PL243313B1 - Sposób otrzymywania biomasy drożdży Saccharomyces cerevisiae o zwiększonej odporności na stres osmotyczny i zastosowanie biomasy - Google Patents

Sposób otrzymywania biomasy drożdży Saccharomyces cerevisiae o zwiększonej odporności na stres osmotyczny i zastosowanie biomasy Download PDF

Info

Publication number
PL243313B1
PL243313B1 PL441114A PL44111422A PL243313B1 PL 243313 B1 PL243313 B1 PL 243313B1 PL 441114 A PL441114 A PL 441114A PL 44111422 A PL44111422 A PL 44111422A PL 243313 B1 PL243313 B1 PL 243313B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
biomass
yeast
amount
saccharomyces cerevisiae
sup
Prior art date
Application number
PL441114A
Other languages
English (en)
Other versions
PL441114A1 (pl
Inventor
Jarosław Kliks
Mateusz Ciepliński
Justyna Korycka-Korwek
Mariusz Kasprzak
Maria Mrówczyńska
Dominika Lachnicka
Original Assignee
Univ Zielonogorski
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Univ Zielonogorski filed Critical Univ Zielonogorski
Priority to PL441114A priority Critical patent/PL243313B1/pl
Publication of PL441114A1 publication Critical patent/PL441114A1/pl
Priority to EP22216642.3A priority patent/EP4273221A1/en
Publication of PL243313B1 publication Critical patent/PL243313B1/pl

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/14Fungi; Culture media therefor
    • C12N1/16Yeasts; Culture media therefor
    • C12N1/18Baker's yeast; Brewer's yeast
    • C12N1/185Saccharomyces isolates
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/14Fungi; Culture media therefor
    • C12N1/16Yeasts; Culture media therefor
    • C12N1/18Baker's yeast; Brewer's yeast
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23LFOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/14Yeasts or derivatives thereof
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2500/00Specific components of cell culture medium
    • C12N2500/05Inorganic components
    • C12N2500/10Metals; Metal chelators
    • C12N2500/12Light metals, i.e. alkali, alkaline earth, Be, Al, Mg
    • C12N2500/14Calcium; Ca chelators; Calcitonin
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2500/00Specific components of cell culture medium
    • C12N2500/05Inorganic components
    • C12N2500/10Metals; Metal chelators
    • C12N2500/12Light metals, i.e. alkali, alkaline earth, Be, Al, Mg
    • C12N2500/16Magnesium; Mg chelators
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2500/00Specific components of cell culture medium
    • C12N2500/05Inorganic components
    • C12N2500/10Metals; Metal chelators
    • C12N2500/20Transition metals
    • C12N2500/22Zinc; Zn chelators
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2500/00Specific components of cell culture medium
    • C12N2500/30Organic components
    • C12N2500/34Sugars
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2500/00Specific components of cell culture medium
    • C12N2500/30Organic components
    • C12N2500/36Lipids
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12RINDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/645Fungi ; Processes using fungi
    • C12R2001/85Saccharomyces
    • C12R2001/865Saccharomyces cerevisiae

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

Przedmiotem wynalazku jest sposób otrzymywania biomasy drożdży Saccharomyces cerevisiae o zwiększonej odporności na stres osmotyczny, w którym do suchej masy drożdży w ilości 0,98% - 2,65% ogólnej masy przygotowywanej biomasy wlewa się wodę demineralizowaną w ilości 88,21 - 97,69% ogólnej masy przygotowywanej biomasy, zawierającą rozpuszczone jony wapnia w ilości 144 – 180 mg/dm<sup>3</sup>, potasu w ilości 286 – 716 mg/dm<sup>3</sup>, magnezu w ilości 100 - 160 mg/dm<sup>3</sup>, azotu amonowego w ilości 106 – 360 mg/dm<sup>3</sup>, cynku w ilości 45 – 68 mg/dm<sup>3</sup> oraz glukozę w ilości 9,80 — 35,30 g/dm<sup>3</sup>, miesza się przez 5 godzin z prędkością 130 obr./min w temperaturze 20°C, a następnie po 5 godzinach dodaje się do mieszaniny estry etylowe kwasów tłuszczowych w ilości od 0,1% do 5% na 1 dm<sup>3</sup> wody, a następnie kondycjonuje się biomasę mieszając składniki z prędkością 130 obr./min w ciśnieniu atmosferycznym od 300 do 800 mbar z udziałem tlenu. Przedmiotem wynalazku jest także zastosowanie biomasy drożdży Saccharomyces cerevisiae jako dodatek spożywczy, suplement diety oraz jako prekursor do otrzymywania biomasy fermentacyjnej o zwiększonych parametrach fermentacyjnych.

Description

Przedmiotem wynalazku jest sposób otrzymywania biomasy drożdży szlachetnych Saccharomyces cerevisiae o zwiększonej odporności na stres osmotyczny i zastosowanie biomasy do produkcji odpornej na niekorzystne warunki osmotyczne biomasy fermentacyjnej, dodatku spożywczego i suplementu diety.
W procesie fermentacji drożdże utylizują cukry proste przetwarzając je w warunkach beztlenowych na alkohol oraz energię. W wyniku tych procesów zmieniają się warunki fizykochemiczne panujące w brzeczce nastawnej, wraz ze zmniejszeniem stężenia cukrów prostych rośnie zawartość etanolu oraz ubocznych produktów procesu fermentacji. Dynamika tych procesów jest zróżnicowana i zależy głównie od typu drożdży oraz stężenia początkowego cukrów. Każdy szczep drożdży ma swoje warunki optymalne, których przekroczenie powoduje obniżenie dynamiki oraz wydajności procesu ze względu na niekorzystne ciśnienie osmotyczne.
Drożdże Saccharomyces cerevisiae znane są już od czasów starożytnych i obecnie są szeroko wykorzystywane w przemyśle spożywczym, a także do produkcji bioetanolu. Drożdże te dostarczane są w kilku postaciach: prasowanej, wysuszonej lub liofilizowanej. Używać je do produkcji można dopiero po zalaniu wodą, gdy powstaje tzw. mleczko drożdżowe i kiedy to po jej wchłonięciu komórki drożdży odzyskują aktywność biologiczną. Saccharomyces cerevisiae jest szczepem kandydatem odpowiednim do długoterminowej hodowli drobnoustrojów na dużą skalę i jest uważany za najbardziej potencjalny szczep do produkcji na dużą skalę. Saccharomyces cerevisiae ma zalety krótkiego cyklu wzrostu, silnej zdolności fermentacyjnej i łatwej hodowli na dużą skalę. Od zawsze był głównym przedmiotem badań podstawowych i stosowanych i jest szeroko stosowany w żywności, medycynie i innych dziedzinach. Saccharomyces cerevisiae jest również używany do fermentacji innych ważnych przemysłowo metabolitów.
W ostatnich latach zwraca się coraz większą uwagę na dobór drożdży wykazujących dużą odporność na niekorzystne warunki środowiskowe.
Jak wynika z publikacji autorstwa dr inż. Moniki CIOCH-SKONECZNY, inż. Agnieszki PITEK, dr hab. inż. Pawła SATORY, prof. UR i mgr inż. Anety PATER pt. Rehydratacja drożdży piwowarskich (w: Postępy Techniki Przetwórstwa Spożywczego, 2018, Tom nr 2, str. 79-83, http://yadda.icm.edu.pl/baztech/element/bwmetal.element.baztech-d470b232-c3d7-48b7-a15b-29ba364cb0fb) celem rehydratacji jest przywrócenie materiałowi poddanemu suszeniu, poprzez jego kontakt z wodą, właściwości jakie miał przed tym zbiegiem. W trakcie procesu tkanki wysuszonego materiału chłoną wodę, co skutkuje zwiększeniem jego masy i objętości oraz wypłukiwaniem substancji, m.in. cukrów, kwasów, minerałów i witamin, z rehydratowanego surowca. Ubytek rozpuszczalnych składników suchej substancji podczas ponownego uwodnienia uzależniony jest przede wszystkim od składu chemicznego i struktury materiału. Proces ponownego uwodnienia drożdży jest kluczowy, aby mogły one odzyskać aktywność metaboliczną i przeprowadzić fermentację. Przeżywalność komórek podczas suszenia uzależniona jest od stanu w jakim były przed rozpoczęciem procesu. Istotny jest dobór odpowiednich parametrów rehydratacji, które w dużym stopniu uzależnione są od rodzaju użytego szczepu. Aktywne suszone drożdże zawierają około 8% wody. Jest to ilość niewystarczająca, aby komórki mogły odzyskać aktywność metaboliczną. Rehydratacja jest więc koniec znym procesem przed wprowadzeniem ich do brzeczki. Istnieje wiele czynników, które wywierają wpływ na żywotność drożdży podczas tego procesu. To m.in. wewnątrzkomórkowe stężenie trehalozy, długość i temperatura uwadniania, pH pożywki, obecność składników p okarmowych, mineralnych oraz dostępność ergosterolu. Wymienione czynniki mają wpływ na strukturę membrany przez modyfikację przepuszczalności, powodując zmiany w przepływie cząsteczek i jonów, które determinują stopień żywotności nawodnionych komórek drożdży. Temperatura rehydratacji aktywnych suszonych drożdży mieści się w zakresie 35-40°C.
Aby komórki zostały uwodnione w bezpiecznych warunkach wymagane jest by woda, w której przeprowadza się proces rehydratacji miała około 25 ppm zawartości minerałów. Gdy ich stężenie wewnątrz komórki drożdży jest wyższe niż w otaczającym środowisku, zgodnie z prawem osmozy, woda będzie napływać do jej środka, powodując rozerwanie. Z tego powodu, woda destylowana nie jest dobrym medium nawadniającym aktywne suszone drożdże. Jony wapnia i glukoza mogą przeciwdziałać nadmiernemu wypływowi substancji wewnątrzkomórkowych z rehydratowanych komórek. Pierwsze zwiększają sztywność konstrukcji membranowej, oddziałując na naprawę uszkodzonych błon cytoplazmatycznych. Glukoza natomiast przenikając do wnętrza komórki, stymuluje tworzenie się żeli białkowych, których obecność zapobiega dyfuzji substancji wewnątrzkomórkowych.
W procesie odwadniania, suszenia drożdży, utrata wody jest oczywistym i znaczącym stresem dla drożdży, a niektóre badania określają ją jako kluczowy czynnik, odpowiedzialny za zmniejszenie ich żywotności. Istnieje również wiele niekorzystnych czynników, takich jak stres oksydacyjny i osmotyczny. Wypływ i napływ wody z komórki podczas odwadniania i rehydratacji, może p owodować jej uszkodzenia i niszczyć samą strukturę błony komórkowej. Uważa się, że obkurczanie komórek może powodować ich rozerwanie w czasie stresu osmotycznego. Ponadto, prowadzi również do niepożądanych interakcji molekularnych w komórce. Istnieją mechanizmy u drożdży, które podnoszą ich odporność na stres osmotyczny. Błona komórkowa zawiera białka błonowe, tj. akwaporyny, które w pewnych okolicznościach mogą ułatwiać napędzany osmotycznie wypływ wody, zmniejszając uszkodzenie membrany. Pod wpływem szoku osmotycznego indukowany jest szlak kinaz MAP-HOG. Ma to na celu akumulację glicerolu w komórce, co skutkuje wyrównaniem osmolarności wewnątrz i na jej zewnątrz. Chroni to komórkę przed potencjalnymi uszkodzeniami związanymi ze zwiększonym ciśnieniem osmot ycznym.
Jak wynika z publikacji Włodzimierza Grajka i Darii Szymanowskiej, pt. Stresy środowiskowe działające na drożdże Saccharomyces cerevisiae w procesie fermentacji etanolowej, w: Prace przeglądowe, Uniwersytet Przyrodniczy, Poznań, 2008, str. 46-63, jednym z głównych metabolitów drożdży gromadzonych w komórce w sytuacjach stresowych jest trehaloza, a rolą tego cukru jest ochrona stabilności uwodnionych związków chemicznych oraz uszczelnianie błon, co zapobiega utracie elektrolitów i rozpuszczalnych składników komórkowych. Dodatkowo w procesie fermentacji na potrzeby produkcji alkoholu stosuje się w celu zmniejszenia stresu osmotycznego dwustopniową hydrolizę skrobi lub proces jednoczesnej hydrolizy skrobi i fermentacji etanolowej. Prowadzone są próby zmniejszania ciśnienia osmotycznego wywołanego przez etanol, polegające na ciągłym usuwaniu etanolu z fermentującego zacieru. Komórki ograniczają działanie stresu osmotycznego poprzez redukcję objętości komórek, co ma negatywny wpływ na żywotność komórek. Pod wpływem stresu osmotycznego, obok zmniejszenia powierzchni komórki, mogą wystąpić także uszkodzenia błony cytoplazmatycznej. Dotyczy to szczególnie zmian w białkach błonowych, które, przy silnym odwodnieniu wywołanym przez wiązanie wody przez zewnątrzkomórkową substancję osmogenną, ulegają denaturacji lub agregacji. Zmiany te można obserwować stosując spektroskopię transformacji Fouriera w podczerwieni. Substancje osmogenne, a szczególnie cukry i alkohole, wykazują działanie ochronne, stabilizujące cząsteczki białek. Innym efektem zmian w ciśnieniu osmotycznym są poprzeczne przemieszczenia kwasów tłuszczowych w dwuwarstwie fosfolipidowej.
W celu zmniejszenia stresu osmotycznego wytwarzane są zmodyfikowane genetycznie szczepy drożdży Saccharomyces cerevisiae o wysokiej odporności na stres osmotyczny.
Z opisu zgłoszeniowego CN112941119 znany jest sposób otrzymywania zmodyfikowanego szczepu Saccharomyces cerevisiae wytwarzającego ester etylowy kwasu tłuszczowego, który poprawia produkcję estrów etylowych kwasu tłuszczowego w drożdżach Saccharomyces cerevisiae, obejmujący m.in. etap fermentacji i hodowli Saccharomyces cerevisiae w czasie 30-40 godzin, w trakcie którego dodaje się 1-3% oleju rzepakowego oraz etanol z szybkością przepływu 6-10 ml/h; gdy stężenie glukozy jest niższe niż 4-6 g/L, rozpoczyna się suplementacja glukozą, a stężenie glukozy w fermentorze jest utrzymywane na poziomie 5-10 g/L. Po fermentacji otrzymuje się bulion fermentacyjny zawierający ester etylowy kwasu tłuszczowego. Podczas procesu fermentacji i hodowli pH utrzymuje się na poziomie 5-6, prędkość obrotowa 180-220 obr./min przez 30-40 godzin przed fermentacją, przepływ powietrza 2-3 vvm, prędkość obrotowa po 30-40 h wynosi 350-450 obr./min, a przepływ powietrza wynosi 4-6 vvm. Jako pożywkę fermentacyjną stosuje się: glukozę 50-70, YNB 6-7, proszek drożdżowy 15-20, pepton 2-4, K2HPO4 7-8, KH2PO4 9-10, kwas octowy 2-4.
Celem wynalazku ujawnionego w opisie zgłoszeniowym CN1944657A jest rozwiązanie problemu tolerancji alkoholu przez Saccharomyces cerevisiae w procesie fermentacji zacieru zagęszczającego alkohol oraz zmniejszenie toksycznego wpływu alkoholu o wysokim stężeniu na Saccharomyces cerevisiae, zapewniając w ten sposób sposób poprawy tolerancji Saccharomyces cerevisiae na alk ohol. Obecność kwasów tłuszczowych, zwłaszcza długołańcuchowych, w błonie komórkowej, może osłabiać wpływ etanolu na przepuszczalność błony komórkowej i zmniejszać wysięk lizatów wewnątrzkomórkowych. Tolerancja bakterii na alkohol wzrasta wraz ze wzrostem nienasycenia błon komórkowych kwasami tłuszczowymi. W wynalazku tym stosuje się proszek sojowy jako promotor fermentacji w fermentacji alkoholowej. Z jednej strony soja bogata w białko i kwasy tłuszczowe może sprawić, że Saccharomyces będą opierać się zwiększonej płynności błony spowodowanej przez alkohol i utrzymać stabilność błony komórkowej.
W opisie zgłoszeniowym JPS6460370A ujawniono sposób hodowli drożdży Saccharomyces cerevisiae, w którym do pożywki modyfikowanego szczepu dodaje się lipid - kwas tłuszczowy o 10-26 atomach węgla lub jego sól, korzystnie kwas mirystynowy, kwas palmitynowy, kwas palmitoleinowy, kwas oleinowy, kwas t-wacenowy, kwas linolowy i kwas arachidonowy i/lub regulator ciśnienia osmotycznego, np. sorbitol. Korzystnie lipid łączy się z regulatorem ciśnienia osmotycznego. Kwas tłuszczowy dodaje się do pożywki w stężeniu około 0,005-0,4% (wag./obj.), korzystnie 0,01-0,2%. Gdy doda się go w stężeniu mniejszym niż 0,005%, nie można uzyskać pożądanych efektów, a gdy zostanie dodany w stężeniu większym niż 0,4%, produkcja może się zmniejszyć. Chociaż kwas tłuszczowy na ogół dodaje się do pożywki w odpowiedniej ilości przed rozpoczęciem inkubacji, można go dodać na początkowym etapie inkubacji.
Z opisu patentowego PL218665 znany jest sposób otrzymywania mleczka drożdżowego na bazie drożdży, wody i substancji odżywczych, znamienny tym, że do zbiornika wlewa się wodę o temperaturze 20-35°C w ilości 50-70% ogólnej masy przygotowywanego mleczka i wrzuca się drożdże w ilości 30-50% ogólnej masy, po czym uruchamia się proces mieszania w czasie 1 do 2,5 godziny, a następnie w czasie 3 do 5 godzin dodaje się w ratach substancję odżywczą w ilości 0-15%, a do zbiornika poprzez przewody napowietrzające doprowadza się tlen.
Brak jest obecnie sposobów, które w sposób inny niż w drodze modyfikacji szczepu drożdży S. cerevisiae, pozwalają na wytworzenie biomasy charakteryzującej się znaczną akumulacją wielonienasyconych kwasów tłuszczowych: kwasu linolowego C18:2 n-6 oraz kwasu linolenowego C18:3 n-3 (ALA) w ścianie komórkowej drożdży S. cerevisiae oraz odpornością na stres osmotyczny.
Celem wynalazku jest rozwiązanie problemu technicznego dotyczącego biomasy drożdży S. cerevisiae polegającego na zwiększeniu odporności komórek drożdży S. cerevisiae na stres osmotyczny panujący w medium fermentacyjnym i zwiększeniu akumulacji wielonienasyconych kwasów tłuszczowych kwasu linolowego C18:2 n-6 oraz kwasu linolenowego C18:3 n-3 (ALA) w ścianie komórkowej drożdży S. cerevisiae.
Sposób otrzymywania biomasy drożdży Saccharomyces cerevisiae o zwiększonej odporności na stres osmotyczny, w którym prowadzi się proces rehydratacji suchej masy drożdży Saccharomyces cerevisiae w wodzie o temperaturze 20°C z dodatkiem substancji odżywczych i doprowadzaniem tlenu charakteryzuje się według wynalazku tym, że do suchej masy drożdży w ilości 0,98%-2,65% ogólnej masy przygotowywanej biomasy wlewa się wodę demineralizowaną w ilości 88,21-97,69% ogólnej masy przygotowywanej biomasy, zawierającą rozpuszczone jony wapnia w ilości 144-180 mg/dm3, potasu w ilości 286-716 mg/dm3, magnezu w ilości 100-160 mg/dm3, azotu amonowego w ilości 106-360 mg/dm3, cynku w ilości 45-68 mg/dm3 oraz glukozę w ilości 9,80-35,30 g/dm3, miesza się przez 5 godzin z prędkością 130 obr./min w temperaturze 20°C, a następnie po 5 godzinach dodaje się do mieszaniny estry etylowe kwasów tłuszczowych w ilości od 0,1% do 5% na 1 dm3 wody, a następnie kondycjonuje się biomasę mieszając składniki z prędkością 130 obr./min w ciśnieniu atmosferycznym od 30 000 do 80 000 Pa z udziałem tlenu. Korzystnie stosuje się estry etylowe kwasów tłuszczowych z oleju lnianego.
Korzystnie biomasę odwirowuje się, po czym mrozi się w temperaturze od -40°C do -75°C i następnie poddaje się procesowi liofilizacji przez 24 h w temperaturze 20°C i przy ciśnieniu 80-8 Pa.
Korzystnie biomasę odwirowuje się, po czym mrozi się w temperaturze od -40°C do -75°C i następnie poddaje procesowi liofilizacji przez 24 h w temperaturze 35°C i przy ciśnieniu 8-3 Pa.
Korzystnie uzyskuje się biomasę drożdży Saccharomyces cerevisiae w postaci mleczka albo w postaci suchej.
Istotą wynalazku jest także zastosowanie otrzymanej wyżej opisanym sposobem biomasy drożdży Saccharomyces cerevisiae jako dodatku spożywczego.
Istotą wynalazku jest także zastosowanie otrzymanej wyżej opisanym sposobem biomasy drożdży Saccharomyces cerevisiae jako suplementu diety.
Istotą wynalazku jest także zastosowanie otrzymanej wyżej opisanym sposobem biomasy drożdży Saccharomyces cerevisiae jako prekursora do otrzymywania biomasy fermentacyjnej o zwiększonych parametrach fermentacyjnych.
Sposób według wynalazku pozwala na znaczną akumulację kwasów tłuszczowych C18:2 n-6 oraz C18:3 n-3 (ALA) w komórkach drożdżowych, w taki sposób że:
- otrzymana biomasa w postaci mleczka może mieć zastosowanie jako prekursor do produkcji odpornej na niekorzystne warunki osmotyczne biomasy fermentacyjnej, jako dodatek spożywczy - w tym dodatek piekarski oraz jako suplement diety;
PL 243313 Β1
- otrzymana biomasa po procesie liofilizacji, tj. w postaci suchej, może pełnić funkcje zarówno jako środek spożywczy cechujący się wysoką zawartością łatwo-przyswajalnych wielonienasyconych kwasów tłuszczowych lub suplement diety, jak również jako osmoaktywna biomasa z zastosowaniem do fermentacji brzeczek o wysokiej zawartości cukrów.
Dzięki sposobowi według wynalazku pozwalającemu na kondycjonowanie drożdży S. cerevisiae w pożywce bogatej w estry etylowe kwasów tłuszczowych z oleju lnianego oraz cukry proste powstaje biomasa, która akumuluje w swojej ścianie komórkowej nienasycone kwasy tłuszczowe C18:2 n-6 oraz C18:3 n-3 (ALA). Akumulacja ta wpływa pozytywnie na zachowanie turgoru komórki - komórki nie odwadniają się w warunkach silnego stresu osmotycznego, zwiększenie dynamiki procesu - ilość gramów etanolu uzyskana ze 100 ml podłoża w trakcie 1 godziny.
Wynalazek został bliżej przedstawiony w przykładach realizacji:
Przykład 1a
Tabela 1 przedstawia kompozycję biomasy drożdży Saccharomyces cerevisiae w postaci mleczka drożdżowego, w której składniki zostały połączone z zastosowaniem minimalnego dozowania poszczególnych bioaktywnych substancji. Składniki mleczka przy zachowaniu odpowiednich warunków procesowania pozwalają na uzyskanie biomasy o wysokiej tolerancji na stresy osmotyczne. W zależności od celu produkcji biomasy można stosować różne dawkowanie estrów etylowych kwasów tłuszczowych oleju lnianego.
Tabela 1
Kompozycja biomasy drożdży Saccharomyces cerevisiae w postaci mleczka drożdżowego z zastosowaniem minimalnych dawek składników
Składnik Masa [g] Udział %
Drożdże Saccharomyces cerevisiae 10,0 0,98
Woda demineralizowana 1000,0 97,69
Chlorek wapnia 0,4 0,04
Wodorofosforan (V) potasu KH2PO4 1,0 0,10
Siarczan (VI) Amonu (NH4)2SO4 0,5 0,05
Siedmiowodny Siarczan (VI) Cynku 7 H2O x ZnSO4 0,2 0,02
Siarczan (VI) Magnezu MgSO4 0,5 0,05
Glukoza 10,0 0,98
Estry etylowe kwasów tłuszczowych oleju lnianego 1,0 0,10
Suma 1023,6 100,00
Drożdże szlachetne Saccharomyces cerevisiae przygotowuje się poprzez odważenie 10 g suchej masy. Suchą masę drożdży umieszcza się w bioreaktorze z mieszadłem (130 obr./min), dodaje się 1 dm3 wody demineralizowanej o temperaturze 20°C, zawierającej rozpuszczone jony: wapnia w ilości 144 mg/dm3, potasu w ilości 286 mg/dm3, magnezu w ilości 100 mg/dm3, azotu amonowego w ilości 106 mg/dm3, cynku w ilości 45 mg/dm3 oraz glukozę w ilości 9,80 g/dm3.
PL 243313 Β1
Prowadzi się proces rehydratacji drożdży przez 5 godzin zachowując stałą temperaturę płaszcza bioreaktora 20°C. Po wskazanym czasie dodaje się do mieszaniny estry etylowe kwasów tłuszczowych oleju lnianego w ilości 1 g estrów na 1 dm3 wody demineralizowanej, co stanowi stężenie 0,1%.
Następnie prowadzi się proces zgodnie z wytycznymi z Tabeli 2. Przez cały czas miesza się z częstotliwością 130 obr./min.
Tabela 2
Wytyczne dla procesu kondycjonowania biomasy drożdżowej
Czas trwania procesu Próżnia Napowietrzanie
2h Ciśnienie atmosferyczne 2 dm3/min
2h Próżnia 30 000 Pa 0 dm3/min
2h Ciśnienie atmosferyczne 2 dm3/min
2h Próżnia 30 000 Pa 0 dm3/min
Napowietrzanie biomasy prowadzi się przez odpowiedni króciec, powietrzem podanym przez pompkę lub z butli przy zachowaniu odpowiedniej czystości - bezpośrednio przed wlotem powietrza do bioreaktora, filtr 0,14 pm.
Przykład 1 b
Uzyskaną w Przykładzie 1a biomasę drożdży Saccharomyces cerevisiae w postaci mleczka drożdżowego wykorzystuje się bezpośrednio lub prowadzi się przetwarzanie celem uzyskania suchych drożdży.
Mleczko poddaje się rozdziałowi w rozdzielaczu. Faza niepolarna zbiera w górnej warstwie, natomiast faza wodna zawierająca komórki drożdżowe w dolnej warstwie rozdzielacza. Po rozdzieleniu faz płyn niezwłocznie poddaje się rozdzieleniu w baktofudze.
Do baktofugi pracującej przy obrotach 5000 obr./min podaje się strumień mleczka z natężeniem objętościowym 30 ml/min. Uzyskaną w ten sposób odwirowaną biomasę rozkłada się na tackach i mrozi szokowo w temperaturze -40°C przez 24 h.
Po tym czasie tacki umieszcza się w komorze liofilizatora. Liofilizację prowadzi się w temperaturze tacy 20°C, ciśnieniu 80 Pa, przez 24 h.
W wariancie wykonania odwirowaną biomasę rozkłada się na tackach i mrozi szokowo w temperaturze -75°C przez 24 h, a po tym czasie liofilizację prowadzi się w temperaturze tacy 20°C, ciśnieniu 8 Pa, przez 24 h.
Uzyskany po liofilizacji proszek pakuje się próżniowo stosując próżnię rzędu 3000 Pa.
Przykład 2a
Tabela 3 przedstawia kompozycję biomasy drożdży Saccharomyces cerevisiae w postaci mleczka drożdżowego, gdzie składniki zostały połączone z zastosowaniem maksymalnych dawek poszczególnych substancji. Składniki mleczka przy zachowaniu odpowiednich warunków procesowania pozwalają na uzyskanie biomasy o wysokiej tolerancji na stresy osmotyczne. W zależności od celu produkcji biomasy można stosować różne dawkowanie estrów etylowych kwasów tłuszczowych oleju lnianego.
PL 243313 Β1
Tabela 3
Kompozycja biomasy drożdży Saccharomyces cerevisiae w postaci mleczka drożdżowego z zastosowaniem maksymalnych dawek składników
Składnik Masa [gl Udział %
Drożdże Saccharomyces cerevisiae 30,0 2,65
Woda demineralizowana 1000,0 88,21
Chlorek wapnia 0,6 0,05
Wodorofosforan (V) potasu KH2PO4 3,0 0,26
Siarczan (VI) Amonu (NH4)2SO4 2,0 0,18
Siedmiowodny Siarczan (VI) Cynku 7 H2O x ZnSO4 0,4 0,04
Siarczan (VI) Magnezu MgSO4 0,9 0,08
Glukoza 40,0 3,53
Estry etylowe kwasów tłuszczowych oleju lnianego 56,7 5,00
Suma 1176,9 100,00
Drożdże szlachetne Saccharomyces cerevisiae SafSpirit M-1 przygotowuje się poprzez odważenie 30g suchej biomasy. Suchą masę drożdży umieszcza się w bioreaktorze z mieszadłem (130 obr./min), dodaje się 1 dm3 wody demineralizowanej o temperaturze 20°C, zawierającej rozpuszczone jony: wapnia w ilości 180 mg/dm3, potasu w ilości 716 mg/dm3, magnezu w ilości 160 mg/dm3, azotu amonowego w ilości 360 mg/dm3, cynku w ilości 68 mg/dm3 oraz glukozę w ilości 35,30 g/dm3.
Prowadzi się proces rehydratacji drożdży przez 5 godzin zachowując stałą temperaturę płaszcza bioreaktora 20°C. Po wskazanym czasie dodaje się do mieszaniny estry etylowe kwasów tłuszczowych oleju lnianego w ilości 56,7 g estrów na 1 dm3 wody demineralizowanej, co stanowi stężenie 5,0%.
Następnie prowadzi się proces zgodnie z wytycznymi z Tabeli 4. Przez cały czas miesza z częstotliwością 130 obr./min.
Tabela 4
Wytyczne dla procesu kondycjonowania biomasy drożdżowej
Czas trwania procesu Próżnia Napowietrzanie
2h Ciśnienie atmosferyczne 6 dm3/min
2h Próżnia 80 000 Pa 0 dm3/min
2h Ciśnienie atmosferyczne 6 dm3/min
2h Próżnia 80 000 Pa 0 dm3/min
Napowietrzanie biomasy prowadzi się przez odpowiedni króciec, powietrzem podanym przez pompkę lub z butli przy zachowaniu odpowiedniej czystości - bezpośrednio przed wlotem powietrza do bioreaktora, filtr 0,44 μm.
Przykład 2b
Uzyskaną w Przykładzie 2a biomasę drożdży Saccharomyces cerevisiae w postaci mleczka drożdżowego wykorzystuje się bezpośrednio lub prowadzi się przetwarzanie celem uzyskania suchych drożdży.
Mleczko poddaje się rozdziałowi w rozdzielaczu. Faza niepolarna zbiera się będzie w górnej warstwie, natomiast faza wodna zawierająca komórki drożdżowe w dolnej warstwie rozdzielacza. Po rozdzieleniu faz płyn niezwłocznie poddaje się rozdzieleniu w baktofudze.
Do baktofugi pracującej przy obrotach 12000 obr./min podaje się strumień mleczka z natężeniem objętościowym 300 ml/min. Uzyskaną w ten sposób odwirowaną biomasę rozkłada się na tackach i mrozi szokowo w temperaturze -40°C przez 24 h.
Po tym czasie tacki umieszcza się w komorze liofilizatora. Liofilizację prowadzi się w temperaturze tacy 35°C, ciśnieniu 8 Pa, przez 24 h.
W wariancie wykonania odwirowaną biomasę rozkłada się na tackach i mrozi szokowo w temperaturze -75°C przez 24 h, a po tym czasie liofilizację prowadzi się w temperaturze tacy 35°C, ciśnieniu 3 Pa, przez 24 h.
Uzyskany po liofilizacji proszek pakuje się próżniowo stosując próżnię rzędu 3000 Pa.
W kompozycjach wskazanych w Przykładach 1a,1b, 2a, 2b użyte zostały S. cerevisiae SafSpirit M-l - jednakże z uwagi na to, że drożdże S. cerevisiae mają podobne cechy i podobną budowę, a różnią się specyficznymi cechami gatunkowymi, wynalazek może mieć zastosowanie do innych niż SafSpirit M-l drożdży S. cerevisiae. Prawidłowość absorbcji kwasów C18:2 n-6 oraz C18:3 n-3 (ALA) będzie taką samą cechą wszystkich S. cerevisiae.
Przykład 3 - zastosowanie biomasy drożdży Saccharomyces cerevisiae jako suplementu diety
Wytworzono biomasę drożdży Saccharomyces cerevisiae w postaci mleczka drożdżowego zgodnie z procedurą opisaną w Przykładzie 1a albo 2a, stosując różne poziomy dozowania estrów etylowych kwasów tłuszczowych oleju lnianego, oznaczone BFO - brak dodatku estrów do kompozycji mleczka, BF1,25-1,25% dodatek estrów, BF2,50-2,50% dodatek estrów, BF3,75-3,75% dodatek estrów oraz BF5,00 - 5,00% dodatek estrów. Zaobserwowano istotne różnice pomiędzy zawartością kwasów C18:2 n-6 oraz C18:3 n-3 (ALA) oznaczonych w komórkach drożdży w zależności od poziomu dozowania estrów etylowych kwasów tłuszczowych z oleju lnianego do przygotowanych mleczek fermentacyjnych. Uzyskana biomasa po wysuszeniu była bogatym źródłem kwasów wielonienasyconych.
Na podstawie danych z Tabeli 5 można zaobserwować, że wraz ze wzrostem udziału estrów etylowych kwasów tłuszczowych pochodzących z oleju lnianego istotnie rósł w badanej biomasie poziom kwasów C18:2 n-6 oraz C18:3 n-3 (ALA) stanowiących frakcję wielonienasyconych niezbędnych kwasów tłuszczowych. Kwasy te pełnią istotną rolę dla prawidłowego funkcjonowania ludzkiego organizmu. Zastosowanie biomasy według wynalazku jako suplementu diety zawierającego wysoki udział tych kwasów tłuszczowych w formie związanej w biomasie może powodować ich istotnie lepsze wchłanianie w przewodzie pokarmowym.
PL 243313 Β1
Tabela 5
Profil kwasów tłuszczowych odwirowanych komórek drożdżowych
BFO [%1 BF1,25 [%1 BF2,50 Γ%1 BF3,75 [%1 BF5,00 r%i
C10:0 4,24 2,25 0,39 0,43 0,43
C16:0 24,64 18.69 22,14 18,78 14,97
C16:l 26,67 9,61 7,11 6,88 5,81
C18:0 16,12 11.59 15,25 10,44 8,10
C18:l 28.33 22.90 21,92 20,63 18,72
C18:2 n-6 0,01 6,11 5,29 8,38 9,62
C18:3 n-3 (ALA) 0,01 28,84 27,91 34,46 42,35
Przykład 4 - zastosowanie biomasy drożdży Saccharomyces cerevisiae jako dodatku spożywczego
Przygotowana biomasa drożdży Saccharomyces cerevisiae w postaci suchej zawierająca wysoki udział kwasów C18:2 n-6 oraz C18:3 n-3 (ALA) może stanowić dobry dodatek spożywczy zarówno w formie aktywnej, tj. w produktach, gdzie aktywność drożdży nie pogarsza ich cech sensorycznych ani przydatności do spożycia - np. produkty piekarskie, jak i w formie nieaktywnej biomasy, tj. biomasy w postaci suchej.
Forma nieaktywnej biomasy może mieć znacznie szersze zastosowanie ze względu na brak negatywnego wpływu na pogorszenie cech sensorycznych produktu oraz na wystąpienie ewentualnej fermentacji, która mogłaby obniżyć termin przydatności. Forma nieaktywna jest biologicznym nośnikiem kwasów C18:2 n-6 oraz C18:3 n-3 pozwalając na zwiększenie wartości żywieniowej produktu przy jednoczesnym braku negatywnego posmaku jełkości związanego z obecnością wolnych kwasów tłuszczowych. Nieaktywne drożdże wzbogacone w kwasy C18:2 n-6 oraz C18:3 n-3 mogą być korzystnie stosowane jako dodatek do:
- jog u rtów owocowych (0,1-1%),
- serów dojrzewających (0,5-1%), pieczywa pszennego i pszenno-żytniego (1-2%), pieczywa żytniego (0,5-1%), pasztetów (0,5-2%),
- wędlin dojrzewających (0,1-3%), przetworów owocowych i owocowo- warzywnych (0,1-1%).
Przykład 5 - zastosowanie biomasy drożdży Saccharomyces cerevisiae jako prekursora do otrzymywania biomasy fermentacyjnej o ulepszonych parametrach fermentacyjnych
Przygotowana biomasa drożdży Saccharomyces cerevisiae w postaci mleczka drożdżowego zawierająca wysoki udział kwasów C18:2 n-6 oraz C18:3 n-3 (ALA) może stanowić prekursor do otrzymywania biomasy fermentacyjnej o ulepszonych parametrach fermentacyjnych.
Fermentacje okresowe przygotowano w następujący sposób:
Do kolb 300ml przeniesiono ilościowo po 10 ml inokulum w postaci biomasy drożdży Saccharomyces cerevisiae w postaci mleczka drożdżowego otrzymanego w Przykładzie 2 inkubowanego 24 h w temp. 20°C. Następnie dodano do każdej próbki fermentacji okresowej BF (Batch Fermentation) estrów etylowych kwasów tłuszczowych z oleju lnianego w ilości: BFO (0,00%), BF1,25 (1,25%), BF2,50 (2,50%), BF3,75 (3,75%) oraz BF5,00 (5,00%).
Fig. 1 przedstawia dynamikę fermentacji dla procesów okresowych. Można zaobserwować znacznie niższą dynamikę procesu w przypadku nastawu BFO, który był przygotowany z inokulum drożdży nie suplementowanych estrami kwasów tłuszczowych. Dla nastawów suplementowanych estrami notowano znacznie wyższą dynamikę fermentacji, maksimum notowano w 47 godzinie procesu dla nastawu BF3,75.
PL 243313 Β1
Tabela 6 przedstawia wpływ suplementacji estrami etylowymi kwasów tłuszczowych na poprawę akumulacji wielonienasyconych kwasów tłuszczowych: kwasu linolowego C18:2 n- 6 oraz kwasu linolenowego C18:3 n-3 (ALA) w ścianie komórkowej drożdży S. cerevisiae oraz poprawę odporności na stres osmotyczny. Oznaczono znacznie wyższe stężenie alkoholu etylowego (11,39%) w nastawie BF5,00 zawierającym 5% dodatek estrów do biomasy niż BFO (10,39%), komórki suplementowane istotnie w większym stopniu akumulowały glicerol jako czynnik osmoprotekcyjny. Również średnica komórek drożdżowych w nastawach suplementowanych znacznie różniła się od wartości uzyskanych w próbie zerowej.
Tabela 6
Efekty fermentacji dla nastawów suplementowanych estrami etylowymi kwasów tłuszczowych z oleju lnianego
BFO BF1,25 BF2,50 BF3,75 BF5,00
Etanol [% v/vj 10,39± 10,97 ± 11,17 ± 11,21 ± 11,39 ±
0,20 0,24 0,31 0,14 0,18
Glicerol [g -dm'3] 8,11 ±0,07 8,40 ±0,10 8,69 ± 0,09 8,66 ±0,14 9,03 ±0,11
Rozmiar komórek ________[EEJ________ 5,17 ±0,11 5,30 ±0,06 5,40 ±0,16 5,37 ±0,21 5,80 ± 0,24
Zastrzeżenia patentowe

Claims (9)

1. Sposób otrzymywania biomasy drożdży Saccharomyces cerevisiae o zwiększonej odporności na stres osmotyczny, w którym prowadzi się proces rehydratacji suchej masy drożdży Saccharomyces cerevisiae w wodzie o temperaturze 20°C z dodatkiem substancji odżywczych i doprowadzaniem tlenu, znamienny tym, że do suchej masy drożdży w ilości 0,98%-2,65% ogólnej masy przygotowywanej biomasy wlewa się wodę demineralizowaną w ilości 88,21-97,69% ogólnej masy przygotowywanej biomasy, zawierającą rozpuszczone jony wapnia w ilości 144-180 mg/dm3, potasu w ilości 286-716 mg/dm3, magnezu w ilości 100-160 mg/dm3, azotu amonowego w ilości 106-360 mg/dm3, cynku w ilości 45-68 mg/dm3 oraz glukozę w ilości 9,80-35,30 g/dm3, miesza się przez 5 godzin z prędkością 130 obr./min w temperaturze 20°C, a następnie po 5 godzinach dodaje się do mieszaniny estry etylowe kwasów tłuszczowych w ilości od 0,1% do 5% na 1 dm3 wody, a następnie kondycjonuje się biomasę mieszając składniki z prędkością 130 obr./min w ciśnieniu atmosferycznym od 30 000 do 80 000 Pa z udziałem tlenu.
2. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że stosuje się estry etylowe kwasów tłuszczowych z oleju lnianego.
3. Sposób według zastrz. 1, albo 2, znamienny tym, że biomasę odwirowuje się, po czym mrozi się w temperaturze od -40°C do -75°C i następnie poddaje się procesowi liofilizacji przez 24 h w temperaturze 20°C i przy ciśnieniu 80-8 Pa.
4. Sposób według zastrz. 1, albo 2, znamienny tym, że biomasę odwirowuje się, po czym mrozi się w temperaturze od -40°C do -75°C i następnie poddaje procesowi liofilizacji przez 24 h w temperaturze 35°C i przy ciśnieniu 8-3 Pa.
5. Sposób według któregokolwiek z zastrz. od 1 do 4, znamienny tym, że uzyskuje się biomasę drożdży Saccharomyces cerevisiae w postaci mleczka.
6. Sposób według któregokolwiek z zastrz. 1 oraz 3 i 4, znamienny tym, że uzyskuje się biomasę drożdży Saccharomyces cerevisiae w postaci suchej.
7. Zastosowanie biomasy drożdży Saccharomyces cerevisiae otrzymanej sposobem zdefiniowanym w którymkolwiek z zastrz. 1-6 jako dodatek spożywczy.
8. Zastosowanie biomasy drożdży Saccharomyces cerevisiae otrzymanej sposobem zdefiniowanym w którymkolwiek z zastrz. 1-6 jako suplement diety.
9. Zastosowanie biomasy drożdży Saccharomyces cerevisiae otrzymanej sposobem zdefiniowanym w którymkolwiek z zastrz. 1-6 jako prekursor do otrzymywania biomasy fermentacyjnej o zwiększonych parametrach fermentacyjnych.
PL441114A 2022-05-06 2022-05-06 Sposób otrzymywania biomasy drożdży Saccharomyces cerevisiae o zwiększonej odporności na stres osmotyczny i zastosowanie biomasy PL243313B1 (pl)

Priority Applications (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL441114A PL243313B1 (pl) 2022-05-06 2022-05-06 Sposób otrzymywania biomasy drożdży Saccharomyces cerevisiae o zwiększonej odporności na stres osmotyczny i zastosowanie biomasy
EP22216642.3A EP4273221A1 (en) 2022-05-06 2022-12-23 Method of obtaining saccharomyces cerevisiae yeast biomass with increased resistance to osmotic stress and application of the biomass

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL441114A PL243313B1 (pl) 2022-05-06 2022-05-06 Sposób otrzymywania biomasy drożdży Saccharomyces cerevisiae o zwiększonej odporności na stres osmotyczny i zastosowanie biomasy

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL441114A1 PL441114A1 (pl) 2022-11-21
PL243313B1 true PL243313B1 (pl) 2023-07-31

Family

ID=84191852

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL441114A PL243313B1 (pl) 2022-05-06 2022-05-06 Sposób otrzymywania biomasy drożdży Saccharomyces cerevisiae o zwiększonej odporności na stres osmotyczny i zastosowanie biomasy

Country Status (2)

Country Link
EP (1) EP4273221A1 (pl)
PL (1) PL243313B1 (pl)

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2825715B1 (fr) * 2001-06-08 2004-07-16 Lallemand Sa Methode de stimulation de levures seches actives pour la fermentation alcoolique, procede de fermentation utilisant cette methode, et boissons fermentees obtenues
CN1944657A (zh) 2006-10-26 2007-04-11 天津科技大学 提高酿酒酵母酒精耐性的方法
CN112941119B (zh) 2021-01-22 2022-08-30 江南大学 一种提高酿酒酵母工程菌脂肪酸乙酯产量的方法

Also Published As

Publication number Publication date
EP4273221A1 (en) 2023-11-08
PL441114A1 (pl) 2022-11-21

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US5374657A (en) Microbial oil mixtures and uses thereof
JP6807329B2 (ja) ω−7脂肪酸合成物、及び黄緑色藻を培養して該合成物を生産する方法と応用
RU2120998C1 (ru) Способ получения масла, содержащего арахидоновую кислоту, немодифицированное микробное масло, способ обеспечения арахидоновой кислотой смеси для детского питания, косметическая композиция, питание или питательная добавка, способ лечения людей и смесь для детского питания
JP6055469B2 (ja) 藻類脂質組成物ならびにその調製方法および利用方法
WO2010097809A2 (en) Improved methods for fermentative production of docosahexaenoic acid
US20210363554A1 (en) Methods of oil production in microorganisms
CN103882071B (zh) 一种微生物油及其制备方法
KR20220088912A (ko) 스키조키트리움 및 그 응용, Sn-2 DHA가 풍부한 미생물 유지 및 그것의 제조 방법과 응용
CN101914581B (zh) 一种提高多烯不饱和脂肪酸发酵产量的方法
CN110800871A (zh) 裂壶藻粉在提高反刍动物乳汁中dha含量的应用
PL243313B1 (pl) Sposób otrzymywania biomasy drożdży Saccharomyces cerevisiae o zwiększonej odporności na stres osmotyczny i zastosowanie biomasy
CN114032259B (zh) 一种酵母菌的高密度发酵及十六碳烯酸提取方法
CN110235960B (zh) 富含均衡不饱和脂肪酸的橄榄油衍生物的制备及应用
Glatz et al. Fermentation of bananas and other food wastes to produce microbial lipid
Cao et al. Arachidonic acid production by Mortierella alpina using raw crop materials
CN104046661B (zh) 脉孢霉转化菜籽饼粕获得的生物培养基的制备方法及其应用
CN105713936B (zh) 微生物油的制备方法
Laopaiboon et al. Ethanol production from sweet sorghum juice under very high gravity fermentation by Saccharomyces cerevisiae: aeration strategy and its effect on yeast intracellular composition
TWI700043B (zh) 由益生菌與植酸酶組合發酵之麩皮製成之飼料添加組成物,其製法及其用於降低家禽發炎反應之應用
CN118222644A (zh) 提高产油微生物的油脂含量的方法和微生物油脂的制备方法
CN112760242A (zh) 一株联产油脂与葡萄糖酸的产油酵母菌及其应用
BR102015018119A2 (pt) Process of biomass rich production in pigs for use in animal nutrition and / or fish employing agricultural waste amilace
CN115336693A (zh) 一种蜂花粉发酵运动饮料及其制备方法
CN116849257A (zh) 一种刺梨薏仁米酸奶及其制备方法
KR20150127373A (ko) 복합 잣 생균제 제조방법 및 상기 제조방법에 의해 제조된 복합 잣 생균제