NO881135L

NO881135L - Fremgangsmaate for fremstilling av 1-(3-azido-2,3-dideoksy-betad-erytro-pentofuranosyl)-5-metyl-2(1h)-pyrimidinon.

Info

Publication number: NO881135L
Application number: NO881135A
Authority: NO
Inventors: Janet Litster Rideout; George Andrew Freeman; Sammy Ray Shaver
Original assignee: Wellcome Found
Priority date: 1987-03-16
Filing date: 1988-03-15
Publication date: 1988-09-19
Also published as: DE3872028T2; AU601556B2; NZ223880A; NO881135D0; EP0287215A2; AU1318588A; FI881216A0; PH24812A; CA1321387C; GR3005506T3; DE3872028D1; PT86982B; FI881216A; DK140588D0; AP8800085A0; MC1914A1; IL85738A0; EP0287215B1; ES2039615T3; HUT47591A

Description

Foreliggende oppfinnelse vedrører nukleosid-derivater som er nyttige i medisinsk terapi spesielt for behandling eller profylakse av visse virale infeksjoner, mer spesielt humane retrovirale infeksjoner slik som ervervet immunsviktsyndrom

(AIDS).

AIDS er en immunosuppresiv eller immunodestruktiv sykdom som predisponerer personer for dødelige oppurtunistiske infeksjoner. Karakteristisk er AIDS forbundet med en progressiv utarming av T-celler, spesielt hjelper-induser subset som bærer OKT^-overflatemarkøren.

Human immunosviktvirus (HIV) har blitt reproduserbart isolert fra pasienter med AIDS eller med tegn og symptomer som ofte går forut for AIDS. HIV er cytopatisk og viser seg selektivt å infisere og ødelegge OKT<4->bærende T-celler, og det er nå generelt erkjent at HIV er det etiologiske middel til AIDS.

Siden oppdagelsen av HIV som det etiologiske middel til AIDS har det vært fremlagt en rekke forslag for anti-HIV kjemo-terapeutiske midler som kan være effektive i behandlingen av AIDS. Således beskriver for eksempel Europeisk patent 1961985 3'-azido-3'-deoksytymidin (som har det vedtatte navnet zidovudin) og dets farmasøytisk akseptable derivater og deres anvendelse i behandlingen av humane retrovirusinfeksjoner inkludert AIDS og tilknyttede kliniske tilstander. Zidovudin har blitt funnet å ha eksepsjonell terapeutisk nyttevirkning for behandlingen av AIDS og tilknyttede tilstander.

I behandlingen av AIDS og beslektede tilstander er det generelt nødvendig å administrere det anti-HIV kjemoterapeu-tiske middelet på en regelmessig basis for å sikre opprett-holdelse av tilstrekkelig høye antivirale nivåer av legemiddelet i pasienten, for eksempel kan det være nødvendig å administrere zidovudin opp til 6 ganger pr. dag.

Man har nå oppdaget at et "bestemt nukleosidderivat, nemlig 1-(3-azido-2,3-dideoksy-p-D-erytro-pentofuranosyl ) -5-metyl - 2(lH)-pyrimidinon, er i stand til omdannelse in vivo til zidovudin ved administrasjon til et menneske eller annet animalsk Individ. Slik omdannelse antaes å oli "bevirket av innvirkningen av slike enzymer som xantinoksydase/dehydroge-nase eller aldehydoksydase som er tilstede i legemet til det individ til hvilket nevnte derivat administreres.

Det ovennevnte derivat kan således anvendes for å forbedre den terapeutiske effektiviteten til zidovudin ved tilveiebringelse av hensiktsmessige blodnivåer av legemiddelet etter administrasjon av nevnte derivat.

Ifølge foreliggende oppfinnelse tilveiebringes forbindelsen med formelen (I):

dvs. l-(3-azido-2,3-dideoksy-P-D-erytro-pentofuranosyl)-5-metyl-2(lH)-pyrimidinon, og dets farmasøytisk akseptable derivater. Forbindelsen med formel (I) og dets ovennevnte derivater er i det følgende referert til som forbindelsene i foreliggende oppfinnelse.

Med "et farmasøytisk akseptabelt derivat" menes et hvilket som helst farmasøytisk akseptabelt salt, ester eller salt av slik ester, eller en hvilket som helst annen forbindelse som ved administrasjon til mottageren er i stand til å gi (direkte eller indirekte) stamforbindelsen med formel (I). Foretrukne estere av forbindelsen med formel (I) Innbefatter karboksylsyreestere hvori ikke-karbonyldelen i estergruppen er valgt fra rett eller forgrenet alkyl, alkoksyalkyl (f.eks. fenyl eventuelt substituert med halogen, C^_4alkyl eller C^_4alkoksy); sulfonatestere slik som alkyl- eller aralkyl-sulfonyl (f.eks. metansulfonyl); og mono-, di- eller tri-fosfatestere. Enhver henvisning til noen av de ovenfor nevnte esterforbindelser innbefatter også en henvisning til et farmasøytisk akseptabelt salt derav.

Med hensyn til de ovenfor beskrevne estere inneholder, med mindre annet er angitt, den tilstedeværende alkyldel fordelaktig 1-18 karbonatomer, spesielt 1-4 karbonatomer. Enhver aryldel som er tilstede i slike estere omfatter fordelaktig en fenylgruppe.

Eksempler på farmasøytiske akseptable salter av forbindelsen med formel (I) og farmasøytisk akseptable derivater derav innbefatter basesalter, f.eks. avledet fra en passende base, slik som alkalimetall (f.eks. natrium)-, jordalkalimetal1 (f.eks. magnesium)-salter, ammonium- og NX<+>4(hvor X er C^_4alkyl)- og mineralsyresalter , slik som hydrokloridet.

Ifølge ytterligere trekk ved oppfinnelsen tilveiebringes:

a) en forbindelse ifølge oppfinnelsen for bruk i medisinsk terapi, spesielt for mennesker, særlig for behandling

eller profylakse av retrovirale infeksjoner; og

b) anvendelse av en forbindelse ifølge oppfinnelsen ved fremstilling av et legemiddel for behandling eller

profylakse av retrovirale infeksjoner.

Eksempler på retrovirale infeksjoner som kan behandles eller hindres ved hjelp av foreliggende oppfinnelse innbefatter humane retrovirale infeksjoner slik som human immunosviktvirus (HIV), HIV-2 og human T-celle lymfotropisk virus (HTLV) f.eks. HTLV-I eller HTLV-IV infeksjoner. Forbindelsene i foreliggende oppfinnelse er spesielt nyttige for behandling eller profylakse av AIDS og beslektede kliniske tilstander slik som AID-relatert kompleks (ARC), progressiv generalisert lymfadenopati (PGL), AIDS-relaterte neurologiske tilstander og anti-HIV antistoff-positive og HIV-positive tilstander. Forbindelsene kan også benyttes ved behandling eller hindring av psoriasis.

Forbindelsene i foreliggende oppfinnelse, også heri betegnet som aktive bestanddeler, kan administreres for terapi ved en hvilken som helst egnet vei inkludert oralt, rektalt, nasalt, topisk (inkludert transdermalt, bukalt og sublingualt), vaginalt og parenteralt (inkludert subkutant, intramuskulært, intravenøst og intradermalt). Det vil forståes at den foretrukne vei vil variere med tilstanden og alderen til mottageren og typen av infeksjon, men oral eller parenteral administrasjon er generelt foretrukket.

Generelt vil en egnet systemisk dose av forbindelsen l-(3-azido-2 , 3-dideoksy-p-D-erytro-pentofuranosyl)-5-metyl-2(1H)-pyrimidinon være i området 4,0 - 160 mg per kg legemsvekt av mottageren pr. dag, fortrinnsvis i området 8 - 120 mg pr. kg legemsvekt pr. dag og mest foretrukket i området 20 - 80 mg pr. kg legemsvekt pr. dag for å utvikle zidovudin for behandling av pattedyret, for eksempel mennesket, som har en HIV-Infeksjon. Den ønskede dose presenteres fortrinnsvis som to, tre, fire, fem, seks eller flere sub-doser administrert ved passende intervaller i løpet av dagen. Disse sub-dosene kan administreres i enhetsdoseformer, for eksempel inneholdende 10 - 1500 mg, fortrinnsvis 20 - 1000 mg, og mest foretrukket 50 - 700 mg aktiv bestanddel pr. enhetsdoseform.

Mens det er mulig for en forbindelse i foreliggende oppfinnelse og administreres (internt) alene er det foretrukket å presentere den som et farmasøytisk preparat. Preparatene i foreliggende oppfinnelse omfatter en forbindelse ifølge oppfinnelsen sammen med en eller flere akseptable bærere for denne og eventuelt andre terapeutiske midler. Hver bærer må være "akseptabel" i den forstand at den er forenlig med de andre bestanddelene i preparatet og ikke skadelig for pasienten. Preparater innbefatter de som er egnet for oral, rektal, nasal, topisk (inkludert transdermal, bukal og sublingual), vaginal eller parenteral (inkludert subkutan, intramuskulær, intranvenøs og Intradermal) administrasjon. Preparatene kan hensiktsmessig prepareres i enhetsdoseform og kan fremstilles ved hvilke som helst metoder som er kjent innen den farmasøytiske teknikk. Slike metoder innbefatter at forbindelsen ifølge oppfinnelsen bringes i kontakt med bæreren som utgjør en eller flere hjelpebestanddeler. Generelt fremstilles preparatene ved ensartet og intim anbringelse av den aktive bestanddel i kontakt med flytende bærere eller findelte faste bærere eller begge deler, og deretter, om nødvendig, forming av produktet.

Preparater i foreliggende oppfinnelse som er egnet for oral administrasjon kan presenteres som adskilte enheter slik som kapsler eller tabletter hver Inneholdende en bestemt mengde av forbindelsen med formel (I); som et pulver eller granuler; som en oppløsning eller en suspensjon i en vandig eller ikke-vandig væske; eller som en flytende olje-i-vann-emulsjon eller en flytende vann-i-olje-emulsjon. Den aktive bestanddel kan også presenteres som en bolus, latverge eller pasta. Forbindelsene i foreliggende oppfinnelse kan formuleres slik at det tilveiebringes langsom eller regulert frigjøring av forbindelsen.

En tablett kan fremstilles ved kompresjon eller støping, eventuelt med en eller flere hjelpebestanddeler. Komprimerte

tabletter kan fremstilles ved sammenpressing i en egnet maskin av forbindelsen ifølge oppfinnelsen i en frittstrøm-mende form slik som pulver eller granuler, eventuelt blandet med et bindemiddel (f.eks. povidon, gelatin, hydroksypropyl-metylcellulose), smøremiddel, inert fortynningsmiddel, preservativ, desintegreringsmiddel (f.eks. natriumstivelse- glykolat, tverrbundet povidon, tverrbundet natriumkarboksy-metylcellulose) overflateaktivt eller dispergeringsmiddel. Støpte tabletter kan fremstilles ved støping i en egnet maskin av en blanding av den pulverformige forbindelsen fuktet med et inert flytende fortynningsmiddel. Tablettene kan eventuelt belegges eller merkes.

Preparater egnet for topisk administrasjon i munnen innbefatter pastiller omfattende den aktive bestanddel I en smaksbasis, vanligvis sukrose og akasie eller tragant; pastiller omfattende den aktive bestanddel i en inert basis slik som gelatin og glycerin, eller sukrose og akasie; og munnvask omfattende den aktive bestanddel i en egnet flytende bærer.

Preparater for rektal administrasjon kan presenteres som et suppositorium med en egnet basis omfattende for eksempel kokossmør eller et salicylat.

Preparater egnet for vaginal administrasjon kan presenteres som pessarer, tamponger, kremer, geler, pastaer, skum eller spraypreparater som i tillegg til forbindelsen ifølge oppfinnelsen inneholder slike bærere som innen teknikken er kjent for å være hensiktsmessige.

Preparater egnet for parenteral administrasjon innbefatter vandige og ikke-vandige, isotoniske, sterile, injeksjons-oppløsninger som kan inneholde anti-oksydasjonsmidler, buffere, bakteriostater og oppløste produkter som gjør preparatet isotonisk med blodet til den tilsiktede mottager; og vandige og ikke-vandige sterile suspensjoner som kan innbefatte suspensjonsmidler og fortykningsmidler. Preparatene kan presenteres i enhets-dose- eller multi-dose-forseglete beholdere, f.eks. ampuller og flasker, og kan lagres i en frysetørket (lyofilisert) tilstand som bare krever tilsetning av den sterile flytende bæreren, for eksempel vann for injeksjoner, umiddelbart før bruk. Injek- sjonsoppløsninger som skal lages på bestilling og suspensjoner kan fremstilles fra sterile pulvere, granulater og

tabletter av den ovenfor beskrevne type.

Foretrukne enhetsdosepreparater er de som inneholder en daglig dose eller enhet, daglig subdose, som angitt ovenfor, eller en passende fraksjon derav, av forbindelsen ifølge oppf innelsen.

Forbindelser Ifølge oppfinnelsen kan også presenteres for bruk i form av veterinærpreparater, som kan fremstilles for eksempel ved fremgangsmåter som er konvensjonelle på området. Eksempler på slike veterinærpreparater innbefatter de som er egnet for: a) oral administrasjon, for eksempel store doser (f.eks. vandige eller ikke-vandige oppløsninger og suspensjoner); tabletter eller boluser; pulvere, granulater eller pelleter for blanding med for; pastaer for anbringelse på tungen; b) parenteral administrasjon for eksempel ved subkutan, intramuskulær eller intranvenøs injeksjon; f.eks. som en steril oppløsning eller suspensjon; eller (når det passer) ved injeksjon av en suspensjon eller oppløsning i juret via spenene; c) topisk påføring, f.eks. et transdermalt plaster påført på huden; eller

d) intravaginalt, f.eks. som en pessar, krem eller skum.

Det vil forståes at slike preparater som er beskrevet ovenfor

også vil være egnet for presentasjon av kombinasjoner ifølge oppfinnelsen, enten enhetspreparater eller separate preparater, og kan fremstilles på samme måte.

Det skal forståes at 1 tillegg til de ovenfor spesielt nevnte bestanddeler, kan preparatene innbefatte andre konvensjonelle midler innen teknikken med hensyn til den aktuelle preparat-typen, for eksempel kan de som er regnet for oral administrasjon Innbefatte slike ytterligere midler som søtningsstoffer, fortykningsmidler og smaksstoffer.

Forbindelsene i foreliggende oppfinnelse kan benyttes I medisinsk terapi i kombinasjon med andre terapeutiske midler, for eksempel acykliske nukleosidderivater slik som 9-(2-hydroksyetoksymetyl)-guanin, 2,3-dideoksynukleosider slik som 2',3'-dideoksycytidin, 2 ' 3 '-dideoksyadenosin og 2',3'-dideoksyinosin, interferoner slik som alfa-interferon, nukleosid-transportinhibitorer slik som dipyridamol, glukuro-nidasjonsinhibitorer slik som probenicid, immunomodulatorer slik som granulocyttmakrofagkoloni-stimulerende faktor (GMCSF) og andre midler som for eksempel beskrevet i Europeisk patent 217580. Komponentforbindelsene i en slik kombina-sjonsterapi kan administreres samtidig, i enten separate eller kombinerte preparater, eller ved forskjellige tider for eksempel i rekkefølge slik at en kombinert effekt oppnåes.

Forbindelsen med formel (I) og dens farmasøytisk akseptable derivater kan fremstilles på konvensjonell måte ved bruk av teknikker som er velkjent på området, for eksempel som beskrevet i Synthetic Procedures in Nucleic Acid Chemistry (1, 321 (1968)), T.A. Krenitsky et al (J. Med. Chem. (26, 981

(1983)); Nucleic Acid Chemistry, Improved and New Synthetic Processes, Methods and Techniques (Del 1 og 2, Ed. L.D. Townsend, R.S. Tipson, (J. Wiley) 1978); J.R. Horwitz et al.

(J. Org. Chem. 29, (July 1964 ) 2076-78); M. Imazawa et al.

(J. Med. Chem., 45, 3274 (1980)); og R.P. Glinski et al. (J. Chem. Soc. Chem. Commun., 915 (1970)).

Foreliggende oppfinnelse innbefatter videre en fremgangsmåte for fremstilling av forbindelsen med formel (I) og dens farmasøytisk akseptable derivater, og denne fremgangsmåten er kjennetegnet ved at man

(A) omsetter en forbindelse med formelen

hvor M representerer en forløpergruppe for 3'-azidogruppen,

eller et derivat (f.eks. en ester) derav, med et middel eller under betingelser som tjener til å omdanne nevnte forløper-gruppe til den ønskede azidogruppen;

(B) omsetter en forbindelse med formelen:

hvor R representerer en forløpergruppe eller et hydrogenatom,

med et middel eller under betingelser som tjener til å omdanne nevnte forløpergruppe til et hydrogenatom; eller

(C) omsetter en forbindelse med formelen:

eller en funksjonell ekvivalent derav, med en forbindelse som tjener til å innføre den ønskede rebofuranosylringen ved 1-stillingen I forbindelse med formel IV; og deretter, eller samtidig dermed, bevirker i det minste en av følgende omdannelser: i) når et derivat av en forbindelse med formel (I) er dannet, omdanner nevnte derivat til stamforbindelsen med formel (I); og

ii) når forbindelsen med formel (I) er dannet, omdanner nevnte forbindelse til et farmasøytisk akseptabelt derivat derav.

I den overfor beskrevne fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen vil det forstås at valget av forløperforbindelsene i metodene

(A) - (C) vil bestemmes stort sett av den spesielle forbindelse som det er ønsket å fremstille, idet de ovennevnte

midler og betingelser velges i overensstemmelse med dette fra de som er kjent innen teknikken for syntetisk nukleosidkjemi. Eksempler på slike omdannelsesmetoder er i det følgende beskrevet som en veiledning og det vil forståes at de kan modifiseres på konvensjonell måte avhengig av den ønskede forbindelsen. Spesielt, når det for eksempel er beskrevet en omdannelse som ellers ville resultere i den uønskede reaksjon av labile grupper så kan slike grupper beskyttes på konvensjonell måte med etterfølgende fjerning av beskyttelsesgrup-pene etter fullføring av omdannelsen.

Således, med for eksempel hensyn til metode (A) kan gruppen M i forbindelsen med formel (II) representere for eksempel et halogen (f.eks. klor)-, hydroksy- eller organosulfonyloksy (f.eks. trifluormetylsulfonyloksy, metansulfonyloksy eller p-toluensulfonyloksy)-radikal.

For fremstilling av forbindelsen med formel (I) kan en forbindelse med formel (II) hvor gruppen M er en halogen (f.eks. klor) gruppe i threo-konfigurasjonen (hvor 5'-hydroksy fordelaktig er beskyttet, f.eks. med en trityl-gruppe), behandlet for eksempel med litium- eller natrium-azid. 3'-threo-halogen (f.eks. klor)-utgangsmaterlale kan oppnåes for eksempel ved omsetning av den tilsvarende 3'erytro-hydroksyforbindelsen med for eksempel trifenylfosfin og karbontetraklorid, eller alternativt ved behandling med organosulfonylhalogenid (f.eks. trifluormetansulfonylklorid) til dannelse av en tilsvarende 3'-erytro-organosulfonyloksy-forbindelse som deretter halogeneres, f.eks. som beskrevet ovenfor. Alterantivt kan en 3'-threo-hydroksyforbindelse med formel (II) behandles for eksempel med trifenylfosfin, karbontetrabromid og litiumazid til dannelse av den tilsvarende 3'-erytro-azidoforbindelsen.

Med hensyn til metode (B) kan forløpergruppen R i formel (III) for eksempel representere en 1,2,4-triazol-1-yl-gruppe som kan omdannes til den ønskede forbindelsen med formel (I) ved for eksempel behandling med hydrazinhydrat og sølvoksyd.

Med hensyn til metode (C) så kan denne utføres for eksempel ved behandling av det passende pyrimidin med formel (IV) eller et salt eller beskyttet derivat derav, med en forbindelse med formelen:

hvor Y representerer en avspaltningsgruppe, f.eks. en acetoksy- eller benzoyloksy- eller halogen (f.eks. klor)-gruppe, og 5'-hydroksylgruppen eventuelt er beskyttet, f.eks. med en p-tolouylgruppe, og etterfølgende fjerning av eventu-elle beskyttende grupper.

Når forbindelsen med formel (I) er dannet kan en slik forbindelse omdannes til et farmasøytisk akseptabelt fosfat eller annet ester ved omsetting av forbindelsen med formel (I) med henholdsvis et fosforyleringsmiddel, f.eks. P0CL3eller et passende forestringsmiddel, f.eks. et syrehalogenid eller -anhydrid. Forbindelsen med formel (I), inkludert estere derav, kan omdannes til et farmasøytisk akseptabelt salt derav på konvensjonell måte, f.eks. ved behandling med en passende base.

Når et derivat av forbindelsen med formel (I) er dannet, for eksempel en ester, kan et slikt derivat omdannes til stamforbindelsen på konvensjonell måte, for eksempel ved hydro-lyse.

Følgende eksempler illustrerer oppfinnelsen. Den i eksemplene benyttede betegnelse "aktiv bestanddel" betyr forbindelsen med formel (I), dvs. 1-(3-azido-2,3-dideoksy-P-D-erytro-pentofuranosyl)-5-metyl-2(1H)-pyrimidinon.

Eksempel 1: Tablettpreparater

Følgende preparater A, B og C fremstilles ved våtgranulering av bestanddelene med en oppløsning av povidon, fulgt av tilsetning av magnesiumstearat og sammenpressing.

Preparat A

Preparat B

Preparat C

Følgende preparater D og E fremstilles ved direkte sammenpressing av de sammenblandede bestanddelene. Laktosen benyttet i preparat E er av den direkte sammenpresningstypen (Dairy Crest - "Zeparox").

Preparat D

Preparat E

Eksempel 2: Kapselpreparater

Preparat A

Et kapselpreparat fremstilles ved sammenblanding av bestanddelene i preparat D i eksempel 1 ovenfor og fylling i en hard gelatinkapsel bestående av to deler. Preparat B (nedenfor) fremstilles på lignende måte.

Preparat B

Preparat C

Kapsler fremstilles ved smelting av Macrogol 4000 B.P., dispergering av den aktive bestanddelen i smeiten og fylling av smeiten en gelatinkapsel omfattende to deler.

Preparat D

Kapsler fremstilles ved dispergering av den aktive bestanddel i lecitin og arakisolje og fylling av dispersjonen i myke, elastiske gelatinkapsler.

Eksempel 3: In. 1 i serbart preparat

Preparat A

Aktiv bestanddel 0,200 g

Saltsyreoppløsning 0,1 M q.s. til pH 4,0 til 7,0 Natriumhydroksydoppløsning 0,1 M q.s. til pH 4,0 til 7,0 Sterilt vann q.s. til 10 ml

Den aktive bestanddelen oppløses i mesteparten av vannet (35-40" C) og pH-verdien justeres mellom 4,0 og 7,0 med saltsyren eller natriumhydroksydet, ettersom det passer. Satsen bringes deretter opp til volum med vann og filtreres gjennom et sterilt mikroporefilter i gulfargede glassampuller (type 1) og forseglet med sterile lukninger og overforseglinger.

Preparat B

Aktiv bestanddel 0,125 g Steril, pyrogenfri, pH 7 fosfatbuffer, q.s. til 25 ml Eksempel 4: Intramuskulær injeksjon

Den aktive bestanddel oppløses i glykofurol. Benzylalkoholen tilsettes deretter og oppløses, og vann tilsettes til 3ml. Blandingen filtreres deretter gjennom et sterilt mikroporefilter og forsegles i sterile 3ml gulfargede glassampuller (type 1).

Eksempel 5: Sirup

Preparat A

Den aktive bestanddelen oppløses i en blanding av glycerol og mesteparten av det rensede vannet. En vandig oppløsning av natriumbenzoatet tilsettes deretter til oppløsningen fulgt av tilsetning av sorbitoloppløsningen og til slutt smaksstoffet. Volumet tilveiebringes med renset vann og blandes godt.

Preparat B

Bland sorbitoloppløsningen, glycerol og en del av det rensede vannet. Oppløs natriumbenzoatet I renset vann og tilsett oppløsningen til massen. Tilsett og disperger den disperger-bare cellulosen og smaksstoffet. Tilsett og disperger den aktive bestanddel. Tilveiebring volumet med renset vann.

Eksempel 6: 3'- Azido- 3'- Deoksvtymidin (AZT)

a) 2, 3'- Anhydrotymidin

Tymidin (85,4g : 0,353mol) ble oppløst i 500ml tørr DMF og

tilsatt til N-(2-klor-l,1,2-trifluoretyl)dietylamin (100,3; 0,529mol) (fremstilt ifølge metoden til D.E. Ayer, J.Med.Chem. 6, 608 (1963)). Denne oppløsningen ble oppvarmet til 70°C i 30 minutter og deretter helt i 950 ml etanol (EtOH) under kraftig omrøring. Produktet ble utfelt fra denne oppløsningen og filtrert. EtOH-supernatanten ble avkjølt og deretter filtrert til dannelse av tittelforbindelsen, sm.p. 230°C.

b) 3'- Azido- 3'- Deoksvtymidin

2,3'-0-Anhydrotymidin (25g : 0,115mol) og NaN3(29g, 0,446mol) ble suspendert i en blanding av 250ml DMF og 38ml vann. Reaksjonsblandingen ble tilbakeløpskokt i 5 timer hvoretter den ble helt i 1 liter vann. Den vandige oppløsningen ble ekstrahert med EtOAc (3 x 700ml ). EtOAc-ekstraktene ble tørket over Na2S04, filtrert og EtOAc ble fjernet i vakuum til oppnåelse av en viskøs olje. Denne oljen ble omrørt med 200ml vann under tilveiebringelse av tittelforbindelsen som et fast stoff som ble oppsamlet ved filtrering, sm.p. = 116-118'C.

Eksempel 7: 5'- Acetyl- 3'- azido- 3'- deoksvtymidin

Til en oppløsning av 3'-azido-3'-deoksytymidin (AZT) (20 g) i pyridin (50ml) ved omgivelsestemperatur ble acetylklorid (2,1 ekvivalenter) tilsatt. Reaksjonsblandingen ble omrørt i to timer og holdt ved 0 - 5°C i 20 timer. Den ble helt på isvann under omrøring. Den vandige fasen ble dekantert. Det olje-aktige produktet ble oppløst i etylacetat og ekstrahert med vann (5 ganger), 0,5N saltsyre, vann (2x), og tørket over magnesiumsulfat. Oppløsningen ble filtrert og inndampet i vakuum. Den resterende oljen ble oppløst i kloroform, påført på en silisiumdioksydgelkolonne og flammekromatografert ved bruk av 2$ metanol i kloroform. Fraksjoner med produkt ble inndampet og oljen ble kromatografert igjen ved bruk av etylacetat:heksan (6:4 v/v). Fraksjoner med produkt ble inndampet i vakuum til oppnåelse av 5'-acetyl-3'-azido-3'-deoksytymidin som et hvitt, fast stoff.

Sm.p. 96-98°C

Beregnet: C, 46,60; H, 4,89; N, 22,65

Funnet : C, 46,67; H, 4,94; N, 22,59

Eksempel 8: 1-( 5- 0- Acetyl- 3- azido- 2, 3- dideoksy- p- D- erytro-pentofuranosyl )- 5- metyl- 4-( l , 2. 4- trl azol- l- yl )- 2 ( 1H )- pyr i - mldinon

5'-Acetyl-3'-azido-3'-deoksytymidin ble omsatt med 5 ekvivalenter av 1,2,4-triazol og to ekvivalenter av 4-klorfenyldi-

klorfosfat i tørr pyridin ved omgivelsestemperatur i 10 dager. Silisiumdioksydgelkromatografi av det urene produktet ved bruk av 1:1 EtOAc/heksan (v/v) fulgt av kombinasjon og inndampning av de hensiktsmessige fraksjonene ga en olje.

Krystallisasjon fra EtOAc ga tittelforbindelsen som et fast stoff, 2,7 g (7,5 mMol; 60#); sm.p. = 143-145°C. UV (nm) : ved pH 1 Xmaks = 324,245,215 (c = 9300, 10000, 20500), Xmin = 282,233 (c = 2100,8200 ); ved pH 13 Xmaks = 276 (c = 6000 ), Xmin = 242 (c = 2000 ), H-^NMR (DMS0-d6) 9,34, 8,40 (2s, 2H triazolyl), 8,23 (s,lH,H6), 6,12 (t,lH,Hl',J = 6,16 Hz), 4,48-4,17 (m,4H,H3',H4<*>,H5'), 2,35 (s,3H,5'-acetyl ), 2,07 (s,3H,5CH3).

Analyse for C14<H>16<N>804

Beregnet: C, 46,67; H, 4,48; N, 31,10

Funnet : C, 46,58; H, 4,51; N, 31,02

Eksempel 9: l-( 3- Azido- 2, 3- dideoksy- g- D- erytro- pentofurano-syl)- 5- metyl- 2( 1H)- pyrimidinon

l-(5-0-Acetyl-3-azido-2 , 3-dideoksy-p-D-erytro-pentofurano-syl)-5-metyl-4-(1,2,4-triazol-l-yl)-2(1H)-pyrimidinon (0,5g, 1.4 mMol) ble oppløst i CH3CN (10 ml) og behandlet med 85$ hydrazinhydrat (0,105g, 2,1 mMol) i 30 minutter ved omgivelsestemperatur, analogt med fremgangsmåten beskrevet av D. Cech og A. Holy, Coll. Czech.Chem.Comm. 42, 2246 (1977 )). Oppløsningsmidlene ble inndampet i vakuum og resten kromatografert på silisiumdioksydgel med 9:1 CHCl3/MeOH (v/v) som det eluerende opppløsningsmiddel. Oppsamling og inndampning av passende fraksjoner ga et fast stoff. Det faste stoffet ble oppløst i EtOH (50ml) inneholdende Ag20 (0,35g, l,5mMol, 1.5 eq) og tilbakeløpskokt i 90 minutter. Filtrering av den varme suspensjonen gjennom et sjikt av celitt fulgt av fjerning av oppløsningsmidler i vakuum ga et fast stoff. Det faste stoffet ble kromatografert på silisiumdioksydgel og eluert med 20:1 CHCl3/MeOH (v/v). Kombinasjon og inndamping av passende fraksjoner ga et fast stoff som ble oppløst i

NH3-mettet MeOH (50 ml) 1 3 timer. Inndampning av oppløs-ningsmidlene i vakuum ga en olje som ble kromatografert på silisiumdioksydgel eluert med 20:1 CHCl3/MeOH (v/v). De passende fraksjonene ble kombinert og oppløsningsmidler inndampet i vakuum til dannelse av en olje som langsomt størknet ved henstand : sm.p. = 62-63°C; UV (nm) : ved pH 1 Xmaks = 326, 212 (c = 7700, 13000), Xmin = 263 (c = 200); ved pH 13X maks = 322, 218 (c = 22700, 10800 ), Xmin = 246 (c = 400); H' NMR: (DMSO- d6) 8,46 (d, 1H, H4, J=3,28Hz), 8,28 (d, 1H, H6, H=3,23Hz), 6,00 (t, 1H, Hl', J = 5,08 Hz), 5,31 (t, 1H, 5'0H, J=5,12Hz), 4,4,-4,3 (m, 1H, H3'), 3,95-3,89 (m, 1H, H4'), 3,8-3,6 (m, 2H, H5 ' ) , 2,5-2,3 (m, 2H, H2' ) , 2,03 (s, 3H, 5-CH3).

Analyse beregnet for C10<H>13<N>503.0,25 H20: C, 46,96; H, 5,32; N, 27,38.

Funnet : C, 47,05; H, 5,40; N, 27,14.

Omdannelse av forbindelsen med formel ( I) til zidovudin

I forsøk med rotter omfattende administrasjon av forbindelsen med formel (I) ovenfor i vann ad oral vei ble zidovudin utvunnet i en gjennomsnittlig mengde på 51$.

Claims

1. Fremgangsmåte for fremstilling av l-(3-azido-2, 3-dideoksy-3-D-erytro-pentofuranosyl)-5-metyl-2(1H)-pyrimidinon og dets farmasøytisk akseptable derivater, karakterisert ved at man(A) omsetter en forbindelse med formelen:

(hvor M representerer en forløpergruppe for 3'-azidogruppen) eller et derivat derav, med et middel eller under betingelser som tjener til å omdanne nevnte forløpergruppe til den ønskede azidogruppen; (B) omsetter en forbindelse med formelen:

(hvor R representerer en forløpergruppe for et hydrogenatom) med et middel eller under betingelser som tjener til å omdanne nevnte forløpergruppe til et hydrogenatom; eller (C) omsetter en forbindelse med formelen:

eller en funksjonell ekvivalent derav, med en forbindelse som tjener til å innføre den ønskede ribofuranosylringen ved 1-stillingen i forbindelsen med formelen (IV); og deretter, eller samtidig dermed, bevirker i det minste en av følgende omdannelser: i) når et derivat av nevnte pyrimidinon er dannet, omdanner derivatet til nevnte pyrimidinon; og ii) når nevnte pyrimidinon er dannet, omdanner nevnte pyrimidinon til et farmasøytisk akseptabelt derivat derav.

2. Fremgangsmåte ifølge krav 1(B), karakterisert ved at en forbindelse med formel (III) anvendes i form av et 5'-acetatderivat.

3. Fremgangsmåte ifølge krav 1(B) eller krav 2, karakterisert ved at det anvendes en forbindelse med formel (III) hvor forløpergrupppen R er 1, 2 , 4-triazol-l-yl-gruppe.

4 . Fremgangsmåte ifølge krav 3, karakterisert ved at forløpergruppen omdannes til et hydrogenatom ved behandling med hydrazinhydrat og sølvoksyd.