PL92081B1 - - Google Patents
Download PDFInfo
- Publication number
- PL92081B1 PL92081B1 PL16218573A PL16218573A PL92081B1 PL 92081 B1 PL92081 B1 PL 92081B1 PL 16218573 A PL16218573 A PL 16218573A PL 16218573 A PL16218573 A PL 16218573A PL 92081 B1 PL92081 B1 PL 92081B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- medium containing
- growth
- brevibacterium
- substances
- assimilable carbon
- Prior art date
Links
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania L-lizyny na drodze fermentacji.
L-iizyna jest niezbedna w zywieniu ludzi i . zwierzat i ma szerokie zastosowanie jako skladnik, wzbogacaja¬
cy pokarmy i pasze. Znane jest wytwarzanie L-lizyny na drodze fermentacji weglowodanów za pomoca bakterii
trzech typów. Pierwszym z nich jest znany z opisu patentowego St.Zj.Am. nr 2979439 szczep Micrococcus
glutamicus, który dla wzrostu wymaga aminokwasów odpowiednich do biosyntezy L-lizyny, takich jak
homoseryna. Drugi typ stanowia znane z francuskiego opisu patentowego nr 1533688 szczepy bakterii, wrazliwe
na treonine albo metionine, szczepy, wrazliwe na treonine i szczepy, wymagajace treoniny. Ich wzrost, za
wyjatkiem ostatniego z wymienionych, jest hamowany przez niskie stezenie treoniny i bez wyjatku przez niskie
stezenie metioniny. Trzeci typ stanowi szczep znany z opisu patentowego St Zj. Amer. nr 3707441, odporny na
S-!2-aminoetylo)-L-cysteine, bedacy siarkowa pochodna L-lizyny i nazywana dalej w skrócie AEC.
Stwierdzono, ze szczepy bakterii, odporne na zahamowanie odtwarzania lizyny i jej analogów, a równoczes¬
nie wykazujace zapotrzebowanie na co najmniej jeden z takich skladników odzywczych, jak seryna, prolina,
alanina, amid kwasu nikotynowego, kwas pantotenowy, tiamina, guanina, hypoksantyna i witamina Bi2,
hodowane w odpowiednim srodowisku, zawierajacym zródla przyswajalnego wegla i azotu oraz skladniki
mineralne, wytwarzaja L-lizyne z wysoka wydajnoscia.
Zgodnie z wynalazkiem, do wytwarzania L-lizyny stosuje sie nowe szczepy o wyzej podanych cechach,
otrzymywane znanymi sposobami ze znanych szczepów macierzystych nalezacych do gatunku Brevibacterium
a mianowicie:
szczep Brevibacterium lactofermentum ATCC 21798, wymagajacy seryny i odporny
na AEC,
szczep Brevibacterium lactofermentum ATCC 21799, wymagajacy kwasu pantotenowego
i odporny na AEC,2 92 081
szczep Brevibacterium lactofermentum ATCC 21800, wymagajacy tiaminy i odporny na AEC,
szczep Brevibacterium lactofermentum ATCC 21801, wymagajacy adeniny lub
guaniny I odporny na AEC,
szczep Brevibacterium lactofermentum FERM P-1711, wymagajacy alaniny I odporny
na AEC,
szczep Brevibacterium lactofermentum FERM P-1712, wymagajacy alanlnylub walinyi odporny na AEC,
szczep Brevlbacterlum lactofermentum FERM P-1857, wymagajacy alaniny i leucyny.
a odporny na AEC,
szczep BreVlbiCterium lactofermentum FERM P-1570, wymagajacy prollny i odporny
na AEC,
szczep Brtyibacterium lactofermentum FERM P-1573, wymagajacy witaminy B42 i odporny
na AEC,
szczep Brevlbacterlum lactofermentum FERM P-1674, wymagajacy amidu kwasu
nikotynowego i odporny na AEC,
szczep Brevibacterium lactofermentum FERM P-1575, wymagajacy hypoksantyny i odporny na AEC-
szczep BreVlbacterium lactofermentum FERM P—1571, wymagajacy amidu kwasu nikotynowego i leucyny,
a odporny na AEC i
szczep Brevib*cterium lactofermentum FERM P-1572, wymagajacy seryny i leucyny,
a odporny na AEC.
Proces wytwarzania L-lizny zgodnie z wynalazkiem prowadzi sie w ten sposób, ze jeden z podanych wyzej
nowych szczepów poddaje sie hodowli w warunkach aerobówych, przy wartosci pH = 5-9, w pozywce
zawierajacej zródla przyswajalnego wegla i azotu, nieorganiczne sole, substancje niezbedna dla wzrostu uzytego
mikroorganizmu i organiczne substancje, wzmagajace wzrost. Fermentacje prowadzi sie korzystnie w temperatu¬
rze 24-37°Cr wciagu 24-98 godzin, stosujac wytrzasanie lub napowietrzanie i mieszanie. Gdy wartosc pH
pozywki jest mniejsze niz 5, podwyzsza sie ja przez dodawanie substancji zobojetniajacych, takich jak weglan
wapia lub wodny roztwór amoniaku, a jezeli wartosc pH jest za wysoka, to stosuje sie dodatek kwasów, np.
kwasu tolnego lub siarkowego.
Z brzeczki hodowlanej wyosabnla sie lizyne znanymi sposobami, np. przez odsaczanie lub odwirowywanie
stalych czesci komórek i traktowanie przesaczu zywica kationowymlenna. Otrzymana L-lizyne identyfikuje sie
na podstawie widma w podczerwieni, metoda chromatografii bibulowej, elektroforezy, prób z mikroorganizmami
lub prób zdekarboksylaza. *
Sklad pozywki fermentacyjne] oraz sposób hodowania jest znany, stosowany zazwyczaj przy fermentacji
aminokwasów, jak równiez moga byc stosowane znane pozywki do wytwarzania lizyny na drodze fermentacji.
Takwiec do hodowli szczepów, stosowanych w sposobie wedlug wynalazku, nadaja sie pozywki syntetyczne, jak
i z naturalnych srodków odzywczych, pod warunkiem, ze zawieraja zasadnicze substancje odzywcze niezbedne
dla wzrostu zastosowanego szczepu. Te srodki odzywcze sa dobrze znane, a mianowicie sa to zródla wegla,
zródla azotu i,zwiazki nieorganiczne, które sa wykorzystywane przez zastosowany mikroorganizm w odpowied¬
nich Ilosciach. <
Przykladami zródla wegla sa weglowodany, takie jak glikoza, fruktoza, maltoza, sacharoza, skrobia,
produkt hydrolizy skrobi, melasa lub inne zródla wegla, takie jak kwasy organiczne, na przyklad kwas octowy,
proplonowy, fumarowy itd. organiczne zwiazki chemiczne, na przyklad kwas benzoesowy lub alkohole, takje jak
na przyklad metanol i etanol. Wymienione substancje moga byc stosowane oddzielnie lub w mieszaninie.
W zaleznosci ód zdolnosci przyswajania zastosowanego mikroorganizmu, jako zródlo wegla stosuje sie
weglowodory w minimalnej lub maksymalnej ilosci.
Jako zródlo azotu stosuje sie rózne rodzaje nieorganicznych lub organicznych soli lub zwiazków, takich jak
mocznik lub sole amonowe, np. chlorek amonu, siarczan amonu, azotan amonu, fosforan amonu, albo jeden iub
wiecej aminokwasów, albo substancje naturalne, zawierajace azot, takie jak wyciag z kielków kukurydzy, wyciag
Z drozdzy, wyciag z miesa, maczka rybna, pepton, bulion, produkty hydrolizy kazeiny, wyciag z otrebów
ryzowych itd. Substancje te równiez mozna stosowac oddzielnie lub w mieszaninie.
Jako zwiazki nieorganiczne do pozywek hodowlanych dodaje sie siarczan magnezu fosforan sodu,
dwuwodoroortofosforan potasowy, jednowodoroortofosforan potasowy, siarczan zelaza lub inne sole zelaza,,
chlorek manganu, chlorek wapnia chlorek sodu itp.
Pozywka hodowlana powinna zawierac srodki odzywcze i inne substancje, konieczne do wzrostu szczepu.
Srodkami, pobudzajacymi wzrost oraz srodkami odzywczymi poprawiajacymi wydajnosc wytwrzania L-lizyny, sa
aminokwasy, na przyklad sery na, prolina, alanina, leucyna, rózne witaminy, takie jak witamina B12, tiamina,
kwas pantotenowy, amid kwasu nikotynowego lub kwas nikotynowy, zasady purynowe, takie jak guanina,92 081 3
adenina i hypoksantyna, produkt hydrolizy proteiny sojowej wyciag z drozdzy, wyciag z kielków kukurydzy,
pepton, produkt hydrolizy kazeiny.
Wazna rzecza jest ograniczenie ilosci wymaganych aminokwasów i innych srodków odzywczych do ilosci
mniejszej niz optimum stezenia dla wzrostu danego szczepu mikroorganizmu, co stosuje sie zazwyczaj przy
fermentacjach aminokwasów.
Zaleta procesu, prowadzonego sposobem wedlug wynalazku, w porównaniu ze znanymi sposobami jest to,
ze dzieki zastosowaniu nowych szczepów o podanej wyzej charakterystyce mozna wytwarzac L-lizyne z wyzsza
wydajnoscia, przy czym dzieki odpornosci tych szczepów na analogi lizyny wydajnosc ta jest w nieznacznym
tylko stopniu zalezna on wahan zawartosci treoniny i innych skladników odzywczych w pozywce. Szczepy,
stosowane zgodnie z wynalazkiem, wytwarza sie znana metoda odsiewu lub metoda indukowania sztucznych
mutantów. W nizej podanych doswiadczeniach opisano przyklady tych sposobów.
Doswiadczenie 1. Szczepy wykazujace zapotrzebowanie na rózne substancje odzywcze wyodrebnia sie
metoda powtórzeniowa z kolonii na plytce agarowej, na której hodowano w temperaturze 31°C wciagu 4—10
dni komórki mikroorganizmów, otrzymane przez naswietlanie szczepu Brevibacterium lactofermentum ATCC
13869 promieniami Roentgena. Zapotrzebowanie otrzymanych mutantów na srodki odzywcze okreslano
znanymi metodami. Otrzymano miedzy innymi 4 szczepy, a mianowicie mutanty, wykazujace zapotrzebowanie
na seryne, kwas pantotenowy, tiamine i guanine (lub adenine).
Te 4 szczepy traktowano 200 jug/ml nitrozoguanidyny w temperaturze 30°C w ciagu 30 minut, a nastepnie
szczepiono na plytkach agarowych, zawierajacych 2 g/dl glukozy, 0,3 g/dl mocznika, wymagana substancje, to
jest 30 mg/dl seryny, 10 mg/litr pehtotenianu wapnia, 100 mg/litr adeniny oraz 0,5 g/dl treoniny, 0,1 g/dl
KH2P04 0,04 g/dl MgS04 7H20, 2 ppm Fe*, 2 ppm Mn*, 50 jug/litr biotyny, 100 /Lig/litr tiaminy, 500 jug/ml AEC
i 2 g/dl agaru o wartosci pH -» 7 i poddawano hodowli w temperaturze 31°C w ciagu 4-10 dni.
Przy badaniu zdolnosci wytwarzania L-lizyny przez szczepy izolowane z kolonii, wystepujacych w wyzej
wymienionych hodowlanych na plytkach, stwierdzono, ze sa 4 nastepujace szczepy, wytwarzajace duze ilosci
L-lizyny:
Brevibacterium lactofermentum ATCC 21796 (AEC y + Ser~)
Brevibacterium lactofermentum ATCC 21799 (AEC 7 + kwas pantotenowy")
Brevibacterium lactofermentum ATCC 21800 (AEC y + tiamina~)
Brevibacterium lactofermentum ATCC 21801 (AEC y + adenina- lub guanina-'
• Wzrost tych 4 szczepów w minimalnej pozywce i z minimalna pozywka, dodawana z wymaganymi srodka¬
mi odzywczymi, badano w sposób nastepujacy.
Wytwarza sie minimalna pozywke o wartosci pH - 7,2, zawierajaca 2 g/dl glukozy, 1 g/dl siarczanu
amonowego, 0,3 g/dl mocznika, 0,1 g/dl KH2P04, 0,04 g/dl MgS04 7H20, 2 ppm jonów Fe i Mn, 50 /ig/Htr
biotyny i 200 A-ig/litr chlorowodorku tiaminy. Do pozywki dodaje sie 30 mg/dl kazdego z wymienionych
w tablicy 1 aminokwasów, 10 mg/litr pantotenianu wapnia lub 100 mg/litr adeniny i mieszajac hoduje sie
mutanty szczepów w temperaturze 31 °C wciagu 24 godzin. Brzeczke hodowlana rozciencza sie 26-krotnie
w stosunku do pierwotnej objetosci i oznacza wlasciwa gestosc optyczna przez pomiar absorbcji swiatla przy
dlugosci fali 562milimikronów. <
Wyniki podano w tablicy 1.
^v.',i:j: -, ; \; iOD) Gestosc optyczna (OD)
przy hodowli minimalnej pozywki
Szczep z dodatkiem
bez dodatku srodka odzywczego
BreYibacterium lactofermentum
ATCC 13869
BreYibacterium lactofermentum
ATCC 21798
BreYibacterium lactofermentum
ATCC 21799
BreYibacterium lactofermentum
ATCC 21800
BreYibacterium lactofermentum
ATCC 21801
•Tiamina zostala wylaczona z minimalnej pozywki
0,400
0,065 seryna 0.410
0,059 pantotenian wapnia
0.405
0,380 0,075*
0,052 adenina
0.3754 92 081
Doswiadczenie II. Brevibecterium lactofermentum ATCC 13869 traktuje sie 250 jug/rnl nitrozoguanidyny
w temperaturze 30°C wciagu 30 minut i zaszczepia na plytce agarowej, zawierajacej 2 g/dl glukozy, 0,3 g/dl
mocznika, 1 g/dl (NH4)aS04, 0,6 g/dl treoniny, 0,1 g/dl KH2P04, 0,04 g/dl MgS04 • 7H20, 2 ppm jonów Fe
i Mn, 60jUg/lltr biotyny, 200/ug/litr chlorowodorku tiaminy, 5 mg/ml AEC i 2 g/dl agaru i hoduje w temperaturze
31°C wciagu 4-10dni. przy wartosci pH « 7. Szczepy wyodrebnia sie z kazdej kolonii, wystepujacej w hodowli
ni plytce. Sa to uczepy odporne na AEC i sposród nich wyodrebnia sie mutanty, zdolne do wytwarzania
L-lizyny, przez badanie zdolnosci jej wytwarzania przez kazdy szczep.
Mutant odporny na AEC, lecz nie zawierajacy wymaganych srodków odzywczych, traktuje sie ponownie
250 Mfl/rnl nitrozoguanidyny w temperaturze 30° C wciagu 30 minut. Nastepnie wyodrebnia sie muntanty,
zdolne do wytwarzania duzej Ilosci L-lizyny. Sa to mutanty odporne na AEC. Zapotrzebowanie na srodki
odzywcze wyodrebnionych mutantów oznacza sie znanymi metodami. Otrzymano 6 nastepujacych szczepów:
BriVfb*ct#rlum lactofermentum FERM P-1670 (AEC + Pro-)
Brtvibect$rlum lactofermentum PERM P—1571 (AEC + nikotynoamid~-Leu~)
BreWbacterlum iaotofermtntum FERM P-1572 (AEC + Ser" + Leu~)
Brevib«ctarium lactofermentum FERM P-1573 (AEC + witamina B12"~)
Brevibioterium lactofermentum FERM P-1674 (AEC + nikotynoamid")
Breyfbacterlum lactofermentum FERM P-1676 (AEC + hypoksantyna-).
Zapotrzebowanie na srodki odzywcze tych szczepów potwierdzono przez badanie ich wzrostu w ten
sposób, ze przygotowuje sie minimalna pozywke, zawierajaca 2% glukozy, 0,3% mocznika, 1% NH4/2S04,0,1%
KHaP04, 0,04% Mg304 • 7HaO, 2 ppm Fe*\ 2 ppm Mn", 50 Mg/l biotyny i 200/ig/l chlorowodorku tiaminy,
o wartosci pH m 7,2 i porcje po 3 ml otrzymanej pozywki, lacznie z kazdym wymienionym w tablicy 2
wymaganym srodkiem odzywczym, zaszczepia sie za pomoca kazdego szczepu, hodowanego uprzednio na skosie
bulionowym i hoduje w temperaturze 31°C wciagu 24 godzin, stosujac napowietrzanie i mieszanie. Brzeczke
hodowlana rozciencza sie 26-krotnie w stosunku do pierwotnej objetosci i oznacza wlaswica gestosc optyczna
przez pomiar absorpcji swiatla przy 562 rnjU-
Wyniki podno w tablicy 2.
Szczep
ATCC 13869
FERM P-1670
FERM P-1571
FERM P-1 572
FERM P-1573
FERM P-1574
FERM P-1575
Tabl Ica 2
Wzrost (OD)
Minimalna
pozywka
0,40
0,058
0,057
0,052
0,058
0,055
0,059
Minimalna pozywka
z dodatkiem srodka odzywczego
0,440 (40 mg/dl proliny)
0,420 (0,5 mg/dl nikotynoamidu
+ 40 mg/dl leucyny)
0,460 (50 mg/dl seryny
+ 40 mg/dl leucyny
0,390 (10Mg/dl witaminy Bl2)
0,430 (1 mg/dl nikotynoamidu)
0,420 (5 mg/dl hypoksantyny)
Doswiadczenie III. Brevibacterium lactofermentum ATCC 13869 traktuje sie 250/ig/ml nitrozoguanidyny
w temperaturze 30°C w ciagu 30 minut i zaszczepia sie na plytce agarowej, zawierajacej 2 g/dl glukozy, 0,3 g/dl
mocznika, 1 g/dl (NH4/2S04, 0,4 g/dl treoniny, 0,1 g/dl KHaP04, 0,04 g/dl MgS04 • 7H20, 2 ppm jonów Fe
i Mn, 50 Mg/litr biotyny, 100 /ig/litr chlorowodorku tiaminy, 4 mg/ml AEC i 2 g/dl agaru i przy wartosci pH = 7
hoduje w temperaturze 31°C wciagu 4-10 dni. Z kazdej kolonii, wystepujacej w hodowli na plytce jako szczep
odporny na AEC, wyodrebnia sie szczep, którego mutanty sa zdolne do wytwarzania L-lizyny i bada zdolnosc jej
wytwarzania w sposób wyzej opisany. Otrzymany szczep nr 872, wykazujacy odpornosc na AEC i nie wykazuja¬
cy zapotrzebowania na srodki odzywcze, traktuje sie ponownie 250 /ig/ml nitrozoguanidyny w temperaturze
°C, wciagu 30 minut, a nastepnie wyodrebnia mutanty, zdolne do wytwarzania duzej ilosci L-lizyny
Zapotrzebowanie na skladniki odzywcze wyodrebnionych mutantów oznacza sie znanymi metodami.
Jako mutanty dobrze wytwarzajace L-lizyne, wykazujace zapotrzebowanie na alanine, alanine, lub waline
i odpornosc na AEC, otrzymano nastepujace mutanty szczepów:92 081 5
Brevsb3Cterium lactorermentum FERM P-1711 (AEC7 + Ala-)
Brevibacterium lactof ermeritum FERM P—1712 (AEC7 + Ala~~lub Wal")
Mutant szczepu FERM P—1711 traktuje sie ponownie nitrozoguanidyna w sposób wyzej opisany i otrzy¬
muje szczep FERM P—1857, wykazujacy odpornosc na AEC i zapotrzebowanie na alanine i leucyne, równiez
dobrze wytwarzajacy L-lizyne.
Zapotrzebowanie na srodki odzywcze wymienionych trzech szczepów potwierdzaja nastepujace badania ich
wzrostu. Przygotowuje sie minimalna pozywke, zawierajaca 2% glukozy, 0,3% mocznika, 1% (NH412SO4, 0,1
KH2P04, 0,04% MgS04 ¦ 7H20, 0,05% NaC!f 2 ppm Fe+\ 2 ppm Mn*\ 50 Mg/litr biotyny i 200 //g/litr
chlorowodorku tiaminy, majaca wartosc pH = 7,0.
Przygotowuje sie zawiesiny 3 szczepów przez dodanie do 6 ml tej pozywki komórek mikrobowych kazdego
szczepu, hodowanego uprzednio w skosie bulionowym w temperaturze 31°C wciagu 24 godzin. Stezenie
komórek mikrobowych (OD) w kazdej zawiesinie wynosi 0,250 dla szczepu FERM P- 1711 10,295 dla FERM
P-1712.
Porcje po 3 ml minimalnej pozywki z dodatkiem substancji odzywczych, wymienionych w tablicach 3 i 4,
zaszczepia sie za pomoca 0,1 ml przygotowanych zawiesin i hoduje w temperaturze 31°C wciagu 24 godzin,
stosujac napowietrzanie i mieszanie. Brzeczke hodowlana rozciencza sie 26-krotnie w stosunku do pierwotnej
objetosci I oznacza wlasciwa gestosc optyczna przez pomiar absorpcji swiatla przy dlugosci fali 562 milimikro-
ny. Wyniki podano w tablicach 3 i 4.
Dodany
srodek odzywczy
brak
L-alanina
D-alanina
Walina
Nikotynoamld
Treonlne
Metionina
L*lenIna
NlkotynoamW
Dzianina
NikotynoamkJ
Walanina
NfkotynoamkJ
Stezanie
mg/dl
—
50
50
50
0,5
50
50
50
0,5
60
0,5
50
0,6
Tablica 3
FERM P-
0,027
0,185
0,155
0,058
0,045
0,022
0,425
0,510
-
1711
0,025*
0.152
0,162
0.080
0,037
0,020
0,460
0,480
-
Wzrost (OD)
FERMP-
0,068
0,170
0,236
0.160
0,066
0,072
0,238
0,348
0.312
-1712
0,070
0,176
0.250
0,210
0,071
0,076
0,251
0,341
0,323
Zamiast nlkotynoamidu mozna stosowac kwas nikotynowy.
Tablica 4
Dodane srodki odzywcze
Dla szczepu AJ-3429
wzrost (OD)
Brak
Alanina
Leucyna
Alanina i Leucyna
Alanina+leucyne+nikotynoamid
Alanina+leucyna+nikotynoamid
+treonina+metionina
0,030
0,031
0,032
0,180
0,460
0,435
0,036
0,033
0,033
0.176
0,480
0,4456 92 081
Stezenie dodanych srodków odzywczych wynosilo 50 mg/dl dla kazdego aminokwasu i 5 mg/dl dla
nikotynoamldu. Ponizsze przyklady ilustruja sposób wedlug wynalazku.
Przyklad I. Przygotowuje sie pozywke hodowlana zawierajaca 10 g/dl glukozy, 5 g /dl (NH4 )2S04,
0r1 g/dl KH2P04, 0,04 g/dl MgS04 • 7H20, 2 ppm jonów zelaza i Mn, 50 jug/l chlorowodorku tianiny, 50/ig/l
biotyny, 1,5 ml/dl produktu hydrolizy proteiny soi (o calkowitej zawartosci azotu 7%) i 5 g/dl weglanu wapnia,
majaca wartosc pH * 7,2, 20 ml tej pozywki umieszcza sie we wstrzasanych butelkach o pojemnosci 500 ml
i sterylizuje. Szczepy, wymienione w tablicy 6, zaszczepia sie na pozywce i hoduje w temperaturze 31°C w ciagu
72 godzin, wstrzasajac. Ilosci wytworzonej L-lizyny w postaci chlorowodorku podano w tablicy 5.
Tablica 5
Ilosc wytworzonej L-lizyny
Szczep (g/dl)
Brevlbacterlum lactofermentum
(FERM P-1443) ATCC21798) 4,1
Brevlbacteri'jm lactofermentum
(FERM P-1444) ATCC21799 2,5
Brevibacterium Lactofermentum
(FERM P-1445) ATCC21800 3,0
Brevibacterlum lactofermentum
(FERM P-1446) ATCC21801 2,8
Pozywki hodowlane dla drugiego i czwartego szczepu zawieraja OJ mg/ml metioniny, 5 mg/ml pantotenia-
nu wapnia i 100 mg/litr adeniny I guanlny.
Komórki bakteryjne i stale sole wapniowe oddziela sie z brzeczki hodowlanej przez odwirowanie. Jeden litr
cieczy sklarowanej nad osadem wprowadza sie na kolumne wypelniona silna kationowymienna zywica (Amberlite
IR—120 typ jon wodorowy: Brand Name), L-lizyne, zaadsorbowana na zywicy, eluuje sie 3% wodnym
roztworem amoniaku. Eluant zateza sie pod zmniejszonym cisnieniem i do zatezonego roztworu dodaje sie
kwasu solnego. Po ochlodzeniu roztworu lodem otrzymuje sie krysztaly surowego dwuwodnego chlorowodorku
L-lizyny w ilosci 30,2 g.
Przyklad II. Brevibaoterium lactofermentum ATCC 21798, ATCC 21799; ATCC 21800 i ATCC
21801 zaszczepia sie na pozywce hodowlanej, zawierajacej 1,5 g/dl glukozy, 0,3 g/dl octanu amonu, 0,1 g/dl
KH2P04, 0,04 g/dl Mg804 ' ^jOr 2 ppm jonów Fe i MN, 50 /ag/litr blotyny, 200 Mg/litr chlorowodorku
tiaminy, 1,5 mi/dl produktu hydrolizy proteiny soi o calkowitej zawartosci azotu 7%) i 0,5 g/dl wyciagu
z drozdzy, majacej wartosc pH - 8 i hoduje w temperaturze 31 °C wciagu 16 godzin, stosujac mieszanie
i napowietrzanie.
Po 16 ml kazdej t tych hodowli dodaje sie do 300 ml glównej pozywki hodowlanej o wartosci pH - 7,5,
zawierajacej 3 g/dl glukozy, 0,6 g/dl octanu amonu, 0,2 g/dl mocznika, OJ g/dl KH2P04, 0f04 ^g/dl
MgS04 • 7H30, 2 ppm jonów Fe i Mn, 50 /ig/l biotyny, 50 Mfl/1 chlorowodorku tiaminy, 3 ml/di produktu
hydrolizy proteiny soi oraz srodki odzywcze, wymienione w tablicy 6, i hoduje w temperaturze 31,5°C, stosujac
mieszanie 1600 obrotów/minute oraz wprowadzajac równa objetosciowo ilosc powietrza na minute. Wartosc pH
W Czasie hodowania utrzymuje sie na poziomie 7,2—6 przez automatyczne dodawanie mieszaniny kwasu
octowego i octanu amonu, zawierajacej 0,25 mola octanu amonu na 1 mol kwasu octowego i w której stezenie
kwasu octowego wynosi 60%.
Po 48 godzinach hodowania w brzeczce hodowlanej kazdego szczepu otrzymuje sie 4,8-6,4 g/dl
Chlorowodorku L-Nzyny, co przedstawiono w tablicy 6.92 031 7
Tablica 6
Szczep
ATCC21798
ATCC 21799
ATCC 21800
ATCC 21801
Dodany srodek odzywczy
(mg/l)
_
pentotenian wapnia : 5
~
adenina: 100 i
guanina: 100
I losc wytworzonej L-lizyny
(g/dl)
6,4
4,8
,7
6,0
Przyklad Ml. Szczepy Brevibacterium lactofermentum ATCC 21798 ATCC 21799, ATCC 21800
i ATCC 21801 hoduje sie w temperaturze ,31,5°C wciagu 16 godzin, stosuje wstrzasanie, na pozywce
hodowlanej, zawierajacej 1,5 g/di glukozy, 0,3 g/dl mocznika, 0,1 g/dl KH2P04, 0,04 g/dl MgS04 • 7H20,2ppm
jonów Fe i Mn, 50jug/litr biotyny, 200/ig/litr chlorowodorku tiaminy, 1,5 ml/dl produktu hydrolizy proteiny soi
i 0,5 g/dl wyciagu z drozdzy.
Wartosc pH pozywki wynosi 8,0. Po 15 ml kazdej z tych hodowli dodaje sie do 300 ml glównej pozywki
hodowlanej, zawierajacej:
glikoza 1 g/dl
etanol 1,5 g/dl •
(NH4/2S04 0,5 g/dl
mocznik 0,2 g/dl
KH2P04 0,1 g/dl
MgS04 -7H20 0,04 g/dl
Fe*4 2ppm
Mn** 2 ppm
blotyna 50jUfl/'
witamina Bi • HCI 50jtig/l
produkt hydrolizy bialka soi
(calkowita zawartosc azotu: 7%) 3 ml/dl
srodki odzywcze wedlug tablicy 7
Wartosc pH tej pozywki wynosi 7,5. Hodowle prowadzi sie w temperaturze 31,5°C, stosujac mieszanie
z szybkoscia 1600 obrotów na minute i wprowadzajac równo objetosciowa w stosunku do objetosci pozywki
Ilosc powietrza.
W czasie fermentacji utrzymuje sie wartosc pH pozywki 7—7,5 przez wprowadzanie gazowego amoniaku.
Mosc pozostalego etanolu okresla sie za pomoca gazowej chromatografii i gdy ilosc ta maleje do okolo 0,3 g/dl,
do pozywki dodaje sie etanolu. Po 48 godzinach w brzeczce hodowlanej kazdego szczepu znajduje sie
chlorowodorek L-lizyny w ilosciach, podanych w tablicy 7.
Szczep
ATCC 21798
ATCC 21799
ATCC 21800
ATCC 21801
Tabl ica 7
Dodany srodek odzywczy
(mg/litr)
__
pantotenian wapnia: 5
-
adenina: 100 i
guanina : 100
Ilosc wytworzonej L-lizyny
(g/dl)
,5
4,4
,5
,78 92 081
Pr zy klad IV. Szczepy Brevibacterium lactofermentum FERM P-1570, FERM P-1571, FERM
P-1572, FERM P-1673, FERM P-1574 i FERM P-1576 hoduje sie w sposób, opisany w przykladzie I, z ta
róznica, ie dodaje sie produkt hydrolizy proteiny soi w ilosciach, podanych w tablicy 8 i 5 rng/dl hypoksantyny
dodaje sie do pozywki dla szczepu FERM P-1575.
Po 72 godzinach hodowania w brzeczce hodowlanej kazdego szczepu otrzymuje sie chlorowodorek
L-llzyny w ilosciach, podanych w tablicy 8.
Szczep
FERM P-1670
FERM-P-1571
FERM P-1572
FERM P-1573
FERM P-1574
FERM P-1575
Tablica 8
I loic produktu
hydrolizy bialka soi
(%)
• 3
1.5
1,5
3
2
3
I losc wytworzonej L-lizyny
(g/dl)
2,9
,0
,6
3,5
3,1
3,0
Przyklad V. Szczepy Brevibacterium lactofermentum FERM P-1570, FERM P-1571, FERM
P-1572, FERM-1573, FERM P-1574 i FERM P-1575 hoduje sie w sposób, opisanyw przykladzie II, stosujac
jako glówne zródlo wegla kwas octowy i z ta. róznica, ze do pozywki dla szczepu FERM P-1575 dodaje sie 5
mg/ml hypoksantyny.
Po 48 godzinach hodowania w brzeczce hodowlanej kazdego szczepu otrzymuje sie chlorowodorek
L-lizyny w ilosciach, podanych w tablicy 9.
Po 48 godzinach hodowania szczepu FERM P-1571 w sposób wyzej podany, zostaje zuzyte 30%
objetosciowych kwasu octowego w stosunku do pierwotne] objetosci pozywki. Brzeczka hodowlana zawiera 7,1
g/dl chlorowodorku L-lizyny. Z jednego litra bulionu w sposób opisany w przykladzie I, otrzymano 56,3 g
dwuwodnego chlorowodorku L-lizyny.
Tablica 9
Szczep
FERM P-1570
FERM P-1571
FERM P-1572
FERM P-1573
FERM P-1574
FERM.P-1575
Dodatek hypoksantyny
(mg/dl)
*
-
-
-
-
I losc wytworzonej L-lizyny
(g/dl)
SA
7,1
7,0
6,5
,8
6,1
Przyklad VI. Szczepy Brevibacterium Lactofermentum podane w przykladzie V, hoduje sie, stosujac
etanol jako glówne zródlo wegla w sposób opisany w przykladzie III, z ta róznica, ze do pozywki dla szczepu
FERM P—1575 dodaje sie 5 mg/ml hypoksantyny.
Po 48 godzinach hodowli otrzymuje sie chlorowodorek L-lizyny w ilosciach, podanych w tablicy 10. Jak
widac z tablicy 10, po 48 godzinach hodowli otrzymuje sie 6,3 g chlorowodorku L-lizyny (27,7% wydajnosci
w stosunku do etanolu), a z 1 litra bulionu hodowlanego przy prowadzeniu procesu w sposób opisany w przykla¬
dzie I, otrzymuje sie 50,4 g dwuwodnego chlorowodorku L-lizyny.92 081
Tablica 10
Szczep
FERM P-1570
FERMP-1571
FERM P-1572
FERM P-1573
FERM P-1574
FERM P-1575
Dodatek hypoksantyny
(mg/dl)
_
-
-
-
" - ¦ 5
Ilosc wytworzonej L-lizyny
— -A-
(g/dl)
,2
6,3
6,5
6,1
,0
,5
Przyklad VII. Szczepy Brevlbacterium lactofermentum FERM P—1711 r FERM P-1712, I nr 872
(kontrolny) hoduje sie W sposób, opisany w przykladzie I, z ta róznica, ze do pozywki dodaje sie 200 /ig/Iitr
chlorowodorku tiaminy i dla szczepu FERM P—1712 dodaje sie 3% produktu hydrolizy proteiny soi.
Po 72 godzinach hodowli otrzymuje sie chlorowodorek L-lizyny w ilosciach, podanych w tablicy 11.
Szczep
FERM P-1711
f^RM P-1712
Nr 872
Tabl Ica 11
I losc wytworzonej L-
(g/dl)
4,4
3,2
1,8
lizyny Wydajnosc
•
w stosunku do glikozy
(%)
44
32
18
Przyklad VIII. Szczepy Brevibacterium lactofermentum FERM P—1711, FERM P—1712 i nr 872
(kontrolny), zaszczepia sie na pozywce o skladzie nizej podanym i nastepnie hoduje w temperaturze 31°C
w ciagu 18 godzin przy mieszaniu i napowietrzaniu.
Pozywka hodowlana:
glikoza 1,5%
octanamonu 0,3%
mocznik 0,1%
KH2P04 * 0,1%
MgS04 • 7HaO 0,04%
Fe 2 ppm
Mn+* 2 ppm
biotyna 50 J*g/litr
chlorowodorek tiaminy 200 Mg/litr
produkt hydrolizy bialka soi
(calkowita zawartosc azotu 7%) 2%
""' ~~ Wartosc pH pozywki wynosi 7,5.
W fermentorach o pojemnosci 1 litra umieszcza sie po 300 ml glównej pozywki hodowlanej o nastepuja¬
cym sklad/Je:
glikoza 2%
octanamonu 0,5%
mocznik 0,2%
KH2P04 0,1%
MgS04 • 7H20 0,04%
Fe*+ 2ppm
Mn*+ 2 ppm10 92 081
biotyna 50/ig/litr
chlorowodorektiaminy 50 fA/Utr
produkt hydrolizy bialka soi
(calkowita zawartosc azotu 7%) ' 2,5%
Wartosc pH pozywki wynosi 7,5.
Po sterylizacji kazda porcje pozywki zaszczepia sie 15 ml poprzednio przygotowanej hodowli i hoduje
w temperaturze 31—33°C, mieszajac z szybkoscia 1500 obrotów/minute i wprowadzajac równa objetosc tlenu na
minute. Wartosc pH pozywki utrzymuje sie w granicach 7,2—8,0 przez automatyczne dodawanie mieszaniny
kwasu octowego i octanu amonu, zawierajacego 0,25 mola octanu amonu na 1 mol kwasu octowego i w której
stezenie kwasu octowego wynosi 60%.
Po 55 godzinach hodowli otrzymuje sie chlorowodorek L-lizyny w ilosciach, podanych w tablicy 12.
Tablica 12
Szczep
FERMP-1711
FERMP-1712
Nr 872
Ilosc wytworzonej L-lizyny
(g/dl)
7,2
6,1
4,0
Zuzycie
;' }
y\
:u
i kwasu octowego
(%)
22
24
32
Przyklad IX. Szczepy Brevlbacterium lactofermentum FERM P—1711 i FERM P—1712 oraz szczep nr
872 (kontrolny) zaszczepia sie na pozywce hodowlanej o skladzie, podanym w przykladzie VIII, z ta róznica, ze
zamiast octanu amonu dodaje sie 0,5% etanolu i,dodaje sie 0,3% mocznika, po czym mieszajac hoduje
W temperaturze 31°C w ciagu 18 godzin z mieszaniem i napowietrzaniem.
Fermentacje prowadzi sie dalej z glówna pozywka hodowlana, jak opisano w przykladzie VIII, z tym, ze
do glównej pozywki hodowlanej zamiast octanu amonu dodaje sie 1% glukozy, 1% etanolu i 0,5% siarczanu
amonu. Wartosc pH utrzymuje sie w granicach 7,2—8,2 za pomoca gazowego amoniaku. Ilosc pozostalego
etanolu okresla sie za pomoca gazowej chromatografii i dodaje go w przypadku, gdy ilosc ta spada do okolo
0,3%.
Po 48 godzinach otrzymuje sie chlorowodorek L-lizyny w ilosciach, podanych w tablicy 13.
Tablica 13
Szczep
FERMP-1711
FERMP-1712
Nr 872
Ilosc wytworzonej L-lizyny
(g/dl)
6,6
,6
3,6
Wydajnosc w stosunku do etanolu
r.:-.¦•"-.(%)
26
17
Claims (26)
1. Sposób wytwarzania L-lizyny, znamienny tym, ze nalezacy do gatunku Brevibacterium nowy szczep Breyibacterium lactofermentum ATCC 21798 poddaje sie hodowli w warunkach aerobowych, przy wartosci pH - 5—0, w pozywce, zawierajacej zródla przyswajalnego wegla i azotu, nieorganiczne sole, substancje niezbedna dla wzrostu i organiczne substancje wzmagajace wzrost.
2. Sposób wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze hodowle prowadzi sie w pozywce, zawierajacej jako zródlo przyswajalnego wegla weglowodan i/lub kwas octowy i/albo etanol.
3. Sposób wytwarzania L-lizyny, znamienny tym, ze nalezacy do gatunku Brevibacterium nowy szczep Brevibacterium lactofermentum ATCC 21799 poddaje sie hodowli w warunkach aerobowych, przy wartosci pH » 5—9, w pozywce, zawierajacej zródla przyswajalnego wegla i azotu nieorganiczne sole, substancje niezbedna dla wzrostu i organiczne substancje wzmagajace wzrost.92081 11
4. Sposób wedlug zastrz. 3, znamienny tym, ze hodowle prowadzi sie w pozywce zawierajacej jako zródlo przyswajalnego wegla weglowodan i/albo kwas octowy i/albo etanol.
5. Sposób wytwarzania L-lizyny, znamienny tym, ze nalezacy do gatunku Brevibacterium nowy szczep Brevibacterium iactoferrnenturn ATCC 21800 poddaje sie hodowli w warunkach aerobowych, przy wartosci pH ° 5-9, w pozywce, zawierajacej zródla przyswajalnego wegla, i azotu, nieorganiczne sole, substan¬ cja niezbedna dla wzrostu i organiczne substancje wzmagajace wzrost.
6. Sposób wedlug zastrz. 6, z n a m i e n n y t y m, ze hodowle prowadzi sie w pozywce, zawierajacej jako zródlo przyswajalnego wegla weglowodan i/lub kwas octowy i/albo etanol.
7. Sposób wytwarzania L-lizyny, znamienny tym, ze nalezacy do gatunku Brevibacterium nowy szczep Brevibacterium Iactofermentum ATCC 21801 poddaje sie hodowli w warunkach aerobowych, przy wartosci pH =* 5-9, w pozywce, zawierajacej zródla przyswajalnego wegla i azotu, nieorganiczne sole, substancje niezbedna dla wzrostu i organiczne substancje wzmagajace wzrost.
8. Sposób wedlug zastrz, 7 •, znamienny tym, ze hodowle prowadzi sie w pozywce, zawierajacej jako zródlo przyswajalnego wegla weglowodan i/lub kwas octowy i/albo etanol.
9. Sposób wytwarzania L-lizyny, znamienny tym, ze nalezacy do gatunku Brevibacterium nowy szczep Brevibacterium Iactofermentum FERM P—1711 poddaje sie hodowli w warunkach aerobowych, przy wartosci pH = 5—9, w pozywce, zawierajacej zródla przyswajalnego wegla i azotu, nieorganiczne sole, substancje niezbedna dla wzrostu i oraganiczne substancje wzmagajace wzrost.
10. Sposób wedlug zastrz. 9f znamienny tym, ze hodowle prowadzi sie w pozywce, zawierajacej jako zródlo przyswajalnego wegla weglowodan i/albo kwas octowy i/albo etanol.
11. Sposób wytwarzania L-lizyny, znamienny tym, ze nalezacy do gatunku Brevibacterium nowy szczep 8revibacterium lactofrmentum FERM P-1712 poddaje sie hodowli w warunkach aerobowych, przy wartosci pH * 5—9, w pozywce, zawierajacej zródla przyswajalnego wegla i azotu, nieorganiczne sole, substancje niezbedna dla wzrostu i organiczne substancje wzmagajace wzrost.
12. Sposób wedlug zastrz. 11, z n a m i,e n n y tym, ze hodowle prowadzi sie w pozywce, zawierajacej jako zródlo przyswajalnego wegla weglowodan i/lub kwas octowy i/albo etanol.
13. Sposób wytwarzania L-lizyny, znamienny tym, ze nalezacy do gatunku Brevibacterium nowy szczep Brevibacterium Iactofermentum FERM P—1857 poddaje sie hodowli w warunkach aerobowych, przy wartosci pH m 5—9 w pozywce, zawierajacej zródla przyswajalnego wegla i azotu, nieorganiczne sole, substancje niezbedna dla wzrostu i organiczne substancje wzmagajace wzrost.
14. Sposób wedlug zastrz. 13, znamienny tym, ze hodowle prowadzi sie w pozywce, zawierajacej jako zródlo przyswajalnego wegla weglowodan i/albo kwas octowy i/albo etanol.
15. Sposób wytwarzania L-lizyny, z n a m i,e n n,y tym, ze nalezacy do gatunku Brevibacterium nowy szczep Brevibacterium Iactofermentum FERM P-1570 poddaje sie hodowli w warunkach aerobowych, przy wartosci pH » 5—9, w pozywce, zawierajacej zródla przyswajalnego wegla i azotu, nieorganiczne soie, substancje niezbedna dla wzrostu i organiczne substancje wzmagajace wzrost.
16. Sposób wedlug zastrz. 15, z na mienny tym, ze hodowle prowadzi sie w pozywce zawierajacej jako zródlo przyswajalnego wegla weglowodan i/albo kwas octowy i/albo etanol.
17. Sposób wytwarzania L-lizyny, znamienny tym, ze nalezacy do gatuku Brevibacterium nowy szczep
18. Brevibacterium Iactofermentum FERM P—1571 poddaje sie hodowli w warunkach aerobowych, przy wartosci pH ¦ 5-9, w pozywce, zawierajacej zródla przyswajalnego wegla i azotu, nieorganiczne sole, substancje nlezbed- _ na dla wzrostu i organiczne substancje wzmagajace wzrost 16. Sposób wedlug zastrz. 17, znamienny tym, ze hodowle prowadzi sie w pozywce, zawierajacej jako zródlo przyswajalnego wegla weglowodan i/albo kwas octowy i/albo etanol.
19. Sposób wytwarzania L-lizyny, znamienny tym, ze nalezacy do gatunku Brevibacterium nowy szczep Brevibacterium iactofermentum FERM P-1572 poddaje sie hodowli w warunkach aerobowych, przy wartosci pH * 5-9 w pozywce, zawierajacej zródla przyswajalnego wegla i azotu, nieorganiczne sole, substancje niezbedna dla wzrostu i organiczne substancje wzmagajace wzrost.
20. Sposób wedlug zastrz. 19, znamienny tym, ze hodowle prowadzi sie w pozywce, zawierajacej jako zródlo przyswajalnego wegla weglowodan i/albo kwas octowy i/albo etanol.
21. Sposób wytwarzania L-lizyny, znamienny tym, ze nalezacy do gatunku Brevibacterium nowy szczep Brevibacterium Iactofermentum FERM P—1573 poddaje sie hodowli w warunkach aerobowych, przy wartosci pH = 5-9 w pozywce, zawierajacej zródla przyswajalnego weglai azotu, nieorganiczne sole, substancje niezbedna dla wzrostu i organiczne substancje wzmagajace wzrost.
22. Sposób wedlug zastrz. 21, z n a m i e n n y tym, ze hodowle prowadzi sie w pozywce, zawierajacej jako zródlo przyswajalnego wegla weglowodan i/albo kwas octowy i/albo etanol.12 92 081
23. Sposób wytwarzania L-lizyny, znamienny tym, ze nalezacy do gatunku Brevibacterium nowy szczep Brevibacterium lactofermentum FERM P—1674 poddaje sie hodowli w warunkach aerobowych, przy wartosci pH = 5-9, w pozywce, zawierajacej zródla przyswajalnego wegla i azotu, nieorganiczne sole, substancje niezbedna dla wzrostu i organiczne substancje wzmagajace wzrost.
24. Sposób wedlug zastrz. 23, znamienny tym, ze hodowle prowadzi sie w pozywce, zawierajacej jako zródlo przyswajalnego wegla weglowodan i/albo kwas octowy i/albo etanol.
25. Sposób wytwarzania L-lizyny, znam i e n n y tym, ze nalezacy do gatunku Brevibacterium nowy szczep Brevibacterium lactofermentum FERM P-1575 poddaje sie hodowli w warunkach aerobowych, przy wartosci pH = 5—9, w pozywce zawierajacej zródla przyswajalnego wegla i azotu nieorganiczne sole, substancje niezbedna dla wzrostu i organiczne substancje wzmagajace wzrost.
26. Sposób wedlug zastrz. 25, znamienny tym, ze hodowle prowadzi sie w pozywce, zawierajacej jako zródlo przyswajalnego wegla weglowodan i/albo kwas octowy i/lub etanol. Prac. Poligraf. UP PRL naklad 120+18 Cena 10 zl
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP47042527A JPS491794A (pl) | 1972-04-27 | 1972-04-27 | |
JP8264172A JPS4936888A (pl) | 1972-08-18 | 1972-08-18 | |
JP12024772A JPS551040B2 (pl) | 1972-11-30 | 1972-11-30 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
PL92081B1 true PL92081B1 (pl) | 1977-03-31 |
Family
ID=27291248
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
PL16218573A PL92081B1 (pl) | 1972-04-27 | 1973-04-27 |
Country Status (2)
Country | Link |
---|---|
PL (1) | PL92081B1 (pl) |
YU (1) | YU41698B (pl) |
-
1973
- 1973-04-27 PL PL16218573A patent/PL92081B1/pl unknown
-
1980
- 1980-02-28 YU YU54980A patent/YU41698B/xx unknown
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
YU54980A (en) | 1983-02-28 |
YU41698B (en) | 1987-12-31 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
KR960016135B1 (ko) | L-이소로이신(l-isoleucine)의 제조법 | |
US5376538A (en) | Process for producing L-threonine with strains of E coli resistant to phenylalanine and leucine | |
FI104836B (fi) | Menetelmä aminohappojen valmistamiseksi fermentoimalla | |
RU2588657C2 (ru) | Микроорганизм для продуцирования одновременно l-аминокислоты и рибофлавина и способ производства l-аминокислоты и рибофлавина с его применением | |
JPH05304969A (ja) | 発酵法によるアミノ酸の製造法 | |
US8361758B2 (en) | Microorganism of Corynebacterium genus having resistance to kanamycin and enhanced L-lysine productivity and method of producing L-lysine using the same | |
KR100270510B1 (ko) | 신규 미생물 및 이를 이용한 엘- 쓰레오닌의 제조방법 | |
CN1318599C (zh) | 含有机氮的组合物及其含有该组合物的肥料 | |
JP3717970B2 (ja) | 発酵法によるl−イソロイシンの製造法 | |
SU1719433A1 (ru) | Способ получени L-аланина | |
RU2763052C1 (ru) | Штамм бактерий Methylococcus capsulatus ВКПМ B-13554 - источник кормового белка | |
US3282794A (en) | Method of producing citrulline by bacterial fermentation | |
US5077207A (en) | Process for the production of L-threonine by fermentation | |
PL92081B1 (pl) | ||
PL95590B1 (pl) | Sposob wytwarzania alfa-lizyny | |
KR100793215B1 (ko) | L-리신 생산용 돌연변이 박테리아 균주 | |
JPH01157395A (ja) | 微生物の培養法 | |
RU2099424C1 (ru) | Способ получения l-лизина посредством культивирования штамма бактерий | |
KR100273950B1 (ko) | L-라이신을 생산하는 코리네박테리움 글루타미컴 cj31-0210및 그를 이용한 l-라이신의 생산방법 | |
US20040067561A1 (en) | Process for the production of L-lysine using coryneform bacteria | |
JPH03259088A (ja) | 発酵法によるl―スレオニンの製造法 | |
KR100389580B1 (ko) | L-트레오닌 생산 변이주 및 그를 이용한 l-트레오닌생산방법 | |
SU908092A1 (ru) | Способ получени рибофлавина | |
RU2774433C1 (ru) | Способ получения l- аргинина, глутаминовой кислоты и метионина из жмыха семян подсолнечника | |
CA1192157A (en) | Fermentative preparation of l-leucine |