PL84477B1 - - Google Patents

Description

Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarza¬ nia 3-fluoro-D-alaniny. 3-fluoro-D-alanina stosowana jest jako srodek bakteriobójczy, cenny przy inhibitowaniu wzrostu bakterii chorobotwórczych zarówno Gram-dodat-) nich jak i Gram-ujemnych.Sposób wedlug wynalazku polega na fermento¬ waniu odpowiedniej N-chloroacetylo-3-fluoro-DL- -alaniny z nerkowym enzymem acylaza I, dzieki czemu uzyskuje sie selektywna asymetryczna hyd¬ rolize izomeru lewoskretnego, przez co otrzymuje sie mieszanine 3-fluoro-4-alaniny i N-chloroace- tylo-3-fluoro-D-alaniny.Mieszanine te rozdziela sie na drodze krystali¬ zacji frakcjonowanej z etanolu, a nastepnie hyd- rolizuje sie uzyskana N-chloroacetylo-3-fluoro-D- -alanine.Enzymem sluzacym do usuwania grupy acety¬ lowej jest enzym nerkowy ze swini, acylaza I, opisany przez Greensteina i Winitza (Chemistry of The Amino Acids, tom 3, strona 1831). Enzy¬ matyczna reakcje usuwania grupy acetylowej prze¬ prowadza sie zwykle w temperaturze 37qC przez okres okolo 24 godzin. W koncu tego okresu czasu izomer lewoskretny jest zasadniczo calkowicie po¬ zbawiony grupy acetylowej, i mozna go latwo od¬ dzielic od niezmienionego prawoskretnego izomeru N-chloro-acetylo-3-fluoro-D-alaniny.Przyklad. Roztwór zawierajacy 5 moli N- -chloroacetylo-DL-3-3-fluoro-alaniny w 5 litrach wody o pH doprowadzonym do wartosci 7,0 przez dodanie stezonego wodnego roztworu amoniaku polaczono ze 150 mg oczyszczonego enzymu ner¬ kowego swini, acylaza I i utrzymywano w tempe¬ raturze 37°C przez okres 24 godzin. Z otrzymanego lugu zawierajacego wolna 3-fluoro-Lr-alanine i N- -chloroacetylo-3-fluoro-D-alanine usunieto bialka i odbarwiono dodajac kwas octowy do zawartosci 0,2 mola/l i wegiel drzewny aktywny (Norit) w ilo¬ sci 2 mg/ml, a nastepnie roztwór przesaczono.Przesacz odparowano pod próznia do 10% poczat¬ kowej objetosci, a nastepnie dodano 6-krotna obje¬ tosc etanolu. W tym czasie wykrystalizowala 3-flu- oro-L-alanina, która oddzielono na drodze filtracji.Powstala w roztworze 3-fluoro-L-alanine selek¬ tywnie usunieto przepuszczajac rozcienczony roz¬ twór macierzysty przez zloze zywicy jonowymien¬ nej Dowex-50 w postaci wodorowej, której zdol¬ nosc jonowymienna równowazna byla 20% amino¬ kwasu, poczatkowo wystepujacego w lugu.Wyciek z kolumny ogrzewano z 2n wolnym roz¬ tworem kwasu chlorowodorowego w temperaturze 1009C przez okres 2 godzin, a nastepnie pH hyd¬ rolizatu doprowadzono do wartosci 4,8 za pomoca wodnego roztworu amoniaku, po czym dodano te sama objetosc etanolu. Wytracona substancje wy¬ dzielono na drodze filtracji i wysuszono otrzymu¬ jac 3-fluoro-D-alanine. 84 4773 PL PL PL

Claims (1)

1. Zastrzezenie patentowe Sposób wytwarzania 3-iluoro-D-alaniny, zna¬ mienny tym, ze acyloWana przy atomie azotu N-chloroacetylo-3-fluoro-DL-alanine, poddaje sie dzialaniu nerkowego enzymu acylazy I, który usu- 477 4 wa grupe acylowa z izomeru lewoskretnego, po czym uzyskana mieszanine 3-fluoro-L-alaniny i N- -chloroacetylo-3-iluoro-D-alaniny, rozdziela sie przez frakcjonowana krystalizacje z wodnego roz- 5 tworu etanolu, po czym oddzielona N-acylo-3-fluo- ro-D-alanine poddaje sie dzialaniu srodka hydro- lizujacego z wytworzeniem 3-fluoro-D-alaniny. RSW Zakl. Graf. W-wa, Srebrna 16, z. 424-76/0 — 11D+20 egz. Cena 10 zl PL PL PL