PL218060B1 - Nowy 3-p-(1,2-diacylo-sn-glicero-3-fosfo)-7a-hydroksy-androst-5-en-17-on i sposób jego otrzymywania - Google Patents

Nowy 3-p-(1,2-diacylo-sn-glicero-3-fosfo)-7a-hydroksy-androst-5-en-17-on i sposób jego otrzymywania

Info

Publication number
PL218060B1
PL218060B1 PL391089A PL39108910A PL218060B1 PL 218060 B1 PL218060 B1 PL 218060B1 PL 391089 A PL391089 A PL 391089A PL 39108910 A PL39108910 A PL 39108910A PL 218060 B1 PL218060 B1 PL 218060B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
diacyl
glycero
androst
phospho
hydroxy
Prior art date
Application number
PL391089A
Other languages
English (en)
Other versions
PL391089A1 (pl
Inventor
Damian Smuga
Małgorzata Smuga
Czesław Wawrzeńczyk
Anna Panek
Alina Świzdor
Original Assignee
Univ Przyrodniczy We Wrocławiu
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Univ Przyrodniczy We Wrocławiu filed Critical Univ Przyrodniczy We Wrocławiu
Priority to PL391089A priority Critical patent/PL218060B1/pl
Publication of PL391089A1 publication Critical patent/PL391089A1/pl
Publication of PL218060B1 publication Critical patent/PL218060B1/pl

Links

Landscapes

  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Description

Przedmiotem wynalazku jest nowy 3-β-(1,2-dipalmitoilo-sn-glicero-3-fosfo)-7a-hydroksy-androst-5-en-17-on o wzorze 3 przestawionym na rysunku i sposób jego wytwarzania.
Związek ten może znaleźć zastosowanie w przemyśle farmaceutycznym jako potencjalny nutraceutyk.
Związek 7a-hydroksydehydroepiandrosteron (7a-OH-DHEA) jest metabolitem dehydroepiandrosteronu (DHEA). Jest on naturalną substancją wytwarzaną w korze nadnerczy, gruczołach płciowych, w mózgu oraz obecny jest w wielu innych tkankach, takich jak skóra, serce oraz w komórkach nowotworowych (Y. Matsuzaki, A. Honda, Current Pharmaceutical Design, 2006, 12, s. 3411-3421). W porównaniu do DHEA, 7a-OH-DHEA nie jest bezpośrednio biotransformowany do hormonów płciowych, jednak posiada szerokie spektrum właściwości oraz aktywności fizjologicznych analogicznych do DHEA. 7α-hydroksydehydroepiandrosteron stymuluje układ immunologiczny, może być pomocny w leczeniu reumatologicznego zapalenia stawów. Ponadto, 7α-OH-DHEA jest efektywnym antyglukokortykoidem, dzięki czemu może być pomocny w zwalczaniu stresu, otyłości, hamowaniu procesów starzenia, a także może być użyteczny w zapobieganiu zakażeniom bakteryjnym, wirusowym oraz procesom notoworzenia (D. L. Auci, C. L. Reading, J. M. Frincke, Autoimmunity Reviews, 2009, 8, s. 369-372., M. Kalimi, Y. Shafagoj, R. Loria, D. Padgett, W. Regelson, Molecular and Cellular Biochemistry, 1994, 131, s. 99-104., Y. Matsuzaki, A. Honda, Current Pharmaceutical Design, 2006, 12, s. 3411-3421).
Nowy związek, 3-β-(1,2-diacylo-sn-glicero-3-fosfo)-7α-hydroksy-androst-5-en-17-on, wzór 3, jest pochodną aktywnego biologicznie kwasu fosfatydowego, otrzymanego z fosfatydylocholiny. Kwas fosfatydowy pełni funkcję prekursora w biosyntezie wielu fosfolipidów, między innymi 1,2-diacyloglicerolu, czy kwasu lizofosfatydowego. Uczestniczy również w wielu procesach biologicznych jako cząsteczka sygnałowa. Ponadto, kwas fosfatydowy otrzymany na drodze enzymatycznej hydrolizy lecytyny z żółtka jaja kurzego jest źródłem egzogennych nienasyconych kwasów tłuszczowych (kwasu linolowego, arachidonowego oraz dekozaheksaenowego), które są niezbędnym elementem diety człowieka.
W literaturze nie napotkano informacji na temat otrzymania 3-β-(1,2-diacylo-sn-glicero-3-fosfo)-7α-hydroksy-androst-5-en-17-onu.
Istotą wynalazku jest nowy 3-β-(1,2-diacylo-sn-glicero-3-fosfo)-7α-hydroksy-androst-5-en-17-on, o wzorze 3 przedstawionym na rysunku.
Istotą wynalazku jest także sposób otrzymywania 3-β-(1,2-diacylo-sn-glicero-3-fosfo)-7αhydroksy-androst-5-en-17-onu o wzorze 3 przedstawionym na rysunku. Sposób polega na tym, że z żółtka jaja izoluje się fosfatydylocholinę, którą następnie poddaje się enzymatycznej hydrolizie z udziałem fosfolipazy D. Otrzymany kwas 1,2-diacylo-sn-glicero-3-fosfatydowy albo sól monopirydyniową tego kwasu, o wzorze 1, gdzie X+ jest odpowiednio kationem wodorowym albo pirydyniowym, poddaje się estryfikacji z dehydroepiandrosteronem z udziałem odczynnika sprzęgającego w bezwodnej pirydynie.
Korzystniej jest, gdy odczynnikiem sprzęgającym jest N,N'-dicykloheksylokarbodiimid.
Sposób według wynalazku przedstawiony jest dokładniej w przykładzie wykonania.
P r z y k ł a d 3
W 200 mM buforze Tris-HCl o pH 8,0 (8 cm3) zawierającym 80 mM CaCl2 zawiesza się fosfatydylocholinę (760 mg, 1 mmol), wyizolowaną z żółtka jaja kurzego metodą opisaną przez L. Palacios i T. Wang (J. Am. Oil Chem. Soc, 2005, 82, s. 571-578). Do otrzymanej mieszaniny dodaje się chlorek 3 metylenu (16 cm3), a następnie 160 U fosfolipazy D ze Streptomyces chromofuscus. Reakcję prowadzi się w temperaturze 308K, w zaciemnieniu, w atmosferze azotu, w warunkach intensywnego mie3 szania. Po 16 godz. do mieszaniny reakcyjnej dodaje się 0,2M EDTA (5 cm3), a następnie mieszaninę doprowadza się do pH < 1 za pomocą 2M HCl. Po rozdzieleniu warstw frakcję wodną ekstrahuje się trzykrotnie mieszaniną CHCl3:MeOH (2:1% objętościowych) (3 x 25 cm3). Połączone frakcje organiczne osusza się za pomocą siarczanu magnezu i po odsączeniu środka suszącego rozpuszczalnik odparowuje się pod zmniejszonym ciśnieniem. Surowy produkt oczyszcza się za pomocą chromatografii kolumnowej na żelu krzemionkowym (eluent: CHCl3:MeOH:H2O, gradient od 65:25:0 do 65:25:4% objętościowych). Oczyszczony związek rozpuszcza się w mieszaninie CHCl3:MeOH:H2O (5:4:1% objętościowych) i nanosi się na kolumnę DOWEX 50WX8 (forma H+) i wymywa tą samą mieszaniną. Po odparowaniu rozpuszczalników, kwas fosfatydowy rozpuszcza się w mieszaninie chloroPL 218 060 B1 form:metanol:woda:pirydyna (3:3:1:1% objętościowych), nanosi na kolumnę DOWEX 50WX8 (forma pirydyniowa) i wymywa tą samą mieszaniną rozpuszczalników. Rozpuszczalniki odparowuje się pod zmniejszonym ciśnieniem, a suchą pozostałość odparowuje się trzykrotnie z toluenem. Otrzymuje się 542 mg kwasu 1,2-diacylo-sn-glicero-3-fosfatydowego w formie soli monopirydyniowej, wzór 1 (0,72 mmol, wydajność 72%). Czystość (> 99%) określono za pomocą HPLC (detektor Corona CAD; kolumna Thermo Betasil DIOL 150 x 2,1 mm; 5 μm, eluent: heksan:2-propanol:1% HCOOH + 0,1% Et3N w wodzie, w gradiencie: 0 min. 40:56:4; 3 min. 40:56:4; 7 min. 40:52:8; 18 min. 40:52:8; 25 min. 40:50:10; 25.5 min. 40:56:4; 35 min. 40:56:4).
Dane spektroskopowe otrzymanego związku są następujące:
1H NMR (600 MHz, CDCl3:MeOD 2:1 v/v) δ 0,89 (t, J = 5,2 Hz, 8H, 2 x CH3-), 1,24-1,41 (m, 44H, 22 x -CH2-), 1,48-1,76 (m, 4H, 2 x CH2-3), 1,92-2,15 (m, 4H, 2 x CH2-CH=CH-), 2,22-2,42 (m, 4H, 2 x CH2-COO), 2,80 (m, 1H, =CH-CH2-CH=), 4,02-4,13 (m, 2H, CH2-3), 4,19 (dd, J = 12,0 Hz, J = 6,9 Hz, 1H, jeden z CH2-1), 4,44 (m, 1H, jeden z CH2-1), 5,28 (m, 1H, CH-2), 5,31-5,49 (m, 2H, -CH=CH-);
31P NMR (243 MHz, CDC^MeOD 2:1 v/v) δ -1,45.
Analizę składu kwasów tłuszczowych w kwasie 1,2-diacylo-sn-glicero-3-fosfatydowym dokonano na drodze transestryfikacji za pomocą 0,2M CH3ONa w metanolu. Otrzymane estry metylowe analizowano za pomocą chromatografii gazowej. Profil kwasów tłuszczowych w kwasie 1,2-di-O-acylo-sn-glicero-3-fosfatydowym przedstawiono w tabeli 1.
T a b e l a 1
Rodzaj kwasu tłuszczowego Kwas
Palmitynowy 16:0 Palmitoleinowy 16:1 Steary- arynowy 18:0 Ole- inowy 18:1 Lino- lowy 18:2 Arachidonowy 20:4 Dekozaheksaenowy 22:6
Zawartość [%] 30 1 18 29 17 3 2
Mieszaninę soli monopirydyniowej kwasu 1,2-diacylo-sn-glicero-3-fosfatydowego (90 mg, 0,12 mmol) i 7a-OH-DHEA (24 mg, 0,08 mmol) osusza się przez trzykrotne odparowanie pod zmniejszonym ciśnieniem z mieszaniną bezwodnych rozpuszczalników chlorek metylenu benzen (1:1% objęto33 ściowych) (3 x 5 cm3) Następnie, mieszaninę rozpuszcza się w 1 cm3 bezwodnej pirydyny, dodaje się 3 jako odczynnik sprzęgający N,N-dicykloheksylokarbodiimid (49 mg, 0,24 mmol) rozpuszczony w 1 cm3 bezwodnej pirydyny i miesza w temperaturze pokojowej w atmosferze azotu, bez dostępu światła 3 przez 48 godzin. Po tym czasie, dodaje się do mieszaniny reakcyjnej 0,1 cm3 wody destylowanej, odsącza się osad i odparowuje się rozpuszczalnik pod zmniejszonym ciśnieniem Surowy produkt oczyszcza się za pomocą chromatografii kolumnowej na żelu krzemionkowym (eluent chloroform metanol w gradiencie 98:2 90:10% objętościowych). Otrzymany produkt rozpuszcza się w mieszaninie chloroform metanol woda (5:4:1% objętościowych), nanosi na kolumnę DOWEX 50WX8 (forma NH4+) i wymywa się tą samą mieszaniną rozpuszczalników Otrzymuje się 3-e-(1,2-diacylo-sn-glicero-3-fosfo)-7α-hydroksy-androst-5-en-17-on w formie soli amonowej, wzór 3 (45 mg, 0,047 mmol) z wydajnością 59%) (w przeliczeniu na 7α-OH-DHEA) Czystość związku (98%) określono za pomocą HPLC (detektor Corona CAD, kolumna Thermo Betasil DIOL 150 x 2,1 mm; 5 μm, eluent: heksan:2-propanol:1% HCOOH + 0,1% Et3N w wodzie, w gradiencie: 0 min. 40:56:4; 3 min. 40:56:4; 7 min. 40:52:8; 18 min. 40:52:8; 25 min. 40:50:10; 25.5 min. 40:56:4; 35 min. 40:56:4).
Dane spektroskopowe otrzymanego produktu są następujące:
1H NMR (600 MHz, CDCl3:MeOD 2:1 v/v) δ 0,89 (t, J = 7,2 Hz, 6H, 2 x CH3- od kwasów), 0,90 (s, 3H, CH3-18), 1,03 (s, 3H, CH3-19), 1,21-1,40 (m, 46H, 22 x CH2 od kwasów), 1,57-1,65 (m, 4H, 2 x CH2-3 od kwasu), 2,28-2,36 (m, 4H, 2 x CH2-COO od kwasu), 2,74-2,90 (m, 1H, =CH-CH2-CH= od kwasów), 3,91 (m, 1H, H-7), 3,94-4,02 (m, 3H, CH2-3', H-3), 4,18 (m, 1H, H-1'), 4,42 (m, 1H, H-1), 5,23 (m, 1H, H-2'), 5,29-5,45 (m, 2H, -CH=CH- od kwasów), 5,62 (dd, J = 5,3, 1,5 Hz, 1H,H-6);
31P NMR (243 MHz, CDCl3:MeOD 2:1 v/v) δ -1,90.

Claims (3)

1. Nowy 3-e-(1,2-diacylo-sn-glicero-3-fosfo)-7a-hydroksy-androst-5-en-17-on, o wzorze 3 przedstawionym na rysunku, gdzie R oznacza mieszaninę kwasów palmitynowego, palmitoleinowego, stearynowego, oleinowego, linolowego, arachidonowego, dekozaheksaenowego.
2. Sposób otrzymywania nowego 3-e-(1,2-diacylo-sn-glicero-3-fosfo)-7a-hydroksy-androst-5-en-17-onu, o wzorze 3, gdzie R oznacza mieszaninę kwasów palmitynowego, palmitoleinowego, stearynowego, oleinowego, linolowego, arachidonowego, dekozaheksaenowego, znamienny tym, że z żółtka jaja izoluje się fosfatydylocholinę, którą poddaje się enzymatycznej hydrolizie z udziałem fosfolipazy D, po czym otrzymany kwas 1,2-diacylo-sn-glicero-3-fosfatydowy albo sól monopirydyniową tego kwasu, o wzorze 1, gdzie X+ jest odpowiednio kationem wodorowym albo pirydyniowym, poddaje się estryfikacji z dehydroepiandrosteronem z udziałem odczynnika sprzęgającego w bezwodnej pirydynie.
3. Sposób według zastrz. 2, znamienny tym, że odczynnikiem sprzęgającym jest N-dicykloheksylokarbodiimid.
PL391089A 2010-04-28 2010-04-28 Nowy 3-p-(1,2-diacylo-sn-glicero-3-fosfo)-7a-hydroksy-androst-5-en-17-on i sposób jego otrzymywania PL218060B1 (pl)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL391089A PL218060B1 (pl) 2010-04-28 2010-04-28 Nowy 3-p-(1,2-diacylo-sn-glicero-3-fosfo)-7a-hydroksy-androst-5-en-17-on i sposób jego otrzymywania

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL391089A PL218060B1 (pl) 2010-04-28 2010-04-28 Nowy 3-p-(1,2-diacylo-sn-glicero-3-fosfo)-7a-hydroksy-androst-5-en-17-on i sposób jego otrzymywania

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL391089A1 PL391089A1 (pl) 2010-10-11
PL218060B1 true PL218060B1 (pl) 2014-10-31

Family

ID=43013943

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL391089A PL218060B1 (pl) 2010-04-28 2010-04-28 Nowy 3-p-(1,2-diacylo-sn-glicero-3-fosfo)-7a-hydroksy-androst-5-en-17-on i sposób jego otrzymywania

Country Status (1)

Country Link
PL (1) PL218060B1 (pl)

Also Published As

Publication number Publication date
PL391089A1 (pl) 2010-10-11

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US9708354B2 (en) Methods for the synthesis of sphingomyelins and dihydrosphingomyelins
EP0161519B1 (de) Derivate des Glycerophosphocholins und Glycerophosphoethanolamins, ihre Herstellung und Verwendung
EP2554546B1 (en) Pyripyropene derivatives having acat2 inhibiting activity and stable to metabolizing enzymes
Zavarzin et al. Synthesis and biological activity of new avermectin 5-O-and 4 ″-O-acyl derivatives
PL218060B1 (pl) Nowy 3-p-(1,2-diacylo-sn-glicero-3-fosfo)-7a-hydroksy-androst-5-en-17-on i sposób jego otrzymywania
Kłobucki et al. Syntheses and antiproliferative activities of novel phosphatidylcholines containing dehydroepiandrosterone moieties
Wang et al. Synthesis of mixed-chain phosphatidylcholines including coumarin fluorophores for FRET-based kinetic studies of phospholipase A2 enzymes
Rosseto et al. Synthesis of phospholipids on a glyceric acid scaffold: design and preparation of phospholipase A2 specific substrates
Rosseto et al. Synthesis of phosphatidylcholine analogues derived from glyceric acid: a new class of biologically active phospholipid compounds
Ni et al. Synthesis and evaluation of immunostimulant plasmalogen lysophosphatidylethanolamine and analogues for natural killer T cells
EP0497234A2 (en) Phosphatidylinositol analogues, inhibitors of phosphatidyl-inositol-specific phospholipase C
Mäntylä et al. Design, synthesis and in vitro evaluation of novel water-soluble prodrugs of buparvaquone
DE69621463T2 (de) Verfahren zum ausgewähltem schutz von baccatinderivaten und ihre verwendung für die synthese von taxanen
PL218059B1 (pl) Nowy 3-p-(1,2-diacylo-sn-glicero-3-fosfo)-androst-5-en-17-on i sposób jego otrzymywania
PL217997B1 (pl) Nowy 3-p-(1,2-dipalmitoilo-sn-glicero-3-fosfo)-7a-hydroksy-androst-5-en-17-on i sposób jego otrzymywania
PL228423B1 (pl) 1’-(3,7,11,15-Tetrametylo-3-winyloheksadecylo)-2’-hydroksy-snglicero- 3’-fosfatydylocholina i sposób jej otrzymywania
Yamamoto et al. A study of synthetic approaches to 2-acyl DHA lysophosphatidic acid
DE112014001871B4 (de) Verfahren zur Herstellung von 3,4,5-Tricaffeoylchinasäure
KR101019728B1 (ko) 라세믹 또는 광학적으로 활성이 있는 α―포스파티딜콜린 유도체의 제조방법
Keshavarz et al. Activity-based targeting of secretory phospholipase A2 enzymes: A fatty-acid-binding-protein assisted approach
Nussbaumer et al. An efficient, one-pot synthesis of various ceramide 1-phosphates from sphingosine 1-phosphate
PL217381B1 (pl) Nowa diacylo-sn-glicero-3-fosfocholina oraz sposób jej otrzymywania
Haritha et al. A novel synthesis of amino acid derivatives of phospholene oxides
Bartel et al. Synthesis of enantiomerically pure, sn-1 modified sn-2-deoxy-2-amido-glycero-3-phospholipids
PL226324B1 (pl) 1-Palmitoilo-2-cytroneloilo-sn-glicero-3-fosfocholina oraz sposób jej otrzymywania

Legal Events

Date Code Title Description
LICE Declarations of willingness to grant licence

Effective date: 20140416