PT1345900E - Derivados amidina e guanidina como inibidores do factor xa - Google Patents

Description

DESCRIÇÃO "DERIVADOS DE GUANIDINA E AMIDINA COMO INIBIDORES DO FACTOR XA" A presente invenção refere-se a compostos de formula I,

(D nos quais Ro ; Q; X; Q', D, Rio e V têm os significados indicados abaixo. Os compostos da fórmula I são compostos farmacologicamente activos, valiosos. Eles exibem um forte efeito antitrombótico e são adequados, por exemplo, para a terapia e profilaxia de distúrbios cardiovasculares, como doenças tromboembólicas ou restenoses. São inibidores reversíveis do factor Xa (FXa) e/ou factor Vila (FVIIa) das enzimas de coagulação sanguínea e podem, no geral, ser aplicadas em patologias nas quais está presente uma actividade indesejada do factor Xa e/ou factor Vila ou para a cura ou prevenção para os quais é pretendida a inibição do factor Xa e/ou factor Vila. Além disso, a invenção refere-se a processos para a preparação de compostos da fórmula I, sua utilização, em particular como ingredientes activos em fármacos e preparações farmacêuticas que compreendem. A hemostasia normal é o resultado de um equilíbrio complexo entre os processos de iniciação do coágulo, formação e 1 dissolução do coágulo. As interacções complexas entre as células sanguíneas, proteínas específicas do plasma e a superfície vascular, mantêm a fluidez do sangue, a não ser que ocorra lesão e perda de sangue (documento EP-A-987274). Muitos estados de doenças significativos estão relacionados com a hemostasia anormal. Por exemplo, a formação local de trombo devido a ruptura da placa aterosclerótica é uma causa principal de enfarte agudo do miocárdio e angina instável. 0 tratamento de um trombo coronário oclusivo por terapia trombolítica ou por angioplastia percutânea pode ser acompanhado por reoclusâo trombolítica aguda do vaso afectado.

Continua a existir uma necessidade de anticoagulantes terapêuticos eficazes e seguros para limitar ou prevenir a formação de trombos. É muito desejado desenvolver agentes que inibam a coagulação sem inibirem, directamente, a trombina mas por inibição de outros passos na cascata de coagulação, como a actividade do factor Xa e/ou factor vila. Acredita-se agora que os inibidores do factor Xa estão associados a um risco de hemorragia inferior aos inibidores da trombina (A. E. P. Adang & J. B. M. Rewinkel, Drugs of the Future 2000, 25, 369-383).

Foram descritos, por exemplo, no documento WO-A-95/29189, inibidores da coagulação sanguínea específicos do factor Xa, de baixo peso molecular que são eficazes mas não causam efeitos secundários indesejados. No entanto, apesar de serem inibidores eficazes da coagulação sanguínea específico do factor Xa, é desejável que tais inibidores possuam também outras propriedades vantajosas, por exemplo, estabilidade no plasma e fígado e selectividade versus outras proteases da serina cuja inibição não é pretendida, tal como a trombina. Existe uma necessidade contínua para outros inibidores da coagulação sanguínea 2 específicos do factor Xa, de baixo peso molecular, que sejam eficazes e possuam, também, as vantagens anteriores. A inibição específica do complexo catalítico factor Vlla/factor tecidular utilizando anticorpos monoclonais (documento WO-A-92/06711) ou uma proteína, tal como factor Vila inactivada pela clorometilcetona (documentos WO-A-96/12800, W0-A-97/47651) é um meio extremamente eficaz de controlar a formação de trombos causada por lesão arterial aguda ou as complicações trombóticas relacionadas com septicemia bacteriana. Existem também resultados experimentais sugerindo que a inibição da actividade do factor Vlla/factor tecidular inibe a restenose após uma angioplastia de balão. Foram efectuados estudos de hemorragia em babuínos e indicaram que a inibição do complexo factor Vlla/factor tecidular tem a janela de segurança mais ampla, no que se refere à eficácia terapêutica e risco de hemorragia, de qualquer abordagem anticoagulante testada, incluindo trombina, plaquetas e inibição do factor Xa. Foram já descritos alguns inibidores do factor Vila. 0 documento EP-A-987274, por exemplo, revela compostos contendo uma unidade tripeptídica que inibe o factor VII. No entanto, o perfil das propriedades destes compostos continua a não ser o ideal e existe uma necessidade contínua por outros inibidores da coagulação sanguínea, inibidores do factor Vila de baixo peso molecular. A presente invenção satisfaz as necessidades anteriores ao proporcionar novos compostos da fórmula I que exibem actividade inibidora do factor Xa e/ou factor Vila e são agentes favoráveis para inibirem a coagulação sanguínea não desejada e formação de trombos. 3 I,

Assim, a presente invenção refere-se a compostos da fórmula

(D em que

Ro é fenilo ou piridilo, em que fenilo e piridilo, independentemente um do outro, são mono-, di- ou tri-substituidos, independentemente um do outro, por R2, R2 é 1. halogéneo, 2. -CN, 3. alquil (Ci-C4) oxi-, em que alquiloxilo é não substituído ou substituído por halogéneo ou um grupo amino, ou 4. -alquilo (C1-C4) , em que alquilo é não substituído ou substituído por um grupo amino ou halogéneo, Q e Q' são diferentes e são uma ligação directa ou -0-, X é -alquileno(C1-C3)-, em que alquileno é não substituído ou mono-, di- ou tri-substituído, 4 independentemente um do outro, por halogéneo, grupo amino ou grupo hidroxilo, D é um átomo de carbono,

a estrutura de fórmula III

(III) é um 1,3-fenileno, em que fenilo é não substituído ou mono-, di-ou tri-substituído, independentemente um do outro, por R1, R1 é 1. halogéneo, 1. halogéneo, 2. -N02, 3. -CN, 4. -NH2, 5. alquilamino (C1-C4)-, em que alquilo é não substituído ou mono-, di- ou tri-substituído, independentemente um do outro, por R13, 6. -OH, 5 7. -S02-NH2, 8. alquil (C1-C4) oxi-, em que alquilo é não substituído ou mono-, di- ou tri-substituído, independentemente um do outro, por R13, 9. arilo(C6-Ci4), em que arilo é não substituído ou mono-, di- ou tri-substituído, independentemente um do outro, por R13, 10. alquil (C1-C4)-, em que alquilo é não substituído ou mono-, di- ou tri-substituído, independentemente um do outro, por R13, 11. alquil (C1-C4) sulfonil-, em que alquilo é não substituído ou mono-, di- ou tri-substituído, independentemente um do outro, por R13, 12. -C (0) -NR14R15, em que R14R15, independentemente um do outro, são átomo de hidrogénio ou alquil (C1-C4) -, 13. R11R12N-, em que R11 e R12 em conjunto com o átomo de azoto ao qual estão ligados formam um anel heterocíclico monocíclico de 5 a 6 membros saturado ou insaturado que, além do átomo de azoto transportando R11 e R12, poder conter um ou dois heteroátomos no anel idênticos ou diferentes, escolhidos de oxigénio, enxofre e azoto e nos quais um ou dois dos átomos de carbono do anel podem ser substituídos por oxo para formar resíduo(s) -C(0)-, ou 6 14. -NR14R15, R13 é 1. halogéneo, 2. -CF3, 3. -NH2, 4. -OH, 5. alquil (C1-C4)ou R10 é V é 6. alquil (C1-C4) oxi-, átomo de hidrogénio, e um fragmento da fórmula lia, em que

L é A é U é em que uma ligação directa, átomo de hidrogénio, -C(0)-0H, -C(0)-O-alquilo (Ci C4), -C(0)-NR4R5 ou alquilo (C1-C4) , -NH2, metilo, -NH-C (0)-O-alquilo (C1-C4) ou -NH-C(O) 0- (CH2) -fenilo, 7 átomo de hidrogénio ou alquil(C1-C3)e M é R4 e R5 são independentemente um do outro, átomo de hidrogénio ou metilo. São preferidos os compostos da fórmula I, em que R0 é fenilo, em que fenilo é mono-, di- ou tri- substituído, independentemente um do outro, por R2, R2 é 1. halogéneo, 2. alquil (C1-C4) oxi-, em que alquiloxilo é não substituído ou substituído por halogéneo ou um grupo amino, ou 3. -alquilo (C1-C4), em que alquilo é não substituído ou substituído por um grupo amino ou halogéneo, Q e Q' são diferentes e são uma ligação directa ou -0-, X é -alquileno (C1-C3)-, D é um átomo de carbono, A sub-estrutura de fórmula III é um 1,3-fenileno, em que fenilo é não substituído ou mono-, di- ou tri-substituído, independentemente um do outro, por R1, R1 é 1. halogéneo, 8 2. -Ν02, 3. -CN, 4. -ΝΗ2. alquilo é não tri-substituído, 5. alquil (C1-C4) amino-, em que substituído ou mono-, di- ou independentemente um do outro, por 6. -OH, 7. -S02-NH2, 8. alquil (C1-C4) oxi-, substituído ou mono-, independentemente um do em que alquilo é não di- ou tri-substituído, outro, por R13, 9. -alquil(C1-C4), em que alquilo é não substituído ou mono-, di- ou tri-substituído, independentemente um do outro, por R13, 10. alquil (C1-C4)-sulfonil-, em que alquilo é não substituído ou mono-, di- ou tri-substituído, independentemente um do outro, por R13, 11. -C (0)-NR14R15, em que R14R15, independentemente um do outro são, átomo de hidrogénio ou -alquil (C1-C2) -, 9 12. R41R12N-, em que R11 e R12 são como definido acima, ou 13. -NR14R15, R13 é 1. halogéneo, 2. -CF3, 3. -NH2, 4. -OH, 5. -alquil (C1-C4)-, ou 6. alquil (C1-C4) oxi-, R10 é átomo de hidrogénio, e V é um fragmento da fórmula lia, em que L é uma ligação directa, A é átomo de hidrogénio, -C (0)-OH, -C (0)-0-alquilo(Ci — C4), -C(0)-NR4R5 ou -alquilo (C1-C4) , U é -NH2, metilo, -NH-C (0)-0-alquilo (C1-C4) ou -NH-C(O)- 0- (CH2) -fenilo, M é átomo de hidrogénio ou metilo, e R4 e R5 são independentemente um do outro, átomo de hidrogénio ou metilo. 10

Mais preferidos são os compostos da fórmula I, em que R0 é fenilo, em que fenilo é di-substituído, independentemente um do outro, por R2, R2 é 1. halogéneo, 2. alquil (Ci-C2) oxi-, em que alquiloxilo é não substituído ou substituído por um grupo amino, ou 3. -alquilo (C1-C4), em que alquilo é não substituído ou substituído por um grupo amino, Q e Q' são diferentes e são uma ligação directa ou -0-, X é -CH2-CH2-, D é um átomo de carbono, a estrutura de fórmula III é um 1,3-fenileno, em que fenilo é não substituído ou mono-, di- ou tri-substituído, independentemente um do outro, por R1 R1 é 1. halogéneo, 2. -OH, 3. -NH2, 11 4. -C (0)-NR14R15, em que R14R15, independentemente um do outro, são átomo de hidrogénio ou alquil (Ci-C2) 5. alquil (C1-C3) oxi-, em que alquilo é não substituído ou mono-, di- ou tri-substituido, independentemente um do outro, por R13, ou 6. alquil(C1-C3)-, em que alquilo é não substituído ou mono-, di- ou tri-substituido, independentemente um do outro, por R13, R13 é flúor ou cloro,

Rio é átomo de hidrogénio, e V é um fragmento da fórmula lia, em que L é uma ligação directa, A é átomo de hidrogénio, -C(0)-0H, -C(0)-0- alquilo (Ci-C4) , -C(0)-NR4R5 ou -alquilo (C1-C4), U é -NH2, metilo, -NH-C (0) -0-alquilo (C1-C4) ou -NH-C(O)- 0- (CH2) -fenilo, M é átomo de hidrogénio, e R4 e R5 são independentemente um do outro, átomo de hidrogénio ou metilo. 12

No geral, o significado de qualquer grupo, resíduo, heteroátomo, número, etc., que pode ocorrer mais do que uma vez nos compostos da fórmula I, é independente do significado deste grupo, resíduo, heteroátomo, número, etc., em qualquer outra situação. Todos os grupos, resíduos, heteroátomos, números etc. que podem ocorrer mais do que uma vez nos compostos da fórmula I podem ser idênticos ou diferentes.

Como aqui utilizado, o termo alquilo é para ser entendido no sentido mais amplo para significar resíduos hidrocarbonados que podem ser lineares, í. e. cadeia linear ou ramificados e que podem ser resíduos cíclicos ou acíclicos ou compreenderem qualquer combinação de subunidades cíclicas e acíclicas. Além disso, o termo alquilo, como aqui utilizado, inclui, expressamente, grupos saturados bem como grupos insaturados, cujos últimos contêm uma ou mais, por exemplo, duas ou três, ligações duplas e/ou ligações triplas, desde que as ligações duplas não estejam localizadas dentro de um grupo alquilo cíclico, de um modo tal que resulte num sistema aromático. Todas estas afirmações também se aplicam caso ocorra algum grupo alquilo como um substituinte noutro resíduo, por exemplo, num resíduo alquiloxilo, um resíduo alquiloxicarbonilo ou um resíduo arilalquilo. Exemplos de resíduos alquilo contendo 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 ou 8 átomos de carbono são metilo, etilo, propilo, butilo, pentilo, hexilo, heptilo ou octilo, os n-isómeros de todos estes resíduos, isopropilo, isobutilo, 1-metilbutilo, isopentilo, neopentilo, 2,2-dimetilbutilo, 2-metilpentilo, 3-metilpentilo, iso-hexilo, sec-butilo, terc-butilo, terc-pentilo, sec-butilo, terc-butilo ou terc-pentilo.

Os resíduos alquilo insaturados são, por exemplo, resíduos alcenilo, tais como vinilo, 1-propenilo, 2-propenilo (= alilo), 13 2-butenilo, 3-butenilo, 2-metil-2-butenilo, 3-metil-2-butenilo, 5-hexenilo ou 1,3-pentadienilo ou resíduos alquinilo, tais como etinilo, 1-propinilo, 2-propinilo (= propargilo) ou 2-butinilo. Os resíduos alquilo podem também ser insaturados quando são substituídos.

Exemplos de resíduos alquilo cíclicos são resíduos cicloalquilo contendo 3, 4, 5 ou 6 átomos de carbono no anel como ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo ou ciclo-hexilo, que podem também ser substituídos e/ou insaturados. Os grupos alquilo cíclicos insaturados e grupos cicloalquilo insaturados como, por exemplo, ciclopentilo ou ciclo-hexenilo podem ser ligados via qualquer átomo de carbono.

Com certeza, um grupo alquilo cíclico tem de conter, pelo menos, três átomos de carbono e um grupo alquilo insaturado tem de conter, pelo menos, dois átomos de carbono. Assim, um grupo como alquilo (Ci-Ce) é para ser entendido como compreendendo, entre outros, alquilo (Ci-Cs) saturado acíclico, cicloalquilo (Ci-C6) e alquilo (C2-C8) insaturado como alcenilo (C2—Ce) ou alquiniloC2-C8) . De um modo semelhante, um grupo como alquilo(C1-C4) é para ser entendido como compreendendo, entre outros, alquilo(C1-C4) saturado acíclico e alquilo (C2-C4) insaturado como alcenilo (C2-C4) ou alquinilo (C2-C4) . A não ser que seja afirmado de outro modo, o termo alquilo compreende, de um modo preferido, resíduos hidrocarbonados saturados acíclicos que têm de um a de seis átomos de carbono e que podem ser lineares ou ramificados. Um grupo particular de resíduos alquilo acíclicos saturados é formado por 14 alquilo(C1-C4), como metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, sec-butilo e terc-butilo. A não ser que seja afirmado de outro modo e independentemente de quaisquer substituintes específicos liqados a grupos alquilo que são indicados na definição dos compostos da fórmula I, os grupos alquilo podem, no geral, ser não substituídos ou substituídos por um ou mais, por exemplo um, dois ou três substituintes idênticos ou diferentes. Podem estar presentes quaisquer tipo de substituintes nos resíduos alquilo substituídos em qualquer posição desejada, desde que a substituição não conduza a uma molécula instável. Exemplos de resíduos de alquilo substituídos são resíduos alquilo nos quais um ou mais, por exemplo, 1, 2 ou 3 átomos de hidrogénio são substituídos por átomos de halogéneo, em particular, átomos de flúor. 0 termo grupo arilo carbocíclico com 5 a 10 membros mono-ou bicíclico refere-se a, por exemplo, fenilo ou naftilo. O termo heteroarilo com 5 a 10 membros mono- ou bicíclico contendo um ou dois átomos de azoto como heteroátomos do anel refere-se a arilo(C5-C10), no qual um ou mais dos 5 a 10 átomos de carbono do anel são substituídos por heteroátomos, tais como azoto, oxigénio ou enxofre. Exemplos são piridilo; tal como 2-piridilo, 3-piridilo ou 4-piridilo; pirrolilo; tal como 2-pirrolilo e 3-pirrolilo; furilo; tal como 2-furilo e 3-furilo; tienilo; tal como 2-tienilo e 3-tienilo; imidazolilo, pirazolilo, oxazolilo, isoxazolilo, tiazolilo, isotiazolilo, tetrazolilo, piridazinilo, pirazinilo, pirimidinilo, indolilo, isoindolilo, indazolilo, ftalazinilo, quinolilo, isoquinolilo ou quinoxalinilo. 15 0 termo R11 e R12, em conjunto com o átomo de azoto ao qual estão ligados, formam um anel heterocíclico monocíclico com 5 a 6 membros saturado ou insaturado que se refere a pirrolo, piperidina, pirrolidina, morfolina, piperazina, piridina, pirimidina, imidazole ou tiomorfolina. 0 termo arilo refere-se a um resíduo hidrocarbonado policíclico ou monocíclico no qual está presente, pelo menos, um anel carbocíclico que tem um sistema de electrões pi conjugado. Num resíduo arilo (C6-Ci4) estão presentes de 6 até 14 átomos de carbono no anel. Exemplos de resíduos arilo (C6-Ci4) são fenilo, naftilo, bifenililo, fluorenilo ou antracenilo. A não ser que seja afirmado o contrário, e independentemente de quaisquer substituintes específicos ligados a grupos arilo que são indicados na definição dos compostos da fórmula I, os resíduos arilo, por exemplo, fenilo, naftilo ou fluorenilo podem, no geral, ser substituídos ou não substituídos, por um ou mais, por exemplo, um, dois ou três substituintes iguais ou diferentes. Os resíduos arilo podem ser ligados via qualquer posição desejada e, nos resíduos arilo substituídos, os substituintes podem ser colocados em qualquer posição desejada. A não ser que seja afirmado o contrário, e independentemente de quaisquer substituintes específicos ligados a grupos arilo que são indicados na definição dos compostos da fórmula I, os substituintes que podem estar presentes nos grupo arilo substituídos são, por exemplo, alquilo (Ci-C8) , em particular, alquilo (Ci-C4) , tais como metilo, etilo ou terc-butilo, hidroxilo, alquil(Ci-Cs)oxilo, em particular, alquil(Ci~C4)oxilo, tal como metoxilo, etoxilo ou terc-butoxilo, metilenodioxilo, etilenodioxilo, F, Cl, Br, I, ciano, nitro, trifluorometilo, trifluorometoxilo, hidroximetilo, formilo, 16 acetilo, amino, mono- ou di-alquil (C1-C4) amino, (alquil(C1-C4))carbonilamino, como acetilamino, hidroxicarbonilo, (alquil-(C1-C4))oxicarbonilo, carbamoílo, benzilo opcionalmente substituído no grupo fenilo, fenilo opcionalmente substituído, fenoxilo opcionalmente substituído ou benziloxilo opcionalmente substituído no grupo fenilo. Um grupo arilo substituído que está presente numa posição específica dos compostos de fórmula I pode, independentemente de outros grupos arilo, ser substituído por substituintes seleccionados de qualquer subgrupo desejado dos substituintes listados antes e/ou na definição específica desse grupo. Por exemplo, um grupo arilo substituído por ser substituído por um ou mais substituintes idênticos ou diferentes, escolhidos de alquilo(C1-C4), hidroxilo, alquil(C1-C4)oxilo, F, Cl, Br, I, ciano, nitro, trifluorometilo, amino, fenilo, benzilo, fenoxilo e benziloxilo. No geral, de um modo preferido, não estão presentes mais de dois grupos nitro nos compostos da fórmula I.

Nos resíduos fenilo mono-substituídos, o substituinte pode estar localizado na posição 2-, na posição 3- ou na posição 4-, sendo a posição 3- e a posição 4- preferidas. Se um grupo fenilo carrega dois substituintes, estes podem estar localizados, na posição 2,3-, posição 2,4-, posição 2,5-, posição 2,6-, posição 3,4 ou posição 3,5-. No resíduos fenilo que suportam três substituintes, os substituintes podem estar localizados na posição 2,3,4-, posição 2,3,5-, posição 2,3,6-, posição 2,4,5-, posição 2,4,6- ou posição 3,4,5-. Os resíduos naftilo podem ser 1-naftilo e 2-naftilo. Nos resíduos naftilo substituídos, os substituintes podem estar localizados em quaisquer posições, por exemplo, nos resíduos 1-naftilo mono-substituído na posição 2-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- ou 8- e nos resíduos 2-naftilo mono-substituído na posição 1-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- ou 8-. Os 17 resíduos bifenililo podem ser 2-bifenililo, 3-bifenililo e 4-bifenililo. Os resíduos fluorenilo podem ser 1-, 2-, 3-, 4- ou 9-fluorenilo. Nos resíduos fluorenilo mono-substituídos ligados via posição 9-, o substituinte está, de um modo preferido, presente na posição 1-, 2-, 3- ou 4-. 0 grupo Het compreende grupos contendo 5, 6, 7, 8, 9 ou 10 átomos no anel no sistema de anel monocíclico, bicíclico ou heterocíclico relacionado. Nos grupos monocíclicos Het, de um modo preferido, o anel heterocíclico é um anel de 5 membros, 6 membros ou 7 membros, de um modo particularmente preferido, um anel de 5 membros ou 6 membros. Nos grupos bicíclicos Het, de um modo preferido, estão presentes dois anéis fundidos, um dos quais é um anel de 5 membros ou um anel heterocíclico de 6 membros e o outro é um anel carbocíclico ou heterocíclico de 5 membros ou 6 membros, i. e. um anel bicíclico Het contém, de um modo preferido, 8, 9 ou 10 átomos no anel, de um modo particularmente preferido, 9 ou 10 átomos no anel.

Het compreende sistemas de anel heterocíclico saturados que não contêm quaisquer ligações duplas no interior dos anéis, bem como sistemas de anel heterocíclico mono-insaturado e poli-insaturado que contêm uma ou mais, por exemplo uma, duas, três, quatro ou cinco ligações duplas no interior dos anéis, desde que o sistema resultante seja estável. Os anéis insaturados podem ser aromáticos ou não aromáticos, i. e. as ligações duplas no interior dos anéis no grupo Het podem ser organizadas de modo a que resulte num sistema de electrão pi conjugado.

Os anéis aromáticos num grupo Het podem ser anéis de 5 membros ou de 6 membros, í. e. grupos aromáticos num grupo Het 18 contêm 5 até 10 átomos no anel. Os anéis aromáticos num grupo Het compreendem, assim, e heterociclicos monociclicos de 5 membros e 6 membros heterociclicos biciclicos constituídos por dois anéis de 5 membros, um anel de 5 membros e um anel de 6 membros ou dois anéis de 6 membros. Nos grupos aromáticos biciclicos num grupo Het, um ou ambos os anéis podem conter heteroátomos. Os grupos aromáticos Het podem, também, ser referidos pelo termo normal heteroarilo, para o qual todas as definições e explicações acima e abaixo relacionadas com o Het se aplicam em concordância. A não ser que seja afirmado de outro modo, nos grupos Het e quaisquer outros grupos heterociclicos, de um modo preferido, estão presentes 1, 2, 3 ou 4 heteroátomos no anel, idênticos ou diferentes, escolhidos de azoto, oxigénio e enxofre. De um modo particularmente preferido, nestes grupos estão presentes um ou dois heteroátomos idênticos ou diferentes escolhidos de azoto, oxigénio e enxofre. Os heteroátomos do anel podem estar presentes em qualquer número e em qualquer posição desejados em relação a cada um, desde que o sistema heterocíclico resultante seja conhecido na técnica e seja estável e adequado como um subgrupo numa substância de fármaco. Exemplos de estruturas relacionadas de heterocíclos das quais o grupo Het pode ser derivado são, aziridina, oxirano, azetidina, pirrolo, furano, tiofeno, dioxole, imidazole, pirazole, oxazole, isoxazole, tiazole, isotiazole, 1,2,3-triazole, 1,2,4-triazole, tetrazole, piridina, pirano, tiopirano, piridazina, pirimidina, pirazina, 1,2-oxazina, 1,3-oxazina, 1,4-oxazina, 1,2-tiazina, 1,3-tiazina, 1,4-tiazina, 1,2,3-triazina, 1,2,4-triazina, 1,3, 5-triazina, azepina, 1,2-diazepina, 1,3-diazepina, 1,4-diazepina, indole, isoindole, benzofurano, benzotiofeno, 1,3-benzodioxole, indazole, benzimidazole, benzoxazole, benzotiazole, quinolina, 19 isoquinolina, cromano, isocromano, cinolina, quinazolina, quinoxalina, ftalazina, piridoimidazoles, piridopiridinas, piridopirimidinas, purina, pteridina etc., bem como sistemas de em anel que resultam dos heterocíclos listados, por fusão (ou condensação) de um anel carbociclico, por exemplo, benzo- fundidos, ciclopenta-fundidos, ciclo-hexa-fundidos ou derivados ciclo-hepta fundidos desses heterocíclos. 0 facto de muitos dos nomes dos heterocíclos anteriormente listados serem nomes químicos de sistemas em anel aromático ou insaturados não implica que os grupos Het possam ser apenas derivados do sistema de anel insaturado respectivo. Os nomes aqui servem apenas para descrever o sistema em anel em relação ao tamanho do anel e ao número dos heteroátomos e as suas posições relativas. Como explicado acima, o grupo Het pode ser saturado ou parcialmente insaturado ou aromático e pode, assim, ser derivado não só dos próprios heterocíclos listados antes como também de todos os seus análogos completamente ou parcialmente hidrogenados mas também dos seus análogos mais altamente insaturados, se aplicável. Como exemplos de análogos completamente ou parcialmente hidrogenados dos heterocíclos listados antes, a partir dos quais os grupos Het podem ser derivados, podem ser mencionados os seguintes: pirrolina, pirrolidina, tetra-hidrofurano, tetra-hidrotiofeno, di-hidropiridina, tetra-hidropiridina, piperidina, 1.3- dioxolano, 2-imidazolina, imidazolidina, 4,5-di-hidro-l,3- oxazol, 1,3-oxazolidina, 4,5-di-hidro-l,3-tiazole, 1.3- tiazolidina, per-hidro-1,4-dioxano, piperazina, per-hidro- 1.4- oxazina (=morfolina), per-hidro-1,4-tiazina (=tiomorfolina), per-hidroazepina, indolina, isoindolina, 1,2,3,4-tetra-hidroquinolina, 1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolina, etc. 20 0 resíduo Het pode ser ligado via qualquer átomo de carbono do anel e, no caso dos heterocíclos de azoto via qualquer átomo de azoto do anel adequado. Assim, por exemplo, um resíduo pirrolilo pode ser 1-pirrolilo, 2-pirrolilo ou 3-pirrolilo, um resíduo pirrolidinilo pode ser pirrolidin-l-ilo (= pirrolidino), pirrolidin-2-ilo ou pirrolidin-3-ilo, um resíduo piridinilo pode ser piridin-2-ilo, piridin-3-ilo ou piridin-4-ilo, um resíduo piperidinilo pode ser piperidin-l-ilo (= piperidino), piperidin-2-ilo, piperidin-3-ilo ou piperidin-4-ilo. Furilo poder ser 2-furilo ou 3-furilo, tienilo pode ser 2-tienilo ou 3-tienilo, imidazolilo pode ser imidazol-l-ilo, imidazol-2-ilo, imidazol-4-ilo ou imidazol-5-ilo, 1,3-oxazolilo pode ser 1,3-oxazol-2-ilo, 1.3- oxazol-4-ilo ou 1,3-oxazol-5-ilo, 1,3-tiazolilo pode ser 1.3- tiazol-2-ilo, 1,3-tiazol-4-ilo ou 1,3-tiazol-5-ilo, pirimidinilo pode ser pirimidin-2-ilo, pirimidin-4-ilo (= 6-pirimidinilo) ou 5-pirimidinilo, piperazinilo pode ser piperazin-l-ilo (= piperazin-4-ilo = piperazino) ou piperazin-2-ilo. Indolilo pode ser indol-l-ilo, indol-2-ilo, indol-3-ilo, indol-4-ilo, indol-5-ilo, indol-6-ilo ou indol-7-ilo. De um modo semelhante, os resíduos benzimidazolilo, benzoxazolilo e benzotiazol podem ser ligados via posição 2 e via qualquer das posições 4, 5, 6, e 7. 0 quinolinilo pode ser quinolin-2-ilo, quinolin-3-ilo, quinolin-4-ilo, quinolin-5-ilo, quinolin-6-ilo, quinolin-7-ilo ou quinolin-8-ilo, isoqinolinilo pode ser isoquinol-l-ilo, isoquinolin-3-ilo, isoquinolin-4-ilo, isoquinolin-5-ilo, isoquinolin-6-ilo, isoquinolin-7-ilo ou isoquinolin-8-ilo. Além de estar ligado via qualquer das posições indicadas para o quinolinilo e isoquinolinilo, o 1,2,3, 4-tetra-hidroquinolinilo e 1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolinilo podem estar ligados via átomos de azoto na posição 1 e posição 2, respectivamente. 21 A não ser que seja afirmado de outro modo e independentemente de quaisquer substituintes especificados ligados a grupos Het ou quaisquer outros grupos heterociclicos que são indicados na definição dos compostos da fórmula I, o grupo Het pode ser não substituído ou substituído nos átomos de carbono do anel, com um ou mais, por exemplo um, dois, três, quatro ou cinco substituintes idênticos ou diferentes como alquilo (Ci-Cs) , em particular alquilo (C1-C4) , alquil (Ci-Cs) oxilo, em particular alquil(C1-C4)oxilo, alquil (C1-C4) tio, halogéneo, nitro, amino, (alquil(C1-C4)-)carbonilamino como acetilamino, trifluorometilo, trifluorometoxilo, hidroxilo, oxo, hidroxi-alquilo (C1-C4) , tal como, por exemplo, hidroximetilo ou 1-hidroxietilo ou 2-hidroxietilo, metilenodioxilo, etilenodioxilo, formilo, acetilo, ciano, aminosulfonilo, metilsulfonilo, hidroxicarbonilo, aminocarbonilo, alquil-(C1-C4)-oxicarbonilo, fenilo opcionalmente substituído, fenoxilo opcionalmente substituído, benzilo opcionalmente substituído no grupo fenilo, benziloxilo opcionalmente substituído no grupo fenilo, etc. Os substituintes podem estar presentes em qualquer posição desejada desde que resulte numa molécula estável. Com certeza, um grupo oxo não pode estar presente num anel aromático. Cada átomo de azoto do anel adequado num grupo Het pode, independentemente um do outro, ser não substituído, i. e. suportar um átomo de hidrogénio, ou pode ser substituído, i. e. suportar um substituinte como alquilo (Ci-C8) , por exemplo, alquilo (C1-C4) , tal como metilo ou etilo, fenilo opcionalmente substituído, fenil-alquilo (C1-C4) , por exemplo, benzilo, opcionalmente substituído no grupo fenilo, hidroxi-alquilo (C2-C4), tal como, por exemplo, 2-hidroxietilo, acetilo ou outro grupo acilo, metilsulfonilo ou outro grupo sulfonilo, aminocarbonilo, alquil (C1-C4) -oxicarbonilo, etc. No geral, nos compostos da fórmula I, os heterocíclos de azoto também podem 22 estar presentes como N-óxidos ou como sais quaternários. Os átomos de enxofre do anel podem ser oxidados no sulfóxido ou na sulfona. Assim, por exemplo, um resíduo tetra-hidrotienilo pode estar presente como resíduo S,S-dioxotetra-hidrotienilo ou um resíduo tiomorfolinilo, como tiomorfolin-4-ilo, pode estar presente como l-oxo-tiomorfolin-4-ilo ou 1,1-dioxo-tiomorfolin-4-ilo. Um grupo substituído Het que pode estar presente numa posição específica dos compostos de fórmula I pode, independentemente de outros grupos Het, ser substituído por substituintes seleccionados de qualquer subgrupo desejado dos substituintes listados antes e/ou na definição desse grupo.

Halogéneo é flúor, cloro, bromo ou iodo, de um modo preferido, flúor, cloro ou bromo, de um modo particularmente preferido, cloro ou bromo.

Os átomos de carbono opticamente activos presentes nos compostos da fórmula I podem, independentemente uns dos outros, apresentar configuração R ou configuração S. Os compostos da fórmula I podem estar presentes na forma de enantiómeros puros ou diasterómeros puros, ou na forma de misturas de enantiómeros e/ou diasterómeros, por exemplo, na forma de racematos. A presente invenção refere-se a enantiómeros puros e misturas de enantiómeros, bem como a diastereómeros puros e misturas de diastereómeros. A invenção compreende misturas de dois ou de mais de dois estereoisómeros da fórmula I e compreende todas as proporções dos estereoisómeros nas misturas. No caso dos compostos da fórmula I poderem estar presentes como isómeros E ou isómeros z (ou isómeros cis ou isómeros trans), a invenção refere-se a ambos, os isómeros E puros e isómeros Z puros e a misturas E/Z, em todas as proporções. A invenção compreende também todas as formas tautoméricas dos compostos da fórmula I. 23

Os diastereómeros, incluindo isómeros E/Z, podem ser separados nos isómeros individuais, por exemplo, por cromatografia. Os racematos podem ser separados nos dois enantiómeros por métodos normais, por exemplo, por cromatografia nas fases quirais ou por resolução, por exemplo, por cristalização dos sais diastereoméricos obtidos com ácidos ou bases opticamente activos. Os compostos estereoquimicamente uniformes da fórmula I podem, também, ser obtidos ao empregar materiais de partida estereoquimicamente uniformes ou por utilização de reacções esteréosselectivas. A escolha de incorporar, num composto da fórmula I, um bloco de construção com configuração R ou configuração S, ou no caso de uma unidade de aminoácido presente num composto da fórmula I, de incorporar um bloco de construção designado como aminoácido D ou aminoácido L, pode depender, por exemplo, das características desejadas do composto da fórmula I. Por exemplo, a incorporação de um bloco de construção aminoácido D pode conferir estabilidade in vitro ou in vivo aumentadas. A incorporação de um bloco de construção aminoácido D pode também atingir um aumento ou diminuição desejados na actividade farmacológica do composto. Nalguns casos, pode ser desejado permitir ao composto permanecer activo durante apenas um curto periodo de tempo. Em alguns casos, a incorporação de um bloco de construção aminoácido L no composto pode permitir às peptidases endógenas, num indivíduo, digerir o composto in vivo, limitando, assim, a exposição do indivíduo ao composto activo. Pode ser observado um efeito semelhante nos compostos da invenção por alteração da configuração noutro bloco de construção de configuração S para configuração R ou vice versa. Tendo em consideração as necessidades médicas, um especialista na técnica 24 pode determinar as características desejadas, por exemplo, uma estereoquímica favorável do composto da invenção necessário.

Os sais fisiologicamente toleráveis dos compostos de fórmula I são sais não tóxicos que são fisiologicamente aceitáveis, em particular, sais farmaceuticamente utilizáveis. Tais sais dos compostos da fórmula I contendo grupos acidicos, por exemplo, um grupo carboxilo COOH são, por exemplo, sais de metais alcalinos ou sais de metais alcalino terrosos, tais como sais de sódio, sais de potássio, sais de magnésio e sais de cálcio e também sais com iões amónio quaternário fisiologicamente toleráveis, tais como tetrametilamónio ou tetraetilamónio e sais de adição de ácidos com amónia e aminas orgânicas fisiologicamente toleráveis, tais como metilamina, dimetilamina, trimetilamina, etilamina, trietilamina, etanolamina ou tris-(2-hidroxietil)amina. Os grupos básicos contidos nos compostos da fórmula I, por exemplo, grupos amino ou grupos guanidino, formam sais de adição de ácido, por exemplo, com ácidos inorgânicos, tais como ácido clorídrico, ácido bromídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico ou ácido fosfórico, ou com ácidos carboxílicos orgânicos e ácidos sulfónicos, tais como ácido fórmico, ácido acético, ácido oxálico, ácido cítrico, ácido láctico, ácido maleico, ácido sucínico, ácido malónico, ácido benzóico, ácido maleico, ácido fumárico, ácido tartárico, ácido metanossulfónico ou ácido p-toluenossulfónico. Podem também estar presentes compostos da fórmula I que contêm simultaneamente um grupo básico e um grupo acídico, por exemplo, um grupo guanino e um grupo carboxílico, como ziteriões (betaínas), que são deste modo incluídos na presente invenção. 25

Os sais dos compostos da fórmula I podem ser obtidos por métodos tradicionais conhecidos pelos especialistas na técnica, por exemplo, por combinação de um composto da fórmula I com um ácido ou base orgânico ou inorgânico num solvente ou dispersante, ou de outros sais por permuta catiónica ou permuta aniónica. A presente invenção inclui também todos os sais dos compostos da fórmula I, que devido à sua baixa tolerância fisiológica, não são directamente adequados para utilização em medicamentos, mas são adequados, por exemplo, como intermediários para efectuar outras alterações químicas dos compostos da fórmula I ou como materiais de partida para a preparação de sais fisiologicamente toleráveis. Além disso, a presente invenção inclui todos os solvatos dos compostos da fórmula I, por exemplo, hidratos ou aductos com álcoois. A invenção inclui também derivados e alterações dos compostos da fórmula I, por exemplo, pró-fármacos, formas protegidas e outros derivados fisiologicamente toleráveis, bem como metabolitos activos dos compostos da fórmula I. A invenção refere-se, em particular, a pró-fármacos e formas protegidas dos composto de fórmula I que podem ser convertidas em compostos da fórmula I, sob condições fisiológicas. Os pró-fármacos adequados para os compostos da fórmula I, i. e. derivados quimicamente modificados dos compostos da fórmula I com propriedades que são melhoradas de um modo desejado, por exemplo, em relação à solubilidade, biodisponibilidade ou duração da acção, são conhecidos pelos especialistas na técnica. Pode-se encontrar informação mais detalhada relacionada com pró-fármacos em literatura convencional como, por exemplo, Design of Prodrugs, H. Bundgaard (ed.), Elsevier, 1985, Fleisher et al., Advanced Drug Delivery Reviews 19 (1996) 115-130; ou H. Bundgaard, Drugs of the Future 16 (1991) 443, que estão todos aqui incorporados 26 por referência. Os pró-fármacos adequados para os compostos da fórmula I são, especialmente, pró-fármacos acilo e pró-fármacos carbamato de grupos contendo azoto passíveis de serem acilados, tais como grupos amino e de grupos grupo guanidino e também pró-fármacos éster e pró-fármacos amida do ácido carboxílico que podem estar presente em compostos da fórmula I. Nos pró-fármacos acilo e pró-fármacos carbamato, um ou mais, por exemplo, um ou dois átomos de hidrogénio ou átomos de azoto em tais grupos, são substituídos por um grupo acilo ou um carbamato, de um modo preferido, um grupo alquil(Ci-C6)-oxicarbonilo. Os grupos acilo e grupos carbamato adequados para pró-fármacos acilo e pró-fármacos carbamato são, por exemplo, os grupos Rpl-CO- e Rp20-C0-, nos quais Rpl é hidrogénio, alquilo (Ci-Ci8) , cicloalquilo (C3-C8) , cicloalquil (C3-C8) -alquil- (C1-C4) -, arilo (C6-Ci4), Het-, aril- (C6-Ci4) -alquil- (C1-C4) - ou Het-alquil-(Ci-C4) - e nos quais Rp2 tem os significados indicados para Rpl com a excepção do hidrogénio. A presente invenção refere-se também a processos de preparação através dos quais podem ser obtidos os compostos da fórmula I e que compreendem um ou mais dos passos de síntese descritos abaixo. Os compostos da fórmula I podem, geralmente, ser preparados, por exemplo, no decorrer de uma síntese convergente, por ligação de dois ou mais fragmentos que podem ser derivados retrossinteticamente da fórmula I. No decorrer da preparação dos compostos de fórmula I pode, geralmente, ser vantajoso ou necessário introduzir grupos funcionais que conduzam a reacções indesejadas ou reacções secundárias no passo de síntese respectivo, na forma de grupos precursores que são mais tarde convertidos nos grupos funcionais desejados, ou para bloquear, temporariamente, grupos funcionais através duma estratégia de grupo de protecção adequado para o problema de 27 síntese. Tais estratégias são bem conhecidas pelos especialistas na técnica (ver, por exemplo, Greene e Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, Wiley, 1991) . Como exemplos de grupos precursores, podem ser mencionados grupos nitro e grupos ciano, que mais tarde podem ser convertidos por redução, por exemplo, por hidrogenação catalítica em grupos amino e grupo aminometilo, respectivamente. Os grupos de protecção podem também ter o significado de uma fase sólida e a clivagem a partir da fase sólida representa a remoção do grupo de protecção. A utilização de tais técnicas é conhecida pelos especialistas na técnica (Burgess K (Ed.) Solid Phase Organic Synthesis, New York: Wiley, 2000) . Por exemplo, pode ser ligado um grupo hidroxilo fenólico a uma resina de tritil-polistireno, que funciona como grupo de protecção e a molécula é clivada desta resina por tratamento com TFA numa etapa posterior da síntese.

Por exemplo, para a preparação de um composto da fórmula I, um bloco de construção de fórmula XI,

XI no qual R0, Q, Q', X, são como definido abaixo para os compostos da fórmula I, mas os grupos funcionais também podem, opcionalmente, estar presentes na forma de grupos precursores ou podem estar protegidos por grupos de protecção conhecidos pelos especialistas na técnica, e. g. um grupo amino pode ser protegido com um grupo terc.-butiloxicarbonilo ou um grupo

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hidrogénio ou como R1 que tem o mesmo significado como na fórmula I, mas pode também, opcionalmente, estar presente na forma de grupos precursores ou pode estar protegido por grupos de protecção conhecidos pelos especialistas na técnica, e. g. pode ser ligado um grupo hidroxilo a uma resina de poliestireno e Y é um grupo de saída nucleofilicamente substituível ou um grupo hidroxilo, é feito reagir com um fragmento de fórmula III H-NRio-V (XII)

Na qual Rio e V são como definido acima para os compostos da fórmula I, mas os grupos funcionais podem também estar presentes, opcionalmente, na forma de grupos precursores ou podem estar protegidos por grupos de protecção. 0 grupo COY na fórmula XI é, de um modo preferido, o grupo ácido carboxílico COOH ou um derivado do ácido carboxílico activado. Assim, Y pode ser, por exemplo, hidroxilo, halogéneo, em particular, cloro ou bromo, alcoxilo, em particular, metoxilo ou etoxilo, ariloxilo, por exemplo, fenoxilo ou pentafluorofenoxilo, feniltio, metiltio, 2-piridiltio ou um resíduo de um heterocíclo de azoto ligado via átomo de azoto, em particular, um resíduo de um azole, tal como, por exemplo, 1-imidazolilo. Alem disso, Y pode ser, por exemplo, (alquil-(C1-C4) ) -0-C0-0- ou tolilsulfoniloxilo e o derivado de ácido activado pode ser, assim, um anidrido misto.

Se Y é hidroxilo, então o ácido carboxílicos é, activado inicialmente, de um modo apropriado, por exemplo, por um dos vários métodos utilizados para junção de péptidos que são bem conhecidos pelos especialistas na técnica. Exemplos de agentes de activação adequados são tetrafluoroborato de 29 Ο-((ciano(etoxicarbonil)metileno)amino)-1,1, 3,3-tetrametilurónio (TOTU); (Kõnig et al., Proc. 21st Europ. Peptide Symp. 1990 (eds. Giralt, Andreu), Escom, Leiden 1991, p. 143), hexafluorofosfato de O-(benzotriazol-l-il)-1,1,3,3- tetrametilurónio (HBTU), hexafluorofosfato de O-(7-azabenzotriazol-l-il)-1,1,3,3-tetrametilurónio (HATU) (L. A. Carpino, J. Am. Chem. Soc. 1993, 115, 4397), ou carbodiimidas como diciclo-hexilcarbodiimida ou diisopropilcarbodiimida. A activação da função ácido carboxilico pode também ser efectuada, de um modo favorável, por exemplo, por conversão do grupo ácido carboxilico no éster pentafluorofenilo, utilizando diciclo-hexilcarbodiimida e pentafluorofenol. São também indicados vários métodos adequados para a preparação de derivados de ácido carboxilico activados, com detalhes da literatura de origem em J. March, Advanced Organic Chemistry, Quarta Edição, John Wiley & Sons, 1992. A activação e a subsequente reacção com o composto da formula III são, geralmente, efectuadas na presença de um solvente ou diluente inerte, por exemplo, DCM, clorofórmio, THF, éter dietílico, n-heptano, n-hexano, n-pentano, ciclo-hexano, éter diisopropílico, éter terc-butilmetílico, acetonitrilo, DMF, DMSO, dioxano, tolueno, benzeno, acetato de etilo ou uma mistura destes solventes, se apropriado com adição de uma base tal como, por exemplo, terc-butóxido de potássio, tributilamina, trietilamina ou diisopropiletilamina. O produto resultante é um composto da fórmula I, no qual os grupos funcionais podem também estar presentes na forma de grupos precursores ou podem estar protegidos por grupos de protecção. Se ainda estiverem presentes quaisquer grupos de protecção ou grupos precursores, estes são então removidos por métodos conhecidos (ver Greene e Wuts, Protective Groups in 30

Organic Synthesis, Wiley, 1991), ou convertidos nos grupos finais desejados, respectivamente. E. g., se um grupo ácido carboxílico protegido como éster de terc-butilo e o ácido carboxílico livre é para ser preparado como o composto final, o grupo de protecção pode ser removido por reacção com ácido trifluoroacético ou os grupos de protecção terc-butiloxicarbonilo podem ser removidos por tratamento com ácido trifluoroacético. Se desejado, podem depois ser efectuadas outras reacções com os compostos obtidos, através de processos convencionais, por exemplo, reacções de acilação ou reacções de esterificação, ou os compostos podem ser convertidos nos sais ou pró-fármacos fisiologicamente toleráveis, através de processos convencionais conhecidos pelos especialistas na técnica.

Podem ser preparados outros compostos da fórmula I de um modo semelhante ao descrito acima, por junção de fragmento da fórmula XIII com o fragmento XII.

Ro-Q-X-Q'-W-C(0)-Y (XIII) no qual Ro, Q, Q' , X e Y são como definido acima para os compostos da fórmula I, W é a substrutura de fórmula III, mas os grupos funcionais podem também, opcionalmente, estar presentes na forma de grupos precursores ou podem ser protegidos por grupos de protecção conhecidos pelos especialistas na técnica, e. g. um grupo amino pode ser protegido com um grupo terc-butiloxicarbonilo ou um grupo benziloxicarbonilo ou um grupo hidroxilo pode estar ligado a uma resina de poliestireno.

Os fragmentos da fórmula XI, XII e XIII são preparados através de métodos bem conhecidos pelos especialistas na técnica (E. g. em J March, Advanced Organic Chemistry, 4 a Edição, John 31

Wiley & Sons, 1992; RC Larock, Comprehensive Organic Transformations, VCH Publishers, Nova Iorque 1989).

Os compostos da presente invenção são inibidores da protease da serina que inibem a actividade dos factores Xa e/ou factor Vila das enzimas de coagulação sanguínea. Em particular, são inibidores altamente activos do factor Xa. São inibidores específicos da protease da serina, na medida em que estes não inibem, substancialmente, a actividade de outras proteases cuja inibição não é desejada. A actividade dos compostos da fórmula I pode ser determinada, por exemplo, nos ensaios descritos abaixo ou noutros ensaios conhecidos pelos especialistas na técnica. Em relação à inibição do factor Xa, uma forma de realização preferida da invenção compreende compostos que apresentem um Ki < 1 para a inibição do factor Xa, como determinado no ensaio descrito abaixo, com ou sem inibição concomitante do factor Vila, e que, de um modo preferido, não inibe, substancialmente, a actividade de outras proteases envolvidas na coagulação e fibrinólise, cuja inibição não é desejada (utilizando a mesma concentração do inibidor). Os compostos da invenção inibem a actividade catalítica do factor Xa, quer directamente, dentro do complexo protrombinase ou como uma subunidade solúvel, ou indirectamente, por inibição da junção do factor Xa no complexo protrombinase. A presente invenção refere-se também aos compostos de fórmula I e/ou seus sais e/ou seus pró-fármacos fisiologicamente toleráveis para utilização como fármacos (ou medicamentos), à utilização dos compostos da fórmula I e/ou seus sais e/ou seus pró-fármacos fisiologicamente toleráveis para a produção de fármacos para inibição do factor Xa e/ou factor Vila ou para influenciar a coagulação sanguínea, resposta inflamatória ou 32 fibrinólise ou para a terapia ou profilaxia das doenças mencionadas acima ou abaixo, por exemplo, para a produção de fármacos para a terapia e profilaxia de distúrbios cardiovasculares, doenças tromboembólicas ou restenose. A invenção refere-se também à utilização de compostos da formula I e/ou seus sais e/ou seus pró-fármacos fisiologicamente toleráveis para a inibição do factor Xa e/ou factor Vila ou para influenciar a coagulação sanguínea ou fibrinólise ou para a terapia ou profilaxia de doenças mencionadas acima ou abaixo, por exemplo, para utilização em terapia ou profilaxia de distúrbios cardiovasculares, doenças tromboembólicas ou restenoses, e a métodos de tratamento com o objectivo de alcançar tais finalidades, incluindo métodos para as referidas terapias e profilaxias. A presente invenção refere-se também a preparações farmacêuticas (ou composições farmacêuticas) que contêm uma quantidade eficaz de, pelo menos, um composto da fórmula I e/ou seus sais e/ou pró-fármacos fisiologicamente toleráveis para além do transportador farmaceuticamente aceitável convencional, i. e. uma ou mais substâncias transportadoras ou excipientes e/ou substâncias auxiliares ou aditivos farmaceuticamente aceitáveis. São preferidos os tratamentos de estados da doença, tais como formação anormal de trombos, enfarte miocardial agudo, angina instável, tromboembolismo, oclusão aguda de vaso associado com a terapia trombolítica ou angioplastia coronária transluminal percutânea, ataques isquémicos transientes, apoplexia, formação patológica de trombos que ocorrem nas veias das extremidades inferiores após cirurgia abdominal, ao joelho e anca, um risco de tromboembolismo pulmonar ou coagulopatia intravascular sistémica disseminada que ocorre nos sistemas 33 vasculares durante o choque séptico, certas infecções virais ou cancro.

Os compostos da fórmula I e seus sais ou seus pró-fármacos fisiologicamente toleráveis podem ser administrados a animais, de um modo preferido, mamíferos e, em particular, a humanos como fármacos para terapia ou profilaxia. Podem ser administrados por si só, ou em misturas com outro ou na forma de preparações farmacêuticas que permitem administração parentérica ou entérica.

Os fármacos podem ser administrados oralmente, por exemplo, na forma de pilulas, comprimidos, comprimidos laçados, comprimidos revestidos, grânulos, cápsulas de gelatina dura ou mole, soluções, xarope, emulsões, suspensões ou misturas de aerossol. No entanto, a administração pode também ser efectuada rectalmente, por exemplo, na forma de supositórios, ou parentericamente, por exemplo, intravenosamente, intramuscularmente ou subcutaneamente, na forma de soluções para injecção ou soluções para infusão, microcápsulas, implantes ou bastonetes, ou percutaneamente ou topicamente, por exemplo, na forma de unguentos, soluções ou tinturas, ou de outras formas, por exemplo, na forma de aerossóis ou vaporizadores nasais.

As preparações farmacêuticas de acordo com a invenção são preparadas de um modo conhecido per se e familiar para os especialistas na técnica, sendo utilizados os veículos orgânicos e/ou inorgânicos inertes farmaceuticamente aceitáveis para além do(s) composto (s) de fórmula I e/ou seu (seus) sais e/ou seu (seus) pró-fármacos fisiologicamente toleráveis. Para a produção de pílulas, comprimidos, comprimidos revestidos e cápsulas de gelatina dura, é possível utilizar, por exemplo, lactose, amido 34 de milho ou seus derivados, talco, ácido esteárico ou seus sais, etc. Os veículos para cápsulas de gelatina mole e supositórios são, por exemplo, gorduras, ceras, polióis semi-sólidos e líquidos, óleos naturais ou endurecidos, etc. Os veículos adequados para a produção de soluções, por exemplo, soluções para injecção ou de emulsões ou xaropes são, por exemplo, água, solução salina, álcoois, glicerol, polióis, sacarose, açúcar invertido, glucose, óleos vegetais, etc. Os veículos adequados para microcápsulas, implantes ou bastonetes são, por exemplo, co-polímeros de ácido glicólico e ácido láctico. As preparações farmacêuticas contêm, normalmente, cerca de 0,5% até 90% em peso dos compostos de fórmula I e/ou seus sais e/ou seus pró-fármacos fisiologicamente toleráveis. A quantidade de ingrediente activo da fórmula I e/ou seus sais e/ou seus pró-fármacos fisiologicamente toleráveis nas preparações farmacêuticas é, normalmente, de cerca de 0,5 mg até cerca de 1000 mg, de um modo preferido, de cerca de 1 mg até cerca de 500 mg.

Além dos ingredientes activos da fórmula I e/ou seus sais e/ou seus pró-fármacos fisiologicamente aceitáveis substâncias transportadoras, as preparações farmacêuticas podem conter aditivos tais como, por exemplo, enchimentos, desintegrantes, ligandos, lubrificantes, agentes humidificantes, estabilizadores, emulsionantes, conservantes, adoçantes, corantes, agentes de sabor, aromatizantes, espessantes, diluentes, substâncias tamponantes, solventes, solubilizantes, agentes para alcançar um efeito de depósito, sais para alterar a pressão osmótica, agentes de revestimento ou antioxidantes. Podem também conter dois ou mais compostos da fórmula I e/ou seus e/ou pró-fármacos fisiologicamente toleráveis. No caso de uma preparação farmacêutica conter dois ou mais compostos da fórmula I, a selecção dos compostos individuais pode ter o como 35 objectivo um perfil farmacológico global especifico da preparação farmacêutica. Por exemplo, um composto altamente potente com uma acção de duração mais curta pode ser combinado com um composto de longa acção de potência mais baixa. A flexibilidade permitida em relação à escolha dos substituintes nos compostos da fórmula I permite um grande controlo sobre as propriedades físico-químicas e biológicas dos compostos e, assim, permite a selecção de tais compostos desejados. Além disso, para além de, pelo menos, um composto da formula I e/ou sais e/ou seus pró-fármacos fisiologicamente toleráveis, as preparações farmacêuticas podem conter também um ou mais de outros ingredientes terapeuticamente ou profilaticamente activos.

Como inibidores do factor Xa e/ou factor Vila, os compostos da fórmula I e seus sais e seus pró-fármacos fisiologicamente toleráveis são, geralmente, adequados para a terapia e profilaxia de patologias nas quais a actividade do factor Xa e/ou factor Vila desempenha função ou têm uma extensão indesejada, ou que pode ser influenciada, de um modo favorável, pela inibição do factor Xa e/ou factor Vila ou diminuídas as suas actividades ou para a prevenção, alívio ou cura das quais a inibição do factor Xa e/ou factor Vila ou uma diminuição na sua actividade é desejada pelo médico. Como a inibição do factor Xa e/ou factor Vila influencia a coagulação sanguínea e fibrinólise, os compostos da fórmula I e seus sais e seus pró-fármacos fisiologicamente toleráveis são, geralmente, adequados para reduzir a coagulação sanguínea ou para a terapia e profilaxia de patologias nas quais a actividade do sistema de coagulação sanguínea desempenha função ou pode tem uma extensão indesejável, ou que pode ser influenciada, de um modo favorável, pela redução da coagulação sanguínea, ou para a prevenção, 36 alívio ou cura em que é desejada a diminuição da actividade do sistema de coagulação pelo médico. Um objectivo específico da presente invenção é, assim, a redução ou inibição da coagulação sanguínea não desejada, em particular num indivíduo, por administração de uma quantidade eficaz de um composto I ou um seu sal ou pró-fármaco fisiologicamente tolerável, bem como suas preparações farmacêuticas.

As patologias nas quais um composto da fórmula I pode ser utilizado de um modo favorável incluem, por exemplo, distúrbios cardiovasculares, doenças tromboembólicas ou complicações associadas, por exemplo, com infecção ou cirurgia. Os compostos da presente invenção podem também ser utilizados para reduzir uma resposta inflamatória. Exemplos de distúrbios específicos para o tratamento ou profilaxia em que os compostos da fórmula I podem ser utilizados são, doença cardíaca coronária, enfarte do miocárdio, angina de peito, restenose vascular, por exemplo, restenose após angioplastia como PTCA, síndrome da insuficiência respiratória em adultos, insuficiência de múltiplos órgãos, ataque cardíaco e distúrbio de coagulação intravascular disseminado. Exemplos de complicações relacionadas associadas com cirurgia são tromboses como tromboses da veia próximal e veia profunda que podem ocorrer após cirurgia. Considerando a sua actividade farmacológica, os compostos da invenção podem substituir ou complementar outros agentes anticoagulantes, tais como heparina. A utilização de um composto da invenção pode resultar, por exemplo, numa diminuição de custos quando comparado com outros anticoagulantes.

Quando se utiliza os compostos da fórmula I, a dose pode variar dentro de limites amplos e, como é normal e é conhecido para o médico, é para ser adequada às patologias individuais em 37 cada caso individual. Depende, por exemplo, do composto especifico empregue, da natureza e gravidade da doença a ser tratada, do modo e calendário de administração, ou se é tratada uma patologia crónica ou aguda ou se é efectuada profilaxia. Pode ser estabelecida uma dosagem apropriada utilizando abordagens clinicas bem conhecidas na técnica médica. No geral, a dose diária para alcançar os resultados desejados num adulto pesando cerca de 75 kg é de 0,01 mg/kg até 100 mg/kg, de um modo preferido, desde 0,1 mg/kg até 50 mg/kg, em particular, desde 0,1 mg/kg até 10 mg/kg, (em cada caso em mg por kg de peso corporal) . A dose diária pode ser dividida, em particular, no caso da administração de quantidades relativamente grandes, em várias, por exemplo, 2, 3 ou 4, partes por administração. Como normal, dependendo do comportamento individual, pode ser necessário desviar para cima ou para baixo da dose diária indicada.

Um composto da fórmula I pode também ser utilizado, de modo vantajoso como um anticoagulante no exterior de um indivíduo. Por exemplo, pode ser colocada em contacto uma quantidade eficaz de um composto da invenção com uma amostra de sangue recolhido de fresco para prevenir a coagulação da amostra de sangue. Além disso, pode ser utilizado um composto da fórmula I e seus sais para objectivos de diagnóstico, por exemplo, em diagnósticos in vitro, e como um auxiliar em investigações bioquímicas. Por exemplo, pode ser utilizado um composto da fórmula I num ensaio para identificar a presença do factor Xa e/ou factor Vila ou para isolar o factor Xa e/ou factor Vila numa forma substancialmente purificada. Um composto da invenção pode ser marcado com, por exemplo, um radioisótopo, e o composto marcado ligado ao factor Xa e/ou factor Vila é, então, detectado utilizando um método de rotina útil para detectar o marcador em 38 particular. Assim, pode ser utilizado um composto da fórmula I ou um seu sal como uma sonda para detectar a localização ou quantidade de actividade do factor Xa e/ou factor Vila in vivo, in vitro ou ex vivo.

Além disso, os compostos da fórmula I podem ser utilizados como intermediários sintéticos para a preparação de outros compostos, em particular de outros ingredientes farmaceuticamente activos, que são obtidos a partir dos compostos de fórmula I, por exemplo, por introdução de substituintes ou modificação de grupos funcionais.

Entende-se que as alterações que não afectam, de um modo substancial, a actividade das várias formas de realização desta invenção são incluídas dentro da invenção aqui revelada. Assim, os seguintes exemplos têm como intenção ilustrar mas não limitar a presente invenção.

Exemplos

Abreviaturas utilizadas tBu

DCM

DEAD terc-Butilo

Diclorometano

Dietilazodicarboxilato

Diisopropilazodicarboxilato DIAD 39

Ν,Ν'-Diisopropilcarbodiimida DIC

N,N'-Diisopropil-N-etilamina DIEA N,N'-Dimetilformamida DMF Dimetilsulfóxido DMSO 0-(7-Azabenzotriazol-l-il) -N,N,Ν',Ν'-tetrametilurónio- hexafluorofosfato HATU l-Hidroxi-7-azabenzotriazole HOAt N-Etilmorfolina NEM Metanol MeOH Tetra-hidrofurano THF Ácido trifluoroacético TFA

Quando no passo final da síntese de um composto foi utilizado um ácido, tal como ácido trifluoroacético ou ácido acético, por exemplo, quando foi empregue ácido trifluoroacético para remover um grupo terc-butilo ou quando um composto foi purificado por cromatografia utilizando um eluente que continha tal ácido, em alguns casos, dependendo do processo de processamento, por exemplo, os detalhes de um processo de secagem por congelação, o composto foi obtido, parcialmente ou 40 completamente, na forma de um sal do ácido utilizado, por exemplo, na forma de um sal de ácido acético ou ácido trifluoroacético ou sal de ácido clorídrico.

Exemplo 1: Éster metílico do ácido (S)-(1-carbamimidoil-piperidin-4-il)-(3-[2-(2,4-dicloro-fenil)-etoxi]-5-hidroxi-benzoilamino}-acético

(a) Éster alilíco do ácido 3,5-di-hidroxi-benzóico A 1,5 g de ácido 3,5-di-hidroxibenzóico num frasco de tampa de rosca foi adicionado 10 g de álcool alilíco e o frasco foi fechado e arrefecido para -20 °C. Aos conteúdos frios do frasco reaccional foi adicionado 5 mL de cloreto de trimetilsililo via seringa através de um septo. O frasco reaccional foi deixado a aquecer até à temperatura ambiente e agitado durante 16 horas. O frasco foi aberto cuidadosamente e os seus conteúdos transferidos para um balão de fundo redondo. O solvente foi removido sob pressão reduzida e o sólido residual foi seco sob pressão reduzida sobre sedimentos de hidróxido de potássio durante 12 horas. O produto semi-sólido foi utilizado nos passos sintéticos subsequentes sem purificação posterior. O produto foi analisado por HPLC e apresentou um tempo de retenção de 41 3,65 numa coluna de fase reversa Cie de 5 cm com um fluxo de 2,5 mL/min de acetonitrilo puro (como solvente A) e ácido trifluoroacético aquoso a 0,1% (como solvente B). O produto foi caracterizado por RMN de 1H (DMSO-dô, 350 MHz) : δ = 6,87 (s, 2H, aromático); 6,44 (s, 1H, aromático); 5,85-5,96 (m, 1 H); 5,16-5,33 (m, 2H) ; 4,65-4,67 (dd, 2H). (b) 300 mg de resina de (2'-cloro)-Clorotritil-poliestireno (0,39 mmol; enchimento 1,3 mmol/g de Cl) foram tratadas com 4 mL de dicloroetano e a resina foi deixada a inchar à temperatura ambiente durante 30 minutos. O solvente foi removido por filtração e a resina foi tratada com uma solução de 227 mg de éster alilico do ácido 3,5-di-hidroxi-benzóico e 0,4 mL de DIEA em 5 mL de diclorometano anidro. A suspensão da resina foi agitada durante 3 a 4 h a 60° C. A resina foi lavada com DMF (3 vezes) , DCM (5 vezes) e DMF (5 vezes) e utilizada no próximo passo. (c) A resina do passo (b) foi lavada com THF anidro (3 vezes) e suspensa em 4 mL de THF anidro contendo 511 mg de trifenilfosfina e 745 mg de álcool 2,4-diclorofenotilico. A suspensão foi arrefecida para -15 °C e foram adicionados 0,384 mL de DIAD. A suspensão da resina foi agitada à temperatura ambiente durante 12 h. 0 solvente foi removido por filtração e a resina foi lavada com THF (9 vezes), DMF (5 vezes), DCM (5 vezes). A resina foi utilizada no próximo passo. (d) A resina do passo (c) foi suspensa em DCM e foram adicionadas 365 mg de ácido 1,3-dimetilbarbitúrico na presença de 45 mg de Pd (0)(PPh3)4 sob árgon. A suspensão da resina foi agitada durante uma hora à temperatura ambiente. 42 0 solvente foi removido por filtração e a resina foi lavada com DCM e seca. (e) A resina seca do passo (d) foi lavada com DMF e suspensa em 3 mL de DMF contendo 265 mg de HOAt e 0,302 mL de DIC. A resina foi agitada durante 5 minutos e foram adicionadas 613 mg de éster metilico do ácido (S)-amino-[1-(terc-butoxicarbonilamino-iminometil)-piperidin-4-il]-acético. A suspensão da resina foi agitada durante 12 h. A resina foi lavada com DMF e DCM e seca sob pressão reduzida durante 6 - 8 h. (f) A resina seca do passo (e) foi suspensa em DCM contendo TFA a 50% e agitada à temperatura ambiente durante 45 minutos. A suspensão de resina foi filtrada, lavada com DCM:TFA (1:1) e as lavagens combinadas com o filtrado clivado. A solução de clivagem foi seca sob pressão reduzida. O produto sólido foi liofilizado a partir de acetonitrilo aquoso a 30% e o produto em bruto purificado por HPLC em coluna de fase reversa Ci8.

As fracções contendo o produto desejado foram reunidas e liofilizadas para proporcionar o éster metilico do ácido (S)-(l-Carbamimidoil-piperidin-4-il)-{3-[2-(2,4-dicloro-fenil)-etoxi]-5-hidroxibenzoilamino}-acético como um sólido branco. O produto foi identificado por LC/EM para proporcionar m/e = 523 (M+H)+. 43

Exemplo 2: 4-Bromo-N-(l-carbamimidoil-piperidin-4-ilmetil)-3-[2-(2,4-diclorofenil)-etoxi]-5-hidroxi-benzamida

-Cl (a) Éster alílico do ácido 4-bromo-3,5-di-hidroxi-benzóico

Este composto foi preparado de um modo análogo ao éster alilico do ácido 3,5-Di-hidroxi-benzóico [Exemplo 1 (a)], no entanto, foi utilizado o ácido 4-bromo-3,5-di-hidroxibenzóico em vez do ácido 3,5-di-hidroxibenzóico. RMN de 1H (DMSO-d6, 350 MHz): δ = 7,04 (s, 2H, aromático); 5,97-6,06 (m, 1 H); 5,25-5,40 (m, 2H); 4,73-4,75 (dd, 2H). (b) O composto do titulo foi sintetizado de um modo análogo ao Exemplo 1, passos (b)-(f) com as seguintes diferenças:

No passo (b) foi utilizado o éster alilico do ácido 4-Bromo-3,5-di-hidroxi-benzóico em vez de éster alilico do ácido 3,5-di-hidroxi-benzóico;

No passo (e) foi utilizado o éster terc-butilico do ácido [(4-aminometil-piperidin-l-il)-imino-metil]-carbâmico em vez do éster metilico do ácido (S)-amino-[1-(terc-butoxicarbonilamino-imino-metil)-piperidin-4-il]-acético. O produto final foi purificado por HPLC e caracterizado por LC/EM para proporcionar m/e = 543,3 (M+H)+. 44

Exemplo 3: N-(l-Carbamimidoil-piperidin-4-ilmetil)-3-[2-(2,4-dicloro-fenil)-etoxi]-5-hidroxi-4-metil-benzamida

(a) éster alílico do ácido 3,5-di-hidroxi-4-metilbenzóico

Este composto foi preparado de um modo análogo ao éster alílico do ácido 3,5-Di-hidroxi-benzóico [Exemplo 1 (a)], no entanto, foi utilizado ácido 3,5-di-hidroxi-4-metilbenzóico em vez de ácido 3,5-di-hidroxibenzóico. (b) 0 composto do título foi sintetizado de um modo análogo ao Exemplo 2, com a seguinte diferença: foi utilizado o éster alílico do ácido 3,5-di-hidroxi-4-metil-benzóico em vez de éster alílico do ácido 4-Bromo-3,5-di-hidroxi-benzóico. 0 produto final foi purificado por HPLC e caracterizado por LC/EM para proporcionar m/e = 478,8 (M+H)+.

De um modo análogo aos exemplos acima, foram preparados os seguintes compostos, através de processos semelhantes e caracterizados por LC/EM: 45

Exemplo Estrutura MWt (M+H)+ 4 T2 HN-^.0 Jv. H 464,13 465,3 5 NHj ΗΝ'^Ν'^^ι 0 ΐγο. HN^O "°Ψ°“όο ^Cl 536,15 537,3 8 N H 2 H HN^O Η O "Ά|^Ά o Br Nh, 523,10 524 9 V2 HN^N^ ‘A ΗΝγ° C H j 411,23 412 10 N Hj HN^N^i A Η 0"ΑγΆ0' N B r 475,11 476

Exemplo 11: N-(l-Carbamimidoil-piperidin-4-ilmetil)-3-[2-(2,4-dicloro-fenil)-etoxi]-4-metoxi-benzamida

(a) Éster metílico do ácido 3-hidroxi-4-metoxi-benzóico

Foram adicionados 10 mL de cloreto de tionilo a 250 mL de metanol a 0 °C. A solução foi agitada durante 10 minutos e foram adicionadas 25 g de ácido 3-hidroxi-4-metoxibenzóico. A reacção foi agitada durante 16 h à temperatura ambiente, depois aquecida para 50 °C durante 3 h. Os solventes foram removidos sob pressão reduzida. O resíduo foi utilizado directamente no próximo passo. (b) Éster metílico do ácido 3-[2-(2,4-diclorofenil)-etoxi]-4-metoxi-benzóico 20 g de trifenilfosfina e 10 g de éster metílico do ácido 3-Hidroxi-4-metoxi-benzóico foram dissolvidas em 200 mL de THF anidro. A solução foi arrefecida para 0 °C até 10 °C e foi adicionada, gota a gota, uma solução de 11,4 mL de DEAD em 30 mL de THF anidro, durante 20 min. A reacção foi aquecida para a temperatura ambiente e agitada durante 45 min. Foi adicionada uma solução de 11,3 mL de 2-(2,4-Diclorofenil)-etanol em 10 mL de THF anidro, com arrefecimento. A reacção foi agitada à temperatura ambiente 47 durante 16 h, depois, os solventes foram removidos sob pressão reduzida. 0 resíduo foi tratado com n-heptano:acetato de etilo/l:l. 0 filtrado foi seco sob pressão reduzida. 0 produto foi purificado por cromatografia em sílica gel, eluída com n-heptano:acetato de etilo/4:l, depois n-heptano:acetato de etilo/3:l. Rendimento de 17 g. (c) Ácido 3-[2-(2,4-Diclorofenil)-etoxi]-4-metoxi-benzóico 17 g de éster metílico do ácido 3-[2-(2,4-Diclorofenil)-etoxi]-4-metoxi-benzóico foram dissolvidas em 200 mL de metanol:água/3:1. Foram adicionadas 4,1 g de mono-hidrato de hidróxido de lítio à solução, e a reacção foi agitada à temperatura ambiente durante 16 h, depois a 90 °C durante 2 h. A solução foi arrefecida para a temperatura ambiente, depois acidificada com ácido clorídrico concentrado para metade. Os solventes foram removidos sob pressão reduzida e o resíduo foi lavado duas vezes com água quente para remover os sais.

(d) Uma solução de 100 mg de ácido 3-[2-(2,4-Diclorofenil)-etoxi]-4-metoxi-benzóico em 2 mL de DMF foi activada por adição de 53 mg de carbonildiimidazole. Após agitação durante 2 h à TA foram adicionadas 90 mg de cloridrato de 4-Aminometil-piperidina-l-carboxamidina e 2 mL de DMSO e a mistura foi agitada de um dia para o outro. A subsequente diluição com 3 mL de água e filtração através de um cartucho chem elut®, eluída com acetato de etilo, proporcionou, após concentração sob pressão reduzida, um sólido branco. A purificação por HPLC preparativa (coluna de fase reversa C18, eluição com um gradiente de H20/MeCN 48 com TFA a 0,5%) e liofilização proporcionou 30 mg (20%) do composto do título como um pó branco. EM (ESI +) m/e 479,3 (M+H) padrão cloro.

Exemplo 12: 3-[2-(2,4-Dicloro-fenil)-etoxi]-N-[1-(1-imino-etil)-piperidin-4-ilmetil]-4-metil-benzamida; composto com ácido trifluoroacético

50 mg de ácido 3-[2-(2,4-Dicloro-fenil)-etoxi]-4-metil- benzóico e 58,9 mg de sal ácido di-trifluoroacético da C-[1-(1-imino-etil)-piperidin-4-il]-metilamina foram dissolvidas em 5 mL de DMF. Após arrefecimento para 0 °C, foram adicionadas 64,3 mg de HATU e 70,8 mg de NEM. A mistura foi agitada a 0 °C durante 2 horas e à temperatura ambiente durante 3 horas. O solvente foi removido sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por HPLC preparativa (coluna de fase reversa Ci8) (gradiente de acetonitrilo e água (contendo ácido trifluoroacético a 0,1%) 90:10 para 0:100). As fracções contendo o produto foram evaporadas e liofilizadas. Proporcionou: 48 mg (54%), EM: 462,2/464,3 (M+H)+. 49

Exemplo 13: N-(l-Carbamimidoil-piperidin-4-ilmetil)-3-[2-(2,4-dicloro-fenil)-etoxi]-4-metil-benzamida; composto com ácido trifluoroacético

50 mg de ácido 3-[2-(2,4-Dicloro-fenil)-etoxi]-4-metil-benzóico e 35,2 mg de di-cloridrato de 4-aminometil-piperidina-1-carboxamidina foram dissolvidas em 5 mL de DMF. Após arrefecimento para 0 °C, foram adicionadas 64,3 mg de HATU e 70,8 mg de NEM. A mistura foi agitada a 0 °C durante 2 horas e à temperatura ambiente durante 3 horas. O solvente foi removido sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por HPLC preparativo (coluna de fase reversa Cis) gradiente de acetonitrilo e água (contendo ácido trifluoroacético a 0,1%) 90:10 até 0:100). As fracções contendo o produto foram evaporadas e liofilizadas.

Rendimento: 45 mg (51%), EM: 463,3/465,3 (M+H)+. 50

Exemplo 14: Éster benzílico do ácido {amino-[4-({3-[2-(2,4-dicloro-fenil)-etoxi]-4-metil-benzoilamino}-metil)-piperidin-1-il]-metileno}-carbâmico

97 mg de ácido 3-[2-(2,4-Dicloro-fenil)-etoxi]-4-metil-benzóico e 124,3 mg de sal ácido trifluoroacético do éster benzilico do ácido [Amino-(4-aminometilpiperidin-l-il)-metileno]-carbâmico foram dissolvidas em 5 mL de DMF. Após arrefecimento para 0 °C, foram adicionadas 136 mg de HATU e 106 mg de NEM. A mistura foi agitada a 0 °C durante 2 horas e à temperatura ambiente durante 3 horas. O solvente foi removido sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por HPLC preparativa (coluna de fase reversa Cie) (gradiente de acetonitrilo e água (contendo ácido trifluoroacético a 0,1%) 90:10 até 0:100). As fracções contendo o produto foram evaporadas e liofilizadas.

Rendimento: 146 mg (79,5%), EM: 597,3/599,3 (M+H)+. 51

Teste farmacológico A capacidade dos compostos da fórmula I para inibir o factor Xa ou factor Vila ou outras enzimas como a trombina, plasmina, ou tripsina, pode ser avaliada por determinação da concentração do composto da fórmula I que inibe a actividade da enzima em 50%, i. e. o valor de IC50, que está relacionado com a constante de inibição Ki. As enzimas purificadas são utilizadas em ensaios cromogénicos. A concentração do inibidor que causa uma diminuição de 50% na taxa de hidrólise de substrato é determinada por regressão linear após representação gráfica das taxas relativas de hidrólise (comparada com o controlo não inibido) versus o log da concentração do composto de fórmula I. Para calcular a constante de inibição Ki, o valor de IC50 é corrigido para competição com o substrato utilizando a fórmula

Ki = ICso/{l + (concentração do substrato/Km)} em que Km é a constante de Michaelis-Menten (Chen e Prusoff,

Biochem. Pharmacol. 22 (1973), 3099-3108; I. H. Segai, Enzyme Kinetics, 1975, John Wiley & Sons, New York, 100-125; que são aqui incorporadas por referência). a) Ensaio do Factor Xa

No ensaio para determinar a inibição da actividade do factor Xa, foi utilizado tampão TBS-PEG (Tris-HCl 50 mM, pH 7,8, NaCl 200 mM, PEG-8000 a 0,05% (p/v) , NaN3 a 0,02% (p/v)) . Foi determinado o IC50 por combinação em poços apropriados de uma placa de microtitulação de meia área 52

Costar de 25 pL de factor humano Xa (Enzyme Research Laboratories, Inc.; South Bend, Indiana) em TBS-PEG; 40 pL de DMSO a 10% (v/v) em TBS-PEG (controlo não inibido) ou várias concentrações do composto a ser testado diluído em DMSO a 10% (v/v) em TBS-PEG; e substrato S-2765 (N (a)-benziloxicarbonil-D-Arg-Gly-L-Arg-p-nitroanilida;

Kabi Pharmacia, Inc.; Franklin, Ohio) em TBS-PEG. O ensaio foi efectuado por pré-incubação do composto de fórmula I mais enzima durante 10 min. Depois, o ensaio foi iniciado por adição do substrato para obter um volume final de 100 pL. A velocidade inicial da hidrólise do substrato cromogénico foi determinada por alteração da absorvância a 4 05 nm utilizando um leitor de placas cinéticas Bio-tek Instruments (Ceres UV900HDÍ) a 25 °C durante a porção linear do decorrer do tempo (normalmente 1,5 min após adição do substrato). A concentração enzimática foi de 0,5 nM e a concentração de substrato foi de 140 pM. b) Ensaio do Factor Vila A actividade inibidora em relação à actividade do factor Vlla/factor tecidular foi determinada utilizando um ensaio cromogénico, essencialmente, como descrito previamente (J. A. Ostrem et ai., Biochemistry 37 (1998) 1053-1059 que é aqui incorporado por referência). Os ensaios cinéticos foram efectuados a 25 °C em placas de microtitulação de metade da área (Costar Corp., Cambridge, Massachusetts) utilizando um leitor de placas cinético (Molecular Devices Spectramax 250). Um ensaio típico consistiu em 25 pL de factor humano Vila e TF (5 nM e 10 nM, em relação à concentração final) combinado com 40 pL de diluições do 53 inibidor em DMSO a 10%/tampão TBS-PEG (Tris 50 mM, NaCl 15 mM, CaCl2 5 mM, PEG 8000 a 0,05 %, pH 8,15). Após um período de pré-incubação de 15 minutos, o ensaio foi iniciado pela adição de 35 pL do substrato cromogénico S-2288 (D-Ile-Pro-Arg-p-nitroanilida, Pharmacia Hepar Inc., concentração final de 500 μΜ).

Foram obtidos os seguintes resultados nos testes (constantes de inibição Ki (FXa) para a inibição do factor Xa):

Exemplo 1: Ki(FXa) 2,116 micromolar

Exemplo 2: Ki(FXa) 0,0137 micromolar

Exemplo 3: Ki(FXa) 0,0585 micromolar

Exemplo 4: Ki(FXa) 0,4635 micromolar

Exemplo 11: Ki(FXa) 0,189 micromolar

Exemplo 12: Ki(FXa) 0,14 micromolar

Exemplo 13: Ki(FXa) 0,173 micromolar

Exemplo 14: Ki(FXa) 5,077 micromolar (Pró-fármaco)

Lisboa, 13 de Março de 2007 54

Claims (11)

1. REIVINDICAÇÕES 1. Composto de fórmula I,

   em que Ro é fenilo ou piridilo, em que fenilo e piridilo, independentemente um do outro, são mono-, di- ou tri-substituídos, independentemente um do outro, por R2, R2 é 1. halogéneo,
2. 2. -CN, 3. alquil (C1-C4) oxi-, em que alquiloxilo é não substituído ou substituído por halogéneo ou um grupo amino, ou 4. -alquilo (C1-C4), em que o alquilo é não substituído ou substituído por um grupo amino ou halogéneo, Q e Q' são diferentes e são uma ligação directa ou -0-, 1 X é -alquileno(C1-C3)em que alquileno é não substituído ou mono-, di- ou tri-substituído, independentemente um do outro, por halogéneo, grupo amino ou grupo hidroxilo, D é um átomo de carbono, a substrutura de fórmula III

   (III) é um 1,3-fenileno, em que fenilo é não substituído ou mono-, di- ou tri-substituído independentemente um do outro por R1, R1 é 1. halogéneo,
3. 2. -NO2,
4. 3. -CN,
5. 4. -NH2, que alquilo é não ou tri-substituído, por R13, 5. alquil (C1-C4) amino-, em substituído ou mono-, di- independentemente um do outro,
6. 6. -OH, 2
7. 7. -SO2-NH2, 8. alquil (C1-C4) oxi-, em que alquilo é não substituído ou mono-, di- ou tri-substituído, independentemente um do outro, por R13, 9. arilo (C6-C14), em que arilo é não substituído ou mono-, di- ou tri-substituído, independentemente um do outro, por R13, 10. alquil (C1-C4)-, em que alquilo é não substituído ou mono-, di- ou tri-substituído, independentemente um do outro, por R13, 11. alquil (C1-C4) sulfonil-, em que alquilo é não substituído ou mono-, di- ou tri-substituído independentemente um do outro por R13, 12. -C (0) -NR14R15, em que R14R15 independentemente um do outro são átomo de hidrogénio ou alquilo (C1-C4)-,
8. 13. Ri;lR12N-, em que R11 e R12 em conjunto com o átomo de azoto ao qual estão ligados formam um anel heterocíclico monocíclico de 5 a 6 membros saturado ou insaturado que, além do átomo de azoto transportando R11 e R12, pode conter um ou dois heteroátomos no anel, idênticos ou diferentes, escolhidos de oxigénio, enxofre e azoto e nos quais um ou dois dos átomos de carbono do anel podem ser substituídos por oxo para formar resíduo(s) -C(0)-, ou 3
9. 14. -NR14R15, R13 é 1. halogéneo, 2. -CF3 , 3. -NH2, 4. -OH, 5. alquil (C1-C4)ou 6. alquil (C1-C4) oxi-, R10 é átomo de hidrogénio, e V é um fragmento da fórmula lia,

   U lia em que L é uma ligação directa, A é átomo de hidrogénio, -C(0)-OH, -C(0)-0-alquilo(C1-C4) , -C(0)-NR4R5 ou alquilo (C1-C4) , 4 U é -ΝΗ2, metilo, -NH-C(0)-O-alquilo (C1-C4) ou -NH-C(0)-0-(CH2) -fenilo, M é átomo de hidrogénio ou alquil (C1-C3)-, e de 1, ri- não um não ou R4 e R5 são, independentemente um do outro, átomo hidrogénio ou metilo. 2. Composto de fórmula I como reivindicado na reivindicação em que R0 é fenilo, em que fenilo é mono-, di- ou t substituído, independentemente um do outro, por R2, R2 é 1. halogéneo, 2. alquil(C1-C4)oxi-, em que alquiloxilo é substituído ou substituído por halogéneo ou grupo amino, ou 3. -alquilo(C1-C4), em que alquilo é substituído ou substituído por um grupo amino halogéneo, Q e Q' são diferentes e são uma ligação directa ou -ΟΧ é -alquileno (C1-C3)-, D é um átomo de carbono, 5 a sub estrutura de fórmula III é um 1,3-fenileno, em que fenilo é não substituído ou mono-, di- ou tri-substituído, independentemente um do outro, por R1, R1 é 1. halogéneo, 2. -N02, 3. -CN, 4. -NH2, 5. alquil (C1-C4) amino-, em que alquilo é não substituído ou mono-, di- ou tri-substituído, independentemente um do outro, por R13, 6. -OH, 7. -SO2-NH2, que alquilo é não ou tri-substituído, , por R13, 8. alquil (C1-C4) oxi-, em substituído ou mono-, di-independentemente um do outro 9. alquil(C1-C4)-, em que alquilo é não substituído ou mono-, di- ou tri-substituído, independentemente um do outro, por R13, 6 10. alquil (C1-C4) sulfonil-, em que alquilo é não substituído ou mono-, di- ou tri-substituído, independentemente um do outro, por R13, 11. -C (O)-NR14R15, em que R14R15, independentemente um do outro, são átomo de hidrogénio ou -alquilo (Ci-C2) ,
10. 12. RnR12N-, em que R11 e R12 são como descrito acima, ou
11. 13. -NR14R15, R 13 é 1. halogéneo, 2. -CF3, 3. -NH2, 4. -OH, 5. alquil (C1-C4) - ou 6. alquil (C1-C4) oxi-, R10 é átomo de hidrogénio, e V é um fragmento da fórmula lia, em que L é uma ligação directa, 7 A é átomo de hidrogénio, -C(0)-0H, -C(0)-0-alquilo(C1-C4), -C (0) -NR1 2R3 ou -alquilo (C1-C4) , U é -NH2, metilo, -NH-C(0)-0-alquilo (C1-C4) ou -NH-C(0)-0-(CH2) -fenilo, M é átomo de hidrogénio ou metilo, e R2 e R3 são, independentemente um do outro, átomo de hidrogénio ou metilo. Composto de fórmula I, como reivindicado nas reivindicações 1 ou 2, em que R0 é fenilo, em que fenilo é di-substituído, independentemente um do outro, por R2, R2 é 1. halogéneo, 2. alquil (C1-C2) oxi-, em que alquiloxilo é não substituído ou substituído por um grupo amino, ou 1 alquilo (C1-C4), em que alquilo é não substituído ou substituído por um grupo amino, Q e Q' são diferentes e são uma ligação directa ou -0-, 2 X é -CH2-CH2-, 3 D é um átomo de carbono, A sub estrutura de fórmula III é um 1,3-fenileno, em que fenilo é não substituído ou mono-, di- ou tri-substituído, independentemente um do outro, por R1 R1 é 1. halogéneo, 2. -OH, 3. -NH2, 4. -C (0)-NR14R15, em que R14R15, independentemente um do outro são, átomo de hidrogénio ou -alquilo (Ci-C2) , 5. alquil (C1-C3) oxi-, em que alquilo é não substituído ou mono-, di- ou tri-substituido, independentemente um do outro, por R13, ou 6. alquil(C1-C3)-, em que alquilo é não substituído ou mono-, di- ou tri-substituído, independentemente um do outro, por R13, R13 é flúor ou cloro, Rio é átomo de hidrogénio, e V é um fragmento da fórmula lia, em que L é uma ligação directa, 9 A é átomo de hidrogénio, -C(0)-OH, -C (0)-0-alquilo(C1-C4) , -C(0)-NR4R5 ou -alquilo (C1-C4) , U é -NH2, metilo, -NH-C(0)-0-alquilo (C1-C4) ou -NH-C(0)-0-(CH2) -fenilo, M é átomo de hidrogénio, e R4 e R5 são, independentemente um do outro, átomo de hidrogénio ou metilo. 4. Processo para a preparação de um composto da fórmula I, como reivindicado numa ou mais das reivindicações 1 a 3, compreendendo a) ligação de um bloco de construção de fórmula XI,

    R R XI no qual R0, Q, Q', X, são como nas reivindicações 1 a 3, e R1’, R1", R1"’, R1””, são átomo de hidrogénio ou como R1 como definido nas reivindicações 1 a 3, mas onde em R0, Q, R1 Q' e X, podem também estar presentes grupos funcionais na forma protegida ou na forma de grupos precursores, e Y é um grupo de saída nucleofilicamente substituível ou um grupo hidroxilo, é feito reagir com um fragmento da fórmula II 10 (XII) H-NRio-V na qual Rio e V são como definido nas reivindicações 1 a 3, mas em que em Ri0 e V, os grupos funcionais podem também estar presentes na forma protegida ou na forma de precursores, ou b) por junção de um fragmento de fórmula XIII com fragmento XII, Ro-Q-X-Q'-W-C(0)-Y (XIII) na qual R0, Q, Q' e X, são como nas reivindicações 1 a 3, W é a sub estrutura de fórmula III, mas em que em R0, Q, Q', W e X, os grupos funcionais podem também estar presentes na forma protegida ou na forma de grupos precursores e Y é um grupo de saida nucleofilicamente substituível ou um grupo hidroxilo ou um grupo hidroxilo pode ser ligado a uma resina de polistireno. 5. Preparação farmacêutica compreendendo, pelo menos, um composto da fórmula I, como reivindicado numa ou mais das reivindicações 1 a 3 e/ou seus sais fisiologicamente toleráveis e um veículo farmaceuticamente aceitável. 6. Utilização de um composto da fórmula I, como reivindicado numa ou mais das reivindicações 1 a 3 e/ou seus sais fisiologicamente toleráveis, para a produção de fármacos para a inibição do factor Xa e/ou factor VTIa ou para influenciar a coagulação sanguínea ou fibrinólise. 11 7. Utilização como reivindicado na reivindicação 6 para influenciar a coagulação sanguínea, resposta inflamatória, fibrinólise, distúrbios cardiovasculares, doenças tromboembólicas, restenoses, formação anormal de trombos, enfarte agudo no miocárdio, angina instável, oclusão aguda de vasos associada com terapia trombolitica, tromboembolismo, formação de trombos patológicos, percutâneos que ocorre nas veias das extremidades inferiores após cirurgia abdominal, aos joelhos e ancas, angioplastia coronária transluminal, ataques isquémicos transientes, apoplexia com risco de tromboembolismo pulmonar, certas infecções virais ou cancro, coagulopatia intravascular que ocorre nos sistemas vasculares durante o choque séptico, doença coronária cardíaca, enfarte do miocárdio, angina de peito, restenose vascular, por exemplo, restenose após angioplastia como PTCA, síndrome da insuficiência respiratória em adultos, insuficiência de múltiplos órgãos, ataque cardíaco e distúrbio de coagulação intravascular disseminada e apoplexia, tromboses como tromboses da veia proximal e veia profunda que podem ocorrer após cirurgia. Lisboa, 13 de Março de 2007 12