PL189586B1 - Sposób wytwarzania autoszczepionki przyspieszającej oczyszczanie gleby i ścieków z zanieczyszczeń ropopochodnych - Google Patents

Sposób wytwarzania autoszczepionki przyspieszającej oczyszczanie gleby i ścieków z zanieczyszczeń ropopochodnych

Info

Publication number
PL189586B1
PL189586B1 PL98329701A PL32970198A PL189586B1 PL 189586 B1 PL189586 B1 PL 189586B1 PL 98329701 A PL98329701 A PL 98329701A PL 32970198 A PL32970198 A PL 32970198A PL 189586 B1 PL189586 B1 PL 189586B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
bacteria
soil
amount
petroleum
solution
Prior art date
Application number
PL98329701A
Other languages
English (en)
Other versions
PL329701A1 (en
Inventor
Krzysztof Ulfig
Grażyna Płaza
Original Assignee
Inst Ekologii Terenow Uprzemys
Wojewodzki Fundusz Ochrony Sro
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Inst Ekologii Terenow Uprzemys, Wojewodzki Fundusz Ochrony Sro filed Critical Inst Ekologii Terenow Uprzemys
Priority to PL98329701A priority Critical patent/PL189586B1/pl
Publication of PL329701A1 publication Critical patent/PL329701A1/xx
Publication of PL189586B1 publication Critical patent/PL189586B1/pl

Links

Landscapes

  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Purification Treatments By Anaerobic Or Anaerobic And Aerobic Bacteria Or Animals (AREA)
  • Processing Of Solid Wastes (AREA)

Abstract

1. Sposób wytwarzania autoszczepionki przyspieszajacej oczyszczanie gleby i scie- ków z zanieczyszczen ropopochodnych, polegajacy na izolowaniu bakterii z gleby lub scieków z zastosowaniem rozcienczen i selektywnej hodowli wzbogacajacej z wyjalo- wiona ropa naftowa lub naftalenem, jako jedynymi zródlami wegla, a nastepnie ich iden- tyfikacji i testowaniu w hodowli w plynnej pozywce mineralnej wzbogaconej w heksan lub toluen w ilosci 0,05% objetosciowych lub naftalen w ilosci 0,01% wagowych w bu- telkach zamknietych, dalszej hodowli w plynnej pozywce mineralnej wzbogaconej w wy- jalowiona rope naftowa w ilosci 0,1% objetosciowych w kolbach otwartych i na procesie namnazania wyselekcjonowanych szczepów bakteryjnych o najwyzszej wydajnosci roz- kladu weglowodorów, znamienny tym, ze namnazanie wyselekcjonowanych bakterii prowadzi sie w pozywce bulionowej, a nastepnie uzyskana w tej hodowli zawiesine bak- teryjna, po zakonczonym 48-godzinnym cyklu hodowli oczyszcza sie z bulionu poprzez um ieszczenie w probów ce o pojem nosci 1 5 cm 3 i w irow anie nrzez 10 min nrzv 3500 ob- rotach na minute, po czym zebrana warstwe supernatantu zlewa sie, a do osadu dolewa sie 10 cm3 soli fizjologicznej, stanowiacej 0,85% roztwór NaCl, a nastepnie uzyskana zawie- sine poddaje sie trzykrotnemu wytrzasaniu w cyklach po 30 sekund i wprowadza sie do roztworu soli mineralnych i mikroelementów. PL

Description

Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania autoszczepionki przyspieszającej oczyszczanie gleby i ścieków z zanieczyszczeń ropopochodnych, gromadzących się zwłaszcza na terenach przylegających do rafinerii ropy naftowej.
W niektórych glebach i ściekach efektywność naturalnych procesów usuwania zanieczyszczeń ropopochodnych, nawet po stworzeniu optymalnych warunków ich biodegradacji nie jest wystarczająca. W takich przypadkach stosowane są różnego rodzaju preparaty przyspieszające powyższe procesy. Preparaty te zawierają substancje odżywcze oraz szczepy bakteryjne i/lub grzybowe, wyspecjalizowane w produkcji szczególnie wydajnych enzymów i substancji powierzchniowo czynnych biorących udział w biodegradacji węglowodorów ropopochodnych. Substancje powierzchniowo czynne zwiększają dostępność węglowodorów dla enzymów mikroorganizmów. Można wyróżnić dwa rodzaje preparatów mikrobiologicznych: preparaty zawierające szczepy pochodzenia zewnętrznego oraz autoszczepionki zawierające wydajne szczepy rodzime, wyizolowane rożnymi metodami z oczyszczanej gleby lub wody.
Znany jest z polskiego opisu patentowego nr 180141 sposób mikrobiologicznej remediacji gruntów z produktów naftowych, w którym wykorzystuje się rodzime mikroorganizmy wyizolowane z grantu, przeznaczonego do oczyszczania. Wyizolowane szczepy bakteryjne hoduje się na płynnym podłożu mineralnym w warunkach tlenowych z udziałem węglowodorów ropopochodnych i drogą identyfikacji wybiera się bakterie o największej aktywności w rozkładzie tych zanieczyszczeń. Wyselekcjonowane w ilości od 5 do 10 różnych gatunków bakterie namnaża się w temperaturze 26°C przez 48 do 72 godzin. Namnożoną hodowlę wprowadza się do skażonego gruntu, poprzez zraszanie gruntu wodną zawiesiną bakterii w ilości powyżej 105 komórek na 1 g suchej masy gruntu.
Opisany sposób remediacji gruntu z udziałem rodzimych szczepów bakteryjnych jest skuteczną metodą usuwania zanieczyszczeń ropopochodnych, lecz zbyt duża ilość wyizolowanych w trakcie hodowli mikroorganizmów ogranicza pewność wyeliminowania z preparatu szczepów patogennych, opóźniających procesy bioremediacji. Ponadto wyselekcjonowane w procesie hodowli i namnażania bakterie mogą nie zapewniać optymalnej aktywności mikroorganizmów w rozkładzie węglowodorów ropopochodnych.
Sposób wytwarzania autoszczepionki przyspieszającej oczyszczanie gleby i ścieków z zanieczyszczeń ropopochodnych, według wynalazku polega na tym, że wyizolowane w znanym procesie hodowli bakterie po ich zidentyfikowaniu i przetestowaniu, poddaje się procesowi namnażania w pożywce bulionowej, stanowiącej mieszaninę bulionu odżywczego w ilości 4 g, ekstraktu drożdżowego w ilości 2,5 g i NaCl w ilości 2,5 g rozpuszczonej w wodzie destylowanej w ilości 500 cm w obecności heksanu lub toluenu w ilości 10 1 lub naftalenu w ilości 0,2 mg przypadającej na 20 cm3 pożywki. Uzyskaną po zakończeniu 48-godzinnej hodowli zawiesinę bakteryjną oczyszcza się z bulionu poprzez umieszczenie jej w probówce o pojemności 15 cm3 i wirowanie przez 10 min przy 3500 obrotach na minutę. Zebraną. warstwę supematantu zlewa się, a do osadu dolewa się 10 cm3 soli fizjologicznej, stanowiącej 0,85% roztwór NaCl. Uzyskaną zawiesinę poddaje się trzykrotnym wstrząsom w cyklach po 30 sekund i wprowadza się do roztworu soli mineralnych i mikroelementów, w składzie korzystnie:
NH 4NO 3 - 1,00 g
K2HPO 4 - 1,00 g
KH2P04 - 1,00 g
MgS04*7H20 - 0,20 g
CaCl2*6H20 - 0,02 g
FeCl3*6H20 - 0,02 g
189 586
0 1 cm roztworu mikroelementów
woda destylowana - 1 dm3
ZnCl2 - 70 mg
MnCl2*4H2O - 100 mg
CoCl2*6H2O - 200 mg
NiCl2*6H2O - 100 mg
CuCl2*2HO2 - 20 mg
NaMoO4*5H2O - 50 mg
Na2SeO3*5H2O - 26 mg
NaVO3*H2O - 10 mg
Na2WO4*2H2O - 30 mg
HCl (25%) - 1 cm3
woda destylowana - 1000 cm3
Wzajemne proporcje objętości zawiesin wyselekcjonowanych bakterii w roztworze soli mineralnych i mikroelementów wynoszą 1:1:1, przy średniej liczbie komórek bakteryjnych w 1 cm3 płynnego preparatu autoszczepionki stanowiącej nie mniej niż 9,5 x 106 dla ścieków i nie mniej niż 1,9 x 107 dla gleby.
Sposób wytwarzania autoszczepionki przyspieszającej oczyszczanie gleby i ścieków z zanieczyszczeń ropopochodnych, według wynalazku pozwala na uzyskanie autoszczepionki charakteryzującej się wysoką wydajnością biodegradacji węglowodorów. Opisany proces hodowli i namnażania bakterii zapewnia wyselekcjonowanie trzech szczepów bakteryjnych o bardzo wysokiej wydajności rozkładu krótko- i długołańcuchowych węglowodorów alifatycznych oraz jedno- i wielopierścieniowych węglowodorów aromatycznych. Wytworzona opisanym sposobem autoszczepionka jest pozbawiona właściwości toksycznych, a metoda oparta na rodzimych, pobranych z gleby szczepach bakteryjnych, stanowiących surowiec produkcyjny jest metodą ekonomiczną, nie wymagającą dużych nakładów. W toku badań laboratoryjnych ustalono, że powstała autoszczepionka skraca ponad 3-krotnie czas usuwania zanieczyszczeń ropopochodnych z zanieczyszczonych gruntów.
Sposób wytwarzania autoszczepionki przyspieszającej oczyszczanie gleby i ścieków z zanieczyszczeń ropopochodnych, według wynalazku przedstawiono w przykładzie wykonania.
Z gruntu zanieczyszczonego produktami ropopochodnymi pobiera się próbkę, którą poddaje się procesowi izolacji bakterii metodą rozcieńczeń oraz matodą oznaczania NPL połączoną z metodą selektywnej hodowli wzbogacającej. Hodowlę prowadzi się w boksach typu BIOLOG w warunkach tlenowych w obecności jałowej ropy naftowej. Wyselekcjonowane w tym procesie bakterie poddaje się testom w hodowli w płynnej pożywce mineralnej, wzbogaconej w heksan w ilości 0,05% objętościowych, w butelkach zamkniętych. Dalszą hodowlę bakterii prowadzi się w kolbach otwartych w płynnej pożywce mineralnej, wzbogaconej w wyjałowioną ropę naftową w ilości 0,1% objętościowych. Wyselekcjonowane w procesie bakterie namnaża się w pożywce bulionowej, stanowiącej mieszaninę bulionu odżywczego w ilości 4 g, ekstraktu drożdżowego w ilości 2,5 g i NaCl w ilości 2,5 g, rozpuszczonej w wodzie destylowanej w ilości 500 cm3, z dodatkiem heksanu w ilości 10 1, przypadającej na 20 cm3 pożywki. Po zakończeniu 48-godzinnej hodowli, hodowlę bakteryjną oczyszcza się: poprzez umieszczenie 10 cm3 hodowli w probówce typu Corning o pojemności 15 cm i wirowanie przez 10 min przy 3500 obrotach na minutę. Zabraną podczas wirowania warstwę supematanu zlewa się, a do osadu dolewa się 10 cm3 soli fizjologicznej, stanowiącej 0,85% roztwór NaCl. Probówkę wstrząsa się na aparacie typu Vortex w trzech cyklach po 30 sekund. Uzyskaną zawiesinę wprowadza się do roztworu soli mineralnych i mikroelementów, w składzie:
I4INOZ3 K2HPO4 KH2PO4 MgSO4*7H2O CaCl2*6H2O FeCl3*6H2O 1 cm3 roztworu mikroelementów ι,υυ g
1,00 g
1,00 g 0,20 g 0,02 g 0,02 g
189 586 woda destylowana - 1 dm3
ZnCl2 - 70 mg
MnCl2*4H2O - 100 mg
CoCl2*6H2O - 200 mg
NiCl2*6H2O - 100 mg
CuCl2*2 H2O - 22) mg
NaMoO4*5H2O - 50 mg
Na2SeOs*5HoO - 26 mg
NaVO3*HoO - 10 mg
Na2WO4*6HoO - 30 mg
HCl (05%) - 1 cm3 woda destylowana - 1000 cm3
Wzajemne proporcje objętości zawiesin wyselekcjonowanych bakterii w roztworze soli mineralnych i mikroelementów wynoszą 0: 0: 0.
W przypadku ścieków, sole mineralne i mikroelementy w postaci suchej oraz 00 cm 3 mieszaniny zawiesin bakteryjnych wprowadza się do 0 dm3 oczyszczanych ścieków, przy średniej liczbie komórek bakteryjnych w 1 cm3 płynnego prepartu autoszczepionki stanowiącej
9,5 x 006.
' O Π
W przypadku gleby, 0 dm płynnego prepartu autoszczepionki zawierającego 60 rn mieszaniny zawisin bakterii w roztworze soli mineralnych i mikroelementów wprowadza się poprzez mieszanie lub zraszanie do 5 dm3 gleby, przy średniej liczbie komórek bakteryjnych w 0 cm3 płynnego preparatu autoszczepionki stanowiącej 1,9 x 100.
189 586
Departament Wydawnictw UP RP. Nakład 50 egz
Cena 2,00 zł.

Claims (4)

  1. Zastrzeżenia patentowe
    1. Sposób wytwarzania autoszczepionki przyspieszającej oczyszczanie gleby i ścieków z zanieczyszczeń ropopochodnych, polegający na izolowaniu bakterii z gleby lub ścieków z zastosowaniem rozcieńczeń i selektywnej hodowli wzbogacającej z wyjałowioną ropą naftową lub naftalenem, jako jedynymi źródłami węgla, a następnie ich identyfikacji i testowaniu w hodowli w płynnej pożywce mineralnej wzbogaconej w heksan lub toluen w ilości 0,05% objętościowych lub naftalen w ilości 0,01% wagowych w butelkach zamkniętych, dalszej hodowli w płynnej pożywce mineralnej wzbogaconej w wyjałowioną ropę naftową w ilości 0,1% objętościowych w kolbach otwartych i na procesie namnażania wyselekcjonowanych szczepów bakteryjnych o najwyższej wydajności rozkładu węglowodorów, znamienny tym, że namnażanie wyselekcjonowanych bakterii prowadzi się w pożywce bulionowej, a następnie uzyskaną w tej hodowli zawiesinę bakteryjną, po zakończonym 48-godzinnym cyklu hodowli oczyszcza się z bulionu poprzez umieszczenie w probówce o pojemności 15 cm3 i wirowanie przez 10 min przy 3500 obrotach na minutę, po czym zebraną warstwę supematantu zlewa się, a do osadu dolewa się 10 cm3 soli fizjologicznej, stanowiącej 0,85% roztwór NaCl, a następnie uzyskaną zawiesinę poddaje się trzykrotnemu wytrząsaniu w cyklach po 30 sekund i wprowadza się do roztworu soli mineralnych i mikroelementów.
  2. 2. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że pożywkę bulionową stanowi mieszanina bulionu odżywczego w ilości 4 g, ekstraktu drożdżowego w ilości 2,5 g oraz NaCl w ilości 2,5 g, rozpuszczona w wodzie destylowanej w ilości 500 cm3, do której dodaje się heksan lub toluen w ilości 10 l lub naftalen w ilości 0,2 mg, przypadającej na 20 cm3 pożywki.
  3. 3. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że skład ilościowy i jakościowy roztworu soli mineralnych i mikroelementów stanowi korzystnie :
    NH4NO3 - 1,00 g
    K2HPO4 - 1,00 g
    KH2PC4 - 1,00 g
    MgSO4*7H2O - 0,20 g
    CaCl2*6H2C - 0,02 g
    FeCl3*6H2O - 0,02 g
    1 cm3 roztworu mikroelementów woda destylowana - 1 dmJ
    ZnCl2 - 70 mg
    MnCl2*4H2O - 100 mg
    CoCl2*6H2O - 200 mg
    NiCl2*6H2O - lOOmg
    CuCl2*2H2O - 20 mg
    NaMoO4*5H2O - 50 mg
    Na2SeO3*5H2O - 26 mg
    NaVO3* H2O - 10 mg
    Na2WO4*2H2O - 30 mg
    HCl (25%) - 1 crn^ woda destylowana - 1000 cm
  4. 4. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że wzajemne proporcje objętości zawiesin wyselekcjonowanych bakterii w roztworze soli mineralnych i mikroelementów wynoszą 1:1:1,
    189 586 przy średniej liczbie komórek bakteryjnych w 1 cm3 płynnego preparatu autoszczepionki stanowiącej nie mniej niż 9,5 x 106 dla ścieków i nie mniej niż 1,9 x 107 dla gleby.
PL98329701A 1998-11-13 1998-11-13 Sposób wytwarzania autoszczepionki przyspieszającej oczyszczanie gleby i ścieków z zanieczyszczeń ropopochodnych PL189586B1 (pl)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL98329701A PL189586B1 (pl) 1998-11-13 1998-11-13 Sposób wytwarzania autoszczepionki przyspieszającej oczyszczanie gleby i ścieków z zanieczyszczeń ropopochodnych

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL98329701A PL189586B1 (pl) 1998-11-13 1998-11-13 Sposób wytwarzania autoszczepionki przyspieszającej oczyszczanie gleby i ścieków z zanieczyszczeń ropopochodnych

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL329701A1 PL329701A1 (en) 2000-05-22
PL189586B1 true PL189586B1 (pl) 2005-08-31

Family

ID=20073165

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL98329701A PL189586B1 (pl) 1998-11-13 1998-11-13 Sposób wytwarzania autoszczepionki przyspieszającej oczyszczanie gleby i ścieków z zanieczyszczeń ropopochodnych

Country Status (1)

Country Link
PL (1) PL189586B1 (pl)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2013179116A1 (en) 2012-05-31 2013-12-05 Uniwersytet Warszawski Composition of bacterial strains, bioremediation mixture and use of this composition for the removal of contaminants from the soil and a method for purifying of the soil contaminants

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2013179116A1 (en) 2012-05-31 2013-12-05 Uniwersytet Warszawski Composition of bacterial strains, bioremediation mixture and use of this composition for the removal of contaminants from the soil and a method for purifying of the soil contaminants

Also Published As

Publication number Publication date
PL329701A1 (en) 2000-05-22

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Vecchioli et al. Use of selected autochthonous soil bacteria to enhanced degradation of hydrocarbons in soil
Maitra et al. Ecological significance and phosphorus release potential of phosphate solubilizing bacteria in freshwater ecosystems
Bashan et al. Environmental uses of plant growth-promoting bacteria
CN103215204B (zh) 高效降解菲的节杆菌菌株及其应用
JPWO2020009097A1 (ja) 石油関連物質により汚染された環境の除染方法および使用する資材
Cappello et al. Bioremediation of oil polluted marine sediments: A bio-engineering treatment
EP0668246A4 (de) Stämme von acinobacter species(bicoccum), arthrobacter species und rhodococcus species und ein verfahren unter anwendung dieser stämme zur biologischen behandlung von ölverunreinigungen.
CN105647838B (zh) 皮特不动杆菌及其用途
Muhammad et al. Stimulated bioremediation of soil contaminated with spent engine oil using organic wastes
EP0550023A2 (en) Non-polluting compositions to degrade hydrocarbons and microorganisms for use thereof
CN110396486A (zh) 一种用于生物修复石油类污染水体的菌株、复合菌剂及其制备方法与应用
KR19990065800A (ko) 폐수처리용 미생물 및 미생물제제
CN109370931A (zh) 一种高效降解多环芳烃的复合菌剂及其应用
Dehvari et al. Petroleum contaminated seawater detoxification in microcosm by halotolerant consortium isolated from Persian Gulf
RU2681831C2 (ru) Препарат для биодеградации нефтепродуктов и способ его получения
US4693842A (en) Cyanobacterium-produced bioemulsifier composition and solution thereof
PL189586B1 (pl) Sposób wytwarzania autoszczepionki przyspieszającej oczyszczanie gleby i ścieków z zanieczyszczeń ropopochodnych
Emmanuel et al. Laboratory-scale bioremediation of crude oil polluted soil using a consortia of rhizobacteria obtained from plants in Gokana-Ogoni, Rivers State
Tepe et al. Utilization of different nitrogen sources by cultures of Scenedesmus acuminatus
RU2295403C1 (ru) Способ получения бактериального препарата родер для очистки почв, почвогрунтов, нефтешламов, пресных и минерализованных вод от нефти и нефтепродуктов
US5250201A (en) Polymeric substance and method of separating and culturing bacteria
KR100301526B1 (ko) 디젤유분해용 복합균주 hpld(기탁번호 : kctc 0625bp) 및 그 제조방법
Tebyanian et al. Relationship between cell surface hydrophobicity and degradation of hexadecane
Arvind et al. Biodegradation of plastic by Pseudomonas aeruginosa
Rani et al. Eco-friendly approach for treating dairy effluent and lipid estimation using microalgae

Legal Events

Date Code Title Description
LAPS Decisions on the lapse of the protection rights

Effective date: 20061113