PL218059B1 - Nowy 3-p-(1,2-diacylo-sn-glicero-3-fosfo)-androst-5-en-17-on i sposób jego otrzymywania - Google Patents
Nowy 3-p-(1,2-diacylo-sn-glicero-3-fosfo)-androst-5-en-17-on i sposób jego otrzymywaniaInfo
- Publication number
- PL218059B1 PL218059B1 PL391087A PL39108710A PL218059B1 PL 218059 B1 PL218059 B1 PL 218059B1 PL 391087 A PL391087 A PL 391087A PL 39108710 A PL39108710 A PL 39108710A PL 218059 B1 PL218059 B1 PL 218059B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- glycero
- androst
- phospho
- diacyl
- acid
- Prior art date
Links
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Description
Przedmiotem wynalazku jest nowy 3-e-(1,2-dipalmitoilo-sn-glicero-3-fosfo)-androst-5-en-17-on o wzorze 3 przestawionym na rysunku i sposób jego wytwarzania.
Związek ten może znaleźć zastosowanie w przemyśle farmaceutycznym jako potencjalny nutraceutyk.
Znany jest sposób otrzymywania pochodnej 3-β-(1,2-dipalmitoilo-sn-glicero-3-fosfo)-androst-5-en-17-onu zawierającej w resztach kwasów tłuszczowych kwas palmitynowy. Związek 3-β-(1,2-όΐpalmitoilo-sn-glicero-3-fosfo)-androst-5-en-17-on został otrzymany na drodze estryfikacji kwasu 1,2-dipalmitoilo-sn-glicero-3-fosfatyfowego z dehydroepiandrosteronem (DHEA), z użyciem chlorku kwasu mezytylenosulfonowego przez J. R. Williams i J. C. Boehm (Steroids, 1995, 60, s. 333-336), a także z użyciem, jako odczynnika sprzęgającego, N,N'-dicykloheksylokarbodiimidu przez G. W. Oertel i P. Benes J. (Steroid Biochem., 1972, 3 (6), s. 903-905).
Dehydroepiandrosteron jest wytwarzany przez korę nadnerczy wraz z metabolitem - estrem siarczanowym DHEA-S. Jest on jednym z kluczowych hormonów u ludzi i ssaków. Związek ten jest również syntezowany de novo w mózgu, gdzie pełni funkcję neuroaktywnego neurosteroidu (N. A. Compagnone, S. H. Mellon, Front. Neuroendocrinol. 2000, 21, s. 1-56).
DHEA określany jest jako „super hormon, który pomaga w zwalczaniu otyłości, rozbudowie masy mięśniowej, zapobiega nowotworom, chorobom serca, cukrzycy insulinoniezależnej, hamuje procesy starzenia, zapobiega lub opóźnia postęp choroby Alzheimera oraz Perkinsona, poprawia libido, wzmacnia system immunologiczny, a także pomaga w leczeniu układowego tocznia rumieniowatego (J. Williams, Lipids, 2000, 35, s. 325-331., P. Celec, L. Starka Physiol. Res. 2003, 52, s. 397-407).
Znanych jest szereg różnych pochodnych dehydroepiandrosteronu, między innymi: siarczan, sulfatyd, estry kwasów tłuszczowych, charakteryzujących się wyższą aktywnością niż wolna forma DHEA. Fosfatyd DHEA będący pochodną kwasu 1,2-di-O-palmitoilo-sn-glicero-3-fosffatydowego jest bardziej efektywnym inhibitorem enzymu dehydrogenazy glukozo-6-fosforanowej niż wolna forma DHEA (G. W. Oertel i P. Benes, J. Steroid Biochem., 1972, 3 (6), s. 903-905).
Nowy związek, 3-β-(1,2-diacylo-sn-glicero-3-fosfo)-androst-5-en-17-on, wzór 3, jest pochodną aktywnego biologicznie kwasu fosfatydowego, otrzymanego z fosfatydylocholiny. Kwas fosfatydowy pełni funkcję prekursora w biosyntezie wielu fosfolipidów, między innymi 1,2-diacyloglicerolu, czy kwasu lizo fosfatydowego. Uczestniczy również w wielu procesach biologicznych jako cząsteczka sygnałowa. Ponadto, kwas fosfatydowy otrzymany na drodze enzymatycznej hydrolizy lecytyny z żółtka jaja kurzego jest źródłem egzogennych nienasyconych kwasów tłuszczowych (kwasu linolowego, arachidonowego oraz dekozaheksaenowego), które są niezbędnym elementem diety człowieka.
W literaturze nie napotkano informacji na temat otrzymania 3-β-(1,2-diacylo-sn-glicero-3-fosfo)-androst-5-en-17-onu.
Istotą wynalazku jest także sposób otrzymywania 3-β-(1,2-diacylo-sn-glicero-3-fosfo)-androst-5-en-17-onu o wzorze 3 przedstawionym na rysunku. Sposób polega na tym, że z żółtka jaja izoluje się fosfatydylochohnę, którą następnie poddaje się enzymatycznej hydrolizie z udziałem fosfolipazy D. Otrzymany kwas 1,2-diacylo-sn-glicero-3-fosfatydowy albo sól monopirydyniową tego kwasu, o wzorze 1, gdzie X+ jest odpowiednio kationem wodorowym albo pirydyniowym, poddaje się estryfikacji z dehydroepiandrosteronem z udziałem odczynnika sprzęgającego w bezwodnej pirydynie.
Korzystniej jest, gdy odczynnikiem sprzęgającym jest N,N'-dicykloheksylokarbodiimid albo chlorek kwasu p-toluenosulfonowego.
Sposób według wynalazku przedstawiony jest dokładniej w przykładach wykonania.
P r z y k ł a d 1 3
W 200 mM buforze Tris-HCl o pH 8,0 (8 cm3) zawierającym 80 mM CaCl2 zawiesza się fosfatydylocholinę (760 mg, 1 mmol), wyizolowaną z żółtka jaja kurzego metodą opisaną przez L. Palacios i T. Wang (J. Am. Oil Chem. Soc, 2005, 82, s. 571-578). Do otrzymanej mieszaniny dodaje się chlorek 3 metylenu (16 cm3), a następnie 160 U fosfolipazy D ze Streptomyces chromofuscus. Reakcję prowadzi się w temperaturze 308K, w zaciemnieniu, w atmosferze azotu, w warunkach intensywnego mie3 szania. Po 16 godz. do mieszaniny reakcyjnej dodaje się 0,2M EDTA (5 cm3), a następnie mieszaninę doprowadza się do pH < 1 za pomocą 2M HCl. Po rozdzieleniu warstw frakcję wodną ekstrahuje się trzykrotnie mieszaniną CHCl3:MeOH (2:1% objętościowych) (3 x 25 cm3). Połączone frakcje organiczne osusza się za pomocą siarczanu magnezu i po odsączeniu środka suszącego rozpuszczalnik odparowuje się pod zmniejszonym ciśnieniem. Surowy produkt oczyszcza się za pomocą chromatografii
PL 218 059 B1 kolumnowej na żelu krzemionkowym (eluent: CHCl3:MeOH:H2O, gradient od 65:25:0 do 65:25:4% objętościowych). Oczyszczony związek rozpuszcza się w mieszaninie CHCl3:MeOH:H2O (5:4:1% objętościowych) i nanosi się na kolumnę DOWEX 50WX8 (forma H+) i wymywa tą samą mieszaniną. Po odparowaniu rozpuszczalników, kwas fosfatydowy rozpuszcza się w mieszaninie chloroform:metanol:woda:pirydyna (3:3:1:1% objętościowych), nanosi na kolumnę DOWEX 50WX8 (forma pirydyniowa) i wymywa tą samą mieszaniną rozpuszczalników. Rozpuszczalniki odparowuje się pod zmniejszonym ciśnieniem, a suchą pozostałość odparowuje się trzykrotnie z toluenem. Otrzymuje się 542 mg kwasu 1,2-diacylo-sn-glicero-3-fosfatydowego w formie soli monopirydyniowej, wzór 1 (0,72 mmol, wydajność 72%). Czystość (> 99%) określono za pomocą HPLC (detektor Corona CAD; kolumna Thermo Betasil DIOL 150 x 2,1 mm; 5 μm, eluent: heksan:2-propanol:1% HCOOH + 0,1% Et3N w wodzie, w gradiencie: 0 min. 40:56:4; 3 min. 40:56:4; 7 min. 40:52:8; 18 min. 40:52:8; 25 min. 40:50:10; 25.5 min. 40:56:4; 35 min. 40:56:4).
Dane spektroskopowe otrzymanego związku są następujące:
1H NMR (600 MHz, CDCl3:MeOD 2:1 v/v) δ 0,89 (t, J = 5,2 Hz, 8H, 2 x CH3-), 1,24-1,41 (m, 44H, 22 x -CH2-), 1,48-1,76 (m, 4H, 2 x CH2-3), 1,92-2,15 (m, 4H, 2 x CH2-CH=CH-), 2,22-2,42 (m, 4H, 2 x CH2-COO), 2,80 (m, 1H, =CH-CH2-CH=), 4,02-4,13 (m, 2H, CH2-3), 4,19 (dd, J = 12,0 Hz, J = 6,9 Hz, 1H, jeden z CH2-1), 4,44 (m, 1H, jeden z CH2-1), 5,28 (m, 1H, CH-2), 5,31-5,49 (m, 2H, -CH=CH-);
31P NMR (243 MHz, CDCh:MeOD 2:1 v/v) δ -1,45.
Analizę składu kwasów tłuszczowych w kwasie 1,2-diacylo-sn-glicero-3-fosfatydowym dokonano na drodze transestryfikacji za pomocą 0,2M CH3ONa w metanolu. Otrzymane estry metylowe analizowano za pomocą chromatografii gazowej. Profil kwasów tłuszczowych w kwasie 1,2-di-O-acylo-sn-glicero-3-fosfatydowym przedstawiono w tabeli 1.
T a b e l a 1
| Rodzaj kwasu tłuszczowego | Kwas | ||||||
| Palmitynowy 16:0 | Palmitoleinowy 16:1 | Steary- arynowy 18:0 | Ole- inowy 18:1 | Lino- lowy 18:2 | Arachidonowy 20:4 | Dekozaheksaenowy 22:6 | |
| Zawartość [%] | 30 | 1 | 18 | 29 | 17 | 3 | 2 |
Mieszaninę soli monopirydyniowej kwasu 1,2-diacylo-sn-glicero-3--fosfatydowego (90 mg, 0,12 mmol) i DHEA (23 mg, 0,08 mmol) osusza się przez trzykrotne odparowanie pod zmniejszonym ciśnieniem z mieszaniną bezwodnych rozpuszczalników chlorek metylenu benzen (1:1% objętościo33 wych) (3 x 5 cm3) Następnie, mieszaninę rozpuszcza się w 1 cm3 bezwodnej pirydyny, dodaje się jako 3 odczynnik sprzęgający chlorek kwasu p-toluenosulfonowego (46 mg, 0,24 mmol) rozpuszczony w 1 cm3 bezwodnej pirydyny i miesza w temperaturze pokojowej w atmosferze azotu, bez dostępu światła 3 przez 48 godziny Po tym czasie, dodaje się do mieszaniny reakcyjnej 0,1 cm3 wody destylowanej, odsącza się osad i odparowuje się rozpuszczalnik pod zmniejszonym ciśnieniem. Surowy produkt oczyszcza się za pomocą chromatografii kolumnowej na żelu krzemionkowym (eluent chloroform metanol w gradiencie 98:2 90:10% objętościowych). Otrzymany produkt rozpuszcza się w mieszaninie chloroform metanol woda (5:4:1% objętościowych), nanosi na kolumnę DOWEX 50WX8 (forma NH4+) i wymywa się tą samą mieszaniną rozpuszczalników Otrzymuje się 3-β-(1,2-diacylo-sn-glicero-3-fosfo)androst-5-en-17-on w formie soli amonowej, wzór 3 (63 mg, 0,066 mmol) z wydajnością 82%) (w przeliczeniu na DHEA) Czystość związku (98%) określono za pomocą HPLC (detektor Corona CAD, kolumna Thermo Betasil DIOL 150 x 2,1 mm; 5 urn, eluent: heksan: 2-propanol:1% HCOOH + 0,1% Et3N w wodzie, w gradiencie: 0 min. 40:56:4; 3 min. 40:56:4; 7 min. 40:52:8; 18 min. 40:52:8; 25 min. 40:50:10; 25.5 min. 40:56:4; 35 min. 40:56:4).
Dane spektroskopowe otrzymanego produktu są następujące:
1H NMR (600 MHz, CDCl3:MeOD 2:1 v/v) δ 0,89 (t, J = 12 Hz, 6H, 2 x CH3-16 od kwasów), 0,91 (s, 3H, CH3-18), 1,02 (m, 1H, H-9), 1,05 (s, 3H, CH3-19), 1,10 (m, 1H, jeden z H-1), 1,22-1,42 (m, 46H, jeden z H-12, H-14, 22 x CH2 od kwasów), 1,51 (ddd, J = 26,5, 13,7, 4,4 Hz, 1H, jeden z H-11), 1,56-1,74 (m, 9H, jeden z H-2, jeden z H-7, jeden z H-11, jeden z H-12, jeden z H-15, 2 x CH2-3 od kwasu), 1,81-1,92 (m, 2H, jeden z H-1, H-8), 1,94-2,17 (m, 8H, jeden z H-2, jeden z H-15, jeden z H-7,
PL 218 059 B1 jeden z H-16, 2 x CH2-CH=CH- od kwasów), 2,27-2,39 (m, 5H, jeden z H-4, 2 x CH2-COO od kwasu),
2,42-2,52 (m, 2H, jeden z H-4, jeden z H-16), 2,78 (m, 1H, =CH-CH2-CH=), 3,92-4,03 (m, 3H, H-3,
CH2-3'), 4,19 (dd, J = 12,0, 6,6 Hz, 1H, H-1'), 4,41 (dd, J = 12,0, 3,4 Hz, 1H, H-1), 5,23 (m, 1H, H-2'),
5,27-5,37 (m, 2H, -CH=CH- od kwasów), 5,40 (m, 1H, H-6);
31P NMR (243 MHz, CDCl3:MeOD 2:1 v/v) δ -2,18.
P r z y k ł a d 2
Postępuje się tak jak w przykładzie 1, z tym, że stosuje się jako odczynnik sprzęgający N,N'-dicykloheksylokarbodiimid (49 mg, 0,24 mmol). Otrzymuje się 3-e-(1,2-di-palmitoilo-sn-glicero-3-fosfo)-androst-5-en-17-on w formie soli amonowej, wzór 3 (53 mg, 0,055 mmol) z wydajnością 75% (w przeliczeniu na DHEA).
Claims (3)
1. Nowy 3-β-(1,2-diacylo-sn-glicero-3-fosfo)-androst-5-en-17-on, o wzorze 3 przedstawionym na rysunku, gdzie R oznacza mieszaninę kwasów palmitynowego, palmitoleinowego, stearynowego, oleinowego, linolowego, arachidonowego, dekozaheksaenowego.
2. Sposób otrzymywania nowego 3-β-(1,2-diacylo-sn-glicero-3-fosfo)-androst-5-en-17-onu, o wzorze 3, gdzie R oznacza mieszaninę kwasów palmitynowego, palmitoleinowego, stearynowego, oleinowego, linolowego, arachidonowego, dekozaheksaenowego, znamienny tym, że z żółtka jaja izoluje się fosfatydylocholinę, którą poddaje się enzymatycznej hydrolizie z udziałem fosfolipazy D, po czym otrzymany kwas 1,2-diacylo-sn-glicero-3-fosfatydowy albo sól monopirydyniową tego kwasu, o wzorze 1, gdzie X+ jest odpowiednio kationem wodorowym albo pirydyniowym, poddaje się estryfikacji z dehydroepiandrosteronem z udziałem odczynnika sprzęgającego w bezwodnej pirydynie.
3. Sposób według zastrz. 2, znamienny tym, że odczynnikiem sprzęgającym jest N-dicykloheksylokarbodiimid albo chlorek kwasu p-toluenosulfonowego.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL391087A PL218059B1 (pl) | 2010-04-28 | 2010-04-28 | Nowy 3-p-(1,2-diacylo-sn-glicero-3-fosfo)-androst-5-en-17-on i sposób jego otrzymywania |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL391087A PL218059B1 (pl) | 2010-04-28 | 2010-04-28 | Nowy 3-p-(1,2-diacylo-sn-glicero-3-fosfo)-androst-5-en-17-on i sposób jego otrzymywania |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL391087A1 PL391087A1 (pl) | 2010-09-13 |
| PL218059B1 true PL218059B1 (pl) | 2014-10-31 |
Family
ID=42941063
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL391087A PL218059B1 (pl) | 2010-04-28 | 2010-04-28 | Nowy 3-p-(1,2-diacylo-sn-glicero-3-fosfo)-androst-5-en-17-on i sposób jego otrzymywania |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| PL (1) | PL218059B1 (pl) |
-
2010
- 2010-04-28 PL PL391087A patent/PL218059B1/pl unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| PL391087A1 (pl) | 2010-09-13 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Amann et al. | New potent Sialyltransferase inhibitors—synthesis of donor and of transition‐state analogues of Sialyl donor CMP‐Neu5Ac | |
| EP2992334B1 (en) | Novel phosphatidylalkanols and compositions thereof | |
| Hollister et al. | Ascaroside activity in Caenorhabditis elegans is highly dependent on chemical structure | |
| Niezgoda et al. | Phosphatidylcholine with cis-9, trans-11 and trans-10, cis-12 conjugated linoleic acid isomers: synthesis and cytotoxic studies | |
| Zavarzin et al. | Synthesis and biological activity of new avermectin 5-O-and 4 ″-O-acyl derivatives | |
| Smuga et al. | Synthesis of dehydroepiandrosterone analogues modified with phosphatidic acid moiety | |
| Andresen et al. | Synthesis of anti-tumour phosphatidylinositol analogues from glucose by the use of ring-closing olefin metathesis | |
| PL218059B1 (pl) | Nowy 3-p-(1,2-diacylo-sn-glicero-3-fosfo)-androst-5-en-17-on i sposób jego otrzymywania | |
| Kłobucki et al. | Syntheses and antiproliferative activities of novel phosphatidylcholines containing dehydroepiandrosterone moieties | |
| Harper et al. | A PIM2 analogue suppresses allergic airway disease | |
| US6130354A (en) | Process for the preparation of shikimic acid and its derivatives | |
| JPH0610189B2 (ja) | １０−オキソビタミンｄ類似体 | |
| PL218060B1 (pl) | Nowy 3-p-(1,2-diacylo-sn-glicero-3-fosfo)-7a-hydroksy-androst-5-en-17-on i sposób jego otrzymywania | |
| Wang et al. | Synthesis of mixed-chain phosphatidylcholines including coumarin fluorophores for FRET-based kinetic studies of phospholipase A2 enzymes | |
| Bibak et al. | A new approach to the synthesis of lysophosphatidylcholines and related derivatives | |
| PL218058B1 (pl) | Sposób wytwarzania 3-p-(1,2-dipalmitoilo-sn-glicero-3-fosfo)-androst-5-en-17-onu | |
| JPH01258691A (ja) | リン脂質誘導体及びその製造方法 | |
| PL218055B1 (pl) | Sposób otrzymywania 3-p-(1,2-dipalmitoilo-sn-glicero-3-fosfo)-androst-5-en-17-onu | |
| Tapolcsányi et al. | The Mitsunobu inversion reaction of sterically hindered 17-hydroxy steroids | |
| Kiuru et al. | Synthesis and Enzymatic Deprotection of Fully Protected 2′‐5′ Oligoadenylates (2‐5A): Towards a Prodrug Strategy for Short 2‐5A | |
| EP3130594B1 (en) | Phosphonates of acetylenic betulin derivatives with anticancer activity, method for their production and their application | |
| Kiuru et al. | 2‐[(Acetyloxy) methyl]‐4‐(acetylsulfanyl)‐2‐(ethoxycarbonyl)‐3‐oxobutyl Group: A Thermolabile Protecting Group for Phosphodiesters | |
| RU2566368C1 (ru) | СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ 6-МЕТИЛЕНО-16α,17α-ЦИКЛОГЕКСАНОПРЕГН-4-ЕН-3,20-ДИОНА | |
| PL238967B1 (pl) | Sposób otrzymywania fosfatydylocholiny zawierającej ibuprofen w pozycji sn-2 oraz resztę kwasu tłuszczowego w pozycji sn-1 | |
| JP3176075B2 (ja) | 新規なステロイド誘導体 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| LICE | Declarations of willingness to grant licence |
Effective date: 20140416 |