NO881190L - Analogifremgangsmaate for fremstilling av terapeutisk virksomme 9-(beta-d-deoxyribofuranosyl)-mucleosider. - Google Patents
Analogifremgangsmaate for fremstilling av terapeutisk virksomme 9-(beta-d-deoxyribofuranosyl)-mucleosider.Info
- Publication number
- NO881190L NO881190L NO881190A NO881190A NO881190L NO 881190 L NO881190 L NO 881190L NO 881190 A NO881190 A NO 881190A NO 881190 A NO881190 A NO 881190A NO 881190 L NO881190 L NO 881190L
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- hiv
- virus
- azido
- cells
- hypoxanthine
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 15
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title description 8
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 title 1
- IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N Thymidine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N 0.000 claims description 38
- FDGQSTZJBFJUBT-UHFFFAOYSA-N hypoxanthine Chemical group O=C1NC=NC2=C1NC=N2 FDGQSTZJBFJUBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- UYTPUPDQBNUYGX-UHFFFAOYSA-N guanine Chemical group O=C1NC(N)=NC2=C1N=CN2 UYTPUPDQBNUYGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 13
- UGQMRVRMYYASKQ-UHFFFAOYSA-N Hypoxanthine nucleoside Natural products OC1C(O)C(CO)OC1N1C(NC=NC2=O)=C2N=C1 UGQMRVRMYYASKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 229910052731 fluorine Chemical group 0.000 claims description 5
- -1 adenine compound Chemical class 0.000 claims description 4
- 125000000852 azido group Chemical group *N=[N+]=[N-] 0.000 claims description 4
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 claims description 4
- 125000001153 fluoro group Chemical group F* 0.000 claims description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 4
- FTVLMFQEYACZNP-UHFFFAOYSA-N trimethylsilyl trifluoromethanesulfonate Chemical compound C[Si](C)(C)OS(=O)(=O)C(F)(F)F FTVLMFQEYACZNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 3
- 229930024421 Adenine Natural products 0.000 claims description 2
- GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N Nitric acid Chemical compound O[N+]([O-])=O GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000004157 Nitrosyl chloride Substances 0.000 claims description 2
- 229960000643 adenine Drugs 0.000 claims description 2
- 229910017604 nitric acid Inorganic materials 0.000 claims description 2
- VPCDQGACGWYTMC-UHFFFAOYSA-N nitrosyl chloride Chemical compound ClN=O VPCDQGACGWYTMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 235000019392 nitrosyl chloride Nutrition 0.000 claims description 2
- 241000725303 Human immunodeficiency virus Species 0.000 description 28
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 25
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 23
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 16
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 15
- DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N Beta-D-1-Arabinofuranosylthymine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N beta-L-thymidine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1OC(CO)C(O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 229940104230 thymidine Drugs 0.000 description 13
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 12
- 208000030507 AIDS Diseases 0.000 description 11
- 239000011149 active material Substances 0.000 description 11
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 10
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 10
- HBOMLICNUCNMMY-XLPZGREQSA-N zidovudine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](N=[N+]=[N-])C1 HBOMLICNUCNMMY-XLPZGREQSA-N 0.000 description 9
- 229960002555 zidovudine Drugs 0.000 description 8
- OCLZPNCLRLDXJC-NTSWFWBYSA-N 2-amino-9-[(2r,5s)-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-3h-purin-6-one Chemical compound C1=2NC(N)=NC(=O)C=2N=CN1[C@H]1CC[C@@H](CO)O1 OCLZPNCLRLDXJC-NTSWFWBYSA-N 0.000 description 7
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 7
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 7
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 7
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 6
- 238000011160 research Methods 0.000 description 5
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 5
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 5
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 5
- KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 7H-purine Chemical group N1=CNC2=NC=NC2=C1 KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- 230000000120 cytopathologic effect Effects 0.000 description 4
- 230000007918 pathogenicity Effects 0.000 description 4
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 4
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 4
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 4
- RWQNBRDOKXIBIV-UHFFFAOYSA-N thymine Chemical group CC1=CNC(=O)NC1=O RWQNBRDOKXIBIV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 4
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 4
- UXCAQJAQSWSNPQ-XLPZGREQSA-N Alovudine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](F)C1 UXCAQJAQSWSNPQ-XLPZGREQSA-N 0.000 description 3
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 3
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010047620 Phytohemagglutinins Proteins 0.000 description 3
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- MTHSVFCYNBDYFN-UHFFFAOYSA-N diethylene glycol Chemical compound OCCOCCO MTHSVFCYNBDYFN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 231100000255 pathogenic effect Toxicity 0.000 description 3
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 3
- 230000001885 phytohemagglutinin Effects 0.000 description 3
- JLKIGFTWXXRPMT-UHFFFAOYSA-N sulphamethoxazole Chemical compound O1C(C)=CC(NS(=O)(=O)C=2C=CC(N)=CC=2)=N1 JLKIGFTWXXRPMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229940113082 thymine Drugs 0.000 description 3
- RTJUXLYUUDBAJN-KVQBGUIXSA-N 2-amino-9-[(2r,4s,5r)-4-fluoro-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-3h-purin-6-one Chemical compound C1=2NC(N)=NC(=O)C=2N=CN1[C@H]1C[C@H](F)[C@@H](CO)O1 RTJUXLYUUDBAJN-KVQBGUIXSA-N 0.000 description 2
- SEUFIMAGNSSKRT-RRKCRQDMSA-N 9-[(2r,4s,5s)-4-azido-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-3h-purin-6-one Chemical compound C1[C@H](N=[N+]=[N-])[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(NC=NC2=O)=C2N=C1 SEUFIMAGNSSKRT-RRKCRQDMSA-N 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N Fluorane Chemical compound F KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NYHBQMYGNKIUIF-UUOKFMHZSA-N Guanosine Chemical compound C1=NC=2C(=O)NC(N)=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O NYHBQMYGNKIUIF-UUOKFMHZSA-N 0.000 description 2
- 208000031886 HIV Infections Diseases 0.000 description 2
- 108010092799 RNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 2
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WQDUMFSSJAZKTM-UHFFFAOYSA-N Sodium methoxide Chemical compound [Na+].[O-]C WQDUMFSSJAZKTM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- ISAKRJDGNUQOIC-UHFFFAOYSA-N Uracil Chemical group O=C1C=CNC(=O)N1 ISAKRJDGNUQOIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DRTQHJPVMGBUCF-XVFCMESISA-N Uridine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-XVFCMESISA-N 0.000 description 2
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 2
- OPTASPLRGRRNAP-UHFFFAOYSA-N cytosine Chemical group NC=1C=CNC(=O)N=1 OPTASPLRGRRNAP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 2
- AFQIYTIJXGTIEY-UHFFFAOYSA-N hydrogen carbonate;triethylazanium Chemical compound OC(O)=O.CCN(CC)CC AFQIYTIJXGTIEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- GRVDJDISBSALJP-UHFFFAOYSA-N methyloxidanyl Chemical compound [O]C GRVDJDISBSALJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002777 nucleoside Substances 0.000 description 2
- 239000008024 pharmaceutical diluent Substances 0.000 description 2
- NROKBHXJSPEDAR-UHFFFAOYSA-M potassium fluoride Chemical compound [F-].[K+] NROKBHXJSPEDAR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- VBKNTGMWIPUCRF-UHFFFAOYSA-M potassium;fluoride;hydrofluoride Chemical compound F.[F-].[K+] VBKNTGMWIPUCRF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 2
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 2
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 2
- 229960005404 sulfamethoxazole Drugs 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 231100001274 therapeutic index Toxicity 0.000 description 2
- 238000005918 transglycosylation reaction Methods 0.000 description 2
- 229940035893 uracil Drugs 0.000 description 2
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 2
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BKIUEHLYJFLWPK-SHYZEUOFSA-N 1-[(2r,4s,5r)-4-fluoro-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]pyrimidine-2,4-dione Chemical compound C1[C@H](F)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 BKIUEHLYJFLWPK-SHYZEUOFSA-N 0.000 description 1
- UHDGCWIWMRVCDJ-UHFFFAOYSA-N 1-beta-D-Xylofuranosyl-NH-Cytosine Natural products O=C1N=C(N)C=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XEZNGIUYQVAUSS-UHFFFAOYSA-N 18-crown-6 Chemical compound C1COCCOCCOCCOCCOCCO1 XEZNGIUYQVAUSS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- MXHRCPNRJAMMIM-SHYZEUOFSA-N 2'-deoxyuridine Chemical compound C1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 MXHRCPNRJAMMIM-SHYZEUOFSA-N 0.000 description 1
- HRBGUGQWTMBDTR-UHFFFAOYSA-N 2,3,4-tri(propan-2-yl)benzenesulfonyl chloride Chemical compound CC(C)C1=CC=C(S(Cl)(=O)=O)C(C(C)C)=C1C(C)C HRBGUGQWTMBDTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BTOTXLJHDSNXMW-POYBYMJQSA-N 2,3-dideoxyuridine Chemical compound O1[C@H](CO)CC[C@@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 BTOTXLJHDSNXMW-POYBYMJQSA-N 0.000 description 1
- HETOJIJPBJGZFJ-KVQBGUIXSA-N 2-amino-9-[(2r,4s,5s)-4-azido-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-3h-purin-6-one Chemical compound C1=2NC(N)=NC(=O)C=2N=CN1[C@H]1C[C@H](N=[N+]=[N-])[C@@H](CO)O1 HETOJIJPBJGZFJ-KVQBGUIXSA-N 0.000 description 1
- YXFWFUSVDJIVIV-UHFFFAOYSA-N 4-nitro-2h-triazole Chemical compound [O-][N+](=O)C=1C=NNN=1 YXFWFUSVDJIVIV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N Adenine Chemical compound NC1=NC=NC2=C1N=CN2 GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KLZUFWVZNOTSEM-UHFFFAOYSA-K Aluminium flouride Chemical compound F[Al](F)F KLZUFWVZNOTSEM-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- APFHPGMGOXICEK-RRAGMBSWSA-N C1=NC=2C(=O)NC(N)=NC=2N1[C@@]1(N=[N+]=[N-])CC[C@@H](CO)O1 Chemical compound C1=NC=2C(=O)NC(N)=NC=2N1[C@@]1(N=[N+]=[N-])CC[C@@H](CO)O1 APFHPGMGOXICEK-RRAGMBSWSA-N 0.000 description 1
- 210000004366 CD4-positive T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- MIKUYHXYGGJMLM-GIMIYPNGSA-N Crotonoside Natural products C1=NC2=C(N)NC(=O)N=C2N1[C@H]1O[C@@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1O MIKUYHXYGGJMLM-GIMIYPNGSA-N 0.000 description 1
- UHDGCWIWMRVCDJ-PSQAKQOGSA-N Cytidine Natural products O=C1N=C(N)C=CN1[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-PSQAKQOGSA-N 0.000 description 1
- NYHBQMYGNKIUIF-UHFFFAOYSA-N D-guanosine Natural products C1=2NC(N)=NC(=O)C=2N=CN1C1OC(CO)C(O)C1O NYHBQMYGNKIUIF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 241000700588 Human alphaherpesvirus 1 Species 0.000 description 1
- 206010061598 Immunodeficiency Diseases 0.000 description 1
- 208000029462 Immunodeficiency disease Diseases 0.000 description 1
- 229930010555 Inosine Natural products 0.000 description 1
- UGQMRVRMYYASKQ-KQYNXXCUSA-N Inosine Chemical class O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C2=NC=NC(O)=C2N=C1 UGQMRVRMYYASKQ-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 1
- 102100034343 Integrase Human genes 0.000 description 1
- 208000008771 Lymphadenopathy Diseases 0.000 description 1
- 206010035664 Pneumonia Diseases 0.000 description 1
- 241000589516 Pseudomonas Species 0.000 description 1
- 208000005074 Retroviridae Infections Diseases 0.000 description 1
- 208000000389 T-cell leukemia Diseases 0.000 description 1
- 208000028530 T-cell lymphoblastic leukemia/lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 241000700618 Vaccinia virus Species 0.000 description 1
- 241000711975 Vesicular stomatitis virus Species 0.000 description 1
- WREGKURFCTUGRC-POYBYMJQSA-N Zalcitabine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)CC1 WREGKURFCTUGRC-POYBYMJQSA-N 0.000 description 1
- BHIIGRBMZRSDRI-UHFFFAOYSA-N [chloro(phenoxy)phosphoryl]oxybenzene Chemical compound C=1C=CC=CC=1OP(=O)(Cl)OC1=CC=CC=C1 BHIIGRBMZRSDRI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- 230000000172 allergic effect Effects 0.000 description 1
- 238000005576 amination reaction Methods 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 230000000884 anti-protozoa Effects 0.000 description 1
- 208000010668 atopic eczema Diseases 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229940098166 bactrim Drugs 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- DRTQHJPVMGBUCF-PSQAKQOGSA-N beta-L-uridine Natural products O[C@H]1[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-PSQAKQOGSA-N 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- SIOVKLKJSOKLIF-UHFFFAOYSA-N bis(trimethylsilyl)acetamide Chemical compound C[Si](C)(C)OC(C)=N[Si](C)(C)C SIOVKLKJSOKLIF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 1
- STNNHWPJRRODGI-UHFFFAOYSA-N carbonic acid;n,n-diethylethanamine Chemical compound [O-]C([O-])=O.CC[NH+](CC)CC.CC[NH+](CC)CC STNNHWPJRRODGI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 229940126214 compound 3 Drugs 0.000 description 1
- UHDGCWIWMRVCDJ-ZAKLUEHWSA-N cytidine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-ZAKLUEHWSA-N 0.000 description 1
- 229940104302 cytosine Drugs 0.000 description 1
- 230000009615 deamination Effects 0.000 description 1
- 238000006481 deamination reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- MXHRCPNRJAMMIM-UHFFFAOYSA-N desoxyuridine Natural products C1C(O)C(CO)OC1N1C(=O)NC(=O)C=C1 MXHRCPNRJAMMIM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002656 didanosine Drugs 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 239000012737 fresh medium Substances 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 229940029575 guanosine Drugs 0.000 description 1
- 210000002443 helper t lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000000652 homosexual effect Effects 0.000 description 1
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 230000007813 immunodeficiency Effects 0.000 description 1
- 239000012678 infectious agent Substances 0.000 description 1
- 229960003786 inosine Drugs 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000012153 long-term therapy Methods 0.000 description 1
- 208000018555 lymphatic system disease Diseases 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 description 1
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- OFRCCDYYOMSXAM-UHFFFAOYSA-N n-(6-oxo-3,7-dihydropurin-2-yl)hexadecanamide Chemical compound N1C(NC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC)=NC(=O)C2=C1N=CN2 OFRCCDYYOMSXAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MRWXACSTFXYYMV-FDDDBJFASA-N nebularine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C2=NC=NC=C2N=C1 MRWXACSTFXYYMV-FDDDBJFASA-N 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 230000000269 nucleophilic effect Effects 0.000 description 1
- 150000003833 nucleoside derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 125000003835 nucleoside group Chemical group 0.000 description 1
- 229960001624 pentamidine isethionate Drugs 0.000 description 1
- YBVNFKZSMZGRAD-UHFFFAOYSA-N pentamidine isethionate Chemical compound OCCS(O)(=O)=O.OCCS(O)(=O)=O.C1=CC(C(=N)N)=CC=C1OCCCCCOC1=CC=C(C(N)=N)C=C1 YBVNFKZSMZGRAD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 1
- 210000005105 peripheral blood lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 235000003270 potassium fluoride Nutrition 0.000 description 1
- 239000011698 potassium fluoride Substances 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 239000002212 purine nucleoside Substances 0.000 description 1
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 1
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 1
- QEVHRUUCFGRFIF-MDEJGZGSSA-N reserpine Chemical compound O([C@H]1[C@@H]([C@H]([C@H]2C[C@@H]3C4=C(C5=CC=C(OC)C=C5N4)CCN3C[C@H]2C1)C(=O)OC)OC)C(=O)C1=CC(OC)=C(OC)C(OC)=C1 QEVHRUUCFGRFIF-MDEJGZGSSA-N 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 231100000816 toxic dose Toxicity 0.000 description 1
- 230000006098 transglycosylation Effects 0.000 description 1
- 150000003852 triazoles Chemical class 0.000 description 1
- 230000010415 tropism Effects 0.000 description 1
- DRTQHJPVMGBUCF-UHFFFAOYSA-N uracil arabinoside Natural products OC1C(O)C(CO)OC1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940045145 uridine Drugs 0.000 description 1
- 230000029812 viral genome replication Effects 0.000 description 1
- 229960000523 zalcitabine Drugs 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
- C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
- C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
- C07H19/16—Purine radicals
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
Description
Oppfinnelsen vedrører en fremgangsmåte for behandling av mennesker med sykdommer frembrakt av virus som er kjennetegnet ved RNA-avhengig DNA-polymerase. Av spesiell interesse er fremgangsmåter for behandling av retrovirusinfek-sjoner, spesielt de som er forårsaket av humant immunsviktvirus (HIV) som er årsaken til ervervet immunsviktsyndrom
(AIDS).
Pasienter med.ervervet immunsviktsyndrom (AIDS) ble først observert i 1981. Mens tilfeller først ble isolert og syntes å være begrenset til den mannlige homoseksuelle popu-lasjon, viste denne observasjon seg hurtig å være feil ettersom AIDS ble funnet å være utbredt i alle populasjonsgrupper.
AIDS-infeksjon er blittkarakterisertsom en epidemi
i noen deler av verden, og det forventes at andre deler av verden snart vil karakterisere infeksjonen som en epidemi.
I U.S. patentskrift nr. 4.520.113, innlevert
23. april 1984, fastslo Gallo et al. at bevismaterialet tyder på at "sykdommen sprer seg ved overføring av et smitte-stoff. De primære mål for hjemsøkelse i menneskekroppen er bestemte underpopulasjoner av T-celler. Den alvorlige immunsvikt hos disse pasientene skriver seg fra en uvanlig lav andel av hjelper-T-celler (T4) i lymfocyttpopulasjonen, noe som reduserer tilgjengeligheten av mange T4-hjelper-funksjoner, hvoriblant er produksjonen av antistoffer ved hjelp av B-celler".
Gallo et al., Science, 220:865-867 (20. mai 1983), foreslo at årsaken til AIDS er et humant T-celle-leukemi-virus (HTLV). Disse virusene er kjennetegnet ved utpreget tropisme for T4-celler, revers transkriptase med høy mole-kylvekt (100 kd), og med preferanse for Mg for optimal enzymaktivitet. Schupbach et al., Science, 224:503-505
(4. mai 1984). Arbeidet til Barre-Sinussi et al., Science, 220:868-871 (20. mai 1983), sluttet seg til Gallo-hypotesen og adskilte seg bare ved at viruset der ble kalt lymfadeno-pati AIDS-assosiert virus (LAV). For tiden refererer de fleste forskere innen området til viruset som humant immunsviktvirus (HIV), og denne betegnelse vil heretter bli brukt.
Det ble praktisk talt øyeblikkelig iverksatt forskning med hensyn på metoder og stoffer for behandling av HIV-infeksjoner, som alltid er dødelige. Det må påpekes at undersøkelsene ble foretatt på flere nivåer. Det første av disse er på "prevensjons"-nivået, dvs. forsøk på å forhindre infeksjon fra å oppstå. Denne fremgangsmåten omfatter modi-fikasjon av adferdsmønsteret og omtales ikke nærmere her. Den andre fremgangsmåten har vært undersøkelser langs linjer for fremkalling av en immunrespons mot viruset ved hjelp av en vaksine. Forskningen har gått sakte fremover på dette område av flere grunner. HIV-infeksjoner oppstår bare hos mennesker og er alltid dødelige. Vaksineforskning omfatter generelt innføring av en svekket eller død stamme av viruset til individet for å fremkalle en immunrespons. Dyremodeller virker ikke, og risikoene som er forbundet med forsøk på mennesker, har vært for store til å ville føre arbeidet på dette området særlig langt.
Så har en tredje fremgangsmåte vært å behandle "oppfølgings"-infeksjoner, slik som Pseudomonas carinii pneumonia (PCP), som utvikler seg etter HIV-ødeleggelser i immunsystemet. Sulfamethoxazol, solgt som "Bactrim", har vært ett effektivt legemiddel. Det er imidlertid svært toksisk, og mange AIDS-pasienter er allergiske overfor det. Disse faktorene resulterer i begrenset nytte av legemidlet. Når sulfamethoxazol ikke kan brukes, anvendes pentamidin-isethionat som er kjent som et anti-protozo-middel. Dette legemidlet har vist seg å være noe mer effektivt når det administreres til AIDS-pasienter i intravenøs eller aerosol-form, men også dette er svært toksisk og har forskjellige kjente og antatte bivirkninger. Langvarig terapi er ikke mulig med noen av disse stoffene.
Den fjerde og siste fremgangsmåte for behandling
av HIV skjer via legemidler som virker inn på virusets evne til å replikere. Dette område har fått mye oppmerksomhet fordi det til sist er den eneste fremgangsmåte som vil øde-legge eller begrense infeksjonen ved dens utspring.
Det legemiddel som for tiden velges på dette området, er azidothymidin, også referert til som AZT. AZT har i svært begrensede forsøk blitt påvist å virke inn på virus-replikasjon, noe som resulterer i en viss remisjon av infeksjonen.
Det har imidlertid vært problemer også med AZT. Det er toksisk og antas å undertrykke benmargfunksjon. Se f.eks. Kolata, Science, 2 2 5:14 6 3 (20. mars 1987). Den kur som anvendes for behandling med AZT, krever svært nøyaktige betingelser som må følges av pasienten for at legemidlet skal være effektivt. På denne bakgrunn, samt toksisiteten til AZT, har forskning ikke stoppet å følge de positive resultater som ble oppnådd med legemidlet.
Det er derfor et formål ved oppfinnelsen å tilveie-bringe en fremgangsmåte for behandling av mennesker som er smittet med viruskarakterisert vedRNA-avhengige polymeraser, spesielt de mennesker som er smittet med humant immunsviktvirus (HIV).
Det er et ytterligere formål ved oppfinnelsen å til-veiebringe et preparat som kan benyttes ved behandling av individer som er smittet med humant immunsviktvirus.
Hvordan disse samt andre formål ved oppfinnelsen oppnås, vil fremgå klarere av beskrivelsen som følger neden-under .
En fremgangsmåte for behandling av mennesker smittet med viruskarakterisert vedRNA-avhengige polymeraser, omfatter å administrere til et smittet individ en effektiv mengde av minst én forbindelse med formelen
hvor X er en azidogruppe, et methoxyradikal eller et fluoratom. B er thymin, uracil, guanin, cytosin, hypoxanthin, eller purin dersom X er et methoxyradikal eller et fluoratom,
og B er et guanin-, purin- eller hypoxanthinradikal dersom X er azido, samt farmasøytisk akseptable salter derav. Det fremstilles også preparater som omfatter minst én forbindelse som beskrevet ovenfor, sammen med vanlige farmasøytiske bærere og fortynningsmidler. Figur 1 viser grafisk patogenisiteten til HIV på MT^-celler. Figur 2 viser - resultater fra in vitro levedyktighets-undersøkelser når 3'-azido-2<1>,3<1->dideoxyguanosin ble tilsatt til HIV-infiserte celler. Figur 3 viser resultatene fra in vitro levedyktig-hetsundersøkelser når 3'-fluor-3'-deoxythymidin ble tilsatt til HIV-infiserte celler. Figur 4 viser resultater fra in vitro levedyktighets-undersøkelser når 3'-fluor-2<1>,3<1->dideoxyguanosin ble tilsatt til HIV-infiserte celler. Figur 5 viser resultater fra in vitro levedyktighets-undersøkelser når 3'-azido-2',3'-dideoxyinosin ble tilsatt til HIV-infiserte celler. De ovenfor beskrevne aktive stoffer vil ses å være 9-(beta-D-deoxyribofuranosyl)nucleosider av thymidin-, uridin-, guanosin-, cytidin- og purinnucleosid- eller -inosinserien. Av spesiell interesse er de bestemte forbindelser 3<1->azido-2',3'-dideoxyguanosin, 3'-azido-2',2'-dideoxy-inosin, 3'-fluor-2',3'-dideoxyguanosin og 3'-fluor-3'-deoxy-thymidin. Den første forbindelse fremstilles i henhold til fremgangsmåten beskrevet i Imazawa et al., J. Org. Chem., 4^:3044-3048 (1978).
Det er overraskende at forbindelsene som anvendes i henhold til oppfinnelsen, er aktive mot HIV ettersom det i Clerco et al., Biochem. Pharm., _2_9 : 1849-1851 (1980) har vært ment at 3<1->azido-2<1>,3'-dideoxyguanosin ikke utviser noen målbar antiviral aktivitet mot vaccinia-virus, herpes simplex-virus 1, eller vesikulært stomatitis-virus.
Fremstillingen av 3<1->azido-2',3<1->dideoxyguanosin finner i prinsippet sted ved transglycosylering av det til svarende 5'-0-acetyl- eller 5<1->O-trimethylsilyl-3'-azido-3'-deoxythymidin med silylert N 2-palmitoylguanin i nærvær av trimethylsily1-trifluormethansulfonat som katalysator.
Den tilsvarende hypoxanthinforbindelse fås på analog måte ved anvendelse av det tilsvarende palmitoyl-hypoxanthin. Alternativt kan disse guanin- og hypoxanthinforbindelser fås ved omsetning av 1-0-methy1-5-0-(4-methylbenzoyl)-3-azido-2,3-dideoxy-D-ribofuranose, erholdt ifølge fremgangsmåten til N.D. Dyatkina og A.V. Azhayev beskrevet i Synthesis, 1984, s. 961, med silylert guanin eller hypoxanthin med hjelp av en katalysator, f.eks. trimethylsilyl-trifluormethansulfonat, ifølge fremgangsmåten til H. Vorbruggen,
K. Krokiewics og B. Benna, beskrevet i Chem. Ber. 114,
s. 1234/1981. De tilsvarende guanin- og hypoxanthinforbindelser med et fluoratom eller en methoxyrest i 3-stillingen i 2-deoxy-ribofuranosy1-strukturen kan fås fra 3'-fluor-3'-deoxy- eller 3<1->0-methy1-3-deoxythymidin ved hjelp av den samme transglycosyleringsreaksjon. 2,3<1->anhydro-1-(2-deoxy-(3-D-xylofuranosyl) -thymin (kort betegnet 0<2>,0<31->cyclothymidin), fremstilt ifølge G. Kowollik, K. Gartner,
P. Langen, Tetrahedron Letters, 1969, s. 3863, tjener derved igjen som utgangsmateriale. Ved omsetning med natrium-methylat fremstilles 3<1->0-methyl-3<1->deoxythymidin.
3'-fluor-3<1->deoxythymidin og dets fremstilling er kjent fra G. Etzold, R. Hintsche, g. Kowollik og P. Langen, Tetrahedron, 21_ (1971), s. 2463-2472 . Fremstillingen oppnås prinsipielt ved omsetning av cyclothymidin i diethylenglycol med kaliumhydrogendifluorid. Reaksjonsproduktene separeres på en kiselgelkolonne med en blanding av CHCl^og methanol. Et andre rensetrinn ble utført ved kromatografi på en "LiChroprep RP-18"-kolonne med en blanding av 50 mM triethyl-ammoniumcarbonat/5% acetonitril.
3'-fluor-3<1->deoxythymidin kan også fremstilles ved
å omsette cyclothymidinet fremstilt ved fremgangsmåten til G. Kowollik, G. Etzold, M. von Janta, Lipinski, K. Gartner, B. Langen i J. Prakt. Chem. (1973), 315, 2. 895, med flussyre
og aluminiumtrifluorid. Alternativt kan cyclothymidinet omsettes med kaliumfluorid i nærvær av kroneetheren 18-krone-6 i dimethylformamid eller dioxan. I tillegg kan hypoxanthinpreparatene fås fra de tilsvarende adeninprepar-ater som delvis er kjent fra litteraturen som er referert ovenfor, ved deaminering med salpetersyre eller nitrosylklorid.
Syntesen av 3.'-f luor-2 ' , 3 '-dideoxyuridin utføres analogt med fremstillingen av 3'-fluor-3<1->deoxythymidin (G. Etzold, R. Hintsche, G. Kowollik og P. Langen, Tetrahedron, 21_ (1971), s. 2463-2472). Således syntetiseres 2 , 3-anhdro-l- (2 1 -deoxy-f3-D-xylof uranosyl) -uracil (kort 2 3' 23' betegnet 0 ,0 -cyclodeoxyuridm) analogt med 0 ,0 -cyclo-ethymidin (G. Kowollik, K. Gartner og P. Lange, Tetrahedron Letters (1969), s. 3863) ved å gå ut fra 2'-deoxyuridin. Cyclodeoxyuridin omsettes så med kaliumhydrogendifluorid i ethylenglycol, hvorved man får 3'-fluor-2<1>,3<1->dideoxyuridin. Denne forbindelsen tjente så som utgangsmateriale for syntesen av 3<1->fluor-2<1>,3<1->dideoxycytidin ved en aminerings-reaksjon ifølge B.F.L. Li, C.B. Reese og P.F. Swann (Biochem. , 2_6 (1987), s. 1986-1993) eller W.L. Sung (J. Org. Chem., 4J7 (1982 ), s. 3623-3628) ved omsetning med difenyl-fosforkloridat eller triisopropylbenzensulfonylklorid eller et annet egnet aktiveringsreagens i nærvær av nitrotriazol, triazol eller en annen passende nucleofil forbindelse, etterfulgt av omsetning med ammoniakk.
Effektiviteten av de aktive forbindelser som anvendes ifølge foreliggende oppfinnelse, ble bekreftet i et biolog-isk system hvor HIV isolert fra pasienter med AIDS og ARC, ble dyrket med mottakelige humane T-celler. Den in vitro patogenitet til det således dyrkede HIV ble bestemt ved bruken av MT^-celler, en T^-cellelinje som HIV er cytopatisk for. MT^-cellelinjen er beskrevet i Science, 229, (1985),
s. 563-566. Den cytopatologiske virkning ble derved over-våket ved måling av inkorporeringen at thymidincellene. Dersom de aktive materialer ifølge foreliggende oppfinnelse, spesielt 3'-azido-2',3'-dideoxyguanosin, ble tilsatt til MT^-
cellene inokulert med HIV, så var det mulig, selv med nano-molare konsentrasjoner av de aktive materialer, å beskytte mot de cytopatologiske virkninger tilveiebrakt av viruset.
Toksisitetsbestemmelsen fant også sted i det samme system. I dette tilfelle ble MT^-celler eksponert mot den nucleoside analog som finnes i det farmasøytiske preparat ifølge foreliggende oppfinnelse, som aktive materialer i fravær av HIV, og på nytt ble toksisiteten bestemt på grunnlag av inkorporeringen av thymidin. Fra den således bestemte konsentrasjon for oppnåelse av en antiviral virkning sammen-lignet med mengden av aktivt materiale som er nødvendig for en toksisk virkning, ble det bestemt en in vitro terapeutisk indeks.
For den mest foretrukne forbindelse, 3'-azido-2<1>,3<1->dideoxyguanosin, var denne terapeutiske indeks i tilfellet med den anvendte humane cellelinje, lik med eller større enn 10 3 , for 3'-fluor-3'-deoxythymidin større enn 10 3, for 3'-fluor-2',3'-dideoxyguanosin omtrent 400. Forsøkene ble utført på en slik måte at prøvene av supernatanten fra cellelinjen som produserer viruset, ble overført i trinnvis fortynning til mikrotiterplater som inneholdt MT^-cellelinjen. Samtidig ble radioaktivt merket thymidin tilsatt til mikrotiterplatene, og inkorporeringen av dette stoff, som forløper parallelt med cellenes livsaktivitet, ble målt. Under innflytelsen av toksiske konsentrasjoner av det aktive materiale ifølge foreliggende oppfinnelse, eller cytopatiske mengder av virusholdig væske, avtok inkorporeringen av radioaktivt merket thymidin tilsvarende.
I fig. 1 er innvirkningen av forskjellige fortynn-inger på den HIV-virusholdige supernatant fra den virus-produserende cellelinje (avvikende viruskonsentrasjon) på thymidininkorporeringen i MT^-celler, illustrert grafisk. Inkorporeringskurven viser at opptil en fortynning på 1:30 fører patogeniteten av HIV-virus til et svært lavt thymidin-opptak, øker tilsvarende og når den høyeste verdi ved en fortynning av den virusholdige supernatant på 1:10.000. Figur 1 viser således i tilfellet med en fortynning av den dyrkede supernatant på 1:40, at en nesten maksimal patogenitet av HIV på MT^-cellene fortsatt er til stede. Undersøkelsene av effektiviteten av de aktive materialer i de farmasøytiske preparater ifølge foreliggende oppfinnelse fant sted i tilfellet med denne virusfortynning ved at en forblandet oppløsning av virusfortynning og av det aktive materiale som skulle undersøkes, ble tilsatt til cellelinje-prøven og thymidininkorporeringen på nytt bestemt.
Resultatene av disse forsøkene med den foretrukne forbindelse 3<1->azido-2<1>,3<1->dideoxyguanosin er vist i fig. 2. Fig. 2 viser grafisk forholdet mellom mengden av aktivt materiale tilsatt i ug/ml og graden av thymidininkorporering i cpm (tellinger pr. minutt). Kurven merket med -HIV, ble oppnådd i fravær av virus, og +HIV-kurven i nærvær av virus. Den viser at en konsentrasjon på 0,3 pg/ml av aktivt materiale beskytter cellene med halv maksimal virkning mot den patogene virkning av en 1:40 fortynning av den opprinnelige HIV-væske. Fig. 3 viser forbindelsen mellom mengden av 3'-fluor-3<1->deoxythymidin tilsatt i ug/ml og thymidininkorporeringen i cpm (tellinger pr. minutt) analogt med det som er forklart for fig. 2. Den viser at den aktive forbindelse ved en konsentrasjon på mindre enn 0,002 ug/ml beskytter cellene allerede med halv maksimal virkning mot den patogene effekt av en 1:40 fortynning av den opprinnelige HIV-væske.
Analogt med dette viser fig. 4 den in vitro anti-virale aktivitet av 3<1->fluor-2<1>,3<1->dideoxyguanosin. Rea-liseringen og fortolkningen ble gjort i henhold til for-klaringen for fig. 2. Dette aktive materiale ved en konsentrasjon på mindre enn 1,5 ug/ml beskytter cellene allerede med halv maksimal virkning mot den patogene effekt av 1:40-fortynningen av den opprinnelige HIV-væske.
I fig. 5 er det presentert forsøk hvor 3'-azido-2',3'-dideoxyinosin var det administrerte legemiddel. Toksisitet av inosinforbindelsen var høyere, men igjen økte graden av thymidininkorporering i den HIV-infiserte cellelinje og nådde nesten opp til inkorporeringen i ikke-infiserte T^-cellelinjer.
Forsøk II
I det følgende forsøk ble undertrykkelsen av HIV-produksjon i lymfocytter fra perifert blod stimulert med fytohemagglutinin (PHA), undersøkt.
Prøver av lymfocytter fra perifert blod ble stimulert med PHA, og dette ble etterfulgt av tilsetning av HIV-virus direkte til dyrkningskolbene hvor cellene ble dyrket. I
de prøvene hvor legemiddel ble tilsatt, skjedde dette umiddelbart etter innføringen av viruset i dyrkningskolben.
Mengden av HIV som er til stede etter administrering av legemidlet, ble bestemt ved hjelp av radioimmunologisk prøve med hensyn på den bestanddel av HIV som er kjent som "p24". Den radioimmunologiske prøve som ble brukt, har en sensitivitet på 20-0,625 ug/ml testet.
Det var vesentlig under utførelsen av denne testen
å bestemme også levedyktigheten til PBLS. Dette ble gjort via inkorporering av radioaktivt thymidin, slik som angitt i eksempel I ovenfor.
Forskjellige konsentrasjoner av et legemiddel ble brukt: for azidothymidin (AZT) var disse 1, 0,1 og 0,01 uM, mens dosene av 3<1->azido-2<1>,3'-dideoxyguanosin (ADG) var 3, 0,3, 0,003 og 0,0003 ug. Positive kontroller ("+") fikk HIV, men ikke noe legemiddel, mens negative kontroller ("-") fikk legemiddel, men ikke noe virus. Prøver ble utført ved 4, 7, 11 og 14 dagers dyrkning. På hvert punkt ble dyrk-ningsmediet erstattet med friskt medium.
Disse resultatene er gjengitt i tabell 1:
Det er interessant å legge merke til at ADG ved en konsentrasjon på 3 ug, var litt mere effektiv enn AZT. Både AZT og ADG begynte å tape virkningsfullhet ved de laveste konsentrasjonene omtrent på samme tid. Legemidlene utviser ikke toksisitet mot PBL heller, ettersom "tellingene" som man fikk fra thymidin, indikerer at cellelevedyktigheten for-ble god.
Tabell 2 viser disse data uttrykt som en RIA justert for 10 celler/ml.
Disse resultatene viser at ADG er effektiv i doser
på fra 0,3 til 3 pg/ml. Man ville forvente lignende resultater for 3<1->azido-2',3'-dideoxyinosin.
Eksempel III
Forsøket beskrevet i eksempel II, ble gjentatt for 31 - fluor-21,31-dideoxyguanosin. 31 - fluor-2',31-dideoxy-guanosin ble syntetisert analogt med syntesen av 3'-azido-2<1>,3<1->dideoxyguanosin (Imazawa og Eckstein, J. Org. Chem. 4_3:3044) (1978) ved transglycosidering av 3 1 -fluor-3 1 -deoxy-thymidin (syntetisert ifølge G. Etzold et al., Tetrahedron, 2_7:2463) (1971) med palmitoylguanin i acetonitril under til-bakeløpskoking i 60 minutter med bis(trimethylsilyl)-acet-amid og trimethylsilyl-trifluormethansulfonat. Kromatografi på kiselgel ga et produkt som på TLC (CHCl3/MeOH, 9:1) har en litt større R (0,43) enn thymin (0,38). Det ble omsatt ved 50 C over natten i MeOH mettet med NH^. Etter inndamping til tørrhet ble resten oppløst i E^O/MeOH og kromato-grafert på en "LiChroprep RP-18"-kolonne med 50 mM triethyl-ammoniumbicarbonat (pH 7,5) inneholdende 6% acetonitril.
Etter inndamping av de produktholdige fraksjoner og ny inndamping med MeOH ble det oppnådd en krystallinsk rest av 9-(3-f luor-2 , 3-dideoxy-f3-D-ribofuranosyl) -guanin;
smp. >230°, -""H-NMR (DMSO) , 8 , 6,15 ppm (dd, 1H, J0 „ „
53 Hz, H=3'), 4,14 (dm, 1H, J. „ _,_ = 32 Hz, H-4').
4 , ri , j r
HPLC på ODS-"Hypersil" med en lineær gradient av 100 mM tri-ethylammoniumbicarbonat (pH 7,5) og acetonitril (0-15% i løpet av 15 minutter), retensjonstider: 8,8 minutter for 3-anomeren, 6,8 minutter for a-anomeren. Utbytte omtrent 15%.
De farmasøytiske preparater ifølge foreliggende oppfinnelse kan inneholde det aktive materiale i fri form eller i form av fysiologisk akseptable salter, nemlig i form av
en forbindelse eller en blanding av forbindelser av den ovenfor angitte generelle formel. I tillegg kan det farma-søytiske preparat inneholde farmasøytiske additiver og fortynningsmidler som er vanlige for den påtenkte administrasjons-f orm.
Administrering kan skje oralt, parenteralt, intra-thekalt, eller intravenøst, ved oral administrering er foretrukket. Foretrukne doseringer ligger i området fra ca. 1 til ca. 20 g pr. dag pr. 70 kg kroppsvekt ved administrering til et menneske. Optimal dosering og administrasjonsmåte vil variere fra individ til individ.
Claims (1)
- Analogifremgangsmåte for fremstilling av tera peutisk virksomme forbindelser med den generelle formelhvor X er en azidogruppe eller et fluoratom, og B er hypoxanthin dersom X er azido, og B er guanin dersom X er F, samt farmasøytisk akseptable salter derav, karakterisert ved at a) det tilsvarende 5'-0-acetyl- eller 5 <1-> O-trimethylsilyl-3 <1-> X-3 <1-> deoxythymidin transglycosileres med silylert N-<p> al mito <y> l-h y <p> oxanthm eller -guanin i nærvær av trimethylsilyl-trifluormethansulfonat som katalysator, eller b) l-O-methyl-5-0-(4-methylbenzoyl)-3-X-2,3-dideoxy-D-ribofuranose omsettes med silylert hypoxanthin eller guanin i nærvær av en slik katalysator som trimethylsilyl-trifluormethansulfonat, eller c) dersom B er hypoxanthin, deamineres den tilsvarende adeninforbindelse med salpetersyre eller nitrosylklorid.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
DE19873708849 DE3708849A1 (de) | 1987-03-18 | 1987-03-18 | Arzneimittel zur behandlung von viruserkrankungen |
US07/041,147 US4880782A (en) | 1986-11-21 | 1987-04-22 | Method of treating viral infections in humans and compositions therefor |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
NO881190D0 NO881190D0 (no) | 1988-03-17 |
NO881190L true NO881190L (no) | 1988-09-19 |
Family
ID=25853652
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
NO881190A NO881190L (no) | 1987-03-18 | 1988-03-17 | Analogifremgangsmaate for fremstilling av terapeutisk virksomme 9-(beta-d-deoxyribofuranosyl)-mucleosider. |
Country Status (7)
Country | Link |
---|---|
EP (1) | EP0286825A3 (no) |
AU (1) | AU609099B2 (no) |
DK (1) | DK147088A (no) |
HU (1) | HU211508A9 (no) |
NO (1) | NO881190L (no) |
NZ (1) | NZ223865A (no) |
PT (1) | PT87004B (no) |
Families Citing this family (10)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5077279A (en) * | 1986-05-01 | 1991-12-31 | University Of Georgia Research Foundation, Inc. | 3'-azido-2',3'-dideoxy-5-methylcytidine anti-viral composition |
US5084445A (en) * | 1986-05-01 | 1992-01-28 | University Of Georgia Research Foundation, Inc. | 3'-azido-2',3'-dideoxy-5-methylcytidine |
JPH01265099A (ja) * | 1987-10-08 | 1989-10-23 | Stichting Rega Vzw | 抗hiv活性をもつ3’,−フルオロプリン−2’,3’−ジデオキシリボシド類 |
US5157114A (en) * | 1988-08-19 | 1992-10-20 | Burroughs Wellcome Co. | 2',3'-dideoxy-3'-fluoro-5-ethyngluridine |
SE464168B (sv) * | 1989-07-19 | 1991-03-18 | Bo Fredrik Oeberg | Antiviral komposition bestaaende av en 3'-fluoro-2',3'-dideoxynukleosidfoerening och en 2',3'-dideoxynukleosidfoerening (exempelvis azt) |
KR910007655A (ko) * | 1989-10-03 | 1991-05-30 | 엠. 피. 잭슨 | 치료용 뉴클레오시드 |
WO1991006554A1 (en) * | 1989-11-06 | 1991-05-16 | Nycomed As | Nucleoside derivatives |
SE9003151D0 (sv) * | 1990-10-02 | 1990-10-02 | Medivir Ab | Nucleoside derivatives |
GB9105899D0 (en) * | 1991-03-20 | 1991-05-08 | Wellcome Found | Therapeutic nucleosides |
US5869493A (en) | 1996-02-16 | 1999-02-09 | Medivir Ab | Acyclic nucleoside derivatives |
Family Cites Families (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DD209197A1 (de) * | 1981-07-21 | 1984-04-25 | Akad Wissenschaften Ddr | Verfahren zur herstellung von 3'-fluor-2',3'-didesoxyguanosin |
SU1053474A1 (ru) * | 1982-02-08 | 1985-08-07 | Институт биоорганической химии АН БССР | 3-Фтор-2,3-дидезоксигуанозин,про вл ющий цитостатическую активность |
US4724232A (en) * | 1985-03-16 | 1988-02-09 | Burroughs Wellcome Co. | Treatment of human viral infections |
CA1285935C (en) * | 1985-03-16 | 1991-07-09 | Janet Lister Rideout | Therapeutic nucleosides |
EP0196185B1 (en) * | 1985-03-16 | 1989-07-12 | The Wellcome Foundation Limited | Antiviral nucleosides |
GB2181128A (en) * | 1985-09-17 | 1987-04-15 | Wellcome Found | 3'-azidonucleosides |
DE3739432A1 (de) * | 1987-02-24 | 1989-06-01 | Multivac Haggenmueller Kg | Verpackungsmaschine |
-
1988
- 1988-03-07 EP EP88103543A patent/EP0286825A3/en not_active Ceased
- 1988-03-11 NZ NZ223865A patent/NZ223865A/xx unknown
- 1988-03-14 AU AU13081/88A patent/AU609099B2/en not_active Ceased
- 1988-03-17 NO NO881190A patent/NO881190L/no unknown
- 1988-03-17 DK DK147088A patent/DK147088A/da not_active Application Discontinuation
- 1988-03-17 PT PT87004A patent/PT87004B/pt not_active IP Right Cessation
-
1995
- 1995-06-22 HU HU95P/P00374P patent/HU211508A9/hu unknown
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
DK147088A (da) | 1988-09-19 |
AU1308188A (en) | 1988-09-22 |
EP0286825A2 (en) | 1988-10-19 |
PT87004A (pt) | 1988-04-01 |
PT87004B (pt) | 1992-06-30 |
EP0286825A3 (en) | 1989-04-12 |
AU609099B2 (en) | 1991-04-26 |
DK147088D0 (da) | 1988-03-17 |
NZ223865A (en) | 1990-06-26 |
HU211508A9 (en) | 1995-11-28 |
NO881190D0 (no) | 1988-03-17 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US4880782A (en) | Method of treating viral infections in humans and compositions therefor | |
EP0216510B1 (en) | Inhibition of in vitro infectivity and cytopathic effect of HTLV-III/LAV by 2'3'-dideoxyinosine, 2'3'-dideoxyguanosine, or 2'3'-dideoxyadenosine | |
Baba et al. | Potent and selective inhibition of human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1) by 5-ethyl-6-phenylthiouracil derivatives through their interaction with the HIV-1 reverse transcriptase. | |
EP0355135B1 (en) | Adenosine deaminase-stable anti-retroviral nucleosides | |
Hayashi et al. | Cyclobut-A and cyclobut-G, carbocyclic oxetanocin analogs that inhibit the replication of human immunodeficiency virus in T cells and monocytes and macrophages in vitro | |
Hostetler et al. | Greatly enhanced inhibition of human immunodeficiency virus type 1 replication in CEM and HT4-6C cells by 3'-deoxythymidine diphosphate dimyristoylglycerol, a lipid prodrug of 3'-deoxythymidine | |
CA1286991C (en) | Medicament for the treatment of virus infections | |
Pauwels et al. | Investigations on the anti-HIV activity of 2′, 3′-dideoxyadenosine analogues with modifications in either the pentose or purine moiety: Potent and selective anti-HIV activity of 2, 6-diaminopurine 2′, 3′-dideoxyriboside | |
NO881190L (no) | Analogifremgangsmaate for fremstilling av terapeutisk virksomme 9-(beta-d-deoxyribofuranosyl)-mucleosider. | |
US5616566A (en) | Method of inhibiting HIV replication with 2',3'-dideoxyadenosine | |
EP0355825A2 (en) | Viral treatment system | |
EP0216511B1 (en) | Inhibition of in vitro infectivity and cytopathic effect of HTLV-III/LAV by 2'3'-dideoxycytidine | |
Ohrui et al. | 4'-C-Substituted-2'-Deoxynucleosides A Family of Antiretroviral Agents Which are Potent Against Drug-Resistant HIV Variants. | |
Jeffries | The antiviral activity of dideoxycytidine | |
WO1988003804A2 (en) | Method of treating viral infections in humans and compositions therefor | |
Jeffries | Targets for antiviral therapy of human immunodeficiency virus infection | |
Shirasaka et al. | Lipophilic 6-halo-2′, 3′-dideoxypurine nucleosides: potential antiretroviral agents targeting HIV-associated neurologic disorders | |
EP0493378A1 (en) | Use of 2',3'-dideoxyguanosine for the treatment of AIDS | |
EP0464137A1 (en) | Inhibition of hiv using synergistic combinations of nucleoside derivatives | |
NO904150L (no) | Antivirale midler og fremgangsmaate for aa oeke den antivirale aktivitet av azt. | |
IE19940570A1 (en) | Use of 2',3'-dideoxyguanosine for the treatment of AIDS | |
IE83887B1 (en) | Use of 2',3'-dideoxyguanosine for the treatment of AIDS |