PL200647B1 - Nowi antagoniści LH-RH o ulepszonej rozpuszczalności, preparat farmaceutyczny zawierający te związki, sposób wytwarzania tych związków, zastosowanie tych związków do wytwarzania leków do leczenia nowotworów zależnych hormonalnie oraz sposób wytwarzania leków zawierających te związki - Google Patents
Nowi antagoniści LH-RH o ulepszonej rozpuszczalności, preparat farmaceutyczny zawierający te związki, sposób wytwarzania tych związków, zastosowanie tych związków do wytwarzania leków do leczenia nowotworów zależnych hormonalnie oraz sposób wytwarzania leków zawierających te związkiInfo
- Publication number
- PL200647B1 PL200647B1 PL351792A PL35179200A PL200647B1 PL 200647 B1 PL200647 B1 PL 200647B1 PL 351792 A PL351792 A PL 351792A PL 35179200 A PL35179200 A PL 35179200A PL 200647 B1 PL200647 B1 PL 200647B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- xxx
- compounds
- nal
- tyr
- cpa
- Prior art date
Links
- 239000003814 drug Substances 0.000 title claims abstract description 11
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 title claims abstract description 7
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 title claims abstract description 6
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 title claims abstract description 6
- 239000005556 hormone Substances 0.000 title claims abstract description 6
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 title claims description 42
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 27
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 title description 4
- 229940124041 Luteinizing hormone releasing hormone (LHRH) antagonist Drugs 0.000 title 1
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 claims abstract description 4
- 239000000579 Gonadotropin-Releasing Hormone Substances 0.000 claims description 23
- -1 3- (4-fluorophenyl) propionyl Chemical group 0.000 claims description 14
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 claims description 12
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 9
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 claims description 8
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 8
- 230000008878 coupling Effects 0.000 claims description 8
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 claims description 8
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 claims description 8
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 claims description 7
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 6
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 claims description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 5
- XLXSAKCOAKORKW-AQJXLSMYSA-N gonadorelin Chemical compound C([C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)NCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CC=1N=CNC=1)NC(=O)[C@H]1NC(=O)CC1)C1=CC=C(O)C=C1 XLXSAKCOAKORKW-AQJXLSMYSA-N 0.000 claims description 4
- AXDLCFOOGCNDST-VIFPVBQESA-N (2s)-3-(4-hydroxyphenyl)-2-(methylamino)propanoic acid Chemical compound CN[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 AXDLCFOOGCNDST-VIFPVBQESA-N 0.000 claims description 3
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical group CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 3
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 claims description 3
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 claims description 3
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 claims description 3
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 claims description 3
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 claims description 3
- 235000013351 cheese Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000012050 conventional carrier Substances 0.000 claims description 3
- 210000002307 prostate Anatomy 0.000 claims description 3
- 230000001629 suppression Effects 0.000 claims description 3
- 101000857870 Squalus acanthias Gonadoliberin Proteins 0.000 claims description 2
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-M Trifluoroacetate Chemical compound [O-]C(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 2
- 230000009435 amidation Effects 0.000 claims description 2
- 238000007112 amidation reaction Methods 0.000 claims description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 2
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 claims description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 2
- 101000904177 Clupea pallasii Gonadoliberin-1 Proteins 0.000 claims 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 abstract description 29
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 abstract description 21
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 abstract description 12
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 abstract 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 abstract 1
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 27
- 108700012941 GNRH1 Proteins 0.000 description 23
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 21
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 21
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 14
- 238000009739 binding Methods 0.000 description 14
- BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 1,3-diisopropylcarbodiimide Chemical compound CC(C)N=C=NC(C)C BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- BGRWYRAHAFMIBJ-UHFFFAOYSA-N diisopropylcarbodiimide Natural products CC(C)NC(=O)NC(C)C BGRWYRAHAFMIBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 13
- IAZDPXIOMUYVGZ-WFGJKAKNSA-N Dimethyl sulfoxide Chemical compound [2H]C([2H])([2H])S(=O)C([2H])([2H])[2H] IAZDPXIOMUYVGZ-WFGJKAKNSA-N 0.000 description 12
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 12
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 11
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 11
- 108700008462 cetrorelix Proteins 0.000 description 11
- SBNPWPIBESPSIF-MHWMIDJBSA-N cetrorelix Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](CCCNC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@H](C)C(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](CC=1C=NC=CC=1)NC(=O)[C@@H](CC=1C=CC(Cl)=CC=1)NC(=O)[C@@H](CC=1C=C2C=CC=CC2=CC=1)NC(C)=O)C1=CC=C(O)C=C1 SBNPWPIBESPSIF-MHWMIDJBSA-N 0.000 description 11
- 229960003230 cetrorelix Drugs 0.000 description 11
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 11
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 10
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 10
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 10
- ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 1-Hydroxybenzotriazole Chemical compound C1=CC=C2N(O)N=NC2=C1 ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 9
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 9
- NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N hydroxybenzotriazole Substances O=C1C=CC=C2NNN=C12 NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 9
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 8
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 8
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 8
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 7
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 6
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 6
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 6
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 6
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 6
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 6
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 5
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 5
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 5
- 239000000047 product Substances 0.000 description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 5
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 5
- QIVBCDIJIAJPQS-SECBINFHSA-N D-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-SECBINFHSA-N 0.000 description 4
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N anisole Chemical compound COC1=CC=CC=C1 RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000002330 electrospray ionisation mass spectrometry Methods 0.000 description 4
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 4
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 4
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- RGJOEKWQDUBAIZ-IBOSZNHHSA-N CoASH Chemical compound O[C@@H]1[C@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OCC(C)(C)[C@@H](O)C(=O)NCCC(=O)NCCS)O[C@H]1N1C2=NC=NC(N)=C2N=C1 RGJOEKWQDUBAIZ-IBOSZNHHSA-N 0.000 description 3
- ODKSFYDXXFIFQN-SCSAIBSYSA-N D-arginine Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-SCSAIBSYSA-N 0.000 description 3
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N L-Ornithine Chemical class NCCC[C@H](N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 3
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 3
- 125000001584 benzyloxycarbonyl group Chemical group C(=O)(OCC1=CC=CC=C1)* 0.000 description 3
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 3
- RGJOEKWQDUBAIZ-UHFFFAOYSA-N coenzime A Natural products OC1C(OP(O)(O)=O)C(COP(O)(=O)OP(O)(=O)OCC(C)(C)C(O)C(=O)NCCC(=O)NCCS)OC1N1C2=NC=NC(N)=C2N=C1 RGJOEKWQDUBAIZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000005516 coenzyme A Substances 0.000 description 3
- 229940093530 coenzyme a Drugs 0.000 description 3
- KDTSHFARGAKYJN-UHFFFAOYSA-N dephosphocoenzyme A Natural products OC1C(O)C(COP(O)(=O)OP(O)(=O)OCC(C)(C)C(O)C(=O)NCCC(=O)NCCS)OC1N1C2=NC=NC(N)=C2N=C1 KDTSHFARGAKYJN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 3
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 3
- 229960001153 serine Drugs 0.000 description 3
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- NOENHWMKHNSHGX-IZOOSHNJSA-N (2s)-1-[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2s)-2-[[(2r)-2-[[(2s)-2-[[(2r)-2-acetamido-3-naphthalen-2-ylpropanoyl]amino]-3-(4-chlorophenyl)propanoyl]amino]-3-pyridin-3-ylpropanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-3-(4-hydroxyphenyl)propanoyl]amino]-6-(ca Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CCCCNC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCNC(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@H](C)C(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](CC=1C=NC=CC=1)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(Cl)=CC=1)NC(=O)[C@@H](CC=1C=C2C=CC=CC2=CC=1)NC(C)=O)C1=CC=C(O)C=C1 NOENHWMKHNSHGX-IZOOSHNJSA-N 0.000 description 2
- IBLJMCCCZZRYEA-UHFFFAOYSA-N 2-(4-carbamimidoylanilino)-4-oxobutanoic acid Chemical compound NC(=N)C1=CC=C(NC(CC=O)C(O)=O)C=C1 IBLJMCCCZZRYEA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WPANETAWYGDRLL-UHFFFAOYSA-N 4-aminobenzenecarboximidamide Chemical compound NC(=N)C1=CC=C(N)C=C1 WPANETAWYGDRLL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 2
- 206010004446 Benign prostatic hyperplasia Diseases 0.000 description 2
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical group C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KDXKERNSBIXSRK-RXMQYKEDSA-N D-lysine Chemical compound NCCCC[C@@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-RXMQYKEDSA-N 0.000 description 2
- COLNVLDHVKWLRT-MRVPVSSYSA-N D-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-MRVPVSSYSA-N 0.000 description 2
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 2
- NIGWMJHCCYYCSF-UHFFFAOYSA-N Fenclonine Chemical compound OC(=O)C(N)CC1=CC=C(Cl)C=C1 NIGWMJHCCYYCSF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N Fluorane Chemical compound F KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-N Guanidine Chemical compound NC(N)=N ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 2
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SEQKRHFRPICQDD-UHFFFAOYSA-N N-tris(hydroxymethyl)methylglycine Chemical compound OCC(CO)(CO)[NH2+]CC([O-])=O SEQKRHFRPICQDD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 2
- 208000004403 Prostatic Hyperplasia Diseases 0.000 description 2
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N Sodium azide Chemical compound [Na+].[N-]=[N+]=[N-] PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 150000001412 amines Chemical group 0.000 description 2
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 2
- 108010070670 antarelix Proteins 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N bromine Substances BrBr GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052794 bromium Inorganic materials 0.000 description 2
- 125000004744 butyloxycarbonyl group Chemical group 0.000 description 2
- 150000001718 carbodiimides Chemical class 0.000 description 2
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 description 2
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 2
- VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N dithiothreitol Chemical compound SC[C@@H](O)[C@H](O)CS VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 2
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 2
- 238000004992 fast atom bombardment mass spectroscopy Methods 0.000 description 2
- 230000005714 functional activity Effects 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 2
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N methoxybenzene Substances CCCCOC=C UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- SHDMMLFAFLZUEV-UHFFFAOYSA-N n-methyl-1,1-diphenylmethanamine Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(NC)C1=CC=CC=C1 SHDMMLFAFLZUEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000006503 p-nitrobenzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(=C([H])C([H])=C1[N+]([O-])=O)C([H])([H])* 0.000 description 2
- WLJNZVDCPSBLRP-UHFFFAOYSA-N pamoic acid Chemical compound C1=CC=C2C(CC=3C4=CC=CC=C4C=C(C=3O)C(=O)O)=C(O)C(C(O)=O)=CC2=C1 WLJNZVDCPSBLRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 2
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 2
- UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N phenylmethyl ester of formic acid Natural products O=COCC1=CC=CC=C1 UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 2
- 238000001525 receptor binding assay Methods 0.000 description 2
- FSYKKLYZXJSNPZ-UHFFFAOYSA-N sarcosine Chemical group C[NH2+]CC([O-])=O FSYKKLYZXJSNPZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 2
- WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N tfa trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F.OC(=O)C(F)(F)F WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VXKHXGOKWPXYNA-PGBVPBMZSA-N triptorelin Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)NCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CC=1N=CNC=1)NC(=O)[C@H]1NC(=O)CC1)C1=CC=C(O)C=C1 VXKHXGOKWPXYNA-PGBVPBMZSA-N 0.000 description 2
- PHOQLWOIWDIYFR-WUCXBFDXSA-N (2r)-2-[[(2s)-1-[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2r)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-acetamido-3-(4-chlorophenyl)propanoyl]amino]-3-(4-chlorophenyl)propanoyl]amino]-3-(1h-indol-3-yl)propanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-3-(4-hydroxyphenyl)propanoyl Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@H](C)C(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@@H](CC=1C=CC(Cl)=CC=1)NC(=O)[C@@H](CC=1C=CC(Cl)=CC=1)NC(C)=O)C1=CC=C(O)C=C1 PHOQLWOIWDIYFR-WUCXBFDXSA-N 0.000 description 1
- MVDPNTCYCFVFOX-SZENRQNHSA-N (2s)-1-[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2r)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-acetamido-3-naphthalen-2-ylpropanoyl]amino]-3-(4-iodanylphenyl)propanoyl]amino]-3-pyridin-3-ylpropanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-3-(4-hydroxyphenyl)propanoyl]amino]-5-(c Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](CCCNC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@H](C)C(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](CC=1C=NC=CC=1)NC(=O)[C@@H](CC=1C=CC([125I])=CC=1)NC(=O)[C@@H](CC=1C=C2C=CC=CC2=CC=1)NC(C)=O)C1=CC=C(O)C=C1 MVDPNTCYCFVFOX-SZENRQNHSA-N 0.000 description 1
- DFZVZEMNPGABKO-ZETCQYMHSA-N (2s)-2-amino-3-pyridin-3-ylpropanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CN=C1 DFZVZEMNPGABKO-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 1
- MYRTYDVEIRVNKP-UHFFFAOYSA-N 1,2-Divinylbenzene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1C=C MYRTYDVEIRVNKP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DFPYXQYWILNVAU-UHFFFAOYSA-N 1-hydroxybenzotriazole Chemical compound C1=CC=C2N(O)N=NC2=C1.C1=CC=C2N(O)N=NC2=C1 DFPYXQYWILNVAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JPZXHKDZASGCLU-GFCCVEGCSA-N 3-(2-Naphthyl)-D-Alanine Chemical compound C1=CC=CC2=CC(C[C@@H](N)C(O)=O)=CC=C21 JPZXHKDZASGCLU-GFCCVEGCSA-N 0.000 description 1
- MVRGLMCHDCMPKD-UHFFFAOYSA-N 3-amino-1h-1,2,4-triazole-5-carboxylic acid Chemical compound NC1=NNC(C(O)=O)=N1 MVRGLMCHDCMPKD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004042 4-aminobutyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])N([H])[H] 0.000 description 1
- 125000001255 4-fluorophenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(*)=C([H])C([H])=C1F 0.000 description 1
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical class N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010001478 Bacitracin Proteins 0.000 description 1
- XZMCDFZZKTWFGF-UHFFFAOYSA-N Cyanamide Chemical compound NC#N XZMCDFZZKTWFGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FCKYPQBAHLOOJQ-UHFFFAOYSA-N Cyclohexane-1,2-diaminetetraacetic acid Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)C1CCCCC1N(CC(O)=O)CC(O)=O FCKYPQBAHLOOJQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IGXWBGJHJZYPQS-SSDOTTSWSA-N D-Luciferin Chemical compound OC(=O)[C@H]1CSC(C=2SC3=CC=C(O)C=C3N=2)=N1 IGXWBGJHJZYPQS-SSDOTTSWSA-N 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N D-alanine Chemical compound C[C@@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N 0.000 description 1
- CYCGRDQQIOGCKX-UHFFFAOYSA-N Dehydro-luciferin Natural products OC(=O)C1=CSC(C=2SC3=CC(O)=CC=C3N=2)=N1 CYCGRDQQIOGCKX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000009273 Endometriosis Diseases 0.000 description 1
- BJGNCJDXODQBOB-UHFFFAOYSA-N Fivefly Luciferin Natural products OC(=O)C1CSC(C=2SC3=CC(O)=CC=C3N=2)=N1 BJGNCJDXODQBOB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Natural products NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- NMJREATYWWNIKX-UHFFFAOYSA-N GnRH Chemical compound C1CCC(C(=O)NCC(N)=O)N1C(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)CNC(=O)C(NC(=O)C(CO)NC(=O)C(CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)C(CC=1NC=NC=1)NC(=O)C1NC(=O)CC1)CC1=CC=C(O)C=C1 NMJREATYWWNIKX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108050000048 Gonadoliberin Proteins 0.000 description 1
- 102000009165 Gonadoliberin Human genes 0.000 description 1
- 102400000932 Gonadoliberin-1 Human genes 0.000 description 1
- 101100229685 Homo sapiens GNRH1 gene Proteins 0.000 description 1
- 101500026183 Homo sapiens Gonadoliberin-1 Proteins 0.000 description 1
- 206010021703 Indifference Diseases 0.000 description 1
- 239000007836 KH2PO4 Substances 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- XIGSAGMEBXLVJJ-YFKPBYRVSA-N L-homocitrulline Chemical compound NC(=O)NCCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O XIGSAGMEBXLVJJ-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- 102000008238 LHRH Receptors Human genes 0.000 description 1
- 241000254158 Lampyridae Species 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108060001084 Luciferase Proteins 0.000 description 1
- 239000005089 Luciferase Substances 0.000 description 1
- DDWFXDSYGUXRAY-UHFFFAOYSA-N Luciferin Natural products CCc1c(C)c(CC2NC(=O)C(=C2C=C)C)[nH]c1Cc3[nH]c4C(=C5/NC(CC(=O)O)C(C)C5CC(=O)O)CC(=O)c4c3C DDWFXDSYGUXRAY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FXHOOIRPVKKKFG-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylacetamide Chemical compound CN(C)C(C)=O FXHOOIRPVKKKFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N N-Hydroxysuccinimide Chemical class ON1C(=O)CCC1=O NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108700024471 N-acetyl-(4-chlorophenylalanyl)(1)-(4-chlorophenylalanyl)(2)-tryptophyl(3)-arginyl(6)-alanine(10)- LHRH Proteins 0.000 description 1
- VIHYIVKEECZGOU-UHFFFAOYSA-N N-acetylimidazole Chemical compound CC(=O)N1C=CN=C1 VIHYIVKEECZGOU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CHJJGSNFBQVOTG-UHFFFAOYSA-N N-methyl-guanidine Natural products CNC(N)=N CHJJGSNFBQVOTG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N Orn-delta-NH2 Natural products NCCCC(N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N Ornithine Natural products OC(=O)C(C)CCCN UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000005662 Paraffin oil Substances 0.000 description 1
- 241000254064 Photinus pyralis Species 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108700008625 Reporter Genes Proteins 0.000 description 1
- 108010077895 Sarcosine Proteins 0.000 description 1
- UZMAPBJVXOGOFT-UHFFFAOYSA-N Syringetin Natural products COC1=C(O)C(OC)=CC(C2=C(C(=O)C3=C(O)C=C(O)C=C3O2)O)=C1 UZMAPBJVXOGOFT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007997 Tricine buffer Substances 0.000 description 1
- 108010050144 Triptorelin Pamoate Proteins 0.000 description 1
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 description 1
- 239000013504 Triton X-100 Substances 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108700023965 acetyl-2-(2-naphthyl)-Ala(1)-4-F-Phe(2)-Trp(3)-Arg(6)- LHRH Proteins 0.000 description 1
- CQJZXVCPROCGRM-OYDHUGEGSA-N acetyl-2-(2-naphthyl)-ala(1)-4-f-phe(2)-trp(3)-arg(6)-lhrh Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)NCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@@H](CC=1C=CC(F)=CC=1)NC(=O)[C@@H](CC=1C=C2C=CC=CC2=CC=1)NC(C)=O)C1=CC=C(O)C=C1 CQJZXVCPROCGRM-OYDHUGEGSA-N 0.000 description 1
- 230000021736 acetylation Effects 0.000 description 1
- 238000006640 acetylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 150000001408 amides Chemical group 0.000 description 1
- 125000006242 amine protecting group Chemical group 0.000 description 1
- 238000007098 aminolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012491 analyte Substances 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 150000008064 anhydrides Chemical class 0.000 description 1
- 230000003042 antagnostic effect Effects 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 239000012131 assay buffer Substances 0.000 description 1
- 150000001540 azides Chemical class 0.000 description 1
- 229960003071 bacitracin Drugs 0.000 description 1
- 229930184125 bacitracin Natural products 0.000 description 1
- CLKOFPXJLQSYAH-ABRJDSQDSA-N bacitracin A Chemical compound C1SC([C@@H](N)[C@@H](C)CC)=N[C@@H]1C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]1C(=O)N[C@H](CCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2N=CNC=2)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)NCCCC1 CLKOFPXJLQSYAH-ABRJDSQDSA-N 0.000 description 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 1
- 239000012148 binding buffer Substances 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-N carbonic acid Chemical compound OC(O)=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001735 carboxylic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000013592 cell lysate Substances 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 1
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 1
- ZTOGYGRJDIWKAQ-UHFFFAOYSA-N cyclohexene-1,2-diamine Chemical compound NC1=C(N)CCCC1 ZTOGYGRJDIWKAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000007405 data analysis Methods 0.000 description 1
- DEZRYPDIMOWBDS-UHFFFAOYSA-N dcm dichloromethane Chemical compound ClCCl.ClCCl DEZRYPDIMOWBDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- KCFYHBSOLOXZIF-UHFFFAOYSA-N dihydrochrysin Natural products COC1=C(O)C(OC)=CC(C2OC3=CC(O)=CC(O)=C3C(=O)C2)=C1 KCFYHBSOLOXZIF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002147 dimethylamino group Chemical group [H]C([H])([H])N(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- SWSQBOPZIKWTGO-UHFFFAOYSA-N dimethylaminoamidine Natural products CN(C)C(N)=N SWSQBOPZIKWTGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UXGNZZKBCMGWAZ-UHFFFAOYSA-N dimethylformamide dmf Chemical compound CN(C)C=O.CN(C)C=O UXGNZZKBCMGWAZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000397 disodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019800 disodium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 238000006073 displacement reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002124 endocrine Effects 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 125000005519 fluorenylmethyloxycarbonyl group Chemical group 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 238000002825 functional assay Methods 0.000 description 1
- 108700032141 ganirelix Proteins 0.000 description 1
- GJNXBNATEDXMAK-PFLSVRRQSA-N ganirelix Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](CCCCN=C(NCC)NCC)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN=C(NCC)NCC)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@H](C)C(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](CC=1C=NC=CC=1)NC(=O)[C@@H](CC=1C=CC(Cl)=CC=1)NC(=O)[C@@H](CC=1C=C2C=CC=CC2=CC=1)NC(C)=O)C1=CC=C(O)C=C1 GJNXBNATEDXMAK-PFLSVRRQSA-N 0.000 description 1
- 229960003794 ganirelix Drugs 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- 125000003630 glycyl group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 229960001442 gonadorelin Drugs 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- 125000001909 leucine group Chemical group [H]N(*)C(C(*)=O)C([H])([H])C(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 238000012417 linear regression Methods 0.000 description 1
- 238000003670 luciferase enzyme activity assay Methods 0.000 description 1
- 238000003468 luciferase reporter gene assay Methods 0.000 description 1
- 238000004020 luminiscence type Methods 0.000 description 1
- 239000012139 lysis buffer Substances 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 125000000250 methylamino group Chemical group [H]N(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- WOOWBQQQJXZGIE-UHFFFAOYSA-N n-ethyl-n-propan-2-ylpropan-2-amine Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C.CCN(C(C)C)C(C)C WOOWBQQQJXZGIE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N ninhydrin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(O)(O)C(=O)C2=C1 FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009871 nonspecific binding Effects 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 229960003104 ornithine Drugs 0.000 description 1
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N phenylalanine group Chemical group N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)O COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 125000001557 phthalyl group Chemical group C(=O)(O)C1=C(C(=O)*)C=CC=C1 0.000 description 1
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 1
- 230000001817 pituitary effect Effects 0.000 description 1
- 229920005990 polystyrene resin Polymers 0.000 description 1
- GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M potassium dihydrogen phosphate Chemical compound [K+].OP(O)([O-])=O GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 230000006340 racemization Effects 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 229940043230 sarcosine Drugs 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 125000003607 serino group Chemical group [H]N([H])[C@]([H])(C(=O)[*])C(O[H])([H])[H] 0.000 description 1
- 229920002545 silicone oil Polymers 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- UGNWTBMOAKPKBL-UHFFFAOYSA-N tetrachloro-1,4-benzoquinone Chemical compound ClC1=C(Cl)C(=O)C(Cl)=C(Cl)C1=O UGNWTBMOAKPKBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000341 threoninyl group Chemical group [H]OC([H])(C([H])([H])[H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 125000004044 trifluoroacetyl group Chemical group FC(C(=O)*)(F)F 0.000 description 1
- 235000011178 triphosphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001226 triphosphate Substances 0.000 description 1
- UNXRWKVEANCORM-UHFFFAOYSA-N triphosphoric acid Chemical compound OP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O UNXRWKVEANCORM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004824 triptorelin Drugs 0.000 description 1
- 125000000430 tryptophan group Chemical group [H]N([H])C(C(=O)O*)C([H])([H])C1=C([H])N([H])C2=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C12 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001493 tyrosinyl group Chemical group [H]OC1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- JPZXHKDZASGCLU-LBPRGKRZSA-N β-(2-naphthyl)-alanine Chemical compound C1=CC=CC2=CC(C[C@H](N)C(O)=O)=CC=C21 JPZXHKDZASGCLU-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- A61K38/10—Peptides having 12 to 20 amino acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
- A61P5/02—Drugs for disorders of the endocrine system of the hypothalamic hormones, e.g. TRH, GnRH, CRH, GRH, somatostatin
- A61P5/04—Drugs for disorders of the endocrine system of the hypothalamic hormones, e.g. TRH, GnRH, CRH, GRH, somatostatin for decreasing, blocking or antagonising the activity of the hypothalamic hormones
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
- A61P5/06—Drugs for disorders of the endocrine system of the anterior pituitary hormones, e.g. TSH, ACTH, FSH, LH, PRL, GH
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/06—Linear peptides containing only normal peptide links having 5 to 11 amino acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/23—Luteinising hormone-releasing hormone [LHRH]; Related peptides
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Reproductive Health (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Wynalazek dotyczy nowych antagonistów LH-RH o ulepszonej rozpuszczalno sci o ogólnym wzorze A-Xxx 1 -Xxx 2 -Xxx 3 -Xxx 4 -Xxx 5 -Xxx 6 -Xxx 7 -Xxx 8 -Xxx 9 -Xxx 10 -NH 2 , preparatu farmaceutycznego zawieraj acego te zwiazki. Wynalazek dotyczy tak ze sposobu wytwarzania zwi azków o ogólnym wzo- rze A-Xxx 1 -Xxx 2 -Xxx 3 -Xxx 4 -Xxx 5 -Xxx 6 -Xxx 7 -Xxx 8 -Xxx 9 -Xxx 10 -NH, zastosowania substancji o wzorze A-Xxx 1 -Xxx 2 -Xxx 3 -Xxx 4 -Xxx 5 -Xxx 6 -Xxx 7 -Xxx 8 -Xxx 9 -Xxx 10 -NH 2 do wytwarzania leków do leczenia nowo- tworów zale znych hormonalnie, zw laszcza raka prostaty lub sutka, oraz do wskaza n niez lo sliwych, których leczenie wymaga t lumienia hormonu LH-RH oraz sposobu wytwarzania leków charakteryzuj a- cego si e tym, ze zwi azki o wzorze A-Xxx 1 -Xxx 2 -Xxx 3 -Xxx 4 -Xxx 5 -Xxx 6 -Xxx 7 -Xxx 8 -Xxx 9 -Xxx 10 -NH 2 mie- sza si e z konwencjonalnymi no snikami i substancjami pomocniczymi i konfekcjonuje jako leki. PL PL PL PL
Description
Opis wynalazku
Wynalazek dotyczy LH-RH antagonistów o ulepszonej rozpuszczalności, sposobu wytwarzania tych związków, leków, w których zawarte są te związki oraz zastosowania tych leków do leczenia hormonalnie zależnych nowotworów i niezłośliwych schorzeń, na które mają wpływ hormony, takich jak łagodny przerost prostaty (BPH) i endometrioza.
Terminologia zastosowana przy definiowaniu peptydów jest zgodna z terminologią wyjaśnioną przez Komisję IUPAC-IUB terminologii biochemicznej (European J. Biochem. 1984, 138, 9-37), gdzie zgodnie z dotychczasowym przedstawieniem grupy aminowe na zakończeniu N są zwrócone w lewo, a grupa karboksylowa na zakończeniu C jest zwrócona w prawo. Antagoniś ci LH-RH, takie jak peptydy według wynalazku, obejmują naturalne i syntetyczne aminokwasy, przy czym te pierwsze obejmują Ala, Val, Leu, Ile, Ser, Thr, Lys, Arg, Asp, Asn, Glu, Gln, Cys, Met, Phe, Tyr, Pro, Trp i His. Skróty literowe poszczególnych reszt aminokwasowych oparte są na zwyczajowych nazwach aminokwasów i są następujące: Ala = alanina, Arg = arginina, Gly = glicyna, Leu = leucyna, Lys = lizyna, Pal (3) = 3-(3-pirydylo)alanina, Nal (2)=3-(2-naftylo)alanina, Phe = fenyloalanina, Cpa = 4-chlorofenyloalanina, Pro = prolina, Ser = seryna, Thr = treonina, Trp = tryptofan, Tyr = tyrozyna oraz Sar = sarkozyna. Wszystkie opisane tu aminokwasy pochodzą z szeregu L, jeżeli nie podano inaczej. Przykładowo D-Nal (2) jest skrótem literowym dla 3-(2-naftylo)-D-alaniny, a Ser jest skrótem dla L-seryny. Podstawienia przy grupie ε-aminowej w łańcuchu bocznym lizyny przedstawione są przez człon w nawiasie za Lys, ewentualnie w postaci skrótu.
Inne stosowane skróty są następujące:
Ac Acetyl
Atz 3-amino-1,2,4-triazol-5-karbonyl
B 4-(4-amidyno-fenylo)-amino-1,4-dioksobutyl
Boc trzeciorzędowy butyloksykarbonyl
Bop fosforan benzotriazol-1-oksy-tris-(dimetyloamino)-fosfonio-heksafluorowy
DCC Dicykloheksylokarbodiimid
DCM Dichlorometan
Ddz dimetoksyfenylo-dimetylometylenoksykarbonyl (dimetoksy-dimetylo-Z)
DIC Diizopropylokarbodiimid
DIPEA N,N-diizopropyloetyloamina
DMF Dimetyloformamid
Fmoc Fluorenylometyloksykarbonyl
HF kwas fluorowodorowy
HOBt 1-hydroksybenzotriazol
HPLC wysokociśnieniowa chromatografia cieczowa
Me Metyl
TFA kwas trifluorooctowy
Z Benzyloksykarbonyl
Hci homocytrulina
Cpa 4-chlorofenyloalanina
Peptydy według wynalazku stanowią analogi hormonu uwalniającego hormon luteinizujący (LH-RH), który ma następującą strukturę:
p-Glu-His-Trp-Ser-Tyr-Gly-Leu-Arg-Pro-Gly-NH2, [LH-RH, gonadorelina].
Od ponad 20 lat badacze poszukują selektywnych silnych inhibitorów dekapeptydu LH-RH [M. Karten i J. E. Rivier, Endocrine Reviews 7, 44-66 (1986)]. Duże zainteresowanie takimi inhibitorami uzasadnione jest ich użytecznością w endokrynologii, ginekologii, w antykoncepcji i w zwalczaniu raka. Wytworzono dużą liczbę związków będących potencjalnymi antagonistami LH-RH. Najbardziej interesujące związki, jakie do dzisiaj wynaleziono, są związkami, których budowa stanowi modyfikację struktury LH-RH.
Pierwszy szereg silnych antagonistów otrzymano przez wprowadzenie aromatycznych reszt aminokwasowych w pozycjach 1, 2, 3 oraz 6, albo 2, 3 oraz 6. Zwykły sposób opisania tych związków jest następujący: najpierw bierze się aminokwasy, które w łańcuchu peptydowym LH-RH zajmują miejsce pierwotnie istniejących aminokwasów, przy czym pozycja, w których nastąpiła wymiana, zaznacza się cyfrowymi indeksami górnymi. Ponadto przez umieszczone dalej oznaczenie „LH-RH” wyraża się, że chodzi tu o analogi LH-RH, na których nastąpiła wymiana.
PL 200 647 B1
Znanymi antagonistami są:
[Ac-D-Cpa1,2, D-Trp3,6] LH-RH (D. H. Coy i in., w: Gross, E. i Meienhofer, J. (Eds) Peptides; Proceedings of the 6th American Peptid Symposium, s. 775-779, Pierce Chem. Co., Rockville III. (1979);
[Ac-Pro1, D-Cpa2, D-Nal (2)3,6] LH-RH (Patent USA nr 4.419.347) i [Ac-Pro1, D-Cpa2, D-Trp3,6] LH-RH (J. L. Pineda, i in., J. Clin Endocrinol. Metab. 56, 420, 1983). Aby polepszyć działanie antagonistów wprowadzono później zasadowe aminokwasy, np. D-Arg, w 6-pozycji. Przykł adowo [Ac-D-Cpa1,2, D-Trp3, D-Arg6, D-Ala10] LH-RH (ORG-30276) (D. H. Coy, i in., Endocrinology 100, 1445, 1982); i
[Ac-D-Nal (2)1, D-Phe(4-F)2, D-Trp3, D-Arg6] LH-RH (ORF 18260) (J. E. Rivier i in. w: Vickery B. H. Nestor, Jr, J. J., Hafez, E. S. E (Eds), LH-RH i jego analogi, s. 11-22 MTP Press, Lancaster, UK 1984).
Dalsi silni antagoniści LH-RH opisani są w WO 92/19651, WO 94/19370, WO 92/17025, WO 94/14841, WO 94/13313, US-A 5,300,492, US-A 5,140,009, EP 0 413 209 A1 i DE 195 44 212 A1.
Ostatnio ujawnione związki ze zmodyfikowanym modułem ornityny lub lizyny w pozycji 6, które są zgodne z następującym wzorem: Ac-D-Nal (2)1-D-Cpa2-D-Pal (3)3-Ser4-Tyr5-D-Xxx6-Leu7-Arg8-Pro9-D-Ala10-NH2, gdzie D-Xxx jest grupą aminokwasową o ogólnym wzorze (6)
-ΗΝ - CH - CO(CH2)n
NH
CO - R
Antagoniści LH-RH są ponadto opisane w WO 97/19953 i w EP-A2 0 328 090.
Dalszymi znanymi antagonistami LH-RH są antareliks, ganireliks i cetroreliks.
Antareliks:
Ac-D-Nal (2)1-D-Cpa2-D-Pal (3)3-Ser4-Tyr5-D-Hci6-Leu7-Lys (iPr)8-Pro9-D-Ala10-NH2
Ganireliks:
Ac-D-Nal (2)1-D-Cpa2-D-Pal (3)3-Ser4-Tyr5-D-hArg (Et)26-Leu7-hArg (Et2)8-Pro9-D-Ala10-NH2 Cetroreliks:
Ac-D-Nal (2)1-D-Cpa2-D-Pal (3)3-Ser4-Tyr5-D-Cit6-Leu7-Arg8-Pro9-D-Ala10-NH2
Celem wynalazku jest opracowanie nowych antagonistów LH-RH o zwiększonej stabilności enzymatycznej i znacznie lepszej rozpuszczalności w wodzie.
Związki o następującym ogólnym wzorze (1) A-Xxx1-Xxx2-Xxx3-Xxx4-Xxx5-Xxx6-Xxx7-Xxx8-Xxx9-Xxx10-NH2 (1) gdzie
A oznacza grup ę acetylową lub 3-(4-fluorofenylo)-propionylową ;
Xxx1 oznacza D-Nal (1) lub D-Nal (2),
Xxx2-Xxx3 oznacza D-Cpa-D-Pal (3) lub wiązanie pojedyncze,
Xxx4 oznacza Ser,
Xxx5 oznacza N-Me-Tyr,
Xxx6 oznacza D-Hci
Xxx7 Nle,
Xxx8 Arg lub Lys (iPr),
Xxx9 Pro oraz
Xxx10 Ala lub Sar, jak również ich sole z farmaceutycznie akceptowanymi kwasami.
Korzystnie sól jest octanem, trifluorooctanem lub embonianem.
Korzystnie związek ma następujący wzór:
Ac-D-Nal (2)1-D-Cpa2-D-Pal (3)3-Ser4-N-Me-Tyr5-D-Hci6-Nle7-Arg8-Pro9-D-Ala10-NH2.
Korzystnie związek ma następujący wzór:
Ac-D-Nal (2)1-D-Cpa2-D-Pal (3)3-Ser4-N-Me-Tyr5-D-Hci6-Nle7-Lys (iPr)8-Pro9-D-Ala10-NH2.
PL 200 647 B1
Korzystnie związek ma następujący wzór:
Ac-D-Nal (2)1-D-Cpa2-D-Pal (3)3-Ser4-N-Me-Tyr5-D-Hci6-Nle7-Lys (iPr)8-Pro9-Sar10-NH2.
Korzystnie związek ma następujący wzór:
Ac-D-Nal (2)1-D-Cpa2-D-Pal (3)3-Ser4-N-Me-Tyr5-D-Hci6-Nle7-Arg8-Pro9-Sar10-NH2.
Preparat farmaceutyczny zawierający związek o następującym ogólnym wzorze (1)
A-Xxx1-Xxx2-Xxx3-Xxx4-Xxx5-Xxx6-Xxx7-Xxx8-Xxx9-Xxx10-NH2 (1) gdzie
A oznacza grupę acetylową lub 3-(4-fluorofenylo)-propionylową;
Xxx1 oznacza D-Nal (1) lub D-Nal (2),
Xxx2-Xxx3 oznacza D-Cpa-D-Pal (3) lub wiązanie pojedyncze,
Xxx4 oznacza Ser,
Xxx5 oznacza N-Me-Tyr,
Xxx6 oznacza D-Hci
Xxx7 Nle,
Xxx8 Arg lub Lys (iPr),
Xxx9 Pro oraz
Xxx10 Ala lub Sar, jak również ich sole z farmaceutycznie akceptowanymi kwasami.
Sposób wytwarzania związków o ogólnym wzorze
A-Xxx1-Xxx2-Xxx3-Xxx4-Xxx5-Xxx6-Xxx7-Xxx8-Xxx9-Xxx10-NH2 (1) charakteryzuje się tym, że fragmenty posiadających odpowiednie grupy osłonowe modułów Xxxm, w których m jest liczbą całkowitą od 1 do 10, a moduł Xxx1 jest acetylowany, syntezuje się w fazie stałej lub w roztworze konwencjonalnymi sposobami, a nastę pnie fragmenty te w fazie stałej łączy się ze sobą przez sprzęganie segmentów i na zakończenie sprzęgania związki o ogólnym wzorze 1 konwencjonalnymi sposobami przez amidowanie przy module Xxx10 odłącza się od fazy stałej.
Zastosowanie substancji do wytwarzania leków do leczenia nowotworów zależnych hormonalnie, zwłaszcza raka prostaty lub sutka, oraz do wskazań niezłośliwych, których leczenie wymaga tłumienia hormonu LH-RH.
Sposób wytwarzania leków charakteryzuje się tym, że związki o ogólnym wzorze A-Xxx1-Xxx2Xxx3-Xxx4-Xxx5-Xxx6-Xxx7-Xxx8-Xxx9-Xxx10-NH2 (1) miesza się z konwencjonalnymi nośnikami i substancjami pomocniczymi i konfekcjonuje jako leki.
Związki według wynalazku można stosować do leczenia nowotworów zależnych od hormonów, zwłaszcza raka prostaty lub raka sutka oraz do niezłośliwych wskazań, których leczenie wymaga tłumienia hormonu LH-RH. W tym celu miesza się je ze zwykłymi substancjami nośnymi i pomocniczymi i konfekcjonuje w postaci leku.
Synteza związków według wzoru (1) może być przeprowadzana albo przez klasyczną kondensację fragmentową, albo przez syntezę w fazie stałej według Merrifielda z kolejno następują syntezą przy stosowaniu acylowanej w łańcuchu bocznym już za pomocą kwasu karboksylowego o ogólnym wzorze R1-COOH D-lizyny, jak też przez przemianę modułu dekapeptydowego z odpowiednimi kwasami karboksylowymi przez wiązanie amidowe w bocznym łańcuchu D-lizyny6. Potem można przeprowadzić wprowadzenie grupy R1-CO w trzech różnych miejscach tego sposobu: przed kondensacją poszczególnych modułów do peptydu, po wbudowaniu lizyny lub ornityny w łańcuch peptydowy, albo też przed kondensacją następnego modułu lub po kondensacji wszystkich modułów.
Związki według wzoru (1) syntezuje się znanymi sposobami, np. czystą techniką ciała stałego, częściowo techniką ciała stałego (tak zwana kondensacja fragmentowa) lub przez klasyczne sprzężenia roztworowe (patrz M. Bodanszky, Principles of Peptide Synthesis, Springer Verlag 1984).
Przykładowo sposoby syntezy w fazie stałej opisano w podręczniku Solid Phase Peptide Synthesis, J. M.,Stewart i J. D. Young, Pierce Chem. Company, Rockford, III, 1984, oraz w G. Barany i R. B. Merrifield, The Peptides, rozdział 1, s. 1-285, 1979, Academic Press Inc. Klasyczne syntezy roztworowe opisano wyczerpująco w opracowaniu Methoden der Organischen Chemie (Houben-Weyl), Synthese von Peptiden E. Wϋnsch (wydawca) 1974, Georg Thieme Verlag, Stuttgart, RFN.
Stopniowa synteza następuje przykładowo wtedy, gdy najpierw aminokwasy z zakończeniami karboksy, których grupa aminowa w pozycji α jest zabezpieczona, łączy się kowalentnie na zwykłym do tego celu nierozpuszczalnym nośniku, odszczepia się osłonowa grupę α-aminową od tych aminokwasów, z tak otrzymanymi swobodnymi grupami aminowymi łączy się dalsze chronione aminokwasy poprzez ich grupę karboksy i w ten sposób krok po kroku łączy się pozostałe aminokwasy syntezowanego
PL 200 647 B1 peptydu we właściwej kolejności, a po połączeniu wszystkich aminokwasów gotowy peptyd odłącza się od nośnika i ewentualnie odłącza dalsze istniejące grupy osłonowe funkcji pobocznych. Stopniową kondensację przeprowadza się przez syntezę z odpowiednich, konwencjonalnie chronionych aminokwasów w dotychczasowy sposób.
Łączenie poszczególnych aminokwasów ze sobą przeprowadza się konwencjonalnymi sposobami, przy czym w grę wchodzą zwłaszcza:
• sposób z symetrycznymi bezwodnikami w obecnoś ci dicykloheksylokarbodiimidu lub diizopropylokarbodiimidu (DCC, DIC);
• sama metoda karbodiimidowa;
• metoda karbodiimidowo-hydroksybenzotriazolowa (patrz The Peptides, tom 2, wyd. E. Gross i J. Meienhofer).
Przy łączeniu fragmentowym stosuje się korzystnie przebiegające bez racemizacji łączenie azydowe lub metodę DCC-1-hydroksybenzotriazolową, względnie DCC-3-hydroksy-3-okso-3,4-dihydro-1,2,3-benzotriazynową. Można również stosować aktywne estry fragmentów.
Do stopniowej kondensacji aminokwasów nadają się szczególnie dobrze uaktywnione estry N-chronionych aminokwasów, jak np. estry N-hydroksybursztynoimidowe lub estry 2,4,5-trichlorofenylowe. Aminolizę daje się bardzo dobrze katalizować przez związki N-hydroksy, które mają w przybliżeniu kwasowość kwasu octowego, jak np. 1-hydroksybenzotriazol.
Jako pośrednie aminowe grupy osłonowe nadają się grupy odwodnione, jak np. reszta benzyloksykarbonylowa (= reszta Z), albo słabo kwasowe grupy odszczepiane. Jako grupy osłonowe wobec grup aminowych w pozycji α wchodzą w grę przykładowo: trzeciorzędowe grupy butyloksykarbonylowe, grupy fluorenylometyloksykarbonylowe, grupy karbobenzoksy, względnie grupy karbobenztio (ewentualnie z resztą p-brom lub p-nitro-benzylową), grupy trifluoroacetylowe, reszta ftalilowa, grupa o-nitrofenoksyacetylowa, grupa tritrylowa, grupa p-toluolosulfonylowa, grupa benzylowa, podstawione w rdzeniu benzolowym reszty benzylowe (reszta p-brom lub p-nitro-benzylowa) oraz reszta α -fenyloetylowa. Patrz również Jesse P. Greenstein i Milton Winitz, Chemistry of Amino Acids, Nowy Jork 1961, John Wiley and Sons, Inc., tom 2, przykładowo s. 883 i następne, Principles of Peptide Synthesis, Springer Verlag 1984, Solid Phase Peptide Synthesis, J. M. Stewart i J. D. Young, Pierce Chem. Company, Rockford, III, 1984, G. Barany i R. B. Merrifield The Peptides, rozdział 1, s. 1-285, 1979, Academic Press Inc. oraz The Peptides, tom 2, wydanie E. Gross i J. Maienhofer, Academic Press, Nowy Jork. Te grupy osłonowe wchodzą zasadniczo również w grę przy ochronie dalszych funkcjonalnych grup bocznych (grupy OH, NH2) odpowiednich aminokwasów.
Istniejące grupy hydroksy (seryna, treonina) chronione są korzystnie przez grupy benzylowe i podobne. Dalsze grupy aminowe nie usytuowane w pozycji α (np. grupy aminowe w pozycji ω, grupa guanidynowa argininy) są korzystnie chronione ortogonalnie.
Poszczególne moduły aminokwasów, za wyjątkiem lizyny lub ornityny modyfikowanej grupą R1-COsą dostępne w handlu. Możliwy przebieg sposobu wytwarzania tych ostatnich związków jest następujący:
1. Amiduje się grupę kwasu α-karboksylowego.
2. Grupę ε-aminową osłania się grupą Z.
3. Grupę α-aminową osłania się grupą Boc, tak że otrzymuje się selektywność w odniesieniu do późniejszego odszczepiania osłonowych grup aminowych.
4. Odszczepia się grupę Z na grupie ε-aminowej.
5. Do grupy ε-aminowej wprowadza się żądaną grupę R4-CO-.
6. Odszczepia się grupę Boc na grupie α-aminowej .
7. Grupę α-aminową wyposaża się w grupę Z.
Przy wprowadzaniu grupy R1-CO- przez reakcję wymiany grupy aminowej lizyny z odpowiednim kwasem karboksylowym wchodzą zasadniczo w grę takie same sposoby jak opisano powyżej w odniesieniu do łączenia aminokwasów. Szczególnie korzystna jest jednak kondensacja z zastosowaniem karbodiimidu, przykładowo 1-etylo-3-(3-dimetyloaminopropylo)-karboimidu oraz 1-hydroksybenzotriazolu.
Reakcja łączenia aminokwasów przeprowadzana jest w konwencjonalnym indyferentnym rozpuszczalniku lub czynniku tworzącym zawiesinę (np. dichlorometan), przy czym ewentualnie w celu polepszenia rozpuszczalności można dodać dimetyloformamidu.
Jako syntetyczny materiał nośnikowy w grę wchodzą nierozpuszczalne polimery, np. pęczniejąca w rozpuszczalnikach organicznych żywica polistyrenowa w postaci perełek (przykładowo kopolimer polistyrenu i 1% diwinylobenzolu). Synteza chronionego dekapeptydoamidu na żywicy metylo-benzhydryloamidowej (żywica MBHA, to znaczy żywica polistyrenowa posiadająca grupy
PL 200 647 B1 metylo-benzhydryloamidowe), która daje pożądaną funkcję amidową peptydu na zakończeniu C po odłączeniu HF od nośnika, może być przeprowadzana zgodnie z następującym schematem działania:
Schemat działania Wykaz syntezy peptydu
| Etap | Funkcja | Rozpuszczalnik/reagent (obj/obj) | Czas |
| 1 | Płukanie | Metanol | 2x2 min |
| 2 | Płukanie | DCM | 3x3 min |
| 3 | Odłączanie | DCM/TFA (1:1) | 1x30 min |
| 4 | Płukanie | Izopropanol | 2x2 min |
| 5 | Płukanie | Metanol | 2x2 min |
| 6 | Płukanie | DCM | 2x3 min |
| 7 | Zobojętnianie | DCM/DIPEA (9:1) | 3x5 min |
| 8 | Płukanie | Metanol | 2x2 min |
| 9 | Płukanie | DCM | 3x3 min |
| 10 | STOP | Dodanie Boc-As w DCM + DIC + HOBt | |
| 11 | Łączenie | DCM, ewentualnie DCM/DCF | ok. 90 min |
| 12 | Płukanie | Metanol | 3x2 min |
| 13 | Płukanie | DCM | 2x3 min |
Aminokwasy chronione przez Να-Boc łączy się zwykle w potrójnym molowym nadmiarze w obecności diizopropylokarbodiimidu (DIC) i 1-hydroksybenzotriazolu (HOBt) w CH2Cl2/DMF w ciągu 90 minut, a grupę osłonową Boc odłącza się przez półgodzinne oddziaływanie 50% kwasu trifluorooctowego (TFA) w CH2Cl2. Do sprawdzenia pełnego przetworzenia może służyć test chloranilowy według Christensena oraz test ninhydrynowy Kaisera. Pozostałości swobodnej funkcji aminowej są blokowane przez acetylowanie w pięciokrotnym nadmiarze wobec acetyloimidazolu w CH2Cl2. Kolejność etapów reakcji syntezy peptydu na żywicy wynika ze schematu postępowania. W celu odłączenia związanego z żywicą peptydu produkt końcowy syntezy w fazie stałej suszy się w próżni nad P2O5 i przy 0°C traktuje się 500-krotnym nadmiarem HF/anizol 10:1 obj/obj przez 60 minut.
Po oddestylowaniu HF i anizolu w próżni peptydoamidy wytrącają się jako białe ciało stałe po wymieszaniu z pozbawionym wody eterem etylowym, a oddzielenie od wytrącającego się polimerowego nośnika następuje przez wypłukanie 50-procentowym wodnym roztworem kwasu octowego. Przez delikatne zatężenie roztworów kwasu octowego w próżni można otrzymać poszczególne peptydy jako oleje o dużej lepkości, które po dodaniu bezwodnego eteru na zimno zmieniają się w białe ciało stałe.
Dalsze oczyszczanie przeprowadza się rutynowymi sposobami preparatywnej wysokociśnieniowej chromatografii cieczowej (HPLC).
Przeprowadzanie peptydów w ich kwaśne sole addycyjne można zrealizować przez ich reakcję wymiany z kwasami w znany sposób. Odwrotnie swobodne peptydy można otrzymać przez reakcję wymiany ich kwaśnych soli addycyjnych z zasadami.
Sole peptydowe kwasu 2,2'-dwuhydroksy-1,1'-dwunaftylometano-3,3'-dwukarboksylowego można otrzymać przez reakcję wymiany peptydowych soli kwasu trifluorooctowego (sole TFA) z wolnym kwasem 2,2'-dwuhydroksy-1,1'-dwunaftylometano-3,3'-dwukarboksylowym lub z odpowiednią dwuazotową solą kwasu 2,2'-dwuhydroksy-1,1'-dwunaftylometano-3,3'-dwukarboksylowego. W tym celu peptydową sól TFA w roztworze wodnym wprowadza się do roztworu diazotowej soli kwasu 2,2'-dwuhydroksy-1,1'-dwunaftylometano-3,3'-dwukarboksylowego w medium biegunowo aprotycznym, korzystnie w dimetyloacetamidzie i izoluje się powstający jasnożółty osad.
Następujące przykłady służą do objaśnienia wynalazku bez ograniczania go.
P r z y k ł a d 1
Ac-D-Nal (2)1-D-Cpa2-D-Pal (3)3-Ser4-N-Me-Tyr5-D-Hci6-Nle7-Arg8-Pro9-D-Ala10-NH2
Synteza ta została przeprowadzona według schematu działania w fazie stałej (zob. wykaz syntezy peptydu) z wiązaniem DIC/HOBt, wychodząc od 3,3 g żywicy MBHA (gęstość załadunku 1,08
PL 200 647 B1 mmol/g). Po odłączeniu HF od polimerowego nośnika otrzymano 3,4 g surowego peptydu, który został oczyszczony standardowym sposobem preparatywnej chromatografii HPCI. Po odparowaniu ze stanu zamrożenia otrzymano 1,43 g jednorodnego pod względem HPLC produktu o sumarycznym wzorze C72, H96, N17, O14, Cl z prawidłowym FAB-MS: 1458,7 (M+H+) (obliczono: 1457,7) i o odpowiednim widmie 1H-NMR.
1H-NMR (500 MHz, D2O/DMSO-d6, δ w częściach na milion): 8,7 - 7,2, kilka m, arom. H i niecałkowicie wymienione NH; 6,92 i 6,58, 2d, 2x2H, arom. H p-Cl-Phe; 5,2 - 3,5, kilka m, Ca-H i alif. H; 3,22,6, kilka m, aromat. Ce-H, 2,1-0,7, kilka m, reszt, alifat. H; 1,70, s, 3H, acetyl; 1,20, d, 3H, Ce-H Ala; 0,8, m, Cδ-H Leu
P r z y k ł a d 2
Ac-D-Nal (2)1-D-Cpa2-D-Pal (3)3-Ser4-N-Me-Tyr5-D-Lys (B)6-Leu7-Lys (iPr)8-Pro9-D-Ala10-NH2
Synteza została przeprowadzona według schematu działania (zob. wykaz syntezy peptydu) z wiązaniem DIC/HOBt wychodząc od 4,0 g żywicy MBHA (gęstość załadunku 1,11 mmol/g). Po odłączeniu HF od polimerowego nośnika otrzymano 4,87 g surowego peptydu, który został oczyszczony standardowym sposobem preparatywnej chromatografii HPCI. Po odparowaniu ze stanu zamrożenia otrzymano 0,93 g produktu jednorodnego pod względem chromatografii HPLC, który przetworzono za pomocą kwasu 4-amidynofenyloamino-4-oksomasłowego w obecności BOP jako reagentu sprzęgającego do żądanego związku. Po ponownym oczyszczeniu metodą chromatografii HPLC otrzymano 148 mg żądanego związku o sumarycznym wzorze C85, H112, N17, O15, Cl z prawidłowym ESI-MS: 1647,6 (M+H+), (obliczono: 1645, 8) i o odpowiednim widmie 1H-NMR.
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, δ w częściach na milion):
10,4, s, 1H i 9,13, s, 2H, i 8,94, s, 2H, NH z 4-amidynoaniliny; 8,6-7,35, kilka m, arom. H i NH; 7,22 i 7,18, 2d, 4H, arom. H (pCl) Phe; 6,95 i 6,58, 2d, 4H, arom.H Tyr; 5,2-3,5, kilka m, Ca-H i alifat. H; 3,3-2,4, kilka m, Ce-H i N-CH3, 2,1-1,1, kilka m, reszt, alifat. H, 1,68, s, 3H, acetyl; 1,20, d, 3H, Ce-H Ala; 0,83, dd, 6H, Cδ-H Leu
P r z y k ł a d 3
Ac-D-Nal (2)1-D-Cpa2-D-Pal (3)3-Ser4-N-Me-Tyr5-D-Lys (B)6-Leu7-Arg8-Pro9-D-Ala10-NH2
Syntezę przeprowadzono według schematu działania w fazie stałej (zob. wykaz syntezy peptydu) z wiązaniem DIC/HOBt wychodząc od 4,0 g żywicy MBHA (gęstość załadunku 0,97 mmol/g). Po odłączeniu HF od polimerowego nośnika otrzymano 4,0 g surowego peptydu, który oczyszczono standardowym sposobem preparatywnej chromatografii HPCI. Po późniejszym odparowaniu ze stanu zamrożenia otrzymano 1,39 g jednorodnego pod względem chromatografii HPLC produktu, który za pomocą kwasu 4-amidynofenyloamino-4-oksomasłowego w obecności BOP jako reagentu sprzęgającego przetworzono w żądany związek. Po ponownym oczyszczeniu metodą chromatografii HPLC otrzymano 440 mg żądanego związku o sumarycznym wzorze C82, H106, N19, O15, Cl z prawidłowym ESI-MS: 1632,7 (M+H+) (obliczono: 1631,7) i o odpowiednim widmie 1H-NMR.
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, δ w częściach na milion) : 10,4, s, 1H i 9,15, s, 2H, i 9,0, s 2H, NH z 4-amidynoaniliny; 8,60, m, 2H, arom.H; 8,3-7,2, kilka m, arom. H i NH; 7,27 i 7,20, 2d, 4H, arom. H (pCl) Phe; 6,96 i 6,60, 2d, 4H, arom.H Tyr; 5,2-3,5, kilka m, Ca-H i alifat. H; 3,3-2,4, kilka m, Ce-H i N-CH3, 2,1-1,1, kilka m, reszt, alifat. H, 1,70, s, 3H, acetyl; 1,20, d, 3H, Ce-H Ala; 0,85, dd, 6H, Cδ-H Leu
P r z y k ł a d 4
Ac-D-Nal (2)1-D-Cpa2-D-Pal (3)3-Ser4-N-Me-Tyr5-D-Hci6-Nle7-Lys (iPr)8-Pro9-Ala10-NH2
Syntezę przeprowadzono według schematu działania w fazie stałej (zob. wykaz syntezy peptydu) z wiązaniem DIC/HOBt wychodząc z 2,5 g żywicy MBHA (gęstość załadunku 1,08 mmol/g). Po odłączeniu HF od polimerowego nośnika otrzymano 2,78 g surowego peptydu, który oczyszczono standardowym sposobem preparatywnej chromatografii HPCI. Po późniejszym odparowaniu ze stanu zamrożenia otrzymano 400 mg jednorodnego pod względem chromatografii HPLC produktu o sumarycznym wzorze C75, H102, N15, O14, Cl z prawidłowym ESI-MS: 1472,6 (M+H+) (obliczono: 1471,7) i o odpowiednim widmie 1H-NMR.
1H-NMR (500 MHz, D2O/DMSO-d6, δ w częściach na milion): 8,62, m, 2H, 8,30, m, 2H, 7,80, m, 4H, 7,66, s, 1H, 7,47, m, 2H, 7,36, d, 1H, aromat. H; 7,25 i 7,20, 2d, 4H, arom. H (pCl) Phe; 6,96 i 6,63, 2d, 4H, aromat. H Tyr; 5,10-4,0, kilka m, Ca-H i alifat. H; 3,75-2,65, kilka m, Ce-H i N-CH3, 2,1-1,05, kilka m, reszt, alifat. H, 1,74, s, 3H, acetyl; 1,23, d, 3H, Ce-H Ala; 1,20, m, CH3 izoprop.; 0,8, m,
3H, Cδ-H Nle
P r z y k ł a d 5
Ac-D-Nal (2)1D-Cpa2-D-Pal (3)3-Ser4-N-Me-Tyr5-D-Hci6-Nle7-Lys (iPr)8-Sar10-NH2
PL 200 647 B1
Syntezę przeprowadzono według schematu działania w fazie stałej (zob. wykaz syntezy peptydu) z wiązaniem DIC/HOBt wychodząc z 2,5 g ż ywicy MBHA (gęstość załadunku 1,08 mmol/g). Po odłączeniu HF od polimerowego nośnika otrzymano 2,74 g surowego peptydu, który oczyszczono standardowym sposobem preparatywnej chromatografii HPCI. Po późniejszym odparowaniu ze stanu zamrożenia otrzymano 840 mg jednorodnego pod względem chromatografii HPLC produktu o sumarycznym wzorze C75, H102, N15, O14, Cl z prawidłowym ESI-MS: 1472,6 (M+H+) (obliczono: 1471,7) i o odpowiednim widmie 1H-NMR.
1H-NMR (500 MHz, D2O/DMSO-d6, δ w częściach na milion): 8,6, m, 2H, 8,3, m, 2H, 7,85 m,
2H, 7,8, m, 2H, 7,65, s, 1H, 7,46, m, 2H, 7,35, d, 1H, aromat. H; 7,23 i 7,17, 2d, 4H, arom. H (pCl)
Phe; 7,0 i 6,6, 2d, 4H, aromat. H Tyr; 5,10-3,8, kilka m, Ca-H i alifat. H; 3,75-2,6, kilka m, Ce-H i N-CH3, 2,2-1,05, kilka m, reszt, alifat. H, 1,70, s, 3H, acetyl; 1,23, d, 3H, Ce Ala; 1,20, m, CH3 izoprop.; 0,8, m, 3H, Cδ-H Nle
P r z y k ł a d 6
3-(4-fluorofenylo)-propionyl-D-Nal (1)1-Ser4-N-Me-Tyr5-D-Lys (Atz)6-Leu7-Arg8-Pro9-D-Ala10-NH2
Syntezę przeprowadzono według schematu działania w fazie stałej (zob. wykaz syntezy peptydu) z wiązaniem DIC/HOBt wychodząc z 9,2 g żywicy MBHA (gęstość załadunku 1,08 mmol/g). Po odłączeniu HF od polimerowego nośnika otrzymano 5,8 g surowego peptydu, który oczyszczono standardowym sposobem preparatywnej chromatografii HPCI. Po późniejszym odparowaniu ze stanu zamrożenia otrzymano 2,0 g jednorodnego, niepodstawionego oktapeptydu, z którego 0,4 mmol z 0,5 mmol kwasu 3-amino-1,2,4-triazol-5-karboskylowego w obecności PyBOP jako reagentu sprzęgającego przetworzono w 790 mg surowego produktu żądanego związku. Po ponownym oczyszczeniu metodą chromatografii HPLC otrzymano 200 mg docelowego związku o sumarycznym wzorze C64, H86, N17, 012, F z prawidłowym FAB-MS: 1304,6 (M+H+) (obliczono: 1303,6).
1H-NMR (500 MHz, D2O/DMSO-d6, δ w częściach na milion): 8,14, m, 1H, 7,90, m, 1H, 7,80 m, 1H, 7,50, m, 2H, 7,35, m, 2H, 7,0, m, 6H, 7,63, m, 2H, aromat. H; 5,0, m, 1H, 4,83, m, 2H, 4,41, m, 1H, 4,30-4,05, kilka m, 4H Ca-H; 3,66 -2,25, kilka m. alifat. i aromat, łańcuchy boczne-H; 2,95, s i 2,75, s, N-Me; 2,05-1,1, kilka m. reszta alifat. H; 1,20, d, Ce-H Ala; 0,75, m, 6H, Cδ-H Leu.
Zgodne z wynalazkiem związki według wzoru 1 sprawdzono pod względem ich wiązania receptorów. Sposób ten oparty był ściśle na sposobie opisanym w publikacji Beckers i in., Eur. J. Biochem. 231, 535-543 (1995). Cetroreliks otrzymany według przedstawionej powyżej syntezy jodowano za pomocą [125I] (Amersham; aktywność właściwa 80,5 Bq/fmol) przy zastosowaniu reagentu lodoGen (Pierce). Mieszaninę reakcyjną oczyszczono przez chromatografię cieczową dużej mocy z odwróceniem faz, przy czym otrzymano monojodowany cetroreliks bez nieoznakowanego peptydu. Około 80% preparatu cetroreliks[125l] oraz nieoznakowanego związku według wynalazku nadawało się do specyficznego wiązania z receptorami.
Działanie in vitro związków według wynalazku można zbadać następującymi sposobami 1 i 2, przy czym określano powinowactwa wiązań w badaniu wiązania z preparatem cetroreliks[125l] (sposób 1) i aktywności funkcjonalne z triptoreliną jako bodźcem agonistycznym (sposób 2).
Sposób 1
Oznaczenie wiązania receptorów według Beckers, T., Marheineke, K., Reilander, H., Hilgard P. (1995) Selection and characterization of mammalian celi lines with stable overexpression of human pituitary receptors for gonadoliberin (GnRH) Eur. J. Biochem. 231, 535-543.
W celu zbadania wiązania receptorów cetroreliks jodowano za pomocą reagentu lodoGen (Pierce) z [125I] (Amersham; aktywność właściwa 80,5 Bq/fmol). Mieszaninę reakcyjną oczyszczono za pomocą chromatografii cieczowej dużej mocy z zamienionymi fazami, przy czym otrzymano monojodowany cetroreliks bez niezaznaczonego peptydu. Około 80% [125I] cetroreliks było zdolne do specyficznego wiązania receptorów.
Oznaczenie wiązania receptorów przeprowadzono z nienaruszonymi komórkami w warunkach fizjologicznych opisanych w publikacji Beckers i in. 1995. Subkonfluentne kultury stabilnie transfizjerowanych komórek LTK, które eksprymują ludzki receptor LHRH, zostały oddzielone przez inkubację w NaCl/Pi (137 mM NaCL, 2,7 mM KCl, 8,1 mM Na2HPO4, 11,47 mM KH2PO4)/1 mM EDTA i zebrane przez odwirowanie. Grudka komórek została z powrotem przeprowadzona w zawiesinę w buforze wiązania (DMEM bez H2CO3, z 4,5 g/l glukozy, 10 mM Hepes pH 7,5, 0,5% (mas./obj.) BSA, 1 g/l bacytracyny, 0,1 g/l SBTI, 0,1% (mas./obj) NaN3). W celu zbadania wypierania inkubowano 0,25x106 komórek/100 μl z około 225 pM [125I] cetroreliksu (aktywność właściwa 5 - 10x105 (dpm/pmol) i różne stężenia nieoznakowanego związku według wynalazku w charakterze konkurenta.
PL 200 647 B1
Zawiesinę komórek w 100 μΐ medium wiążącego nałożono w probówkach 400 μΐ na 200 μΐ 84% obj. oleju silikonowego (Merck Typ 550)/16% obj. oleju parafinowego. Po inkubacji przez 1 h przy temperaturze 37°C z powolnym ciągłym wstrząsaniem komórki oddzielono od medium inkubacji przez odwirowanie przez 2 minuty z prędkością 9000 obr/min (Rotortyp HTA13,8; Heraeus Sepatec, Osterode/Niemcy). Końce probówek, które zawierały grudkę komórek, odcięto. Następnie grudkę komórek i występ analizowano przez zliczanie promieniowania γ. Liczbę niespecyficznych wiązań oznaczono z uwzględnieniem nieoznakowanego cetroreliks przy końcowym stężeniu 1 μm i wynosiła ona typowo <10% wszystkich wiązań. Analizę danych dotyczących wiązania przeprowadzono za pomocą programu analizy EBDA/ligandu (Biosoft V3.0).
Sposób 2
Oznaczenie funkcjonalne w celu określenia działania antagonistycznego
Oznaczenie z kilku wprowadzonymi modyfikacjami przeprowadzono zgodnie z publikacją Beckers, T., Reilander, H., Hilgard, P. (1997) Characterization of gonadotropinreleasing hormone analogs based on a sensitive cellular luciferase reporter gene assay, Analyt, Biochem. 251, 17-23 (Beckers i in. 1997). 10000 komórek w każdym dołku, które eksprymowały ludzki receptor LH-RH i gen reporter lucyferazy, hodowano przez 24 h w płytkach mikromiareczkowych przy zastosowaniu DMEM z dodatkami i 1% (obj/obj) FCSi. Następnie komórki stymulowano przez 6 h za pomocą 1 nM [D-Trp6] LH-RH. Antagonistyczne związki według wynalazku zostały dodane przed stymulowaniem, a komórki na zakończenie lizowano w celu kwantyfikacji komórkowej aktywności Luc. Obliczenie wartości IC50 z krzywych dawka-działanie przeprowadzono przez nieliniową analizę regresji z zastosowaniem modelu HIlla (program EDX 2.0, C. Grunwald, Arzneimittelwerk Drezno).
Kwantyfikację aktywności Luc przeprowadzono zasadniczo jak opisano (Promega Technical Bulletins nr 101/161) przy zastosowaniu systemu oznaczenia lucyferazy (Promega E4030) z podwojeniem oznaczenia. Przez dodanie koenzymu A (CoA) utlenianie Luciferyl-CoA przebiega z korzystną kinetyką. Po usunięciu medium kultury z płytki mikromiareczkowej komórki lizowano przez dodanie 100 μl buforu lizy (25 mM trisfosforanu pH 7,8, 2 mM ditiotreitolu, 2 mM kwasu 1,2-diaminocykloheksano-N,N,N'N'-tetraoctowego (CDTA), 10% (obj/obj) gliceryny, 1% (obj/obj) Triton X-100). Po 15 minutach inkubacji w temperaturze pokojowej 10 μl lizatu komórek przeprowadzono do białej płytki mikromiareczkowej (Dynatech) nadającej się do detekcji luminometrycznej. Reakcję enzymatyczną inicjowano przez dodanie 50 μl buforu oznaczenia (20 mM tricyny pH 7,8, 1,07 mM (MgCO3) 4Mg (OH)2, 2,67 mM MgSO4, 0,1 mM kwasu etylenodiaminotetraoctowego (EDTA), 33,3 mM ditiotreitolu, 270 μM koenzymu A, 470 μM lucyferyny z robaczków świętojańskich (Photinus pyralis), 540 μM rATPNa2). Po jednej minucie przez całkowity czas jednej sekundy określano luminescencję z czasem połowicznego zmniejszenia wartości sygnału 5 minut przy zastosowaniu urządzenia EG&G Berthold MicroLumat LB 96 P.
W ten sposób otrzymano następujące dane in vitro, przy czym KD oznacza powinowactwo wiązania, a IC50 oznacza aktywność funkcjonalną, zaś pM oznacza pikomol na litr:
| Związek | Kd [pM] | IC50 [pM] |
| Cetroreliks | 170 (21) | 198 (5) |
| Przykład 1 (octan) | nie oznaczono | 242 (3) |
| Przykład 2 | 181 (1) | 684 (2) |
| Przykład 3 | 154 (1) | 492 (2) |
| Przykład 6 | nie oznaczono | 221 (2) |
( ) = Liczba niezależnych od siebie badań
Claims (10)
1. Zwią zki o następującym ogólnym wzorze (1) A-Xxx1-Xxx2-Xxx3-Xxx4-Xxx5-Xxx6-Xxx7-Xxx8-Xxx9-Xxx10-NH2 (1) gdzie
A oznacza grupę acetylową lub 3-(4-fluorofenylo)-propionylową;
Xxx1 oznacza D-Nal (1) lub D-Nal (2),
Xxx2-Xxx3 oznacza D-Cpa-D-Pal (3) lub wiązanie pojedyncze,
Xxx4 oznacza Ser,
Xxx5 oznacza N-Me-Tyr,
Xxx6 oznacza D-Hci Xxx7 Nle,
Xxx8 Arg lub Lys (iPr),
Xxx9 Pro oraz Xxx10 Ala lub Sar, jak również ich sole z farmaceutycznie akceptowanymi kwasami.
2. Związki według zastrz. 1, znamienne tym, że sól jest octanem, trifluorooctanem lub embonianem.
3. Związek według zastrz. 1, znamienny tym, że ma następujący wzór:
Ac-D-Nal (2)1-D-Cpa2-D-Pal (3)3-Ser4-N-Me-Tyr5-D-Hci6-Nle7-Arg8-Pro9-D-Ala10-NH2.
4. Związek według zastrz. 1, znamienny tym, że ma następujący wzór:
Ac-D-Nal (2)1-D-Cpa2-D-Pal (3)3-Ser4-N-Me-Tyr5-D-Hci6-Nle7-Lys (iPr)8-Pro9-D-Ala10-NH2.
5. Związek według zastrz. 1, znamienny tym, że ma następujący wzór:
Ac-D-Nal (2)1-D-Cpa2-D-Pal (3)3-Ser4-N-Me-Tyr5-D-Hci6-Nle7-Lys (iPr)8-Pro9-Sar10-NH2.
6. Związek według zastrz. 1, znamienny tym, że ma następujący wzór:
Ac-D-Nal (2)1-D-Cpa2-D-Pal (3)3-Ser4-N-Me-Tyr5-D-Hci6-Nle7-Arg8-Pro9-Sar10-NH2.
7. Preparat farmaceutyczny zawierają cy związek według jednego z zastrz. 1-6.
8. Sposób wytwarzania związków o ogólnym wzorze 1 według zastrz. 1, znamienny tym, że fragmenty posiadających odpowiednie grupy osłonowe modułów Xxxm, w których m jest liczbą całkowitą od 1 do 10, a moduł Xxx1 jest acetylowany, syntezuje się w fazie stałej lub w roztworze konwencjonalnymi sposobami, a następnie fragmenty te w fazie stałej łączy się ze sobą przez sprzęganie segmentów i na zakończenie sprzęgania związki o ogólnym wzorze 1 konwencjonalnymi sposobami przez amidowanie przy module Xxx10 odłącza się od fazy stałej.
9. Zastosowanie substancji według jednego z zastrz. 1-6 do wytwarzania leków do leczenia nowotworów zależnych hormonalnie, zwłaszcza raka prostaty lub sutka, oraz do wskazań niezłośliwych, których leczenie wymaga tłumienia hormonu LH-RH.
10. Sposób wytwarzania leków, znamienny tym, że związki według jednego z zastrz. 1-6 miesza się z konwencjonalnymi nośnikami i substancjami pomocniczymi i konfekcjonuje jako leki.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE19911771A DE19911771B4 (de) | 1999-03-17 | 1999-03-17 | LHRH-Antagonist, Verfahren zu seiner Herstellung und seiner Verwendung |
| PCT/EP2000/002165 WO2000055190A1 (de) | 1999-03-17 | 2000-03-11 | Neue lhrh-antagonisten mit verbesserten löslichkeitseigenschaften |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL351792A1 PL351792A1 (en) | 2003-06-16 |
| PL200647B1 true PL200647B1 (pl) | 2009-01-30 |
Family
ID=7901213
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL351792A PL200647B1 (pl) | 1999-03-17 | 2000-03-11 | Nowi antagoniści LH-RH o ulepszonej rozpuszczalności, preparat farmaceutyczny zawierający te związki, sposób wytwarzania tych związków, zastosowanie tych związków do wytwarzania leków do leczenia nowotworów zależnych hormonalnie oraz sposób wytwarzania leków zawierających te związki |
Country Status (33)
| Country | Link |
|---|---|
| US (3) | US6627609B1 (pl) |
| EP (1) | EP1163264B1 (pl) |
| JP (1) | JP3801867B2 (pl) |
| KR (1) | KR100569623B1 (pl) |
| CN (1) | CN1185251C (pl) |
| AR (1) | AR022970A1 (pl) |
| AT (1) | ATE277077T1 (pl) |
| AU (1) | AU759442B2 (pl) |
| BG (1) | BG65283B1 (pl) |
| BR (1) | BR0009472A (pl) |
| CA (1) | CA2381461C (pl) |
| CO (1) | CO5150192A1 (pl) |
| CZ (1) | CZ301696B6 (pl) |
| DE (2) | DE19911771B4 (pl) |
| DK (1) | DK1163264T3 (pl) |
| ES (1) | ES2225103T3 (pl) |
| HK (1) | HK1045531B (pl) |
| HU (1) | HU229672B1 (pl) |
| IL (3) | IL145484A0 (pl) |
| MX (1) | MXPA01010052A (pl) |
| NO (1) | NO327753B1 (pl) |
| NZ (1) | NZ514830A (pl) |
| PL (1) | PL200647B1 (pl) |
| PT (1) | PT1163264E (pl) |
| RU (1) | RU2227145C2 (pl) |
| SI (2) | SI1163264T1 (pl) |
| SK (1) | SK287880B6 (pl) |
| TR (1) | TR200103339T2 (pl) |
| TW (1) | TWI243179B (pl) |
| UA (1) | UA70997C2 (pl) |
| WO (1) | WO2000055190A1 (pl) |
| YU (1) | YU68702A (pl) |
| ZA (1) | ZA200107753B (pl) |
Families Citing this family (18)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6828415B2 (en) * | 1993-02-19 | 2004-12-07 | Zentaris Gmbh | Oligopeptide lyophilisate, their preparation and use |
| US5677184A (en) * | 1994-04-19 | 1997-10-14 | Takeda Chemical Industries, Ltd. | CHO cells that express human LH-RH receptor |
| WO2001068676A2 (de) | 2000-03-14 | 2001-09-20 | Zentaris Ag | Lh-rh-antagonisten, deren herstellung und verwendung als arzeimittel |
| DE19911771B4 (de) | 1999-03-17 | 2006-03-30 | Zentaris Gmbh | LHRH-Antagonist, Verfahren zu seiner Herstellung und seiner Verwendung |
| UA73956C2 (en) * | 1999-09-23 | 2005-10-17 | Zentaris Gmbh | Method for therapeutic management of extrauterine proliferation of endometrial tissue, chronic pelvic pain and fallopian tube obstruction due to extrauterine proliferation of endometrial tissue |
| US7005418B1 (en) | 1999-09-23 | 2006-02-28 | Zentaris Gmbh | Method for the therapeutic management of extrauterine proliferation of endometrial tissue, chronic pelvic pain and fallopian tube obstruction |
| DE10024451A1 (de) | 2000-05-18 | 2001-11-29 | Asta Medica Ag | Pharmazeutische Darreichungsform für Peptide, Verfahren zu deren Herstellung und Verwendung |
| CZ20033167A3 (cs) * | 2001-04-30 | 2004-08-18 | Zentariságmbh | Způsob ošetřování demence a neurodegenerativních chorob středními dávkami LHRH antagonistů |
| SE0104462D0 (sv) * | 2001-12-29 | 2001-12-29 | Carlbiotech Ltd As | Peptide purifcation (Peptidrening) |
| MXPA05003318A (es) * | 2002-09-27 | 2005-09-12 | Zentaris Gmbh | Forma de administracion para peptidos farmaceuticamente activos con liberacion sostenida y metodo para la produccion de los mismos. |
| CN100340572C (zh) * | 2004-12-01 | 2007-10-03 | 中国人民解放军军事医学科学院毒物药物研究所 | 新的lhrh拮抗剂 |
| CN101037472B (zh) * | 2006-03-14 | 2013-03-27 | 中国人民解放军军事医学科学院毒物药物研究所 | 具有低组胺释放作用的促黄体生成素释放激素拮抗剂 |
| EP1891964A1 (en) * | 2006-08-08 | 2008-02-27 | AEterna Zentaris GmbH | Application of initial doses of LHRH analogues and maintenance doses of LHRH antagonists for the treatment of hormone-dependent cancers and corresponding pharmaceutical kits |
| CN101597321B (zh) * | 2008-06-03 | 2013-04-24 | 中国人民解放军军事医学科学院毒物药物研究所 | 长效低组胺释放副作用的lhrh拮抗剂 |
| WO2012050892A2 (en) * | 2010-09-29 | 2012-04-19 | Esperance Pharmaceuticals, Inc. | Methods for stimulating, increasing or enhancing killing of a cell that expresses luteinizing hormone releasing hormone (lhrh) receptors |
| CN102584945A (zh) * | 2012-02-09 | 2012-07-18 | 深圳翰宇药业股份有限公司 | 一种醋酸加尼瑞克的制备方法 |
| CN103524599B (zh) * | 2012-07-05 | 2016-04-20 | 中国人民解放军军事医学科学院毒物药物研究所 | 环肽lhrh拮抗剂衍生物及其药物用途 |
| CN104231055A (zh) | 2013-06-18 | 2014-12-24 | 深圳翰宇药业股份有限公司 | 加尼瑞克前体以及由其制备醋酸加尼瑞克的方法 |
Family Cites Families (15)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4581169A (en) | 1982-12-21 | 1986-04-08 | Syntex (U.S.A.) Inc. | Nona-peptide and deca-peptide analogs of LHRH, useful as LHRH antagonists |
| EP0145032B1 (en) | 1983-08-16 | 1987-11-04 | Akzo N.V. | Lh- rh antagonists |
| US4800191A (en) * | 1987-07-17 | 1989-01-24 | Schally Andrew Victor | LHRH antagonists |
| US5110904A (en) * | 1989-08-07 | 1992-05-05 | Abbott Laboratories | Lhrh analogs |
| EP0400065B1 (en) * | 1988-02-10 | 1997-08-27 | TAP Pharmaceuticals Inc. | Lhrh analog |
| US5140009A (en) | 1988-02-10 | 1992-08-18 | Tap Pharmaceuticals, Inc. | Octapeptide LHRH antagonists |
| US5300492A (en) * | 1988-02-10 | 1994-04-05 | Tap Pharmaceuticals | LHRH analogs |
| DE4117507A1 (de) | 1991-05-24 | 1992-11-26 | Schering Ag | Verfahren zur herstellung von n(pfeil hoch)6(pfeil hoch)-substituierten lysin-derivaten |
| US5942493A (en) * | 1995-11-28 | 1999-08-24 | Asta Medica Aktiengesellschaft | LH-RH antagonists having improved action |
| DE19544212A1 (de) * | 1995-11-28 | 1997-06-05 | Asta Medica Ag | Neue LH-RH-Antagonisten mit verbesserter Wirkung |
| US6054432A (en) * | 1996-09-12 | 2000-04-25 | Asta Medica Aktiengesellschaft | Means for treating prostate hypertrophy and prostate cancer |
| US5968895A (en) | 1996-12-11 | 1999-10-19 | Praecis Pharmaceuticals, Inc. | Pharmaceutical formulations for sustained drug delivery |
| DE19911771B4 (de) | 1999-03-17 | 2006-03-30 | Zentaris Gmbh | LHRH-Antagonist, Verfahren zu seiner Herstellung und seiner Verwendung |
| US6586403B1 (en) * | 2000-07-20 | 2003-07-01 | Salpep Biotechnology, Inc. | Treating allergic reactions and inflammatory responses with tri-and dipeptides |
| KR100876538B1 (ko) * | 2000-08-17 | 2008-12-31 | 아에테르나 젠타리스 게엠베하 | Ｌｈｒｈ 길항제의 염의 제조방법 |
-
1999
- 1999-03-17 DE DE19911771A patent/DE19911771B4/de not_active Expired - Fee Related
-
2000
- 2000-03-07 TW TW089104093A patent/TWI243179B/zh not_active IP Right Cessation
- 2000-03-11 NZ NZ514830A patent/NZ514830A/en not_active IP Right Cessation
- 2000-03-11 AT AT00910816T patent/ATE277077T1/de active
- 2000-03-11 DE DE50007905T patent/DE50007905D1/de not_active Expired - Lifetime
- 2000-03-11 JP JP2000605616A patent/JP3801867B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 2000-03-11 IL IL14548400A patent/IL145484A0/xx active IP Right Grant
- 2000-03-11 CN CNB008067341A patent/CN1185251C/zh not_active Expired - Lifetime
- 2000-03-11 SK SK1323-2001A patent/SK287880B6/sk not_active IP Right Cessation
- 2000-03-11 RU RU2001128232/04A patent/RU2227145C2/ru active
- 2000-03-11 MX MXPA01010052A patent/MXPA01010052A/es active IP Right Grant
- 2000-03-11 SI SI200030505T patent/SI1163264T1/xx unknown
- 2000-03-11 ES ES00910816T patent/ES2225103T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2000-03-11 WO PCT/EP2000/002165 patent/WO2000055190A1/de active IP Right Grant
- 2000-03-11 TR TR2001/03339T patent/TR200103339T2/xx unknown
- 2000-03-11 DK DK00910816T patent/DK1163264T3/da active
- 2000-03-11 AU AU32887/00A patent/AU759442B2/en not_active Expired
- 2000-03-11 HU HU0200363A patent/HU229672B1/hu unknown
- 2000-03-11 BR BR0009472-2A patent/BR0009472A/pt not_active Application Discontinuation
- 2000-03-11 CA CA2381461A patent/CA2381461C/en not_active Expired - Lifetime
- 2000-03-11 PL PL351792A patent/PL200647B1/pl unknown
- 2000-03-11 EP EP00910816A patent/EP1163264B1/de not_active Expired - Lifetime
- 2000-03-11 KR KR1020017011843A patent/KR100569623B1/ko active IP Right Grant
- 2000-03-11 CZ CZ20013318A patent/CZ301696B6/cs not_active IP Right Cessation
- 2000-03-11 PT PT00910816T patent/PT1163264E/pt unknown
- 2000-03-14 US US09/525,007 patent/US6627609B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2000-03-16 CO CO00019239A patent/CO5150192A1/es unknown
- 2000-03-17 AR ARP000101201A patent/AR022970A1/es active IP Right Grant
- 2000-11-03 UA UA2001106842A patent/UA70997C2/uk unknown
-
2001
- 2001-03-12 YU YU68702A patent/YU68702A/sh unknown
- 2001-03-12 SI SI200130882T patent/SI1268522T1/sl unknown
- 2001-09-14 NO NO20014486A patent/NO327753B1/no not_active IP Right Cessation
- 2001-09-16 IL IL145484A patent/IL145484A/en not_active IP Right Cessation
- 2001-09-19 ZA ZA200107753A patent/ZA200107753B/en unknown
- 2001-10-11 BG BG106008A patent/BG65283B1/bg unknown
-
2002
- 2002-09-05 IL IL151647A patent/IL151647A/en not_active IP Right Cessation
- 2002-09-26 HK HK02107028.9A patent/HK1045531B/zh not_active IP Right Cessation
-
2003
- 2003-09-29 US US10/671,573 patent/US7148195B2/en not_active Expired - Lifetime
-
2006
- 2006-07-24 US US11/459,583 patent/US7732412B2/en not_active Expired - Lifetime
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US7732412B2 (en) | Methods of treatment using novel LHRH antagonists having improved solubility properties | |
| JP3805679B2 (ja) | 新規のｌｈｒｈ拮抗物質、その製造および医薬としてのその使用 | |
| NO311023B1 (no) | Nye LH-RH-antagonister, deres fremstilling og anvendelser samt legemidler inneholdende forbindelsene og deres fremstilling |