PL180253B1 - Pochodne N-metylo-N-glikozylowe estrów metylowych antybiotyków z grupy makrolidów polienowych i ich sole oraz sposób ich otrzymywania PL PL PL PL PL PL - Google Patents
Pochodne N-metylo-N-glikozylowe estrów metylowych antybiotyków z grupy makrolidów polienowych i ich sole oraz sposób ich otrzymywania PL PL PL PL PL PLInfo
- Publication number
- PL180253B1 PL180253B1 PL95308583A PL30858395A PL180253B1 PL 180253 B1 PL180253 B1 PL 180253B1 PL 95308583 A PL95308583 A PL 95308583A PL 30858395 A PL30858395 A PL 30858395A PL 180253 B1 PL180253 B1 PL 180253B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- antibiotic
- methyl
- polyene
- glucose
- derivatives
- Prior art date
Links
- 150000004291 polyenes Chemical class 0.000 title claims abstract description 45
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 43
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 title claims abstract description 15
- 150000004702 methyl esters Chemical class 0.000 title claims description 38
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 title claims description 34
- 239000003120 macrolide antibiotic agent Substances 0.000 claims abstract description 43
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 claims abstract description 22
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 claims abstract description 20
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 claims abstract description 16
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 14
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 claims abstract description 9
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 claims abstract description 8
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 claims abstract description 6
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 94
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 25
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 22
- WQZGKKKJIJFFOK-SVZMEOIVSA-N (+)-Galactose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-SVZMEOIVSA-N 0.000 claims description 20
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 19
- 229940041033 macrolides Drugs 0.000 claims description 19
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N dimethylformamide Substances CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- APKFDSVGJQXUKY-INPOYWNPSA-N amphotericin B Chemical compound O[C@H]1[C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](C)O[C@H]1O[C@H]1/C=C/C=C/C=C/C=C/C=C/C=C/C=C/[C@H](C)[C@@H](O)[C@@H](C)[C@H](C)OC(=O)C[C@H](O)C[C@H](O)CC[C@@H](O)[C@H](O)C[C@H](O)C[C@](O)(C[C@H](O)[C@H]2C(O)=O)O[C@H]2C1 APKFDSVGJQXUKY-INPOYWNPSA-N 0.000 claims description 17
- APKFDSVGJQXUKY-KKGHZKTASA-N Amphotericin-B Natural products O[C@H]1[C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](C)O[C@H]1O[C@H]1C=CC=CC=CC=CC=CC=CC=C[C@H](C)[C@@H](O)[C@@H](C)[C@H](C)OC(=O)C[C@H](O)C[C@H](O)CC[C@@H](O)[C@H](O)C[C@H](O)C[C@](O)(C[C@H](O)[C@H]2C(O)=O)O[C@H]2C1 APKFDSVGJQXUKY-KKGHZKTASA-N 0.000 claims description 16
- 229960003942 amphotericin b Drugs 0.000 claims description 16
- 238000003691 Amadori rearrangement reaction Methods 0.000 claims description 15
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 14
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 claims description 12
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- WQZGKKKJIJFFOK-ZZWDRFIYSA-N L-glucose Chemical compound OC[C@@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-ZZWDRFIYSA-N 0.000 claims description 11
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 claims description 11
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 claims description 11
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 11
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- DPAGRPSAFDXQDN-UHFFFAOYSA-N 5-methoxy-8,8-dimethyl-2-phenyl-4H,8H-pyrano[2,3-h]chromen-4-one Chemical compound C=1C(=O)C=2C(OC)=CC=3OC(C)(C)C=CC=3C=2OC=1C1=CC=CC=C1 DPAGRPSAFDXQDN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 claims description 10
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 claims description 10
- 239000008101 lactose Substances 0.000 claims description 10
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 claims description 10
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 claims description 10
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 claims description 9
- 239000012043 crude product Substances 0.000 claims description 9
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims description 8
- YXHKONLOYHBTNS-UHFFFAOYSA-N Diazomethane Chemical compound C=[N+]=[N-] YXHKONLOYHBTNS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims description 7
- YKSVGLFNJPQDJE-YDMQLZBCSA-N (19E,21E,23E,25E,27E,29E,31E)-33-[(2R,3S,4R,5S,6R)-4-amino-3,5-dihydroxy-6-methyloxan-2-yl]oxy-17-[7-(4-aminophenyl)-5-hydroxy-4-methyl-7-oxoheptan-2-yl]-1,3,5,7,37-pentahydroxy-18-methyl-9,13,15-trioxo-16,39-dioxabicyclo[33.3.1]nonatriaconta-19,21,23,25,27,29,31-heptaene-36-carboxylic acid Chemical compound CC(CC(C)C1OC(=O)CC(=O)CCCC(=O)CC(O)CC(O)CC(O)CC2(O)CC(O)C(C(CC(O[C@@H]3O[C@H](C)[C@@H](O)[C@@H](N)[C@@H]3O)\C=C\C=C\C=C\C=C\C=C\C=C\C=C\C1C)O2)C(O)=O)C(O)CC(=O)C1=CC=C(N)C=C1 YKSVGLFNJPQDJE-YDMQLZBCSA-N 0.000 claims description 6
- DXENDDMPDZMHSQ-UHFFFAOYSA-N Qingdainone Natural products C12=NC3=CC=CC=C3C(=O)N1C1=CC=CC=C1C2=C1C(=O)C2=CC=CC=C2N1 DXENDDMPDZMHSQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 229960004348 candicidin Drugs 0.000 claims description 6
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 claims description 6
- CYGXFHUZSVKTBA-MOAKSMKPSA-N Candidin Natural products C[C@H]1OC(=O)C[C@@H](O)C[C@@H](O)CC(=O)CC[C@@H](O)[C@H](O)CC(=O)C[C@@H](O)[C@H]([C@H](O)C[C@H](O[C@@H]2O[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](N)[C@@H]2O)C=CC=CC=CC=CC=CC=CC=C[C@@H](C)[C@H](O)[C@@H]1C)C(=O)O CYGXFHUZSVKTBA-MOAKSMKPSA-N 0.000 claims description 5
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 claims description 5
- 229960000988 nystatin Drugs 0.000 claims description 5
- VQOXZBDYSJBXMA-NQTDYLQESA-N nystatin A1 Chemical compound O[C@H]1[C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](C)O[C@H]1O[C@H]1/C=C/C=C/C=C/C=C/CC/C=C/C=C/[C@H](C)[C@@H](O)[C@@H](C)[C@H](C)OC(=O)C[C@H](O)C[C@H](O)C[C@H](O)CC[C@@H](O)[C@H](O)C[C@](O)(C[C@H](O)[C@H]2C(O)=O)O[C@H]2C1 VQOXZBDYSJBXMA-NQTDYLQESA-N 0.000 claims description 5
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 5
- 229930188428 trichomycin Natural products 0.000 claims description 5
- GXLOOVOKGBOVIH-YPBFURFVSA-N (1s,3r,4e,6e,8e,10e,12e,14e,16e,18s,19r,20r,21s,25r,29r,32r,33r,35s,37s,38r)-3-[(2r,3s,4s,5s,6r)-4-amino-3,5-dihydroxy-6-methyloxan-2-yl]oxy-19,25,29,32,33,35,37-heptahydroxy-18,20,21-trimethyl-23,27-dioxo-22,39-dioxabicyclo[33.3.1]nonatriaconta-4,6,8,10, Chemical compound O[C@H]1[C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](C)O[C@H]1O[C@H]1/C=C/C=C/C=C/C=C/C=C/C=C/C=C/[C@H](C)[C@@H](O)[C@@H](C)[C@H](C)OC(=O)C[C@H](O)CC(=O)C[C@H](O)CC[C@@H](O)[C@H](O)C[C@](O)(C[C@H](O)[C@H]2C(O)=O)O[C@H]2C1 GXLOOVOKGBOVIH-YPBFURFVSA-N 0.000 claims description 4
- GXLOOVOKGBOVIH-UHFFFAOYSA-N Mycoheptin Natural products OC1C(N)C(O)C(C)OC1OC1C=CC=CC=CC=CC=CC=CC=CC(C)C(O)C(C)C(C)OC(=O)CC(O)CC(=O)CC(O)CCC(O)C(O)CC(O)(CC(O)C2C(O)=O)OC2C1 GXLOOVOKGBOVIH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 claims description 4
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 claims description 4
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 claims description 3
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 claims description 3
- CKLJMWTZIZZHCS-UHFFFAOYSA-N D-OH-Asp Natural products OC(=O)C(N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- CKLJMWTZIZZHCS-UWTATZPHSA-N L-Aspartic acid Natural products OC(=O)[C@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-UWTATZPHSA-N 0.000 claims description 2
- 229960005261 aspartic acid Drugs 0.000 claims description 2
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 claims 1
- KPUNOVLMCQQCSK-UHFFFAOYSA-N diazomethane;ethoxyethane Chemical compound C=[N+]=[N-].CCOCC KPUNOVLMCQQCSK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 claims 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 claims 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 abstract description 39
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 abstract description 10
- 230000000843 anti-fungal effect Effects 0.000 abstract description 10
- 239000000203 mixture Substances 0.000 abstract description 7
- 206010017533 Fungal infection Diseases 0.000 abstract description 3
- 208000031888 Mycoses Diseases 0.000 abstract description 3
- 229940121375 antifungal agent Drugs 0.000 abstract description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 abstract description 2
- 125000004178 (C1-C4) alkyl group Chemical group 0.000 abstract 1
- 125000005907 alkyl ester group Chemical group 0.000 abstract 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 abstract 1
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 66
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 22
- -1 N-substituted maleimides Chemical class 0.000 description 13
- 239000000047 product Substances 0.000 description 10
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 9
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 8
- 125000001160 methoxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])OC(*)=O 0.000 description 8
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 7
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 7
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 7
- 229960001866 silicon dioxide Drugs 0.000 description 7
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 6
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 6
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 5
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 5
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 5
- 241000222122 Candida albicans Species 0.000 description 4
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 4
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 4
- SIHHLZPXQLFPMC-UHFFFAOYSA-N chloroform;methanol;hydrate Chemical compound O.OC.ClC(Cl)Cl SIHHLZPXQLFPMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 4
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 4
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- 239000011877 solvent mixture Substances 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- 241000222120 Candida <Saccharomycetales> Species 0.000 description 3
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 3
- 229940095731 candida albicans Drugs 0.000 description 3
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 3
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 3
- 150000002016 disaccharides Chemical group 0.000 description 3
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 3
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 3
- 238000001644 13C nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RFSUNEUAIZKAJO-VRPWFDPXSA-N D-Fructose Natural products OC[C@H]1OC(O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-VRPWFDPXSA-N 0.000 description 2
- OKKJLVBELUTLKV-MZCSYVLQSA-N Deuterated methanol Chemical compound [2H]OC([2H])([2H])[2H] OKKJLVBELUTLKV-MZCSYVLQSA-N 0.000 description 2
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940121710 HMGCoA reductase inhibitor Drugs 0.000 description 2
- 206010018910 Haemolysis Diseases 0.000 description 2
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 2
- YRKCREAYFQTBPV-UHFFFAOYSA-N acetylacetone Chemical compound CC(=O)CC(C)=O YRKCREAYFQTBPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 230000007059 acute toxicity Effects 0.000 description 2
- 231100000403 acute toxicity Toxicity 0.000 description 2
- PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N aldehydo-D-ribose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 2
- 230000000973 chemotherapeutic effect Effects 0.000 description 2
- DDRJAANPRJIHGJ-UHFFFAOYSA-N creatinine Chemical compound CN1CC(=O)NC1=N DDRJAANPRJIHGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 2
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 2
- 230000008588 hemolysis Effects 0.000 description 2
- 231100000086 high toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 2
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 2
- VIENZRUMYAUKFY-UHFFFAOYSA-N 1-[3-(dimethylamino)propyl]pyrrole-2,5-dione Chemical compound CN(C)CCCN1C(=O)C=CC1=O VIENZRUMYAUKFY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XILIYVSXLSWUAI-UHFFFAOYSA-N 2-(diethylamino)ethyl n'-phenylcarbamimidothioate;dihydrobromide Chemical compound Br.Br.CCN(CC)CCSC(N)=NC1=CC=CC=C1 XILIYVSXLSWUAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 102000004625 Aspartate Aminotransferases Human genes 0.000 description 1
- 108010003415 Aspartate Aminotransferases Proteins 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-DCSYEGIMSA-N Beta-Lactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-DCSYEGIMSA-N 0.000 description 1
- 206010007134 Candida infections Diseases 0.000 description 1
- DXENDDMPDZMHSQ-FMQUCBEESA-N Candidine Natural products C12=NC3=CC=CC=C3C(=O)N1C1=CC=CC=C1/C2=C1/C(=O)C2=CC=CC=C2N1 DXENDDMPDZMHSQ-FMQUCBEESA-N 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052684 Cerium Inorganic materials 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- LKDRXBCSQODPBY-VRPWFDPXSA-N D-fructopyranose Chemical group OCC1(O)OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O LKDRXBCSQODPBY-VRPWFDPXSA-N 0.000 description 1
- 125000002353 D-glucosyl group Chemical group C1([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N D-mannomethylose Natural products CC1OC(O)C(O)C(O)C1O SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000001554 Hemoglobins Human genes 0.000 description 1
- 108010054147 Hemoglobins Proteins 0.000 description 1
- PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N L-rhamnose Natural products CC(O)C(O)C(O)C(O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- FXHOOIRPVKKKFG-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylacetamide Chemical compound CN(C)C(C)=O FXHOOIRPVKKKFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZSXGLVDWWRXATF-UHFFFAOYSA-N N,N-dimethylformamide dimethyl acetal Chemical compound COC(OC)N(C)C ZSXGLVDWWRXATF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GHAZCVNUKKZTLG-UHFFFAOYSA-N N-ethyl-succinimide Natural products CCN1C(=O)CCC1=O GHAZCVNUKKZTLG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HDFGOPSGAURCEO-UHFFFAOYSA-N N-ethylmaleimide Chemical compound CCN1C(=O)C=CC1=O HDFGOPSGAURCEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010067482 No adverse event Diseases 0.000 description 1
- 238000000862 absorption spectrum Methods 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- GZCGUPFRVQAUEE-SLPGGIOYSA-N aldehydo-D-glucose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O GZCGUPFRVQAUEE-SLPGGIOYSA-N 0.000 description 1
- PNNNRSAQSRJVSB-BXKVDMCESA-N aldehydo-L-rhamnose Chemical compound C[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-BXKVDMCESA-N 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ZXXMMSQZSA-N alpha-D-fructofuranose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ZXXMMSQZSA-N 0.000 description 1
- 150000001409 amidines Chemical class 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical group 0.000 description 1
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940009098 aspartate Drugs 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LKDRXBCSQODPBY-ARQDHWQXSA-N beta-D-fructopyranose Chemical compound OC[C@@]1(O)OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O LKDRXBCSQODPBY-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000008033 biological extinction Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 1
- PTOJXIKSKSASRB-UHFFFAOYSA-O candicine Chemical compound C[N+](C)(C)CCC1=CC=C(O)C=C1 PTOJXIKSKSASRB-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 201000003984 candidiasis Diseases 0.000 description 1
- 125000002915 carbonyl group Chemical group [*:2]C([*:1])=O 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- GWXLDORMOJMVQZ-UHFFFAOYSA-N cerium Chemical compound [Ce] GWXLDORMOJMVQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 238000005094 computer simulation Methods 0.000 description 1
- 229940109239 creatinine Drugs 0.000 description 1
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- VAYGXNSJCAHWJZ-UHFFFAOYSA-N dimethyl sulfate Chemical compound COS(=O)(=O)OC VAYGXNSJCAHWJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 238000001663 electronic absorption spectrum Methods 0.000 description 1
- XYIBRDXRRQCHLP-UHFFFAOYSA-N ethyl acetoacetate Chemical compound CCOC(=O)CC(C)=O XYIBRDXRRQCHLP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 150000002232 fructoses Chemical class 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 231100001231 less toxic Toxicity 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 230000011987 methylation Effects 0.000 description 1
- 238000007069 methylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- DTSSDPFTHGBSDX-KVTDHHQDSA-N mycosamine Chemical group C[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](N)[C@H](O)C=O DTSSDPFTHGBSDX-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 230000020477 pH reduction Effects 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 230000005588 protonation Effects 0.000 description 1
- 150000003214 pyranose derivatives Chemical group 0.000 description 1
- 150000003242 quaternary ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000001896 rotating frame Overhauser effect spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000004611 spectroscopical analysis Methods 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- GETQZCLCWQTVFV-UHFFFAOYSA-N trimethylamine Chemical class CN(C)C GETQZCLCWQTVFV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 231100000925 very toxic Toxicity 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H17/00—Compounds containing heterocyclic radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
- C07H17/04—Heterocyclic radicals containing only oxygen as ring hetero atoms
- C07H17/08—Hetero rings containing eight or more ring members, e.g. erythromycins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
- A61K31/7048—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having oxygen as a ring hetero atom, e.g. leucoglucosan, hesperidin, erythromycin, nystatin, digitoxin or digoxin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Oncology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
1. Pochodne N-metylo-N-glikozylowe estrów metylowych antybiotyków z grupy makrolidów polienowych o wzorze ogólnym 1, gdzie M oznacza reszte antybiotyku z grupy makrolidów polienowych, zas R oznacza fra- gment reszty cukrowej powstaly w wyniku reakcji tego antybiotyku z mono lub oligosa- charydem, korzystnie z D-glukoza lub L-glu- koza lub D-mannoza lub D-galaktoza lub laktoza lub maltoza, z przegrupowaniem Amadon. wzór 1 P L 180253 B 1 PL PL PL PL PL PL
Description
Przedmiotem wynalazku sąpochodne N-metylo-N-glikozylowe estrów metylowych antybiotyków przeciwgrzybowych z grupy makrolidów polienowych o wzorze ogólnym 1, gdzie M oznacza reszty antybiotyków z grupy makrolidów polienowych, a R oznacza zmienną część fragmentu reszty cukrowej oraz ich sole o wzorze ogólnym 2, gdzie M oznacza reszty antybiotyków z grupy makrolidów polienowych, R oznacza zmienną część fragmentu reszty cukrowej, zaś A oznacza anion kwasu nieorganicznego lub organicznego, oraz sposób ich otrzymywania i wykorzystywania w lecznictwie.
Znane sąpochodne N-alkilowe antybiotyków z grupy makrolidów polienowych, to znaczy związki, w których grupa aminowa macierzystego antybiotyku jest podstawiona podstawnikami alkilowymi. Z publikacji J. Antibiotics 28,244 (1975), L. Falkowski, J. Golik, P. Kołodziejczyk, J. Pawlak, J. Zieliński, T. Zimiński, E. Borowski; Acta Polon. Pharm. 37, 517 (1980), L. Falkowski, J. Pawlak, J. Golik. P. Kołodziejczyk, B. Stefańska, E. Bylec, E. Borowski - znane sąpochodne N-glikozylowe makrolidów polienowych, w których grupa aminowa wyjściowego antybiotyku jest podstawiona resztą cukrową taką jak: reszta D-głukozy, D-mannozy, L-ramnozy, D-rybozy, maltozy. Związki te otrzymuje się w reakcji makrolidów polienowych z wymienionymi cukrami z równoczesnym przegrupowaniem Amadori. Posiadają one aktywność biologiczną zbliżoną do aktywności wyjściowych antybiotyków i tworzą rozpuszczalne w wodzie sole. Jednakże wykazują one wysoką toksyczność.
Innym typem pochodnych sąpochodne trimetyloamoniowe estrów metylowych makrohdów polienowych znane z publikacji - J. Antibiotics 32,1080 (1979), L. Falkowski, B. Stefańska, J. Zieliński, E Bylec, J. Golik, P. Kołodziejczyk, E. Borowski - w których grupa aminowa estru metylowego antybiotyku jest całkowicie zmetylowana z utworzeniem czwartorzędowej soli amoniowej Związki te otrzymuje się w reakcji wyczerpującego metylowania macierzystego antybiotyku za pomocąsiarczanu dimetylu. Pochodne te sąrozpuszczalne w wodzie i charakteryzują się aktywnością przeciwgrzybową porównywalną z aktywnością wyjściowych antybiotyków lecz są bardzo toksyczne i nietrwałe.
Kolejnym typem pochodnych N-alkilowych sąpochodne N-sukcynimidyłowe będące wynikiem reakcji antybiotyku z N-podstawionymi maleimidami takimi jak: N-etyłomaleimid, Ν,Ν'-heksametylenodimaleimid, N-(3-dimetyloaminopropylo)maleimid, zwanej addycją Michaela, znane z publikacji - J. Antibiotics 44, 979 (1991), A. Czerwiński, W. A. Konig, T. Zieniawa, P. Sowiński, V. Sinnwell, S. Milewski, E. Borowski. Związki takie są mniej toksyczne w porównaniu z macierzystymi antybiotykami, lecz ich aktywność przeciwgrzybową jest obniżona.
Ostatnią wreszcie znanągrupąpochodnych N-alkilowych makrolidów polienowych sąpochodne N-enaminowe i amidynowe, powstające w wyniku reakcji tych antybiotyków z acetyloacetonem, acetylooctanem etylu lub dimetyloacetalem dimetyloformamidu, które przedstawione są w publikacji - Acta Polonica Pharm. 45,71 (1988), B. Stefańska, J. Zieliński, E. Borowski, L Falkowski. Pochodne te wykazują aktywność przeciwgrzybową zbliżoną do macierzystych antybiotyków i polepszoną rozpuszczalność w rozpuszczalnikach organicznych, sąjednak nadal znacznie toksyczne a także bardzo nietrwałe.
Dotychczas nie są znane pochodne N-metylo-N-glikozylowe estrów metylowych antybiotyków z grupy makrolidów polienowych oraz sposób ich otrzymywania. Nieoczekiwanie związki takie, zachowując aktywność przeciwgrzybową zbliżoną do macierzystych antybiotyków i tworząc z kwasami rozpuszczalne w wodzie sole wykazywały radykalnie obniżoną toksyczność. Wysoka toksyczność jest
180 253 podstawową niedogodnością wszystkich znanych dotąd N-alkilowych pochodnych makrolidów polienowych, której to niedogodności są pozbawione związki będące przedmiotem wynalazku.
Pochodne N-metylo-N-glikozylowe estrów metylowych antybiotyków z grupy makrolidów polienowych według wynalazku są wzorem ogólnym 1, gdzie M oznacza resztę antybiotyku z grupy makrolidów polienowych, zaś R oznacza fragment reszty cukrowej powstały w wyniku reakcji tego antybiotyku z mono lub oligosacharydem, korzystnie z D-glukoząlub L-glukoząlub D-mannozą lub D-galaktozą lub laktozą lub maltozą, z przegrupowaniem Amadori.
Korzystnie w tych pochodnych antybiotykiem z grupy makrolidów polienowych jest amfoterycyna B lub kandydyna lub kandydoina lub kandydynina lub mykoheptyna lub nystatyna lub pohfungina lub aureofacyna lub wacydyna lub trychomycyna lub kandycydyna.
Według wynalazku sole pochodnych N-metylo-N-glikozylowych estrów metylowych antybiotyków z grupy makrolidów polienowych przedstawione są wzorem ogólnym 2, gdzie M oznacza resztę antybiotyku z grupy makrolidów polienowych, zaś R oznacza fragment reszty cukrowej powstały w wyniku reakcji tego antybiotyku z mono lub oligosacharydem, korzystnie z D-glukoząlub L-glukoząlub D-mannoząłub D-galaktoząlub laktozą lub maltozą, z przegrupowaniem Amadori, zaś A oznacza amon kwasu organicznego lub nieorganicznego.
Korzystnie w tych solach antybiotykiem z grupy makrolidów polienowych jest amfoterycyna B lub kandydyna lub kandydoina lub kandydynina lub mykoheptyna lub nystatyna lub poiiftmgina lub aureofacyna lub wacydyna lub trychomycyna lub kandycydyna i również korzystnie A oznacza anion kwasu L-asparaginowego.
Sposób otrzymywania pochodnych N-metylo-N-glikozylowych estrów metylowych antybiotyków z grupy makrolidów polienowych o wzorze ogólnym 1, gdzie M oznacza resztę antybiotyku z grupy makrolidów polienowych, zaś R oznacza fragment reszty cukrowej powstały w wyniku reakcji tego antybiotyku z mono lub oligosacharydem, korzystnie z D-glukoząlub L-glukozą lub D-mannozą lub D-galaktozą lub laktozą lub maltozą, z przegrupowaniem Amadori, charakteryzuje się według wynalazku tym, że otrzymane w wyniku reakcji przegrupowania Amadori N-glikozylowe pochodne antybiotyków z grupy makrolidów polienowych przeprowadza się w zawiesinę przez wytrącenie rozpuszczalnikiem, korzystnie eterem dietylowym z roztworu tej pochodnej w rozpuszczalniku organicznym korzystnie w Ν,Ν-dimetyloformamidzie, a następnie działa się roztworem eterowym diazometanu w obniżonej temperaturze korzystnie w zakresie -5°C do +5°C i miesza się, po czym surowy produkt reakcji izoluje się przez odparowanie rozpuszczalników i wytrącenie z zagęszczonego roztworu korzystnie eterem dietylowym stosowanym w nadmiarze, a następnie surowy produkt oczyszcza się znanymi sposobami.
Sposób otrzymywania soli pochodnych N-metylo-N-glikozylowych estrów metylowych antybiotyków z grupy makrolidów polienowych o wzorze ogólnym 2, gdzie M oznacza resztę antybiotyku z grupy makrolidów polienowych, a R oznacza fragment reszty cukrowej powstały w wyniku reakcji tego antybiotyku z mono lub oligosacharydem, korzystnie z D-glukozą lub L-glukoząlub D-mannozą lub D-galaktozą lub laktozą lub maltozą, z przegrupowaniem Amadori, zaś A oznacza anion kwasu organicznego lub nieorganicznego charakteryzuje się według wynalazku tym, że otrzymane w wyniku reakcji przegrupowania Amadori N-glikozylowe pochodne antybiotyków z grupy makrolidów polienowych przeprowadza się w zawiesinę przez wytrącenie rozpuszczalnikiem, korzystnie eterem dietylowym z roztworu tej pochodnej w rozpuszczalniku organicznym korzystnie w Ν,Ν-dimetyloformamidzie, a następnie działa się roztworem eterowym diazometanu w obniżonej temperaturze, korzystnie w zakresie -5°C do +5°C i miesza się, po czym surowy produkt reakcji izoluje się przez odparowanie rozpuszczalników i wytrącenie z zagęszczonego roztworu, korzystnie eterem dietylowym stosowanym w nadmiarze, a następnie surowy produkt oczyszcza się znanymi sposobami, po czym otrzymaną pochodną w postaci osadu zawiesza się w niewielkiej ilości wody, dodaje się do zawiesiny kwas organiczny lub nieorganiczny w stosunku stechiometrycznym, a następnie z otrzymanego roztworu wytrąca się osad za pomocą nadmiaru rozpuszczalnika organicznego mieszającego się z wodą, korzystnie acetonu, osad przemywa się, korzystnie acetonem, a dalej, korzystnie eterem dietylowym, i suszy się, korzystnie pod zmniejszonym ciśnieniem.
Sposób leczenia zewnętrznych i układowych infekcji grzybowych u ludzi i zwierząt charakteryzuje się według wynalazku tym, że do leczenia tych schorzeń stosuje się pochodne N-mety
180 253 lo-N-glikozylowe estrów metylowych antybiotyków z grupy makrolidów polienowych o wzorze ogólnym 1, gdzie M oznacza resztę antybiotyku z grupy makrolidów polienowych, zaś R oznacza fragment reszty cukrowej powstały w wyniku reakcji tego antybiotyku z mono lub oligosacharydem, korzystnie z D-glukoząlub L-glukoząlub D-mannoząlub D-galaktoząlub laktozą lub maltozą z przegrupowaniem Amadori.
Sposób leczenia zewnętrznych i układowych infekcji grzybowych u ludzi i zwierząt charakteryzuje się według wynalazku tym, że do leczenia tych schorzeń stosuje się sole pochodnych N-metylo-N-glikozylowych estrów metylowych antybiotyków z grupy makrolidów polienowych o wzorze ogólnym 2, gdzie M oznacza resztę antybiotyku z grupy makrolidów polienowych, zaś R oznacza fragment reszty cukrowej powstały w wyniku reakcji tego antybiotyku z mono lub oligosacharydem, korzystnie z D-glukozą lub L-glukozą lub D-mannozą lub D-galaktoząlub laktozą lub maltozą z przegrupowaniem Amadori, zaś A oznacza anion kwasu organicznego lub nieorganicznego.
Według wynalazku sposób otrzymywania N-metylo-N-glikozylowych pochodnych estrów metylowych antybiotyków z grupy makrolidów polienowych prowadzi do otrzymania żądanego produktu bez zmian w strukturze pozostałej części cząsteczki macierzystego antybiotyku. Dowód struktury otrzymanych związków przeprowadzono metodami spektroskopowymi. Postępowanie dowodowe przykładowo ilustruje sposób ustalenia budowy estru metylowego N-metylo-N-D-fruktozyloamfoterycyny B przedstawionego wzorem 3.
Identyczność elektronowego widma absorpcyjnego estru metylowego N-metylo-N-D-fruktozyloamfotercyny B z widmem wyjściowego antybiotyku, to jest amfoterycyny B, dowodzi, że opracowany sposób nie prowadzi do degradacji chromoforu polienowego, a wysoka wartość ekstynkcji (Ej^j = 1300 przy 382 nm) świadczy o wysokim stopniu czystości otrzymanego produktu. W widmie absorpcyjnym w podczerwieni estru metylowego N-metylo-N-D-fruktozyloamfotercyny B obserwuje się pasmo odpowiadające drganiom walencyjnym grupy karbonylowej estru metylowego przy 1730 cm’1 oraz brak pasma odpowiadającego wolnej grupie karboksylowej, co świadczy o tym, że grupa karboksylowa została przekształcona w wyniku reakcji w ester metylowy. Kompletnych informacji o strukturze estru metylowego N-metylo-N-D-fruktozyloamfotercyny B dostarczyły widma magnetycznego rezonansu jądrowego (NMR). Niezbędne dane uzyskane z widma *H (DQF-COSY, ROESY), 13C (DEPT) i heterokorelowanych (spektrometr Varian 300 MHz) pozwoliły na ustalenie struktury związku przedstawionego wzorem 3, którym jest struktura estru metylowego N-metylo-N-D-fruktozylo amfotercyny B.
Najbardziej znaczące ‘H i l3C informacje są przedstawione odpowiednio w tabeli 1 i 2. Dane NMR dla aghkonu amfoterycyny B są w pełnej zgodności z danymi literaturowymi -Magn Reson. Chem. 30, 275 (1992), P. Sowiński, J. Pawlak, E. Borowski, P. Gariboldi. Przesunięcia chemiczne 'H (w rozpuszczalniku DMSO-MeOD) dla N-CH3 (δ=2.35 ppm) 1H-1” (2.30 i 3.15 ppm) są charakterystyczne dla wpływu podstawnika aminowego. Po zakwaszeniu, δ zmienia się do 2.92 ppm dla N-CH3 i do 3.64 dla H-l” w wyniku protonowania grupy aminowej (δ dla H-3’ zmienia się na 3.19 ppm). Te dane wspierają również efekty ROE między protonami NCH3/H3 ’, NCH3H2’, NCH3/Hl”b i 1” a/H3’. Stałe sprzężenia i ROE wskazują na konformację 4Ci fragmentu mykozaminowego tak, j ak to zostało uprzednio znalezione dla wolnej amfoterycyny B.
W tabeli 1 przedstawione zostały przesunięcia chemiczne *H i efekty ROE we fragmencie disacharydowym estru metylowego N-metylo-N-D-fruktozyloamfotercyny B.
Tabela 1
| proton | δ [ppm] | ROE do protonów | δ [ppm] | ROE do protonów |
| pirydyna-dj metanol-d4 9:1 | DMSO-ck metanol-d4 4:6 | |||
| Γ | 4 77 | 2’, 3’, 5’, 18b, COOMe | 4 48 | 3’, 5’ |
| 2’ | 441 | 1’ 3’,NMe, 17, COOMe, 1” a? | 4.04 | 3’,NMe, COOMe |
180 253
c.d. tabeli 1
| 3’ | 2.06 | Γ, 2’, 5’, NMe, 1” a, COOMe | 1.89 | l’,2’,NMe, l”b |
| 4’ | 4.38 | 6’ | 3.80 | 6’ |
| 5’ | 3.61 | l’,3’,6’ | 3.45 | l’,3’,6’ |
| 6’ | 1 23 | 4’, 5’ | 1.27 | 4’, 5’ |
| l”a | 2.56 | 3’, 3” (2’) | 2.30 | |
| l”b | 3 58 | NMe | 3 15 | 3”, 3’ |
| 3” | 441 | l”a ? | 3.65 | l”b |
| 4” | 4 76 | 3.97 | ||
| 5” | 4.41 | 3.63 | ||
| 6”a | 4.21 | 3.57 | ||
| 6”b | 4.36 | 3.76 | ||
| NMe | 2.29 | 2’, 3’, l”b, COOMe | 2.35 | 2’, 3’, l”a, l”b, COOMe |
| COOMe | 3 70 | l’,2’, 3’,NMe. 16 | 3.77 | 2’, NMe |
W tabeli 2 przedstawione zostały przesunięcia chemiczne 13C-NMR we fragmencie disacharydowym estru metylowego N-metylo-N-D-fruktozyloamfotercyny B i ich porównanie z danymi dla D-fruktozy.
Tabela 2
| węgiel | δ [ppm] | dane dla fruktoz*) | ||
| β-D-fruktopyranoza | a-D-fruktofuranoza | β-D-fruktofuranoza | ||
| δ [ppm] | δ [ppm] | δ [ppm] | ||
| 1’ | 98.3 | |||
| 2’ | 72.4 | |||
| 3’ | 66.4 | |||
| 4’ | 69.8 | |||
| 5’ | 72.3 | |||
| 6’ | 18.2 | |||
| 1” | 62.2 | 64 1 | 62 1 | 63 9 |
| 2” | 98 1 | 99 1 | 105.3 | 102 4 |
| 3” | 66.9 | 70.5 | 83.0 | 76.5 |
| 4” | 71 2 | 68.4 | 77.0 | 75 5 |
| 5” | 72.2 | 70 0 | 82.2 | 81.5 |
| 6” | 64.6 | 64.7 | 62.1 | 63.3 |
| NMe | 40.9 | |||
| COOMe | 51.6 |
*) S. N. Rosenthal & J. H. Fendler, Próg. Phys. Org. Chem. 13,280 (1976).
Porównanie danych 13C-NMR z tabeli 2 dla fragmentu fruktozylowego z danymi literaturowymi dla D-fruktozy wskazująna formę pyranozowąpodstawnika cukrowego. Obserwowane
180 253 sprzężenia J, przedstawione w tabeli 3, wskazują na konformację łódkową pierścienia fruktopyranozydowego przedstawioną wzorem 4. Jedynie taka konformacja tego pierścienia jest w pełnej zgodności ze zmierzonymi stałymi sprzężenia.
W tabeli 3 przedstawione zostały stałe sprzężenia JH H protonów fragmentu disacharydowego N-metylo-N-D-fruktozyloamfotercyny B (Py-d5:metanol-d4 9:1), przy czym przesunięcia chemiczne i stałe sprzężenia silnie sprzężonego układu spinowego H3”-H6” były udokładniane iteracyjnie poprzez jego komputerową symulację.
Tabela 3
| protony | J [Hz] | protony | J [Hz] |
| l’,2’ | ~0 | l”a, l”b | 11.6 |
| 2’, 3’ | 2.2 | 3”, 4” | 1.05 |
| 3’, 4’ | 9.5 | 4”, 5” | 8.09 |
| 4’, 5’ | 9.2 | 5”, 6”a | 5.76 |
| 5’, 6’ | 60 | 5”, 6”b | 3.61 |
| 6”a, 6”b | ~ 10 86 | ||
| 4”, 6”a | ~0 1 |
Wyniki tych badań pozwoliły na potwierdzenie konformacji fragmentu fruktozylowego estru metylowego N-metylo-N-D-fruktozyloamfotercyny B, który przedstawiony jest wzorem 4.
Pozostałe pochodne N-metylo-N-glikozylowe estrów metylowych antybiotyków z grupy makrolidów polienowych charakteryzowano w podobny do opisanego wyżej sposób.
Dla otrzymanych związków określano aktywność przeciwgrzybową a także toksyczność in vitro. Dla związku o najkorzystniejszych właściwościach, to jest asparaginianu estru metylowego N-metylo-N-D-fruktozyloamfotercyny B określono także toksyczność i aktywność in vivo.
Aktywność przeciwgrzybową związków określano posługując się standardową metodą stosowaną dla makrolidów polienowych. Płynne podłoże Sabourauda zaszczepiono 104 komórek/ml organizmu testowego Candida albicans ATCC 262778 i inkubowano przez 24 godziny w temperaturze 30°C z badanym antybiotykiem (rozcieńczenia seryjne). Jako związek porównawczy stosowano amfoterycynę B. Związki rozpuszczano w DMF i odpowiednie ilości roztworów dodawano do podłoży. Dla określenia stopnia zahamowania wzrostu drobnoustroju stosowano metodę turbidymetryczną przy 660 nm. Stężenie antybiotyku, przy którym wzrost grzyba został zahamowany w 50% określano z krzywej zależności wzrostu od stężenia Otrzymana wartość IC50 charakteryzuje aktywność przeciwgrzybową związku.
Toksyczność związków in vitro w stosunku do komórek zwierzęcych określano stosując standardowy test przyjęty dla makrolidów polienowych, jakim jest stopień hemohzy erytrocytów ludzkich. Ludzkie czerwone krwinki izolowane ze świeżej krwi z dodatkiem cytrynianu przemywano dwukrotnie zimnym roztworem soli fizjologicznej. Komórki rozcieńczano 250-krotnie solą fizjologiczną i przetrzymywano w 37°C przez 30 minut. Porcję krwinek inkubowano z różnymi stężeniami antybiotyków (roztwór bazowy w DMF) przez 30 minut w 37°C. Lizę erytrocytów określano, po wirowaniu, mierząc uwalnianą do roztworu hemoglobinę. Gęstość optyczną supematantu mierzono przy 550 nm. Wyniki wyrażano wartościami EH50 jako stężęnie antybiotyku, przy którym ma miejsce 50% hemolizy. Wartości EH50 odczytywano z krzywej zależności stopnia hemolizy od stężenia antybiotyku.
Toksyczność in vivo określono dla L-asparaginianu estru metylowego N-metylo-N-D-fruktozyloamfotercyny B. Określono najwyższą dawkę tolerowaną, MTD, oraz toksyczność ostrą LD50. Dla określenia dawki MTD preparat rozpuszczano w 5% roztworze glukozy i podawano dożylnie oraz dootrzewnowe myszom rasy Balb/c, w dawce pojedynczej i wielokrotnej. Najwyższa
180 253 poj edyncza dawka tolerowana wynosiła 100 mg/kg przy podaniu dożylnym i powyżej 200 mg/kg przy podaniu dootrzewnowym. Najwyższa wielokrotna dawka tolerowana przy podawaniu dootrzewnowe 100 mg/kg przez 5 dni znacznie przekracza tę wartość. Przy takiej dawce nie stwierdzano żadnych toksycznych efektów do 20 dni obserwacji.
Toksyczność ostrą, LD50, L-asparaginianu estru metylowego N-metylo-N-D-fruktozyloamfotercyny B określono dla samic myszy Swiss Webster o wadze przeciętnie 20 g. Zwierzętom podawano dożylnie różne ilości badanego preparatu i dla porównania amfoterycynę B w postaci preparatu Fungizon, rozpuszczone w 5% glukozie. Podawana objętość roztworu wynosiła 0.5 ml. Jako kontrolę podawano myszom 0.5 ml 5% roztworu glukozy. Każdą dawkę obu preparatów podawano grupie 5 myszy. Zwierzęta obserwowano przez 7 dni. Po tym czasie myszy przeżywające zabijano i badano niektóre wskaźniki w surowicy. Nie stwierdzono, w porównaniu z myszami kontrolnymi, zwiększonego poziomu aminotransferazy asparagmianowej czy kreatyniny. LD50 dla L-asparaginianu estru metylowego N-metylo-N-D-fruktozyloamfotercyny B wynosiło 400 mg/kg, podczas gdy dla amfoterycyny B w formie Fungizonu wynosiło 6 mg/kg
Efektywność chemoterapeutycznąL-asparaginianu estru metylowego N-metylo-N-D-fruktozyloamfotercyny B określono na modelu uogólnionej kandydozy myszy. Candida albicans hodowano przez dobę na podłożu Sabourauda z glukozą w temperaturze pokojowej. Komórki grzybowe odwirowano i dwukrotnie przemyto 0.9% roztworem chlorku sodu, po czym komórki zawieszono w roztworze soli fizjologicznej. Samice myszy Swiss Webster o wadze 25 g inokulowano dożylnie 105 komórek Candida w 0,2 ml 0.9% roztworu chlorku sodu. Początkowo infekcja jest uogólniona, lecz po 2 do 3 dniach lokalizuje się w nerkach. Nie leczone zwierzęta giną zwykle pomiędzy 7 a 14 dniem po infekcji. Trzy dni po zainfekowaniu zwierzęta leczono podając dożylnie preparat dwa razy dziennie w odstępach 5 do 6 godzin przez 5 kolejnych dni. Preparat podawano jako roztwór w 5% glukozie. Zwierzęta obserwowano przez 5 tygodni począwszy od dnia infekcji. Po tym czasie zwierzęta, które przeżyły zabijano, wyjmowano nerki, homogenizowano je w sterylnej wodzie i homogenat posiewano na płytkach agarowych z podłożem Sabourauda z glukozą i liczono wyrosłe kolonie Candida. Efektywność chemoterapeutyczną preparatu określono jako dawkę w mg/kg, która w powyższym teście spowodowała przeżycie 50% zwierząt lub pełne usunięcie Candida z nerek połowy myszy. Dawkę tę określanąjako ED50 obliczano metodą podaną w publikacji w J. Hyg. 27, 493 (1938). Wartości ED50 L-asparaginianu estru metylowego N-metylo-N-D-fruktozyloamfotercyny B wynoszą2.3 mg/kg biorąc pod uwagę wskaźnik przeżycia oraz 6 mg/kg biorąc pod uwagę wskaźnik sterylizacji nerek.
Pochodne N-metylo-N-ghkozylowe estrów metylowych antybiotyków z grupy makrolidów pohenowych, ich sole oraz sposób otrzymywania ilustrują podane niżej przykłady.
Przykład I g Amfoterycyny B o E}^ = 1350 przy 382 nm w metanolu, rozpuszcza się w 15 ml Ν,Ν-dimetyloformamidu, dodaje 0.3 g D-glukozy i miesza się w ciemności przez 40 godz. w temp. 37°C. Po przereagowaniu mieszaninę reakcyjną schładza się i wytrąca się z niej osad przy pomocy nadmiaru eteru dietylowego. Osad odwirowuje się, przemywa dwukrotnie eterem diety lowym i suszy pod zmniejszonym ciśnieniem. Celem usunięcia nadmiaru D-glukozy osad zawiesza się w 20 ml wody, odwirowuje, przemywa dwukrotnie niewielką ilością wody oraz dwukrotnie acetonem i następnie dwukrotnie eterem di etylowym. Produkt suszy się pod zmniejszonym ciśnieniem, otrzymując 0.98 g N-D-fruktozyloamfoterycyny B o E]’^ = 1200 przy 382 nm w metanolu. Produkt rozpuszcza się w 10 ml Ν,Ν-dimetyloformamidu mieszając. Do otrzymanego roztworu dodaje się mieszając 50 ml eteru dietylowego, co powoduje wytrącenie rozdrobnionej zawiesiny. Całość schładza się w łaźni lodowej o temp. 0-2°C i dodaje mieszając energicznie świeżo otrzymany roztwór diazometanu w eterze dietylowym w proporcji 2.5 mola diazometanu w 1 mmol N-D-fruktozyloamfoterycyny B. Przebieg reakcji kontroluje się metodą chromatografu cienkowarstwowej na żelu krzemionkowym w układzie rozpuszczalników chloroformmetanol-woda 10:6:1 objętościowo. Po przereagowaniu, w ciągu około 2 godz., nadmiar diazometanu oraz eter dietylowy odparowuje się pod zmniejszonym ciśnieniem w temperaturze nie wyższej niż 40°C. Z pozostałego roztworu surowy produkt wytrąca się nadmiarem eteru dietylo
180 253 wego, odwirowuje, przemywa dwukrotnie eterem dietylowym i następnie n-heksanem i suszy pod zmniejszonym ciśnieniem, otrzymując 0.95 g preparatu. Czysty ester metylowy N-metyloN-D-fruktozyloamfotercyny B wydziela się z surowego preparatu na drodze chromatografii kolumnowej z użyciem żelu krzemionkowego Silicagel 60,70-230 mesh firmy Merck oraz mieszaniny rozpuszczalników o składzie chloroform-metanol-woda w stosunku obj ętościowym 20:8:1. I tak 0.95 g surowego produktu zawiesza się w mieszaninie rozpuszczalników o podanym wyżej składzie, a jeśli napotka się trudności w rozpuszczaniu się produktu stosuje się mieszaninę o tym samym składzie, lecz zmienionym stosunku składników 10:6:1. Nierozpuszczoną część odwirowuje się, a supernatant nanosi się na kolumnę chromatograficzną i przemywa stosując podaną wyżej mieszaninę rozpuszczalników lecz w stosunku objętościowym 20:8:1. Eluat z kolumny analizuje się metodą chromatografu cienkowarstwowej na płytkach z sihcagelem stoując mieszaninę rozpuszczalników chloroform-metanol-woda w stosunku objętościowym 10:6:1. Płytki wizualizuje się odczynnikiem cerowym. Zbiera się frakcje o wartości Rf= 0,5-0,54 zawierające czystą N-metylo-N-D-fruktozylową pochodną estru metylowego amfoterycyny B. Połączone frakcje eluatu odparowuje się do sucha pod zmniejszonym ciśnieniem. Suchąpozostałość rozpuszcza się w niewielkiej ilości Ν,Ν-dimetyloformamidu i wytrąca produkt nadmiarem eteru dietylowego, osad odwirowuje się, przemywa dwukrotnie eterem dietylowym i suszy w eksykatorze próżniowym. Otrzymuje się 0.137 g estru metylowego N-metylo-N-D-fruktozyloamfotercyny B oEj’^ - 1300 przy 382 nm w metanolu. Dowód struktury otrzymanego związku został podany w części opisowej. Aktywność przeciwgrzybowa związku względem Candida albicans określona metodą podaną w części opisowej wyraża się wartością IC50 = 0.12 pg/ml, zaś toksyczność dla erytrocytów ludzkich określona według opisanej we wstępie metody wyraża się wartością EH50 powyżej 350 pg/ml. Dla porównania EH50 dla wyjściowej amfoterycyny B wynosi 1.5 pg/ml. Dokładnej wartości EH50 dla N-metylo-N-D-fruktozyloamfotercyny B nie można było określić, gdyż powyżej stężenia350 pg/ml związek jest już w warunkach metody testowej nierozpuszczalny
Przykład II
0.5 g kandydyny o E[°^ = 1175 przy 382 nm w metanolu 10.15 g D-glukozy rozpuszcza się w 10mlN,N-dimetyloformamiduimiesza się w temperaturze 37°C przez 36 godz. a dalej postępuje się analogicznie jak w przykładzie I. Otrzymuje się 0.43 g N-D-fruktozylokandydyny o Ejcl= 1100 przy 382 nm w metanolu. Produkt poddaje się reakcji metylowania za pomocądiazometanu rozpuszczonego w eterze dietylowym w sposób analogiczny jak w przykładzie I. Uzyskuje się 0.4 g surowego produktu, z którego izoluje się czysty ester metylowy N-metylo-N-D-fruktozylokandydyny na drodze chromatografii kolumnowej według metody podanej w przykładzie I. Zbiera się frakcje zawierające czystą pochodną które w teście chromatografii cienkowarstwowej jak w przykładzie I wykazują Rf = 0.49-0.52. Po odparowaniu połączonych frakcji do sucha, rozpuszczeniu w niewielkiej ilości Ν,Ν-dimetyloformamidu, wytrąceniu osadu eterem dietylowym, odwirowaniu, przemyciu eterem dietylowym i wysuszeniu w eksykatorze próżniowym otrzymuje się 0.05 g estru metylowego N-metylo-N-D-fruktozylokandydyny o Ej°^ = 1200 przy 382 nm w metanolu, IC50 = 0.75 pg/ml i EH50 powyżej 300 pg/ml. Strukturę związku określono metodami identycznymi jak w przypadku estru metylowego N-metylo-N-D-fruktozyloamfotercyny B.
Przykład III g nystatyny o Ej”^ = 870 przy 304 nm w metanolu i 0.6 g D-glukozy rozpuszcza się w 3 5 ml Ν,Ν-dimetyloacetamidu i w temperaturze 37°C miesza się przez 40 godz. Po przereagowamu wytrąca się surowy produkt, N-D-fruktozylonystatynę, za pomocą eteru dietylowego, odwirowuje i suszy pod zmniejszonym ciśnieniem. Następnie odmywa się nadmiar D-glukozy przez przemywanie osadu niewielką ilością wody i acetonu w stosunku objętościowym 1:1, następnie acetonem, eterem dietylowym i po odwirowaniu suszy w eksykatorze próżniowym. Otrzymuje się 1.2 g N-D-fruktozylonystatny o E}^ = 720 przy 304 nm w metanolu. Produkt poddaje się metylowaniu diazometanem tak jak w przykładzie I. Uzyskuje się 1.25 g surowego produktu, który oczyszcza się stosując chromatografię kolumnowąna żelu krzemionkowym jak w przykładzie I. Frakcje zawierające czysty ester metylowy N-metylo-N-D-fruktozylonystatynę o Rf= 0.65-0.67
180 253 w metodzie chromatografii cienkowarstwowej jak w przykładzie I, łączy się, odparowuje do sucha w temp. 30°C pod zmniejszonym ciśnieniem, rozpuszcza w niewielkiej ilości N,N-dimetyloacetamidu i wytrąca produkt eterem dietylowym, odwirowuje, przemywa eterem dietylowym i suszy w eksykatorze próżniowym. Otrzymuje się 0.17 g estru metylowego N-metylo-N-D-fruktozylonystatyny o Ej^ = 900 przy 304 nm w metanolu. Strukturę związku ustalono według metody opisanej dla estru metylowego N-metylo-N-D-fruktozyloamfotercyny B. Dla otrzymanego związku określono IC50 = 6.8 pg/ml i EH50 powyżej 300 pg/ml.
Przykład IV
0.79 g wacydyny, głównego składnika kompleksu antybiotycznego aureofacyny, o E}°^ =900 przy 378 nm w metanolu i 0.22 g D-glukozy w 15 ml Ν,Ν-dimetyloacetamidu miesza się w temperaturze 37°C przez 18 godz. Po przereagowaniu mieszaninę reakcyjną schładza się i wytrąca osad za pomocą nadmiaru eteru dietylowego, odwirowuje, przemywa eterem dietylowym i suszy pod zmniejszonym ciśnieniem, uzyskując 0.8 g surowej N-D-fruktozylowacydyny 0 E]cm= 720 przy 378 nm w metanolu. Otrzymaną pochodnąpoddaje się metylowaniu z zastosowaniem diazemetanu analogicznie jak w przykładzie I, uzyskując 0.5 g surowego preparatu. Czysty ester metylowy N-metylo-N-D-fruktozylowacydyny izoluje się na kolumnie chromatograficznej z żelem krzemionkowym podobnie jak opisano w przykładzie I z tym, że jako układ rozwijający stosuje się mieszaninę chloroformu, metanolu i wody w stosunku objętościowym 30'8'1. Zbiera się i łączy frakcje zawierające czystą pochodną wacydyny o Rf = 0.53-0.55 na chromatografii cienkowarstwowej z żelem krzemionkowym w układzie rozpuszczalników chloroform-metanol-woda w stosunku objętościowym 13:8:1. Dalej postępuje się jak w przykładzie ΙΠ. Otrzymuje się 0.07 g estru metylowego N-metylo-N-D-fruktozylowacydyny o Efcm = 900 przy 378 nm w metanolu. Związek wykazuje IC50 = 0.01 pg/ml i EH50 = 170 pg/ml. Strukturę związku ustalono według metody opisanej dla estru metylowego N-metylo-N-D-fruktozyloamfotercyny B.
Przykład V
0.79 g kandycydyny D, głównego składnika kompleksu antybiotycznego kandycydyny, poddaje się postępowaniu identycznemu jak opisano w przykładzie IV. Otrzymuje się 0.1 g estru metylowego N-metylo-N-D-fruktozylokandycyny D E}°^ = 920 przy 378 nm w metanolu. Rf związku w chromatografii cienkowarstwowej w warunkach opisanych w przykładzie IV wynosi 0 49-0.52. Związek wykazuje wartości IC50 = 0.01 pg/ml i EH50 = 180 pg/ml. Strukturę związku ustalono według metody opisanej dla estru metylowego N-metylo-N-D-fruktozyloamfotercyny B.
Przykład VI
0.79 g głównego składnika kompleksu antybiotycznego trychomycyny poddaje się postępowaniu identycznemu jak opisano w przykładzie IV. Otrzymuje się 0.1 g estru metylowego N-metylo-N-D-fruktozylotrychomcyny o Ej^ = 910 przy 378 nm w metanolu. Rf związku w chromatografii cienkowarstwowej w warunkach opisanych w przykładzie IV wynosi 0.49-0.52. Związek wykazuje wartości IC50 = 0.013 pg/ml i EH50 = 165 pg/ml. Strukturę związku ustalono według metody opisanej dla estru metylowego N-metylo-N-D-fruktozyloamfotercyny B.
Przykład VII
0.5 g amfoterycyny B o Ej^ = 1350 przy 382 nm w metanolu i 0.15 g L-glukozy w 8 ml Ν,Ν-dimetyloformamidu miesza się przez 40 godz. w temp. 37°C. Dalszy tok postępowania jest identyczny jak w przykładzie I. Otrzymuje się 0.065 g estru metylowego N-metylo-N-D-fruktozyloamfoterycyny Β o E= 1280 przy 382 nm w metanolu. Związek wykazuje wartości IC50 = 0.42 pg/ml i EH50 = ponad 200 pg/ml. Strukturę związku ustalono według metody opisanej dla estru metylowego N-metylo-N-D-fruktozyloamfotercyny B.
Przykład VIII
0.52 g amfoterycyny B o E{^ = 1350 przy 382 nm w metanolu 10.153 g D-mannozy rozpuszcza się w 10 ml Ν,Ν-dimetyloacetamidu i miesza przez 40 godz. w temp. 37°C. Dalej postępuje się jak opisano w przykładzie I. Czystą pochodną izoluje się metodą chromatografii kolumnowej na żelu krzemionkowym w sposób analogiczny jak w przykładzie I, zbierając frakcje o Rf = 0.5-0.53 w chromatografii cienkowarstwowej według metody opisanej wprzykładzie I. Dal
180 253 sze postępowanie jest identyczne jak opisano w przykładzie I. Otrzymuje się 0.08 g estru metylowego N-metylo-N-D-fruktozyloamfotercyny B o E1^ =1210 przy 382 nm w metanolu. Związek wykazuje wartości IC50 = 0.55 pg/ ml i EH50 powyżej 200 pg/ml. Strukturę związku ustalono według metody opisanej dla estru metylowego N-metylo-N-D-fruktozyloarnfotercyny B.
Przykład IX
0.5 g amfoterycyny B o Ej^, = 1350 przy 382 nm w metanolu i 0.3 g D-laktozy w 12 ml Ν,Ν-dimetyloformamidu miesza się w temp. 37°C przez 2 doby. Dalszy tok postępowania jest identyczny z opisanym w przykładzie I. Czysty związek izoluje się metodą chromatografii kolumnowej w sposób jak to podano w przykładzie I, zbierając frakcje eluatu wykazujące w chromatografii cienkowarstwowej w warunkach opisanych w przykładzie I Rf = 0.25-0.30. Otrzymuje się 0.08 g estru metylowego N-metylo-N-D-fruktozylo-galaktozyloamfoterycyny B o Ej°^ = 1000 przy 382 nm w metanolu. Związek wykazuje wartości IC50 = 6.0 pg/ml i EH50 powyżej 200 pg/ml.
Przykład X
0.5 g estru metylowego N-metylo-N-D-fruktozyloamfotercyny B otrzymanego według przykładu I zawiesza się w 10 ml wody i do zawiesiny dodaje się 0.059 g kwasu L-asparaginowego rozpuszczonego w 2 ml wody. Roztwór kwasu dodaje się kroplami przy mieszaniu aż do momentu uzyskania roztworu. Otrzymany roztwór sączy się w celu usunięcia drobnej ilości pozostałej zawiesiny i do klarownego przesączu dodaje się nadmiar acetonu aż do kompletnego wytrącenia powstające soli. Powstały osad odsącza się lub odwirowuje i przemywa dwukrotnie acetonem, dwukrotnie eterem dietylowym i suszy pod zmniejszonym ciśnieniem. Otrzymuje się 0.5 g L-asparaginianu estru metylowego N-metylo-N-D-fruktozyloamfotercyny B o E}^= 1100 przy 382 nm w metanolu. W chromatografii cienkowarstwowej na żelu krzemionkowym w rozpuszczalniku jak w przykładzie I Rf = 0.5-0.54. Produkt rozpuszcza się w N,N-dimetyloformamidzie, dimetylosulfotlenku, w 5% roztworze glukozy. W wodzie rozpuszcza się bardzo dobrze. Związek wykazuje wartości IC50 = 0.125 pg/ml i EH50 powyżej 350 pg/ml.
180 253
M—COOCH
| H3C—N—CH2 θ ΗΟ^\ wzór 1 M—COOCH3 HoC—N—CHn ó I \ °\ H X) _ HO R/_ wzór 2 oz Jb ^CH3 HO' O OH OH OH OH O^ II 1 1 1 1 B Jar U Λ JL 1 i 113 > OH OH wzór 3 OH HO^7 / / OH wzór 4 | Ί ® Αθ — g / \YTVch3 OH ν^-θπ ΠΒθΝγ· „ 6· OH Ί Ηθ\ζ~Ης^>Ι JL xcooch3 oh ^^OH |
Departament Wydawnictw UP RP. Nakład 70 egz. Cena 4,00 zł.
Claims (7)
- Zastrzeżenia patentowe1. Pochodne N-metylo-N-glikozylowe estrów metylowych antybiotyków z grupy makrolidów polienowych o wzorze ogólnym 1, gdzie M oznacza resztę antybiotyku z grupy makrolidów polienowych, zaś R oznacza fragment reszty cukrowej powstały w wyniku reakcji tego antybiotyku z mono lub oligosacharydem, korzystnie z D-glukozą lub L-glukozą lub D-mannozą lub D-galaktozą lub laktozą lub maltozą, z przegrupowaniem Amadori.
- 2. Pochodne według zastrz. 1, znamienne tym, że antybiotykiem z grupy makrolidów polienowych j est amfoterycyna B lub kandydyna lub kandydoina lub kandydynina lub mykoheptyna lub nystatyna lub polifungina lub aureofacyna lub wacydyna lub trychomycyna lub kandycydyna.
- 3. Sole pochodnych N-metylo-N-glikozylowych estrów metylowych antybiotyków z grupy makrolidów polienowych o wzorze ogólnym 2, gdzie M oznacza resztę antybiotyku z grupy makrolidów polienowych, zaś R oznacza fragment reszty cukrowej powstały w wyniku reakcji tego antybiotyku z mono lub oligosacharydem, korzystnie z D-glukozą lub L-glukozą lub D-mannozą lub D-galaktozą lub laktozą lub maltozą, z przegrupowaniem Amadori, zaś A oznacza anion kwasu organicznego lub nieorganicznego.
- 4. Sole pochodnych według zastrz. 3, znamienne tym, że antybiotykiem z grupy makrohdów polienowych jest amfoterycyna B lub kandydyna lub kandydoina lub kandydynina lub mykoheptyna lub nystatyna lub polifungina lub aureofacyna lub wacydyna lub trychomycyna lub kandycydyna
- 5. Sole pochodnych według zastrz. 3 albo 4, znamienne tym, że A oznacza anion kwasu L-asparaginowego.
- 6. Sposób otrzymywania pochodnych N-metylo-N-glikozylowych estrów metylowych antybiotyków z grupy makrolidów polienowych o wzorze ogólnym 1, gdzie M oznacza resztę antybiotyku z grupy makrolidów polienowych, zaś R oznacza fragment reszty cukrowej powstały w wyniku reakcji tego antybiotyku z mono lub oligosacharydem, korzystnie z D-glukozą lub L-glukozą lub D-mannozą lub D-galaktozą lub laktozą lub maltozą, z przegrupowaniem Amadori, znamienny tym, że otrzymane w wyniku reakcji przegrupowania Amadori N-glikozylowe pochodne antybiotyków z grupy makrolidów polienowych przeprowadza się w zawiesinę przez wytrącenie rozpuszczalnikiem, korzystnie eterem dietylowym, z roztworu tej pochodnej w rozpuszczalniku organicznym, korzystnie w Ν,Ν-dimetyloformamidzie, a następnie działa się roztworem eterowym diazometanu w obniżonej temperaturze korzystnie w zakresie -5°C do +5°C i miesza się, po czym surowy produkt reakcji izoluje się przez odparowanie rozpuszczalników i wytrącenie z zagęszczonego roztworu, korzystnie eterem dietylowym, stosowanym w nadmiarze, a następnie surowy produkt oczyszcza się znanymi sposobami.
- 7. Sposób otrzymywania soli pochodnych N-metylo-N-glikozylowych estrów metylowych antybiotyków z grupy makrolidów polienowych o wzorze ogólnym 2, gdzie M oznacza resztę antybiotyku z grupy makrolidów polienowych, a R oznacza fragment reszty cukrowej powstały w wyniku reakcji tego antybiotyku z mono lub oligosacharydem, korzystnie z D-glukozą lub L-glukozą lub D-mannozą lub D-galaktozą lub laktozą lub maltozą, z przegrupowaniem Amadori, zaś A oznacza anion kwasu organicznego lub nieorganicznego, znamienny tym, że otrzymane w wyniku reakcji przegrupowania Amadori N-glikozylowe pochodne antybiotyków z grupy makrolidów polienowych przeprowadza się w zawiesinę przez wytrącenie rozpuszczalnikiem, korzystnie eterem dietylowym, z roztworu tej pochodnej w rozpuszczalniku organicznym, korzystnie w Ν,Ν-dimetyloformamidzie, a następnie działa się roztworem eterowym diazometanu w obniżonej temperaturze, korzystnie w zakresie -5°C do +5°C, i miesza się, po180 253 czym surowy produkt reakcji izoluje się przez odparowanie rozpuszczalników i wytrącenie z zagęszczonego roztworu, korzystnie eterem dietylowym, stosowanym w nadmiarze, a następnie surowy produkt oczyszcza się znanymi sposobami, po czym otrzymaną pochodną w postaci osadu zawiesza się w niewielkiej ilości wody, dodaje się do zawiesiny kwas organiczny lub nieorganiczny w stosunku stechiometrycznym, a następnie z otrzymanego roztworu wytrąca się osad za pomocą nadmiaru rozpuszczalnika organicznego mieszającego się z wodą korzystnie acetonu, osad przemywa się, korzystnie acetonem, a dalej, korzystnie eterem dietylowym, i suszy się, korzystnie pod zmniejszonym ciśnieniem.* * *
Priority Applications (11)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL95308583A PL180253B1 (pl) | 1995-05-13 | 1995-05-13 | Pochodne N-metylo-N-glikozylowe estrów metylowych antybiotyków z grupy makrolidów polienowych i ich sole oraz sposób ich otrzymywania PL PL PL PL PL PL |
| NZ307592A NZ307592A (en) | 1995-05-13 | 1996-05-10 | N-alkyl-n-glycosyl derivatives of alkyl esters of antifungal antibiotics of polyene macrolides |
| JP8533895A JPH11504647A (ja) | 1995-05-13 | 1996-05-10 | 抗生物質 |
| KR1019970708187A KR19990014843A (ko) | 1995-05-13 | 1996-05-10 | 항생물질 |
| PCT/GB1996/001144 WO1996035701A1 (en) | 1995-05-13 | 1996-05-10 | Antibiotics |
| CA002220771A CA2220771A1 (en) | 1995-05-13 | 1996-05-10 | Antibiotics |
| MX9708637A MX9708637A (es) | 1995-05-13 | 1996-05-10 | Antibioticos. |
| AU56983/96A AU716883B2 (en) | 1995-05-13 | 1996-05-10 | Antibiotics |
| EP96915094A EP0825995A1 (en) | 1995-05-13 | 1996-05-10 | Antibiotics |
| ZA9603787A ZA963787B (en) | 1995-05-13 | 1996-05-13 | Antibiotics. |
| IL11823396A IL118233A0 (en) | 1995-05-13 | 1996-05-13 | Derivatives of alkyl esters of polyene macrolides their preparation and use |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL95308583A PL180253B1 (pl) | 1995-05-13 | 1995-05-13 | Pochodne N-metylo-N-glikozylowe estrów metylowych antybiotyków z grupy makrolidów polienowych i ich sole oraz sposób ich otrzymywania PL PL PL PL PL PL |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL308583A1 PL308583A1 (en) | 1996-11-25 |
| PL180253B1 true PL180253B1 (pl) | 2001-01-31 |
Family
ID=20065009
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL95308583A PL180253B1 (pl) | 1995-05-13 | 1995-05-13 | Pochodne N-metylo-N-glikozylowe estrów metylowych antybiotyków z grupy makrolidów polienowych i ich sole oraz sposób ich otrzymywania PL PL PL PL PL PL |
Country Status (11)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0825995A1 (pl) |
| JP (1) | JPH11504647A (pl) |
| KR (1) | KR19990014843A (pl) |
| AU (1) | AU716883B2 (pl) |
| CA (1) | CA2220771A1 (pl) |
| IL (1) | IL118233A0 (pl) |
| MX (1) | MX9708637A (pl) |
| NZ (1) | NZ307592A (pl) |
| PL (1) | PL180253B1 (pl) |
| WO (1) | WO1996035701A1 (pl) |
| ZA (1) | ZA963787B (pl) |
Families Citing this family (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5981721A (en) * | 1997-10-23 | 1999-11-09 | Karykion Corporation | Polyene macrolide schiff bases, their alkyl esters and processes for preparing polyene macrolide alkyl ester salts thereof |
| WO2001051061A1 (en) | 2000-01-14 | 2001-07-19 | Intrabiotics Pharmaceuticals, Inc. | Derivatives of polyene macrolides and preparation and use thereof |
| KR100687748B1 (ko) * | 2005-06-23 | 2007-02-27 | 한국전자통신연구원 | 이동 단말에 독립적인 빠른 핸드오버 수행을 위한 방법 및그 시스템 |
| GB0712881D0 (en) | 2007-07-03 | 2007-08-15 | Biosergen As | Compounds |
| US9447136B2 (en) | 2012-03-09 | 2016-09-20 | Blirt S.A. | Semisynthetic derivatives of Nystatin A1 |
| KR20150027217A (ko) | 2012-06-15 | 2015-03-11 | 블러트 에스.에이. | 항진균성 항생 암포테리신 b의 n-치환된 제2 세대 유도체, 및 이의 제조 및 응용 방법 |
| US10246478B2 (en) | 2014-06-12 | 2019-04-02 | Shionogi & Co., Ltd. | Polyene macrolide derivative |
| JP7240811B2 (ja) * | 2015-04-15 | 2023-03-16 | スファンガ セラピューティクス インコーポレイテッド | アムホテリシンｂの誘導体 |
| CN112920238B (zh) * | 2021-01-27 | 2022-09-30 | 河南农业大学 | 一种糖胺类Amadori衍生物及其制备方法和应用 |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FI60877C (fi) * | 1971-08-13 | 1982-04-13 | Politechnika Gdanska | Foerfarande foer framstaellning av terapeutiskt aktiva i vatten laett dispergerbara polyenmakrolidantibiot-n-glykosylderivat |
| US4002741A (en) * | 1974-04-24 | 1977-01-11 | Valter Osvaldovich Kulbakh | Meglumine complex fungicidal polyene macrolide antibiotic compositions and treatment method |
| US4195172A (en) * | 1976-04-22 | 1980-03-25 | Politechnika Gdanska | Salts of N-glycosyl derivatives of polyene macrolides, especially N-methylglucamine salts as well as the method of their preparation |
| US4144328A (en) * | 1977-02-28 | 1979-03-13 | Vainshtein Viktor A | N,N,N-Trimethyl derivatives of polyene amphoteric antibiotics, process of producing same and pharmaceutical composition |
| FR2654339B1 (fr) * | 1989-11-14 | 1994-10-28 | Mayoly Spindler Laboratoires | Nouveaux derives solubles et non toxiques des macrolides polyeniques basiques, leur preparation et leurs applications. |
-
1995
- 1995-05-13 PL PL95308583A patent/PL180253B1/pl not_active IP Right Cessation
-
1996
- 1996-05-10 MX MX9708637A patent/MX9708637A/es unknown
- 1996-05-10 KR KR1019970708187A patent/KR19990014843A/ko not_active Withdrawn
- 1996-05-10 EP EP96915094A patent/EP0825995A1/en not_active Withdrawn
- 1996-05-10 CA CA002220771A patent/CA2220771A1/en not_active Abandoned
- 1996-05-10 WO PCT/GB1996/001144 patent/WO1996035701A1/en not_active Ceased
- 1996-05-10 JP JP8533895A patent/JPH11504647A/ja active Pending
- 1996-05-10 AU AU56983/96A patent/AU716883B2/en not_active Ceased
- 1996-05-10 NZ NZ307592A patent/NZ307592A/xx unknown
- 1996-05-13 IL IL11823396A patent/IL118233A0/xx unknown
- 1996-05-13 ZA ZA9603787A patent/ZA963787B/xx unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| KR19990014843A (ko) | 1999-02-25 |
| IL118233A0 (en) | 1996-09-12 |
| CA2220771A1 (en) | 1996-11-14 |
| WO1996035701A1 (en) | 1996-11-14 |
| NZ307592A (en) | 1999-01-28 |
| EP0825995A1 (en) | 1998-03-04 |
| JPH11504647A (ja) | 1999-04-27 |
| MX9708637A (es) | 1998-02-28 |
| AU5698396A (en) | 1996-11-29 |
| PL308583A1 (en) | 1996-11-25 |
| AU716883B2 (en) | 2000-03-09 |
| ZA963787B (en) | 1997-11-13 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| PL180253B1 (pl) | Pochodne N-metylo-N-glikozylowe estrów metylowych antybiotyków z grupy makrolidów polienowych i ich sole oraz sposób ich otrzymywania PL PL PL PL PL PL | |
| Grzybowska et al. | N-methyl-ND-fructopyranosylamphotericin B methyl ester, new amphotericin B derivative of low toxicity | |
| DE19512484A1 (de) | Kohlenhydratmodifizierte Cytostatika | |
| DE2239891C2 (de) | An der Aminogruppe ihres Aminozuckerrestes substituierte Polyenmakrolide und ihre Verwendung | |
| US20040029830A1 (en) | Water-soluble indole-3-propionic acid | |
| MXPA97008637A (en) | Antibioti | |
| CA2146475C (en) | Process for the preparation of azithromycin dihydrochloride | |
| US5942495A (en) | Antibiotics | |
| CA2075336A1 (en) | 3-deoxy-mannosamine derivatives and process for their preparation | |
| US4351937A (en) | N-Glycosyl derivatives of anthracycline antibiotics and the method of their preparation | |
| DE2929058C2 (de) | N,N,N-Trimethylammonium-methylsulfate der Polyenmakrolidmethylester und Verfahren zu deren Herstellung | |
| Eby et al. | The stepwise synthesis of methyl α-isomaltooligoside derivatives and methyl α-isomaltopentaoside | |
| Kovács et al. | Studies of the synthesis of 1, 2-cis-(cyclic carbamates) of α-d-aldopyranosylamines | |
| Pandey et al. | POLYENE ANTIBIOTICS. IX AN IMPROVED METHOD FOR THE PREPARATION OF METHYL ESTERS OF POLYENE ANTIBIOTICS | |
| Oda et al. | STUDIES ON NEW ANTIBIOTIC LIVIDOMYCINS. III PARTIAL STRUCTURE OF LIVIDOMYCIN A | |
| US7125861B2 (en) | Water-soluble chitosan-indole-3-propionic acid conjugates | |
| DE3207021C2 (pl) | ||
| US5948896A (en) | Processes for preparing 13-deoxy anthracycline derivatives | |
| US4555404A (en) | Sodium 7β-(2D-2-amino-2-carboxyethylthioacetamido)-7α-methoxy-3-(1-methyl-1H-tetrazol-5-yl)thiomethyl-3-cephem-4-carboxylate heptahydrate and process for its preparation | |
| CN1189835A (zh) | 抗菌素 | |
| CA2176893A1 (en) | Antibiotics | |
| Takahashi et al. | Synthesis of 4′-deoxy-4′-fluorokanamycin A and B | |
| US5942605A (en) | 5-imino-13-deoxy anthracycline derivatives, their uses, and processes for preparing them | |
| D Raposo et al. | Synthesis, characterization, antimicrobial and antitumor activities of sucrose Octa (N-ethyl) carbamate | |
| JPS58180497A (ja) | 半合成的マクロライド類 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| LAPS | Decisions on the lapse of the protection rights |
Effective date: 20050513 |