PT1924253E - Compostos nitro cíclicos, composições farmacêuticas que os contêm e suas utilizações - Google Patents

Description

DESCRIÇÃO "Compostos nitro cíclicos, composições farmacêuticas que os contêm e suas utilizações"

CAMPO DA INVENÇÃO A presente invenção refere-se genericamente a composições farmacêuticas de compostos nitro cíclicos e à utilização de compostos nitro cíclicos e de composições farmacêuticas que os contêm para tratar ou prevenir doenças caracterizadas por proliferação celular anormal, tais como cancro.

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO A proliferação celular anormal é um sintoma característico de cancro. Além disso, a proliferação celular anormal foi implicada em numerosas outras doenças (e.g., doenças cardiovasculares, doenças inflamatórias tais como artrite reumatóide, retinopatia diabética, etc.). Apesar de terem sido desenvolvidos tratamentos para prevenir a proliferação aberrante de células, um problema significativo com a maioria das terapias existentes é a distinção selectiva entre proliferação celular normal e anormal. A radioterapia é uma abordagem promissora para atingir selectivamente a proliferação celular anormal. Foram descritos vários radiossensibilizadores diferentes na especialidade e incluem tióis, nitroimidazoles e compostos de metal e texafirina (Ver e.g., Rosenthal et ai., Clin. Cancer. Res., 1999, 739). Os problemas significativos com as abordagens de radiossensibilização existentes são (1) a formação de produtos secundários tóxicos derivados dos radiossensibilizadores, o que tem limitado a sua utilidade na terapia do cancro; e (2) a obtenção de uma densidade suficientemente elevada de radicais livres que seja eficaz, abaixo da toxicidade limitativa da dose.

Outra abordagem popular para atingir selectivamente a proliferação celular anormal é o tratamento com compostos biorredutores, os quais são activados selectivamente num ambiente redutor. Uma vez que muitos cancros contêm tipicamente regiões de baixa tensão de oxigénio (i.e., hipóxia), compostos com baixos potenciais redox (i.e., compostos biorredutores) podem ser selectivamente activados no ambiente redutor de células tumorais sem activação externa.

Deste modo, são necessários novos compostos para explorar completamente o tratamento ou prevenção da proliferação celular anormal. Estes novos compostos podem ter actividade radioterapêutica ou actividade biorredutora. Esses compostos podem ser eficazes no tratamento ou prevenção de várias doenças associadas com proliferação celular anormal, tais como cancro, sem formação de produtos secundários tóxicos.

SUMÁRIO DA INVENÇÃO A presente invenção satisfaz esta e outras necessidades ao proporcionar compostos nitro cíclicos, composições farmacêuticas de compostos nitro cíclicos que podem ser utilizadas para tratar ou prevenir doenças associadas com a proliferação celular anormal. A invenção é descrita nas reivindicações.

BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS A Figura 1 ilustra a dependência em relação à dose e àa linha celular, da produção de ERO em células tumorais na presença de ABDNAZ; A Figura 2 ilustra a produção de ERO em células tumorais HT29 na presença de ABDNAZ irradiado; A Figura 3 ilustra a produção de ERO em células tumorais SCO VII na presença de ABDNAZ irradiado; A Figura 4 ilustra a inibição da proliferação de células HL60 transfectadas com bcl-2 e com vector, por ABDNAZ; A Figura 5 ilustra a indução de apoptose de células HL60 transfectadas com bcl-2 e com vector, por ABDNAZ; A Figura 6 ilustra a apoptose e perfil de ciclo celular de neo células HL60, após exposição a ABDNAZ; A Figura 7 ilustra a apoptose e o perfil de ciclo celular de células HL60 bcl-2, após exposição a ABDNAZ; e A Figura 8 ilustra a inibição da expressão de bcl-2 em células HL 60. DESCRIÇÃO DETALHADA DAS CONCRETIZAÇÕES PREFERIDAS Definições "Alquilo", por si só ou como parte de outro substituinte, refere-se a um radical hidrocarboneto monovalente, saturado ou insaturado, ramificado, de cadeia linear ou cíclico, derivado pela remoção de um átomo de hidrogénio de um único átomo de carbono de um alcano, alceno ou alcino parente. Os grupos alquilo típicos incluem, mas não estão limitados a, metilo; etilos tais como etanilo, etenilo, etinilo; propilos tais como propan-l-ilo, propan-2-ilo, ciclopropan-l-ilo, prop-l-en-1-ilo, prop-l-en-2-ilo, prop-2-en-l-ilo (alilo) , cicloprop-l-en- 1- ilo; cicloprop-2-en-l-ilo, prop-l-in-l-ilo, prop-2-in-l-ilo, etc.; butilos tais como butan-l-ilo, butan-2-ilo, 2-metilpropan-l-ilo, 2-metilpropan-2-ilo, ciclobutan-l-ilo, but-l-en-l-ilo, but-l-en-2-ilo, 2-metilprop-l-en-l-ilo, but- 2- en-l-ilo, but-2-en-2-ilo, buta-1,3-dien-l-ilo, buta-1,3- dien-2-ilo, ciclobut-l-en-l-ilo, ciclobut-l-en-3-ilo, ciclobuta-1,3-dien-l-ilo, but-l-in-l-ilo, but-l-in-3-ilo, but-3-in-l-ilo, etc. É especificamente pretendido que o termo "alquilo" inclua grupos com qualquer grau ou nível de saturação, i.e., grupos que tenham exclusivamente ligações carbono-carbono simples, grupos que tenham uma ou mais ligações carbono-carbono duplas, grupos que tenham uma ou mais ligações carbono-carbono triplas e grupos que tenham misturas de ligações carbono-carbono simples, duplas e triplas. Quando é pretendido um nível específico de saturação, são utilizadas as expressões "alcanilo", "alcenilo" e "alcinilo. Em certas concretizações, um grupo alquilo compreende de 1 a 20 átomos de carbono. Noutras concretizações, um grupo alquilo compreende 1 a 10 átomos de carbono. Ainda noutras concretizações, um grupo alquilo compreende de 1 a 6 átomos de carbono. "Alcanilo", por si só ou como parte de outro substituinte, refere-se a um radical alquilo saturado, ramificado, de cadeia linear ou cíclico, derivado pela remoção de um único átomo de hidrogénio de um alcano parente. Grupos alcanilo típicos incluem, mas não estão limitados a, metanilo; etanilo; propanilos tais como propan-l-ilo, propan-2-ilo (isopropilo), ciclopropan-l-ilo, etc.; butanilos tais como butan-l-ilo, butan-2-ilo (sec-butilo), 2-metilpropan-l-ilo (isobutilo), 2-metilpropan-2-ilo (t-butilo), ciclobutan-l-ilo, etc. "Alcenilo," por si só ou como parte de outro substituinte, refere-se a um radical alquilo insaturado, ramificado, de cadeia linear ou cíclico que tem pelo menos uma ligação carbono-carbono dupla, derivado pela remoção de um átomo de hidrogénio de um único átomo de carbono de um alceno parente. 0 grupo pode ter a conformação cis ou trans em torno da(s) ligação (ões) dupla (s) . Os grupos alcenilo típicos incluem, mas não estão limitados a, etenilo; propenilos tais como prop-1-en-l-ilo, prop-l-en-2-ilo, prop-2-en-l-il (alilo), prop-2-en-2-ilo, cicloprop-l-en-l-ilo; cicloprop-2-en-l-ilo; butenilos tais como but-l-en-l-ilo, but-l-en-2-ilo, 2-metilprop-l-en-l-ilo, but-2-en-l-ilo, but-2-en-l-ilo, but-2-en-2-ilo, buta-1,3-dien-l-ilo, buta-1,3-dien-2-ilo, ciclobut-l-en-l-ilo, ciclobut-l-en-3-ilo, ciclobuta-1,3-dien-l-ilo, etc. "Alcinilo", por si só ou como parte de outro substituinte, refere-se a um radical alquilo insaturado, ramificado, de cadeia linear ou cíclico que tem pelo menos uma ligação carbono-carbono tripla, derivado pela remoção de um átomo de hidrogénio de um único átomo de carbono de um alcino parente. Os grupos alcinilo típicos incluem, mas não estão limitados a, etinilo; propinilos tais como prop-l-in-l-ilo, prop-2-in-l-ilo, etc.; butinilos tais como but-l-in-l-ilo, but-l-in-3-ilo, but-3-in-l-ilo, etc.. "Acilo", por si só ou como parte de outro substituinte, refere-se a um radical -C(0)R30, em que R30 é hidrogénio, alquilo, cicloalquilo, ciclo-heteroalquilo, arilo, arilalquilo, heteroalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, como definidos aqui. Exemplos representativos incluem, mas não estão limitados a, formilo, acetilo, ciclohexilcarbonilo, ciclohexilmetilcarbonilo, benzoilo, benzilcarbonilo. "Alcoxicarbonilo", por si só ou como parte de outro substituinte, refere-se a um radical -C(0)OR31 em que R31 representa um grupo alquilo ou cicloalquilo, como definidos aqui. Exemplos representativos incluem, mas não estão limitados a, metoxicarbonilo, etoxicarbonilo, propoxicarbonilo, butoxicarbonilo, ciclohexiloxicarbonilo. "Arilo", por si só ou como parte de outro substituinte, refere-se a um grupo hidrocarboneto aromático monovalente, derivado pela remoção de um átomo de hidrogénio de um único átomo de carbono de um sistema de anéis aromáticos parente Os grupos arilo típicos incluem, mas não estão limitados a, grupos derivados de aceantrileno, acenaftileno, acefenantrileno, antraceno, azuleno, benzeno, criseno, coroneno, fluoranteno, fluoreno, hexaceno, hexafeno, hexaleno, as-indaceno, s-indaceno, indano, indeno, naftaleno, octaceno, octafeno, octaleno, ovaleno, penta-2,4-dieno, pentaceno, pentaleno, pentafeno, perileno, fenaleno, fenantreno, piceno, pleiadeno, pireno, pirantreno, rubiceno, trifenileno, trinaftaleno. Em certas concretizações, um grupo arilo compreende de 6 a 20 átomos de carbono. Noutras concretizações, um grupo arilo compreende entre 6 e 12 átomos de carbono. "Arilalquilo", por si só ou como parte de outro substituinte, refere-se a um grupo alquilo acíclico em que um dos átomos de hidrogénio ligados a um átomo de carbono, tipicamente um átomo de carbono terminal ou sp3, é substituído por um grupo arilo. Os grupos arilalquilo típicos incluem, mas não estão limitados a, benzilo, 2-feniletan-l-ilo, 2-fenileten-l-ilo, naftilmetilo, 2-naftiletan-l-ilo, 2-naftileten-l-ilo, naftobenzilo, 2-naftofeniletan-l-ilo. Quando são pretendidas porções alquilo específicas, é utilizada a nomenclatura arilalcanilo, arilalcenilo e/ou arilalcinilo. Em certas concretizações, um grupo arilalquilo é arilalquilo (C6-C30) , e.g., a porção alcanilo, alcenilo ou alcinilo do grupo arilalquilo é (C1-C10) e a porção arilo é (C6— C20) . Noutras concretizações, um grupo arilalquilo é arilalquilo (C6-C20) , e.g., a porção alcanilo, alcenilo ou alcinilo do grupo arilalquilo é (Ci-Cs) e a porção arilo é (C6— C12) . "Heteroalquilo,_Heteroalcanilo,_Heteroalcenilo_e

Heteroalcinilo", por si sós ou como parte de outro substituinte, referem-se a grupos alquilo, alcanilo, alcenilo e alcinilo, respectivamente, em que um ou mais dos átomos de carbono (e quaisquer átomos de hidrogénio associados) são independentemente substituídos pelos mesmos ou diferentes grupos heteroatómicos. Os grupos heteroatómicos típicos que podem ser incluídos nestes grupos incluem, mas não estão limitados a, -0-, -S-, -0-0-, -S-S-, -0-S-, -NR34R35-, =N-N=, -N-N-, -N=N-NR35R37, -PR38-, -P(0)2-, -POR39-, -0-P (0) 2-, -S0-, -S02 —, -SnR40R41-, em que R34, R35, R36, R37, R38, R39, R40 e R41 são independentemente hidrogénio, alquilo, alquilo substituído, arilo, arilo substituído, arilalquilo, arilalquilo substituído, cicloalquilo, cicloalquilo substituído, ciclo-heteroalquilo, ciclo-heteroalquilo substituído, heteroalquilo, heteroalquilo substituído, heteroarilo, heteroarilo substituído, heteroarilalquilo ou heteroarilalquilo substituído. "Heteroarilo", por si só ou como parte de outro substituinte, refere-se a um radical monovalente heteroaromático, derivado pela remoção de um átomo de hidrogénio de um único átomo de um sistema de anéis heteroaromático parente. Os grupos heteroarilo típicos incluem, mas não estão limitados a, grupos derivados de acridina, arsindole, carbazole, -carbolina, cromano, cromeno, cinolina, furano, imidazole, indazole, índole, indolina, indolizina, isobenzofurano, isocromeno, isoindole, isoindolina, isoquinolina, isotiazole, isoxazole, naftiridina, oxadiazole, oxazole, perimidina, fenantridina, fenantrolina, fenazina, ftalazina, pteridina, purina, pirano, pirazina, pirazole, piridazina, piridina, pirimidina, pirrole, pirrolizina, quinazolina, quinolina, quinolizina, quinoxalina, tetrazole, tiadiazole, tiazole, tiofeno, triazole, xanteno. Em certas concretizações, o grupo heteroarilo é um grupo heteroarilo com 5-20 membros. Noutras concretizações, o grupo heteroarilo é um heteroarilo com 5-10 membros. Em certas concretizações, os grupos heteroarilo incluem os derivados de tiofeno, pirrole, benzotiofeno, benzofurano, indole, piridina, quinolina, imidazole, oxazole e pirazina. "Heteroarilalquilo", por si só ou como parte de outro substituinte, refere-se a um grupo alquilo aciclico em que um dos átomos de hidrogénio ligados a um átomo de carbono, tipicamente um átomo de carbono terminal ou sp3, é substituído por um grupo heteroarilo. Quando são pretendidas porções alquilo específicas, é utilizada a nomenclatura heteroarilalcanilo, heteroarilalcenilo e/ou heterorilalcinilo. Em certas concretizações o grupo heteroarilalquilo é um heteroarilalquilo de 6-30 membros, e.g., a porção alcanilo, alcenilo ou alcinilo do heteroarilalquilo tem 1-10 membros e a porção heteroarilo é um heteroarilo de 5-20 membros. Noutras concretizações, o grupo heteroarilalquilo é um heteroarilalquilo de 6-20 membros, e.g., a porção alcanilo, alcenilo ou alcinilo do heteroarilalquilo tem 1-8 membros e a porção heteroarilo é um heteroarilo de 5-12 membros. "Sistema de Anéis Aromático Parente", por si só ou como parte de outro substituinte, refere-se a um sistema de anéis insaturado cíclico ou policíclico que tem um sistema de electrões π conjugado. Especificamente incluídos na definição de "Sistema de anéis aromático parente" estão os sistemas de anéis fundidos em que um ou mais dos anéis são aromáticos e um ou mais dos anéis são saturados ou insaturados, tais como por exemplo, fluoreno, indano, indeno, fenaleno, etc. Sistemas de anéis aromáticos parentes típicos incluem, mas não estão limitados a, aceantrileno, acenaftileno, acefenantrileno, antraceno, azuleno, benzeno, criseno, coroneno, fluoranteno, fluoreno, hexaceno, hexafeno, hexaleno, as-indaceno, s-indaceno, indano, indeno, naftaleno, octaceno, octafeno, octaleno, ovaleno, penta-2,4-dieno, pentaceno, pentaleno, pentafeno, perileno, fenaleno, fenantreno, piceno, pleiadeno, pireno, pirantreno, rubiceno, trifenileno, trinaftaleno. "Sistema de Anéis Heteroaromático Parente", por si só ou como parte de outro substituinte, refere-se a um sistema de anéis aromático parente em que um ou mais átomos de carbono (e quaisquer átomos de hidrogénio associados) são substituídos independentemente pelo mesmo ou diferentes heteroátomos. Os heteroátomos típicos para substituir os átomos de carbono incluem, mas não estão limitados a, N, P, 0, S, Si, etc. Estão especificamente incluídos na definição de "sistemas de anéis heteroaromáticos parentes" os sistemas fundidos em que um ou mais anéis são aromáticos e um ou mais dos anéis são saturados ou insaturados, tais como por exemplo, arsindole, benzodioxano, benzofurano, cromano, cromeno, indole, indolina, xanteno, etc. Sistemas de anéis heteroaromáticos parentes típicos incluem, mas não estão limitados a, arsindole, carbazole, -carbolina, cromano, cromeno, cinolina, furano, imidazole, indazole, indole, indolina, indolizina, isobenzofurano, isocromeno, isoindole, isoindolina, isoquinolina, isotiazole, isoxazole, naftiridina, oxadiazole, oxazole, perimidina, fenantridina, fenantrolina, fenazina, ftalazina, pteridina, purina, pirano, pirazina, pirazole, piridazina, piridina, pirimidina, pirrole, pirrolizina, quinazolina, quinolina, quinolizina, quinoxalina, tetrazole, tiadiazole, tiazole, tiofeno, triazole, xanteno. "Sal farmaceuticamente aceitável" refere-se a um sal de um composto O-nitro, que é farmaceuticamente aceitável e possui a actividade farmacológica desejada do composto parente. Esses sais: (1) sais de adição de ácido, formados com ácidos inorgânicos tais como ácido clorídrico, ácido bromídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido fosfórico; ou formados com ácidos orgânicos tais como ácido acético, ácido propiónico, ácido hexanóico, ácido ciclopentanopropiónico, ácido glicólico, ácido pirúvico, ácido láctico, ácido malónico, ácido succínico, ácido málico, ácido maleico, ácido fumárico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido benzóico, ácido 3—(4— hidroxibenzoí1)benzóico, ácido cinâmico, ácido mandélico, ácido metanossulfónico, ácido etanossulfónico, ácido 1,2-etanodissulfónico, ácido 2-hidroxietanossulfónico, ácido benzenossulfónico, ácido 4-clorobenzenossulfónico, ácido 2-naftalenossulfónico, ácido 4-toluenossulfónico, ácido canforsulfónico, ácido 4-metilbiciclo[2.2.2]-oct-2-eno-l- carboxílico, ácido glucoheptónico, ácido 3-fenilpropiónico, ácido trimetilacético, ácido t-butilacético, ácido laurilsulfúrico, ácido glucónico, ácido glutâmico, ácido hidroxinaftóico, ácido salicílico, ácido esteárico, ácido mucónico; ou (2) sais formados quando um protão ácido presente no composto parente é substituído por um ião amónio, um ião metálico, e.g., um ião de metal alcalino (e.g., sódio ou potássio), um ião alcalino-terroso (e.g., cálcio ou magnésio), ou um ião de alumínio; ou coordenados com uma base orgânica tal como etanolamina, dietanolamina, trietanolamina, N-metilglucamina, morfolina, piperidina, dimetilamina, dietilamina. São também incluídos os sais de aminoácidos tais como arginatos e semelhantes, e sais de ácidos orgânicos tais como ácidos glucurmico ou galactunórico. "Veículo farmaceuticamente aceitável" refere-se a um diluente, adjuvante, excipiente ou veículo com o qual um composto O-nitro é administrado. "Paciente" inclui humanos e outros mamíferos. "Fosfonilo", por si só ou como parte de outro substituinte, refere-se a um radical -P (0) (OR32) 2, em que cada R32 é independentemente hidrogénio, alquilo, cicloalquilo, ciclo-heteroalquilo, arilo, arilalquilo, heteroalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, como definidos aqui. "Prevenir" ou "prevenção" refere-se a uma redução do risco de adquirir uma doença ou perturbação (i.e., fazer com que pelo menos um dos sintomas clínicos da doença não se desenvolva num paciente que possa estar exposto a, ou predisposto, à doença mas que ainda não experimenta ou exibe sintomas da doença). "Substituído" refere-se a um grupo em que um ou mais átomos de hidrogénio são substituídos independentemente com o mesmo ou diferentes substituinte (s) . Substituintes típicos incluem, mas não estão limitados a, -M, -R50, -0-, =0, -OR50, -SR61, -S“, =S, -NR60R61, =NR60, -CF3, -CN, -OCN, -SON, -NO, -NO2, -ONO2, =N2, -N3, -S(0)20-, -S(0)20H, -S(0)2R60, -0S(02)0-, - OS(0)2R60, -P (0)(0-)2, -P (0) (OR60) (0-) , -OP (0) (OR60) (OR61) , C (0) R50, -C(S)R60, -C (0) OR50, -c (0) NR50R51,-c (0) 0-, -C(S)OR50, - NR52C (0) NR50R51, -NR52C (S) NR50R51, -NR52C (NR53) NR50R51 e C (NR62) NR60R61 em que M é independentemente um halogéneo; R60, R51, R62 e R63 são independentemente hidrogénio, alquilo, alquilo substituído, alcoxi, alcoxi substituído, cicloalquilo, cicloalquilo substituído, ciclo-heteroalquilo, ciclo-heteroalquilo substituído, arilo, arilo substituído, heteroarilo ou heteroarilo substituído, ou opcionalmente R60 e R61, em conjunto com o átomo de azoto ao qual estão ligados, formam um anel ciclo-heteroalquilo ou ciclo-heteroalquilo substituído; e R64 e R65 são independentemente hidrogénio, alquilo, alquilo substituído, arilo, cicloalquilo, cicloalquilo substituído, ciclo-heteroalquilo, ciclo-heteroalquilo substituído, arilo, arilo substituído, heteroarilo ou heteroarilo substituído, ou opcionalmente R64 e R65 em conjunto com o átomo de azoto ao qual estão ligados formam um anel ciclo-heteroalquilo ou ciclo-heteroalquilo substituído. Em certas concretizações, os substituintes incluem -M, -R60, =0, -OR60, -SR60, -S“, =S, -NR60R61 =NR60, -CF3, -CN, -OCN, -SCN, -NO, -N02, -0N02, =N2, -N3, -S (0) 2R50, -0S(02)0-, -0S(0)2R60, -P(0)(0-)2, -P (0) (OR60) (0-) , -OP (0) (OR60) (OR61) , - C (0) R60, -C(S)R60, -C (0) OR60, -c (0) NR60R61,-c (0) 0-, NR62C (0) NR60R61, em que R60, R61 e R62 são como definidos acima. Noutras concretizações, os substituintes incluem -M, -R60, =0, -OR60, -SR60, -NR60R61, -CF3, -CN, -N02, -0N02, -S (0) 2R60, -P (0) (OR60) (0-) , -OP (0) (OR60) (OR61) , -C(0)R60, -C(0)0R60, C(O)NR60R61 e -C(0)0_ em que R60, R61 e R62 são como definidos acima. Ainda noutras concretizações, os substituintes incluem -M, -R60, =0, -OR60, -SR60, -NR60R61, -CF3, -CN, -N02, - 0N02, -S(0)2R60, -0P (0) (OR60) (OR61) , -C (0) R60, -C (0) OR60 e -C(0)Cr, em que R60, R61 e R62 são como definidos acima. " Sulfonilo", por si só ou como parte de outro substituinte, refere-se a um radical -S(0)2R33, em que cada R33 é independentemente hidrogénio, alquilo, cicloalquilo, ciclo-heteroalquilo, arilo, arilalquilo, heteroalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo como definidos aqui. "Tratar" ou "tratamento" de qualquer doença ou perturbação referem-se, em certas concretizações, ao melhoramento da doença ou perturbação (i.e., parando ou reduzindo o desenvolvimento da doença ou, pelo menos, de um dos seus sintomas clínicos). Noutras concretizações "tratar" ou "tratamento" referem-se ao melhoramento de pelo menos um parâmetro físico, que pode não ser discernível pelo paciente. Ainda noutras concretizações, "tratar" ou "tratamento" referem-se a inibir a doença ou perturbação, fisicamente (e.g., estabilização ou erradicação de um sintoma discernível), fisiologicamente, (e.g., estabilização ou erradicação de um parâmetro físico), ou ambos. Ainda noutras concretizações, "tratar" ou "tratamento" referem-se a atrasar o início da doença ou perturbação. "Quantidade terapeuticamente eficaz" significa a quantidade de um composto que, quando administrada a um paciente para tratar ou prevenir uma doença, é suficiente para efectuar esse tratamento ou prevenção da doença. A "quantidade terapeuticamente eficaz" variará dependendo do composto, da doença e da sua severidade e da idade, peso, etc., do paciente a ser tratado.

Será agora feita referência em detalhe a concretizações da invenção. Apesar da invenção ser descrita em conjunção com estas concretizações, será entendido que não se pretende limitar a invenção a essas concretizações preferidas. Pelo contrário, pretende-se cobrir alternativas, modificações e equivalentes que podem ser incluídos no espírito e âmbito da invenção, como definida pelas reivindicações apensas. "Sal farmaceuticamente aceitável" refere-se a um sal de um composto nitro cíclico, que é farmaceuticamente aceitável e possui a actividade farmacológica desejada do composto parente. Esses sais: (1) sais de adição de ácido, formados com ácidos inorgânicos tais como ácido clorídrico, ácido bromídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido fosfórico; ou formados com ácidos orgânicos tais como ácido acético, ácido propiónico, ácido hexanóico, ácido ciclopentanopropiónico, ácido glicólico, ácido pirúvico, ácido láctico, ácido malónico, ácido succínico, ácido málico, ácido maleico, ácido fumárico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido benzóico, ácido 3-(4-hidroxibenzoíl)benzóico, ácido cinâmico, ácido mandélico, ácido metanossulfónico, ácido etanossulfónico, ácido 1,2-etanodissulfónico, ácido 2-hidroxietanossulfónico, ácido benzenossulfónico, ácido 4-clorobenzenossulfónico, ácido 2-naftalenossulfónico, ácido 4-toluenossulfónico, ácido canforsulfónico, ácido 4-metilbiciclo[2.2.2]-oct-2-eno-l-carboxílico, ácido glucoheptónico, ácido 3-fenilpropiónico, ácido trimetilacético, ácido t-butilacético, ácido laurilsulfúrico, ácido glucónico, ácido glutâmico, ácido hidroxinaftóico, ácido salicílico, ácido esteárico, ácido mucónico; ou (2) sais formados quando um protão ácido presente no composto parente é substituído por um ião amónio, um ião metálico, e.g., um ião de metal alcalino (e.g., sódio ou potássio), um ião alcalino-terroso (e.g., cálcio ou magnésio), ou um ião de alumínio; ou coordenados com uma base orgânica tal como etanolamina, dietanolamina, trietanolamina, N-metilglucamina, morfolina, piperidina, dimetilamina, dietilamina. São também incluídos os sais de aminoácidos tais como arginatos e semelhantes, e sais de ácidos orgânicos tais como ácidos glucurmico ou galactunórico. "Veículo farmaceuticamente aceitável" refere-se a um diluente, adjuvante, excipiente ou veículo com o qual um composto nitro cíclico é administrado. "Paciente" inclui humanos e outros mamíferos. "Prevenir" ou "prevenção" refere-se a uma redução do risco de adquirir uma doença ou perturbação (i.e., fazer com que pelo menos um dos sintomas clínicos da doença não se desenvolva num paciente que possa estar exposto a, ou predisposto, à doença mas que ainda não experimenta ou exibe sintomas da doença). "Tratar" ou "tratamento" de qualquer doença ou perturbação referem-se, numa concretização, ao melhoramento da doença ou perturbação (i.e., parando ou reduzindo o desenvolvimento da doença ou pelo menos um dos seus sintomas clínicos). Noutra concretização "tratar" ou "tratamento" referem-se ao melhoramento de pelo menos um parâmetro físico, que pode não ser discernível pelo paciente. Ainda noutra concretização, "tratar" ou "tratamento" referem-se a inibir a doença ou perturbação, fisicamente (e.g., estabilização ou erradicação de um sintoma discernível), fisiologicamente, (e.g., estabilização ou erradicação de um parâmetro físico), ou ambos. Ainda noutra concretização, "tratar" ou "tratamento" referem-se a atrasar o início da doença ou perturbação. "Quantidade terapeuticamente eficaz" significa a quantidade de um composto que, quando administrada a um paciente para tratar ou prevenir uma doença, é suficiente para efectuar esse tratamento ou prevenção da doença. A "quantidade terapeuticamente eficaz" variará dependendo do composto, da doença e da sua severidade e da idade, peso, etc., do paciente a ser tratado.

Será agora feita referência em detalhe a concretizações da invenção. Apesar da invenção ser descrita em conjunção com estas concretizações, será entendido que não se pretende limitar a invenção a essas concretizações preferidas. Pelo contrário, pretende-se cobrir alternativas, modificações e equivalentes que podem ser incluídos no espírito e âmbito da invenção, como definida pelas reivindicações apensas.

Compostos Nitro Cíclicos e Sua Utilização Para Tratar ou Prevenir a Proliferação Celular Anormal. A presente invenção proporciona compostos nitro cíclicos, composições farmacêuticas de compostos nitro cíclicos que podem ser utilizadas para tratar ou prevenir doenças associadas com proliferação celular anormal.

Os compostos podem ser utilizados por administração a um paciente necessitado desse tratamento ou prevenção, de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto nitro cíclico ou de um seu sal, hidrato, solvato ou N-óxido farmaceuticamente aceitável. Numa concretização, o composto nitro cíclico é activado intracelularmente pelo ambiente redutor de uma célula tumoral. Noutras concretizações, o paciente é irradiado para activar o composto nitro cíclico. Sem pretender ficar ligado pela teoria, a irradiação ou redução de compostos nitro cíclicos pode conduzir à formação de radicais livres que subsequentemente previnem a replicação celular e matam as células, presumivelmente por interferência com a replicação do ADN e/ou reacção com membranas celulares. No entanto, outros mecanismos, presentemente desconhecidos, podem contribuir para a eficácia dos compostos nitro cíclicos no tratamento ou prevenção da proliferação celular anormal.

Assim, em certas concretizações, os compostos nitro cíclicos da presente invenção podem ser activados por redução intracelular e por irradiação externa. Nestas concretizações, pode ser observado um efeito sinergístico ou aditivo.

Os compostos nitro cíclicos são geralmente compostos orgânicos substituídos com um ou mais grupos nitro (i.e., compostos nitro), mas também incluem sais nitrato (e.g., dinitreto de amónio, trinitreto de alumínio, etc.). Tipicamente, os compostos nitro cíclicos têm uma entalapia de formação elevada (i.e., a decomposição de compostos nitro cíclicos liberta uma grande quantidade de energia). Em certas concretizações, os compostos nitro cíclicos têm uma entalapia de formação que varia entre cerca de 5 kcal/mole e cerca de 150 kcal/mole, com maior preferência, entre cerca de 10 kcal/mole e cerca de 110 kcal/mole. A entalapia de formação dos compostos nitro pode ser prontamente calculada por métodos conhecidos dos peritos na especialidade. Deste modo, os compostos nitro cíclicos incluem os compostos nitro que se decompõem com força explosiva após activação. Esses compostos podem ser prontamente identificados pelos peritos na especialidade por cálculo da entalapia de formação.

Os compostos nitro cíclicos podem também ser reduzidos, a potenciais de redução baixos. A voltametria cíclica demonstra que a transferência de electrões para compostos nitro cíclicos ocorre entre cerca de -0,1 volts e cerca de -1,0 volts utilizando eléctrodos padrão (e.g., cátodo de mercúrio ou carbono e ânodo de platina) e soluções de electrólito.

Em certas concretizações, os compostos nitro cíclicos contêm uma grande densidade de grupos nitro (i.e., os grupos nitro representam uma fracção significativa da massa global do composto). Noutras concretizações, os compostos nitro cíclicos contêm dois grupos nitro. Ainda noutras concretizações, os compostos nitro cíclicos contêm três grupos nitro. Ainda noutras concretizações, os compostos nitro cíclicos contêm três ou mais grupos nitro. Ainda noutras concretizações, um composto nitro cíclico contém seis grupos nitro.

Em certas concretizações, o composto nitro cíclico é um nitrocarboneto que tem uma razão de grupos nitro para átomos de carbono de 1:1. Noutras concretizações, o composto nitro cíclico é um nitrocarboneto que tem uma razão de grupos nitro para átomos de carbono de 1:2.

Em certas concretizações, é proporcionado um composto de Fórmula estrutural (I):

ou seus sais, solvatos ou hidratos, em que: R1, R2, R3 e R4 são cada um independentemente, hidrogénio, alquilo, alquilo substituído, arilo, arilo substituído, arilalquilo, arilalquilo substituído, heteroalquilo, heteroalquilo substituído, heteroarilo, heteroarilo substituído, heteroarilalquilo, heteroarilalquilo substituído, halogeno, hidroxi ou nitro; cada R5 e R6 são cada um independentemente, hidrogénio, alquilo, alquilo substituído, arilo, arilo substituído, arilalquilo, arilalquilo substituído, heteroalquilo, heteroalquilo substituído, heteroarilo, heteroarilo substituído, heteroarilalquilo, heteroarilalquilo substituído, halogeno, hidroxi ou nitro; oéO, 1, 2, 3 ou 4; R7 é alquilo substituído, arilalquilo substituído, heteroalquilo substituído, heteroarilo substituído, heteroarilalquilo substituído, acilo substituído, alcoxicarbonilo substituído, fosfonilo substituído ou sulfonilo substituído; desde que pelo menos um de entre R1, R2, R3, R4, R5 e R6 seja nitro.

Em certas concretizações, pelo menos dois de entre R1, R2, R3, R4, R5 ou R6 são nitro. Noutras concretizações, R1, R2, R3 e R4 são cada um independentemente, hidrogénio, alquilo ou nitro e cada R5 e R6 são cada um independentemente, hidrogénio, alquilo ou nitro. Ainda noutras concretizações, R7 é alquilo substituído, acilo substituído, alcoxicarbonilo substituído, fosfonilo substituído ou sulfonilo substituído. Ainda noutras concretizações, R7 é alquilo, acilo, alcoxicarbonilo, fosfonilo ou sulfonilo substituído com um ou mais halogéneos, -CF3 ou -0S(0)2R8, em que R8 é alquilo, alquilo substituído, arilo ou arilo substituído. Ainda noutras concretizações, R3 e R4 são nitro.

Em certas concretizações, R1, R2, R3 e R4 são cada um independentemente, hidrogénio, alquilo ou nitro, cada R5 e R6 são cada um independentemente, hidrogénio, alquilo ou nitro e R7 é alquilo substituído, acilo substituído, alcoxicarbonilo substituído, fosfonilo substituído ou sulfonilo substituído. Noutras concretizações, R1, R2, R3 e R4 são cada um independentemente, hidrogénio, alquilo ou nitro, cada R5 e R6 são cada um independentemente, hidrogénio, alquilo ou nitro e R7 é alquilo, acilo, alcoxicarbonilo, fosfonilo ou sulfonilo substituído com um ou mais halogéneos, -CF3 ou -0S(0)2R8, em que R8 é alquilo, alquilo substituído, arilo ou arilo substituído. Ainda noutras concretizações, R1 e R2 são cada um independentemente, hidrogénio, alquilo ou nitro, R3 e R4 são nitro, cada R5 e R6 são cada um independentemente, hidrogénio, alquilo ou nitro, R7 é alquilo substituído, acilo substituído, alcoxicarbonilo substituído, fosfonilo substituído ou sulfonilo substituído. Ainda noutras concretizações, R1 e R2 são cada um independentemente, hidrogénio, alquilo ou nitro, R3 e R4 são nitro, cada R5 e R6 são cada um independentemente, hidrogénio, alquilo ou nitro, R7 é alquilo, acilo, alcoxicarbonilo, fosfonilo ou sulfonilo substituído com um ou mais halogéneos, -CF3 ou -0S(0)2R8, em que R8 é alquilo, alquilo substituído, arilo ou arilo substituído. Em algumas de qualquer uma das concretizações acima, o é 1.

Em certas concretizações, R1 e R2 são cada um independentemente, hidrogénio, alquilo ou nitro, R3 e R4 são nitro, R5 e R6 são cada um independentemente, hidrogénio, alquilo ou nitro, R7 é alquilo ou acilo substituído com um ou mais halogéneos ou -CF3 e o é 1. Noutras concretizações, R1 e R2 são hidrogénio, R3 e R4 são nitro, R5 e R6 são hidrogénio, R7 é alquilo ou acilo substituído com um ou mais halogéneos ou -CF3 e o é 1.

Em certas concretizações, o composto nitro cíclico tem a estrutura:

em que cada X é independentemente -F, -Cl, -Br, -I ou -0S(0)2R8, em que R8 é metilo, CF3, fenilo ou tolilo e cada p é independentemente 1, 2, 3, ou 4.

Noutras concretizações, o composto nitro cíclico tem a estrutura:

em que cada X é independentemente -F, -Cl, -Br, -I ou -0S(0)2R8, em que R8 é metilo, CF3, fenilo ou tolilo. Em certas concretizações específicas, o composto nitro cíclico tem a estrutura:

comummente referido como ABDNAZ.

Os compostos nitro cíclicos podem existir em várias formas tautoméricas e suas misturas. Os compostos nitro cíclicos podem também incluir compostos marcados isotopicamente, em que um ou mais átomos têm uma massa atómica diferente da massa atómica encontrada convencionalmente na natureza. Exemplos de isótopos que podem ser incorporados em compostos nitro cíclicos incluem, mas não estão limitados a, 2H, 3H, 13C, 14C, 15N, 180 e 170. Os compostos nitro cíclicos podem existir em formas não solvatadas assim como em formas solvatadas, incluindo formas hidratadas ou como N-óxidos. Em geral, as formas hidratadas e solvatadas estão dentro do âmbito da presente invenção. Certos compostos nitro cíclicos podem existir em múltiplas formas cristalinas ou amorfas. Em geral, todas as formas físicas são equivalentes para as utilizações contempladas pela presente invenção e são entendidas como estando dentro do âmbito da presente invenção.

Os compostos nitro cíclicos podem ser activados por redução intracelular. Em certas concretizações, os compostos nitro cíclicos são activados por redução intracelular em células tumorais hipóxicas, secundárias a níveis de glutationa elevados (GSH:GSSG elevado (i.e., razões entre glutationa e dissulfureto de glutationa)) e possivelmente níveis elevados de outras enzimas antioxidantes em muitas células tumorais e/ou uma pC>2 de células tumorais mediana de menos do que cerca de 10 mm Hg.

Os compostos nitro cíclicos podem também ser activados por aplicação de energia externa. Os métodos úteis para decompor compostos nitro cíclicos incluem, mas não estão limitados a, irradiação (e.g., com raios X, luz visível, irradiação infravermelho) ultrassons (e.g. ultrassons focalizados), redução electroquímica, aquecimento, co-administração de iniciadores de radicais livres (e.g., tióis), etc. Em certas concretizações, um composto nitro cíclico é activado por irradiação do paciente com fotões. Em certas concretizações, o tumor do paciente é irradiado utilizando um acelerador linear a uma taxa de dosagem de cerca de 100 cGy/min. O paciente pode também ser tratado com terapia de feixe de electrões, terapia de radiação interoperativa, radiocirurgia estereoestática e braquiterapia de dose elevada ou baixa.

Em certas situações todo o paciente pode ser irradiado. Em certas concretizações, uma porção do paciente é irradiada, de tal forma que apenas o composto nitro cíclico localizado na porção irradiada (e.g., região do tumor) do paciente é activado. De preferência, a porção do paciente que é irradiada é o sítio de proliferação celular anormal.

Os compostos nitro cíclicos podem ser obtidos por meio de métodos de síntese convencionais descritos na técnica, ou estão disponíveis comercialmente, e.g., de ATK Thiokol, Salt Lake City, UT. Os materiais de partida úteis para a preparação de compostos nitro cíclicos e seus intermediários estão disponíveis comercialmente ou podem ser preparados por métodos de síntese bem conhecidos. Outros métodos, para síntese dos compostos nitro cíclicos aqui descritos e/ou dos materiais de partida estão descritos na técnica ou serão evidentes para o perito na especialidade.

De acordo com a invenção, um composto nitro cíclico ou uma sua composição farmacêutica é administrado a um paciente, de preferência um humano, que sofra de uma doença caracterizada por proliferação celular anormal. 0 composto nitro cíclico e as suas composições farmacêuticas, podem ser utilizados para tratar ou prevenir doenças caracterizadas por proliferação celular anormal.

As doenças caracterizadas por proliferação celular anormal incluem, mas não estão limitadas a, cancro (e.g., qualquer tumor vascularizado, de preferência, um tumor sólido, incluindo mas não limitado a, carcinomas do pulmão, mama, ovário, estômago, pâncreas, laringe, esófago, testículos, fígado, parótida, tracto biliar, cólon, recto, cérvice, útero, endométrio, rim, bexiga, próstata, tiróide, carcinomas de células escamosas, adenocarcinomas, carcinomas de pequenas células, melanomas, gliomas, neuroblastomas, sarcomas (e.g., angiossarcomas, condrossarcomas), diabetes, doenças cardiovasculares (e.g., arteriosclerose), doenças inflamatórias (e.g., artrite, retinopatia diabética, artrite reumatóide, glaucoma neovascular e psoríase) e doenças autoimunes.

Noutras concretizações, os compostos nitro cíclicos podem ser utilizados para esterilização in vitro. Soluções biológicas podem ser tratadas com compostos nitro cíclicos, que são tóxicos para bactérias patogénicas, vírus e células. Este processo pode também ser catalisado pela aplicação de energia externa tal como luz ou calor.

Além disso, em certas concretizações, um composto nitro cíclico e/ou as suas composições farmacêuticas são administrados a um paciente, de preferência um humano, como medida preventiva contra várias doenças ou perturbações caracterizadas por proliferação celular anormal. Assim, os compostos nitro cíclicos e/ou as suas composições farmacêuticas podem ser utilizados para a prevenção de uma doença ou perturbação e concorrentemente tratar outra (e.g. , prevenindo a artrite enquanto trata o cancro).

Administração Terapêutica/Profiláctica

Os compostos nitro cíclicos e/ou as suas composições farmacêuticas podem ser utilizados vantajosamente em medicina humana. Tal como descrito anteriormente na Secção 5.2 supra, os compostos nitro cíclicos e/ou as suas composições farmacêuticas são úteis para o tratamento ou prevenção de várias doenças ou perturbações tais como as listadas acima.

Quando utilizados para tratar ou prevenir a doença ou perturbações acima, os compostos nitro cíclicos e/ou as suas composições farmacêuticas podem ser administrados ou aplicados singularmente ou em combinação com outros agentes. Os compostos nitro cíclicos e/ou as suas composições farmacêuticas podem também ser administrados ou aplicados singularmente, ou em combinação com outros agentes farmaceuticamente activos (e.g., outros agentes anti-cancro, outros agentes contra artrite, etc.), incluindo outros compostos nitro cíclicos e/ou as suas composições farmacêuticas.

Os compostos nitro cíclicos e/ou as suas composições farmacêuticas podem ser administrados oralmente. Os compostos nitro cíclicos e/ou as suas composições farmacêuticas podem também ser administrados por qualquer outra via conveniente, for exemplo, por infusão ou injecção em bolus, por absorção através dos revestimentos epiteliais ou mucocutâneos (e.g., mucosa oral, mucosa rectal e intestinal, etc.). A administração pode ser sistémica ou local. São conhecidos vários sistemas de administração (e.g., encapsulação em lipossomas, micropartícuias, microcápsulas, cápsulas, etc.) que podem ser utilizados para administrar um composto nitro cíclico e/ou uma sua composição farmacêutica.

Em concretizações específicas, pode ser desejável administrar um ou mais compostos nitro cíclicos e/ou as suas composições farmacêuticas localmente à área necessitada de tratamento. Isto pode ser conseguido, por exemplo, e não a titulo de limitação, por infusão local durante a cirurgia, aplicação tópica, e.g., em conjunção com a realização de um penso numa ferida após cirurgia, por injecção, por meio de um cateter, por meio de um supositório ou por meio de um implante, sendo esse implante um material poroso, não poroso ou gelatinoso, incluindo membranas, tais como membranas sialastic ou fibras.

Em certas concretizações, pode ser desejável introduzir um ou mais compostos nitro cíclicos e/ou as suas composições farmacêuticas no sistema nervoso central por qualquer via apropriada, incluindo injecção intraventricular, intratecal e epidural. A injecção intraventricular pode ser facilitada por um cateter intraventricular, por exemplo, ligado a um reservatório, tal como um reservatório Ommaya.

Os compostos nitro cíclicos e/ou as suas composições farmacêuticas podem também ser administrados directamente aos pulmões por inalação. Para administração por inalação, os compostos nitro cíclicos e/ou sua composição farmacêutica podem ser convenientemente administrados aos pulmões por uma série de dispositivos diferentes. Por exemplo, um Inalador de Dose Calibrada ("IDCI"), que utiliza latas que contêm um propulsor de baixo ponto de ebulição adequado (e.g., diclorodifluorometano, triclorofluorometano, diclorotetra-fluoroetano, dióxido de carbono ou qualquer outro gás adequado), pode ser utilizado para administrar compostos nitro cíclicos e/ou as suas composições farmacêuticas directamente para os pulmões.

Em alternativa, pode ser utilizado um dispositivo Inalador de Pó Seco ("IPS") para administrar um composto nitro cíclico e/ou sua composição farmacêutica aos pulmões. Os dispositivos IPS utilizam tipicamente um mecanismo tal como um rebentamento de gás para libertar uma nuvem de pó seco dentro de um recipiente que pode então ser inalado pelo paciente e são bem conhecidos na especialidade. Uma variação popular é o sistema IPS de doses múltiplas ("IPSDM"), que possibilita a administração de mais do que uma dose terapêutica. Os dispositivos IPSDM estão disponíveis comercialmente de uma série de companhias farmacêuticas e.g., Schering Plough, Madison, NJ) . Por exemplo, cápsulas e cartuchos de gelatina para utilização num inalador ou insuflador, podem ser formulados contendo uma mistura de pó de um composto nitro cíclico e/ou sua composição farmacêutica e de uma base em pó adequada tal como lactose ou amido para estes sistemas.

Outro tipo de dispositivo que pode ser utilizado para administrar um composto nitro cíclico e/ou sua composição farmacêutica aos pulmões é um dispositivo de pulverização de líquido, fornecido por exemplo, por Aradigm Corporation, Hayward, CA. Os sistemas de pulverização de líquido utilizam orifícios de pulverização extremamente pequenos para aerossolizar formulações de fármacos líquidas que podem então ser directamente inaladas para os pulmões.

Em certas concretizações, é utilizado um nebulizador para administrar um composto nitro cíclico e/ou sua composição farmacêutica aos pulmões. Os nebulizadores criam aerossóis a partir de formulações de fármacos líquidas utilizando, por exemplo, energia ultrassónica para formar partículas finas que podem ser prontamente inaladas (ver e.g., Verschoyle et ai., Brutish J. Cancer, 1999, 80, Supl. 2, 96). Exemplos de nebulizadores incluem dispositivos fornecidos por Sheffield Pharmaceuticals, St. Louis, MO. (Armer et ai., Patente dos Estados Unidos da América No. 5,954,047; van der Linden et ai., Patente dos Estados Unidos da América No. 5,950,619; van der Linden et ai., Patente dos Estados Unidos da América No. 5,970,974) e Batelle Pulmonary Therapeutics, Columbus, OH) .

Noutras concretizações, é utilizado um dispositivo de aerossol electrohidrodinâmico ("EHD") para administrar um composto nitro cíclico e/ou sua composição farmacêutica aos pulmões de um paciente. Os dispositivos de aerossol EHD utilizam energia eléctrica para aerossolizar soluções ou suspensões de fármacos líquidas (ver e.g., Noakes et ai., Patente dos Estados Unidos da América No. 4,765,539). As propriedades electroquímicas da formulação podem ser parâmetros importantes para optimizar quando se administra um composto nitro cíclico e/ou sua composição farmacêutica aos pulmões com um dispositivo de aerossol EHD e essa optimização é efectuada de forma rotineira por um perito na especialidade. Os dispositivos de aerossol EHD podem administrar fármacos mais eficientemente para os pulmões do que as tecnologias de administração pulmonar existentes.

Em certas concretizações, um composto nitro cíclico e/ou as suas composições farmacêuticas podem ser administrados numa vesícula, em particular um lipossoma (e.g., Langer, 1990, Science, 249:1527-1533; Treat et ai., in "Liposomes in the Therapy of Infectious Disease and Cancer," Lopez-Berestein and Fidler (eds.), Liss, Nova Iorque, pg. 353-365 (1989)).

Em certas concretizações, um composto nitro cíclico e/ou as suas composições farmacêuticas podem ser administrados via sistemas de libertação controlada, de preferência sistemas de libertação controlada orais. Noutras concretizações, pode ser utilizada uma bomba (e.g., Langer, supra, Sefton, 1987, CRC Crit. Ref Biomed. Eng. 14:201; Saudek et ai., 1989, N. Engl. JMed. 321:574) .

Em certas concretizações, podem ser utilizados materiais poliméricos (e.g., "Medicai Applications of Controlled Release," Langer and Wise (eds.), CRC Press, Boca Raton, Flórida (1974) ; "Controlled Drug Bioavailability," Drug Product Design and Performance, Smolen and Ball (eds.), Wiley, Nova Iorque (1984); Ranger et al., 1983, J Macromol. Sci. Rev. Macromol Chem. 23:61; Levy et al., 1985, Science 228: 190; During et al., 1989, Ann. Neurol. 25:351; Howard et al., 1989, J. Neurosurg. 71:105).

Noutras concretizações, são utilizados materiais poliméricos para administração oral de libertação controlada. Os polímeros incluem, mas não estão limitados a, carboximetilcelulose de sódio, hidroxipropilcelulose, hidroxipropilmetilcelulose e hidroxietilcelulose (o mais preferido, hidroxipropilmetilcelulose). Foram descritos outros éteres de celulose (Alderman, Int. J. Pharm. Tech. & Prod. Mfr. 1984, 5(3) 1-9). Os factores que afectam a libertação de fármacos são bem conhecidos dos peritos na especialidade e foram descritos na técnica (Bamba et al., Int. J. Pharm. 1979, 2, 307) .

Noutras concretizações, podem ser utilizadas preparações com revestimento entérico para administração oral de libertação controlada. Os materiais de revestimento incluem polímeros com uma solubilidade dependente do pH (i.e., libertação controlada pelo pH) , polímeros com uma velocidade de entumescimento, dissolução ou erosão lenta ou dependente do pH (i.e., libertação controlada pelo tempo), polímeros que são degradados por enzimas (i.e., libertação controlada por enzimas) e polímeros que formam camadas firmes que são destruídas por um aumento de pressão (i.e., libertação controlada pela pressão).

Noutras concretizações, são utilizados sistemas de administração osmótica para administração oral de libertação controlada (Verma et ai., Drug Dev. Ind. Pharm., 2000, 26:695— 708) . Em certas concretizações, são utilizados dispositivos osmóticos OROS™ para dispositivos de administração oral de libertação controlada (Theeuwes et ai., Patente dos Estados Unidos da América No. 3,845,770; Theeuwes et ai., Patente dos Estados Unidos da América No. 3, 916, 899) .

Ainda noutras concretizações, um sistema de libertação controlada pode ser colocado na proximidade do alvo do composto nitro cíclico e/ou composição farmacêutica, requerendo assim apenas uma fracção da dose sistémica (e.g., Goodson, in "Medicai Applications of Controlled Release", supra, vol. 2, pg. 115-138 (1984)). Outros sistemas de libertação controlada previamente podem também ser utilizados (Langer, 1990, Science 249:1527-1533).

Composições Farmacêuticas

As presentes composições farmacêuticas contêm tipicamente uma quantidade terapeuticamente eficaz de um ou compostos nitro cíclicos, de preferência em forma purificada, em conjunto com uma quantidade adequada de um veículo farmaceuticamente aceitável, de modo a providenciar a forma para administração adequada a um paciente. Quando administrado a um paciente, o composto nitro cíclico e os veículos farmaceuticamente aceitáveis são de preferência estéreis. A água é o veículo preferido quando o composto nitro cíclico é administrado por via intravenosa. As soluções salinas e dextrose aquosa e soluções de glicerol podem também ser empregues como veículos líquidos, particularmente para soluções injectáveis. Os veículos farmacêuticos adequados incluem também excipientes tais como amido, glucose, lactose, sacarose, gelatina, malte, arroz, farinha, giz, sílica gel, estearato de sódio, monoestearato de glicerol, talco, cloreto de sódio, leite em pó magro, glicerol, propilenoglicol, água, etanol. As presentes composições farmacêuticas, se desejado, podem também conter quantidades menores de agentes humectantes ou emulsificantes ou agentes tampão de pH. Em adição, podem ser utilizados agentes auxiliares, estabilizantes, espessantes, lubrificantes e corantes.

As composições farmacêuticas que compreendem um composto nitro cíclico podem ser preparadas por meio de processos de mistura convencional, dissolução, granulação, formação de drageias, levigação, emulsificação, encapsulação, aprisionamento ou liofilização. As composições farmacêuticas podem ser formuladas de maneira convencional utilizando um ou mais veículos, diluentes, excipientes ou auxiliares fisiologicamente aceitáveis que facilitam o processamento dos compostos em preparações que possam ser utilizadas farmaceuticamente. A formulação adequada depende da via de administração escolhida.

As presentes composições farmacêuticas podem tomar a forma de soluções, suspensões, emulsão, comprimidos, pílulas, peletes, cápsulas, cápsulas que contêm líquidos, pós, formulações de libertação controlada, supositórios, emulsões aerossóis, líquidos para pulverização, suspensões ou qualquer outra forma adequada para utilização. Numa concretização, o veículo farmaceuticamente aceitável é uma cápsula (e.g., Grosswald et al., Patente dos Estados Unidos da América No. 5,698,155). Uma discussão geral sobre a preparação de composições farmacêuticas pode ser encontrada em Remington, "The Science and Practice of Pharmacy," 19a Edição.

Para administração tópica um composto nitro cíclico pode ser formulado como soluções, geles, unguentos, cremes, suspensões, etc., como é bem conhecido na técnica.

As formulações sistémicas incluem as concebidas para administração por injecção, e.g., injecção subcutânea, intravenosa, intramuscular, intratecal ou intraperitoneal, assim como as concebidas para administração transdérmica, transmucosas, oral ou pulmonar. As formulações sistémicas podem ser realizadas em combinação com outro agente activo que melhore a eliminação mucociliar do muco das vias respiratórias ou que reduza a viscosidade do muco. Estes agentes activos incluem, mas não estão limitados a, bloqueadores do canal do sódio, antibióticos, N-acetilcisteína, homocisteína e fosfolípidos.

Numa concretização preferida, os compostos nitro cíclicos são formulados de acordo com procedimentos de rotina como uma composição farmacêutica adaptada para administração intravenosa a seres humanos. Tipicamente, os compostos nitro cíclicos são soluções em tampão aquoso isotónico estéril, para administração intravenosa. Para injecção, os compostos nitro cíclicos podem ser formulados em soluções aquosas, de preferência em tampões fisiologicamente compatíveis, tais como solução de Hank, solução de Ringer ou tampão salino fisiológico. A solução pode conter agentes de formulação tais como agentes de suspensão, estabilizantes e/ou dispersantes. Quando necessário, as composições farmacêuticas podem também incluir um agente de solubilização. As composições farmacêuticas para administração intravenosa podem incluir opcionalmente um anestésico local tal como lignocaína para diminuir a dor no sítio da injecção. Geralmente, os ingredientes são fornecidos separadamente ou misturados em conjunto em forma de dosagem unitária, por exemplo, como um pó liofilizado ou concentrado livre de água, num recipiente hermeticamente selado tal como uma ampola ou saqueta com indicação da quantidade de agente activo. Quando os compostos nitro cíclicos são administrados por infusão, esta pode ser dispensada, por exemplo, com um saco de infusão que contenha água ou solução salina de qualidade farmacêutica estéril. Quando o composto nitro cíclico é administrado por injecção, pode ser providenciada uma ampola de água estéril para injecção ou solução salina, de modo que os ingredientes possam ser misturados antes da administração.

Para administração transmucosa, são utilizados na formulação penetrantes apropriados para a barreira a ser permeada. Esses penetrantes são geralmente conhecidos na técnica.

As composições farmacêuticas para administração oral podem ser na forma de comprimidos, pastilhas, suspensões aquosas ou oleosas, grânulos, pós, emulsões, cápsulas, xaropes ou elixires, por exemplo. As composições farmacêuticas administradas oralmente podem conter um ou mais agentes opcionais, por exemplo, agentes edulcorantes tais como frutose, aspartame ou sacarina; agentes aromatizantes tais como menta, óleo ou gualtéria, ou agentes corantes de cereja e agentes conservantes, para proporcionar uma preparação farmaceuticamente palatável. Além disso, quando em forma de comprimido ou pilula, as composições farmacêuticas podem ser revestidas para atrasar a desintegração e absorção no tracto gastrointestinal, providenciando assim uma acção controlada durante um período de tempo prolongado. Membranas selectivamente permeáveis circundantes de um composto condutor osmoticamente activo são também adequadas para compostos administrados oralmente. Nestas últimas plataformas, o fluido do ambiente que circunda a cápsula é absorvido pelo composto condutor que incha de modo a desalojar o agente ou composição de agentes através de uma abertura. Estas plataformas de administração podem proporcionar um perfil de administração essencialmente de ordem zero em oposição aos perfis de pico das formulações de libertação imediata. Um material de retardamento temporal como monoestearato de glicerol ou estearato deglicerol pode também ser utilizado. As composições orais podem incluir veículos padrão tais como manitol, lactose, amido, estearato de magnésio, sacarina sódica, celulose, carbonato de magnésio, etc. Esses veículos são de preferência de qualidade farmacêutica.

Para preparações líquidas orais tais como, por exemplo, suspensões, elixires e soluções, os veículos, excipientes ou diluentes adequados incluem água, solução salina, alquilenoglicóis (e.g., propilenoglicol), polialquilenoglicóis (e.g., polietilenoglicol), óleos, álcoois, tampões ligeiramente ácidos entre pH 4 e pH 6 (e.g., acetato, citrato, ascorbato a entre cerca de 5,0 mM e cerca de 50,0 mM) , etc. Adicionalmente, podem ser adicionados agentes aromatizantes, conservantes, agentes corantes, sais biliares, acilcarnitinas.

Para administração bucal as composições farmacêuticas podem tomar a forma de comprimidos, pastilhas, etc., formulados de maneira convencional.

As formulações de fármacos liquidas adequadas para utilização com nebulizadores e dispositivos de pulverização de líquidos e dispositivos de aerossol EHD, incluem tipicamente um composto nitro cíclico com um veículo farmaceuticamente aceitável. De preferência, o veículo farmaceuticamente aceitável é um líquido tal como álcool, água, polietilenoglicol ou um perfluorocarboneto. Opcionalmente, pode ser adicionado outro material para alterar as propriedades do aerossol da solução ou suspensão de compostos. De preferência, este material é líquido tal como um álcool, glicol, poliglicol ou um ácido gordo. Outros métodos de formulação de soluções ou suspensões de fármacos líquidos, adequadas para utilização em dispositivos de aerossol são conhecidos dos peritos na especialidade (ver, e.g., Biesalski, Patente dos Estados Unidos da América No. 5,112,598; Biesalski, Patente dos Estados Unidos da América No. 5,556,611).

Um composto nitro cíclico pode também ser formulado em composições farmacêuticas rectais ou vaginais, tais como supositórios ou enemas de retenção, e.g., contendo bases de supositório convencionais tais como manteiga de cacau ou outros glicéridos.

Em adição às formulações descritas anteriormente, um composto nitro cíclico pode também ser formulado como uma preparação depot. Essas formulações de longa acção podem ser administradas por implantação (for exemplo, subcutaneamente ou intramuscularmente) ou por injecção intramuscular. Assim, por exemplo, um composto nitro cíclico pode ser formulado com materiais poliméricos ou hidrófobos adequados (e.g., como uma emulsão num óleo aceitável) ou resinas de permuta iónica, ou como derivados fracamente solúveis, tal como um sal fracamente solúvel.

Quando um composto nitro cíclico é ácido ou básico, pode ser incluído em qualquer uma das formulações descritas acima, na forma do ácido livre ou da base livre, como um sal farmaceuticamente aceitável, um solvato ou hidrato. Os sais farmaceuticamente aceitáveis retêm substancialmente a actividade do ácido ou base livres, podem ser preparados por reacção com ácidos ou bases e tendem a ser mais solúveis em solventes aquosos e noutros solventes próticos, do que a forma de ácido livre ou base livre correspondente.

Doses

Um composto nitro cíclico e/ou sua composição farmacêutica, será geralmente utilizado numa quantidade eficaz para alcançar a finalidade desejada. Para utilização para tratar ou prevenir as doenças ou perturbações acima, o composto nitro cíclico e/ou as suas composições farmacêuticas, são administrados ou aplicados numa quantidade terapeuticamente eficaz. A quantidade de um composto nitro cíclico e/ou sua composição farmacêutica que será eficaz no tratamento de uma perturbação ou condição particular aqui revelada, dependerá da natureza da perturbação ou condição e pode ser determinada por técnicas clínicas padrão conhecidas na técnica. Adicionalmente, podem opcionalmente ser empregues ensaios in vitro ou in vivo para auxiliar a identificar os intervalos de dosagem óptimos. A quantidade de um composto nitro cíclico e/ou sua composição farmacêutica administrada dependerão evidentemente de, entre outros factores, o sujeito a ser tratado, o peso do sujeito, a severidade da aflição, a maneira de administração e o julgamento do médico prescritor.

Por exemplo, a dosagem pode ser administrada numa composição farmacêutica por uma administração singular, por aplicações múltiplas ou libertação controlada. 0 doseamento pode ser repetido intermitentemente, pode ser providenciado sozinho ou em combinação com outros fármacos e pode continuar tanto tempo quanto o requerido para o tratamento eficaz do estado de doença ou perturbação.

Os intervalos de dosagem adequados para administração oral são dependentes da eficiência de radiossensibilização, mas são geralmente cerca de 0,001 mg a cerca de 100 mg do composto nitro cíclico por kg de peso corporal. Os intervalos de dosagem podem ser prontamente determinados por métodos conhecidos do perito na especialidade.

Intervalos de dosagem adequados para administração intravenosa (i.v.) são de cerca de 0,01 mg a cerca de 100 mg por kg/ de peso corporal. Intervalos de dosagem adequados para administração intranasal são geralmente de cerca de 0,01 mg/kg de peso corporal a cerca de 1 mg/kg de peso corporal. Os supositórios geralmente contêm cerca de 0,01 miligramas a cerca de 50 miligramas de um composto nitro cíclico por kg/ de peso corporal e compreendem ingrediente activo no intervalo de cerca de 0,5% a cerca de 10% em peso. As dosagens recomendadas para administração intradérmica, intramuscular, intraperitoneal, subcutânea, epidural, sublingual ou intracerebral situam-se no intervalo de cerca de 0,001 mg a cerca de 200 mg por kg/ de peso corporal. Doses eficazes podem ser extrapoladas a partir de curvas de dose-resposta derivadas de sistemas de ensaio de modelos in vitro ou animais. Esses modelos e sistemas animais são bem conhecidos na técnica.

Os compostos nitro cíclicos são de preferência ensaiados in vitro e in vivo, relativamente à actividade terapêutica ou profiláctica desejada, antes da utilização em humanos. Por exemplo, podem ser utilizados ensaios in vitro para determinar se é preferida a administração de um composto nitro cíclico específico ou de uma combinação de compostos nitro cíclicos. O composto nitro cíclico pode também ser demonstrado como sendo eficaz e seguro utilizando sistemas de modelos animais.

De preferência, uma dose terapeuticamente eficaz de um composto nitro cíclico e/ou sua composição farmacêutica aqui descritos proporcionará benefício terapêutico sem causar toxicidade substancial. A toxicidade de compostos nitro cíclicos e/ou das suas composições farmacêuticas pode ser determinada utilizando procedimentos farmacêuticos padrão e pode ser prontamente verificada pelo perito na especialidade. A razão de doses entre o efeito tóxico e o efeito terapêutico é o índice terapêutico. Um composto nitro cíclico e/ou sua composição farmacêutica exibirá de preferência índices terapêuticos particularmente elevados no tratamento de doenças e perturbações caracterizadas por proliferação celular anormal aberrante. A dosagem de um composto nitro cíclico e/ou sua composição farmacêutica aqui descritos estará de preferência dentro de um intervalo de concentrações em circulação que inclui uma dose eficaz com pouca ou nenhuma toxicidade.

Terapia de combinação

Em certas concretizações da presente invenção, os compostos nitro cíclicos e/ou as suas composições farmacêuticas podem ser utilizados em terapia de combinação com pelo menos um outro agente terapêutico. 0 composto nitro cíclico e/ou a sua composição farmacêutica e o agente terapêutico podem actuar aditivamente ou, com maior preferência, sinergisticamente. Numa concretização, um composto nitro cíclico e/ou uma sua composição farmacêutica é administrado concorrentemente com a administração de outro agente terapêutico. Noutra concretização um composto nitro cíclico e/ou sua composição farmacêutica é administrado antes ou subsequentemente à administração de outro agente terapêutico.

Em particular, numa concretização, os compostos nitro cíclicos e/ou as suas composições farmacêuticas podem ser utilizados em terapia de combinação com outros agentes quimioterapêuticos (e.g., agentes alquilantes (e.g., mostardas de azoto (e.g., ciclofosfamida, ifosfamida, mecloretamina, melfalen, clorambucilo, hexametilmelamina, tiotepa), sulfonatos de alquilo (e.g., bussulfano), nitrosoureias, triazinas)), antimetabolitos (e.g., análogos de ácido fólico, análogos de pirimidina (e.g., fluorouracilo, floxuridina, citosina arabinósido, etc.), análogos de purina (e.g., mercaptopurina, tiogunaina, pentostatina, etc.), produtos naturais (e.g., vinblastina, vincristina, etopósido, tertipósido, dactinomicina, daunorubicina, doxurrubicina, bleomicina, mitrmicina, mitomicina C, L-asparaginase, interferão alfa), complexos de coordenação de platina (e.g., cis-platina, carboplatina, etc.), agentes indutores de apoptose, agentes de depleção de glutationa ou outros agentes que possam alterar o estado redox da célula. Os peritos na especialidade apreciarão que os compostos nitro cíclicos podem também ser utilizados em terapia de combinação concorrente com os agentes quimioterapêuticos listados acima e com radioterapia.

Estojos Terapêuticos A presente invenção proporciona também estojos terapêuticos que compreendem compostos nitro cíclicos e/ou as suas composições farmacêuticas. Os estojos terapêuticos podem também conter outros compostos (e.g., agentes quimioterapêuticos, produtos naturais, agentes indutores de apoptose, etc.) ou as suas composições farmacêuticas.

Os estojos terapêuticos podem ter um único recipiente que contém um composto nitro cíclico e/ou as suas composições farmacêuticas com ou sem outros componentes (e.g., outros compostos ou composições farmacêuticas desses outros compostos) ou podem ter recipientes distintos para cada componente. De preferência, os estojos terapêuticos incluem um composto nitro cíclico e/ou uma sua composição farmacêutica embalado para utilização em combinação com a co-administração de um segundo composto (de preferência, um agente quimioterapêutico, um produto natural, um agente indutor de apoptose, etc.) ou uma sua composição farmacêutica. Os componentes do estojo podem ser pré-complexados ou cada componente pode estar num recipiente distinto separado antes da administração a um paciente.

Os componentes do estojo podem ser providenciados numa ou mais soluções líquidas, de preferência uma solução aquosa, com maior preferência uma solução aquosa estéril. Os componentes do estojo podem também ser providenciados como sólidos, que podem ser convertidos em líquidos por adição de solventes adequados que são, de preferência, providenciados noutro recipiente distinto. 0 recipiente de um estojo terapêutico pode ser um frasco pequeno, tubo de ensaio, frasco, garrafa, seringa ou quaisquer outros meios de encerrar um sólido ou líquido. Usualmente, quando há mais de um componente, o estojo conterá um segundo frasco ou outro recipiente que permita doseamento separado. 0 estojo pode também conter outro recipiente para um liquido farmaceuticamente aceitável.

De preferência, um estojo terapêutico conterá dispositivos (e.g., uma ou mais agulhas, seringas, conta-gotas oculares, pipetas, etc.), que possibilitem a administração dos componentes do estojo.

EXEMPLOS A invenção é ainda definida por referência aos exemplos que se seguem, que descrevem em detalhe a preparação de compostos e métodos de ensaio da actividade biológica. Será evidente para os peritos na especialidade que muitas modificações, tanto aos materiais como aos métodos, podem ser praticadas sem sair do âmbito.

Exemplo 1: Produção de ERO em Células Tumorais por ABDNAZ e Irradiação Células da linha celular de cancro do cólon humano HT29 e células da linha celular de carcinoma de células escamosas de murino SCC VII foram deixadas crescer numa placa de 96 poços durante a noite a 37°C e em seguida foi adicionada uma sonda fluorescente de diacetato de 2'7'-diclorofluorescina (DCFH-DA), numa concentração de 20 μΜ durante 1 hora e depois removida por lavagem. Adicionou-se ABDNAZ no meio de crescimento em concentrações de 1 μΜ, 10 μΜ ou 100 μΜ. A fluorescência verde foi observada sob um microscópio de fluorescência e medida utilizando um espectrofluorimetro de microplaca com uma excitação a 488 nm e uma emissão a 525 nm. Para células que foram tratadas com ABDNAZ e irradiação, as placas foram irradiadas imediatamente após a adição de ABDNAZ utilizando uma fonte de 137Cs. A Figura 1 mostra a produção de espécies reactivas de

oxigénio (ERO) em células HT29 e em células SCC VII após exposição a ABDNAZ. A produção de ERO foi dependente da dose, do tempo e da linha celular. A produção de ERO em células HT29 aumentou gradualmente ao longo do tempo e apresentou um pico às 24 horas. Para as células SCC VII, a produção de ERO teve um pico 2 horas após a adição de ABDNAZ e os niveis de ERO foram significativamente mais elevados do que os induzidos em células HT29.

As Figuras 2 e 3 ilustram a produção de ERO em células HT29 e em células SCC VII tratadas com ABDNAZ e radiação. 0 tratamento combinado de ABDNAZ e radiação induziu sinergisticamente a geração de ERO intracelular em células HT29 e em células SCC VII, comparativamente a cada modalidade sozinha.

Exemplo 2: Inibição da Proliferação de células HL60 por ABDNAZ A linha celular HL60 que é uma linha celular de leucemia promeolocitica aguda, foi transfectada de forma estável com oncogene bcl-2 (células HL60 bcl-2). As neo células HL60 foram utilizadas como controlo (HL60 neo). As células foram deixadas crescer em meio RPMI1640 na presença de ABDNAZ a uma concentração de 1 uM, 2 uM ou 5 uM. 0 número de células viáveis foi contado diariamente durante 10 dias. As curvas de crescimento celular são apresentadas na Figura 4 que demonstra que ABDNAZ inibiu o crescimento celular de uma maneira dependente da dose. Uma dose de 5 uM de ABDNAZ inibiu o crescimento celular em > 95% e as células HL60 bcl-2 foram tão sensíveis como as neo células a ABDNAZ.

Exemplo 3: Indução da Apoptose de células HL 60 por ABDNAZ Células, preparadas e deixadas crescer como descrito no Exemplo 2, supra, foram recolhidas às 8, 24, 48 e 72 horas

após adição de ABDNAZ e analisadas utilizando FACS. A Figura 5 ilustra a percentagem de apoptose vs. tempo na presença de ABDNAZ. Tal como se pode ver nas Figuras 5, 6 e 7, o ABDNAZ induziu um nível muito elevado de morte celular apoptótica, tanto em células HL60 neo como em células bcl-2 de uma maneira dependente da dose. O ABDNAZ a 5 uM induziu 95% e 7 8% de apoptose às 48 horas para células neo e bcl-2, respectivamente. A 2 uM, o ABDNAZ produziu morte celular apoptótica que foi muito semelhante em células HL60 neo e em células bcl-2 com picos de -40% às 8 horas. As Figuras 6 e 7 ilustram os histogramas detalhados da análise FACS para células HL60 neo e para células HL60 bcl-2, respectivamente.

Exemplo 4: Inibição da Expressão do Oncogene bcl-2 por ABDNAZ Células HL60 foram tratadas como descrito no Exemplo 2, supra. As células foram recolhidas às 6 e 24 horas para análise de manchas Western. Como mostrado na Figura 8, o ABDNAZ a 2 e 5 uM inibiu a expressão da proteína bcl-2 em ambas as células neo e bcl-2 de uma maneira dependente da dose. A proteína bcl-2 em células transfectadas HL60 bcl-2 pode ser clivada na presença de 2 uM de ABDNAZ como indicado pela presença das bandas de menor peso molecular após 6 e 24 horas.

Exemplo 5: Sintese de ABDNAZ

Um balão de fundo redondo de 25 ml, com três tubuladuras, foi carregado com 7 ml de cloreto de metileno e 2,50 g (12,3 mmol) de t-BuDNAZ preparado como descrito em Archibald et al., journal of Organic Chemistry, 1990, 2920. Sob azoto, adicionaram-se 0,16 ml (1,23 mmol) de eterato de trifluoreto de boro. Após agitação durante 5 min à temperatura ambiente, adicionaram-se 0,54 ml (6,15 mol) de brometo de bromoacetilo. A solução foi aquecida entre 50-60°C durante 2 h. A mistura de reacção escurecida foi arrefecida para a temperatura ambiente, diluída com 50 ml de cloreto de metileno e filtrada. O sólido foi identificado como o sal de HBr do t-BuDNAZ. O filtrado de cloreto de metileno foi lavado com duas porções de 20 ml de água, seco sobre sulfato de sódio, filtrado e evaporado sob pressão reduzida. O sólido resultante foi lavado com três porções de 20 ml de éter etílico e seco sob vácuo para dar

1.24 g (75,2% com base em brometo de bromoacetilo) de BrADNAZ como um sólido branco (pf = 124-125°C) . ΤΗ RMN (CDCI3) : 3,76 (s, 2H) , 4, 88 (s largo, 2H) , 5, 14 (s largo, 2H) ; 13C RMN (CDCI3) : 165,2, 105, 0, 59,72, 57,79, 23, 90. Calcul. para sKEsBrNsOs:

%C 22,41, %H 2,26, %N 15,68; Encontrado: %C 22,61, %H 2,36, %N

15,58. HPLC/MS Coluna C-8 de fase inversa com fase móvel de acetonitrilo/água - m/e 266, 95 (100%), 268, 95 (98,3%) . FT-IR 3014.24 (fraco), 1677,66, 1586,30, 1567,65, 1445,55 (N02), 1367,80, 1338,00, 1251,27 cm-1.

Exemplo 6: Síntese de N-(cloroacetil)-3,3-dinitroazetidina (C1ADNAZ)

Um balão de fundo redondo de 25 ml, com três tubuladuras, foi carregado com 7 ml de cloreto de metileno e 2,50 g (12,3 mmol) de t-BuDNAZ. Sob azoto, adicionaram-se 0,16 ml (1,23 mmol) de eterato de trifluoreto de boro. Após agitação durante 5 min à temperatura ambiente, adicionaram-se 0,54 ml (6,15 mol) de cloreto de cloroacetilo. A solução foi aquecida entre 50-60°C durante 2 h. A mistura de reacção escurecida foi arrefecida para a temperatura ambiente, diluída com 50 ml de cloreto de metileno e filtrada. O sólido foi identificado como o sal de HBr de t-BuDNAZ. O filtrado de cloreto de metileno foi lavado com duas porções de 20 ml de água, seco sobre sulfato de sódio, filtrado e evaporado sob pressão reduzida. O sólido resultante foi lavado com três porções de 20 ml de éter etílico e seco sob vácuo para dar um sólido branco (pf: 130-132°C) com 60% de rendimento. CHN para C5H6CIN3O5: Encontrado C: 26,94%, H: 2,53%, N:17,77%; Calculado C: 26,86%, H: 2,71% N: 18,79%. FTIR: 2979 (fraco), 1690,01, 1577,57, 1438,91 (N02) , 1368,21, 1338, 99, 1286,21 cm-1. ΤΗ RMN: (DMSO-d6) , 5,09 (2H) , 4,81(2H), 3,77(2H).13C RMN: (DMSO-de) , 168,58, 106,98, 60,39, 50,38. HPLC: >98% puro. Resultados de

Segurança: Impacto ABL: 80 cm; Fricção ABL: 800@ 8 pés/s; TC ESD Não confinado a 50%: 1,10 Joules (ignição da massa no ensaio a granel). DSC Início: 259,56°C.

Exemplo 7: Síntese de N-Iodoacetil-3,3-dinitroazetidi- na(IADNAZ)

Um balão de fundo redondo de 100 ml, com três tubuladuras, foi carregado com 40 mL de acetona anidra e 2,01 g de BrADNAZ sob azoto. Adicionou-se 1,4 g de K2CO3, seguido pela adição de 1,2 g de iodeto de sódio. A mistura de reacção foi deixada em refluxo durante a noite e monitorizada por RMN do protão. A solução escurecida foi diluída com cloreto de metileno, o sólido foi filtrado e o filtrado foi extraído com 2 X 30 mL porções de cloreto de metileno e água. A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio e concentrada sob vácuo. O sólido foi purificado por cromatografia flash em coluna (10% de acetato de etilo/hexanos) para dar um sólido branco (pf 97-100°C.) com 80% de rendimento. Análise para C5H6IN3O5:

Encontrado C: 19,67%, H: 1,80%, N: 12,70%. Calculado C: 19,06%, H: 1,92%, N: 13,24%. FTIR: 2980 (fraco), 1667,44, 1568,49, 1439,74 (N02) , 1373, 69, 1335, 60, 1305,35 cm-1. 3H RMN: (DMSO- d6) , 5,09 (2H) , 4,81 (2H) , 3,77(2H).13C RMN: (DMSO-de), 168,58, 106,98, 60,39, 50,38. HPLC: >98% puro. Resultados de

Segurança: Impacto ABL: 80 cm; Fricção ABL: 800Θ 8 pés/s; TC ESD, Não confinado 50% 7,30 Joules (sem ignição da massa no ensaio a granel); SBAT Inicio: 286°F. DSC Inicio: 253,52°C.

Exemplo 8: Síntese de N-Azidoacetil-3,3-dinitroazetidi- na(AzADNAZ)

Um balão de fundo redondo de 100 ml, com três tubuladuras, foi carregado com 40 mL de acetona anidra e 2,01g de BrADNAZ sob azoto. Adicionou-se 1,05 g de K2CO3 seguida pela adição de 0,4 g de azida de sódio. A mistura de reacção foi deixada em refluxo durante a noite e monitorizada por RMN do protão. A solução escurecida foi diluída com cloreto de metileno e o sólido foi filtrado. O filtrado foi extraído com 2 30 mL porções de cloreto de metileno e água. A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio e concentrada sob vácuo. O sólido foi purificado por cromatografia flash em coluna (10% de acetato de etilo/Hexanos) para dar um sólido branco (pf 103-104°C) com 80% de rendimento. Análise para C5H6N6O5: Encontrado C: 26,84%, H: 2,70%, N: 35,49%. Calculado C: 26,09%, H: 2,63%, N: 34,76%. FTIR: 2981,60 (fraco), 2109,15 (forte), 1678,88, 1598,80, 1571,47, 1463, 18 (N02) , 1446, 89, 1332,20, 1275,28 cirr !. 3H RMN: (DMSO-de), 5,08(2H), 4,83(2H), 4,02(2H)13C RMN: (DMSO-de), 169, 098, 107,74, 59, 84, 58,16. HPLC: >99,7% puro.

Resultados de Segurança: Impacto ABL: 64 cm; Fricção ABL: 800@ 8 pés/s; TC ESD, Não confinado 50% <0,5 Joules(sem ignição da massa no ensaio a granel); SBAT Início: 314°F.

Exemplo 9: Síntese de N-Succinil-3,3-Dinitroazetidina

Um balão de fundo redondo de 100 ml, com três tubuladuras, foi carregado com 30 mL de diclorometano anidro e 5,0 gramas de terc-butil-3,3-dinitroazetidina(t-BDNAZ) sob azoto.

Adicionaram-se 4,5 gramas de cloreto de succinilo, seguidos pela adição de 0,5 mL de eterato de trifluoreto de boro. A mistura de reacção foi aquecida a 50°C e monitorizada por RMN. A mistura de reacção foi vertida lentamente sobre gelo e em seguida filtrada. 0 sólido castanho foi lavado com 3X 20 mL porções de diclorometano, seco com sulfato de sódio e concentrado sob vácuo. O sólido foi purificado por cromatografia flash em coluna (10% de acetato de etilo/hexanos) para dar um sólido branco pálido com 20% de rendimento (pf: 190-192°C) . Análise para C7H9N3O7: Encontrado C: 33, 93%, H: 3,63%, N: 19%. Calculado C: 34,02%; H: 3,67%; N: 17,00. FTIR: 3004,44 (fraco), 1644,78 (forte), 1558,45, 1472, 60, 1450, 06, 1423,01, 1369, 90, 1338,05, 1310,05, 1260, 99 cm-1. ΤΗ RMN: (DMSO-d6) , 5,27(2H), 4,85(2H), 2,03(4H). HPLC: >97%. Resultados de

Segurança: Impacto ABL: 64 cm; Fricção ABL: 800Θ 8 pés/s; TC ESD, Não confinado a 50% < 0,26 Joules (sem ignição da massa a 8 Joules). DSC Inicio: 253,86 °C.

Exemplo 10: Síntese de N-Fumaril-3,3-Dinitroazetidina

Um balão de fundo redondo de 100 ml, com três tubuladuras, foi carregado com 8,69 gramas de terc-butil-3,3-dinitroazetidina(t-BDNAZ) sob azoto e adicionaram-se 5 mL de cloreto de fumarilo, seguidos pela adição de 0,5 mL de eterato de trifluoreto de boro a 0°C durante 2 horas. A mistura de reacção foi monitorizada por RMN. A pasta espessa foi lavada com metanol e depois vertida sobre gelo-água. O sólido foi filtrado e lavado com 200 mL de água e seco sob vácuo o que originou um sólido amarelo pálido com 20% de rendimento (pf: 240°C) . Análise para C7H7N3O7: Encontrado C: 34,9%, H: 3,2%, N: 19,6%. Calculado C: 34,3%; H: 2,9%; N: 17,1. FTIR: 3082,73(fraco), 1664,79 (forte), 1577, 69, 1430,19 (N02) , 1366, 92, 1274,30, 1231,24, 1213,45 cm-1. ΤΗ RMN: (DMSO-de) , 5,88(2H), 5,29(2H), 4,90(2H). HPLC:>96%. Resultados de

Segurança: Fricção ABL: 800@ 8 pés/s, TC ESD Não confinado a 50%: 1,05 Joules (ignição da massa no ensaio a granel).

Exemplo 11: Síntese de N-Trifluoroacetil-3,3-Dinitroazetidina

Um balão de fundo redondo de 25 ml, com três tubuladuras, foi carregado com 2,28 gramas de terc-butil-3,3-dinitroazetidina(t-BDNAZ) sob azoto. Adicionaram-se 10 mL de anidrido trifluoroacético, seguidos pela adição de 0,3 mL de eterato de trifluoreto de boro. A mistura de reacção foi aquecida a 50°C e monitorizada por RMN. A reacção foi concentrada sob vácuo. O óleo residual foi lavado com água. O óleo residual foi adicionado a hexanos quentes para dar 460 mg de agulhas brancas (pf: 70-71°C) . Análise para C5H4F3N3O5: Encontrado C: Η:, N: Calculado C: 24,70%, H: 1,66%, N: 17,29%. FTIR: 2991 (fraco), 1716, 1683, 96, 1591,37, 1576,43 (N02) , 1165, 92, 1134,12 cm-1, ΐ RMN: (DMSO-de) , 5,39(2H), 5,04(2H). HPLC: >96% puro. Resultados de Segurança: Fricção ABL: 800Θ 8 pés/s; TC ESD Não confinado a 50%: > 8 Joules. DSC Início: 240,75°C.

Finalmente, deve ser notado que existem formas alternativas de implementar a presente invenção. Deste modo, as presentes concretizações devem ser consideradas como ilustrativas e não restritivas e a invenção não pode ser limitada aos detalhes aqui apresentados, mas pode ser modificada dentro do âmbito e equivalentes das reivindicações apensas. Todas as publicações aqui citadas são incorporadas por referência.

Lisboa, 2015-03-10

Claims (22)

1. REIVINDICAÇÕES 1. Composto de Fórmula estrutural (I):

   ou seus sais, solvatos ou hidratos, em que: R1, R2, R3 e R4 são cada um independentemente, hidrogénio, alquilo, alquilo substituído, arilo, arilo substituído, arilalquilo, arilalquilo substituído, heteroarilo, heteroarilo substituído, heteroalquilo, heteroalquilo substituído, heteroarilalquilo, heteroarilalquilo substituído, halogeno, hidroxi ou nitro; R5 e R6 são cada um independentemente, hidrogénio, alquilo, alquilo substituído, arilo, arilo substituído, arilalquilo, arilalquilo substituído, heteroarilo, heteroarilo substituído, heteroalquilo, heteroalquilo substituído, heteroarilalquilo, heteroarilalquilo substituído, halogeno, hidroxi ou nitro; oéO, 1, 2, 3 ou 4; R7 é acilo substituído com um ou mais de entre halogéneo, -CF3 ou -OS (0) 2R8; R8 é alquilo, alquilo substituído, arilo ou arilo substituído; desde que pelo menos um de entre R1, R2, R3, R4, R5 e R6 seja nitro; em que, excepto como já providenciado para a variável R7, substituído refere-se aos substituintes -M, -R60, =0, -OR60, -SR60, =S, -NR60R61, =NR60, -CF3, -CN, -OCN, -SCN, -NO, -N02, - 0N02, =N2, -N3, -S(0)20H, -S(0)2Rso, -0S(0)2R60, OP (0) (OR60) (OR61) , -C (0) R60, -C(S)R60, -C (0) OR60, -C (0) NR60R61, - C (S) OR60, -NR62C (0) NR60R61, -NR62C (S) 60R61, -NR62C (NR63) NR60 R61 e -C (NR62) NR60R61, em que M é independentemente um halogéneo; R60, R61, R62 e R63 são independentemente hidrogénio, alquilo, alquilo substituído, alcoxi, alcoxi substituído, cicloalquilo, cicloalquilo substituído, ciclo-heteroalquilo, ciclo-heteroalquilo substituído, arilo, arilo substituído, heteroarilo ou heteroarilo substituído, ou opcionalmente R60 e R61 em conjunto com o átomo de azoto ao qual estão ligados formam um anel ciclo-heteroalquilo ou ciclo-heteroalquilo substituído.
2. 2. Composto de acordo com a reivindicação 1 em que pelo menos dois de entre R1, R2, R3, R4, R5 e R6 são nitro.
3. 3. Composto de acordo com a reivindicação 1 em que R1, R2, R3 e R4 são cada um independentemente, hidrogénio, alquilo ou nitro; e cada R5 e R6 são cada um independentemente, hidrogénio, alquilo ou nitro.
4. 4. Composto de acordo com a reivindicação 1 em que R7 é acilo substituído com um ou mais de entre, halogéneo, -CF3 ou -OS (0) 2R8 em que R8 é alquilo ou arilo.
5. 5. Composto de acordo com a reivindicação 1 em que R3 e R4 são nitro.
6. 6. Composto de acordo com a reivindicação 1 em que R1, R2, R3 e R4 são cada um independentemente, hidrogénio, alquilo ou nitro, cada R5 e R6 são cada um independentemente, hidrogénio, alquilo ou nitro e R7 é acilo substituído com um ou mais halogéneos, -CF3 ou -OS (0) 2R8 em que R8 é alquilo ou arilo.
7. 7. Composto de acordo com a reivindicação 1 em que R1 e R2 são cada um independentemente, hidrogénio, alquilo ou nitro, R3 e R4 são nitro, cada R5 e R6 são cada um independentemente, hidrogénio, alquilo ou nitro e R7 é acilo substituído com um ou mais halogéneos.
8. 8. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1-7 em que o é 1.
9. 9. Composto de acordo com a reivindicação 1 em que R1 e R2 são cada um independentemente, hidrogénio, alquilo ou nitro, R3 e R4 são nitro, cada R5 e R6 são cada um independentemente, hidrogénio, alquilo ou nitro, R7 é acilo substituído com um ou mais halogéneos ou -CF3, e o é 1.
10. 10. Composto de acordo com a reivindicação 1 em que R1 e R2 são hidrogénio, R3 e R4 são nitro, R5 e R6 são hidrogénio, R7 é acilo substituído com um ou mais halogéneos ou -CF3, e o é 1.
11. 11. Composto que tem a estrutura:

    em que cada X é independentemente -F, -Cl, -Br, -I ou -0S(0)2R8 onde R8 é metilo, CF3, fenilo ou tolilo e cada p é independentemente 1, 2, 3, ou 4.
12. 12. Composto de acordo com a reivindicação 1 que tem a estrutura:

    em que X é -F, -Cl, -Br, -I ou -OS (0)2R8 onde R8 é metilo, CF3, fenilo ou tolilo.
13. 13. Composto de acordo com a reivindicação 1 em que o composto tem a estrutura:
14. 14. Composto de acordo com a reivindicação 1 em que o composto tem a estrutura:

    ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
15. 15. Composto de acordo com a reivindicação 1 em que o composto é N-(cloroacetil)-3,3-dinitroazetidina ou N-iodoacetil-3,3-dinitroazetidina.
16. 16. Composição farmacêutica que compreende um composto de acordo com a reivindicação 1 e um veiculo farmaceuticamente aceitável.
17. 17. Composição farmacêutica que compreende um composto de acordo com a reivindicação 6 e um veiculo farmaceuticamente aceitável.
18. 18. Composição farmacêutica que compreende um composto de acordo com a reivindicação 13 e um veiculo farmaceuticamente aceitável.
19. 19. Composto de acordo com a qualquer uma das reivindicações 1-15 para utilização como um medicamento.
20. 20. Composto de acordo com a reivindicação 19 para utilização como um medicamento para tratamento do cancro.
21. 21. Composto de acordo com a reivindicação 20 em que o cancro é cancro da mama, cancro renal, cancro cerebral, cancro do cólon, cancro colorrectal, cancro da próstata, cancro do pulmão, uma leucemia ou um linfoma.
22. 22. Composto de acordo com a reivindicação 19 para utilização como um medicamento para tratamento ou prevenção de inflamação, doença autoimune ou doença cardiovascular. Lisboa, 2015-03-10