PT1343529E

PT1343529E - Formulações de aines compreendendo óleos de lecitina para proteger o tracto gastrointestinal e proporcionar actividade terapêutica reforçada

Info

Publication number: PT1343529E
Application number: PT01273758T
Authority: PT
Inventors: Lenard Lichtenberger
Original assignee: Univ Texas
Priority date: 2000-12-19
Filing date: 2001-12-19
Publication date: 2009-02-27
Also published as: JP2005506303A; ES2317873T3; CY1110474T1; MXPA03005550A; CN102258457B; JP4958381B2; KR20030072565A; IL156361A0; BR0116380A; DE60136647D1; IL156361A; CN1543358A; HK1161107A1; CN102258457A; JP2010031044A; EP1343529A2; SI1343529T1; WO2002085414A2; CA2431606A1; EP1343529B1

Description

ΕΡ 1 343 529/ΡΤ

DESCRIÇÃO "Formulações de AINEs compreendendo óleos de lecitina para proteger o tracto gastrointestinal e proporcionar actividade terapêutica reforçada"

PEDIDO RELACIONADO

Este pedido reivindica prioridade provisória do Pedido de Patente Provisório U.S. n.°

ANTERIORIDADE DO INVENTO 2 ΕΡ 1 343 529/ΡΤ entre a população mundial tanto como medicamento de venda livre como sujeito a receita médica. Devido à sua grande utilidade, uma percentagem significativa da nossa população consome AINEs regularmente, nomeadamente 30-40 milhões de americanos que sofrem de artrite reumatóide ou osteoartrite, e inúmeros outros que tomam a medicação para tratar/prevenir inflamação e dor causadas por outras condições inflamatórias ou lesões, dor de dismenorreia, febre, o desenvolvimento de trombose e doenças cardiovasculares relacionadas, cancro do ovário, cancro do cólon e doença de Alzheimer.1,2 O problema com a tendência cada vez maior para utilizar AINEs, especialmente entre os idosos, é que esses fármacos comummente induzem efeitos colaterais gastrointestinais (GI).3~6

No estômago e no intestino delgado, os fármacos causam dispepsia (perturbação gástrica, azia, inchaço ou náuseas), erosões, gastrite/duodenite e úlceras em alguns indivíduos. Os consumidores de AINEs podem igualmente ser vitimas de sangramento gastrointestinal que pode resultar em episódios de anemia (de gravidade variável), ou hemorragia - que pode ser potencialmente fatal nos casos mais graves.7'8 Estima-se que uma ou mais destas complicações gastrointestinais ocorrem em 20-40% dos consumidores regulares de AINEs. Considerando o grande mercado de AINEs, até mesmo complicações gastrointestinais menos frequentes podem anualmente ser responsáveis por enviar uns estimados 76 000 americanos para o hospital e matar uns estimados 7 600.

Um dos principais contributos para compreender a acção dos ΑΙΝΕ veio de estudos pioneiros de Vane e associados no início dos anos 1970s, que revelaram que membros quimicamente diferentes da família de AINEs partilham a capacidade para inibir a actividade da enzima cicloxigenase (COX) que catalisa a conversão do ácido araquidónico às prostaglandinas G2 e H2 através de etapas sequenciais de oxidação e peroxidação.9-11 A prostaglandina H2 é então convertida a um dos vários eicosanóides na célula alvo por um processo catalisado por determinadas prostaglandina-sintases. Desta forma, inibindo reversível ou irreversivelmente a actividade da COX, os AINEs podem empobrecer um determinado tecido ou fluido celular em prostaglandinas, as quais foram demonstradas promover a inflamação de tecidos.12 Pouco depois destas revelações, 3 ΕΡ 1 343 529/ΡΤ

Robert e os seus associados de Upjohn Company demonstraram que certas classes de prostaglandinas partilham a notável propriedade de proteger o epitélio gastrointestinal contra uma série de condições e/ou compostos ulcerogénicos, demonstrando a natureza "citoprotectora" destes mediadores lipídicos.13 Com base nestes dois grandes contributos, concluiu-se que os AINEs induzem lesões e ulcerações no epitélio gastrointestinal através da inibição da actividade da COX da mucosa e do empobrecimento do tecido em prostaglandinas "citoprotectoras." 0 seguinte e mais recente desenvolvimento na nossa compreensão do metabolismo do ácido araquidónico ocorreu no inicio da década de 1990, quando um número de investigadores14-18 identificou e clonou uma segunda isoenzima COX (agora chamada COX-2) que é estrutural e funcionalmente relacionada com a enzima descrita originalmente (agora chamada COX-1). Em contraste com a COX-1 que é expressa constitutivamente na maioria dos tecidos, incluindo na mucosa gastrointestinal, a COX-2 foi demonstrada ser indutivel, principalmente por citoquinas e outros mediadores da inflamação. Com base nestes resultados, juntamente com provas de que a COX-2 é expressa selectivamente em locais de inflamação, e é expressa a baixos ou indetectáveis niveis na mucosa gastrointestinal não inflamada,19-23 várias empresas farmacêuticas deram inicio ao desenvolvimento de compostos que inibem selectivamente a COX-2.

Este esforço culminou com o lançamento dos dois primeiros inibidores selectivos da COX-2, o Celebrex (Celecoxib) e o Vioxx (Rofecoxib). Os resultados pré-clínicos e clínicos revelados até ao momento indicam que estes compostos são terapeuticamente eficazes e possuem baixa toxicidade na mucosa gastrointestinal. Esta novidade causou uma grande excitação nas comunidades médica e leiga, que se traduziu num número recorde de prescrições de Vioxx e Celebrex sendo passadas nos primeiros dois anos em que estes fármacos estiveram no mercado.24

Uma das grandes preocupações do inventor e de uma série de outros pesquisadores que estudam lesões gastrointestinais induzidas por AINEs, é que a ligação entre a inibição da COX e as lesões e sangramento gastrointestinais não é muito forte. 4 ΕΡ 1 343 529/ΡΤ

Por exemplo, Ligumsky e associados, no início da década de 1980 publicaram uma série de artigos sobre ratos e cães que pareciam dissociar a inibição da COX de lesões mucosas.25-27

Inicialmente, demonstraram que a aspirina e o seu metabolito, o ácido salicílico, tinham capacidades equivalentes para induzir lesões na mucosa gástrica canina, embora no caso da aspirina esta empobrecesse o tecido em prostaglandinas "citoprotectoras", enquanto o ácido salicílico não exibia nenhuma actividade inibitória da COX.25 Em estudos posteriores com roedores, foi demonstrado que a actividade da COX na mucosa era inibida em mais de 90% independentemente de a aspirina ser administrada por via subcutânea ou intragástrica, embora a formação de ulcerações no estômago dos ratos só tenha ocorrido quando os ΑΙΝΕ foram administrados intragastricamente. 26,27 Whittle divulgou igualmente uma dissociação entre os efeitos da indometacina para induzir a inibição da COX e lesões na mucosa do intestino delgado, já que as lesões intestinais começaram a desenvolver-se apenas 48 horas após a administração de AINEs, num momento em que actividade da COX (que é totalmente inibida em menos de 3 horas pós-indometacina) tinha voltado ao normal.28

Deve salientar-se que a evidência que sugere que a inibição da COX na mucosa pode não estar directamente envolvida na patogénese da enteropatia induzida por AINEs, é também apoiada por alguns estudos clínicos que relataram que a administração intravenosa de aspirina não provocou danos histológicos detectáveis na mucosa gástrica humana, em contraste com a administração oral do ΑΙΝΕ.29 Foi igualmente relatado que, após 2-4 semanas de tratamento com ΑΙΝΕ, a mucosa gástrica humana tornou-se resistente às acções lesivas da aspirina oral ou da indometacina, e que esta resposta adaptativa não estava associada a uma recuperação da actividade da COX que se manteve totalmente bloqueada durante a período de estudo.30

Por fim, a hipótese de que os AINEs induzem lesões gastrointestinais principalmente através da inibição da COX-1 da mucosa, prevê que ratinhos deficientes em isoenzima, devido à destruição do gene alvo, sejam propensos ao desenvolvimento de úlceras espontâneas na mucosa e sejam mais sensíveis a AINEs do que os seus equivalentes do tipo selvagem. Langenbach 5 ΕΡ 1 343 529/ΡΤ e associados31 relataram que animais sem a COX-1 não têm doenças gastrointestinais detectáveis e, para além disso, são mais resistentes ao desenvolvimento de úlceras induzidas por indometacina. Para tornar tudo ainda mais confuso, Morham et al.32 relataram num estudo posterior que ratos COX-2 knockout não são viáveis e frequentemente sucumbem a peritonite e a doenças renais. A possibilidade de que a inibição da COX-2 pode ser prejudicial tem também sido apoiada por vários estudos com animais que indicam que a cicatrização de úlceras no intestino distai e proximal é agravada quando os animais são tratados com bloqueadores selectivos da COX-2.33'34 Até ao momento, não foram relatadas complicações similares em seres humanos.

Com base na evidência atrás documentada, há razões mais do que suficientes para investigar outros mecanismos pelos quais os AINEs podem induzir lesões na mucosa gastrointestinal, e como pode esta informação ser utilizada no desenvolvimento de estratégias alternativas a fim de prevenir ou reduzir a toxicidade gastrointestinal destes compostos. Outro alvos potenciais da gastroenteropatia induzida por AINEs devem-se à capacidade que estas drogas revelam para: reduzir o fluxo sanguíneo da mucosa e induzir a adesão de leucócitos à parede vascular; desemparelhar a fosforilaçao oxidativa; induzir acidificação celular devido às suas características protonóforas; e atenuar as características hidrófobas, não molháveis da mucosa, aumentando assim a susceptibilidade do tecido ao ácido luminal.35-40 É esta última propriedade que tem sido o enfoque do laboratório do inventor nos últimos 15-20 anos.

Em 1983, o laboratório do inventor fez a primeira observação de que a mucosa gástrica canina tinha uma superfície hidrófoba única, conforme determinado pela análise do ângulo de contacto.41'42 Desde então, o seu e outros laboratórios têm demonstrado que essa propriedade de superfície não molhável da mucosa gástrica é encontrada numa série de outras espécies, incluindo no homem e roedores.40'43'44 Para além disso, empregaram-se técnicas tanto bioquímicas como morfológicas para demonstrar que esta propriedade pode ser atribuída a um revestimento extracelular à base de fosfolípido do tipo tensioactivo, tanto no interior como na superfície da 6 ΕΡ 1 343 529/ΡΤ camada de gel mucosa. 45-47 O laboratório do inventor também fez a observação de que muitos agentes que danificam a mucosa gástrica, incluindo os AINEs, têm a capacidade de transformar rapidamente o tecido de um estado não molhável (hidrófobo) para um molhável (hidrófilo), e que essa acção prejudicial poderia ser atenuada pela administração de fosfolipidos sintéticos ou purificados.48-51

Nos últimos anos, a investigação tem incidido sobre o mecanismo da interacção AINE-fosfolípido. Nestes estudos, o laboratório do inventor obteve provas convincentes de que os AINEs podem provocar lesões mucosas através da associação química com fosfolipidos zwiteriónicos, tais como a fosfatidilcolina (PC), no interior e na superfície da camada de gel mucosa, com o local de ligação electrostática estando entre o grupo principal colina positivamente carregado do fosfolípido zwiteriónico, a fosfatidilcolina (PC), e o grupo (carboxilo ou sulfonilo) negativamente carregado do ΑΙΝΕ.52 Com base nesta informação, o nosso grupo avaliou a toxicidade gastrointestinal, antes de administração, de um determinado número de AINEs que estavam quimicamente pré-associados com PC sintética ou purificada, e obteve provas de que, nos ratos, esses novos fármacos eram muito menos prejudiciais no que se refere à formação de lesões e sangramento gastrointestinais do que os AINEs inalterados. A aplicabilidade desta abordagem a doenças humanas foi recentemente confirmada quando estudos piloto clínicos revelaram que PC-aspirina, empregando PC purificada (93% pura), induziu significativamente menos lesões gástricas em seres humanos do que aspirina inalterada num estudo piloto duplamente cego e cruzado de 4 dias.53

Curiosamente, o laboratório do inventor também determinou que a associação PC-AINE possui uma eficácia e potência terapêuticas superiores às dos fármacos inalterados em modelos de animais com febre, inflamação/dor, trombose e osteoporose, sugerindo que a sua menor toxicidade gástrica não poderá ser simplesmente explicada por uma redução na biodisponibil idade .52'54

Embora a combinação de PC (não incluindo outros fosfolipidos semelhantes) e AINEs resulte na redução dos efeitos patogénicos da administração de AINEs, a administração 7 ΕΡ 1 343 529/ΡΤ oral destas combinações tem sido pouco adequada porque a combinação exige um volume maior por dose eficaz do que ο ΑΙΝΕ sozinho. Assim, há necessidade na arte para uma composição de AINEs e transportador que permita uma maior concentração de AINEs na composição e em que o transportador reduza os efeitos patogénicos dos AINEs e esteja numa forma apropriada para administração por via oral, interna ou tópica. Além disso, há necessidade na arte de uma composição de AINEs que tenha uma duração em armazenagem melhorada, especialmente no caso de fármacos contendo aspirina. WO 98/13073 revela composições que compreendem AINEs e fosfolipidos. WO 96/22780 revela que os AINEs possuem capacidade para se associarem quimicamente com fosfolípidos zwiteriónicos em sistemas de solventes orgânicos e aquosos.

Leyck et al. (European Journal of Pharmacology, 1985, 117, p. 35-42) divulgam melhorias na tolerância gastrointestinal a AINEs usando formulações aquosas de polienofosfatidilcolina.

Em US 5 154 930 divulgam-se preparações de soluções lipídicas de agentes farmacológicos.

SUMÁRIO DA INVENÇÃO

Num primeiro aspecto da presente invenção, proporciona-se uma composição não aquosa que compreende: uma quantidade terapeuticamente eficaz de um fármaco anti-inflamatório não esteróide (ΑΙΝΕ), misturado na forma de pó directamente num óleo transportador biocompatível contendo um fosfolípido, em que o fosfolípido está presente em quantidade suficiente para prevenir, reduzir, e/ou tratar efeitos patogénicos, incluindo ulcerações gastrointestinais (GI), sangramento gastrointestinal (GI), danos hepáticos, danos renais e/ou efeitos colaterais cardiovasculares adversos, e em que a quantidade terapeuticamente eficaz do ΑΙΝΕ é suficiente para prevenir, reduzir, tratar e/ou melhorar 8 ΕΡ 1 343 529/ΡΤ inflamação de tecidos, dor, febre, doenças cardiovasculares, cancros do ovário, cancros do cólon, acidentes vasculares cerebrais, traumatismo cranioencefálico, lesão medular acorde e os seus sintomas, e/ou doença de Alzheimer e os seus sintomas.

Num outro aspecto, a presente invenção proporciona um método de preparação de uma composição de acordo com a invenção, que compreende as etapas de misturar uma quantidade terapeuticamente eficaz de um ΑΙΝΕ na forma de pó directamente num óleo transportador biocompativel contendo um fosfolipido.

Composições Gerais A presente invenção proporciona uma composição que inclui uma concentração relativamente elevada de um fármaco anti-inflamatório não esteróide (ΑΙΝΕ) num fluido transportador não aquoso. A presente invenção proporciona uma composição de um ΑΙΝΕ num fluido transportador não aquoso, onde o transportador compreende um óleo biocompativel e um fosfolipido. A presente invenção proporciona uma composição de um ΑΙΝΕ num transportador fluido não aquoso, onde o transportador compreende um óleo biocompativel rico em fosfolipido. A presente invenção proporciona iqualmente uma composição que inclui uma concentração relativamente alta de um ΑΙΝΕ num fluido transportador não aquoso, onde o transportador ou os seus constituintes actuam no sentido de reduzir os efeitos patogénicos do ΑΙΝΕ, a fim de aumentar a biodisponibilidade do ΑΙΝΕ e a disponibilidade do ΑΙΝΕ através de barreiras relativamente hidrófobas num animal incluindo um ser humano. A presente invenção proporciona também uma composição que inclui uma concentração relativamente elevada de um ΑΙΝΕ e um fosfolipido num fluido transportador não aquoso, onde o fosfolipido está presente numa quantidade suficiente para reduzir os efeitos patogénicos do ΑΙΝΕ, para aumentar a biodisponibilidade do ΑΙΝΕ, e para aumentar a disponibilidade 9 ΕΡ 1 343 529/ΡΤ do ΑΙΝΕ através de barreiras relativamente hidrófobas num animal, incluindo um ser humano. A presente invenção proporciona uma composição que inclui uma concentração relativamente elevada de um ΑΙΝΕ num fluido transportador não aquoso que compreende um fosfolípido e um óleo biocompativel, onde o fosfolípido está presente numa quantidade suficiente para reduzir os efeitos patogénicos do ΑΙΝΕ, aumentar a biodisponibilidade do ΑΙΝΕ, e aumentar a disponibilidade do ΑΙΝΕ através de barreiras relativamente hidrófobas num animal, incluindo um ser humano. A presença do fosfolípido também reduz a patogenicidade e/ou a toxicidade gerais dos AINEs. Assim, o fosfolípido reduz e/ou evita os danos hepáticos causados pela administração de acetaminofeno, e/ou os efeitos colaterais renais e/ou cardiovasculares causados pela administração de outros AINEs tais como ibuprofeno ou inibidores da COX-2. Métodos Gerais para Fazer as Composições Gerais A presente invenção proporciona igualmente um método de preparação de uma composição que compreende um ΑΙΝΕ num fluido transportador não aquoso, compreendendo a etapa de combinar o ΑΙΝΕ com o transportador para formar uma solução, uma pasta, um semi-sólido, uma dispersão, uma suspensão, uma suspensão coloidal ou uma sua mistura. A presente invenção proporciona também um método de preparação de uma composição que compreende um ΑΙΝΕ num fluido transportador não aquoso contendo um fosfolípido, que compreende a etapa de combinar ο ΑΙΝΕ com o transportador para formar uma solução, uma pasta, um semi-sólido, uma dispersão, uma suspensão, suspensão coloidal ou suas misturas contendo o complexo de associação fosfolípido-AINE. A presente invenção proporciona igualmente um método de preparação de uma composição que compreende um ΑΙΝΕ num fluido transportador não aquoso que inclui um óleo biocompativel contendo fosfatidilcolina, compreendendo a etapa de combinar o ΑΙΝΕ com o transportador para formar uma solução, uma pasta, um semi-sólido, uma dispersão, uma suspensão, uma suspensão 10 ΕΡ 1 343 529/ΡΤ coloidal ou uma sua mistura compreendendo o complexo de associação fosfatidilcolina-AINE. A presente invenção proporciona igualmente um método de preparação de uma composição compreendendo um ΑΙΝΕ num fluido transportador não aquoso, que compreende a etapa de combinar o ΑΙΝΕ com o transportador para formar uma solução, uma pasta, um semi-sólido, uma dispersão, uma suspensão, uma suspensão coloidal ou uma sua mistura, em que o transportador compreende um óleo biocompativel contendo fosfolípido, ou um óleo biocompativel e um fosfolípido, ou uma sua mistura.

Composições para tratamento de inflamação A presente invenção proporciona igualmente uma composição para reduzir inflamação de tecidos que inclui um transportador não aquoso contendo uma quantidade terapeuticamente eficaz de um ΑΙΝΕ e um fosfolípido em quantidade suficiente para reduzir os efeitos patogénicos do ΑΙΝΕ, em que a composição reduz a inflamação de tecidos a uma dose de ΑΙΝΕ inferior à dose normalmente requerida para se obter a mesma resposta terapêutica na ausência do fosfolípido, com toxicidade e/ou irritação da mucosa diminuídas. A presente invenção proporciona igualmente um tratamento pós-operatório para reduzir a inflamação de tecidos, órgãos e/ou incisões e outras suas consequências, em que a composição inclui um transportador não aquoso contendo uma quantidade terapeuticamente eficaz de um ΑΙΝΕ e um fosfolípido em quantidade suficiente para reduzir os efeitos patogénicos do ΑΙΝΕ, em que a composição reduz a inflamação de tecidos a uma dose de ΑΙΝΕ inferior à dose normalmente requerida para se obter a mesma resposta terapêutica na ausência do fosfolípido, com toxicidade e/ou irritação da mucosa diminuídas. Naturalmente, a composição pode ser uma pomada, um spray, revestindo um material absorvente (wipe) ou um substrato biodegradável, ou afins.

Composição para Tratamento de Agregação Plaquetária um A presente invenção proporciona igualmente uma composição para redução da agregação plaquetária, que inclui 11 ΕΡ 1 343 529/ΡΤ transportador não aquoso contendo uma quantidade terapeuticamente eficaz de um ΑΙΝΕ e um fosfolípido em quantidade suficiente para reduzir os efeitos patogénicos do ΑΙΝΕ, em que a composição reduz a agregação plaquetária a uma dose de ΑΙΝΕ inferior à dose normalmente requerida para se obter a mesma resposta terapêutica na ausência do fosfolípido, com toxicidade e/ou irritação da mucosa diminuídas.

Composição para Tratamento de Condições Piréticas A presente invenção proporciona também uma composição com actividade antipirética que inclui um transportador não aquoso contendo uma quantidade terapeuticamente eficaz de um ΑΙΝΕ e um fosfolípido em quantidade suficiente para reduzir os efeitos patogénicos do ΑΙΝΕ, em que a composição demonstra actividade antipirética a uma dose de ΑΙΝΕ inferior à dose normalmente requerida para se obter a mesma resposta terapêutica na ausência do fosfolípido, com toxicidade e/ou irritação da mucosa diminuídas.

Composição para Tratamento de Tecidos Ulcerados A presente invenção proporciona uma composição para tratamento de tecidos ulcerados que inclui um transportador não aquoso compreendendo um fosfolípido, um óleo biocompatível e uma quantidade terapeuticamente eficaz de um ΑΙΝΕ, em que o fosfolípido está presente numa quantidade suficiente para reduzir a ulceração de tecidos e ο ΑΙΝΕ reduz a inflamação das regiões ulceradas do tecido.

Composição para Tratamento de Traumas do Sistema Nervoso Central e/ou Periférico. A presente invenção proporciona também uma composição para tratamento oral ou interno da medula espinal, acidentes vasculares cerebrais e/ou lesões cerebrais traumáticas, em que a composição inclui um transportador não aquoso contendo um fosfolípido e uma quantidade terapeuticamente eficaz de um ΑΙΝΕ, ou um transportador não aquoso compreendendo um fosfolípido, um óleo biocompatível e uma quantidade terapeuticamente eficaz de um ΑΙΝΕ, em que o fosfolípido aumenta o transporte do ΑΙΝΕ através da barreira 12 ΕΡ 1 343 529/ΡΤ hematoencefálica ou para o sistema nervoso central (SNC) ou o sistema nervoso periférico (SNP), permitindo que mais ΑΙΝΕ atinja o local de trauma e reduza a inflamação, em que ο ΑΙΝΕ reduz a inflamação, a agreqação plaquetária, a sensação de dor (nociceptiva), a morte celular e/ou apoptose devido a inflamação. Métodos de Tratamento de Traumas do Sistema Nervoso Central e/ou Periférico A presente invenção proporciona igualmente métodos para o tratamento da medula espinal, acidentes vasculares cerebrais e/ou lesões cerebrais traumáticas através da administração de uma composição desta invenção por via oral, e/ou directa por meio de injecção, em que a administração directa pode ser numa veia (administração i.v.), numa artéria (administração i.a.), ou directamente no local do trauma (administração directa), em que o fosfolipido aumenta o transporte do ΑΙΝΕ através da barreira hematoencefálica permitindo que mais ΑΙΝΕ atinja o local de trauma e reduza a inflamação no caso da administração i.v. e i.a., e o fosfolipido reduza os efeitos patogénicos do ΑΙΝΕ em todas as formas de administração.

Composição para Tratamento da Doença de Alzheimer A presente invenção proporciona também uma composição para prevenir, tratar ou melhorar os sintomas associados à doença de Alzheimer, incluindo um óleo biocompatível, um fosfolipido e uma quantidade terapeuticamente eficaz de um ΑΙΝΕ, em que ο ΑΙΝΕ e o fosfolipido actuam no sentido de prevenir o aparecimento dos sintomas da doença de Alzheimer ou de melhorar os sintomas da doença de Alzheimer. Métodos para Tratamento da Doença de Alzheimer A presente invenção proporciona igualmente um método para prevenir, tratar ou melhorar os sintomas associados com a doença de Alzheimer, que inclui a etapa de administração por via oral ou interna de uma composição desta invenção de acordo com um protocolo de tratamento. 13 ΕΡ 1 343 529/ΡΤ

DESCRIÇÃO DOS DESENHOS A presente invenção pode ser melhor compreendida com referência à seguinte descrição detalhada, juntamente com os desenhos ilustrativos anexados nos quais elementos iguais têm a mesma numeração: A Figura 1 mostra que, em contraste com o elevado número de lesões gástricas observadas em ratos ministrados apenas com aspirina (ASA), os ratos tratados com todas as três aspirinas: formulações de lecitina (LEC, utilizando o óleo de lecitina Phosal 35 SB) a razões ASA:LEC em peso de cerca de 1:0,5, 1:1 e cerca de 1:2, tiveram significativamente menos lesões gástricas; A Figura 2 mostra que a indometacina, numa dose de 10 mg/kg, induz um severo aumento no sangramento gastrointestinal, o qual se encontra acentuada e significativamente reduzido em ratos que receberam intragastricamente uma dose equivalente de indometacina combinada com Phosal 35 SB, a uma razão ΑΙΝΕ:lecitina de 1:1 em peso; A Figura 3 mostra que o ibuprofeno (que é considerado um dos AINEs convencionais menos tóxicos para ratos), numa dose de 100 mg/kg induz um modesto aumento no sangramento gastrointestinal, o qual se encontra significativamente reduzido em ratos que receberam intragastricamente uma dose equivalente de ibuprofeno combinado com Phosal 35 SB, a uma razão ΑΙΝΕ:lecitina de 1:1 em peso; A Figura 4 mostra que a aspirina, numa dose de 10 mg/kg, aumentou modestamente o limiar de dor da pata afectada do rato, ao passo que a actividade analgésica de uma dose equivalente de aspirina, quando administrada em combinação com o óleo de lecitina a todas as razões em peso testadas, foi significativamente reforçada; A Figura 5 mostra que o ibuprofeno, numa dose de 25 mg/kg, teve uma modesta, embora não significativa, capacidade para aumentar o limiar de dor à pressão da pata inflamada do rato, ao passo que a actividade analgésica de uma dose equivalente de ibuprofeno, quando administrada em combinação com o óleo de lecitina a uma razão em peso de 1:1, foi significativamente reforçada; 14 ΕΡ 1 343 529/ΡΤ A Figura 6 mostra que a indometacina, numa dose de 4 mg/kg, tem um modesta, embora não significativa, capacidade para aumentar o limiar de dor à pressão da pata inflamada do rato, ao passo que a actividade analgésica de uma dose equivalente de indometacina, quando administrada em combinação com o óleo de lecitina a uma razão de 1:1 em peso, foi significativamente reforçada; A Figura 7A mostra graficamente como a hiperalgesia induzida por lesão medular (LM) é contrariada por tratamento com PC-Ibuprofeno e Ibuprofeno; A Figura 7B mostra graficamente como a hiperalgesia induzida pela lesão medular (LM) é contrariada por tratamento com PC-Ibuprofeno e Ibuprofeno A Figura 8 representa graficamente os resultados da actividade analgésica de PC-Ibuprofeno e de Ibuprofeno em ratos 5 semanas após lesão medular; A Figura 9 representa graficamente os resultados do ganho de peso ao fim de 6 semanas em ratos lesados na medula espinal e tratados com PC-Ibuprofeno e Ibuprofeno; A Figura 10 ilustra graficamente os resultados da recuperação da função motora após lesão medular (LM) tratada com PC-

Ibuprofeno e Ibuprofeno; A Figura 11 mostra graficamente como o complexo PC-aspirina reduziu significativamente o número de erosões gástricas em 70% em indivíduos susceptíveis comparado com uma dose equivalente de aspirina inalterada, e esta redução na toxicidade gástrica não teve uma correspondente alteração na actividade inibitória da COX do fármaco; A Figura 12 mostra graficamente que tanto a aspirina como o complexo PC-aspirina têm uma capacidade equivalente para inibir a actividade da COX no antro em mais de 85%; A Figura 13A&B representa graficamente a concentração de TXB2 em plaquetas de rato 30 min após a administração oral de solução salina, DPPC, ASA (20 mg/kg), ou ASA complexado com DPPC. O PRP foi preparado e a agregação induzida por AA (2 mm) . O TXB2 foi medido por RIA. Os resultados expressos como média ± EPM; n = 3; * = p <0,050 vs ASA - Abreviaturas:

PRP DPPC = dipalmitoílfosfatidilcolina; AA = ácido araquidónico; = plasma rico em plaquetas; TXB = tromboxano; 15 ΕΡ 1 343 529/ΡΤ A Figura 13Β representa graficamente ο efeito da administração intra-gástrica a ratos de 20 mg/kg de ASA isolado ou complexado com DPPC na produção de 6KPGFla pela aorta abdominal. Ao fim de 1 hora a aorta foi removida e cada anel da aorta foi incubado a 370°C durante 10 minutos em tampão Tris-HCl contendo 25 mM de AA. O ôKPGFla foi medido por RIA. * = P < 0,050 x ASA; ** = p < 0,001 vs solução salina; n = 4; A Figura 14A mostra graficamente o registo representativo dos fluxos sanguíneos (kHz) de um coelho durante a formação de trombos provocados com 2,5 mg/kg de aspirina inalterada ou de aspirina complexada com DPPC juntamente com solução salina ou controlos de PC; A Figura 14B representa graficamente o efeito de 2,5 mg/kg de aspirina, com ou sem DPPC, no peso dos trombos num modelo de coelho com trombose arterial. * = P < 0,001 vs ASA; A Figura 14C representa graficamente o efeito de 2,5 mg/kg de aspirina, com ou sem DPPC, na razão de PGI2 para TXA2 da artéria carótida do modelo de coelho com trombose arterial; e A Figura 15 representa graficamente as lesões hepáticas em ratos, tal como indicado pelas subidas nos níveis plasmáticos da enzima aspartato-transaminase (AST), 24 horas após ratos em jejum terem recebido acetaminofeno (800 mg/kg) por via oral, isoladamente ou em combinação com P35SB a razões em peso de 1:1 e 1:2.

DEFINIÇÕES DE TERMOS E EXPRESSÕES

Os seguintes termos e expressões terão os significados abaixo indicados, que podem ou não corresponder ao seu significado geralmente aceite: O termo "ΑΙΝΕ" significa qualquer variedade de fármacos geralmente classificados como fármacos anti-inflamatórios não esteróides, incluindo, sem limitação, ibuprofeno, piroxicam, salicilato, aspirina, naproxeno, indometacina, diclofenac, acetaminofeno, inibidores da COX2 ou qualquer sua mistura. A expressão "essencialmente isento" significa composições que incluem um determinado ingrediente numa quantidade biologicamente inerte e/ou não activa, de preferência, o componente está presente numa quantidade inferior a cerca de 16 ΕΡ 1 343 529/ΡΤ 0,10% em peso de um determinado ingrediente, e particularmente numa quantidade inferior a cerca de 0,01% em peso sendo preferida. A expressão "concentração relativamente elevada" significa que a razão em peso do ΑΙΝΕ para o transportador varia entre cerca de 10:1 e cerca de 1:10. Preferivelmente, a razão em peso do ΑΙΝΕ para o transportador varia entre cerca de 5:1 e cerca de 1:5, em particular entre cerca de 2:1 e 1:2, e especialmente entre cerca de 2:1 e 1:1. A expressão "fosfolípido zwiteriónico" abrange um vasto leque de fosfolipidos, incluindo, mas não lhes estando limitados, fosfatidilcolina, fosfatidilserina, fosfalidileta-nolamina, esfingomielina e outras ceramidas, bem como vários outros fosfolípidos zwiteriónicos. A expressão "óleo biocompatível" significa qualquer óleo aprovado para consumo humano pela FDA ou para consumo animal. A expressão "administração interna" ou "administrado internamente" significa administração por qualquer técnica que apresente a composição directamente na corrente sanguínea, num local de tecido, num órgão ou similar, sem primeiro passar através do tracto digestivo. A expressão "administração oral" ou "administrado por via oral" significa administração pela boca. A expressão "administração tópica" ou "topicamente administrado" significa administrar sobre uma superfície tal como a pele, uma camada de gel mucosa, os olhos, um tecido e/ou órgão exposto durante um procedimento cirúrgico, ou qualquer outro tecido corporal exposto. A expressão "complexo de associação" significa uma interacção química não covalente e/ou interacção física entre um ΑΙΝΕ e um fosfolípido tal como a interacção entre um ΑΙΝΕ e um fosfolípido zwiteriónico. 17 ΕΡ 1 343 529/ΡΤ Ο termo "zwiteriónico" significa que uma molécula possui tanto um grupo funcional de carga positiva como um grupo funcional de carga negativa a valores biológicos de pH. A expressão "fosfolípido aniónico" significa um fosfolípido que tem uma carga global negativa a valores biológicos de pH. A expressão "lípido neutro" significa um lipido não carregado. A expressão "barreiras relativamente hidrófobas" significa qualquer barreira externa, interna, celular ou subcelular com propriedades hidrófobas, que geralmente resiste ao, ou reduz o transporte de reagentes hidrófilos através da barreira. Estas barreiras incluem, sem lhes estar limitadas, a camada de gel da mucosa, uma membrana plasmática (membrana celular), a barreira hematoencefálica, ou qualquer outra barreira de um animal, incluindo um homem, que mais facilmente transporta materiais hidrófobos através de si do que materiais hidrófilos.

DESCRIÇÃO DETALHADA DO INVENTO 0 inventor constatou que se podem preparar formulações farmacêuticas únicas compreendendo um transportador fluido não aquoso e biocompatível contendo um fosfolípido e um ΑΙΝΕ para ajudar a reparar ulcerações do tecido mucoso e/ou para diminuir os efeitos patogénicos da administração do ΑΙΝΕ. A razão em peso do ΑΙΝΕ para o transportador varia geralmente entre cerca de 10:1 e cerca de 1:10, o que resulta numa mistura altamente concentrada de ΑΙΝΕ no transportador com inesperadas propriedades de baixa toxicidade gastrointestinal e actividade terapêutica reforçada do ΑΙΝΕ. Preferivelmente, a razão em peso do ΑΙΝΕ para o transportador varia entre cerca de 5:1 e cerca de 1:5, em particular entre cerca de 2:1 e 1:2, e especialmente entre cerca de 2:1 e 1:1. A prática desta invenção ficou limitada a modelos de roedores com doença de úlcera induzida por ΑΙΝΕ e com inflamação aguda do membro posterior. As formulações podem estar na forma de uma solução, uma pasta, um semi-sólido, uma 18 ΕΡ 1 343 529/ΡΤ dispersão, uma suspensão, uma suspensão coloidal ou uma sua mistura. 0 transportador fluido não aquoso e biocompatível compreende um óleo biocompatível ou mistura de óleos biocompat íveis ou de substâncias do tipo óleo. Um óleo ou mistura de óleo biocompatível pode incluir naturalmente um fosfolípido ou este pode ter sido adicionado. A quantidade de fosfolípido presente, naturalmente ou por adição ao transportador, é suficiente para prevenir, reduzir ou tratar ulceração de tecidos, ou é suficiente para reduzir os efeitos patogénicos do ΑΙΝΕ, tais como ulceração e sangramento gastrointestinais, danos hepáticos, danos renais, e/ou doenças cardiovasculares e/ou efeitos colaterais, tais como: hipertensão arterial, aterosclerose, trombose, angina peitoral, acidentes vasculares cerebrais e enfarte do miocárdio.

Em publicações e patentes anteriores tanto do inventor como de outros, formaram-se composições incluindo um fosfolípido e um ΑΙΝΕ pela dissolução inicial dos componentes num solvente orgânico tal como metanol, etanol ou clorofórmio, e removendo o solvente por destilação ou evaporação; ou dissolveu-se ο ΑΙΝΕ numa solução aquosa à qual se adicionou o fosfolípido seguido de liofilização. Estes processos permitem os dois componentes interagir quimicamente para formar um complexo. Muito frequentemente, estes processos utilizam uma fosfatidilcolina (PC) como fosfolípido, quer preparada sinteticamente, tal como a dipalmitoílfosfatidilcolina (DPPC), quer como um composto purificado ou semi-purifiçado. A presente invenção diz respeito de uma maneira geral a uma formulação ou composição farmacêutica que compreende um transportador fluido não aquoso contendo um fosfolípido e um ΑΙΝΕ, em que o fosfolípido está presente numa quantidade suficiente para evitar, reduzir ou tratar ulceração de tecidos e/ou inflamação, e o fosfolípido está presente numa quantidade capaz de reduzir os efeitos patogénicos do ΑΙΝΕ. As formulações são geralmente soluções viscosas, pastas, semi-sólidos, dispersões, suspensões, suspensões coloidais ou suas misturas, e podem ser administradas por via oral, 19 ΕΡ 1 343 529/ΡΤ administradas directamente, administradas internamente ou administradas topicamente. A presente invenção diz respeito de uma maneira geral a uma formulação ou composição farmacêutica que compreende um transportador fluido não aquoso contendo um fosfolípido e um ΑΙΝΕ, em que o fosfolípido está presente numa quantidade suficiente para evitar, reduzir ou tratar ulceração de tecidos, e para reduzir a toxicidade gastrointestinal do ΑΙΝΕ. A utilização de um fluido não aquoso permite a formação de composições com elevadas concentrações do ΑΙΝΕ para reduzir o volume de uma quantidade terapeuticamente eficaz do ΑΙΝΕ. As formulações são geralmente soluções viscosas, pastas, semi-sólidos, dispersões, suspensões, suspensões coloidais ou suas misturas, e podem ser administradas por via oral, administradas directamente, administradas internamente ou administradas topicamente. A presente invenção também se refere de uma maneira geral a um método de preparação de formulações farmacêuticas, que inclui a etapa de combinação de um ΑΙΝΕ sólido com um transportador não aquoso, em que o transportador inclui um óleo biocompatível contendo um fosfolípido, ou um óleo biocompatível e um fosfolípido, ou suas misturas, para formar uma composição de ΑΙΝΕ muito concentrada tendo os efeitos patogénicos do ΑΙΝΕ reduzidos. A presente invenção também diz respeito de uma maneira geral a um método para tratamento de inflamação, dor ou outras patologias tratáveis com AINEs, através da administração de uma quantidade eficaz de uma formulação farmacêutica que inclui um transportador fluido não aquoso contendo um ΑΙΝΕ e um fosfolípido, onde o fosfolípido está presente numa quantidade suficiente para reduzir a patologia do ΑΙΝΕ, e o ΑΙΝΕ está presente numa quantidade terapeuticamente eficaz, onde a combinação fosfolípido-AINE permite que a quantidade de ΑΙΝΕ administrado por dose seja inferior a uma quantidade equivalente de ΑΙΝΕ na ausência do fosfolípido para se obter o mesmo efeito terapêutico A presente invenção também se refere de uma maneira geral a um método de prevenção, redução e/ou tratamento de tecido 20 ΕΡ 1 343 529/ΡΤ ulcerado e/ou redução de inflamação, dor ou outras patologias tratáveis com AINEs associadas com inflamação e/ou ulceração de tecidos, através da administração de uma quantidade eficaz de uma formulação farmacêutica que compreende um fosfolipido e opcionalmente um ΑΙΝΕ num transportador não aquoso, onde o transportador é um óleo biocompativel ou sua mistura.

Em especial, o inventor constatou que se podem preparar formulações farmacêuticas únicas que compreendem um óleo biocompativel contendo um fosfolipido, tal como os óleos não purificados de lecitina que contêm naturalmente um fosfolipido, e onde a formulação resultante consiste de uma solução, uma pasta, um semi-sólido, uma dispersão, uma suspensão, suspensão coloidal ou suas misturas ou composição com inesperadas propriedades de baixa toxicidade gastrointestinal e actividade terapêutica reforçada.

As composições são facilmente preparadas combinando um óleo biocompativel, um fosfolipido e um ΑΙΝΕ, onde ο ΑΙΝΕ é adicionado na forma de pó directamente a um óleo de lecitina bruto ou semi-bruto para formar uma pasta, semi-sólido, dispersão ou suspensão coloidal ou composição semelhante que pode ser adicionada a cápsulas de gelatina mole ou dura ou cápsulas vegetais disponíveis em VitaHerb Nutraceuticals, de Placentia, CA, para administração oral, injectada para administração interna, ou aplicada sobre a pele para administração tópica. Uma observação inesperada foi a de que estas simples formulações, que são semelhantes aos produtos de PC-AINE feitos pelos métodos convencionais descritos atrás, exibem uma toxicidade gastrointestinal (GI) extremamente baixa em modelos de roedores com a doença de úlcera induzida por AINEs como se pode ver nas Figuras 1, 2 e 15, e demonstram também uma actividade terapêutica reforçada para tratar inflamação/dor num modelo de inflamação aguda da pata como se mostra nas Figuras 3 e 4, e em modelos de lesões medulares crónicas como se pode ver nas Figuras 7 e 8.

Geralmente, a razão em peso do ΑΙΝΕ para o óleo que contém o fosfolipido varia entre cerca de 10:1 e cerca de 1:10, preferivelmente entre cerca de 4:1 e cerca de 1:4, em particular, entre cerca de 2:1 e cerca de 1:2, e, especialmente, entre cerca de 2:1 e cerca de 1: 1. Para os 21 ΕΡ 1 343 529/ΡΤ óleos úteis na prática desta invenção que contêm naturalmente um fosfolípido, os óleos geralmente incluem entre cerca de 10 e cerca de 15% em peso de um fosfolípido, preferivelmente entre cerca de 10% em peso e cerca de 20% em peso de um fosfolípido e, particularmente, entre cerca de 10% e cerca de 40% em peso de um fosfolípido. Também se podem usar quantidades maiores e menores de fosfolípido. Porém, a uma percentagem muito inferior a 10% em peso, torna-se um problema uma quantidade que seja terapeuticamente eficaz ou suficiente para se associar a qualquer ΑΙΝΕ adicionado, enquanto que a uma percentagem superior a cerca de 40% em peso, pode ter que se adicionar um fosfolípido purificado ao óleo biocompatível que naturalmente inclui um fosfolípido, tal como óleo de lecitina. Para os óleos biocompatíveis com uma baixa quantidade de fosfolípido (inferior a cerca de 10% em peso), adiciona-se um fosfolípido ao óleo. Esta combinação óleo-fosfolípido pode ser preparada com concentrações de fosfolípido tão altas quanto cerca de 90% em peso. No entanto, a combinação preferida inclui quantidades de fosfolípido entre cerca de 10% em peso e cerca de 90% em peso, em especial entre cerca de 20% em peso e cerca de 80% em peso, mais especialmente, entre cerca de 20% em peso e cerca de 60% em peso, e ainda mais especialmente, entre cerca de 20% em peso e cerca de 40% em peso.

Geralmente, a dosagem das composições da presente invenção para uso geral que contêm ο ΑΙΝΕ vai desde 5 mg por dose até 500 mg por dose. Obviamente que se podem preparar formulações de doses maiores e menores; no entanto, isso não abrange as gamas normalmente encontradas para os AINEs comercialmente disponíveis. Preferivelmente, o intervalo de dosagem dos AINEs varia entre cerca de 10 mg e cerca de 325 mg por dose, particularmente, entre cerca de 25 mg e cerca de 200 mg por dose e, especialmente, entre cerca de 50 mg e cerca de 100 mg por dose. Reconhece-se que cada ΑΙΝΕ possui um leque diferente de doses por comprimido ou similar, com a finalidade de que estes intervalos abranjam todas as gamas que um paciente iria geralmente encontrar ao tomar formulações contendo AINEs tal como o termo é utilizado aqui. Também deveria ser reconhecido que a composição da presente invenção não só inclui um ΑΙΝΕ, mas inclui um ΑΙΝΕ num transportador fluido não aquoso contendo um fosfolípido, onde a quantidade 22 ΕΡ 1 343 529/ΡΤ de fosfolípido é suficiente, quando um ΑΙΝΕ está presente, para reforçar a eficácia terapêutica do ΑΙΝΕ enquanto ao mesmo tempo reduz os efeitos patogénicos do ΑΙΝΕ. Estes efeitos patogénicos do ΑΙΝΕ são, naturalmente, específicos do ΑΙΝΕ, mas incluem, sem lhes estar limitados, danos gastrointestinais tais como ulceração, sangramento ou afins (a maioria, senão todos os ΑΙΝΕ), danos hepáticos (por exemplo, acetaminofeno), danos renais (por exemplo, ibuprofeno, acetaminofeno, inibidores da COX-2), danos cardíacos (por exemplo, inibidores da COX-2), etc. Devido aos complexos de AINE-fosfolípido associados, é necessária uma menor dose de ΑΙΝΕ, em mg, para se obter um determinado efeito terapêutico ou resposta (redução de febre, redução de inflamação, redução de agregação plaquetária, etc.) A dose, em mg, pode ser reduzida entre 1 a 15 vezes. Preferivelmente, a dose é reduzida entre cerca de 1 e cerca de 10 vezes em mg por dose de ΑΙΝΕ. O aumento de bioactividade proporcionado por uma composição que inclui a combinação fosfolípido-AINE não resulta num aumento equivalente na toxicidade do ΑΙΝΕ, mas sim, inesperadamente, numa diminuição da toxicidade do ΑΙΝΕ tal como evidenciado pelos resultados aqui apresentados.

Para condições mais severas como artrite, doença de Alzheimer, traumas do SNC e do SNP, ou outras condições mais graves tratáveis com AINEs e/ou fosfolípidos, as necessidades da dose diária de ΑΙΝΕ são geralmente muito mais elevadas. Normalmente, a dose diária vai desde cerca de 100 mg até cerca de 5000 mg por dia, de preferência, desde cerca de 500 mg até cerca de 3000 mg por dia, especialmente, desde cerca de 750 mg até cerca de 3000 mg por dia e, mais especialmente, desde cerca de 1000 mg até cerca de 3000 mg por dia. Uma vez mais, a eficácia reforçada das combinações fosfolípido-AINE permitem a dose causar um maior efeito terapêutico, sem o concomitante aumento de patogenicidade ou toxicidade do ΑΙΝΕ. Naturalmente, este aumento na bioactividade dos AINEs permite a administração de doses mais baixas de AINEs.

Como regra geral, quando se administra um ΑΙΝΕ numa formulação da presente invenção, em que ο ΑΙΝΕ está dissolvido, disperso, suspenso ou de outra forma misturado num transportador não aquoso, um óleo biocompatível, contendo uma quantidade suficiente de um fosfolípido para reforçar a 23 ΕΡ 1 343 529/ΡΤ actividade do ΑΙΝΕ ao mesmo tempo que reduz a toxicidade do ΑΙΝΕ, as necessidades de dosagem podem ser tão baixas quanto 5% da dose recomendada necessária para tratar uma especifica condição, e podem ir até 100% dessa dose dependendo do paciente, do seu estado e outros factores. Preferivelmente, a dosagem vai desde cerca de 10% até cerca de 90% da dose recomendada necessária para tratar uma especifica condição, e particularmente desde cerca de 10% até cerca de 50% da dose recomendada necessária para tratar uma especifica condição. As necessidades de dosagem recomendada para um determinado ΑΙΝΕ e para uma determinada doença podem ser encontradas em publicações tais como o Physicians Desk Reference (PDR), publicação AMA, a publicação da FDA ou similares, e são critérios bem estabelecidos.

As composições da presente invenção podem ainda incluir: (1) uma quantidade farmaceuticamente aceitável de antioxidante seleccionado do grupo composto de vitamina A, Vitamina C e Vitamina E, ou outros antioxidantes aprovados para consumo humano e animal pela FDA e suas misturas ou combinações; (2) uma quantidade farmaceuticamente aceitável de um catião polivalente seleccionado do grupo constituído por cobre, zinco, ouro, alumínio e cálcio e suas misturas ou combinações, (3) uma quantidade farmaceuticamente aceitável de um agente para promover fluidez, espalhamento ou permeabilidade, seleccionado do grupo constituído por dimetilsulfóxido/DMSO, propilenoglicol/PPG, e triglicéridos de cadeia média/MCT e suas misturas ou combinações, (4) uma quantidade farmaceuticamente aceitável de coloração alimentar ou corante não tóxico; (5) uma quantidade farmaceuticamente aceitável de um intensif icador de sabor; (6) um excipiente; e/ou (7) um adjuvante.

Composições Gerais A presente invenção refere-se a uma composição que inclui uma concentração relativamente elevada de um fármaco anti-inflamatório não esteróide (ΑΙΝΕ) num fluido transportador não aquoso. Preferivelmente, o transportador compreende um óleo biocompatível e um fosfolípido, ou um óleo biocompatível rico em fosfolípido. 0 transportador, quer naturalmente e/ou por via de adição, inclui uma quantidade suficiente de fosfolípido 24 ΕΡ 1 343 529/ΡΤ para reduzir os efeitos patogénicos do ΑΙΝΕ, para aumentar a biodisponibilidade do ΑΙΝΕ, e para aumentar a disponibilidade do ΑΙΝΕ através de barreiras relativamente hidrófobas do corpo de um animal, incluindo um corpo humano. Preferivelmente, a composição resultante inclui uma concentração relativamente elevada de um complexo de associação fosfolípido-AINE. Em particular, a composição resultante inclui uma concentração relativamente elevada de um complexo de associação fosfatidilcolina-AINE. A presente invenção refere-se a uma composição que inclui uma concentração relativamente elevada de um ΑΙΝΕ num fluido transportador não aquoso, compreendendo um fosfolípido e um óleo biocompatível, onde o fosfolípido está presente numa quantidade suficiente para reduzir os efeitos patogénicos do ΑΙΝΕ, para aumentar a biodisponibilidade do ΑΙΝΕ através de barreiras relativamente hidrófobas no corpo de um animal incluindo um corpo humano, onde a dose da composição é suficiente para resultar na entrega de uma quantidade terapeuticamente eficaz do ΑΙΝΕ e/ou do fosfolípido, em que a quantidade do ΑΙΝΕ é 1-10 vezes inferior à quantidade de ΑΙΝΕ necessária para se obter o mesmo efeito terapêutico na ausência do fosfolípido. Preferivelmente, a composição resultante inclui uma concentração relativamente elevada de um complexo de associação fosfolípido-AINE. Em particular, a composição resultante inclui uma concentração relativamente elevada de um complexo de associação fosfatidilcolina-AINE. A presença do fosfolípido na composição da presente invenção também reduz a patogenicidade e/ou toxicidade gerais ou específicas dos AINEs. Assim, os fosfolípidos reduzem e/ou previnem lesões hepáticas causadas pela administração de acetaminofeno, e/ou danos renais e/ou danos cardíacos provocados pela administração de outros AINEs, tais como ibuprofeno ou inibidores da COX2. Métodos Gerais para Fazer as Composições Gerais A presente invenção refere-se igualmente a um método de preparação de uma composição que compreende um ΑΙΝΕ num fluido transportador não aquoso, compreendendo a etapa de combinar o ΑΙΝΕ com o transportador para formar uma solução, uma pasta, 25 ΕΡ 1 343 529/ΡΤ um semi-sólido, uma dispersão, uma suspensão, uma suspensão coloidal ou uma sua mistura, tendo uma concentração relativamente elevada de ΑΙΝΕ. 0 transportador compreende um óleo biocompatível contendo um fosfolipido, ou um óleo biocompatível e um fosfolípido. Preferivelmente, a composição resultante inclui uma concentração relativamente elevada do complexo de associação fosfolípido-AINE. Em particular, a composição resultante inclui uma concentração relativamente elevada de um complexo de associação fosfatidilcolina-AINE.

Composições para Tratamento de Inflamação A presente invenção refere-se igualmente a uma composição para reduzir a inflamação de tecidos que inclui um transportador não aquoso contendo uma quantidade terapeuticamente eficaz de um ΑΙΝΕ e um fosfolípido em quantidade suficiente para reduzir os efeitos patogénicos do ΑΙΝΕ, em que a composição reduz a inflamação de tecidos a uma dose de ΑΙΝΕ inferior à dose normalmente requerida para se obter a mesma resposta terapêutica na ausência do fosfolípido, com toxicidade e/ou irritação da mucosa diminuídas.

Composição para Tratamento de Agregação Plaquetária A presente invenção refere-se igualmente a uma composição para redução da agregação plaquetária, que inclui um transportador não aquoso contendo uma quantidade terapeuticamente eficaz de um ΑΙΝΕ, e um fosfolípido em quantidade suficiente para reduzir os efeitos patogénicos do ΑΙΝΕ, em que a composição reduz a agregação plaquetária a uma dose de ΑΙΝΕ inferior à dose normalmente requerida para se obter a mesma resposta terapêutica na ausência do fosfolípido, com toxicidade e/ou irritação da mucosa diminuídas.

Composição para Tratamento de Condições Piréticas A presente invenção proporciona também uma composição com actividade antipirética que inclui um transportador não aquoso contendo uma quantidade terapeuticamente eficaz de um ΑΙΝΕ e um fosfolípido em quantidade suficiente para reduzir os 26 ΕΡ 1 343 529/ΡΤ efeitos patogénicos do ΑΙΝΕ, em que a composição demonstra actividade antipirética a uma dose de ΑΙΝΕ inferior à dose normalmente requerida para se obter a mesma resposta terapêutica na ausência do fosfolípido, com toxicidade e/ou irritação da mucosa diminuídas.

Composição para Tratamento de Tecidos Ulcerados e/ou Inflamados A presente invenção proporciona uma composição para tratamento de tecidos ulcerados que compreende uma emulsão ou microemulsão aquosas contendo um fosfolípido, um óleo biocompatível e uma quantidade terapeuticamente eficaz de um ΑΙΝΕ, em que o fosfolípido está presente numa quantidade suficiente para reduzir a inflamação e/ou a ulceração do tecido e ο ΑΙΝΕ reduz a inflamação das regiões afectadas do tecido.

Composição para Tratamento de Traumas do Sistema Nervoso Central e/ou Periférico. A presente invenção também se refere a uma composição para tratamento oral ou interno da medula espinal, de acidentes vasculares cerebrais e/ou lesões cerebrais traumáticas, em que a composição inclui um transportador não aquoso contendo um fosfolípido e uma quantidade terapeuticamente eficaz de um ΑΙΝΕ, em que o fosfolípido aumenta o transporte do ΑΙΝΕ através da barreira hematoencefálica permitindo que mais ΑΙΝΕ atinja o local de trauma e reduza a inflamação, em que ο ΑΙΝΕ reduz inflamação, agregação plaquetária, actividade antipirética e morte celular devido a inflamação. Métodos de Tratamento de Traumas do Sistema Nervoso Central e/ou Periférico A presente invenção refere-se igualmente a métodos para o tratamento da medula espinal, acidentes vasculares cerebrais e/ou lesões cerebrais traumáticas através da injecção de uma composição desta invenção quer numa veia (administração i.v.), quer numa artéria (administração i.a.), ou directamente no local do trauma (administração directa), em que o fosfolípido 27 ΕΡ 1 343 529/ΡΤ aumenta ο transporte do ΑΙΝΕ através da barreira hematoencefálica ou de outra barreira neurogénica permitindo que mais ΑΙΝΕ atinja o local de trauma e reduza a inflamação no caso de administração i.v. e i.a., e o fosfolípido reduza os efeitos patogénicos do ΑΙΝΕ em todas as formas de administração. A presente invenção também se refere a uma medicação para melhorar os sintomas de lesão medular, acidente vascular cerebral e/ou lesão cerebral traumática, em que a medicação inclui uma concentração relativamente elevada de um ΑΙΝΕ num transportador à base de óleo contendo um fosfolípido, em que o ΑΙΝΕ e o fosfolípido formam um complexo de associação na medicação, em que a composição inclui uma concentração suficiente do ΑΙΝΕ para reduzir o inchaço do tecido traumatizado e uma concentração suficiente de fosfolípido para reduzir os efeitos patogénicos do ΑΙΝΕ no tecido traumatizado.

Composição para Tratamento da Doença de Alzheimer A presente invenção proporciona também uma composição para prevenir, tratar ou melhorar os sintomas associados com a doença de Alzheimer, que inclui um óleo biocompatível, um fosfolípido e uma quantidade terapeuticamente eficaz de um ΑΙΝΕ, em que ο ΑΙΝΕ e o fosfolípido actuam no sentido de prevenir o aparecimento dos sintomas da doença de Alzheimer ou de melhorar os sintomas da doença de Alzheimer. Métodos de Tratamento da Doença de Alzheimer A presente invenção proporciona igualmente um método para prevenir, tratar ou melhorar os sintomas associados com a doença de Alzheimer, que inclui a etapa de administração por via oral ou interna de uma composição desta invenção de acordo com um protocolo de tratamento.

Composição para Tratamento de Incisões A presente invenção também diz respeito a uma composição para tratamento de incisões de forma a reduzir a inflamação local induzida cirurgicamente e promover a cicatrização, que compreende um óleo biocompatível, um fosfolípido e uma 28 ΕΡ 1 343 529/ΡΤ quantidade terapeuticamente eficaz de um ΑΙΝΕ, em que ο ΑΙΝΕ e o fosfolipido actuam no sentido de reduzir a inflamação e sintomas associados e promover a cicatrização. Métodos de Tratamento de Incisões A presente invenção também diz respeito a um método para tratamento de incisões de forma a reduzir a inflamação local induzida cirurgicamente e promover cicatrização, que compreende a aplicação de uma composição incluindo um óleo biocompativel, um fosfolipido e uma quantidade terapeuticamente eficaz de um ΑΙΝΕ num local cirúrgico durante e após a cirurgia, mas antes do fechamento, em que ο ΑΙΝΕ e o fosfolipido actuam no sentido de reduzir a inflamação e sintomas associados e promover a cicatrização.

Composição para Melhorar Ulceração e/ou Inflamação causadas por Radioterapia e/ou Quimioterapia A presente invenção também se refere a composições para melhorar a ulceração de tecidos induzida pela radioterapia e/ou quimioterapia de certos tipos de cancro, tal como mucosite ou condições afins, em que a composição inclui um óleo biocompativel, um fosfolipido e uma quantidade terapeuticamente eficaz de um ΑΙΝΕ, onde o fosfolipido está presente numa quantidade suficiente para prevenir e/ou reduzir a ulceração ou a inflamação associadas à mucosite, e o fosfolipido está presente numa quantidade suficiente não só para prevenir e/ou reduzir ulceração ou inflamação, mas também para garantir que ο ΑΙΝΕ não agrave a condição. Preferivelmente, na quimioterapia, o agente quimioterápico é administrado numa composição adequadamente formulada da presente invenção. Assim, se o agente quimioterápico for administrado por via oral, o agente pode ser misturado com uma composição adequadamente formulada da presente invenção desde que não ocorram interacções adversas entre o agente e os componentes das composições da presente invenção, e administrado ao paciente. Se houver interacções adversas entre o agente quimioterápico e os componentes das composições da presente invenção, ou se o agente for administrado por injecção, então a composição da presente invenção é administrada por via oral juntamente com o agente 29 ΕΡ 1 343 529/ΡΤ quimioterápico e durante um período de tempo suficiente para prevenir ou reduzir a duração do episódio de mucosite. Métodos para Melhorar Ulceração e/ou Inflamação Causadas por Radioterapia ou Quimioterapia A presente invenção também se refere a métodos para prevenir e/ou tratar mucosite ou outra condição de ulceração induzida por tratamentos médicos tais como radioterapia e/ou quimioterapia, em que o método inclui as etapas de administrar uma quantidade eficaz de uma composição da presente invenção que inclui um óleo biocompatível, um fosfolípido e uma quantidade terapeuticamente eficaz de um ΑΙΝΕ, onde o fosfolípido está presente numa quantidade suficiente para prevenir e/ou reduzir a ulceração ou a inflamação associadas à mucosite, e o fosfolípido está presente numa quantidade suficiente não só para prevenir e/ou reduzir a ulceração, mas também para garantir que ο ΑΙΝΕ não agrava a condição, à área afectada do corpo, antes, em paralelo, e/ou após a radioterapia ou quimioterapia. Preferivelmente, a composição é concebida para administração oral e é dada antes e em paralelo com a radioterapia ou quimioterapia para prevenir e/ou tratar e/ou reduzir a duração de um episódio de mucosite. A composição da presente invenção pode ser usada em conjunto com qualquer formulação de lavagem da boca ou de higiene oral, incluindo as formulações descritas nas Patentes U.S. 5 407 663, 5 236 699, 5 130 146, 5 085 850, aqui incorporadas por referência. A composição da presente invenção pode também ser administrada na forma de uma pasta, pastilha, ou em qualquer outro formato normalmente usado para administração oral. Naturalmente, a composição também pode ser contida em cápsulas, cápsulas de gel ou afins.

Para administração tópica, as composições da presente invenção podem estar na forma de uma pomada, uma pasta, um óleo, uma emulsão, uma microemulsão, ou sua mistura ou combinação. Além disso, as composições podem ser misturadas com outros ingredientes habitualmente utilizados em pomadas e na indústria de cosméticos. 30 ΕΡ 1 343 529/ΡΤ

Os fosfolípidos adequados para utilização nesta invenção incluem, mas não lhes estando limitados, dimiristoilfos-fatidilcolina, diestearoilfosfatidilcolina, dilinoleoílfosfa-tidilcolina (DLL-PC), dipalmitoilfosfatidilcolina (DPPC), fosfatidilcolina de soja (Soja-PC ou PCS) e fosfatidilcolina de ovo (Ονο-PC ou PCo) . Na DPPC, um fosfolípido saturado, a substituição alifática saturada em Ri e R2 é CH3-(CH2) 14, R3 é CH3 e X é H. Na DLL-PC, um fosfolípido insaturado, Ri e R2 são CH3- (CH2) 4-CH=CH-CH2-CH=CH- (CH2) 7, R3 é CH3 e X é H. Na PC de ovo, que é uma mistura de fosfolípidos insaturados, Ri contém basicamente uma substituição alifática saturada (por exemplo, ácido palmítico ou esteárico), e R2 é primariamente uma substituição alifática insaturada (por exemplo, ácido oleico ou araquidónico) . A PC de soja, para além dos fosfolípidos saturados (ácido palmítico e ácido esteárico), é uma mistura de fosfolípidos insaturados, (ácido oleico, ácido linoleico e ácido linolénico] . Os fosfolípidos zwiteriónicos preferidos incluem, sem limitação, dipalmitoilfosfatidilcolina, fosfatidilcolina ou uma sua mistura.

Os AINEs adequados incluem, mas não lhes estando limitados, fármacos do ácido propiónico tal como Fenoprofeno cálcico (Nalfon .RTM.), Flurbiprofeno (Ansaid .RTM.), Suprofeno, Benoxaprofeno, Ibuprofeno (Motrin RTM. de prescrição) Ibuprofeno (200 mg. Nuprin de venda livre, Motrin 1B .RTM.), Cetoprofeno (Orduis, Oruvall .RTM.), Naproxeno (Naprosyn .RTM.), Naproxeno sódico (Aleve , Anaprox, Aflaxen .RTM.) Oxaprozina (Daypro .RTM.), ou afins; fármacos do ácido acético tais como Diclofenac sódico (Voltaren .RTM.) Diclofenac potássico (Cataflam .RTM.) Etodolac (Lodine .RTM.), Indometacina (Indocin .RTM.), Cetorolac de trometamina (Acular, Toradol .RTM. intramuscular), Cetorolac (Toradol .RTM. oral), ou afins; fármacos de cetona como Nabumetona (Relafen .RTM.), Sulindac (Clinoril .RTM.), Tolmetina sódica (Tolectin. RTM), ou afins; fármacos de Fenamato como Meclofenamato sódico (Meclomen .RTM.), ácido mefenâmico (Ponstel .RTM.), e afins; fármacos de oxicam como Piroxicam (Dolibid .RTM.), e afins; fármacos de ácido salicílico tais como Diflunisal (Feldene .RTM.), Aspirina, ou afins; fármacos ácidos de pirazolina tais como Oxifenbutazona (Tandearil .RTM.), Fenilbutazona (Butazolidin .RTM.), ou afins; acetaminofeno (Tylenol .RTM.), ou afins; inibidores da COX-2, 31 ΕΡ 1 343 529/ΡΤ tais como Celebrex, Vioxx, ou afins, ou suas misturas ou combinações.

Os agentes emulsionantes biocompatíveis adequados incluem, sem lhes estar limitados, qualquer agente emulsionante iónico ou não iónico ou tensioactivos aprovados para consumo humano ou animal ou para uso interno. Exemplos típicos incluem monoglicéridos acetilados, sais de alumínio de ácidos gordos, arabinogalactano, glicano de levedura de padeiro, carbonato de cálcio, sais de cálcio de ácidos gordos, goma de alfarrobeira (goma de alfarroba), goma curdlana, ésteres diacetiltartáricos de mono- e diglicéridos de gorduras ou óleos comestíveis, ou ácidos gordos formadores de gorduras comestíveis, dioctilsulfossuccinato sódico, fosfato dissódico (fosfato de sódio X-ref, mono-, di-, e tri-), mono e diglicéridos etoxilados, extracto de Eucheuma cottonii, extracto de Eucheuma spinosum, ácidos gordos, sais de (alumínio, cálcio, magnésio, potássio e sódio), amido alimentar esterificado com anidrido n-octenilsuccínico tratado com beta-amilase, furazolidona, furcelleran ou ágar da Dinamarca, sais de amónio, cálcio, potássio, ou sódio, goma Ghatti, extractos de gigartina, ésteres lacto-glicerílicos de ácidos gordos, oleato de hexitol, lecitina hidroxilada, hidroxipropilcelulose, hidroxipropilmetilcelulose, ésteres lácticos de ácidos gordos de glicerol e propilenoglicol, ésteres lácticos de ácidos gordos, lecitina, lecitina hidroxilada, metiletilcelulose, mono- e diglicéridos de gorduras ou óleos comestíveis ou ácidos formadores de gordura comestível, citrato de mono-isopropilo, derivados de fosfato monossódico de mono- e diglicéridos de gorduras ou óleos comestíveis, ou ácidos gordos formadores de gordura comestíveis, Myrj 45 (estearato de polioxietileno (8)), extracto de bílis de boi, pectinas (incluindo pectina modificada), dioleato de polietilenoglicol (400), ésteres de poliglicerol de ácidos gordos, mono- e di-oleatos de polioxietilenoglicol (400), Polisorbato 60 (monoestearato de polioxietileno (20) sorbitano ), Polisorbato 65 (triestearato de polioxietileno (20) sorbitano), Polisorbato 80 (mono-oleato de polioxietileno (20) sorbitano), sais de potássio de ácidos gordos, alginato de propilenoglicol (éster de propilenoglicol de ácido algínico), mono e di-ésteres de propilenoglicol de gorduras e ácidos gordos, óleo de canola totalmente 32 ΕΡ 1 343 529/ΡΤ hidrogenado e super-glicerinado, pirofosfato ácido de sódio, aluminofosfato de sódio, hipofosfito de sódio, laurilsulfato de sódio, metafosfato de sódio, metilsulfato de sódio, pectinato de sódio, sais de sódio de ácidos gordos, estearoíl-lactilato de sódio, derivados de sulfoacetato de sódio (mono-e di-glicéridos) , mono-oleato de sorbitano, monoestearato de sorbitano, monoglicéridos succinilados, Succistearin (hidrogenossuccinato de estearoilo e propilenoglicol) , isobutirato de acetato de sacarose (SAIB), ésteres de ácidos gordos da sacarose, oleato de butilo sulfatado, fosfato trissódico, goma xantana, ou afins ou suas misturas ou combinações.

Os lipidos neutros adequados incluem, sem lhes estar limitados, qualquer lipido neutro tal como triglicéridos. Para uma lista incompleta de lipidos neutros típicos, tais como os triglicéridos, faz-se referência especialmente às Patentes U.S. 4 950 656 e 5 043 329. Nas presentes composições podem utilizar-se tanto triglicéridos saturados como insaturados, e incluir triglicéridos tais como trioleína e trilinoleína (insaturados). No entanto, estes triglicéridos específicos estão aqui listados apenas por conveniência, e são meramente representativos de uma variedade de triglicéridos úteis, não se pretendendo ser abrangente.

Exemplos biocompatíveis poliglicolidas, poliuretanos, polidioxanonas, não limitativos de polímeros adequados e biodegradáveis, incluem polilactidas, policaprolactonas, polianidridos, poliamidas, poliésteramidas, poliortoésteres, poliacetais, policetais, policarbonatos, poliortocarbonatos, polifosfazenos, poli-hidroxibutiratos, poli-hidroxivaleratos, polialquileno-oxalatos, polialquileno-succinatos, poli(ácido málico), poli(aminoácidos) , poli(éter metilvinílico), poli(anidrido maleico), quitina, quitosano e copolímeros, terpolímeros, ou seus polímeros de polimonoméricos superiores, ou suas combinações ou misturas. Os polímeros biodegradáveis preferidos são todos degradados por hidrólise.

Tipicamente, os polímeros são polímeros susceptíveis de erosão superficial, tais como os polianidridos, ou polímeros susceptíveis de erosão em massa, tais como os poliortoésteres. 33 ΕΡ 1 343 529/ΡΤ

Os polímeros biocompatíveis e biodegradáveis preferidos são o poli(ácido L-láctico) (PILA), o poli(ácido DL-láctico) (PLA), o poli(ácido glicólico) (PGA), policaprolactonas, copolímeros, terpolímeros, seus polímeros polimonoméricos superiores, ou suas combinações ou misturas. Os copolímeros biodegradáveis preferidos são copolímeros de ácido láctico e de ácido glicólico por vezes referidos como poli(ácido DL-láctico-co-glicólico) (PLG). As razões do co-monómero (láctico:glicólico) do poli(ácido DL-láctico-co-glicólico) situam-se de preferência entre cerca de 100:0 e cerca de 50:50 de ácido láctico para ácido glicólico. Mais preferivelmente, as razões do co-monómero situam-se entre cerca de 85:15 e cerca de 50:50 de ácido láctico para ácido glicólico. Misturas de PLA com PLG, de preferência desde cerca de 85:15 até cerca de 50:50 de PLG para PLA, são também utilizadas na preparação de materiais poliméricos.

Os polímeros PLA, PILA, PGA, PLG e as suas combinações ou misturas estão entre os polímeros sintéticos aprovados para uso clínico humano. Actualmente, são utilizados como materiais de sutura cirúrgica e em dispositivos de libertação controlada, assim como em outras aplicações médicas e farmacêuticas. Estes polímeros são biocompatíveis e os seus produtos de degradação são compostos de baixo peso molecular, tais como o ácido láctico e o ácido glicólico, que entram nas vias metabólicas normais. Além disso, os copolímeros de poli(ácido láctico-co-glicólico) oferecem a vantagem de terem um espectro largo de velocidades de degradação que vai desde alguns dias até anos, simplesmente variando a razão de ácido láctico para ácido glicólico do copolímero.

Para melhorar a biodegradação dos polímeros utilizados em aplicações biológicas, as composições da presente invenção podem também incluir a adição de enzimas capazes de facilitar a biodegradação dos polímeros utilizados na composição. As enzimas ou reagentes similares preferidos são as proteases ou as hidrolases com capacidade para hidrolisar ésteres. Estas enzimas incluem, sem lhes estar limitadas, a proteinase K, a bromelaína, a pronase E, a celulase, a dextranase, a elastase, a plasmina-estreptoquinase, a tripsina, a quimotripsina, a papaína, a quimiopapaína, a colagenase, a subtilisina, a clostridiopeptidase A, a ficina, a carboxipeptidase A, a 34 ΕΡ 1 343 529/ΡΤ pectinase, a pectinesterase, uma oxidorredutase, uma oxidase ou afins. A inclusão de uma quantidade adequada de um destes agentes promotores de degradação pode ser utilizada para regular a duração de um implante.

Os agentes quimioterápicos e/ou radioterápicos adequados (nomes comerciais) incluem, sem limitação, platina complexada, ouro (III) complexado, complexos de paládio, alitretinoina (Panretin), alopurinol (Zyloprim), altretamina (Hexalen), amifostina (Ethyol), anastrozol (Arimidex), trióxido arsénico (Trisenox), bexaroteno (Targretin), bleomicina (Blenoxane), bussulfano intravenoso (Busulfex), bussulfano oral (Myleran), capecitabina (Xeloda), carboplatina (Paraplatin), implante de carmustina com Polifeprosan 20 (Gliadel Wafer), celecoxib (Celebrex), clorambucilo (Leukeran), cisplatina (Platinol), cladribina (Leustatin (2-CdA), ciclofosfamida (Cytoxan), citarabina lipossómica (DepoCyt), daunorrubicina lipossómica (DanuoXome), daunorrubicina daunomicina (Daunorubicin), daunorrubicina daunomina (Cerubidine), dexrazoxano (Zinecard), docetaxel (Taxotere), doxorrubicina (Injecção Adriamycin PFS), doxorrubicina lipossómica (Doxil), Solução B de Elliott (Elliotfs B Solution), epirrubicina (Ellence) , estramustina (Emcyt), fosfato de etoposido (Etopophos), etoposido (VP-16, Vepesid), exemestano (Aromasin), fludarabina (Fludara), fluorouracilo (5-FU, Adrucil), gencitabina (Gemzar), gemtuzumab ozogamicina (Mylotarg), acetato de goserelina (Zoladex Implant), hidroxiureia (Hydrea Capsules), idarrubicina (Idamycin), ifosfamida (IFEX), mesilato de imatinib (Gleevec), irinotecano (Camptosar), letrozol (Femara), leucovorina (Leucovorin), levamisol (Ergamisol), melfalano L-PAM (Alkeran), mesna (Mesnex), metotrexato (Methotrexate), metoxsaleno (Uvadex), mitoxantrona (Novantrone), paclitaxel (Paxene), paclitaxel (Taxol), pamidronato (Aredia), pegademase (Adagen (Pegademase Bovine)), pentostatina (Nipent), porfímero sódico (Photofrin), estreptozocina (Zanosar), talco (Sclerosol), tamoxifeno (Nolvadex) , temozolamida (Temodar) , teniposido VM-26 (Vumon) , topotecano (Hycamtin), toremifeno (Fareston), tretinoina ATRA (Vesanoid), valrubicina (Valstar), vinorelbina (Navelbine), ou suas misturas ou combinações. Naturalmente, a radioterapia pode também incluir os tradicionais tratamentos com radiação. 35 ΕΡ 1 343 529/ΡΤ

Embora a presente invenção diga respeito preferivelmente à utilização de óleos de lecitina não purificados, pode também utilizar-se qualquer óleo biocompatível que contenha fosfolipidos, incluindo, sem limitação, qualquer óleo para consumo humano contendo um fosfolípido.

Os óleos biocompatíveis adequados incluem, sem lhes estar limitados, qualquer óleo aprovado para consumo humano ou animal pela FDA, incluindo óleos naturais tais como óleos vegetais ou animais ou seus derivados, óleos sintéticos, e especialmente óleo natural rico em fosfolípidos tal como o óleo de lecitina de soja. Exemplos típicos destes óleos incluem óleos essenciais, óleos animais, óleos vegetais e óleos vegetais hidrogenados tais como óleo de amendoim, óleo de canola, óleo de abacate, óleo de cártamo, azeite, óleo de milho, óleo de soja, óleo de gergelim, vitamina A, vitamina D, vitamina E, óleos de peixe, ou afins. A formulação ou composições da presente invenção podem também incluir outras substâncias químicas, tais como antioxidantes (por exemplo, as vitaminas A, C, D, E, etc.), vestígios de metais e/ou de catiões polivalentes (alumínio, ouro, cobre, zinco, cálcio, etc.), agentes tensioactivos e/ou solventes (por exemplo, propilenoglicol/PPG, sulfóxido de dimetilo/DMSO, triglicéridos de cadeia média/MCT, etc.), corantes não tóxicos e intensificadores de sabor podem ser adicionados à formulação durante a sua preparação para melhorar a estabilidade, fluidez/espalhamento, permeabilidade, eficácia e aceitação pelo consumidor.

As formulações da presente invenção que incluem um fosfolípido, preferivelmente uma PC e um ΑΙΝΕ, podem ser usadas para encher cápsulas de gelatina mole ou de gelatina dura ou cápsulas vegetais para administração oral, ou podem ser usadas como tal, na forma de uma solução, uma pasta, um semi-sólido, uma dispersão, uma suspensão, uma suspensão coloidal ou sua mistura para ser aplicada topicamente na pele ou no tecido inflamado, ulcerado e/ou irritado.

Uma concretização preferida desta formulação é uma composição de PC-AINE à base de óleo de lecitina testada quanto à sua toxicidade gastrointestinal. As três formulações 36 ΕΡ 1 343 529/ΡΤ testadas incluem óleos de lecitina combinados com aspirina, indometacina e ibuprofeno. Neste estudo, combinou-se aspirina com Phosal SB 35, um óleo de lecitina de soja contendo 35% de PC, e administrou-se intragastricamente a ratos em jejum, a uma dose de aspirina de 18 mg/kg, onde a razão em peso de ΑΙΝΕ:óleo de lecitina foi variada sistematicamente de 1:0,5 para 1:1, para 1:2. Além disso, outros grupos de ratos receberam uma dose equivalente de aspirina sem óleo de lecitina, ou um volume equivalente de solução salina. Quarenta e cinco minutos mais tarde, todos os animais foram provocados intragastricamente com 1 ml de HC1 0,6 N, e 15 minutos mais tarde, os animais foram sacrificados, os estômagos foram abertos e as lesões gástricas foram contadas de acordo com um método estabelecido.50-52

Conforme se mostra na Figura 1, os resultados mostram que, em contraste com o elevado número de lesões gástricas observadas em ratos ministrados apenas com aspirina, os ratos tratados com todas as três formulações de aspirina:lecitina tiveram significativamente menos lesões gástricas. A fim de avaliar a toxicidade gástrica dos AINEs não aspirina, ou seja, o ibuprofeno e a indometacina, utilizou-se outro modelo de úlcera em que o fim consistia de uma hemorragia gastrointestinal tal como anteriormente descrito.52 Neste modelo, os AINEs foram administrados intragastricamente a ratos em jejum, isoladamente ou em combinação com o óleo de lecitina Phosal 35 SB a uma razão ΑΙΝΕ: lecitina de 1:1 em peso. Os ratos controlo receberam um volume equivalente de solução salina. Para tornar os ratos mais sensíveis aos efeitos lesivos gastrointestinais do ΑΙΝΕ, todos os ratos foram também injectados com inibidor da óxido nitrico-sintase (NOS) , L-NAME (20 mg / kg) , três vezes ao longo das 18-20 horas do período de estudo, após o qual os animais foram sacrificados, os 20 cm distais do tracto gastrointestinal foram lavados com 2 ml de solução salina, e a solução de lavagem foi recolhida para análise de hemoglobina - como indicador de hemorragia gastrointestinal. Os resultados destes testes estão apresentados nas Figuras 2 e 3 adiante.

Referindo agora a Figura 2, os resultados mostram que a indometacina a uma dose de 10 mg/kg induz um aumento severo no 37 ΕΡ 1 343 529/ΡΤ sangramento gastrointestinal, ο qual se encontra reduzido de forma acentuada e significativa nos ratos ministrados intragastricamente com uma dose equivalente de indometacina combinada com Phosal 35 SB, a uma razão ΑΙΝΕ: lecitina de 1:1 em peso.

Referindo agora a Figura 3, os resultados mostram que o ibuprofeno (que é considerado um dos menos tóxicos entre os AINEs convencionais em sistemas de modelo de roedor), a uma dose de 100 mg/kg induz um aumento modesto no sangramento gastrointestinal, o qual está significativamente reduzido nos ratos ministrados intragastricamente com uma dose equivalente de ibuprofeno combinada com Phosal 35 SB, a uma razão ΑΙΝΕ:lecitina de 1:1 em peso.

Um método descrito anteriormente foi então usado para avaliar a actividade anti-inflamatória/analgésica das formulações AINE-lecitina (em comparação com os AINEs isoladamente). Isto foi conseguido injectando 0,1 ml de Adjuvante Completo de Freund (CFA) no membro posterior esquerdo de ratos para induzir uma resposta inflamatória aguda. Quatro dias mais tarde, os ratos, jejuados durante a noite, foram ministrados intragastricamente com AINEs (quer aspirina, indometacina ou ibuprofeno) isoladamente ou em combinação com Phosal 35 SB a uma razão ΑΙΝΕ: lecitina de 1:1 (excepto no caso da aspirina onde outras razões foram também avaliadas). Duas horas mais tarde, mediu-se a sensibilidade do rato à dor por pressão utilizando a técnica Randall-Sellito (55). Isto foi conseguido aumentando incrementalmente a pressão aplicada quer à pata inflamada, quer à pata contralateral não inflamada, até o animal apresentar o primeiro sinal de sensação de dor (por vocalização ou extensão dos dedos do membro posterior testado), que foi anotado como o limiar de dor do rato. Desta forma, um baixo limiar de dor indica que a pata inflamada é muito sensível à pressão, enquanto que um limiar de dor aumentado representa baixa sensibilidade à dor ou analgesia. Os resultados estão apresentados nas Figuras 4-6.

Referindo agora a Figura 4, os resultados mostram que a aspirina, a uma dose de 10 mg/kg, exibiu uma capacidade modesta para aumentar o limiar de dor da pata afectada dos 38 ΕΡ 1 343 529/ΡΤ ratos, ao passo que a actividade analgésica de uma dose equivalente de aspirina, quando administrada em combinação com lecitina, melhorou significativamente a todas as razões em peso testadas.

Referindo agora a Figura 5, os resultados mostram que o ibuprofeno, a uma dose de 25 mg/kg, possui uma capacidade modesta embora não significativa para aumentar o limiar de dor à pressão da pata inflamada dos ratos, ao passo que a actividade analgésica de uma dose equivalente de ibuprofeno, quando administrada em combinação com o óleo de lecitina a um peso de 1:1, foi significativamente melhorada.

Referindo agora a Figura 6 que diz respeito aos testes com indometacina (INDO) a uma dose de 4 mg/kg. Os resultados mostram que a composição do tipo pasta melhorou a capacidade para suportar dor comparado com a INDO inalterada, e melhorou muito mais a capacidade para suportar dor comparado com o controlo de solução salina. AINEs e Lesões e Trauma do Sistema Nervoso Central e Periférico 0 processo de inflamação é um elemento fundamental na fisiopatologia progressiva associada tanto a lesões agudas como traumáticas do SNC, tais como lesão medular (LM) [AI ] , assim como doenças neurodegenerativas tardias, tal como a Doença de Alzheimer (DA) [A2] . Pensa-se que o processo de inflamação provoca, quer directamente ou como contributo, a deterioração progressiva da função motora e o desenvolvimento de dor crónica que são normalmente observados em lesões medulares, e a perda de memória e de função cognitiva observada na DA. Recentemente, o uso de anti-inflamatórios num modelo de roedor com LM traumático [A3] mostrou ser eficaz a reduzir a perda tecidular e os défices funcionais.

Mais notável ainda são os vários estudos epidemiológicos recentes que sugerem que o consumo crónico de anti-inf lamatórios não esteróides (AINEs), pode reduzir até 50% o risco de DA [A4]. Sendo possível utilizar estratégias terapêuticas com AINEs tanto agudas como crónicas dependendo da natureza da condição inflamatória, é fundamental que os 39 ΕΡ 1 343 529/ΡΤ AINEs sejam eficazes em doses baixas e que sejam bem tolerados com efeitos colaterais mínimos. Está bem estabelecido que -40% da nossa população desenvolve sintomas gastrointestinais (GI) em resposta ao consumo crónico de AINEs, que podem variar desde dispepsia até à indução de episódios de úlcera péptica e de hemorragia potencialmente fatais [A5].

Em 1995, o laboratório do PI revelou que, para além de inibir a actividade da cicloxigenase (COX), os AINEs têm também a capacidade para atenuar a barreira hidrófoba da superfície da parte superior do trato gastrointestinal, muito provavelmente através da associação química com um revestimento de fosfolípidos da superfície [A6]. Além disso, foi demonstrado tanto em animais de laboratório como em seres humanos, que o efeito prejudicial dos AINEs poderia ser evitado se os fármacos fossem quimicamente associados com o fosfolípido mais proeminente, a fosfatidilcolina (PC), estando esta tanto na forma de uma espécie sintética como de um extracto purificado (por exemplo, lecitina de soja) [A6, A7] . Curiosamente, foi também demonstrado que, para além da sua baixa toxicidade gastrointestinal, a associação PC-AINE possui também uma actividade terapêutica reforçada para inibir febre, inflamação e dor, talvez atribuível à sua maior permeabilidade membranar e à sua actividade inibitória da COX [A6, A8, A9].

Assim, a composição desta invenção atenua a inflamação neural e diminui a fisiopatologia associada a diversas condições neurológicas incluindo LM e DA. PC-Ibuprofeno Administrado por Via Oral Reduz o Desenvolvimento de Hiperalgesia Devida a Inflamação Associada à Ligação de Nervos Periféricos

Foi referido que a colocação de quatro ligaduras soltas de suturas crómicas de intestino em redor do nervo ciático induz grave inflamação periférica neural do nervo afectado e dor neuropática 2 a 4 dias pós-cirurgia, como indicado pela resposta hiper-álgica à pressão ou ao calor aplicados no membro posterior ipsilateral [ΑΙΟ,ΑΙΙ]. O efeito do tratamento com PC-AINE da inflamação periférica neural e a redução da resposta hiper-álgica utilizando esta técnica de indução em ratos. Este modelo de roedor foi usado para induzir inflamação 40 ΕΡ 1 343 529/ΡΤ neural quer do nervo ciático direito quer esquerdo utilizando. Operações simuladas foram realizadas no lado contralateral. Dois dias após a cirurgia, os ratos foram distribuídos aleatoriamente pelos seguintes grupos experimentais (12 ratos/grupo); controlo de solução salina; ibuprofeno (15 mg/kg); e PC-ibuprofeno (dose equivalente do ΑΙΝΕ). Os ratos foram ministrados com a formulação experimental de ΑΙΝΕ b.i.d. durante os dois dias seguintes e vários parâmetros comportamentais de sensação de dor foram avaliados em ambos os membros posteriores, antes e dois dias após o período de dosagem. As análises comportamentais usadas para avaliar a eficácia foram: comportamento acautelado do membro posterior afectado; períodos de latência de retirada da pata ao calor; resposta de retirada da pata ao estímulo produzido pelos filamentos de von Frey; e resposta de dor à aplicação de pressão no membro posterior [A8] . Durante a eutanásia, os nervos ligados e os nervos controlo foram dissecados para exames macroscópicos e histológicos assim como para parâmetros de inflamação. Os resultados destes estudos indicam que a actividade analgésica de PC-ibuprofeno é significativamente maior do que a do ibuprofeno isoladamente num modelo de inflamação do membro posterior (induzida com adjuvante de Freund), e que PC-ibuprofeno foi também mais eficaz a aliviar a sensibilidade à dor causada pela ligação do nervo ciático, tal como estabelecido ao medir a resposta de retirada da pata tanto aos estímulos produzidos pelos filamentos de von Frey como ao calor. PC-Ibuprofeno Administrado por Via Oral Reduz a Perda de Tecido e de Função Locomotora, e Atenua o Desenvolvimento da Síndrome de Dor Crónica num Modelo de Rato com LM Contusa

Recentemente, mostrou-se que a administração de uma única dose de um fármaco anti-inf lamatório reduz o grau de lesão medular em ratos adultos [A3] . Estes ratos tratados com ΑΙΝΕ exibiram maior actividade locomotora e sintomas diminuídos de hiperalgesia e de alodínia mecânica (dor induzida pelo toque), características de dor neuropática, comparado com os ratos não tratados. O desenvolvimento de dor crónica e neuropática é uma ocorrência muito frequente após lesão da medula espinal e pode tornar-se um fardo permanente para o paciente. É extremamente necessário desenvolver uma terapia eficaz e bastante tolerável 41 ΕΡ 1 343 529/ΡΤ para prevenir ou atenuar o desenvolvimento de dor crónica central. A administração por via oral de PC-AINE reduz o dano de tecidos, melhora o resultado locomotor, e evita a sindrome de dor crónica associada à LM.

PC-Ibuprofeno é Mais Eficaz do que Ibuprofeno na Prevenção do Desenvolvimento de Fisiopatologia do tipo Doença de Alzheimer num Modelo de Ratinho Transgénico com DA

Recente evidência clinica sugere que os AINEs podem reduzir significativamente o risco de aparecimento da DA. Um grande entrave à concepção de estratégias terapêuticas para a DA tem sido a falta de modelos animais adequados. 0 recém-criado ratinho Tg2576 que super-expressa β-amilóide humano proporciona um modelo de roedor conveniente que demonstra a memória em função da idade, défices cognitivos e histopatológicos, incluindo a formação de placas amilóides, a activação da microglia, a reactividade astrocitária e neurites distróficas [A19-A21]. Recentemente, mostrou-se que o Ibuprofeno reduz o número de placas amilóides, de neurites distróficas e de microglia activada no modelo de ratinho Tg2576 com DA [A21].

Optimização da Duração em Armazenagem de PC-AINE 0 sucesso de comercialização de um PC-AINE requer uma formulação que permaneça estável durante longos períodos de tempo à temperatura ambiente. Embora isto não seja um problema para a maioria dos AINEs, tal como o ibuprofeno, é para a aspirina que rapidamente sofre hidrólise para ácido salicílico se for exposta à água. As formulações da presente invenção são à base de um ΑΙΝΕ dissolvido e/ou disperso num transportador não aquoso, tal como óleo de lecitina ou qualquer outro óleo biocompatível contendo um fosfolípido. Uma vez que estes ambientes são hidrófobos, podem contribuir para aumentar a estabilidade da aspirina em formulações à base de aspirina.

Resultados Experimentais de Lesões e Trauma do Sistema Nervoso Central e Periférico

Estes testes demonstram que PC-ibuprofeno é um bom tratamento para lesões medulares (LM) . Os resultados 42 ΕΡ 1 343 529/ΡΤ evidenciam os efeitos do tratamento de ratos com 25 mg de AINE/kg de peso corporal, duas vezes por dia durante 6 semanas após lesão medular (LM), comparando PC-ibuprofeno, ibuprofeno e solução salina.

Referindo as figuras 7A e 7B, os dados representados graficamente mostram que a LM tornou os ratos hiper-álgicos tal como evidenciado por uma diminuição no limiar de dor à pressão em ratos com LM tratados com solução salina, utilizando a técnica de Randall Sellito. Em contrapartida, não se observou hiperalgesia devida a LM em ratos com LM tratados com ibuprofeno ou PC-ibuprofeno, com PC-ibuprofeno parecendo superior ao ibuprofeno inalterado. Estes resultados são apresentados de duas formas. Na Figura 7A, os resultados foram representados graficamente, directamente tal como registados (sem normalização), ao passo que na Figura 7B, os resultados para cada animal são comparados com os seus próprios valores basais pré-operatórios. Esta apresentação gráfica dos resultados é talvez mais convincente do que os efeitos benéficos da administração do ΑΙΝΕ após a LM.

Referindo agora a Figura 8, a actividade analgésica superior do PC-ibuprofeno em ratos com LM é também demonstrada num segundo teste comportamental em que se determina a percentagem de respostas do membro posterior a estímulos de filamentos (von Frey) com diâmetros crescentes (que é equiparado a força). Repare-se que neste caso, um número menor é indicativo de analgesia, enquanto que no teste de Randall Sellito, valores mais elevados do limiar de dor à pressão são indicativos de analgesia.

Referindo agora a Figura 9, pode ver-se que ratos com LM tratados com ibuprofeno não ganharam peso ao longo das 6 semanas do período de estudo, em contraste com ratos tratados com solução salina ou PC-ibuprofeno. Esta indicação de que ratos com LM podem ter uma reacção ligeiramente tóxica ao ibuprofeno isolado é também sugerida pelas ligeiras subidas no azoto ureico do sangue (evidência de toxicidade renal) e na desidrogenase láctica (DLH, prova de toxicidade hepática).

Referindo agora a Figura 10, pode ver-se que a recuperação da função motora após LM, conforme avaliada pelo 43 ΕΡ 1 343 529/ΡΤ teste de ΒΒΒ que foi estabelecido, é atenuada em ratos tratados com ibuprofeno inalterado, ao passo que não houve qualquer diferença neste parâmetro de recuperação da função motora entre os grupos de solução salina e de PC-ibuprofeno. PC-AINE como Formulação Eficaz para o Tratamento de Distúrbios Trombóticos

As formulações da presente invenção que compreendem um fosfolipido, tal como fosfatidilcolina (PC), e um ΑΙΝΕ, especialmente aspirina, num óleo biocompatível, são formulações eficazes para o tratamento de distúrbios trombóticos, incluindo trombose, acidente vascular cerebral e enfarte do miocárdio. Além da sua segurança gastrointestinal melhorada, PC-aspirina é um inibidor mais potente da agregação plaquetária e da trombogénese do que a aspirina regular. A aspirina (ASA) associa-se quimicamente a fosfolípidos zwiteriónicos formando um complexo de associação que possui a mesma ou melhor actividade do que a aspirina natural na redução de febre, dor, e inflamação mas sem os graves efeitos colaterais gastrointestinais de ulceração e hemorragia da aspirina. É um facto intrigante de que a aspirina complexada a fosfolípidos é mais potente do que a aspirina isolada na prevenção da formação de trombos num modelo in vivo de trombose arterial. Desta forma, as formulações de PC-aspirina da presente invenção inibem a agregação plaquetária e a trombogénese, reduzindo os sintomas dos distúrbios trombóticos.

Doenças arteriais obstrutivas e trombóticas, tais como enfarte do miocárdio (IM) e acidentes vasculares cerebrais, são a principal causa de morte nos EUA e nas sociedades ocidentais. Segundo a American Heart Association, mais de um milhão de americanos irão ter um enfarte agudo do miocárdio no próximo ano. Os fármacos que efectivamente reduzem a incidência de trombose arterial são de grande importância clínica. Como a trombose é um processo fundamental na iniciação e propagação da doença arterial obstrutiva, existe uma forte razão para se desenvolverem novos fármacos antitrombóticos específicos. A trombose arterial é um processo complexo que envolve uma série de interacções celulares e bioquímicas entre as células sanguíneas, a parede vascular e 44 ΕΡ 1 343 529/ΡΤ proteínas plasmáticas (Bl). As plaquetas sanguíneas desempenham um papel central nestas interacções (B2). Aderem à parede do vaso danificado, sofrem activação celular, secreção e agregação. As plaquetas activadas aceleram a coagulação do sangue, e as suas moléculas segregadas promovem a proliferação de células no músculo liso vascular. Considerando o papel fundamental que as plaquetas sanguíneas desempenham na trombose arterial, grandes esforços têm sido feitos ao longo dos anos para desenvolver medicamentos antitrombóticos baseados na inibição da função plaquetária (B3). No entanto, poucos compostos foram clinicamente úteis. Na realidade, a aspirina continua a ser o fármaco principal e o protótipo de agentes antiplaquetários usados clinicamente devido à sua eficácia e considerações de custos. A aspirina é eficaz na prevenção primária e secundária de enfarte do miocárdio e acidente vascular cerebral (B4-B7). No entanto, persistem incertezas acerca da óptima dose terapêutica da aspirina, e mais de 40% dos doentes são incapazes de usar aspirina, ou mesmo aspirina revestida entericamente, devido à sua toxicidade gastrointestinal. De especial relevância é a recente divulgação de que até mesmo doses muito baixas de aspirina (10-80 mg) induzem lesões gástricas erosivas e sangramento num número significativo de seres humanos. Isto pode explicar porque é que actualmente o maior grupo de admissões hospitalares por hemorragia gastrointestinal são indivíduos que tomam cronicamente uma dose baixa de aspirina para redução do risco cardiovascular (B8). Há muito que é sabido que o principal mecanismo de acção da aspirina e de outros anti-inflamatórios não esteróides (AINEs) é a sua capacidade para inibir a síntese da prostaglandina. Foram descritas duas isoenzimas da cicloxigenase, a COX-1 e COX-2, e os AINEs bloqueiam as actividades de ambas as isoformas da COX (B9-B12). A aspirina exerce o seu efeito antiplaquetário bloqueando a produção de tromboxano A2 (TXA2) através da inibição da actividade da COX-1 em plaquetas. No entanto, a aspirina também inibe a mesma enzima em células endoteliais vasculares e, consequentemente, impede a produção de prostaciclina (PGI2) (B13, B14). Esta inibição da COX endotelial, que pode contribuir para a progressão de trombose ou de aterosclerose, é o chamado "dilema aspirina", e é uma desvantagem para a sua 45 ΕΡ 1 343 529/ΡΤ utilidade clinica. Este dilema tem levado ao uso de doses baixas de aspirina, sugerindo que a inibição da produção de TXA2, ao mesmo tempo que poupa a PGI2, pode oferecer as melhores condições antitrombóticas para reduzir a agregação plaquetária, mantendo simultaneamente a vasodilatação. Portanto, uma razão PGI2 para TXA2 favorável pode ter profundas implicações no tratamento e prevenção de angina instável, enfarte do miocárdio, ataques isquémicos transitórios, e acidentes vasculares cerebrais. Com uma posologia, formulação, e taxa de entrega adequadas, a aspirina pode possivelmente prevenir a produção de TXA2 pelas plaquetas com uma interferência mínima na produção de PGI2 vascular (B15-B17).

Utilização de AINEs no Tratamento e/ou Prevenção de Trombose

Os AINEs, incluindo a aspirina, são os fármacos mais consumidos entre a nossa população e o seu consumo tem aumentado exponencialmente na última década devido à grande eficácia desta família de fármacos para tratar febre, dor e inflamação (B 18). Evidência recente de que os indivíduos que tomam aspirina cronicamente têm uma incidência menor do que a população em geral de desenvolvimento de doenças cardiovasculares (angina, enfarte do miocárdio, tromboses e acidente vascular cerebral), levou a um número cada vez maior de pessoas auto-medicadas com este fármaco, representando 35-40% das vendas totais anuais de aspirina (B 19). Consequentemente, estima-se que cerca de 1% da nossa população toma uma aspirina diariamente. Em vista disso, a FDA aprovou o uso de aspirina para reduzir o risco de acidente vascular cerebral, angina e ataque cardíaco. No entanto, persistem incertezas sobre a dose terapêutica óptima da aspirina. Um aspecto preocupante relativamente ao aumento exponencial do consumo de AINEs, que se espera manter à medida que a idade média de nossa população aumenta, é de que esta família de compostos induz sérios efeitos colaterais numa percentagem significativa dos seus consumidores, com o mais prevalecente sendo hemorragia e ulceração gastrointestinais (B20). De especial relevância é a recente divulgação de que até mesmo doses muito baixas de aspirina (10-75 mg) induzem significativas lesões gástricas erosivas e sangramento em seres humanos (B8). 46 ΕΡ 1 343 529/ΡΤ A dosagem de aspirina pode ser reduzida consideravelmente após a associação desta com um fosfolipido zwiteriónico tal como uma PC, resultando numa acentuada melhoria na razão beneficio:risco do fármaco. Como a aspirina complexada a fosfolipido inibe selectivamente a produção de TXA2 pelas plaquetas em relação à PGI2 vascular, é possível que estes diferentes efeitos nas actividades das plaquetas e da COX endotelial do complexo fosfolípido/aspirina relativamente à acção da aspirina não complexada sejam importantes para o reforço da sua actividade antitrombótica. Esta observação é ainda apoiada pelo facto de que, num modelo in vivo de trombose arterial, doses baixas de aspirina complexada a fosfolipido impediram a formação de trombos e a obstrução vascular durante toda a duração do teste, ao passo que a aspirina isoladamente a esta dose subliminar não evitou a formação de trombos e os vasos ficaram obstruídos no espaço de uma hora. Deve ser também ressaltado que um benefício adicional do complexo PC-aspirina, é que este produz significativamente menos lesões na mucosa gástrica do que a aspirina regular e, portanto, o desenvolvimento do complexo PC-aspirina como eficaz agente antitrombótico sem efeitos colaterais gastrointestinais, terá vastas aplicações clínicas com custos económicos.

Resultados do Investigador Principal:

Em 1995, Lichtenberger e os seus associados (B21) relataram que em ratos, as acções lesivas agudas gastrointestinais da aspirina e de uma série de outros AINEs (incluindo diclofenac, indometacina e naproxeno) administrados por via oral poderiam ser consideravelmente reduzidas se o fármaco fosse pré-associado com dipalmitoílfosfatidilcolina (DPPC), uma PC sintética, ou um extracto purificado de lecitina de soja. Recentemente, o inventor divulgou (B22) os resultados de um estudo clínico duplamente cego e cruzado, em que dezasseis voluntários saudáveis receberam aspirina ou aspirina complexada a PC (650 mg t.i.d.) por via oral ao longo de um período de estudo de 4 dias, e os danos à mucosa foram avaliados por vídeo-endoscopia. Conforme se mostra na Figura 11, o complexo PC-aspirina reduziu significativamente o número de erosões gástricas em 70% em indivíduos susceptíveis, em comparação com uma dose equivalente de aspirina inalterada. 47 ΕΡ 1 343 529/ΡΤ

Esta redução na toxicidade gástrica não correspondeu a uma alteração na actividade inibitória da COX do fármaco, já que tanto a aspirina como PC-aspirina demonstraram uma capacidade equivalente para inibir a actividade da COX no antro, em mais de 85% como se pode ver na Figura 12. 0 laboratório do inventor também revelou (B23) que, em ratos, a actividade terapêutica da aspirina na inibição de febre, inflamação e dor é consistentemente reforçada quando o ΑΙΝΕ é administrado em associação quimica com uma PC, e a sua potência terapêutica aumenta 5-10 vezes em relação ao ΑΙΝΕ inalterado. Estudos adicionais utilizando modelos de roedor com artrite, também produziram provas a confirmar que a potência de um ΑΙΝΕ para inibir inflamação e dor das articulações é aumentada quando o fármaco é administrado intragastricamente em associação quimica com uma PC.

Estudos ex vivo em animais sobre os efeitos do complexo fosfolipido-aspirina (contendo concentrações equimolares dos dois agentes), nomeadamente a capacidade para produzir TXA2 e PGI2 nas plaquetas e no tecido vascular, respectivamente, foram conduzidos. Os ratos receberam intragastricamente quer aspirina inalterada, quer aspirina associada a DPPC (20 mg/kg dose), e após 30 minutos, colheu-se sangue, preparou-se plasma rico em plaquetas e induziu-se agregação com ácido araquidónico. Foi observada uma redução na produção de TXB2 (um metabolito estável do TXA2) nas plaquetas dos ratos tratados individualmente com aspirina inalterada ou com DPPC-aspirina, relativamente ao controlo de solução salina. O complexo PC-aspirina suprimiu ainda mais a produção de TXB2 como se pode ver na Figura 13A.

Esta abordagem ex vivo foi então usada para medir a PGI2 vascular (endotelial). Aorta abdominal que tinha sido excisada uma hora após a administração do fármaco, foi avaliada quanto à sua capacidade para produzir 6-ceto-PGF (um metabolito estável da PGI2) por incubação com ácido araquidónico (AA, 25 mm) . Conforme se mostra na Figura 13B, a aspirina inibiu significativamente a produção de 6-ceto-PGF, ao passo que a DPPC isolada e a DPPC complexada com ASA não tiveram qualquer efeito relativamente ao controlo. Por conseguinte, é possível inibir selectivamente a cicloxigenase plaquetária e conservar 48 ΕΡ 1 343 529/ΡΤ a biossíntese da prostaciclina vascular através da administração de PC-aspirina. 0 efeito antitrombótico da aspirina com ou sem PC foi de seguida avaliado num modelo in vivo de trombogénese arterial. De acordo com o protocolo (B24), a artéria carótida esquerda de um coelho anestesiado foi submetida a corrente anódica até o fluxo sanguíneo médio da carótida aumentar 50% acima dos valores controlo, o que corresponde a 50% de obstrução dos vasos pelos trombos formados. Nesta altura, a corrente foi interrompida e os fármacos experimentais foram administrados intravenosamente, sendo o fluxo sanguíneo monitorizado nas seguintes 2-3 horas. Na Figura 14A, pode ver-se que o fluxo sanguíneo da artéria carótida desceu para zero (indicativo de obstrução completa do vaso pelos trombos) em menos de 60 min nos coelhos controlo tratados quer com solução salina quer com fosfolípido isoladamente (tempo médio até ao fechamento = 40 ± 17) . Em contraste, os coelhos ministrados com aspirina inalterada, num intervalo de dosagem de 5-20 mg/kg, não tiveram qualquer obstrução do vaso durante as 2-3 h de duração do teste (resultados não apresentados). Curiosamente, quando a dose de aspirina foi reduzida para 2,5 mg/kg, observou-se que a aspirina complexada com fosfolípido era ainda eficaz a prevenir a formação de trombos (> 180 min após a administração do complexo), ao passo que a aspirina isoladamente (a esta dose subliminar) não conseguiu impedir a formação de trombos e o vaso ficou obstruído no espaço de 61±15 minutos (n = 4) como se mostra na Figura 14A. Além disso, o peso dos trombos formados nos coelhos ministrados com o complexo aspirina-fosfolípido a uma dose de 2,5 mg/kg era significativamente menor do que naqueles tratados quer com aspirina natural, com solução salina ou com fosfolípido isoladamente como se pode ver na Figura 14B.

As concentrações de 6-ceto-PGFia (um metabolito da PGI2) e de TXA2 nas artérias carótidas afectadas foram também determinadas. Nos coelhos controlo em solução salina, a razão de PGI2 para TXA2 nas artérias afectadas - onde se formaram os trombos - era significativamente menor (devido à uma produção aumentada de TXB2) do que nas artérias carótidas não afectadas (normais)- onde não se formaram trombos. Esta razão de PGI para TXA2 melhorou ligeiramente quando os coelhos foram 49 ΕΡ 1 343 529/ΡΤ tratados com aspirina (2,5 mg/kg) ou com fosfolípido isoladamente, mas não o suficiente para bloquear a formação de trombos. Em contrapartida, a razão PGI2/TXA2 nos coelhos que receberam a mesma dose de PC-aspirina, melhorou consideravelmente e não era significativamente diferente da razão determinada nas artérias normais (não expostas a corrente anódica) dos coelhos tratados com solução salina como se mostra na Figura 14C.

Formulações de PC-Acetaminofeno

Os resultados apresentados graficamente na Figura 15 indicam que uma razão de 1:2 de acetaminofeno (Tylenol):P35 SB protege os ratos contra lesões hepáticas tal como indicado pelas subidas na enzima aspartato-transaminase (AST) do fígado, 24 horas após ratos Sprague Dawley em jejum terem sido provocados oralmente quer com Tylenol isoladamente, quer com as combinações anteriores de Tylenol:P35 SB. Através de vários testes estatísticos, os resultados mostram que os níveis de AST parecem estar significativamente elevados nos ratos tratados com Tylenol em relação aos valores controlo de solução salina, mas não nos ratos administrados com a combinação Tylenol:P35 SB a uma razão de 1:2 em peso.

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Lisboa, 2009-02-19

Claims

ΕΡ 1 343 529/ΡΤ 1/3 REIVINDICAÇÕES 1. Composição não aquosa que compreende: uma quantidade terapeuticamente eficaz de um fármaco anti-inflamatório não esteróide (ΑΙΝΕ), misturado na forma de pó directamente num óleo transportador biocompatível contendo um fosfolipido, em que o fosfolipido está presente numa quantidade suficiente para prevenir, reduzir, e/ou tratar efeitos patogénicos incluindo ulceração gastrointestinal (GI), sangramento GI, danos hepáticos, danos renais e/ou efeitos colaterais cardiovasculares adversos, e em que a quantidade terapeuticamente eficaz do ΑΙΝΕ é suficiente para prevenir, reduzir, tratar e/ou melhorar inflamação de tecidos, dor, febre, doenças cardiovasculares, cancros do ovário, cancros do cólon, acidentes vasculares cerebrais, traumatismo cranioencefálico, lesão medular e os seus sintomas, e/ou a doença de Alzheimer e os seus sintomas.
2. Composição de acordo com a reivindicação 1, em que a concentração de fosfolipido no transportador se situa entre 10 e 40% em peso.
3. Composição de acordo com a reivindicação 2, em que a concentração de fosfolipido se situa entre 10 e 30% em peso.
4. Composição de acordo com a reivindicação 2, em que a concentração de fosfolipido se situa entre 10 e 20% em peso.
5. Composição de acordo com qualquer uma das reivindicações precedentes, em que a razão em peso do ΑΙΝΕ para o transportador se situa entre 10:1 e 1:10.
6. Composição de acordo com a reivindicação 5, em que a razão em peso se situa entre 2:1 e 1:1.
7. Composição de acordo com qualquer uma das reivindicações precedentes, em que ο ΑΙΝΕ é seleccionado do grupo que consiste em aspirina, salicilato, naproxeno, diclofenac, indometacina, sulindac, ibuprofeno, cetoprofeno, oxaprozeno, cetorolac, nabumetona, ácido meclofenâmico, ΕΡ 1 343 529/ΡΤ 2/3 piroxicam, diflunisal, oxifenbutazona, fenilbutazona, celecoxib, rofecoxib, inibidores da C0X2, acetaminofeno, ou suas misturas e combinações.
8. Composição de acordo com qualquer uma das reivindicações precedentes, em que a composição reforça a actividade e/ou eficiência terapêuticas do ΑΙΝΕ para prevenir, reduzir, tratar e/ou melhorar inflamação, dor, febre, doenças cardiovasculares, cancros do ovário, cancros do cólon, acidentes vasculares cerebrais, traumatismo cranioencefálico, lesão medular e/ou a doença de Alzheimer e os seus sintomas.
9. Composição de acordo com qualquer uma das reivindicações precedentes, em que o óleo biocompativel é seleccionado do grupo que consiste em óleos de lecitina, óleos essenciais, óleos vegetais, óleos vegetais hidrogenados, óleos animais, e suas misturas ou combinações.
10. Composição de acordo com qualquer uma das reivindicações precedentes, em que o fosfolípido reduz a toxicidade GI do ΑΙΝΕ.
11. Composição de acordo com qualquer uma das reivindicações precedentes, em que a composição reforça a actividade e/ou potência terapêuticas do ΑΙΝΕ para tratar/prevenir inflamação, dor, febre, doenças cardiovasculares, cancro do ovário, cancro do cólon, acidentes vasculares cerebrais, traumatismo cranioencefálico, lesão medular e/ou a doença de Alzheimer.
12. Composição como reivindicada em qualquer uma das reivindicações precedentes, em que a composição é uma solução para lavar a boca ou bochechar para tratamento oral de ulceração e/ou inflamação da boca devido a mucosite, em que a boca inclui a cavidade oral, gengivas e dentes.
13. Composição de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 11, em que a composição consiste em gotas ou solução de lavagem oftálmicas para o tratamento de inflamação dos olhos devido a uveite. ΕΡ 1 343 529/ΡΤ 3/3
14. Composição de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 11, em que a composição é bebível para tratamento da boca, esófago e/ou tracto gastrointestinal devido a mucosite.
15. Método de preparação de uma composição não aquosa de acordo com qualquer uma das reivindicações precedentes, compreendendo a etapa de misturar uma quantidade terapeuticamente eficaz de um ΑΙΝΕ na forma de pó directamente num óleo transportador biocompatível contendo um fosfolípido.
16. Composição como reivindicada em qualquer uma das reivindicações de 1 a 14, para utilizar no tratamento de inflamação num animal incluindo um ser humano.
17. Composição de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 14, para utilizar no tratamento de ulceração e/ou inflamação de tecidos num animal incluindo um ser humano. Lisboa, 2009-02-19