NO963568L - Farmasöytisk preparat for behandling av blodkoagulasjonssykdommer, fremgangsmåter for fremstilling av dette og dets anvendelse - Google Patents
Farmasöytisk preparat for behandling av blodkoagulasjonssykdommer, fremgangsmåter for fremstilling av dette og dets anvendelseInfo
- Publication number
- NO963568L NO963568L NO963568A NO963568A NO963568L NO 963568 L NO963568 L NO 963568L NO 963568 A NO963568 A NO 963568A NO 963568 A NO963568 A NO 963568A NO 963568 L NO963568 L NO 963568L
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- factor
- feiba
- coagulation
- pharmaceutical preparation
- activity
- Prior art date
Links
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 65
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 37
- 238000011282 treatment Methods 0.000 title claims description 22
- 208000015294 blood coagulation disease Diseases 0.000 title claims description 5
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title 1
- 108010018823 anti-inhibitor coagulant complex Proteins 0.000 claims description 73
- 229940105776 factor viii inhibitor bypassing activity Drugs 0.000 claims description 73
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 42
- 102000015081 Blood Coagulation Factors Human genes 0.000 claims description 38
- 108010039209 Blood Coagulation Factors Proteins 0.000 claims description 38
- 239000003114 blood coagulation factor Substances 0.000 claims description 38
- 108010094028 Prothrombin Proteins 0.000 claims description 31
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 claims description 31
- 102100027378 Prothrombin Human genes 0.000 claims description 28
- 229940039716 prothrombin Drugs 0.000 claims description 28
- 108010023321 Factor VII Proteins 0.000 claims description 26
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 claims description 24
- 208000034158 bleeding Diseases 0.000 claims description 24
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 claims description 24
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 21
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 21
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims description 15
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 claims description 14
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims description 12
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 claims description 12
- 102000016519 Coagulation factor VII Human genes 0.000 claims description 11
- 229940105772 coagulation factor vii Drugs 0.000 claims description 11
- 239000007858 starting material Substances 0.000 claims description 11
- 238000002955 isolation Methods 0.000 claims description 10
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 10
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 8
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 7
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 claims description 6
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 claims description 6
- 239000012678 infectious agent Substances 0.000 claims description 6
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims description 6
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 5
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 4
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 claims description 3
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 claims description 3
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 claims description 2
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 claims description 2
- 101800004937 Protein C Proteins 0.000 claims description 2
- 102000017975 Protein C Human genes 0.000 claims description 2
- 229940096437 Protein S Drugs 0.000 claims description 2
- 102000029301 Protein S Human genes 0.000 claims description 2
- 108010066124 Protein S Proteins 0.000 claims description 2
- 101800001700 Saposin-D Proteins 0.000 claims description 2
- 229960000856 protein c Drugs 0.000 claims description 2
- 125000001453 quaternary ammonium group Chemical group 0.000 claims description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 2
- 206010067787 Coagulation factor deficiency Diseases 0.000 claims 2
- 208000014763 coagulation protein disease Diseases 0.000 claims 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 24
- 108010054265 Factor VIIa Proteins 0.000 description 22
- 229940012414 factor viia Drugs 0.000 description 22
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 20
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 19
- 102100023804 Coagulation factor VII Human genes 0.000 description 15
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 15
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 15
- 229940012413 factor vii Drugs 0.000 description 15
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 13
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 13
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 13
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 11
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 11
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 10
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 10
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 8
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 8
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 8
- 229940124135 Factor VIII inhibitor Drugs 0.000 description 7
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 7
- 108010000499 Thromboplastin Proteins 0.000 description 7
- 102000002262 Thromboplastin Human genes 0.000 description 7
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 7
- 102100022641 Coagulation factor IX Human genes 0.000 description 6
- 108010076282 Factor IX Proteins 0.000 description 6
- 208000009292 Hemophilia A Diseases 0.000 description 6
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 6
- 229960004222 factor ix Drugs 0.000 description 6
- PGOHTUIFYSHAQG-LJSDBVFPSA-N (2S)-6-amino-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-4-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S,3R)-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S,3R)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-1-[(2S,3R)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2R)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-1-[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-amino-4-methylsulfanylbutanoyl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)propanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]propanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-3-methylbutanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]acetyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-3-sulfanylpropanoyl]amino]-4-methylsulfanylbutanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]-3-hydroxybutanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-3-(1H-imidazol-5-yl)propanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-3-hydroxybutanoyl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)propanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-3-hydroxybutanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-3-carboxypropanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]-3-methylbutanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-4-oxobutanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)propanoyl]amino]-4-carboxybutanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]hexanoic acid Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](Cc1c[nH]c2ccccc12)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](Cc1cnc[nH]1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](Cc1c[nH]c2ccccc12)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](Cc1ccccc1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](Cc1c[nH]c2ccccc12)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O PGOHTUIFYSHAQG-LJSDBVFPSA-N 0.000 description 5
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 102100026735 Coagulation factor VIII Human genes 0.000 description 5
- 108010054218 Factor VIII Proteins 0.000 description 5
- 102000001690 Factor VIII Human genes 0.000 description 5
- 201000003542 Factor VIII deficiency Diseases 0.000 description 5
- 101000911390 Homo sapiens Coagulation factor VIII Proteins 0.000 description 5
- 229960000301 factor viii Drugs 0.000 description 5
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 5
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 5
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 4
- AGVAZMGAQJOSFJ-WZHZPDAFSA-M cobalt(2+);[(2r,3s,4r,5s)-5-(5,6-dimethylbenzimidazol-1-yl)-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] [(2r)-1-[3-[(1r,2r,3r,4z,7s,9z,12s,13s,14z,17s,18s,19r)-2,13,18-tris(2-amino-2-oxoethyl)-7,12,17-tris(3-amino-3-oxopropyl)-3,5,8,8,13,15,18,19-octamethyl-2 Chemical compound [Co+2].N#[C-].[N-]([C@@H]1[C@H](CC(N)=O)[C@@]2(C)CCC(=O)NC[C@@H](C)OP(O)(=O)O[C@H]3[C@H]([C@H](O[C@@H]3CO)N3C4=CC(C)=C(C)C=C4N=C3)O)\C2=C(C)/C([C@H](C\2(C)C)CCC(N)=O)=N/C/2=C\C([C@H]([C@@]/2(CC(N)=O)C)CCC(N)=O)=N\C\2=C(C)/C2=N[C@]1(C)[C@@](C)(CC(N)=O)[C@@H]2CCC(N)=O AGVAZMGAQJOSFJ-WZHZPDAFSA-M 0.000 description 4
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 4
- 230000023597 hemostasis Effects 0.000 description 4
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 4
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 4
- BFSVOASYOCHEOV-UHFFFAOYSA-N 2-diethylaminoethanol Chemical compound CCN(CC)CCO BFSVOASYOCHEOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 3
- 102000001554 Hemoglobins Human genes 0.000 description 3
- 108010054147 Hemoglobins Proteins 0.000 description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000012564 Q sepharose fast flow resin Substances 0.000 description 3
- 239000012614 Q-Sepharose Substances 0.000 description 3
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 description 3
- 230000009471 action Effects 0.000 description 3
- 238000005349 anion exchange Methods 0.000 description 3
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 3
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 3
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 3
- 210000004779 membrane envelope Anatomy 0.000 description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 229920002271 DEAE-Sepharose Polymers 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010014173 Factor X Proteins 0.000 description 2
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 2
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 2
- 229940024545 aluminum hydroxide Drugs 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 230000023555 blood coagulation Effects 0.000 description 2
- 230000001186 cumulative effect Effects 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 2
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 2
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 2
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 2
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 108010012557 prothrombin complex concentrates Proteins 0.000 description 2
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 2
- 230000002885 thrombogenetic effect Effects 0.000 description 2
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 2
- 239000011534 wash buffer Substances 0.000 description 2
- GUPXYSSGJWIURR-UHFFFAOYSA-N 3-octoxypropane-1,2-diol Chemical compound CCCCCCCCOCC(O)CO GUPXYSSGJWIURR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 1
- 208000019838 Blood disease Diseases 0.000 description 1
- 239000012619 Butyl Sepharose® Substances 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108010029144 Factor IIa Proteins 0.000 description 1
- 108010074860 Factor Xa Proteins 0.000 description 1
- 102000009123 Fibrin Human genes 0.000 description 1
- 108010073385 Fibrin Proteins 0.000 description 1
- BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N Fibrin monomer Chemical compound CNC(=O)CNC(=O)CN BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010049003 Fibrinogen Proteins 0.000 description 1
- 102000008946 Fibrinogen Human genes 0.000 description 1
- 206010062713 Haemorrhagic diathesis Diseases 0.000 description 1
- 241000711549 Hepacivirus C Species 0.000 description 1
- 241000700721 Hepatitis B virus Species 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 241000725303 Human immunodeficiency virus Species 0.000 description 1
- UEEJHVSXFDXPFK-UHFFFAOYSA-N N-dimethylaminoethanol Chemical compound CN(C)CCO UEEJHVSXFDXPFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108090000190 Thrombin Proteins 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 1
- WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K aluminium hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229940024546 aluminum hydroxide gel Drugs 0.000 description 1
- SMYKVLBUSSNXMV-UHFFFAOYSA-K aluminum;trihydroxide;hydrate Chemical compound O.[OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] SMYKVLBUSSNXMV-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000000908 ammonium hydroxide Substances 0.000 description 1
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 238000005571 anion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 1
- 229940019700 blood coagulation factors Drugs 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 125000000484 butyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 description 1
- 210000000078 claw Anatomy 0.000 description 1
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 1
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 1
- 238000011067 equilibration Methods 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 210000003191 femoral vein Anatomy 0.000 description 1
- 229950003499 fibrin Drugs 0.000 description 1
- 229940012952 fibrinogen Drugs 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 208000014951 hematologic disease Diseases 0.000 description 1
- 208000018706 hematopoietic system disease Diseases 0.000 description 1
- 208000031169 hemorrhagic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002008 hemorrhagic effect Effects 0.000 description 1
- 208000002672 hepatitis B Diseases 0.000 description 1
- 210000000548 hind-foot Anatomy 0.000 description 1
- 239000000017 hydrogel Substances 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 1
- 238000001470 plasma protein fractionation Methods 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 238000009256 replacement therapy Methods 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000011146 sterile filtration Methods 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 229920002994 synthetic fiber Polymers 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000009210 therapy by ultrasound Methods 0.000 description 1
- 229960004072 thrombin Drugs 0.000 description 1
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 1
- 230000001960 triggered effect Effects 0.000 description 1
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/14—Hydrolases (3)
- C12N9/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
- C12N9/50—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25)
- C12N9/64—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from animal tissue
- C12N9/6421—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from animal tissue from mammals
- C12N9/6424—Serine endopeptidases (3.4.21)
- C12N9/6437—Coagulation factor VIIa (3.4.21.21)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
- A61K38/46—Hydrolases (3)
- A61K38/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
- A61K38/482—Serine endopeptidases (3.4.21)
- A61K38/4846—Factor VII (3.4.21.21); Factor IX (3.4.21.22); Factor Xa (3.4.21.6); Factor XI (3.4.21.27); Factor XII (3.4.21.38)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/14—Hydrolases (3)
- C12N9/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
- C12N9/50—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25)
- C12N9/64—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from animal tissue
- C12N9/6421—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from animal tissue from mammals
- C12N9/6424—Serine endopeptidases (3.4.21)
- C12N9/647—Blood coagulation factors not provided for in a preceding group or according to more than one of the proceeding groups
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Y—ENZYMES
- C12Y304/00—Hydrolases acting on peptide bonds, i.e. peptidases (3.4)
- C12Y304/21—Serine endopeptidases (3.4.21)
- C12Y304/21021—Coagulation factor VIIa (3.4.21.21)
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Hematology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Description
Foreliggende oppfinnelse vedrører et farmasøytisk preparat for behandling av blodkoaguleringsforstyrrelser, spesielt hos pasienter med faktor VIII-inhibitor. Foreliggende oppfinnelse vedrører dessuten en fremgangsmåte for fremstilling av et preparat av denne type så vel som dets anvendelse.
Blodkoagulering utløses av serier av etterfølgende reaksjoner med ulike proteiner og/eller enzymer. Dannelsen av fibrin fra fibrinogen, og derved lukking av sår, hindres som følge av mangel på blodkoaguleringsfaktorer; konsekvensen av dette er blødning. Slike tilfeller eksisterer i forbindelse med hemofilia A. Dette er den mest utbredte blodforstyrrelsen, og forårsakes av en svikt i faktor VIII. Faktor VIII inneholdende preparater anvendes for utbyttingsterapi ved hemofilia A. Behandling med disse preparater fører til et raskt opphør av blødning i de fleste tilfeller.
Det er imidlertid også pasienter som ikke kun har svikt i faktor VIII, men som også har utviklet en inhibitor rettet mot faktor VIII. En ytterligere gruppe av pasienter fremviser faktor Vlll-inhibitorer uten å lide av hemofili A. Avhengig av mengde av faktor A-inhibitorer til stede, hemmes virkningen av administrert faktor VIII i form av dennes nøytralisering.
Preparater som er basert på en plasmafraksjon inneholdende en blanding av koaguleringsfaktorer, tilbys i dag for behandling av pasienter med faktor VIII-inhibitor. Denne plasmafraksjonen kan f.eks. inneholde faktorer av protrombinkompleks (faktor II, VII, IX, X). Et blodkoaguleringsfremmende preparat med faktor Vlll-inhibitor med bypassaktivitet (FEIBA TIM 4, Immuno AG) er erholdt, i henhold til AT-0 368 883, f.eks. ved behandling av kryosupernatant. Dette preparatet inneholder også koaguleringsfaktorene II, VII, IX, X.
Virkningen til et FEIBA-preparat er kompleks, som følge av dets komplekse sammensetning. Mariani et al (Thrombosis Res. 31, 475-488, (1983)) nevner faktor VII i dens aktiverte form som et virkningsprinsipp. Det ble fastslått at et høyere innhold av faktor Vila i plasma finner sted hos hemofilipasienter etter infusjon av et FEIBA-preparat.
Rollen til faktor Vila i protrombinkomplekskonsentrater med en faktor Vlll-inhibitor-bypassaktivitet er likeledes diskutert på samme måte, av Teitel (Thrombosis and Haemostasis 66 (5) 559-564, (1991)). Samtidig er virknings-prinsippet til faktor Xa i preparater av denne type også behandlet. Undersøkte protrombinkomplekskonsentrater inneholdt faktor Vila, uttrykt i et forhold mellom faktor VII-aktivitet og faktor VII-antigen på 2,1 og 2,5.
Det terapeutiske preparat inneholdende protrombin, fremstilt ifølge EP-0 044 343-B1, er egnet for behandling av koaguleringsfaktorinhibitorer og inneholder et aktivert protrombin-kompleks der faktorene er delvis aktivert. Mengde av faktor Vila er mellom 8-80 enheter pr. ml. Faktor IX-konsen-trasjonen er i området fra 15 til 112 enheter pr. ml. Tilsvarende er innholdet av faktor Vila, med hensyn til faktor IX, 0,07-5,3 U faktor VIIa/U faktor IX. Vinazzer (Thrombosis Res. 26:21-29 (1982)) viser forskjellen mellom preparatene AUTOPLEX, som er fremstilt i henhold til EP-44 343 og FEIBA. Slik det er vist der skiller AUTOPLEX seg ut på grunn av høyere innhold av trombin (faktor Ila) målt i NIH-enheter sammenlignet med FEIBA (se tabell ls. 18).
Høyrensede faktor Vlla-preparater er imidlertid også foreslått for behandling av koaguleringsfaktorinhibitortil-stander (f.eks. EP 0 082 182-B1) og Hedner et al. (Haemostasis 19, 335-343 (1989)).
En fremgangsmåte for rensing av et konsentrat som inneholder høyrenset faktor Vila er også beskrevet i EP 0 547 932-A1. Faktor VII separeres fra koaguleringsfaktorene II, IX og X ved anionebyttekromatografi av et kryobunnfall. Faktor VII utsettes så for en videre rensing og aktivering, hvorved tilsetning av eksogene proteiner unngås. Faktor Vila behandles så for inaktivering av virus ved hjelp av en behandling med et organisk løsningsmiddel/detergent (TnBP/Tween).
Risiko for å overføre infeksiøse stoffer eksisterer ved anvendelse av plasma eller en plasmafraksjon som utgangsmateriale for fremstilling av farmasøytiske preparater. Til tross for utvelgelse av donorer, og tester av individuelle plasmadoneringer for mulig tilstedeværelse av virus, slik som HIV, hepatitt B eller hepatitt C-virus, eksisterer muligheten for at en plasmaenhet er infeksiøs. Denne resterende infeksiøsitet kan ikke utelukkes på grunn av begrenset sensitivitet i testsystemene, men også på grunn av inkuber-ingstiden frem til tilsynekomst av målbare infeksjonsmarkører (diagnostisk vindu).
Farmasøytiske preparater som er fremstilt fra plasma eller en plasmafraksjon utsettes derfor for ulike behandlinger for inaktivering av potensielt tilstedeværende virus. En ut-prøvet fremgangsmåte for inaktivering av virus med membrankappe, så vel som virus uten membrankappe er gjort rede for i EP 0 159 311-B1. Et farmasøytisk preparat oppvarmes her i en fast fase etter at vanninnholdet er justert til en verdi på 5-70 %. Denne behandling er også beskrevet som en koke- (damp) behandling. I stedet for vann kan også metanol eller etanol anvendes.
Kombinasjoner av virusinaktiveringsfremgangsmåter er imidlertid også mulig. I henhold til EP 0 519 901, kan en behandling med høykonsentrerte tensider kombineres med varmebehandling.
En målsetning med foreliggende oppfinnelse er å til-veiebringe et forbedret farmasøytisk preparat for behandling av blodkoaguleringsforstyrrelser, spesielt pasienter med faktor VIII-inhibitor, så vel som en enkel fremgangsmåte for dets fremstilling.
Målsettingen ifølge foreliggende oppfinnelse, er oppnådd ved hjelp av et farmasøytisk preparat med FEIB-aktivitet, inneholdende faktor Vila og minst en ytterligere aktiv bestanddel, og har aktivitet på 10 faktor Vlla-enheter pr. enhet av FEIBA.
Innholdet av faktor Vila i preparatet ifølge foreliggende oppfinnelse, er minst 10, fortrinnsvis fra 10 til 100, mest foretrukket fra 10 til 20, spesielt 10 til 15 enheter pr. enhet FEIB-aktivitet. FEIB-aktivitet bestemmes som vist i fremgangsmåten ifølge AT-350 726.
Det har vist seg at et preparat inneholdende høy-renset faktor Vila som eneste effektive substans, ikke besitter noen FEIB-aktivitet. Av denne grunn var det overraskende at tilsetning av faktor Vila til preparatet med FEIB-aktivitet, slik som en av de oppnådde protrombinkompleksinne- holdende fraksjoner, bidrar til en betydelig forbedring av effektiviteten av et farmasøytisk preparat for behandling av blodkoaguleringsforstyrrelser, særlig hos pasienter med faktor Vlll-inhibitor.
Innholdet av faktor Vila ble bestemt i de følgende eksempler med fremgangsmåtene beskrevet av van Deijk (Haemostasis 13: 192-197, 1983) og EP 0 547 932 med tromboplastin fra kveg. I tillegg kan også faktor Vila bestemmes ved anvendelse av rekombinant, løselig vevsfaktor ifølge fremgangsmåtene til Morrissey et al. (Blood 81: 734-744, 1983) og WO 92/18870.
Koaguleringsf aktorene II, IX og X, og i tillegg f.eks. vevsfaktor eller Xa og fosfolipider, må nevnes som aktive bestanddeler i et preparat med FEIB-aktivitet. De oven-nevnte bestanddeler i et preparat med FEIB-aktivitet er ikke fullstendige, og av denne grunn bør de ikke anses som begrens-ende.
Preparatet ifølge foreliggende oppfinnelse inneholder fortrinnsvis koaguleringsfaktorer II, IX og X, fortrinnsvis i en konsentrasjon som tilsvarer et forhold på 0,5 - 2, særlig foretrukket 0,5 - 1,5 U/U FEIBA for hver faktor. Målingen ble utført ifølge testbeskrivelsen i AT-350 726.
Preparatet ifølge foreliggende oppfinnelse, er derved forskjellig fra kjente preparater, ikke bare på grunn av dets spesielt høye innhold av faktor Vila i forhold til FEIBA, men også ved dets innhold av faktor Vila i forhold til faktor IX. Det siste er f.eks. betydelig høyere enn i EP-0 044 343.
Det er av ytterligere fordel når preparatet ifølge foreliggende oppfinnelse, dessuten inneholder protein C og/eller protein S.
Det var overraskende at preparatet ifølge foreliggende oppfinnelse, kan fremstilles på en enkel og økonomisk måte. Av denne grunn omfatter også foreliggende oppfinnelse en produksjonsfremgangsmåte som er kjennetegnet ved at en fraksjon som beskrevet ovenfor bringes i kontakt med en anionbytter, hvorved koaguleringsfaktor VII, i det minste delvis aktiveres. Betingelser som tillater simultan absorpsjon av faktor VII og/eller faktor Vila med koaguleringsfaktorene II, IX og X, er derved utvalgt, f.eks. ved anvendelse av buffer med lav ionestyrke. Deretter separeres ionebytteren, f.eks. ved dannelse av bunnfall, og fraksjonen inneholdende koaguleringsf aktorene II, Vila, IX og X isoleres. I denne sammenheng inneholder fraksjonen allerede FEIBA før kontakt og/eller en FEIBA dannes i fraksjonen i løpet av dette.
En sterk anionbytter, f.eks. en matriks med kvaternære ammoniumgrupper slik som QAE, TMAE og Q-grupper, anvendes som anionbyttemateriale. Som en bærer for anionbyttegrupper anvendes kryssbundet Dextran, slik som Sephadex eller Sepharose, eller syntetiske materialer, slik som Fractogel.
Foreliggende fremgangsmåte for fremstilling er, bl.a. forbedret ved dets økonomiske fremgangsmåte. Fremgangsmåten har fordelen ved at koaguleringsfaktor VII ikke først må separeres for så å tilsettes til preparatet igjen. I tillegg renses ikke bare den koaguleringsfaktorinneholdende fraksjonen, men koaguleringsfaktor VII aktiveres også i ett trinn. Delvis aktivering av faktor IX og faktor X, men ikke faktor II, skjer også samtidig.
Preparatet ifølge foreliggende oppfinnelse, kan også erholdes ved kombinering av en fraksjon inneholdende et renset protrombinkompleks og en fraksjon inneholdende renset faktor Vila, og ved en behandling for inaktivering av virus. Det farmasøytiske preparat ifølge foreliggende oppfinnelse, kan imidlertid også settes sammen av en fraksjon inneholdende en renset del av protrombinkompleks (fraksjonene II, IX og X) og en fraksjon inneholdende renset faktor Vila, hvorved denne er behandlet for inaktivering av virus. Protrombinkompleks anvendt for fremstilling av preparatet ifølge foreliggende oppfinnelse er fortrinnsvis til stede i form av aktivert protrombinkompleks eller i form at et FEIBA-preparat. I et aktivert protrombinkompleks er koaguleringsfaktorene II, IX og X delvis aktivert. Aktiveringen av II er imidlertid unngått i et slikt preparat for å direkte utelukke protrombogen aktivitet.
Ved anvendelse av visse betingelser, slik som høy ionestyrke i utgangsløsningen og/eller i vaskebufferen, og sterke anionbyttegeler, f.eks. Q-Sepharose Fast Flow (Pharmacia), kan aktivert protrombinkompleks isoleres i form av et FEIBA-preparat med høyere utbytter fra plasma eller plasmasupernatant, etter separering av kryopresipitatet. Geler av denne type binder så faktor VII eller faktor Vila relativt dårlig. Faktor Vila kan derfor isoleres fra samme utgangsmateriale i en ytterligere fremgangsmåte med større utbytter.
De erholdte fraksjoner behandles for å danne farma-søytiske preparater på vanlig måte, f.eks. ved tilsetning av farmasøytisk akseptable bærere og/eller hjelpemidler, steril filtrering og lyofilisering, til farmasøytiske preparater egnet for lagring.
Preparatet ifølge foreliggende oppfinnelse kan fremstilles ved hjelp av en ytterligere fremgangsmåte med følgende trinn: a) isolering av koaguleringsf aktorene II, IX og X i form av individuelle komponenter eller i form av en blanding, fra en eller flere utgangsmaterialer, inneholdende en eller flere av koaguleringsfaktorene II, IX og/eller X,
b) isolering av koaguleringsfaktorene VII/Vila fra et utgangsmateriale, inneholdende koaguleringsfaktor Vila
og/eller koaguleringsfaktor VII, hvorved koaguleringsfaktor VII i det minste er delvis aktivert,
c) forbehandling eller behandling av utgangsmaterialene eller isolerte koaguleringsfaktorer for inaktivering av
infeksiøse midler, og
d) blanding av isolerte koaguleringsfaktorer sammen med en farmasøytisk akseptabel bærer.
I en foretrukken utførelsesform tilsettes faktor Vila til protrombinkompleks, som kan være til stede i form av delvis protrombinkompleks, etter rensing av komponentene og blanding med en farmasøytisk akseptabel bærer, og etterfulgt av en behandling for virusinaktivering, f.eks. en varmebehandling.
Tilsetning og/eller innhold av høyrenset faktor Vila er særlig fordelaktig etter som færre forurensende proteiner introduseres i preparatet i form av urenheter. Spesifikk aktivitet av faktor Vila i preparatet er fortrinnsvis mer enn fra 10 U/mg til 1.000 U/mg protein.
Protrombinkomplekset er fortrinnsvis til stede i form av et aktivert protrombinkompleks eller FEIBA-preparat.
Varmebehandling, f.eks. dampbehandling, utføres fortrinnsvis, for inaktivering av infeksiøse midler (virus). Det har derved vist seg at en varmebehandling av koaguleringsfaktorene i en fast tilstand kan utføres uten tilsetning av stabiliserende proteiner, slik som albumin. Faktor Vila er, overraskende, stabil nok til at det også i en renset tilstand, kan behandles for inaktivering av infeksiøse midler.
Varmebehandling for inaktivering av virus har fordelen ved at ikke kun lipidbelagte virus inaktiveres, men også virus som ikke er omsluttet av en lipidkappe.
Fremgangsmåten ifølge foreliggende oppfinnelse, er kjennetegnet ved at faktor Vila kan isoleres fra en fraksjon som akkumuleres som et biprodukt i fremstillingen av en fraksjon inneholdende (delvis) protrombinkompleks. Denne fremgangsmåte er derfor også særlig forbedret ved dets økonomiske effektivitet.
Med fremgangsmåten ifølge foreliggende oppfinnelse, er det mulig å erholde alle komponenter av preparatet ifølge foreliggende oppfinnelse, fra et enkelt utgangsmateriale, fortrinnsvis et plasmaforråd eller en plasmafraksjon. Derved økes sikkerheten til de farmasøytiske preparater erholdt ifølge foreliggende oppfinnelse.
I en foretrukket utførelsesform tilsikter fremgangsmåten ifølge foreliggende oppfinnelse, isolering av koaguleringsfaktor VII ved kromatografiske fremgangsmåter, fortrinnsvis 1 form av anionbyttere slik som DEAE-Sephacel, DEAE-Sephadex, DEAE-Sepharose CL6B, DEAE-Sepharose Fast Flow, QAE-Sephadex, QAE-Sepharose Fast Flow, Q-Sepharose High Performance, Q-Sepharose Big Beads (erholdes fra Pharmacia); DEAE-Tris Acryl, SEAE-Spherodex, Q-Hyper-D (erholdes fra Sepracor); Macroprep DEAE, Macroprep Q BioRad); DEAE-Toyopearl, QAE-Toyopearl, Poyopearl Super-Q (Tosohaas), Protein PAK DEAE (Waters), Fractogel EMD-TMAE, Fractogel EMD-DEAE, Fractogel EMD-DMAE, LicrospherlOOO TMAE, Licrospher. 1000 DEAE og Licrospher 4000 DMAE (Merck). En særlig foretrukket utførelsesform, angår isolering av faktor Vila, ved hydrofobisk kromatografi, f.eks. ved anvendelse av følgende materialer: Butyl-Sepharose, Octyl-Sepharose, Phenyl-Sepharose , Phenyl-Sepharose Fast Flow High Sub, Phenyl-Sepharose Fast Flow Low Sub, Phenyl-Sepharose High Performance (alle erholdes fra Pharmacia); Fractogel TSK-Butyl (Merck); Macroprep-Methyl-HIC-Support, Macroprep-t-Butyl-HIC-Support (BioRad), TSK-Gel Butyl Toyopearl, TSK-Gel Phenyl Toyopearl, TSK-Gel Ether Toyopearl (Tosohaas). En samtidig aktivering, i det minste delvis, i løpet av isoleringen er fordelaktig ved rensing av koaguleringsfaktorene IX og X, på samme måte som med koaguleringsfaktor VII. Man må imidlertid være oppmerksom på at preparatet ikke har noen trombogen aktivitet; et innhold av aktivert faktor II må således unngås.
Preparatet ifølge foreliggende oppfinnelse, har med fordel en FEIB-aktivitet i området 1 - 1000 enheter FEIBA/ml av anvendelsesklar løsning, fortrinnsvis er FElB-aktiviteten mer enn 5 U/ml, mest foretrukket er en FEIBA i området fra 10 til 100 U/ml.
Foreliggende oppfinnelse omfatter også anvendelse av en kombinasjon av faktor Vila og minst en aktiv bestanddel for fremstilling av et farmasøytisk preparat med FEIB-aktivitet, for raskt opphør av blødning hos pasienter med en koaguleringsf aktor svikt. Et raskt opphør av blødning, som er avhengig av hemmere av koaguleringsfaktorer, er særlig oppnådd ved denne anvendelse.
In vivo-effekten av det farmasøytiske preparat ifølge foreliggende oppfinnelse, kan vises i en dyremodell der kaniner temporært er plassert i en hemofili A-tilstand etter behandling med faktor Vlll-inhibitorinneholdende plasma. I forbehandlede dyr av denne type, med blødningstendens tilsvarende en av inhibitorhemofillene, kan abnormal blødningsadferd korrigeres til den for en ubehandlet kanin ved administrering av 75 til 100 enheter FEIBA/kg. For å vise forbedret effektivitet av et FEIBA-preparat, med et definert høyere faktor Vlla-innhold, ble det farmasøytiske preparat ifølge foreliggende oppfinnelse, inneholdende FEIBA og faktor Vila i et forhold på 10 enheter faktor Vila pr. enhet FEIBA, administrert til hemorrgi-kaniner i en dose på 5 U FEIBA/kg (tilsvarende 50 U faktor VIIa/kg). Blødningsintensiteten ble redusert til det samme nivå som ved administrering av 75 U FEIBA/kg. Som kontroller ble vanlig FEIBA administrert i en dose på 5 U/kg eller faktor Vila i en dose på 50 U/kg, der dosene ikke førte til noen merkbar reduksjon av blødnings-intensitet i forhold til ubehandlet hemofili A-inhibitordyr, i hvert tilfelle. En uventet høy effektivitet av det farmasøyt-iske preparat ifølge foreliggende oppfinnelse, ble derved dokumentert. En viktig fordel er derved at det trombogene potensial av det farmasøytiske preparat ifølge foreliggende oppfinnelse, er klart redusert i forhold til vanlig FEIBA.
Oppfinnelsen beskrives nærmere ved hjelp av de følg-ende eksempler.
Eksempler 1 til 8:
Fremgangsmåte for fremstilling av et faktor Vlla-preparat
Eksempel 1
Separering av kryptopresipitat og FEIBA fra plasma
Fremstilling skjer på bakgrunn av AT-350 726 og AT-368 883.
Ferskt, frosset, humant sitrert plasma ble opptint ved 0-+4 "C og det resulterende kryptopresipitat ble separert ved hjelp av sentr i fuger ing ved +2 °C. Ved nativ pH-verdi ble 0,5 g DEAE-Sephadex A-50 tilsatt til den resulterende kryptosupernatant derfra ved +4 °C, under kontinuerlig omrøring. Suspensjonen ble omrørt i ytterligere en time og deretter tillatt å stå slik at protein-DEAE-Sephadex-komplekset dannet bunnfall. FEIBA ble derved generert og absorbert på DEAE-Sephadex sammen med faktorer av protrombinkompleks (II, VII, IX og X) og inert protein. DEAE-Sephadex-proteinkomplekset ble separert fra supernatanten etter fullført absorpsjonsprosess, ved sentrifugering eller filtrering. Som beskrevet i AT 368883, ble FEIBA isolert ved vasking og eluering av DEAE-Sephadex-proteinkomplekset. Supernatanten ble videre behandlet til faktor Vlla-preparat.
Eksempel 2
Separering av faktor VII/ Vila fra FEIBA- supernatant
Etter separering av FEIBA fra eksempel 1, ble protrombinkompleks faktorer, særlig faktorene VII og Vila, isolert fra supernatanten ved absorpsjon til aluminiumhydroksid. Pr. 1 liter FEIBA supernatant ble 10 ml 2 % aluminiumhydrogel-suspensjon sentrifugert (SORVALL RC3B, Rotor H6000A, 5000 rpm, 10 minutter, ca. 4 °C. Det resulterende bunnfall ble homogent blandet med mengden av FEIBA-supernatant som skulle behandles (Ultra Turrax). Etter dette ble det omrørt i 30 minutter ved 20-22 °C og sentrifugert deretter (SORVALL RC3B, Rotor H6000A, 5000 rpm, 10 minutter, ca. 4 °C).
Det sentrifugerte bunnfall ble suspendert med 3,5 % av volumet av FEIBA-supernatanten, anvendt for absorpsjon i en løsning av 4 g Na3sitrat-2H20/1 og 7 g NaCl/1, pH 7,5 og omrørt i 30 minutter for fjerning av protein. Deretter ble bunnfallet separert ved sentrifugering (RC3B, Rotor H6000A, 5000 rpm, 10 minutter, ca. 4 °C). Supernatanten ble kastet og bunnfallet ble anvendt for videre fremstilling. Etter dette ble et trinn for inaktivering av mulig tilstedeværelse av patogene substanser utført i henhold til AT-A1547/93. Tween 80 ble presentert i en mengde på 1,5 volum % av FEIBA-supernatanten anvendt for absorpsjonen, og varmet til 55 °C. Supernatanten etter første vasking var suspendert i Tween 80-løsning i form av en ultra-Turrax-blander, i løpet av 1-2 minutter og omrørt i 10 minutter ved 55 "C. Deretter ble dette fortynnet med en gang med 9 volumenheter vann (+4 °C).
Det behandlede Al (OH)3-proteinkomplekset ble separert ved sentrifugering, supernatanten ble kastet, og presipitatet ble ytterligere behandlet. To påfølgende vask-inger, hver med 3,5 volum % anvendt FEIBA-supernatant ble ut-ført ved hjelp av resuspensjon og fornyet sentrifugering med sitratbuffer (4 g Na3sitrat-2H20/1 og 7 g NaCl/1, pH 7,5).
Fraksjonen inneholdende faktor VII/VIIa ble separert fra aluminiumhydroksidgel ved eluering med fosfatbuffer. Protein-aluminiumhydroksidkomplekset ble omrørt i 30 minutter med 1 volum % av FEIBA-supernatanten anvendt for absorpsjon av 0,3 M fosfatbuffer, pH 8,6 (53,4 g Na2HP04-2H20/1 ble justert til pH 8,6 med en løsning av 41,4 g NaH2P04-H20/1). Fast fase ble så separert ved sentrifugering ved 5000 rpm i 10 minutter ved 20-22 °C. Supernatanten inneholdt faktor VII/Vila og ble videre behandlet for etterfølgende rensing.
Eksempel 3
Aktivering av faktor VII og lonebvtterenslnq av faktor Vila
Eluatet isolert i eksempel 2 ble fortynnet med destillert vann i et forhold på 1:1, blandet med 0,25 mM CaCl2og pH-verdi ble justert til 8,6. Løsningen ble deretter blandet med 65 ml/l Sepharose FF, forvasket med buffer og om-rørt i 2 timer ved 4 "C. Gelen der faktor Vila nå var bundet ble så separert ved hjelp av filtrering eller sentrifugering. Den anbrakte gelen ble frigjort for inert protein ved resuspensjon i 15 minutter og etterfulgt av separering fra en vaskebuffer (96,7 g Na2HP04-2H20/1 og 0,0368 g CaCl2-2H20/1 ble justert til pH 8,6 med en løsning av 20,7 NaH2P04-H20/1). Faktor Vila ble så eluert ved eluering med en løsning av 105,7 g (NH4)2S04/1, 58 , 5 g NaCl/1 og 2,42 g TrisHCl/1, pH 7,4 ved suspensjon i 30 minutter. Gelsupernatanten inneholdende faktor Vila ble separert ved filtrering eller sentrifugering.
Eksempel 4
Rensing av faktor Vila ved hydrofob kromatografi
Løsningen inneholdende faktor Vila fra eksempel 3 ble kromatografirenset over Fenylsepharose LS. En kolonne med 50 mm ID og 24 mm laghøyde ble fylt med Fenylsepharose LS og ekvilibrert i en buffer inneholdende 2,42 g TrisHCl/1 og 105,7 g (NH4)2S04/1, pH 7,4. 100 ml av eluatet inneholdende faktor Vila fra eksempel 3, ble pumpet over gelen med en strømningshastighet på 23 ml/min. Faktor Vila ble derved bundet til gelen; inert protein ble funnet i gjennomstrømmen. Gelen ble vasket med bufferen anvendt for ekvilibrering. Faktor Vila ble så eluert med en løsning av 2,42 g TrisHCl/1, pH 7,4. Fraksjoner ble så samlet. Fraksjonene inneholdende faktor Vlla-aktivitet ble kombinert og bufferbytting ble utført ved kromatografi over Sephadex G-25 mot en buffer inneholdende 2,42 g TrisHCl/1, pH 7,4.
Eksempel 5
Rensing av faktor Vila ved kromatografi og Q- Sepharose
Q-Sepharose FF, pakket i en kolonne med 25 mm ID og 55 mm laghøyde, ble ekvilibrert med 20 mm TrisHCl/1, pH 7,4.
43 ml av løsningen inneholdende faktor Vila fra eksempel 4 ble så pumpet over kolonnen med en strømningshastighet på 5,3 ml/min. Faktor Vila ble derved bundet til gelen, mens inerte proteiner forble i strømmen som rant igjennom. Dette ble så vasket med en buffer inneholdende 25 mM Na3sitrat- 2H20 og 80 mM NaCl, pH 6,0. Dessuten ble inert protein derved separert. Elueringen av faktor Vila ble utført ved vasking av kolonnen med 25 mM Na3sitrat* 2H20 og 160 mM NaCl, pH 6,0. Protein og fraksjonene inneholdende faktor Vlla-aktiviteten fra dette elueringstrinn, ble samlet. Kolonnen ble så regenerert med en buffer (25 mM Na3sitrat-2H20 og 1 M NaCl, pH 6,0) og anvendt videre. ;Eksempel 6;Ultrakonsentraslon av faktor Vlla- preparat;Forrådet inneholdende faktor Vila fra eksempel 5 ble justert til pH 7,0 og blandet med 0,1 % humant albumin. Dette ble så konsentrert til 1/10 av utgangsvolumet over ultra-filtreringsmembraner (Amicon YM 10, cut-off 10,000 D) under et trykk på 3,0 bar i en AMICON 80/50 omrøringscelle. Konsentrert løsning inneholdende faktor Vila ble så lyofilisert. ;Eksempel 7;Varmebehandling av l<y>ofilisert faktor Vila;For inaktivering av mulig inkludert patogen ble lyofilisert faktor Vlla-preparat fra eksempel 6 varmet, ifølge fremgangsmåte i patent EP 159 311 under forhøyet partielt vanntrykk, og/eller etterfulgt av behandling ved 60 °C, også behandlet i ytterligere en time ved 80 °C. Utbyttet av faktor Vila var mer enn 90 % i hvert tilfelle. ;Eksempel 8;Karakterisering av faktor Vlla- preparat;Måling av aktivitetsgrad av faktor VII ble utført ifølge fremgangsmåten beskrevet av van Deijk, Haemostasis 13: 192-197 (1983). Koagulasjonstesten er basert på anvendelse av tromboplastin fra kveg, på den ene side og tromboplastin fra menneske, på den annen side, i forbindelse med faktor VII-utvunnet plasma. Som standard var målingene gjort med normalt plasma fra menneske. Spesifikk aktivitet til faktor Vila for de ulike trinn av fremstilling, og rensing så vel som aktiver-ingsgrad. Faktor VII, målt med tromboplastin fra kveg, mot faktor VII, målt med tromboplastin fra menneske, er gitt i tabell 1. Proteinmålingene ble utført ifølge fremgangsmåten til Bradford, Anal. Biochem. 72: 248-254 (1976). ;Eksempel 9;Kombinasjon av FEIBA og faktor Vila;Ferskt, frosset, humant sitratplasma ble tint ved 0-4 °C og det resulterende kryptopresipitat ble separert ved sentrifugering ved +2 °C. Ved nativ pH-verdi ble 0,5 g DEAE-Sephadex A-50 ved +4 °C, tilsatt til supernatanten som resulterte derav, under konstant omrøring. Suspensjonen ble omrørt i ytterligere en time og derpå tillatt å stå slik at protein-DEAE-Sephadex-komplekset dannet bunnfall. FEIBA ble derved dannet og absorbert til DEAE-Sephadex, sammen med fraksjoner av protrombinkompleks og inert protein. DEAE-Sephadex-proteinkomplekset ble separert fra supernatanten ved filtrering etter fullført absorpsjonsprosess. Som beskrevet i AT 368 883, ble FEIBA desorbert fra DEAE-Sephadex, ved vasking med buffer og etterfulgt av eluering med natriumkloridløsning. Løsningen inneholdende FEIBA ble konsentrert til 1/5 av utgangsvolumet ved ultrafiltrering og deretter inkubert for autoaktivering av protrombinkompleksfaktorer i 20 timer ved romtemperatur. Løsningen inneholdende aktivert protrombinkompleks ble så lyofilisert. Pulveret ble så løst til en konsentrasjon på 30 mg protein/ml i en buffer på 2 gNa3sitrat* 2H20 og 4 g NaCl, pH 7,2. Denne løsning ble filtrert gjennom et filter med en porestørrelse på 1 um og relyof ilisert. Pulveret, som ble isolert på denne måte, ble løst i en løsning inneholdende faktor Vila fremstilt som beskrevet i eksempel 4. Løsningen ble justert slik at 10 U FVIIa var til stede pr. 1 U FEIBA, og testet ifølge AT 350 726. Denne blanding ble relyofilisert ifølge fremgangsmåten i EP 159 311, og behandlet i 10 timer ved 60 °C og 1 time ved 80 °C. FEIB-aktivitet og FVIIa til pulveret ble målt før og etter varmebehandling. Etter varmebehandlingstrinnet var aktiviteten til FVIIa i preparatet 96 % av utgangsmaterialet og hadde derved sunket med 4 %; FEIB-aktiviteten var 90 %, tilsvarende et tap på 10 %. Som en sammenligning av dette var FVIIa-preparatet fra eksempel 4 lyofilisert og også varmebehandlet. Aktiviteten sank dermed med 48 %.
Eksempel 10
Kombinasjon av protrombinkompleks oo faktor Vila
Et preparat inneholdende protrombinkompleks ble behandlet ifølge fremgangsmåten til H.G.J. Brummelhus, Methods of Plasma Protein Fractionation, J.M. Curling (Hrsg.), side 117-128, Academic Press 1980. Preparatet inneholdt faktor II, IX og X i et lignende forhold. Preparatet ble så blandet med faktor Vila fremstilt som beskrevet i eksempel 4. Blandingen ble justert på en slik måte at 10 U FVIIa var til stede pr. 1 U FX. Et frysetørket pulver fra denne blanding ble behandlet ifølge fremgangsmåten i Epn 159 311 i 10 timer ved 60 °C og 1 time ved 80 °C. Aktiviteten til koagulasjonsfaktorene II, IX og X og faktor Vila ble målt henholdsvis før og etter varmebehandlingen. Tap av aktivitet var 7 % for faktor II, 12 % for faktor IX, 3 % for faktor X og 1 % for faktor Vila.
Som en sammenligning av dette var faktor Vlla-preparatet fra eksempel 4 lyofilisert og også varmebehandlet. Aktiviteten sank derved med 48 %.
Eksempel 11
Isolering av faktor VIIa/ FEIBA- preparat
Et preparat inneholdende faktor Vila og FEIBA-aktivitet ble isolert som følger. Ferskt, frosset, humant sitratplasma ble tint ved 0-+4 °C og det resulterende kryptopresipitat ble separert ved sentrifugering ved +2 °C. Ved nativ pH ble den resulterende kryptosupernatant derfra blandet med 0,5 g av QAE-Sephadex A50 (Pharmacia) og omrørt ved +4 °C i 15 timer. Gelproteinkomplekset ble så separert fra supernatanten ved å danne bunnfall, filtrert og fraksjonen inneholdende faktor VI Ia og FEIBA ble isolert ved eluering med 3 % NaCl-løsning. Faktor Vila og FEIBA ble kvantitativt målt. Preparatet inneholdt 12,7 % U FVIIa pr. enhet FEIBA.
Eksempel 12
Isolering av et faktor VIIa/ FEIBA- preparat
FEIBA ble isolert som beskrevet i eksempel 11. Fractogel EMD TMAE (Merck) ble imidlertid anvendt som en ionebytter for absorpsjon, i en konsentrasjon på 5 ml fuktighet pr. liter kryptosupernatant. Etter eluering av aktiverte protrombinkompleksfaktorer med 3 % NaCl-løsning, inneholdt denne 54 U FEIBA/ml, så vel som 0,6 U faktor Vila/U FEIBA. For å fremstille preparatet ifølge foreliggende oppfinnelse, ble faktor Vila, ifølge eksemplene 2-4, isolert fra kryptosupernatanten, og løsningen inneholdende FEIBA ble tilsatt slik at minst 10 U faktor VIIa/U FEIBA var det endelige innhold.
Eksempel 13
Isolering av et faktor VIIa/ FEIBA- preparat
Analogt til eksempel 12 ble FEIBA fremstilt på ny. Som en ionebytter ble Q-Sepharose Fast Flow (Pharmacia) anvendt i en konsentrasjon på 5 ml pr. liter kryptosupernatant. FEIB-aktiviteten i det erholdte eluat var 1,280 U/ml og 0,3 U faktor VIIa/U FEIBA. For å fremstille et preparat med 20 U faktor VIIa/U FEIBA var faktor Vila fremstilt, som i eksempel 11, fra den samme kryptosupernatanten som FEIBA-preparatet var isolert fra, og blandet med løsningen inneholdende FEIBA.
Eksempel 14
In vivo - ef fektivitet av et faktor VIIa/ FEIBA- preparat
En kombinasjon av FEIBA og faktor Vila fremstilt i henhold til eksempel 9, ble testet på kaniner med faktor VIII-inhibitorhemof ili som følger. Ca. 2 kg hvit kanin fra New Zealand ble anestisert. Etter igangsettelse av anestesi ble høyre femurale vene hos hver kanin forberedt og en permanent venøs tilgang ble tillaget. Gjennom denne ble 0,5 ml/kg kroppsvekt av et humant faktor Vlll-inhibitorplasma (1500 Bethesda-enheter/ml), tilført i løpet av 10 minutter, 30 minutter etter endt tilførsel ble blødningskarakteristika målt med en modifisert fremgangsmåte ifølge Giles et al, Blood 60: 727-730 (1982). For dette ble pelsen rundt kloen til kaninens bakre pote barbert for å forebygge at utgått blod ble absorbert i pelsen i løpet av den senere blødning. Toppunktet til snittene ble skadet ved hjelp av en klotang. Rett deretter ble filteret arrangert under såret på en slik måte at blodet kunne dryppe direkte på filteret uten å suges opp fra dette på grunn av kapillareffekt. Ødeleggelse som følge av en dannende blodkoagulasjon ble forebygget ved denne forsiktighetsfor-anstaltning. Filtrene ble byttet hvert annet minutt og utgått blod ble oppsamlet i fraksjoner. Blodoppsamling ble utført i 30 minutter. Undersøkelsen av blødningskarakteristika ble ut-ført ved ekstraksjon av blodet som var oppsamlet i fraksjoner på filteret med 5 ml hver av 0,04 % ammoniumhydroksidløsning i løpet av 5 timer. Erytrocyttene som derved var samlet med blodet i filteret ble lysert. I løpet av en 10 minutters ultralydbehandling ble hemoglobin ekstrahert og kvantitativt målt fotometrisk ved 416 nm i forhold til en kalibrerings-kurve, hvorved kalibreringskurven var fremstilt ved pipetter-ing av volumer av kaninblod mellom 10 ul og 1 ml på filtrene, ekstrahert som beskrevet ovenfor og måling av hemoglobinet fotometrisk ved 416 nm. Lineære kalibreringskurver kunne følgelig fremstilles som gjorde det mulig med en direkte om-dannelse av hemoglobinkonsentrasjonen i forhold til mengde av blod pr. filter. Blødningskarakteristika til klokuttene ble tilveiebrakt i form av et kumulativt tap av blod i løpet av additiv grafisk plotting av individuelle blodfraksjoner mot tid. Økning av kumulativ blødning mellom 10 og 20 minutter ut i forsøket ble tilveiebrakt i form av en relevant sitrering av blødning, og fungerte som en måling for blødningsintensitet. Gjennomsnittlig blødningsintensitet til dyr behandlet ifølge foreliggende fremgangsmåte, er gitt i figuren (fig. 1).
For testing av aktive substanser ble en løsning av et farmasøytisk preparat inneholdende respektive aktive bestanddeler i et volum på 30 ml, kontinuerlig tilført etter hemningsindusert blødning i kaninen med en tilføringshastighet på 1 ml /min og, samtidig med start av tilføringen, ble blød-ningsintensitet tilveiebrakt på ny som beskrevet ovenfor. Et FEIBA-preparat fremstilt ifølge A 350 726 eller A 368 883 ble følgelig administrert i en dose på 75 U/FEIBA/kg til tilsvar ende forbehandlede kaniner. Denne dose førte til en drastisk reduksjon i blødningsintensitet (se fig. 1).
Som kontroll ble en buffer uten aktivt stoff tilført, noe som førte til reduksjon av blødning. Administreringen av FEIBA i en dose på 5 U/kg førte likeledes til ingen signifi-kant reduksjon av blødningsintensitet.
Når et preparat ifølge foreliggende oppfinnelse, tilsvarende en dose på 5 U FEIBA/kg og 50 U faktor VIIa/kg ble gitt til kaninene, resulterte dette i motsetning til en reduksjon i blødningsintensitet, sammenlignet med en effektiv FEIBA-dose, mens 50 U faktor VIIa/kg hadde ingen effekt på den abnormale økte blødningsintensitet.
Claims (23)
1. Farmasøytisk preparat med FEIB-aktivitet for behandling av pasienter med blodkoagulasjonsforstyrrelser, forårsaket av koaguleringsfaktorsvikt og/eller inhibitorer av koaguleringsfaktorer,
karakterisert ved at det inneholder faktor Vila og minst ytterligere en aktiv bestanddel, og har en aktivitet på minst 10 faktor Vlla-enheter pr. enhet FEIBA.
2. Farmasøytisk preparat ifølge krav 1, karakterisert ved at det har en aktivitet i området fra 10 til 100 faktor Vlla-enheter pr. enhet FEIBA.
3. Farmasøytisk preparat ifølge krav 2, karakterisert ved at det har en aktivitet i området fra 10 til 20 faktor Vlla-enheter pr. enhet FEIBA.
4. Farmasøytisk preparat ifølge krav 2, karakterisert ved at det har en aktivitet i området fra 10 til 15 faktor Vlla-enheter pr. enhet FEIBA.
5. Farmasøytisk preparat ifølge kravene 1 til 4, karakterisert ved at faktor Vila, i tillegg til koaguleringsfaktorene II, IX og X, er inkludert som ytterligere aktive bestanddeler, fortrinnsvis i et forhold på 0,5 til 2 enheter pr. enhet FEIBA.
6. Farmasøytisk preparat ifølge kravene 1 til 4, karakterisert ved at faktor Vila, i tillegg til koaguleringsfaktorene II, IX og X, er inkludert som ytterligere aktive bestanddeler, fortrinnsvis i et forhold på 0,5 til 1,5 enheter pr. enhet FEIBA.
7. Farmasøytisk preparat ifølge kravene 1 til 6, karakterisert ved at det videre omfatter protein C og/eller protein S.
8. Farmasøytisk preparat ifølge krav 1, karakterisert ved at det er sammensatt av en fraksjon inneholdende renset protrombinkompleks og en fraksjon inneholdende renset faktor Vila, hvori den spesifikke aktivitet av faktor Vila er > 10 U/mg protein, og er behandlet for inaktivering av virus.
9. Farmasøytisk preparat ifølge krav 1, karakterisert ved at det er sammensatt av en fraksjon inneholdende renset partielt protrombinkompleks og en fraksjon inneholdende renset faktor Vila, hvorved spesifikk aktivitet av faktor Vila > 10 U/mg protein, og er behandlet for inaktivering av virus.
10. Farmasøytisk preparat ifølge krav 8 eller 9, karakterisert ved at protrombinkomplekset er til stede i form av aktivert protrombinkompleks eller FEIBA-preparat .
11. Farmasøytisk preparat ifølge krav 8 eller 9, karakterisert ved at faktorene inneholdende protrombinkompleks, så vel som faktor Vila stammer fra samme plasmaforråd.
12. Fremgangsmåte for rensing av et farmasøytisk preparat ifølge ett eller flere av kravene 1 til 7, karakterisert ved
- en fraksjon inneholdende koaguleringsfaktor VII bringes i kontakt med en anionbytter, hvorved koaguleringsfaktor VII er, i det minste delvis, aktivert,
- separering av anionbytteren og isolering av fraksjonen inneholdende koaguleringsfaktor Vila, hvorved fraksjonen besitter en FEIBA før binding og/eller en FEIBA dannes i fraksjonen.
13. Fremgangsmåte ifølge krav 12, karakterisert ved at en anionbytter med kvaternære ammoniumgrupper, f.eks. av QAE, TAE og Q-type, anvendes.
14. Fremgangsmåte for fremstilling av et farmasøytisk preparat med FEIB-aktivitet ifølge et av kravene 8 til 10, karakterisert ved at den omfatter følgende trinn:
a) isolering av koaguleringsf aktorene II, IX og X i form av individuelle komponenter eller i form av en blanding av en eller flere utgangsmaterialer inneholdende disse koaguleringsfaktorer, og
b) isolering av koaguleringsfaktorene VII/VIIa fra et utgangsmateriale inneholdende koaguleringsfaktor VII, hvorved koaguleringsfaktor VII i det minste delvis er aktivert til Vila, og
c) forbehandling og/eller behandling av utgangsmaterialene eller respektive koaguleringsfaktorer for inaktivering av infeksiøse midler, og
d) blanding av isolerte koaguleringsfaktorer med en farmasøytisk akseptabel bærer.
15. Fremgangsmåte ifølge krav 14, karakterisert ved at koaguleringsf aktorene isoleres fra et enkelt utgangsmateriale, fortrinnsvis et plasmaforråd eller en plasmafraksjon.
16. Fremgangsmåte ifølge krav 14, karakterisert ved at en varmebehandling ut-føres for inaktivering av infeksiøse midler.
17. Fremgangsmåte ifølge krav 16, karakterisert ved at en varmebehandling av koaguleringsfaktorene utføres i fast tilstand.
18. Fremgangsmåte ifølge krav 16, karakterisert ved at varmebehandlingen skjer i fravær av albumin.
19. Fremgangsmåte ifølge ett eller flere av kravene 14 til 18,
karakterisert ved at behandlingen for inaktivering av infeksiøse midler utføres etter blandingen av koaguleringsfaktorene med den farmasøytisk akseptable bæreren.
20. Fremgangsmåte ifølge ett eller flere av kravene 14 til 19,
karakterisert ved at koaguleringsfaktor Vila isoleres ved hydrofob kromatografi.
21. Fremgangsmåte ifølge krav 14 til 19, karakterisert ved at koaguleringsfaktorene IX, X så vel som VII, i det minste er delvis aktivert i løpet av isoleringen.
22. Anvendelse av en kombinasjon av faktor Vila og minst en ytterligere aktiv bestanddel for fremstilling av et farma-søytisk preparat med FEIB-aktivitet ifølge ett av kravene 1 til 11, for rask stansing av blødning hos pasienter med koaguleringsfaktorsvikt.
23. Anvendelse ifølge krav 22, hvorved preparatet er egnet for raskt opphør av blødning forårsaket av inhibitorer av koaguleringsfaktorer.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE19531637A DE19531637A1 (de) | 1995-08-28 | 1995-08-28 | Pharmazeutische Zusammensetzung zur Behandlung von Blutgerinnungsstörugnen, Verfahren zur Herstellung derselben und deren Verwendung |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| NO963568D0 NO963568D0 (no) | 1996-08-27 |
| NO963568L true NO963568L (no) | 1997-03-03 |
Family
ID=7770599
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NO963568A NO963568L (no) | 1995-08-28 | 1996-08-27 | Farmasöytisk preparat for behandling av blodkoagulasjonssykdommer, fremgangsmåter for fremstilling av dette og dets anvendelse |
Country Status (6)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US5891843A (no) |
| EP (1) | EP0765669A1 (no) |
| JP (1) | JPH09110715A (no) |
| CA (1) | CA2184226A1 (no) |
| DE (1) | DE19531637A1 (no) |
| NO (1) | NO963568L (no) |
Families Citing this family (40)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE59712322D1 (de) * | 1996-03-20 | 2005-06-30 | Baxter Ag | Pharmazeutisches Präparat zur Behandlung von Blutgerinnungsstörungen |
| AT405608B (de) * | 1997-04-08 | 1999-10-25 | Immuno Ag | Verfahren zur inaktivierung von pathogenen, insbesondere von viren, in einem biologischen material |
| PT973544E (pt) | 1997-04-08 | 2001-12-28 | Baxter Ag | Preparacao de complexo de protrombina imunotolerante |
| US20050032690A1 (en) * | 1997-09-10 | 2005-02-10 | Rojkjaer Lisa Payne | Factor VII polypeptides for preventing formation of inhibitors in subjects with haemophilia |
| ATA159597A (de) * | 1997-09-19 | 2000-09-15 | Immuno Ag | Präparat zur behandlung von blutgerinnungsstörungen |
| US7247708B2 (en) * | 1997-10-23 | 2007-07-24 | Regents Of The University Of Minnesota | Modified vitamin K-dependent polypeptides |
| US6747003B1 (en) | 1997-10-23 | 2004-06-08 | Regents Of The University Of Minnesota | Modified vitamin K-dependent polypeptides |
| AT408613B (de) * | 1998-06-17 | 2002-01-25 | Immuno Ag | Pharmazeutisches faktor vii-präparat |
| JP4676585B2 (ja) | 1999-12-24 | 2011-04-27 | 一般財団法人化学及血清療法研究所 | 血液凝固異常に基づく疾患の治療・予防用医薬組成物 |
| RU2278123C2 (ru) | 2000-02-11 | 2006-06-20 | Максиджен Холдингз Лтд. | Молекулы, подобные фактору vii или viia |
| DE10012732A1 (de) | 2000-03-18 | 2001-09-20 | Aventis Behring Gmbh | Thrombin-Zubereitungen und Verfahren zu ihrer Herstellung |
| US7812132B2 (en) | 2000-04-28 | 2010-10-12 | Regents Of The University Of Minnesota | Modified vitamin K-dependent polypeptides |
| US7220837B1 (en) | 2000-04-28 | 2007-05-22 | Regents Of The University Of Minnesota | Modified vitamin K-dependent polypeptides |
| US20030211094A1 (en) * | 2001-06-26 | 2003-11-13 | Nelsestuen Gary L. | High molecular weight derivatives of vitamin k-dependent polypeptides |
| EP1359935A1 (en) * | 2001-02-05 | 2003-11-12 | Novo Nordisk Health Care AG | Combined use of factor vii polypeptides and factor ix polypeptides |
| US20030203845A1 (en) * | 2001-02-05 | 2003-10-30 | Knudsen Jens Bjerre | Combined use of factor VII polypeptides and factor IX polypeptides |
| CA2452395C (en) | 2001-07-10 | 2012-04-10 | Juridical Foundation The Chemo-Sero-Therapeutic Research Institute | Pharmaceutically stable hemostatic compositions |
| IL162239A0 (en) | 2001-12-21 | 2005-11-20 | Novo Nordisk Healthcare Ag | Liquid composition of factor vii polypeptides |
| SI1499719T1 (sl) * | 2002-04-30 | 2011-03-31 | Bayer Healthcare Llc | Polipeptidne variante faktorja VII ali VIIa |
| ES2523655T5 (es) | 2002-06-21 | 2018-04-23 | Novo Nordisk Health Care Ag | Composiciones sólidas estabilizadas de polipéptidos del Factor VIIa |
| AU2003277034A1 (en) * | 2002-09-30 | 2004-04-23 | Socratech L.L.C. | Protein s protects the nervous system from injury |
| US20040198660A1 (en) * | 2002-11-06 | 2004-10-07 | Petersen Lars Christian | Tissue factor antagonist and protein C polypeptide compositions |
| US20070142272A1 (en) * | 2003-01-24 | 2007-06-21 | Zlokovic Berislav V | Neuroprotective activity of activated protein c independent of its anticoagulant activity |
| CA2519020A1 (en) * | 2003-03-18 | 2004-09-30 | Novo Nordisk Health Care Ag | Method for the production of gla-residue containing serine proteases |
| DK2085470T3 (da) * | 2003-03-20 | 2012-08-06 | Bayer Healthcare Llc | FVII- eller FVIIa-varianter |
| US7897734B2 (en) | 2003-03-26 | 2011-03-01 | Novo Nordisk Healthcare Ag | Method for the production of proteins |
| US7977460B2 (en) * | 2003-05-19 | 2011-07-12 | National Institute For Biological Standards And Control | Compositions comprising coagulation factors IXA and VIII for the treatment of haemophilia A or B |
| RU2364609C2 (ru) | 2003-05-23 | 2009-08-20 | Ново Нордиск Хелт Кэр Аг | Стабилизация белка в растворе |
| CN1839203B (zh) * | 2003-06-19 | 2011-11-16 | 拜耳医药保健有限公司 | 因子VII或VIIa的GLA结构域变体 |
| ATE547114T1 (de) | 2003-06-25 | 2012-03-15 | Novo Nordisk Healthcare Ag | Flüssige zusammensetzungen von factor vii polypeptiden |
| CN102872451A (zh) | 2003-08-14 | 2013-01-16 | 诺和诺德医疗保健公司 | 因子vii多肽类的含水液体药物组合物 |
| RU2373953C2 (ru) | 2003-12-19 | 2009-11-27 | Ново Нордиск Хелс Кеа Аг | Стабилизированная композиция, содержащая полипептид фактора vii |
| CA2565414A1 (en) * | 2004-05-04 | 2005-11-24 | Novo Nordisk Health Care Ag | O-linked glycoforms of polypeptides and method to manufacture them |
| US20070037966A1 (en) * | 2004-05-04 | 2007-02-15 | Novo Nordisk A/S | Hydrophobic interaction chromatography purification of factor VII polypeptides |
| JP2008507561A (ja) * | 2004-07-23 | 2008-03-13 | ザ ユニバーシティ オブ ロチェスター | 活性化プロテインｃによる、脳内のプラスミノゲン活性化因子の不都合な作用の阻害 |
| JP2008514216A (ja) * | 2004-09-29 | 2008-05-08 | ノボ ノルディスク ヘルス ケア アクチェンゲゼルシャフト | Ｄｅｓｇｌａ−ｖｉｉ因子ポリペプチド構造の除去による、ｖｉｉ因子ポリペプチドの原体の精製 |
| EP1907540B1 (en) * | 2005-07-22 | 2012-12-19 | Bayer HealthCare LLC | In-solution activation of factor vii |
| US7807435B2 (en) * | 2005-08-11 | 2010-10-05 | Baxter International Inc. | Method for the purification of alpha-1 proteinase inhibitor (a1PI) |
| ES2257225B1 (es) * | 2006-02-17 | 2007-03-16 | Grifols, S.A | Preparacion terapeutica de fviia de muy alta pureza y metodo para su obtencion. |
| TWI684599B (zh) * | 2014-08-12 | 2020-02-11 | 美商巴克斯歐塔公司 | 因子ｘ活化 |
Family Cites Families (16)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| AT154793B (de) | 1936-09-03 | 1938-10-25 | Telefunken Gmbh | Mehrgitterröhre. |
| AT350726B (de) * | 1976-08-30 | 1979-06-11 | Immuno Ag | Verfahren zur herstellung einer blut- gerinnungsfoerdernden praeperation aus menschlichem blutplasma |
| JPH0686385B2 (ja) * | 1980-01-28 | 1994-11-02 | バクスタ−、インタ−ナショナル、インコ−ポレイテッド | 活性プロトロンビン複合体組成物およびその製造方法 |
| US4287180A (en) * | 1980-01-28 | 1981-09-01 | Baxter Travenol Laboratories, Inc. | Method for treating blood clotting factor inhibitors |
| US4364861A (en) * | 1980-05-27 | 1982-12-21 | Cutter Laboratories, Inc. | Blood-coagulation-promoting products and methods of preparing them |
| AT368883B (de) * | 1980-07-22 | 1982-11-25 | Immuno Ag | Verfahren zur herstellung einer neuen blutgerinnungsfoerdernden praeparation auf basis von humanproteinen |
| US4382083A (en) * | 1981-06-25 | 1983-05-03 | Baxter Travenol Laboratories, Inc. | Therapeutic method for treating blood-clotting defects with factor VIIa |
| ATE36457T1 (de) * | 1983-05-02 | 1988-09-15 | Immuno Ag | Verfahren zur inaktivierung von vermehrungsfaehigen krankheitserregern. |
| AT389815B (de) * | 1984-03-09 | 1990-02-12 | Immuno Ag | Verfahren zur inaktivierung von vermehrungsfaehigen filtrierbaren krankheitserregern in blutprodukten |
| DE3740520A1 (de) * | 1987-11-30 | 1989-06-08 | Hans Dr Rer Nat Scheefers | Schnelles verfahren zur gewinnung einer faktor vii - praeparation sowie ihre verwendung |
| FR2632524B1 (fr) * | 1988-06-09 | 1992-03-13 | Fondation Nale Transfusion San | Procede de preparation d'une fraction concentree en facteur viia et son application a titre de medicament |
| US5472850A (en) * | 1991-04-10 | 1995-12-05 | Oklahoma Medical Research Foundation | Quantitative clotting assay for activated factor VII |
| ATE150374T1 (de) * | 1989-08-04 | 1997-04-15 | Komori Printing Mach | Druckplattenbefestigungsgerät für eine bogendruckmaschine |
| AT402891B (de) * | 1991-06-20 | 1997-09-25 | Immuno Ag | Verfahren zur herstellung eines inaktivierten blutproduktes |
| FR2684999A1 (fr) * | 1991-12-16 | 1993-06-18 | Aquitaine Dev Transf Sanguine | Procede de fabrication d'un concentre de facteur vii active de haute purete essentiellement depourvu des facteurs vitamine k dependants et des facteurs viiic et viiicag. |
| AT402151B (de) * | 1993-08-03 | 1997-02-25 | Immuno Ag | Verfahren zur herstellung eines virussicheren biologischen präparates |
-
1995
- 1995-08-28 DE DE19531637A patent/DE19531637A1/de not_active Withdrawn
-
1996
- 1996-07-09 EP EP96111052A patent/EP0765669A1/de not_active Withdrawn
- 1996-08-22 US US08/701,755 patent/US5891843A/en not_active Expired - Lifetime
- 1996-08-27 NO NO963568A patent/NO963568L/no not_active Application Discontinuation
- 1996-08-27 CA CA002184226A patent/CA2184226A1/en not_active Abandoned
- 1996-08-28 JP JP8226561A patent/JPH09110715A/ja active Pending
-
1997
- 1997-09-11 US US08/926,845 patent/US6013620A/en not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| US5891843A (en) | 1999-04-06 |
| CA2184226A1 (en) | 1997-03-01 |
| US6013620A (en) | 2000-01-11 |
| NO963568D0 (no) | 1996-08-27 |
| DE19531637A1 (de) | 1997-03-06 |
| EP0765669A1 (de) | 1997-04-02 |
| JPH09110715A (ja) | 1997-04-28 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US5891843A (en) | Pharmaceutical composition for the treatment of blood coagulation diseases, methods for the production thereof and its use | |
| US5877152A (en) | Method for isolation of highly pure von Willebrand Factor | |
| US5639730A (en) | Method of producing a virus-safe biological preparation | |
| FI107702B (fi) | Menetelmä verihiutalemembraanifraktion valmistamiseksi | |
| AU711298B2 (en) | Therapeutic grade thrombin production and products | |
| JPH01149733A (ja) | 高イオン性濃度媒体中の血漿及び組換え蛋白処方物 | |
| US6358534B1 (en) | Immunotolerant prothrombin complex preparation | |
| EP2152867B1 (en) | Methods for preparing Factor X, activated Factor X, inactivated Factor X and inactivated Factor Xa | |
| EP0573605B1 (en) | Preparation of factor ix | |
| EP0813598B1 (en) | Thrombin preparation | |
| US5945103A (en) | Process for producing thrombin | |
| US9956272B2 (en) | Methods for preparing factor X, activated factor X, inactivated factor X and inactivated factor Xa, and pharmaceutical compositions comprising same | |
| MXPA99008941A (es) | Preparacion del complejo de protrombina inmunotolerante |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| FC2A | Withdrawal, rejection or dismissal of laid open patent application |