1 H) , 7, 92-7, 80 (m, 3 H) , 7,65 (d, J= 6,6 Hz, 2 H) , 7,40- 7,05 (m, 5 H) , 4,25-3, 45 (m, 18 H) , 2,95-2, 68 (m, 5 H) , 2,10-1,70 (4 H). Espetro de massa: 709,2 (M+H)+.
Preparação do Exemplo BC
Reagentes e Condições: i. N feniltriffuorometanosulfonimida, CS2CO3. CH2CI2; ii. 77, AcOH, isopropanol, 80
°C; íii. ácido canforsulfónico, dimetoxipropano, acetona; ív. ácido 3-piridinaborónico, PdCydppf), Na2C03, DME: v.a. TFA, CH2CI2; b. 70, diisopropiletilamina, DMAP, ACN
Composto 80 A um frasco de processo de Smith foram adicionados o
Composto 62 (16 mg, 0,0215 mmol), ácido 3-piridinaborónico (4,0 mg, 0,0322 mmol), PdCl2 (dppf) (1 mg), Na2CC>3 a 2 M (0,2 ml) e DME (0,6 ml). O frasco foi vedado e aquecido a 120 °C durante 25 min via irradiação de micro-ondas. A mistura de reação foi diluída com EtOAc e lavada com solução de NaHCCh saturado, salmoura e seca (MgSCb), concentrada e purificada por meio de HPLC de fase reversa (coluna Phenomenex
Synergi®, 5 a 100 % de ACN/H2O + 0,1 % de TFA) e concentrada para dar o Composto 80 como um óleo castanho (10,7 mg, 0,0136 mmol, 63 %) . Espetro de massa: 674,2 (M+H)+.
Exemplo BC A uma solução do Composto 80 (10,7 mg, 0,0136 mmol) em CH2CI2 (0,6 ml) à t.a. foi adicionado TFA (0,3 ml) e a mistura de reação foi agitada durante 2,5 h. A mistura de reação foi diluída com ACN e concentrada a 30 °C e co- evaporada com ACN (2x) . O resíduo foi dissolvido em ACN (0,5 ml) e arrefecido até 0 °C. Diisopropiletilamina (11 pL, 0,065 mmol) e DMAP (0,2 mg, 0,0013 mmol) foram adicionados, seguido do Composto 70 (3,8 mg, 0,013 mmol). A mistura de reação foi aquecida até a t.a. durante a noite e, em seguida, diisopropiletilamina (11 pL, 0,065 mmol) foi adicionada e agitada durante 3 h. A mistura de reação foi diluída com EtOAc e lavada com H2O (3x), NaOH a 1 M (2x) , salmoura e seca (MgSCb) , concentrada e purificada por meio de HPLC de fase reversa (coluna Phenomenex Synergi®, 5 a 100 % de ACN/H2O + 0,1 % de TFA) para dar o Exemplo BC como um pó branco após liofilização (8,0 mg, 0,010 mmol, 77 %). !H RMN (300 MHz, CD3OD) : δ 9,07 (s, 1 H) , 8,78-8, 70 (m, 2 H) , 8,02 (dd, J = 8,1,6,6 Hz, 1H) , 7,67 (d, J = 8,4 Hz, 2 H) , 7,45 (d, J = 8,4 Hz, 2 H) , 7,36 (d, J = 6,6 Hz, 2 H) , 7,27-7,15 (m, 3 H) , 5,52 (d, J = 5,1 Hz, 1 H) , 4,97-4,80 (m, 1 H) , 4,01-3,55 (m, 12 H) , 2, 97-2,78 (m, 5 H) , 1,58- 1,40 (m, 2 H) , 0,67 (s, 9 H) . Espetro de massa: 690,2 (M+H)+.
Preparação do Exemplo BD
Reagentes e Condições: i. 4,4,5,5-te»rametil-1,3,2-tiioxaborolano, PdCh{dppf), trietilamina, dioxano; ii. 2-bromopiridina, K3PO4, PdCh(dppf), dioxano; iii. a. TFA, CH2CÍ2; b, 70, diisopropiletilamina, DMAP, ACN
Composto 81 A um balão seco em forno carregado com o Composto 79 (73,7 mg, 0,0990 mmol) foi destilado em dioxano (1,0 ml). A esta solução foi adicionado PdCl2 (dppf) (4,9 mg, 0,00594 mmol), trietilamina (83 pL, 0,594 mmol) e 4,4,5,5-dioxaborolano (86 pL, 0,594 mmol). A mistura de reação foi aquecida a 100 °C durante 4,5 h sob árgon, arrefecida até a t.a., diluída com EtOAc e lavada com H2O, salmoura e seca (MgSCP), concentrada, purificada (cromatografia em sílica gel, 10 a 40 % de EtOAc/Hex) e purificada de novo (cromatografia em sílica gel, 10 a 40 % de EtOAc/Hex) para dar o Composto 81 como uma espuma branca (48,1 mg, 0,067 mmol, 67 %). Espetro de massa: 723,3 (M+H)+.
Composto 82
Um balão seco em forno foi carregado com o Composto 81 (19 mg, 0,026 mmol), 2-bromopiridina (4 pL, 0,0384 mmol), fosfato de potássio (28 mg, 0,130 mmol), H2O (40 pL) e dioxano (0,6 ml). PdCl2(dppf) (1 mg) foi adicionado e a mistura de reação foi agitada a 65 °C 8 h. A mistura de reação foi diluída com EtOAc e lavada com H2O, salmoura e seca (MgS04) , concentrada e purificada por meio de HPLC de fase reversa (coluna Phenomenex Synergi®, 5 a 100 % de ACN/H2O + 0,1 % de TFA) para dar o Composto 82 como um pó branco após liofilização (12,3 mg, 0,0156 mmol, 60 %). Espetro de massa: 674,3 (M+H)+.
Exemplo BD A uma solução do Composto 82 (12,3 mg, 0,0156 mmol) em CH2CI2 (0,6 ml) à t.a. foi adicionado TFA (0,3 ml) e a mistura de reação foi agitada durante 4 h. A mistura de reação foi diluída com ACN e concentrada a 30 °C e co-evaporada com ACN (2x) . O resíduo foi dissolvido em ACN (0,5 ml) e arrefecido até 0 °C. Diisopropiletilamina (14 pL, 0,078 mmol) e DMAP (0,2 mg, 0,00156 mmol) foram adicionados, seguido do Composto 70 (4,6 mg, 0,0156 mmol). A mistura de reação foi aquecida até a t.a. ao longo de 8 h. A mistura de reação foi concentrada e purificada por meio de HPLC de fase reversa (coluna Phenomenex Synergi®, 5 a 100 % de ACN/H2O + 0,1 % de TFA) para dar o Exemplo BD como um pó branco após liofilização (3,3 mg, 0,0041 mmol, 26 %) . ΤΗ RMN (300 MHz, CD3OD) : δ 8,71 (d, J = 5,4 Hz, 1 H), 8,50-8,40 (m, 1 H) , 8,21 (d, J= 8,1 Hz, 1 H) , 7,82 (d, J = 8,4 Hz, 2 H) , 7,51 (d, J = 8,4 Hz, 2 H) , 7,37 (d, J = 6,6 Hz, 2 H) , 7,27-7,15 (m, 3 H) , 5,52 (d, J = 5,4 Hz, 1 H) , 4, 95-4,75 (m, 1 H) , 4,01-3,55 (m, 12 H) , 2, 97-2,78 (m, 5 H), 1,58-1,40 (m, 2 H), 0,67 (s, 9 H). Espetro de massa: 690,3 (M+H)+.
Preparação dos Exemplos BE e BF
Reagentes e Condições: i. ácido carboxíiico, TPTU, NMM, DMF; ií. 84, diisopropiletilamina, DMAP, ACN
Exemplo BE
Uma solução de ácido 3-hidroxi-2-metoxicarbonilamino-3-metil-butírico (20 mg, 0,106 mmol) e TPTU (32 mg, 0,106 mmol) em DMF (0,2 ml) foi agitada durante 20 min à t.a.. O
Composto 48 (30 mg, 0,048 mmol) e N-metilmorfolina (16 pL, 0,144 mmol) em DMF (0,2 ml) foi adicionado à mistura de reação e agitado durante 1 h à t.a.. A mistura de reação foi diluída com H20 e extraída com CH2CI2 e seca (MgSCd) , concentrada e purificada (2x) por meio de HPLC de fase reversa (coluna Phenomenex Synergi®, 5 a 100 % de ACN/H20 + 0,1 % de TFA) e liofilizado para dar o Exemplo BE como um pó branco (6 mg, 0, 0066 mmol, 14 %) . ΤΗ RMN (300 MHz, CD3OD) : δ 8,74 (d, J = 6,0 Hz, 1 H) , 8,60-8,5 (m, 1 H) , 8,28 (d, J = 8,4 Hz, 1 H) 7, 93-7, 60 (m, 5 H) , 7,40-7,20 (m, 5 H) , 7,11 (d, J = 8,4 Hz, 2 H) , 6,83 (d, J = 8,7 Hz, 2 H) , 5,52 (d, J = 5,1 Hz, 1 H) , 5,00 (s, 2 H) , 4, 95-4,89 (m, 1 H), 3, 94-3, 50 (m, 12 H) , 2,86-2, 65 (m, 5 H) , 1,52-1,31 (m, 2 H) , 0,95 (d, J = 14,4 Hz, 6 H) . Espetro de massa: 798,2 (M+H)+.
Exemplo BF 0 Composto 48 (31 mg, 0,0496 mmol) foi dissolvido em ACN (0,5 ml) e arrefecido até 0 °C. Diisopropiletilamina (26 pL, 0,149 mmol) e D MAP (0,6 mg, 0, 00496 mmol) foram adicionados, seguido do Composto 84 (16 mg, 0,0546 mmol), preparado de acordo com o documento WO 9414436 AI. A mistura de reação foi aquecida até a t.a. ao longo de 48 h. A mistura de reação foi diluída com EtOAc e lavada com H20 (3x) , NaOH a 0,5 M (3x) , salmoura e seca, concentrada e purificada (cromatograf ia em sílica gel, 50 a 100 % de EtOAc/Hex), então por meio de HPLC de fase reversa (5 a 100 % de ACN/H2O + 0,1 % de TFA) para dar o Exemplo BF como um pó branco após liofilização (5,5 mg, 0,0064 mmol, 13 %). 1R RMN (300 MHz, CD3OD): δ 8,75 (d, J= 4,2 Hz, 1 H), 8,57-8,5 (m, 1 H) , 8,27 (d, J = 8,1 Hz, 1 H) , 8,05 (s, 1 H) , 7,93- 7,89 (m, 1 H) , 7,82 (d, J= 7,8 Hz, 2 H) , 7,63 (d, J = 8,1
Hz, 2H) , 7,40-7, 06 (m, 7 H) , 6,96 (s, 1 H) , 6,83 (d, J = 8,4 Hz, 2 H), 5,52 (d, J = 5,4 Hz, 1 H) , 5, 00-4, 87 (m, 5 H), 4,10-3,55 (m, 7 H) , 2, 86-2, 65 (m, 5 H) , 1,52-1,31 (m, 2 H). Espetro de massa: 750,1 (M+H)+.
Preparação do Exemplo BG Esquema 26
Reagentes e Condições: j. a. 4-trifluorometoxi-benzaídeído , isopropanol, 80 °C; b. NaBH-jCN, 88 %; ii. 68c AcOH, isopropanol, 80 “C; iii. a. TFA, CH2CI2; b. 70, diisopropiletilamina, D MAP, ACN
Composto 86 0 Composto 3 (215 mg, 1,06 mmol) , preparado de acordo com Bold et al. L Med. Chem. 1998, 41, 3387-3401, em isopropanol (10 ml) foi tratado com 4-trifluorometoxi-benzaldeido comercialmente disponível (151 pL, 1,06 mmol) a 80 °C durante 18 h. A mistura de reação foi arrefecida até a t.a. e purificado (cromatografia em sílica gel, 0 a 100 % de EtOAc/Hex) para dar um sólido branco (252 mg, 0,671 mmol, 63 %) . 0 sólido foi dissolvido em THF (7 ml) .
Cianoborohidreto de sódio (44,3 mg, 0,705 mmol) foi adicionado, seguido de adição de ácido p-toluenossulfónico (141 mg, 0,739 mmol). A mistura de reação foi agitada durante 5 horas, então dividida em partições com solução de NaHC03 saturado e EtOAc, extraída com EtOAc (2x). A camada orgânica combinada foi seca em Na2SC>4 e concentrada. 0 resíduo foi dissolvido em THF (2 ml) e MeOH (4 ml) e
Na2B4C>7 · 1OH2O (4 eq) em H2O foi adicionado. A mistura de reação foi agitada durante a noite, então 10 gotas de AcOH foram adicionadas. A mistura de reação foi agitada durante uma hora, então dividida em partições com solução de NaHCCb saturado e EtOAc, extraída com EtOAc (2x) , seca em Na2SC>4 e purificada (cromatograf ia em sílica gel, 0 a 100 % de
EtOAc/Hex) para dar o Composto 86 como um óleo espesso limpo (173 mg, 0,460 mmol, 68 %) . Espetro de massa: 378,0 (M+H)+.
Composto 88 A uma solução do Composto 68c (53,9 mg, 0,184 mmol) em isopropanol (3,0 ml) foram adicionados o Composto 86 (69,4 mg, 0,184 mmol) e AcOH (ácido acético) (8,8 mg). Após agitação durante 3 dias a 80 °C, a mistura de reação foi concentrada e purificada (cromatografia em sílica gel, 0 a 100 % de EtOAc/Hex e 0 a 8 % de MeOH/CH2Cl2) para dar o
Composto 88 como um sólido branco (91,9 mg, 0,137 mmol, 75 %). Espetro de massa: 671,1 (M+H)+.
Exemplo BG A uma solução do Composto 88 (91,9 mg, 0,137 mmol) em CH2CI2 (1,6 ml) arrefecido até 0 °C foi adicionado TFA (0,4 ml). A mistura de reação foi agitada a 0 °C durante 15 min. e à t.a. durante 1,5 horas. A mistura foi co-evaporada com tolueno (4 ml) e colocada sob alto vácuo durante 2 horas. O resíduo foi dissolvido em ACN (2 ml). DMAP (3,4 mg, 0,027 mmol) e diisopropiletilamina (0,072 ml, 0,412 mmol) foram adicionados, seguido do Composto 70 (40,6 mg, 0,137 mmol). A mistura de reação foi agitada durante 2 horas então purificado (TLC prep, 4 % de MeOH/CH2Cl2) para dar um
Exemplo BG como um sólido branco (48,3 mg, 0,066 mmol, 48 %) . !H RMN (300 MHz, CDCI3) : δ 7,41-7,39 (d), 7,27-7,11 (m) , 6, 80-6, 77 (d), 6,69 (s) , 5, 66-5, 65 (d), 5, 37-5,30 (m) , 5, 05-5, 00 (m) , 4,81 (s) , 4,13-4,07 (m) , 3, 97-3, 94 (m) , 3, 85-3, 47 (m) , 2, 93-2,86 (m) , 2, 69-2, 67 (d), 1,96 (s) , 1, 66-1, 60 (m) , 1,28-1,23 (m) , 0,88-0,85 (m) , 0,65 (s) .
Espetro de massa: 727,2 (M+H)+.
Preparação do Exemplo BH Esquema 27
Reagentes e Condições: i. 86, AeOH, isopropanol, 80 °C; ii. ácido canforsuifónico, dimetoxipropano, acetona; iíi. ácido 3-piridinaborónico, PdCh(dppf), Na2C03, DME; iv. a. TFA, CH2CI2; b. 70, diisopropiletilamina, DMAP, ACN
Composto 91 A uma solução do Composto 60 (113 mg, 0,276 mmol) em isopropanol (4,0 ml) foram adicionados o Composto 86 (104 mg, 0,276 mmol) e AcOH (13,2 mg). Após agitação durante 3 dias a 80 °C, a mistura de reação foi concentrada e purificada (cromatograf ia em sílica gel, 0 a 100 % de EtOAc/Hex e 0 a 8 % de MeOH/CH2Cl2) para dar o Composto 91 como um sólido branco (135 mg, 0,172 mmol, 62 %) . Espetro de massa: 789,0 (M+H)+.
Composto 92
Uma solução do Composto 91 (135 mg, 0,172 mmol), ácido canforsuifónico (43,9 mg, 0,189 mmol) e dimetoxipropano (0,211 ml, 1,72 mmol) em acetona (3 ml) foi aquecida ao refluxo durante 4,5 h. A mistura de reação foi arrefecida até a t.a., dividida em partições com solução de NaHCCh saturado e EtOAc, extraída com EtOAc (lx), lavada com H2O (lx) e seca em Na2S04, concentrada e purificada (cromatografia em sílica gel, 0 a 100 % de EtOAc/Hex) para dar o Composto 92 como um filme limpo (72,0 mg, 0,087 mmol, 51 %) . Espetro de massa: 829,1 (M+H)+.
Composto 93 A um frasco de processo de Smith foram adicionados o Composto 92 (24 mg, 0,029 mmol), ácido 3-piridinaborónico (8,9 mg, 0,072 mmol), PdCl2 (dppf) (3,3 mg, 0, 003 mmol), Na2C03 a 2 M (0,072 ml) e DME (0,6 ml). O frasco foi vedado e aquecido a 120 °C durante 25 min via irradiação de micro-ondas. A mistura de reação foi diluída com EtOAc e lavada com solução de NaHC03 saturado, H2O e seca em Na2S04, concentrada e purificada (cromatografia em sílica gel, 20 a 90 % de EtOAc/Hex) para dar o Composto 93 como um sólido branco (14,2 mg, 0,019 mmol, 65 %). Espetro de massa: 758,2 (M+H)+.
Exemplo BH A uma solução do Composto 93 (14,2 mg, 0,019 mmol) em CH2CI2 (1,5 ml) à t.a. foi adicionado TFA (1,5 ml) e a mistura de reação foi agitada durante a noite então concentrada, dividida em partições com solução de NaHCCb saturado e EtOAc, extraída com EtOAc (lx), seca em Na2S04 e concentrada. O resíduo foi dissolvido em ACN (1 ml). Diisopropiletilamina (6,5 pL, 0,037 mmol) e DMAP (0,5 mg, 0,004 mmol) foram adicionados, seguido do Composto 70 (5,5 mg, 0,019 mmol). A mistura de reação foi agitada durante 4 h. então concentrada, purificada com TLC prep (sílica gel placa, 6 % de MeOH/CH2Cl2) para dar o Exemplo BH como um sólido branco (4,5 mg, 0,006 mmol, 31 %). ΧΗ RMN (300 MHz, CDCI3) : δ 8, 83-8,82 (d), 8,59-8,57 (m) , 7, 87-7,84 (d), 7,52-7,49 (d), 7,44-7,33 (m) , 7,19-7,16 (d), 6,36 (s) , 5, 66-5, 64 (d), 5,33-5,31 (d), 5,25-5,21 (d), 5, 07-5,00 (m) , 4,84 (s), 4,17-4,12 (d), 4,01-3,96 (m), 3,89-3,52 (m), 3, 02-2,89 (m) , 2,71-2,67 (d), 1, 63-1, 59 (m) ' 1,32 1,26 (m) ' 0,66 (s). Espetro de massa: 774,2 (M+H) '
Preparação dos Exemplos BI, BJ, Bk,
Reagentes e Condições:i-PrOH, 60 °C; ii. TFA, DCM; iii. DMAP, DIPEA, bistetrahidrofurano-3-il carbonato de (R)-4-nitrofenito para BI, tetrahidÍOfurano-3-il carbonato de (R)-4-nitrofenilo para BJ CH3CIM; iv. EDO, HOBt, NMM, DMF
Composto 96 0 epóxido 94, comprado de Kaneka Corporation, (527 mg, 2 mmol) e o Composto 5 (741 mg, 2 mmol) foram dissolvidos em isopropanol e aquecidos até 80 °C. A mistura de reação foi deixada a agitar durante 18 h antes de ter sido arrefecida até a t.a., concentrada, e purificada em cromatografia em sílica gel (acetato de etilo/hexano, 30-50 %) para dar o Composto 96 (500 mg, 50 %) Espetro de massa: (M+Na)+ = 656
Exemplo BI TFA (0,4 ml) foi adicionado a 96 (100 mg, 0,16 mmol) em DCM (1,6 ml) e a mistura foi deixada a agitar à t.a. durante 1,5 h. A solução foi concentrada e co-evaporada três vezes com DCM e três vezes com acetonitrilo para obter o Composto 97. O Composto 97 (28 mg, 0,052 mmol) foi dissolvido em acetonitrilo anidro (0,5 ml) e arrefecido até 0 °C. DMAP (1 mg, 0, 008 mmol) foi adicionado seguido de DIEA (35 pL, 0,2 mmol) até que a solução alcançasse o pH 9. 0 Composto 70 (16 mg, 0,052 mmol) foi adicionado. A mistura de reação foi agitada durante 2 h a 0 °C e durante 16 h à t.a. A mistura de reação foi concentrada e purificada por meio de HPLC de fase reversa (coluna Phenomenex Synergi®, 25-100 % de acetonitrilo/IHbO + 0,1 % de TFA) para dar o
Exemplo BI (20 mg, 56 %) . ΤΗ RMN (300 MHz, CDC13) : δ 9,04 (d, J = 5,7 Hz, 1 H), 8,36 (m, 1H), 8,03 (d, J = 8,4 Hz, 1 H) , 7,86 (d, J = 8,1 Hz, 2 H) , 7,79 (m, 1H) , 7,61 (d, J = 8,1 Hz, 2H) , 7,21-7,18 (m, 5 H) , 5,66 (d, J = 5,1 Hz, 1H) , 5,33 (m, 2 H) , 5,00 (m, 1 H) , 4,09 (m, 2H) , 4, 05-3, 63 (m, 10 H) , 3,58 (s, 3H), 30,08-2, 98 (m, 5 H ), 1,72-1,58 (m, 2H), 0,83(s, 9H). Espetro de massa: (M+Na)+ = 713
Exemplo BJ O Composto 97 (53 mg, 0,1 mmol) foi dissolvido em acetonitrilo anidro (1 ml) e arrefecido até 0 °C. DMAP (1 mg, 0,008 mmol) foi adicionado seguido de DIEA (70 pL, 0,4 mmol) até que a solução alcançasse o pH 9.
Tetrahidrofurano-3-il carbonato de (R)-4-nitrofenilo (25 mg, 0,1 mmol) foi adicionado. A mistura de reação foi agitada durante 2 h a 0 °C e durante 16 h à t.a. A mistura de reação foi concentrada e purificada por meio de HPLC de fase reversa (coluna Phenomenex Synergi®, 25-100 % de acetonitrilo/H20 + 0,1 % de TFA) para dar o Exemplo BJ (38 mg, 60 %) . ΤΗ RMN (300 MHz, CDCI3) : δ 9,05 (d, J = 5,7 Hz, 1 H) , 8,31 (m, 1H), 7,98 (d, J = 8,1 Hz, 1 H) , 7,85 (d, J = 7,8 Hz, 2H), 7,74 (m, 1H), 7,59 (d, J = 7,8 Hz, 2H), 7,27- 7,20 (m, 5 Η), 5,12-4,88 (m, 4 Η), 4,09-3,61 (m, 10 Η), 3,54 (s, 3H) , 2, 95-2,88 (m, 4H) , 2,18-1,92 (m, 2 H ), 0,84 (s, 9H). Espetro de massa: (M+Na)+ = 671
Exemplo BK
Uma solução de ácido 3-hidroxi-o-toluico, comprado de TCI, (15 mg, 0,1 mmol), EDC (21 mg, 0,11 mmol), HOBT (15 mg, 0,11 mmol), e 4-met ilmorf olina (13 pL, 0,12 mmol) em DMF (0,5 ml) foi deixada a agitar durante 45 min. 0
Composto 97 (53 mg, 0,1 mmol) foi dissolvido em DMF (0,1 ml) e adicionado à mistura de reação. A mistura resultante foi deixada a agitar à t.a. durante 24 h. A solução de reação foi diluida com acetato de etilo, lavada com NaHCCt saturado, e salmoura. As camadas aquosas combinadas foram extraídas com acetato de etilo e as camadas orgânicas combinadas foram secas em Na2SC>4 e concentradas. O resíduo resultante foi purificado por meio de HPLC de fase reversa (coluna Phenomenex Synergi®, 25-100 % de acetonitrilo/H20 + 0,1 % de TFA) e produziu o Exemplo BK como um sólido branco (40 mg, 61 %). Ή RMN (300 MHz, CD3OD): δ 8,77 (d, J = 5,4
Hz, 1 H), 8,49 (m, 1H), 8,24 (d, J = 8,1 Hz, 1H) , 7,89-7,82 (m, 3H), 7,65 (d, J = 8,1 Hz, 2H) , 7,29-7,19 (m, 5 H) , 6,94 (m, 1H), 6,75 (d, J = 7,8 Hz, 1H) , 6,53 (d, J = 7,8 Hz, 1H) , 4,37 (m, 1H) , 4,14 (s, 2 H) , 3,84 (m, 1H) , 3,71 (m, 1H), 3,31 (s, 3H), 3,22-2,71 (m, 5H) , 1,89 (s, 3 H) , 0,83 (s, 9 H). Espetro de massa: (M+Na)+ = 691
Exemplo BL O Exemplo BL foi preparado a partir do Composto 97 de um modo similar a esse usado para preparar o Exemplo BK, exceto que ácido quináldico, comprado de Aldrich, foi usado ao invés de ácido 3-hidroxi-o-toluico para proporcionar o Exemplo BL como um pó branco (41 mg, 60 %) . XH RMN (300 MHz, CDCls) : δ 9,04 (d, J = 5,7 Hz, 1 H) , 8,46 (d, J = 9,3
Hz, 1H), 8,30-8,19 (m, 4H), 8,06-7,52 (m, 10H), 7,36-7,19 (m, 5H) , 5,39 (m, 1H) 4,46 (m, 1 H) , 4,12-3, 97 (m, 2H) , 3, 78-3, 68 (m, 2H) , 3,49 (s, 3H), 3,30-2, 99 (m, 5 H), 0,82 (s, 9 Η). Espetro de massa: (M+Na)+ = 712
Preparação dos Exemplos BM e BN
Reagentes e Condições:I. TEA, DCM, Bis(4-nítrogenil)oarbonato; ii. a. TFA. DCM; b, DMAP, D1PEA, 99 para BM;e 101 para BN
Composto 99 TEA (63 pL, 0,45 mmol) foi adicionado a uma solução do Composto 73 (38 mg, 0,3 mmol) e Bis (4-nitrofenil)carbonato (92 mg, 0,3 mmol) em DCM (1,2 ml) e a mistura de reação foi deixada a agitar à t.a. durante 2 h. A mistura de reação foi concentrada e, em seguida, diluída com acetato de etilo, lavada quatro vezes com uma solução de NaOH aquoso (1 N) , uma vez com uma solução saturada de NaHCCP, e uma vez com salmoura antes de ter sido seca em Na2SC>4 e concentrada. 0 resíduo bruto foi purificado em cromatografia em sílica gel (10-30 % de acetato de etilo em hexano) para dar o Composto 99 (69 mg, 80 %) . Espetro de massa: (M+H)+ = 295
Composto 101 TEA (209 pL, 1,5 mmol) foi adicionado a uma solução do Composto 100 (S)-Pantolactona (130 mg, 1 mmol) e Bis (4-nitrofenil) carbonato (304 mg, 1 mmol) em DCM (5 ml) e a mistura de reação foi deixada a agitar à t.a. durante 2 h. A mistura de reação foi concentrada e, em seguida, diluída com acetato de etilo, lavada quatro vezes com uma solução de NaOH aquoso (1 N) , uma vez com uma solução de NaHCC>3 saturado, e uma vez com salmoura antes de ter sido seco em Na2S04 e concentrado. 0 resíduo bruto foi purificado em sílica gel (10-30 % de acetato de etilo em hexano) para dar o Composto 101 (240 mg, 81 %) . Espetro de massa: (M+H)+ = 296
Exemplo BM TFA (0,3 ml) foi adicionado ao Composto 6 (36 mg, 0,057 mmol) em DCM (1 ml) e a mistura foi deixada a agitar à t.a. durante 2 h. A solução foi concentrada e co- evaporada três vezes com DCM e três vezes com acetonitrilo. 0 resíduo resultante foi dissolvido em acetonitrilo anidro (0,6 ml) e arrefecido até 0 °C. DMAP (1 mg, 0,08 mmol) foi adicionado seguido de DIPEA (40 pL, 0,23 mmol) até que o pH 9 tenha sido alcançado. Seguiu-se a adição de carbonato 99 (17 mg, 0,057 mmol). A mistura de reação foi agitada durante 1 h a 0 °C e durante 16 h à t.a. A mistura de reação foi concentrada e dissolvida em acetato de etilo. A camada orgânica foi lavada três vezes com H2O, três vezes com NaOH (1 N) , e uma vez com salmoura antes de ter sido seca em Na2S04 e concentrada e purificada por meio de HPLC de fase reversa (coluna Phenomenex Synergi®, 25-100 % de acetonitrilo/H20 + 0,1 % de TFA) para dar o Exemplo BM (23 mg, 60 %) . !H RMN (300 MHz, CDC13) : δ 9,05 (d, J = 5,7 Hz, 1 Η), 8,28 (m, 1Η) , 7,95 (d, J = 7,8 Hz, 1 H) , 7,85 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,72 ( m, 1H), 7,58 (d, J = 7,8 Hz, 2H) , 7,21-7,17 (m, 4 H) , 6,97 (s, 1H) , 5,45-5,10 (m, 4 H) , 4,18-3,86 (m, 7H) , 3,61 (s, 3H) , 3,57 (m, 1H) , 2,93 (m, 4H) , 2,74 (s, 3H), 0,71 (s, 9H). Espetro de massa: (M+Na)+ = 712
Exemplo BN TFA (0,3 ml) foi adicionado ao Composto 6 (33 mg, 0,06 mmol) em DCM (1 ml) e a mistura foi deixada a agitar à t.a. durante 2 h. A solução foi concentrada e co-evaporada três vezes com DCM e três vezes com acetonitrilo. O resíduo resultante foi dissolvido em acetonitrilo anidro (0,6 ml) e arrefecido até 0 °C. DMAP (1 mg, 0,008 mmol) foi adicionado seguido de DIPEA (42 pL, 0,24 mmol) até que o pH 9 tenha sido alcançado. Seguiu-se a adição de carbonato 101 (18 mg, 0,06 mmol). A mistura de reação foi agitada durante 1 h a 0 °C e durante 16 h à t.a. A mistura de reação foi concentrada e dissolvida em acetato de etilo. A camada orgânica foi lavada três vezes com H2O, três vezes com NaOH (1 N), e uma vez com salmoura antes de ter sido seca em Na2SC>4 e concentrada e purificada por meio de HPLC de fase reversa (coluna Phenomenex Synergi®, 25-100 % de acetonitrilo/H20 + 0,1 % de TFA) para dar o Exemplo BN (24 mg, 58 %) . Ή RMN (300 MHz, CDC13) : δ 8,70 (d, J = 4,5 Hz, 1 H), 7,95 (d, J = 7,8 Hz, 2 H) , 7,78-7,70 (m, 2 H) , 7,45 (m, 2H), 7,24 -7,17 (m, 4 H) , 6,50 (s, 1H) , 5,55-5,16 (m, 4H) , 4,12-3,95 (m, 6H) , 3,65 (s, 3H) , 3,56 (m, 2H) , 2,99- 2,60 (m, 6H), 1,15 (s, 3H) , 0,99 (s, 3H) , 0,76 (s, 9H) .
Espetro de massa: (M+Na)+ = 713
Preparação dos Exemplos BO. BP, BQ, e BR
Exemplo BO O Composto 104 (41 mg, 0,08 mmol) foi dissolvido em
DMF (0,25 ml) à t.a. e TPTU (30 mg, 0,1 mmol) foi adicionado e a mistura de reação e foi deixada a agitar durante 20 min. O Exemplo G (16 mg, 0,08 mmol) foi dissolvido em DMF (0,25 ml) e foi adicionado ao balão de reação seguido de 4-metilmorfolina (16 pL, 0,14 mmol). A mistura de reação foi deixada a agitar à t.a. durante 1 h e, em seguida, a mistura de reação foi diluída com H2O e extraída três vezes com DCM. A camada orgânica foi seca em NaiSCU, e concentrada. A purificação por meio de HPLC de fase reversa (coluna Phenomenex Synergi®, 25-100 % de
acetonitrilo/H20) produziu o Exemplo BO como um sólido branco (28 mg, 50 %) . ΤΗ RMN (300 MHz, CDCI3) : δ 8,68 (d, J = 4,2 Hz, 1 H), 7,93 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,76-7,70 (m, 2 H), 7,45 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,27-7,18 (m, 6H), 5,66 (d, J = 4,8 Hz, 1H) , 5,31 (m, 1H) , 5,03 (m, 1H) , 4,68 (m, 1H) , 4, 06-3, 60 (m, 10H), 3,20-2, 93 (m, 8H), 1,79-1, 60 (m, 6H) , 0,85 (s, 9H). Espetro de massa: (M+H)+ = 716.
Exemplo BP O Composto 105 (41 mg, 0,08 mmol) foi dissolvido em DMF (0,25 ml) à t.a. e TPTU (48 mg, 0,16 mmol) foi adicionado e a mistura de reação e foi deixada a agitar durante 20 min. 0 Exemplo G (31 mg, 0,16 mmol) foi dissolvido em DMF (0,25 ml) e foi adicionado ao balão de reação seguido de 4-metilmorfolina (26 pL, 0,24 mmol). A mistura de reação foi deixada a agitar à t.a. durante 1 h e, em seguida, a mistura de reação foi diluída com H2O e extraída três vezes com DCM. A camada orgânica foi seca em Na2SC>4, e concentrada. A purificação por meio de HPLC de fase reversa (coluna Phenomenex Synergi®, 25-100 % de
acetonitrilo/H20) produziu o Exemplo BP como um sólido branco (37 mg, 68 %) . Ή RMN (300 MHz, CDC13) : δ 8,69 (d, J = 4,5 Hz, 1H) , 7,95 (d, J = 8,1 Hz, 2H) , 7,78-7,70 (m, 2 H), 7,29-7,18 (m, 6H) , 5,67 (d, J = 5,1 Hz, 1H) , 5,31-5,04 (m, 2H) , 4,13 (m, 1H) , 4, 02-3, 70 (m, 10 H) , 2,95 (m, 4H) , 2,70 (m, 1H) , 1, 92-1, 63 (m, 8H) , 0,70 (d, J = 6,7 Hz, 3H) , 0,61 (d, J = 6,7 Hz, 3H). Espetro de massa: (M+H)+ = 695.
Exemplo BO O Composto 106 (41 mg, 0,08 mmol) foi dissolvido em DMF (0,25 ml) à t.a. e TPTU (48 mg, 0,16 mmol) foi adicionado e a mistura de reação e foi deixada a agitar
durante 20 min. O Exemplo G (40 mg, 0,16 mmol) foi dissolvido em DMF (0,25 ml) e foi adicionado ao balão de reação seguido de 4-metilmorfolina (26 pL, 0,24 mmol). A mistura de reação foi deixada a agitar à t.a. durante 1 h e, em seguida, a mistura de reação foi diluída com H2O e extraída três vezes com DCM. A camada orgânica foi seca em Na2SC>4, e concentrada. A purificação por meio de HPLC de fase reversa (coluna Phenomenex Synergi®, 25-100 % de acetonitrilo/H20) produziu o Exemplo BQ como um sólido branco (35 mg, 60 %) . ΤΗ RMN (300 MHz, DMSO) : δ 9,23 (m, 1H) , 8,64 (d, J = 3,9 Hz, 1H) , 7,97 (d, J = 8,4 Hz, 2H) , 7,89-7,81 (m, 2 H), 7,45 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,34-7,15 (m, 5H) , 6,21-6,01( m, 1H) , 5,49 (d, J = 5,1 Hz, 1H) , 4,99-4,91 (m, 2H) , 4,03-3, 48 (m, 10H) , 3,07 (m, 2H) , 2,75 (m, 7H) , 1,75 (m, 3H), 1,39 (m, 3H), 0,61 (s, 9H). Espetro de massa: (M+H)+ = 752.
Exemplo BR O Composto 107 (52 mg, 0,1 mmol) foi dissolvido em DMF (0,25 ml) à t.a. e TPTU (60 mg, 0,2 mmol) foi adicionado e a mistura de reação e foi deixada a agitar durante 20 min. O Exemplo G (32,2 mg, 0,2 mmol) foi dissolvido em DMF (0,25 ml) e foi adicionado ao balão de reação seguido de 4- metilmorfolina (33 pL, 0,3 mmol). A mistura de reação foi deixada a agitar à t.a. durante lhe, em seguida, a mistura de reação foi diluída com H2O e extraída três vezes com DCM. A camada orgânica foi seca em Na2SC>4, e concentrada. A purificação por meio de HPLC de fase reversa (coluna Phenomenex Synergi®, 25-100 % de acetonitrilo/H20) produziu o Exemplo BR como um sólido branco (30 mg, 45 %). 1R RMN (300 MHz, CDCI3) : δ 8,69 (d, J = 5,1 Hz, 1 H) , 7,96 (d, J = 8,1 Hz, 2H) , 7,77-7, 69 (m, 2H) , 7,43 (d, J = 8,1 Hz, 2H) , 7,27-7,18 (m, 6H) , 5,68 (d, J = 5,1 Hz, 1H) , 5,35 (d, J = 5,1 Hz, 1H) , 5, 07-4, 95 (m, 2 H) , 4,17-3,59 (m, 10 H) , 2, 98-2, 88 (m, 4H) , 2,63 (m, 2H) , 1,79-1, 63 (m, 5H) , 1,48 (s, 3H) , 0,98 (s, 3H) . Espetro de massa: (M+Na)+ = 684 .
Preparação dos Exemplos BS, BT, BU, e BV
Reagentes e condições: i. EDC, HOBt, NMM, DMF; ii. TFA, DCM; iii,
Cloreto de metanossulfonilo, DIEA, DCM; iv. Cloreto de dimetilsulfamoilo. DIEA, DCM
Exemplo BV
Boc-L-terc-leucina (46 mg, 0,2 mmol) foi dissolvida em DMF (0,25 ml) à t.a. EDC (38 mg, 0,2 mmol) e HOBT (27 mg, 0,2 mmol) foram adicionados e a mistura de reação foi deixada a agitar durante 30 min. O Exemplo G (52 mg, 0,1 mmol) foi dissolvido em DMF (0,25 ml) e foi adicionado ao balão de reação após a adição de 4-metilmorfolina (26 pL, 0,24 mmol). A mistura de reação foi deixada a agitar à t.a. durante 18 h e, em seguida, a mistura de reação foi diluída com acetato de etilo e lavada com NaHCCd saturado e salmoura antes de ter sido seca em Na2SC>4, e concentrada. A purificação por meio de HPLC de fase reversa ( (coluna Phenomenex Synergi®, 25-100 % de acetonitrilo/fbO) produziu 0 Exemplo BV como um sólido (47 mg, 65 %) . ΧΗ RMN (300 MHz, CDC13) : δ 9,06 (d, J = 5,4 Hz, 1H) , 8,34 (m, 1H) , 8,00 (d, J = 7,8 Hz, 1H) , 7,86 (d, J = 8,4 Hz, 2H) , 7,75 (m, 1 H) , 7,63 (d, J = 8,4 Hz, 2H) , 7,25-7,18 (m, 5H) , 5,64 (d, J = 5.1 Hz, 1H) , 5,29-4, 99 (m, 3H) , 4,16 (m, 1H) , 4,03-3, 53 (m, 10H), 2,92 (m, 7H), 1,42 (s, 9 H), 0,73 (s, 9H), Espetro de massa: (M+H)+ = 732.
Exemplo BS Ácido carboxílico 109 (30 mg, 0,15 mmol) foi dissolvido em DMF (0,5 ml) à t.a. EDC (30 mg, 0,15 mmol) e HOBT (21 mg, 0,15 mmol) foram adicionados e a mistura de reação foi deixada a agitar durante 30 min. O Exemplo G (78 mg, 0,15 mmol) foi dissolvido em DMF (0,5 ml) e foi adicionado ao balão de reação após a adição de 4-met ilmorf olina (22 pL, 0,2 mmol) . A mistura de reação foi deixada a agitar à t.a. durante 18 h e, em seguida, a mistura de reação foi diluída com acetato de etilo e lavada com NaHC03 saturado e salmoura antes de ter sido seca em Na2SC>4, e concentrada. A purificação por meio de HPLC de fase reversa (coluna Phenomenex Synergi®, 25-100 % de acetonitrilo/H20) produziu o Exemplo BS como um sólido (63 mg, 60 %) . !H RMN (300 MHz, CDCI3) : δ 8,88 (d, J = 4,5 Hz, 1 H) , 7, 98 (m, 1H) , 7,90 (d, J = 8,4 Hz, 2H) , 7,80 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7,53 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,43 (m, 1 H), 7,26- 7,18 (m, 5H) , 5,66 (d, J = 5,1 Hz, 1H) , 5, 30-5, 04 (m, 2 H) , 4,09 (m, 1H) , 4, 00-3, 60 (m, 10 H) , 3,08-2,81 (m, 10H) , 2,09 (m, 4H) , 1,64 (m, 1H) , 0,78 (d, J = 6,3 Hz, 3 H) , 0,52 (d, J = 6,3 Hz, 3H). Espetro de massa: (M+H)+ = 702.
Exemplo BT DCM (1 ml) foi usado para dissolver o Exemplo BV (20 mg, 0,027 mmol) e TFA (0,2 ml) foi adicionado. A mistura de reação foi deixada a agitar à t.a. durante 2 h então a mistura de reação foi concentrada. O resíduo resultante foi dissolvido em DCM anidro (0,5 ml) e arrefecido até 0 °C. DIPEA (14 pL, 0,08 mmol) foi adicionado seguido de cloreto de metanossulfonilo (2,8 pL, 0,035 mmol) A mistura de reação foi agitada durante 1 h a 0 °C e durante 16 h à t.a. A mistura de reação foi concentrada e dissolvida em acetato de etilo. A camada orgânica foi lavada três vezes com H2O, três vezes com NaHCCh e uma vez com salmoura antes de ter sido seca em Na2SC>4 e concentrada e purificada por meio de HPLC de fase reversa (coluna Phenomenex Synergi®, 25-100 % de acetonitrilo/H20) para dar o Exemplo BT (10 mg, 50 %) . !H RMN (300 MHz, CDCI3) : δ 8,69 (d, J = 4,2 Hz, 1 H) , 7,95 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,74 (m, 2H) , 7,46 (d, J = 8,4 Hz, 1H) , 7,26-7,18 (m, 7H) , 6,57 (m, 1H) , 5,65 (d, J = 5,4 Hz, 1H) , 5,15-4,99 (m, 3 H) , 4,14 (m, 1H) , 4, 00-3, 66 (m, 10 H) , 3,24 (m, 1H) , 2,98-2,78 (m, 6H) , 2,69 (s, 3H) , 0,77 (s, 9H), Espetro de massa: (M+H)+ = 711.
Exemplo BU DCM (1 ml) foi usado para dissolver o Exemplo BV (20 mg, 0,027 mmol) e TFA (0,2 ml) foi adicionado. A mistura de reação foi deixada a agitar à t.a. durante 2 h então a mistura de reação foi concentrada. O resíduo resultante foi dissolvido em DCM anidro (0,5 ml) e arrefecido até 0 °C. DIPEA (42 pL, 0,24 mmol) foi adicionado seguido de cloreto de dimetanossulfamonilo (3,8 pL, 0,035 mmol). A mistura de reação foi agitada durante 1 h a 0 °C e durante 16 h à t.a. A mistura de reação foi concentrada e dissolvida em acetato de etilo. A camada orgânica foi lavada três vezes com H2O três vezes com NaHCCh e uma vez com salmoura antes de ter sido seca em Na2SC>4 e concentrada e purificada por meio de HPLC de fase reversa (coluna Phenomenex Synergi®, 25-100 % de acetonitrilo/H20) para dar o Exemplo BU (9 mg, 45 %) . ΤΗ RMN (300 MHz, CDC13) : δ 8,98 (d, J = 5,4 Hz, 1 H) , 8,19 (m, 1H) , 7,90 (m, 3H), 7,62 (m, 3H) , 7,26-7,18 (m, 5H) , 5,63 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 5,26-4,94 (m, 3H), 4,20 (m, 1H), 4,ΟΠΗ,66 (m, 10 H) , 3,19 (m, 1H) , 2, 98-2,83 (m, 6H ), 2,78 (s, 6H), 0,74 (s, 9H), Espetro de massa: (M+H)+ = 739.
Preparação dos Exemplos BW e BX
Reagentes e Condições: j. TBAP, THF; ii. ROH, ΡΙΊ3Ρ, DBAD, DCM; iii. TFA, DCM, DIEA, DMAP, Composto
70 MeCN
Compostos 112a DCM (1,2 ml) foi usado para dissolver o Composto 33 (36 mg, 0,06 mmol) e tiazol-4-il metanol (0,12 mmol) foi adicionado à t.a.. Seguido de PI13P (31 mg, 0,12 mmol) e Di-terc-butilazodicarboxilato (28 mg, 0,12 mmol). A mistura de reação foi deixada a agitar à t.a. durante 16 h, diluída com acetato de etilo (20 ml), e a camada orgânica foi lavada salmoura e seca em Na2SC>4 anidro e concentrada e purificada por meio de cromatografia em sílica gel para dar os Compostos 112a.
Compostos 112b
0 Composto 112b pode ser preparado seguindo o procedimento para o Composto 112a, exceto pela utilização de 3-hidroximetilpiridina em lugar de tiazol-4-il-metanol. Exemplo BW D CM (1 ml) foi usado para dissolver o Composto 112a (90 mg, 0,13 mmol) e TFA (0,2 ml) foi adicionado. A mistura de reação foi deixada a agitar à t.a. durante 2 h então a mistura de reação foi concentrada. O resíduo resultante foi dissolvido em acetonitrilo anidro (0,5 ml) e arrefecido até 0 °C. DIPEA (105 pL, 0,6 mmol) foi adicionado seguido do
Composto 70 (41 mg, 0,14 mmol) e DMAP (2 mg, 0,016 mmol). A mistura de reação foi agitada durante 1 h a 0 °C e durante 16 h à t.a. A mistura de reação foi concentrada e dissolvida em acetato de etilo. A camada orgânica foi lavada três vezes com H2O, três vezes com NaHCC>3 e uma vez com salmoura antes de ter sido seca em Na2SC>4 e concentrada e purificada por meio de HPLC de fase reversa (coluna Phenomenex Synergi®, 25-100 % de acetonitrilo/H20) para dar o Exemplo BW (38 mg, 40 %) . ΤΗ RMN (300 MHz, CDC13) : δ 8,85 (d, J = 1,8 Hz, 1 H) , 7,41 (m, 1H) , 7,25 (d, J = 8,4 Hz, 2H) , 7,11 (d, J = 8,4 Hz, 2H) , 6,95 (d, J = 8,4 Hz, 2H) , 6,79 (d, J = 8,4 Hz, 2H) , 5,67 (d, J = 5,4 Hz, 1H) , 5,26- 5,00 (m, 5H) , 4,03-3, 55 (m, 13H) , 2, 96-2, 85 (m, 5H) , 2,60 (m, 5H) , 1,67 (m, 1H) , 0,75 (s, 9H) , Espetro de massa: (M+H)+ = 757.
Exemplo BX
DCM (0,5 ml) foi usado para dissolver o Composto 112b (40 mg, 0, 058 mmol) e TFA (0,1 ml) foi adicionado. A mistura de reação foi deixada a agitar à t.a. durante 2 h então a mistura de reação foi concentrada. O resíduo resultante foi dissolvido em acetonitrilo anidro (0,5 ml) e arrefecido até 0 °C. DIPEA (51 pL, 0,29 mmol) foi adicionado seguido do Composto 70 (18 mg, 0,06 mmol) e DMAP (0,8 mg, 0,006 mmol). A mistura de reação foi agitada durante 1 h a 0 °C e durante 16 h à t.a. A mistura de reação foi concentrada e dissolvida em acetato de etilo. A camada orgânica foi lavada três vezes com H2O, três vezes com NaHCCh e uma vez com salmoura antes de ter sido seca em Na2SC>4 e concentrada e purificada por meio de HPLC de fase reversa (coluna Phenomenex Synergi®, acetonitrilo/H20 +0,1 % de TFA) para dar o Exemplo BX (20 mg, 45 %). 1H RMN (300 MHz, CDCI3) : δ 9,02 (s, 1H) , 8,84 (d, J = 4,8 Hz, 1H) , 8,45 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,91 (m, 1H) , 7,31 (d, J = 8,4 Hz, 2H) , 7,10 (d, J = 8,7 Hz, 2H) , 6,93 (d, J = 8,7 Hz, 2H) , 6,79 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 5,66 (d, J = 5,1 Hz, 1H) , 5,34- 5,01 (m, 5H) , 4,07-3,61 (m, 16H), 2, 92-2, 66 (m, 6H) , 1,68 (m, 2H), 0,79 (s, 9H), Espetro de massa: (M+H)+ = 751. Preparação do Exemplo BY Esquema 33
Reagentes e Condições: i. i-PrOH, 80 °C; ii. TFA, DCM; DMAP, DIPEA, Composto 70
Composto 115 O epóxido 68c (59 mg, 0,2 rnmol) e 114 (76 mg_ 0j21 mmol) foram dissolvidos em isopropanol e aquecidos até 80 °C. A mistura de reação foi deixada a agitar durante 18 h antes de ter sido arrefecida até a t.a., concentrada, e purificada em cromatografia em silica gel (acetato de etilo/hexano, 30-50 %) para dar o Composto 115 (72 mg, 55 %) Espetro de massa: (M+H)+ = 654
Exemplo BY TFA (0,05 ml) foi adicionado a 115 (50 mg, 0,075 mmol) em DCM (0,5 ml) e a mistura foi deixada a agitar à t.a. durante 1,5 h. A solução foi concentrada e co-evaporada três vezes com DCM e três vezes com acetonitrilo. 0 resíduo foi dissolvido em acetonitrilo anidro (1 ml) e arrefecido até 0 °C. DMAP (1,5 mg, 0,01 mmol) foi adicionado seguido de DIEA (52,5 pL, 0,3 mmol) até que a solução alcançasse o pH 9. O Composto 70 (23,5 mg, 0,08 mmol) foi adicionado. A mistura de reação foi agitada durante 2 h a 0 °C e durante 16 h à t.a. A mistura de reação foi concentrada e purificada por meio de HPLC de fase reversa (coluna Phenomenex Synergi®, 25-100 % de acetonitrilo/H20 + 0,1 % de TFA) para dar o Exemplo BY (27 mg, 50 %) . ΧΗ RMN (300 MHz, CDCls) : 8,54 (s, 1H) , 8,11 (s, 1H) , 7,64 (d, J = 8,7 Hz, 1 H) , 7,52 (d, J = 8,7 Hz, 1 H) , 7,13 (d, J = 8,4 Hz, 2 H) , 6,80 (d, J = 8,4 Hz, 2H) , 6,47 (m, 1H) , 5,67 (d, J = 5, 1 Hz, 1H) , 5,24 (m, 2 H) , 5,03 (m, 1 H), 4,74 (m, 1H), 4,17 -3,54 (m, 15 H), 2,95-2,68 (m, 5 H ), 1,72-1,58 (m, 2H) , 0,73 (s, 9H) . Espetro de massa: (M+H)+ = 710
Preparação dos Exemplos BZ e CA
Reagentes e Condições:). TFA, DCM; DMAP, DIPEA, Composto 70 Exemplo BZ TFA (0,03 ml) foi adicionado a 116 (28 mg, 0,052 mmol) em DCM (0,3 ml) e a mistura foi deixada a agitar à t.a. durante 1,5 h. A solução foi concentrada e co-evaporada três vezes com DCM e três vezes com acetonitrilo. O resíduo foi dissolvido em acetonitrilo anidro (0,5 ml) e arrefecido até 0 °C. DMAP (1 mg, 0,008 mmol) foi adicionado seguido de DIEA (35 pL, 0,2 mmol) até que a solução alcançasse o pH 9. Bistetrahidrofuran-3-il carbonato de (R)-4-nitrofenilo (16 mg, 0,052 mmol) foi adicionado. A mistura de reação foi agitada durante 2 h a 0 °C e durante 16 h à t.a. A mistura de reação foi concentrada e purificada por meio de HPLC de fase reversa (coluna Phenomenex Synergi®, 25-100 % de acetonitrilo/EbO + 0,1 % de TFA) para dar o Exemplo BZ (15 mg, 50 %) . ΧΗ RMN (300 MHz, CDCI3) : δ 8,99 (m, 1H) , 8,25 (m, 1H) , 8,12 (d, J = 7,2 Hz, 2H) , 7,91-7,15 (m, 12 H) , 6,88 (d, J = 7,2 Hz, 2H) 5,66 (d, J = 5,1 Hz, 1H) , 5,48- 5,03 (m, 1 OH) , 4,11-3,59 (m, 6H) , 2, 95-2, 68 (m, 4H) , 1,92- 1,63 (m, 4H), 0,65 (m, 6H). Espetro de massa: (M+H)+ = 752
Exemplo CA TFA (0,03 ml) foi adicionado a 10 (31 mg, 0,052 mmol) em DCM (0,3 ml) e a mistura foi deixada a agitar à t.a. durante 1,5 h. A solução foi concentrada e co-evaporada três vezes com DCM e três vezes com acetonitrilo. O resíduo foi dissolvido em acetonitrilo anidro (0,5 ml) e arrefecido até 0 °C. DMAP (1 mg, 0,008 mmol) foi adicionado seguido de DIEA (35 pL, 0,2 mmol) até que a solução alcançasse o pH 9. O Composto 70 (16 mg, 0,052 mmol) foi adicionado. A mistura de reação foi agitada durante 2 h a 0 °C e durante 16 h à t.a. A mistura de reação foi concentrada e purificada por meio de HPLC de fase reversa (coluna Phenomenex Synergi®, 25-100 % de acetonitrilo/H20 + 0,1 % de TFA) para dar o Exemplo CA (16 mg, 50 %) . ΧΗ RMN (300 MHz, CDCls) : δ 8,75 (m, 1H) , 7,94 (d, J = 7,5 Hz, 2H) , 7,85-7,73 (m, 4 H) , 7,44-7,18 (m, 11H), 5,66 (d, J = 5,1 Hz, 1H), 5,60 (m, 1H), 5,28-5, 03 (m, 4H) , 4, 08-3, 66 (m, 8H) , 2, 96-2, 60 (m, 6H) , 1,67 (m, 2H), Espetro de massa: (M+Na)+ = 675
Preparação dos Exemplos CB-CG
Reagentes e Condições: *. HQAc, i-PrOH, 80 ®C; ii. TPA. DCM; DMAP, DIPEA. bistetrahidroftsetvceitMjnato
Composto 117
Um balão de fundo redondo foi carregado com o composto 60 (1,24 g, 3,01 mmol), ácido 3-piridinaborónico (Aldrich, 0,741 g, 6,03 mmol), e PdCl2 (dppf) (0,276 g, 0,301 mmol).
Uma solução de carbonato de sódio aquoso a 2 M (7,5 ml, 15,05 mmol) e dimetoxietano (30 ml) foram adicionados e a mistura de reação foi agitada durante 45 min a 80 °C. A mistura de reação foi diluída com acetato de etilo e lavada com salmoura. A camada orgânica foi seca (MgSCA) , concentrada até 10 ml e purificada por meio de cromatograf ia flash (sílica gel, 30 a 60 % de isopropanol/Hex) para dar um sólido branco (0,7247 g, 70 %) . LC-MS mostra 341,1 (M+l) . ΧΗ RMN (300 MHz, CDC13) : δ 8,81 (s, 1 H) , 8,58 (m, 1 H) , 7,82 (m, 1 H) , 7,51 (m, 2 H) , 7,37 (m, 3 H) , 4,64 (m, 1 H) , 4,17 (m, 1 H) , 3,04 (m, 1 H) , 2,95 (m, 2 H) , 2,72 (t, 1 H) , 2,60 (s, 1 H) , 1,39 (s, 9 H) .
Composto 119a O epóxido 117 (34 mg, 0,1 mmol) e 118a (100 mg, 0,3 mmol) foram dissolvidos em isopropanol (1,5 ml), ácido acético (0,014 ml, 0,24 mmol) foi adicionado e a mistura de reação foi aquecida até 80 °C. A reação foi deixada a agitar durante 18 h antes de ter sido arrefecida até a t.a., concentrada, e purificada em sílica gel (acetato de etilo/hexano, 30-50 %) para dar composto 119a (25 mg, 25 %). Espetro de massa: (M+Na)+ = 693
Exemplo CB TFA (0,1 ml) foi adicionado a 119a (12 mg, 0,018 mmol) em DCM (0,5 ml) e a mistura foi deixada a agitar à t.a. durante 2 h. A solução foi concentrada e co-evaporada três vezes com DCM e três vezes com acetonitrilo. O resíduo foi dissolvido em acetonitrilo anidro (0,5 ml) e arrefecido até 0 °C. D MAP (0,3 mg, 0,002 mmol) foi adicionado seguido de DIEA (16 pL, 0,09 mmol) até que a solução alcançasse o pH 9. 0 bistetrahidrofurano-carbonato (6 mg, 0,02 mmol) foi adicionado. A reação foi agitada durante 2 h a 0 °C e durante 16 h à t.a. A mistura de reação foi concentrada e purificada por meio de HPLC de fase reversa (25-100 % de acetonitrilo/fMO + 0,1 % de TFA) para dar o Exemplo CB (8 mg, 61 %) . iH RMN (300 MHz, CDCI3) : δ 8,86 (s, 1H) , 8,60 (m, 1H), 7, 95 (d, 1H) , 7,49 (d, 2H) , 7,34 (d, 2H) , 7,29 (m, 1H) , 6,91 (d, 2H) , 6,80 (s, 1H) , 5,67 (d, 1H) , 5,34 (m, 1H) , 5,22 (m, 1H) , 5,07 (m, 1H) , 4,12 (m, 2H) , 4,05-3,64 (m, 10H), 3,58 (s, 3H) , 2, 98-2, 63 (m, 4H) , 1,72 (m, 2H) , 0,89(s, 9H). Espetro de massa: (M+H)+ = 727
Composto 119b 0 epóxido 117 (34 mg, 0,1 mmol) e 118b (97 mg, 0,28 mmol) foram dissolvidos em isopropanol (1,5 ml), ácido acético (0,013 ml, 0,22 mmol) foi adicionado e a mistura de reação foi aquecida até 80 °C. A reação foi deixada a agitar durante 18 h antes de ter sido arrefecida até a t.a., concentrada, e purificada em silica gel (acetato de etilo/hexano, 30-50 %) para dar composto 119b (30 mg, 30 %) . Espetro de massa: (M+Na)+ = 711
Exemplo CC TFA (0,1 ml) foi adicionado a 119b (13 mg, 0,018 mmol) em D CM (0,5 ml) e a mistura foi deixada a agitar à t.a. durante 2 h. A solução foi concentrada e co-evaporada três vezes com DCM e três vezes com acetonitrilo. O resíduo foi dissolvido em acetonitrilo anidro (0,5 ml) e arrefecido até 0 °C. DMAP (0,3 mg, 0,002 mmol) foi adicionado seguido de DIEA (16 pL, 0,09 mmol) até que a solução alcançasse o pH 9. O bistetrahidrofurano-carbonato (6 mg, 0,02 mmol) foi adicionado. A mistura de reação foi agitada durante 2 h a 0 °C e durante 16 h à t.a. A reação foi concentrada e purificada por meio de HPLC de fase reversa (25-100 % de acetonitrilo/H20 + 0,1 % de TFA) para dar o Exemplo CC (10 mg, 71 %) . iH RMN (300 MHz, CDC13) : δ 9,14 (s, 1H) , 8,79 (d, 1H) , 8,48 (d, 1H) , 7,91(m, 1H) , 7,55 (d, 2H) , 7,42 (d, 2H) , 7,29 (m, 1H) , 6,95 (m, 1H) , 5,68 (d, 1H) , 5,39 (m, 1H) , 5,29 (m, 1H) , 5,05 (m, 1H) , 4,40(m, 2H) , 4, 04-3, 72 (m, 10H), 3,63 (s, 3H), 3, 02-2,73 (m, 4H), 1,73 (m, 2H) , 0,79 (s, 9H). Espetro de massa: (M+H)+ = 745
Composto 119C O epóxido 117 (34 mg, 0,1 mmol) e 118C (100 mg, 0,3 mmol) foram dissolvidos em isopropanol (1,5 ml), ácido acético (0,014 ml, 0,24 mmol) foi adicionado e a mistura de reação foi aquecida até 80 °C. A mistura de reação foi deixada a agitar durante 18 h antes de ter sido arrefecida até a t.a., concentrada, e purificada em sílica gel (acetato de etilo/hexano, 30-50 %) para dar composto 119C (40 mg, 60 %). Espetro de massa: (M+Na)+ = 693
Exemplo CD TFA (0,1 ml) foi adicionado a 119C (36 mg, 0,054 mmol) em DCM (0,8 ml) e a mistura foi deixada a agitar à t.a. durante 2 h. A solução foi concentrada e co-evaporada três vezes com DCM e três vezes com acetonitrilo. O resíduo foi dissolvido em acetonitrilo anidro (1 ml) e arrefecido até 0 °C. D MAP (0,5 mg, 0, 004 mmol) foi adicionado seguido de DIEA (47 pL, 0,27 mmol) até que a solução alcançasse o pH 9. O bistetrahidrofurano-carbonato (16 mg, 0,055 mmol) foi adicionado. A reação foi agitada durante 2 h a 0 °C e durante 16 h à t.a. A reação foi concentrada e purificada por meio de HPLC de fase reversa (25-100 % de acetonitrilo/H20 + 0,1 % de TFA) para dar o Exemplo CD (15 mg, 38 %) . Ή RMN (300 MHz, CDC13) : δ 9,18 (s, 1H) , 8,83 (m, 1H) , 8,54 (m, 1H) , 7,95 (m, 1H) , 7,56 (d, 2H) , 7,44 (d, 2H) , 6,92 (d, 2H) , 6,72 (m, 1H) , 5,69 (d, 1H) , 5,46 (m, 1H), 5,40 (m, 1H), 5,05 (m, 1H), 4,10-3,45 (m, 14H), 3,03-2,72(m, 5H) , 1,74 (m, 2H) , 0,74(s, 9H) . Espetro de massa: (M+H)+ = 727 Composto 119d O epóxido 117 (136 mg, 0,4 mmol) e 118d (229 mg, 0,7 mmol) foram dissolvidos em isopropanol (4 ml), adicionou-se ácido acético (0,032 ml, 0,56 mmol) e a mistura de reação foi aquecida a 80 °C. A reação foi deixada em agitação durante 18 h antes de que se arrefecesse a t.a., foi concentrada e foi purificada em sílica gel (acetato de etilo/hexano, 30-50 %) para dar o composto 119d (64 mg, 24 %). Espetro de massas: (M+Na) + = 691
Exemplo CE:
Adicionou-se TFA (0,2 ml) a 119d (64 mg, 0,095 mmol) em DCM (1,0 ml) e a mistura foi deixada em agitação a t.a. durante 2 h. A solução foi concentrada e foi co-evaporada três vezes com DCM e três vezes com acetonitrilo. 0 resíduo foi dissolvido em acetonitrilo anidro (1,9 ml) e foi arrefecido a 0 °C. Adicionou-se D MAP (1,1 mg, 0,01 mmol) seguido de DIEA (60 μΐ, 0,34 mmol) até gue a solução alcançasse um pH de 9. Adicionou-se bistetrahidrofurano-carbonato (28 mg, 0,095 mmol). A reação foi agitada durante 2 h a 0 °C e durante 16 h a t.a. A reação foi concentrada e foi purificada por HPLC de fase inversa (acetonitrilo a 25-100 %/H20 + TFA a 0,1 %) para dar o Exemplo CE (32 mg, 40 %) . !H RMN (300 MHz, CD3OD) : δ 9,09 (s, 1H) , 8,76 (m, 2H) , 8,05 (m, 1H) , 7,67 (d, 2H) , 7,45 (d, 2H) , 7,35 (d, 2H) , 7,21 (d, 2H), 5,52 (d, 1H) , 4,91 (m, 1H) , 3,99-3,57 (m, 16H), 2, 94-2,81 (m, 5H) , 1,47 (m, 2H), 0,70(s, 9H) .
Espetro de massas: (M+H)+ = 725
Composto 119e O epóxido 117 (136 mg, 0,4 mmol) e 118e (242 mg, 0,7 mmol) foram dissolvidos em isopropanol (4 ml), adicionou-se ácido acético (0,032 ml, 0,56 mmol) e a mistura de reação foi aguecida a 80 °C. A mistura de reação foi deixada em agitação durante 18 h antes de que se arrefecesse a t.a., foi concentrada e foi purificada em sílica gel (acetato de etilo/hexano, 30-50 %) para dar o composto 119e (51 mg, 19 %) . Espetro de massas: (M+Na)+ = 709
Exemplo CF
Adicionou-se TFA (0,2 ml) a 119e (51 mg, 0, 075 mmol) em DCM (1,0 ml) e a mistura foi deixada em agitação a t.a. durante 2 h. A solução foi concentrada e foi co-evaporada três vezes com DCM e três vezes com acetonitrilo. O resíduo foi dissolvido em acetonitrilo anidro (1,6 ml) e foi arrefecido a 0 °C. Adicionou-se DMAP (0,9 mg, 0, 008 mmol) seguido de DIEA (50 μΐ, 0,29 mmol) até que a solução alcançasse um pH de 9. Adicionou-se bistetrahidrofurano-carbonato (22 mg, 0,075 mmol). A reação foi agitada durante 2 h a 0 °C e durante 16 h a t.a. A reação foi concentrada e foi purificada por HPLC de fase inversa (acetonitrilo a 25-100 %/H20 + TFA a 0,1 %) para dar o Exemplo CF (17 mg, 26 %) . ΧΗ RMN (300 MHz, CD3OD) : δ 9,07 (s, 1H) , 8,73 (m, 2H) , 8,02 (m, 1H) , 7,67 (d, 2H) , 7,43 (d, 2H) , 7,22 (m, 2H) , 7,00 (m, 1H), 5,52 (d, 1H) , 4,90 (m, 1H) , 4,22-3,60 (m, 16H), 2,91-2,84 (m, 5H) , 1,50 (m, 2H) , 0,82 (s, 9H) .
Espetro de massas: (M+H)+ = 743
Composto 119f 0 epóxido 117 (85 mg, 0,25 mmol) e 118f (164 mg, 0,5 mmol) foram dissolvidos em isopropanol (2,5 ml), adicionou-se ácido acético (0,023 ml, 0,4 mmol) e a mistura de reação foi aquecida a 80 °C. A mistura de reação foi deixada em agitação durante 18 h antes de que se arrefecesse a t.a., foi concentrada e foi purificada em sílica gel (acetato de etilo/hexano, 30-50 %) para dar o composto 119f (46 mg, 27 %). Espetro de massas: (M+Na) + = 691
Exemplo CG
Adicionou-se TFA (0,2 ml) a 119f (46 mg, 0,068 mmol) em DCM (1,0 ml) e a mistura foi deixada em agitação a t.a. durante 2 h. A solução foi concentrada e foi co-evaporada três vezes com DCM e três vezes com acetonitrilo. O resíduo foi dissolvido em acetonitrilo anidro (1,4 ml) e foi arrefecido a 0 °C. Adicionou-se DMAP (0,8 mg, 0, 007 mmol) seguido de DIEA (82 μΐ, 0,48 mmol) até que a solução alcançasse um pH de 9. Adicionou-se bistetrahidrofurano-carbonato (20 mg, 0,068 mmol). A reação foi agitada durante 2 h a 0 °C e durante 16 h a t.a. A reação foi concentrada e foi purificada por HPLC de fase inversa (acetonitrilo a 25-100 %/H20 + TFA a 0,1 %) para dar o Exemplo CG (19 mg, 34 %) . !H RMN (300 MHz, CDCI3) : δ 9,11 (s, 1H) , 8,76 (m, 1H) , 8,45 (m, 1H) , 7,88 (m, 1H) , 7,50 (d, 2H) , 7,40 (d, 2H) , 7,32 (d, 2H) , 7,22 (d, 2H) , 5,64 (d, 1H) , 5,34 (m, 2H) , 5,01 (m, 2H) , 4,58-3, 56 (m, 15H) , 2, 98-2, 89(m, 4H) , 1,69 (m, 1H) , 0,68 (s, 9H) . Espetro de massas: (M+H) + = 725
Preparação do Exemplo CH
Reagentes e Condições: i. TFA, DCM; DMAP, DIPEA, bistetrahidrofuran-carbonato Exemplo CH TFA (0,15 ml) foi adicionado a 120 (18 mg, 0,026 mmol) numa mistura 1:1 de CH3CN e H2O (2,0 ml), e a mistura foi deixada a agitar à t.a. durante 2 h. A solução foi concentrada e co-evaporada três vezes com DCM e três vezes com acetonitrilo. 0 resíduo foi dissolvido em acetonitrilo anidro (0,4 ml) e arrefecido até 0 °C. DMAP (0,3 mg, 0,002 mmol) foi adicionado seguido de DIEA (20 pL, 0,12 mmol) até que a solução alcançasse o pH 9. O bistetrahidrofurano- carbonato (7,6 mg, 0,026 mmol) foi adicionado. A reação foi agitada durante 2 h a 0 °C e durante 16 h à t.a. A reação foi concentrada e purificada por meio de HPLC de fase reversa (25-100 % de acetonitrilo/tbO + 0,1 % de TFA) para dar o Exemplo CH (8 mg, 43 %) . Ή RMN (300 MHz, CDC13) : δ 9,18 (s, 1H) , 8,87 (s, 2H) , 7,50 (s, 4H) , 7,07 (d, 2H) , 6,744 (d, 2H) , 5,62 (d, 1H) , 5,21 (m, 1H) , 5,01 (m, 1H) , 4,17 (m, 1H), 3, 96-3, 60 (m, 17H) , 2,91-2,67 (m, 5H) , 1,61 (m, 2H), 0,66 (s, 9H). Espetro de massa: (M+H) + = 722 Preparação do Exemplo Cl
Reagentes e Condições: 2-bromo tiazol, PdCb(dppf), DME, Na2CO? ac.; ii a. TFA al 1 % en MeCN/hbG (1:1); b TFA, DCM; iii. (3R,3aS,6aR)-tetrahidro-2H-furo[2,3-b]furan-3-il carbonato de 4-nítrofenilo, MeCN, Dl EA, D MAP.
Composto 121
Um tubo de reação de micro-ondas de 5 ml foi carregado com o composto 81 (27 mg, 0,0373 mmol), 2-bromo-tiazol (5 pL, 0,056 mmol, 1,5 eq.), e PdCl2 (dppf) (0,6 mg, 0.0007 mmol, 0,02 eq.). Uma solução de carbonato de sódio aquoso a 2 M (0,093 ml, 0,186 mmol, 5 eq.) e dimetoxietano (0,4 ml) foram adicionados. A mistura de reação foi aquecida a 130 °C no reator de micro-ondas durante 25 minutos. A mistura de reação foi diluída com acetato de etilo e lavada com salmoura. A camada orgânica foi concentrada e purificada por meio de cromatografia flash (sílica gel, 30 a 90 % de acetato de etilo/Hexano) para dar um sólido castanho claro (7,6 mg, 30 %). LC-MS mostra: 680,2 (M+H)+.
Composto 122 1 % de TFA em acetonitrilo/água (1:1) (2 ml) foi adicionado ao composto 121 (7,6 mg, 0,011 mmol). A mistura
de reação foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. O produto de reação bruto foi concentrado e seco sob alto vácuo. TFA (1 ml) foi adicionado ao produto de reação bruto acima em 2 ml de DCM. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora. 0 produto de reação bruto foi concentrado e purificado via HPLC de fase reversa (0,5 % de TFA em MeCN/água) para dar um pó branco (7 mg, 90 % durante 2 etapas). LC-MS mostra: 540,2 (M+H)+. 1h RMN (300 MHz, CD3OD) : δ 7,96 (d, 2 H) , 7,88 (d, 1 H) , 7,62 (d, 1 H) , 7,42 (d, 2 H) , 7,36 (m, 5 H) , 4,03 (m, 1 H) , 3,88-3,76 (m, 2 H) , 3,60 (s, 3 H) , 3, 67-3,58 (m, 2 H) , 3,20-2,92 (m, 4 H) , 0,70 (s, 9 H) .
Exemplo Cl DIEA (7 pL, 0,0.046 mmol, 3,0 eq.) foi adicionado ao composto 122 (7 mg, 0,013 mmol, 1,0 eq.) e (3R,3aS,6aR)-
tetrahidro-2Hfuro[2,3—b]furan-3-il carbonato de 4-nitrofenilo (4,6 mg, 0,016 mmol, 1,2 eq.) em 1,2 ml de MeCN, seguido de D MAP (0,3 mg, 0,2 eq.) . A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 12 horas. O produto de reação bruto foi filtrado e purificado por meio de HPLC prep (0,5 % de TFA em MeCN/água) para dar um pó branco (3,5 mg, 40 %). LC-MS mostra 696,2 (M+H)+. 1H RMN (300 MHz, CD3OD) : δ 7,84 (m, 3 H) , 7,59 (d, 1 H) , 7,41 (m, 4 H) , 7,24 (m, 3 H) , 5,59 (d, 1 H) , 4,95 (m, 1 H) , 4,06- 3,87 (m, 4 H) , 3,80 (m, 1 H) , 3,71 (m, 4 H) , 3,60 (s, 3 H) , 3, 03-2, 80 (m, 5 H) , 1,52 (m, 1 H) , 0,70 (s, 9 H) .
Preparação do Exemplo CJ
Reagentes e Condições; j. a p-anisaideído , isopropanol, 80 °C; b. NaBHjCN, ii. 60, HOAc, IPA, 80 “C; iii. a. 2,2-dimetoxi propane, ácido R-(-)-lÕ-canforsulfónico, acetona; rv. ácido 4-piridinabcrón)co, PdCh(dppí), DME, Na?CO:i ac,; v. a. TFA ai 1 % en MeCN/HjO {1 ;1); v. b. TFA, DCM; c. {3R,3aS,6aRHetrahidfo-2Hfuro[2,3-b]furan-3-i! carbonato de 4-nítrofenilo, MeCN, DIEA, DMAP
Composto 123 O Composto 123 foi preparado de um modo similar ao procedimento usado para preparar composto 57 exceto p- anisaldeído (1,01 ml, 8,36 mmol) foi usado ao invés de benzaldeido; (1,66 g, 62 %) . Espetro de massa: 321,1 (M + H) +.
Composto 124 0 Composto 124 foi preparado de um modo similar ao procedimento usado para preparar composto 61 exceto composto 123 (0,435 g, 1,056 mmol) foi usado ao invés de composto 57; 0,216g, 27 ·5. Espetro de mass a. 734,3 (M + H) +.
Composto 125 0 Composto 125 foi preparado de um modo similar ao procedimento usado para preparar composto 62 exceto composto 124 (0,216 g, 0,294 mmol) foi usado ao invés de composto 61; (0,156 g, 68 %). Espetro de massa: 775,2 (M + H)+.
Composto 126
0 Composto 126 foi preparado de um modo similar ao procedimento usado para preparar composto 63 exceto composto 125 (0,156 g, 0,202 mmol) foi reagido com ácido 4-piridinaborónico (Aldrich, 0,062 g, 0,505 mmol) para dar composto 126; (0,1044 g, 73 %). Espetro de massa: 704,4 (M + H) +.
Exemplo CJ O Exemplo CJ foi preparado de um modo similar ao procedimento usado para preparar o Exemplo AR exceto composto 126 (0,021 g, 0,030 mmol) foi usado ao invés de composto 63; (0,0114 g, 53 %) . XH RMN (300 MHz, CD3OD) : δ 8,78 (d, J= 6,9 Hz, 2 H) , 8,32 (d, J = 6,9 Hz, 2 H) , 7,87 (d, J= 8,1 Hz, 2 H) , 7,49 (d, J = 8,4 Hz, 2 H) , 7,26 (d, J = 8,7 Hz, 2 H) , 6,77 (d, J = 8,7 Hz, 2 H) , 5,51 (d, J = 4,64 Hz, 1 H) , 4, 99-4,82 (m, 1 H) , 4,05-3, 60 (m, 10 H) , 3,55 (s, 3 H) , 2, 95-3, 70 (m, 5 H) , 1, 60-1,40 (m, 2 H) , 0,72 (s, 9 H). Espetro de massa: 720,4 (M + H)+.
Preparação dos Exemplos CK e CL
Reagentes e Condições: i a. 4-difluorometoxí“õefizaldeído , isopropanoí, 80 °C, b. Pd/C, H2, EtOH; ti. 60, AcOH, isopropanoí, 80 °C; iii. ácido canforsuifónlco, dimetoxipropano, acetona; iv. ácido piridinaborónico, PdCl2(dppt), Na2COs, DME; v, a, TFA, CH2CI2; b. 70, difsopropilelilamina, DMAP, ACN
Composto 127 0 Composto 3 (300 mg, 1,48 mmol) , preparado de acordo com Bold et al. J. Med. Chem. 1998, 41, 3387-3401, em isopropanoí (10 ml) foi tratado com 4-difluorometoxi-benzaldeído comercialmente disponível (293 pL, 2,21 mmol) a 80 °C durante 4,5 h. A mistura de reação foi arrefecida até a t.a. e purificada (sílica gel, 0 a 80 % de EtOAc/Hex) para dar uma espuma branca (449 mg, 1,26 mmol, 85 %). A uma solução da espuma acima em etanol (10 ml) foi adicionado paládio a 10 %/carbono (40 mg) . A mistura de reação foi agitada sob uma atmosfera de hidrogénio durante 1,5 h, então filtrada através de uma almofada de Celite, concentrada e purificada (sílica gel, 20 a 100 % de
EtOAc/Hexano) para dar uma espuma branca (256 mg, 0,713 mmol, 57 %) . Espetro de massa: 360,0 (M + H)+.
Composto 128 A uma solução de composto 60 (258 mg, 0, 628 mmol) em isopropanol (11 ml) foram adicionados o composto 127 (205 mg, 0,571 mmol) e AcOH (27,4 mg). Após agitação durante 3 dias a 80 °C, mistura de reação foi concentrada e purificada (sílica gel, 10 a 100 % de EtOAc/Hexano) para dar composto 128 (286 mg, 0,371 mmol, 65 %) . Espetro de massa: 771,0 (M + H)+.
Composto 129
Uma solução do composto 128 (286 mg, 0,371 mmol), ácido canforsulfónico (94,8 mg, 0,408 mmol) e dimetoxipropano (0,455 ml, 3,71 mmol) em acetona (5 ml) foi aguecida ao refluxo durante 4,5 h. A mistura de reação foi arrefecida até a t.a., dividida em partições com solução de NaHCCU saturado e EtOAc, extraída com EtOAc (lx), lavada com H2O (lx) e seca em Na2SC>4. Concentrou-se e purificou-se (sílica gel, 0 a 100 % de EtOAc/Hex) para dar um óleo espesso limpo (211 mg, 0,260 mmol, 70 %). Espetro de massa: 811,0 (M+H)+.
Composto 130a A um frasco de processo de Smith foram adicionados o composto 129 (70 mg, 0,088 mmol), ácido 3-piridinaborónico (27 mg, 0,22 mmol), PdCl2 (dppf) (10 mg, 0, 009 mmol), Na2CC>3 a 2 M (0,22 ml) e D ME (1,5 ml) . O frasco foi vedado e aquecido a 120 °C durante 25 min via irradiação de micro-ondas. A mistura de reação foi diluída com EtOAc e lavada com solução de NaHC03 saturado, H2O e seca em Na2S04. Concentrou-se e purificou-se (sílica gel, 20 a 90 % de
EtOAc/Hex) para dar um sólido branco (49 mg, 0,067 mmol, 77 %). Espetro de massa: 740,2 (M + H)+.
Composto 130b A um frasco de processo de Smith foram adicionados o composto 129 (53 mg, 0,064 mmol), ácido 4-piridinaborónico (20 mg, 0,16 mmol), PdCl2 (dppf) (7,5 mg, 0, 009 mmol), Na2CC>3 a 2 M (0,16 ml) e DME (1,0 ml) . O frasco foi vedado e aquecido a 120 °C durante 25 min via irradiação de micro-ondas. A mistura de reação foi diluída com EtOAc e lavada com solução de NaHCCh saturado, H20 e seca em Na2S04. Concentrou-se e purificou-se (sílica gel, 20 a 90 % de
EtOAc/Hex) para dar um sólido branco (35 mg, 0,067 mmol, 74 %) . Espetro de massa: 740,3 (M + H)+.
Exemplo CK A uma solução de composto 130a (34,3 mg, 0,045 mmol) em MeCN/água (1 ml/1 ml) foi adicionado TFA (20 pL) . A mistura foi então agitada durante a noite e concentrada, redissolvida em CH2CI2 (1,6 ml), então TFA (0,4 ml) foi adicionado e a mistura de reação foi agitada durante 1 h, tornada azeotrópica com tolueno e colocada sob alto vácuo durante 1 hora. O resíduo foi dissolvido em acetonitrilo (1,5 ml). Diisopropiletilamina (18 mg, 0,139 mmol) e DMAP (1,1 mg, 0,009 mmol) foram adicionados, seguido de composto 70 (13,7 mg, 0,046 mmol). A mistura de reação foi agitada durante 4 h. Em seguida, concentrou-se, e purificou-se com TLC prep (6 % de MeOH/CH2Cl2) para dar um sólido branco (20 mg, 0,026 mmol, 57 %) . !H RMN (300 MHz, CDCI3) : δ 8,81 (s) , 8,56 (m), 7,86-7,83 (d), 7,50-7,48 (d), 7,39-7,23 (m), 7, 07-7, 00 (m) , 6,89 (s) , 6,73 (s) , 6,48 (s) , 6,23 (s) , 5,69 (d), 5,63 (d), 5,54-5,30 (m) , 5,10-5,01 (m) , 4,91 (s) , 4,15-3,48 (m), 3,05-2,81 (m) , 2,70-2, 60 (m), 2, 04-1,77 (m) , 1,55 (m) , 1,31-1,23 (m) , 0,73-0, 69 (d). Espetro de massa: 756,3 (M + H) + .
Exemplo CL A uma solução de composto 130b (35,3 mg, 0,048 mmol) em MeCN/água (1 ml/1 ml) foi adicionado TFA (20 pL) . A mistura foi então agitada durante a noite e concentrada, redissolvida em CH2C12 (1,6 ml), então TFA (0,4 ml) foi adicionado e a mistura de reação foi agitada durante 1 h, tornada azeotrópica com tolueno e colocada sob alto vácuo durante 1 hora. 0 resíduo foi dissolvido em acetonitrilo (1,5 ml). Diisopropiletilamina (19 mg, 0,143 mmol) e DMAP (1,2 mg, 0,010 mmol) foram adicionados, seguido do composto 70 (14,1 mg, 0,048 mmol) . A mistura de reação foi agitada durante 4 h. Em seguida, concentrou-se, e purificou-se com TLC prep (6 % de MeOH/CH2Cl2) para dar um sólido branco (16,2 mg, 0,026 mmol, 45 %) . RMN (300 MHz, CDC13) : δ 8,62-8,61 (m), 7,56-7,54 (d), 7,48-7,46 (d), 7,38-7,27 (m) , 7, 08-7,02 (m) , 6,85 (s) , 6,73 (s) , 6,48 (s) , 6,23 (s) , 5,69 (d), 5,63 (d), 5,54-5, 30 (m) , 5,10-5,01 (m) , 4,91 (s) , 4,15-3,48 (m), 3,05-2,81 (m) , 2,70-2, 60 (m), 2, 04-1,77 (m) , I, 55 (m) , 1,31-1,23 (m) , 0,74-0, 69 (d). Espetro de massa: 756,4 (M + H) + .
Ensaios Biológicos Utilizados para a Caraterização dos Inibidores de Protease do VIH, Ensaio Enzimático da
Protease do VIH (Ki) O ensaio é a base da deteção fluorométrica da clivagem de substrato hexapeptidico sintético por meio da protease do VIH-1 num tampão de reação definido como foi descrito de forma inicial Μ. V. Toth e G. R. Marshall, Int. J. Peptide Protein Res. 36, 544 (1990)
Substrato: (2-aminobenzoil)Thr-Ile-Nle-(p-nitro)Phe-Gln-Arg
Substrato fornecido por Bachem California, Inc. (Torrance, CA; n° de cat. H-2992)
Enzima: protease do VIH-1 recombinante expressa em E. coli Enzima proporcionada por Bachem California, Inc. (Torrance, CA; n° de cat. H-9040)
Tampão de reação: acetato de amónio 100 mM, pH 5,3
cloreto de sódio 1 M ácido etilenodiaminotetraacético 1 mM ditioutreitol 1 mM dimetilsulfóxido a 10 %
Protocolo de ensaio para a determinação da constante de inibição Ki: 1. Preparar séries de soluções no tampão de reação, que contenham uma quantidade idêntica da enzima (1 a 2,5 nM) e um inibidor de teste a concentrações distintas 2. Transferir as soluções (190 μΐ de cada uma) a uma placa de 96 poços branca
3. Pré-incubar durante 15 min a 37 °C 4. Solubilizar o substrato em dimetilsulfóxido a 100 % a uma concentração de 800 μΜ. Começar a reação adicionando 10 μΐ de substrato 800 μΜ em cada poço (concentração de substrato final de 40 μΜ) 5. Medir as cinéticas da reação em tempo real a 37 °C utilizando o fluorómetro de placas de 96 poços Gemini (Molecular Devices, Sunnyvale, CA) a λ(Εχ) = 330 nm e λ(Em) = 420 nm 6. Determinar as velocidades iniciais das reações com distintas concentrações de inibidor e calcular o valor de Ki (em unidades de concentração picomolar) utilizando o programa EnzFitter (Biosoft, Cambridge, R.U.) de acordo com um algoritmo para a inibição competitiva de união forte que é descrito por Ermolieff J., Lin X., e Tang J., Biochemistry 36, 12364 (1997)
Ensaio de Cultura Celular Anti-VIH-1 (CEso)
Este ensaio é a base da quantificação do efeito citopático associado ao VIH-1 por meio da deteção colorimétrica da viabilidade de células infetadas com virus na presença ou ausência dos inibidores testados. A morte celular que induz o VIH-1 foi determinada utilizando um substrato metabólico 2,3-bis(2-metoxi-4-nitro-5- sulfofenil)-2H-tetrazolio-5-carboxanilida (XTT), o qual se converte num produto com caraterísticas de absorção específicas somente em células intatas, como é descrito por Weislow OS, Kiser R, Fine DL, Bader J, Shoemaker RH e Boyd MR, J. Natl. Cancer Inst. 81,577 (1989).
Protocolo de ensaio para a determinação da CEso: 1. Manter as células MT2 em meio RPMI-1640 complementado com soro fetal bovino a 5 % e antibióticos. 2. Infetar as células com a estirpe de tipo selvagem IIIB do VIH-1 (Advanced Biotechnologies, Columbia, MD) durante 3 horas a 37 °C, utilizando o inoculo virai correspondente a uma multiplicidade de infeção igual a 0, 01. 3. Preparar um conjunto de soluções que contenham diversas concentrações do inibidor testado, preparando diluições em série com fator 5 em placas de 96 poços (100 μΐ/poço). Distribuir as células infetadas na placa de 96 poços (20.000 células em 100 μΐ/poço) . Incluir amostras com células de controlo infetadas não tratadas e infetadas de forma simulada não tratadas. 4. Incubar as células durante 5 dias a 37 °C. 5. Preparar a solução de XTT (6 ml por placa de ensaio) a uma concentração de 2 mg/ml numa solução salina tamponada com fosfato pH 7,4. Aquecer a solução num banho de água durante 5 min a 55 °C. Adicionar 50 μΐ de metassulfato de N-metilfenazónio (5 pg/ml) por 6 ml de solução de XTT. 6. Retirar 100 μΐ de meio de cada poço da placa de ensaio. 7. Adicionar 100 μΐ da solução de substrato XTT por poço e incubar a 37 °C durante 45 a 60 min num incubador de C02. 8. Adicionar 20 μΐ de Triton X-100 a 2 % por poço para inativar o vírus. 9. Ler a absorvância a 450 nm subtraendo a absorvância de fundo a 650 nm. 10. Representar a absorvância percentual em comparação com o controlo não tratado e estimar o valor da CEso como a concentração de fármaco que da como resultado uma proteção do 50 % das células infetadas.
Ensaio de cultura celular de citotoxicidade (CC50) : O ensaio baseia-se na avaliação do efeito citotóxico dos compostos testados utilizando um substrato metabólico 2,3-bis(2-metoxi-4-nitro-5-sulfofenil)-2H-tetrazolio-5-carboxanilida (XTT) como foi descrito por Weislow OS, Kiser R, Fina DL, Bader J, Shoemaker RH e Boyd MR, J. Natl. Cancer Inst. 81,577 (1989).
Protocolo de ensaio para a determinação da CCso: 1. Manter as células MT2 em meio RPMI-1640 complementado com soro fetal bovino a 5 % e antibióticos. 2. Preparar um conjunto de soluções que contenham diversas concentrações do inibidor testado, preparando diluições em série com fator 5 em placa de 96 poços (100 μΐ/poço). Distribuir as células na placa de 96 poços (20.000 células em 100 μΐ/poço). Como controlo incluir amostras com células não tratadas. 3. Incubar as células durante 5 dias a 37 °C. 4. Preparar a solução de XTT (6 ml por placa de ensaio) no escuro a uma concentração de 2 mg/ml numa solução salina tamponada com fosfato pH 7,4. Aquecer a solução num banho de água a 55 °C durante 5 min. Adicionar 50 μΐ de metassulfato de N-metilfenazónio (5 pg/ml) por 6 ml de solução de XTT. 5. Retirar 100 μΐ de meio de cada poço da placa de ensaio e adicionar 100 μΐ de solução de substrato XTT por poço. Incubar a 37 °C durante 45 a 60 min num incubador de CO2. 6. Adicionar 20 μΐ de Triton X-100 a 2 % por poço para interromper a conversão metabólica do XTT. 7. Ler a absorvância a 450 nm subtraendo o fundo a 650 nm.
Representar a absorvância percentual em comparação com o controlo não tratado e estimar o valor da CC50 como a concentração de fármaco que da como resultado uma inibição do 50 % do crescimento celular. Considerar a absorvância como sendo diretamente proporcional ao crescimento celular.
Os compostos da presente invenção têm valores de K± (pM) no intervalo de aproximadamente 1-1300, ou aproximadamente 1-1000, aproximadamente 1-500, aproximadamente 1-200, ou de menos de aproximadamente 30. Por exemplo, os Exemplos C, J, Μ, N, Q, T, V, X, Z, AN, AQ, AS, AT, AX, e AY têm valores de K± de menos de aproximadamente 30.
DOCUMENTOS REFERIDOS NA DESCRIÇÃO
Esta lista de documentos referidos pelo autor do presente pedido de patente foi elaborada apenas para informação do leitor. Não é parte integrante do documento de patente europeia. Não obstante o cuidado na sua elaboração, o IEP não assume qualquer responsabilidade por eventuais erros ou omissões.
Documentos de patente referidos na descrição • US 4816570 A [0052] • US 4968788 A [0052] • US 5663159 A [0052] • US 5792756 A [0052] • EP 486948 A2, Kempf [0139] • WO 03078438 AI [0207] • WO 9414436 AI [0268]
Documentos de não patente citados na descrição • PAQUETTE, LEO A. Principles of Modern Heterocyclic Chemistry. W.A. Benjamin, 1968 [0030] • The Chemistry of Heterocyclic Compounds, A Series of
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Lisboa, 2 de Junho de 2016

Claims (8)

  1. REIVINDICAÇÕES
    1. Um composto selecionado a partir do grupo que consiste em:
    e
    ou um sal farmaceuticamente aceitável, solvato, e/ou éster do mesmo. 2. 0 composto de acordo com a reivindicação 1, selecionado a partir do grupo que consiste em:
    ou um sal farmaceuticamente aceitável, solvato, e/ ou éster do mesmo.
  2. 3. Uma composição farmacêutica que compreende: uma quantidade terapeuticamente eficaz de pelo menos um composto de acordo com a reivindicação 1 ou 2, ou um sal farmaceuticamente aceitável, solvato, e/ou éster do mesmo, e um veiculo farmaceuticamente aceitável ou excipiente.
  3. 4. A composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 3, que compreende ainda pelo menos um agente ativo adicional que é selecionado a partir do grupo que consiste em: compostos que inibem a protease do VIH, inibidores não nucleosídicos do VIH de transcritase reversa, inibidores nucleosídicos do VIH de transcritase reversa, inibidores nucleotídicos do VIH de transcritase reversa, inibidores da integrase do VIH, inibidores de gp4, inibidores de CXCR4, inibidores de entrada, inibidores de gpl20, inibidores de G6PD e NADH-oxidase, inibidores de CCR5, outros fármacos para tratar VIH, e misturas dos mesmos.
  4. 5. A composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 4, em que: (1) os ditos inibidores de protease do VIH são selecionados a partir do grupo que consiste em amprenavir, atazanavir, fosamprenavir, indinavir, lopinavir, ritonavir, nelfinavir, saquinavir, tipranavir, brecanavir, darunavir, TMC-126, TMC-114, mozenavir (DMP-450), JE-2147 (AG1776), L-756423, RO0334649, KNI-272, DPC-681, DPC-684, GW640385X, DG17, PPL-100, DG35, e AG 1859; (2) os ditos inibidores não nucleosidicos do VIH de transcritase reversa são selecionados a partir do grupo que consiste em capravirina, emivirina, delaviridina, efavirenz, nevirapina, (+) calanolida A, etravirina, GW 5 634, DPC-083, DPC-961, DPC-963, MIV-150, TMC-120, TMC-278 (rilpivireno) , efavirenz, BILR 355 BS, VRX 840773, UK-453061, e RDEA806; (3) os ditos inibidores nucleosidicos do VIH de transcritase reversa são selecionados a partir do grupo que consiste em zidovudina, emtricitabina, didanosina, estavudina, zalcitabina, lamivudina, abacavir, amdoxovir, elvucitabina, alovudina, MIV- 210, racivir (±-FTC), D-d4FC, emtricitabina, fosfazida, fozivudina tidoxil, apricitibina (AVX754), GS-7340, amdoxovir, KP-1461, e fosalvudina tidoxil (anteriormente HDP 99.0003); (4) os ditos inibidores nucleotidicos do VIH de transcritase reversa são selecionados a partir do grupo que consiste em tenofovir e adefovir; (5) os ditos inibidores da integrase do VIH são selecionados a partir do grupo que consiste em curcumina, derivados de curcumina, ácido chicórico, derivados de ácido chicórico, ácido 3,5-dicafeoilquínico, derivados de ácido 3,5-dicafeoilquinico, ácido aurintricarboxilico, derivados de ácido aurintricarboxilico, éster fenetilico de ácido cafeico, derivados de éster fenetilico de ácido cafeico, tirfostina, derivados de tirfostina, quercetina, derivados de quercetina, S-1360, zintevir (AR- 177), elvitegravir, L-870812, e L-870810, MK-0518 (raltegravir), BMS-538158, GSK364735C, BMS-707035, MK- 2048, e BA Oil; (6) o dito inibidor de gp41 é selecionado a partir do grupo gue consiste em enfuvirtida, sifuvirtida, FB006M, e TRI-1144; (7) o dito inibidor de CXCR4 é AMD-070; (8) o dito inibidor de entrada é SP01A; (9) o dito inibidor de gpl20 é BMS-488043 ou BlockAide/ CR; (10) o dito inibidor de G6PD e NADH-oxidase é imunitina; (11) os ditos inibidores de CCR5 são selecionados a partir do grupo gue consiste em aplaviroc, vicriviroc, maraviroc, PRO-140, INCB15050, PF-232798 (Pfizer), e CCR5mAb004; e (12) os ditos outros fármacos para tratar VIH são selecionados a partir do grupo que consiste em BAS-100, SPI-452, REP 9, SP- 01A, TNX-355, DES 6, ODN-93, ODN-112, VGV-1, PA-457 (bevirimat), Ampligen, HRG214, Cytolin, VGX-410, KD-247, AMZ 0026, CYT 99007A-221 VIH, DEBIO-025, BAY 50-4798, MDX010 (ipilimumab), PBS 119, ALG 889, e PA-1050040 (PA—040).
  5. 6. Um composto de acordo com a reivindicação 1 ou 2, ou um sal farmaceuticamente aceitável, solvato, e/ou éster do mesmo, para utilização no tratamento de infeção por VIH.
  6. 7. O composto para utilização de acordo com a reivindicação 6 que compreende ainda a utilização de pelo menos um agente adicional como foi definido nas reivindicações 4 e 5.
  7. 8. O composto para utilização de acordo com a reivindicação 7, em que o pelo menos um agente adicional é administrado simultaneamente ou sequencialmente com um composto de acordo com a reivindicação 1 ou 2, ou um sal farmaceuticamente aceitável, solvato, e/ou éster do mesmo.
  8. 9. Um composto de acordo com a reivindicação 1 ou 2, ou um sal farmaceuticamente aceitável, solvato, e/ou éster do mesmo, para utilização em terapêutica. Lisboa, 2 de Junho de 2016
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