NO840292L

NO840292L - Pyrrol-2-acetylaminosyre-derivater.

Info

Publication number: NO840292L
Application number: NO840292A
Authority: NO
Inventors: John Robert Carson; Bruce Howard Migdalof
Original assignee: Mcneilab Inc
Priority date: 1983-01-26
Filing date: 1984-01-25
Publication date: 1984-07-27
Also published as: AU2378784A; HU195232B; IE840167L; ES535101A0; GB2134111B; DK33284D0; FI840299A0; NZ206818A; FI840299L; FI840299A7; ES529120A0; EP0115424A1; ES8504704A1; IE56608B1; DK33284A; DE3467164D1; ES8506620A1; GB8401876D0; AU556810B2; YU251283A

Description

Foreliggende oppfinnelse angår nye acylamino syrer og deres salter med følgende formel:

hvori R'' er som angitt nedenfor for formlene 4 og 4 0 og Y

er hydrogen og Q er CH3, hvori acylgruppen er [i -metyl-5-(4-metylbenzoyl)-'<;>lH-pyrrol-2-yl -acetyl],med den generelle formel 4 nedenfor, eller Y er CH3og Q er klor, hvori asyl-gruppen er f 5- (4-klorobensoyl)-1 , 4-dimentyl)-1 H-pyrrol-2-yl]

-asetyl med den generelle formel 40 nedenfor, og også amidestere av nevnte syrer med den generelle formel (6):

Også definert av den generelle formel 3 og 30 nedenfor, som benyttes som mellomprodukter for å fremstille syrer med de generelle formler 4, henholdsvis 40.

Tolmetin (generell formel 1 nedenfor) er det generiske navnet

for forbindelsen: [i-metyl-5-(4-metylbensol)-1H-pyrrol-2-yl - eddik-syre ; som også kan benevnes som 1-metyl-5-(4-metyl-bensoyl)-1H-pyrrole-2-eddik-syre, som har anti-inflammatorisk virkning, og som er kommersiell tilgjengelig som tolmetin-natrium-dihydrat for bruk som et nonsteroid, anti-inflammato-

risk middel. Tolmetin er et sikkert og effektivt medikament,

men inngis i relativt store doser. Det er nå uventet funnet at potensen for tolmetin vesentlig kan økes og den nødvendige dosering vesentlig reduseres ved hjelp av nye forbindelser ifølge oppfinnelsen med den generelle formel 4 nedenfor, slik at tolmetin inngis i form av sitt amid med en aminosyre.

Zomepirac (den generelle formel 10 nedenfor) er det generiske navn for forbindelsen 5-(4-klorobensoyl)-1,4-dimetyl-1H-pyrrol-2-yl-eddiksyre, som har analgetisk og anti-inflama-torisk virkning og som er kommersielt tilgjengelig som somepirak-natriumdihydrat. Selv om somepirak benyttes klinisk som analgetikum, synes virkningsmåten å involvere inhibin av prostaglandin—biosyntes. Zomepirakdeler med andre medi-kamenter som innhiberer prostaglandin-biosyntesen bivirkningen gastrointestinal irritasjon. Det er nå uventet funnet at tendensen for zomepirak mot gastrointestinal irritasjon kan reduseres hvis zomepirak inngis i form av sitt amid med en aminosyre.

Ved de spesielle aminosyrederivater av tolmetin og zomepirak er de følgende: glysin, alanin, metionin, • glutaminsyre, asparatinsyre, lysin og glutamin, og de resulterende forbindelser ifølge oppfinnelsen har de generelle formler 4 og 40 nedenfor, og kan foreligge i enten optisk aktiv eller i rase-misk form. De kan inngis i form av den frie syre eller i form av de farmasøytisk aksepterbare salter, f.eks. som salter av alkalimetaller, fortrinnsvis natrium eller kalium, eller jordalkalimetaller ,t fortrinnsvis kalsium, eller salter av organiske aminer, fortrinnsvis 2-amino-2-(hydroksymetyl)-1,3-propandiol (trometamin). Aminosyrederivatene av tolmetin og zomepirak kan- fremstilles ved de følgende reaksjonsskjemaer

(A) henholdsvis (B):

I disse formler finner man:

X = halogenid (spesielt Cl eller Br), -OCH2CN, eller -0C00- alkyl,

R = H, alkyl, (CH^CC^R1, CH2CH2SCH3, (CH^NHCbZ, eller

(CH2)2CONH2

n = 1 eller 2

R<1>= alkyl eller benzyl

R" = H, alkyl, (C<H>2)nC02H, CH2CH2SCH3, (CH^Nr^, eller

(CH2)2CONH2

Når uttrykket "alkyl" benyttes, er dette ment å inkludere C^-Cg-alkyl som kan være rett eller forgrenet, primær, sekundær eller tertiær, slik som metyl, isopropyl, iso-butyl, sek.-butyl, heksyl og lignende alkyler. Forbindelser av typene 4 og 40 kan fremstilles ved de illu-strerte tre-trinnsprosedyrer 1-4, henholdsvis 10-40. Tolmetin (1) og zomepirac (10) omdannes først til et aktivert derivat 2 eller 20. Tre forskjellige typer aktiverte derivater kan benyttes, nemlig syrehalogenider der X = halogenid, den aktiverte ester der X = OCt^CN, eller det blandede karboniske anhydrid der X = O-CO-O-alkyl. Frem-stillingen av syrehalogenidene er tidligere beskrevet i US-PS 3,752.826. Den aktiverte ester der X = OCH2CN, kan fremstilles ved omsetning av et tolmetin- eller zomepirac-salt med kloracetonitril i et dipolart aprotisk oppløsnings-middel slik som f.eks. DMSO, DMF, acetonitril eller aceton, ved 20-80°C. De blandede anhydrider der X = -O-COO-alky1, kan fremstilles ved omsetning av et tolmetin- eller zomepirac-salt, f.eks. trietylammonium eller N-metylmorfolinium),

med et alkylklorformiat, f.eks. etylklorformiat eller iso-butylklorformiat, i et inert aprotisk oppløsningsmiddel slik som THF eller metylenklorid, ved -50° - -70°C.

I et andre trinn blir aminosyreestrene, NI^-CHR-CC^R1 , acylert ved påvirkning av et aktivert tolmetin- eller zomepirac-derivat 2 eller 20, for å gi amidestere 3 eller 30. Aminosyreestrene kan settes fri fra de tilsvarende salter ved behandling med et organisk tertiært amin slik som trietylamin eller en uorganisk svak base slik som et alkalimetallbikarbonat eller -karbonat. Acylering av aminosyreestrene ved bruk av tolmetin- eller zomepirac-acylhalogenider gjennomføres i nærvær av en hydrogenhalogenid-akseptor slik som et tertiært amin, f.eks. trietylamin, i et inert aprotisk oppløsningsmiddel ved 0-80°C. Acyler-ingsprosedyren som benytter aktiverte estere, X - OCf^CN, gjennomføres i et inert aprotisk oppløsningsmiddel slik som f.eks. THF eller dioksan, ved forhøyede temperaturer, f.eks. 50-100°C, og fortrinnsvis i nærvær av en svak sur kataly-sator slik som eddiksyre. Aminosyreestrene benyttes i overskudd. Acyleringsreaksjonene som benytter det blandede anhydridreagens, X = -O-COO-alky1, gjennomføres i et inert aprotisk oppløsningsmiddel, fortrinnsvis i den samme opp-løsning der reagensen prepareres. Temperaturområdet for gjennomføring av acyleringer ved bruk av blandede anhydrider er 0 —75°C. Når aminosyreesteren som benyttes er en gluta-minsyreester, er ruten med blandet anhydrid foretrukket og den aktiverte esterrute benyttes ikke.

Omdanningen av amidestre 3 eller 30 til amidsyrer 4 eller 40 kan gjennomføres ved konvensjonell forsåpning ved bruk av en ekvivalent av et alkalimetallhydroksyd i vandig eller blandet vandig organisk oppløsning, f.eks. etanolvann, over en temp-eratur av 25-100°C. Når R' er benzyl, kan dannelsen av 4 gjennomføres ved katalytisk debenzylering ved bruk av hydrogen og en edelmetallkatalysator, f.eks. palladium eller platina, i et organisk oppløsningsmiddel slik som en lavere alkanol eller eddiksyre. Når R' er benzyl, må dannelsen av 4 eller 40 gjennomføres ved behandling med bortribromid i et inert organisk oppløsningsmiddel slik som metylenklorid.

Når R er (CH2)4NHCbZ i 3, CbZ = benzyloksykarbonyl, gjennom-føres fjerningen av CbZ-blokkeringsgruppen ved katalytisk debenzylering eller fortrinnsvis ved behandling med bortribromid. Når R er (CH^^NHCbZ i 30, skjer fjerningen av CbZ-gruppen ved behandling med bortribromid.

Når R<1>er tertiært alkyl, kan omdanningen av 3 til 4 eller

30 til 40, gjennomføres ved påvirkning av en aprotisk syre, f.eks. ved tilbakeløpskokende trifluoreddiksyre. Alternativt kan forbindelser av typen 4 eller 40 fremstilles ved Schotten-Baumann-reaksjon av syrehalogenidet, 2, henholdsvis 20, der X er halogenid, med aminosyren i nærvær av en svak base, fortrinnsvis natrium- eller kaliumbikarbonat, i vandig oppløsning som etter følgende reaksjonsskjema:

Saltene av forbindelsene med den generelle formel 4 og 40 kan fremstilles ved den konvensjonelle metode ved omsetning av syreforbindelsene 4, henholdsvis 40, med den ønskede basen, eller ved kationbytting.

Den anti-inflammatoriske virkning for forbindelsene 4 ifølge oppfinnelsen, ble målt ved rottehjelpemiddel arthritis-prøven (S. Wong et al., J. Pharmacol. og Exp. Ther. 185, 127 (1973)). Wistar/Lewis-hunnrotter ble gitt en injeksjon av varmedrept Mycobacterium butyricum i lett mineralolje. Etter 11 dager ble dyrene som hadde utviklet en arthritisk tilstand valgt og gitt daglige orale doser av prøvemedikamentet i 17 dager. Den prøvede forbindelse ble inngitt enten som vandig oppløsning av natriumsalt, inngivelsesform "a", eller en vandig suspensjon av fri syre i 0,05% metylcellulose, inngivelsesform "b". Potevolumene ble målt og prosent inhibering av svelling av ikke-injisert bakpote sammenlignet med kontroller, ble beregnet for den fjerde og den syttende dagen etter initieringen av doser-ingen. Prøveresultatene er angitt i tabell I og uttrykt _ som ED,.q i mg/kg/dag.

I tillegg til den anti-inflammatoriske virkning, ble forbindelsene med formel 4 bedømt med henblikk på evnen til å indusere gastrisk sårdannelse fordi gastrisk irritasjon er den mest signifikante bivirkning etter inngivelse av ikke-steroide anti-inflammatoriske midler. Forbindelsen som ble prøvet ble inngitt enten som vandig oppløsning av natriumsalt, inngivelsesform "a", eller som vandig suspensjon av fri syre i 0,05% metylcellulose, inngivelsesform "b". Som beskrevet av Wong et al., bestemte man den dose UDr_

DU

i mg/kg/dag som var nødvendig for å gi 50% ulcerogen-respons etter 4 dager oral dosering med prøvemedikamentet. En terapeutisk indeks med henblikk på gastrisk sårdannelse, den anti-inlfammatoriske indeks, (All), ble beregnet.

Prøveresultatene er angitt i tabell II.

Som det fremgår, viser i tillegg til større potens enn tolmetin, forbindelsene med formel 4 også en mer gunstig terapeutisk indeks enn stammedikamentet. Til felles for andre ikke-stereoide anti-inflammatoriske midler, har forbindelsene med formel 4 også analgetisk virkning. Forbindelsene med formel 4 kan inngis til mennesker på den samme generelle måte som tolmetin, bortsett fra at, fordi forbindelsene er mer potente, mengden aktivt medikament pr. enhetsdose vil være mindre og i størrelsesorden 25 mg-200 mg.

Analgetisk virkning for forbindelsene med formel 40 kan bestemmes ved bruk av musacetylkolinbromid-indusert vridningsprøve, beskrevet av H.O.J. Collier, L.C. Deneen, CA. Johnson og C. Schneider i Brit. J. Pharmacol.

Chemother. 32, 295 (1968) i doser på omkring 0,5-5 mg/kg, p.o.

Den anti-inflammatoriske virkning for forbindelsene 40

ifølge oppfinnelsen ble målt ved å bruke rotteadjuvant-arthritis-prøven (S. Wong, J.F. Gardocki og T.P. Pruss,

J. Pharmacol. og Exp. Ther. 185, 127 (1973)). Wistar/ Lewis-hunnrotter ble gitt en injeksjon av varmedreptMycobacterium butyricum i lett mineralolje. Etter 11 dager ble dyrene som hadde utviklet arthritiske tilstander valgt og gitt en daglig oral dose av medikamentet i 4 dager. Potevolumene ble målt og prosent inhibering av ikke-injisert bakpote-sammenlignet med kontroller ble beregnet. Resultatene i tabell III er uttrykt som ED^Qi mg/kg/dag.

I tillegg til den anti-inflammatoriske virkning ble forbindelsene med formel 40 bedømt på evnen til å indusere gastrisk sårdannelse fordi gastrisk irritasjon er den mest signifikante bivirkning etter inngivelse av prostaglandin-biosynteseinhibitorer. Som beskrevet av Wong et al., ble dosen (UDj-q mg/kg/dag) som var nødvendig for å oppnå 50% ulcerogen respons etter 4 dagers oral dosering av prøve-forbindelsen bestemt. Resultatene er vist i tabell III.

Som beskrevet av Wong et al., ble det bestemt en terapeutisk indeks med henblikk på gastrisk sårdannelse, den anti-inf lammatoriske indeks "All", definert som UD^q/ED^q. Resultatene i tabell III viser den uventede sikkerhet for forbindelsene ifølge oppfinnelsen.

Forbindelsene med formel 40 kan inngis til mennesker på den samme generelle måte som zomepirac i et enhetsdoseområde fra ca. 10 til 100 mg.

De følgende eksempler skal illustrere, men ikke på noen måte begrense oppfinnelsen.

Eksempel 1

132,9 g eller 1,76 mol kloracetonitril ble tilsatt til en suspensjon av 446,8 g eller 1,6 mol tørr natrium[1-metyl-5-(4-metylbenzoyl)-lH-pyrrol-2-yl]-acetat i 1 liter DMF. Blandingen ble oppvarmet til 55°C i 4 timer. Reaksjonsblandingen ble avkjølt og vann ble tilsatt. Bunnfallet ble samlet og lufttørket og man oppnådde 436 g cyanometyl[1-mety1-5-(4-metylbenzoyl)-lH-pyrrol-2-yl]-acetat i et utbytte på

92% og med smeltepunkt 132-135°C.

Eksempel 2

Metyl-N-Hl-metYl-5-J4-metYlbe §£2£Yll2lY2i2^£

En blanding av 5,6 g eller 0,019 mol cyanometyl-[1-mety1-5-(4-metylbenzoyl)-lH-pyrrol-2-yl]-acetat, 2,34 g eller 0,019 mol glycinmetylesterhydroklorid, 2,6 ml eller 0,019

mol trietylamin og 0,2 ml iseddik i 15 ml THF, ble tilsatt under tilbakeløp i 3 timer. En andre tilsetning av 1,17 g eller 0,0095 mol glycinmetylesterhydroklorid og 1,3 ml eller 0,0095 mol trietylamin ble foretatt. Reaksjonen ble oppvarmet under tilbakeløp i 2 timer. En tredje tilset-

ning av 1,17 g glycinmetylesterhydroklorid og 1,3 ml trietylamin ble gjennomført. Reaksjonen ble oppvarmet under tilbakeløp i 1 time. Den ble avkjølt og helt i vann. Faststoffet ble samlet og tørket og man oppnådde 6,0 g hvitt krystallinsk metyl-N-{[l-metyl-5-(4-metylbenzoyl)]-1H-pyrrol-2-yl]-acetyl}-glycinat i et utbytte på 97% og med smeltepunkt 149-150°C.

H nmr (CDC13> 67,7 (d, J=9), 2H; 7,2 (d, J=9), 1H; 6,7 (d, J = 4), 1H; 6,3 (m), 1H; 6,15 (d, J=4), 1H, 4,0 (m), 2H; 3,9 (s), 3H; 3,71 (s) 3H, 3,68 (s), 2H; 2,4 (s), 3H.

Eksempel 3

Ved bruk av fremgangsmåten ifølge eksempel 2 og ved å benytte de følgende aminosyrestersalter istedet for glycinmetylesterhydroklorid, og å tillate disse å reagere med cyanometyl-[l-metyl-5-(4-metylbenzoyl)-lH-pyrrol-2-yl]-acetat i nærvær av trietylamin, ble de respektive tl-metyl-5-(4-metylbenzoyl)-lH-pyrrol-2-yl]-acetylderivater med aminosyreestrene fremstilt:

Eksempel 4

Ved å følge prosedyren i eksempel 2 og ved å benytte de følgende aminosyreestere og ved å bringe disse til reaksjon med cyanometyl-[l-metyl-5(4-metylbenzoyl)-lH-pyrrol-2-yl]-acetat i nærvær av trietylamin, ble de tilsvarende [1-mety1- 5-(4-metylbenzoyl)-lH-pyrrol-2-yl]-acetylaminosyreestere fremstilt:

Aminosyreester

Eksempel 5

522tYi2iutamat

Til en suspensjon av 45,10 g eller 0,152 mol [l-metyl-5-(4-metylbenzoyl)-lH-pyrrol-2-yl]-eddiksyre i 230 ml tørr THF, ble det tilsatt 16,47 ml eller 0,15 mol N-metylmorfolin. Blandingen ble avkjølt til -65°C. En andel på 14 ml eller 0,152 mol etylklorformiat i 50 ml tørr THF ble tilsatt dråpevis til reaksjonsblandingen mens man holdt temperaturen ved -65°C. Blandingen ble omrørt i en halv time etter at tilsetningen var ferdig.

I mellomtiden ble 40,0 g eller 0,20 mol L-glutaminsyredi-metylesterhydroklorid oppdelt mellom 175 ml kald 20%-ig kaliumkarbonat og 310 ml THF. THF ble vasket med saltopp-løsning, tørket over 4A-sikter og vannfri natriumsulfat, medgått tid ca. 10 minutter. L-glutaminsyredimetylesteroppløsningen ble tilsatt til reaksjonslbandingen så hurtig som mulig mens man holdt temperaturen ved -65°C. Den ble omrørt i ytterligere 4 timer. Reaksjonsblandingen ble helt i 3N-saltsyre, ekstrahert til kloroform, vasket med natriumbikarbonatoppløsning, vann, saltoppløsning og tørket over vannfri magnesiumsulfat. Oppløsningsmidlet ble fjernet i vakuum og man oppnådde et gyllent brunt fast stoff som ved omkrystallisering fra 2-propanol ga 40,5 g dimetyl-N-{[l-metyl-5-(4-metylbenzoyl)-lH-pyrrol-2-yl]-acetyl}-glutamat i et utbytte på 65% og med smeltepunkt 109-111°C, nmr: 7,70, d, (J=8)/2H; 7,25, d, (J-8) , 2H; 6,68, d, (J=4), 1H; 6,52, m, 1H; 6,15, d, (J=4), 1H; 4,55, m, 1H, 3,95, s, 2H; 3,74, S, 3H; 3,66, 2s, (koincidental), 6H; 2,2, m, 4H.

Eksempel 6

N-{ [_ 1-mety 1-5-j4-metylbenzoYl En oppløsning av 64 ml eller 0,032 mol 0,5 N natriumhydroksyd ble tilsatt dråpevis i løpet av 2 timer til en tilbakeløps-kokende oppløsning av 10,49 g eller 0,0318 mol av metyl-N-{[l-metyl-5-(4-metylbenzoyl]-lH-pyrrol-2-yl]-acetyl}-glycinat i 100 ml metanol. Metanolen ble fordampet i vakuum. Oppløsningen ble tilsatt til kald 3N HC1. Faststoffet ble samlet og lufttørket. Det ble omkrystallisert fra 2-propanol hvorved man oppnådde 7,3 g hvitt krystallinsk N-{[l-metyl-5-(4-metylbenzoyl)-lH-pyrrol-2-yl]-acetyl}-glycin i et utbytte på 72% og med smeltepunkt 197-199°C.

Analyse: beregnet for C-^H^N^: C 64,96; H 5,77

Funnet: C 64,98; H 5,84

Eksempel 7

Ved å følge prosedyren i eksempel 6 og ved å benytte N-{ti-me ty 1-5- (4-metylbenzoyl)-lH-pyrrol-2-yl]-acetyl}-derivatene av aminosyremetylestrene fra eksemplene III og V istedet for metyl-N-{[l-metyl-5-(4-metylbenzoyl)-lH-pyrrol-2-yl]-acetyl}-glycinat og ved å benytte en ekvivalent natriumhydroksyd pr. forsåpbar estergruppe, ble følgende N-{ti-me ty 1-5- (4-benzoyl)-lH-pyrrol-2-yl]-acetyl}derivater av aminosyrer fremstilt:

Eksempel 8

Ved å følge prosedyren i eksempel 6 og ved å benytte N-{[l-metyl-5-(4-metylbenzoyl)-lH-pyrrol-2-yl]-acetyl}-aminosyremetylester fra eksempel 4, ble følgende produkter fremstilt: N{[l-metyl-5-(4-metylbenzoyl)-lH-pyrrol-2-yl]-acetyl}-valin

N-{[l-metyl-5-(4-metylbenzoyl)-lH-pyrrol-2-yl]-acetyl}-leucin

N-{[l-metyl-5-(4-metylbenzoyl)-lH-pyrrol-2-yl]-acetyl}-isoleucin

Eksempel 9

N-HlzmetYl-5-J42metylbenzoYli-lH^sp^rtinsyre

En oppløsning av 13,3 g eller 0,024 mol dibenzyl-N-{[1-metyl-5-(4-metylbenzoyl)-lH-pyrrol-2-yl]-acetyl}-aspartat i 150 ml iseddik ble hydrogenert over 1,3 g 10%-ig palladium på trekull i 2 1/4 time ved romtemperatur under et trykk på 3,5 kg/cm 2hydrogen. Oppløsningsmidlet ble fordampet i vakuum. Resten ble omkrystallisert fra etanol-vann og man oppnådde 8,4 g av et gummirødt faststoff. Dette ble anbragt i ekstraksjonsbeholderen i en Soxhlet-ekstraktor og konti-nuerlig ekstrahert med fuktig eter. Faststoffet ble samlet fra ekstraktet og tørket. Det ble oppnådd 5,1 g rosa N-{[l-metyl-5-(4-metylbenzoyl)-lH-pyrrol-2-yl]-acetyl}-aspartinsyre i et utbytte på 63% med et smeltepunkt 158-160°C.

Analyse: beregnet for CigH20<N>2<C>>6<:>C 61,28; H 5,41; N 7,52

Funnet: C 61,18; H 5,45; N 7,52

Eksempel 10

N_2-{ [ l-metYl-5- i^. zB2^ Yl^ 2^ 2Yl. lzl^ z£Y^ 2} :ZZzYllz^ £2t:Yll~ iY§i2^Y^E^£ lii

En andel på 17,2 g eller 0,028 mol N^-benzyloksykarbonyl-N 2-{[l-metyl-5-(4-metylbenzoyl)-lH-pyrrol-2-yl]-acetyl}-lysinbenzylester ble oppløst i 170 ml metylenklorid og opp-løsningen avkjølt til -70°C i et tørrisbad under nitrogen. Deretter ble 227 ml 1 molar bortribromidoppløsning i metylenklorid tilsatt dråpevis mens man holdt temperaturen i reaksjonsblandingen under -50°C. Reaksjonen ble omrørt mekanisk i 3 timer ved -50°C og deretter tillate oppvarming til 22°C

i løpet av en time. Vann ble deretter tilsatt dråpevis under heftig omrøring. Metylenklorid ble fordampet i vakuum og den vandige blanding gjort basisk til pH 12 med natrium-hydroksydoppløsning, deretter behandlet med 3N saltsyre til pH 7,5. Det faste bunnfall ble filtrert i kald tilstand,

og deretter tørket ved bruk av en fordampningsplate.

Den faste rest ble vasket flere ganger med varm acetonitril og deretter omkrystallisert fra etanol-vann hvorved man oppnådde N 2-{[l-metyl-5-(4-metylbenzoyl)-lH-pyrrol-2-yl]-acetyl}-lysinhydrat (2:1), smeltepunkt 231-233°C under dekomponering som et lett gyllent faststoff, utbytte var 10% av det teoretiske.

nmr (CD3OD/D20): 67,9-7,0 (q, 4H, J-14 Hz); 6,8-6,6 (d,

1H, J=4Hz); 6,3-6,1 (d, 1H, J-4Hz); 3,85 (s, 3HO; 3,75 (s,

2H) ; 3,4-3,15 (ra, 1H) ; 3,1-2,6 (m, 2H) ; 2,4 (2, 3H) ; 2,1-

I, 0 (m, 6H).

Eksempel 11

N_2liIIlmStYl-5- i4-metYlbenzoYli;lH-p_Y£I2il2zYiIl^£2tYiI~ glutamin 20 g eller 0,073 mol [l-metyl-5-(4-metylbenzoyl)-1H-pyrrol-2-yl]-acetylklorid ble tilsatt til en oppløsning av II, 5 g eller 0,079 mol glutamin og 29,3 g eller 0,32 mol natriumbikarbonat i 300 ml vann. Oppløsningen ble omrørt i 3 timer. Faststoffet ble filtrert og kassert. Filtratet ble surgjort med 3N HC1. Faststoffet ble filtrert og vasket med vann. Det faste stoff ble oppløst i acetonrvann (50:50), behandlet med trekull og oppløsningsmidlet fordampet i vakuum. Faststoffet ble ekstrahert med kokende aceton og man oppnådde 4,3 g hvitt krystallinsk N 2-{[l-metyl-5-(4-metylbenzoyl)-lH-pyrrol-2-yl]-acetyl}-glutaminhydrat (10:1), smeltepunkt 194-196°C, i et utbytte på 15,4%.

Analyse: Beregnet for C20H23N3^5 " ^ 'H2^:

C 62,04; H 6,4; H20 0,4 6

Funnet: C 62,08; H 6,01; H20 0,29

Eksempel 12

^2tYiz^ziIiz<m>§£Yiz5zi^Z<m>2tYi2§D52YiiziSzEY££2iz<2>zYliz§2§£Yil_<g>lycinat

En oppløsning av 14,0 g eller 0,139 mol trietylamin i 350 ml etanol fri kloroform ble tilsatt til en suspensjon av 8,3 g eller 0,066 mol glycinmetylesterhydroklorid i 500 ml kloroform. Blandingen ble avkjølt til 0°C og en oppløsning av 16,83 g eller 0,061 mol [l-metyl-5-(4-metylbenzyl)-1H-pyrrol-2-yl]-acetylklorid i 300 ml kloroform ble tilsatt. Blandingen ble deretter vasket suksessivt med fortynnet

HC1, natriumbikarbonatoppløsning, vann og saltoppløsning. Oppløsningen ble tørket over vannfri magnesiumsulfat og oppløsningsmidlet fordampet i vakuum. Faststoffet ble fordampet i kloroform-etylacetat og filtrert gjennom silikagel. Oppløsningsmidlet ble fordampet og resten omkrystallisert to ganger fra etylacetat hvorved man oppnådde 14,9 g eller 68% metyl-N-{[l-metyl-5-(4-metylbenzoyl)-lH-pyrrol-2-yl]-acetyl}-glycinat, med smeltepunkt 149-150°C.

Eksempel 13

^ l% 2- £-^ Y-^ ziLlzB2% Ylz^ zilzB^ Yl. 221^ ?:2Y} :Lzl^ Z2Y£' £' 2lzZzY] :l~

(A) En oppløsning av 361 g eller 1,1 mol metyl-N-{[l-metyl-5-(4-metylbenzoyl)-lH-pyrrol-2-yl]-acetyl}-glycinat i 2 1 etanol og 220 ml 5N NaOH ble oppvarmet under tilbake-løp i 45 minutter. Blandingen ble avkjølt og faststoffet samlet og tørket hvorved man oppnådde 303 g natrium-N-{[l-metyl-5-(4-metylbenzoyl-lH-pyrrol-2-yl]-acetyl}-glycinat, med et smeltepunkt på 281-284°C (dekomponering). (B) En oppløsning av 12 g eller 0,038 mol N-{[l-metyl-5-(4-metylbenzoyl)-lH-pyrrol-2-yl]-acetyl}-glycin og 4,6 g 2-amino-2-(hydroksymetyl-1,3-propandiol i 300 ml 2-propanol ble konsentrert i vakuum og faststoffet samlet og tørket. Det ble oppnådd 6,0 g 2-ammonium-2-(hydroksymetyl)-1,3-propandiol-N-{[l-metyl-5-(4-metylbenzoyl)-lH-pyrrol-2-yl]-acetyl}-glycinat i forholdet 1:1,65 med smeltepunkt 68-73°C. (C) Til en oppløsning av 6,73 g 2-ammonium-2-(hydroksy-metyl) -1,3-propandiol-N-{[l-metyl-5-(4-metylbenzoyl)-1H-pyrrol-2-yl]-acetyl}-glycinat i 50 ml vann ble det tilsatt en mettet oppløsning av 22,64 g CaC^ i vann. Faststoffet ble samlet, vasket med vann og luft og man oppnådde kalsium-N-{[l-metyl-5-(4-metylbenzoyl)-lH-pyrrol-2-yl]-acetyl}-glycinathydrat (1:0,5:1,6), smeltepunkt 267-270°C (dekomponering).

Eksempel 14

Ved å følge prosedyren i det foregående eksempel 13 og ved

å anvende egnede N-{[l-metyl-5-(4-metylbenzoyl)-lH-pyrrol-2-yl]-acetyllaminosyrederivater kan følgende salter oppnås: Natrium-N-{[l-methyl-5-(4-metylbenzoyl)-lH-pyrrol-2-yl]-acetyl}-alaninat.

Natrium-N-{[l-metyl-5-(4-metylbenzoyl)-lH-pyrrol-2-yl]-acetyl}-lysinat.

2-ammonium-2-(hydroksymetyl)-1,3-propandiol-N-{[1-metyl-5-(4-metylbenzoyl)-lH-pyrrol-2-yl]-acetyl}-metioninat.

Kalsium-N-{[l-metyl-5-(4-metylbenzoyl)-lH-pyrrol-2-yl]-acetyl}-aspartat (1:1)

Eksempel 15

acetat

21 ml eller 0,33 mol kloracetonitril ble tilsatt til en suspensjon av 100 g eller 0,28 mol natrium-[5-(4-klorbenzoyl)-l,4-dimetyl-lH-pyrrol-2-yl]-acetat i 1,3 liter DMSO. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 5 timer. Reaksjonsblandingen ble helt i vann. Bunnfallet ble samlet, tatt opp i metylenklorid, vasket med natriumbikarbonatoppløsning og tørket over vannfri kaliumkarbonat. Metylenkloridet ble strippet av i vakuum, man oppnådde et gult faststoff som ved omkrystallisering fra toluen ga 74,6 g cyanometyl-[5-(4-klor-benzoyl ) -1 , 4-dimety 1-lH-pyrrol -2-yl ] -acetat i et utbytte på 80% med smeltepunkt 133-136°C.

Eksempel 16

En oppløsning av 10,0 g eller 0,03 mol cyanometyl-[5-(4-klorbenzoyl)-1,4-dimetyl-lH-pyrrol-2-yl]acetat, 1,6 g eller 0,015 mol alaninmetylesterhydroklorid, 0,3 ml is-

eddik og 2,1 ml eller 0,015 mol trietylamin i 40 ml THF

ble oppvarmet under tilbakeløp i 3 1/2 time. En andre tilsetning av 1,6 g alaninmetylesterhydroklorid og 2,1 ml trietylamin ble gjennomført. Blandingen ble oppvarmet under til-

bakeløp i 2 timer. En fjerde tilsetning av 2,0 g eller 0,018 mol trietylamin ble gjennomført. Blandingen ble oppvarmet under tilbakeløp i 16 timer. Reaksjonsblandingen ble fordelt mellom kloroform og fortynnet saltsyre. De organiske sjikt ble vasket med saltoppløsning og tørket over vann-

fri magnesiumsulfat. Oppløsningsmidlet ble fordampet i vakuum og resten omkrystallisert fra acetonitril hvorved man oppnådde 9,6 g metyl-N-{[5-(4-klorbenzoyl)-1,4-dimetyl-lH-pyrrol-2-yl]acetyl}-alaninat, smeltepunkt 163-165°C, utbytte 85%.

Eksempel 17

Ved bruk av fremgangsmåten ifølge eksempel 16 og ved å benytte de følgende aminosyreestersalter istedet for alaninmetylesterhydroklorid, og å tillate disse å reagere med cyano-metyl- [ 5- (4-klorbenzoyl)-1,4-dimetyl-lH-pyrrol-2-yl]acetat i nærvær av trietylamin, oppnådde man de respektive [5-(4-klorbenzoyl-1,4-dimetyl-lH-pyrrol-2-yl]acetylderivater av aminosyreestrene:

Eksempel 18

Ved bruk av fremgangsmåten ifølge eksempel 16 med på ny å benytte de følgende aminosyreestere istedet for alanin-metylester, og ved å bringe disse til reaksjon med' cyanometyl[5-(4-klorbenzoyl)-1,4-dimetyl-lH-pyrrol-2-yl]-acetat i nærvær av trietylamin, oppnådde man de følgende [5-(4-klorbenzoyl)-1,4-dimetyl-lH-pyrrol-2-yl]-acetylamino-syreestere:

Eksempel 19

2i2§tY<l>iN-{X5-^4-klorbenzoYl]_-lYll-acetylIslutamat

Til en suspensjon av 30,45 g eller 0,098 mol [5-(4-klor-benzoyl)-1,4-dimetyl-lH-pyrrol-2-yl]eddiksyre i 120 ml tørr THF ble det tilsatt 1,4 ml eller 0,098 mol N-metylmorfolin. Blandingen ble avkjølt til -65°C. 10 ml eller 0,098 mol etylklorformiat i 50 ml tørr THF ble tilsatt dråpevis til reaksjonsblandingen mens man holdt temperaturen ved -65°C. Blandingen ble omrørt i 1/2 time etter at tilsetningen var ferdig.

Deretter ble 32,32 g eller 0,15 mol L-glutaminsyredimety1-esterhydroklorid fordelt mellom 150 ml 20% kaliumkarbonat og 275 ml tetrahydrofuran. Tetrahydrofuransjiktet ble separert og tørket over 4A-molekylsikter og vannfri natriumsulfat.

Den resulterende L-glutaminsyredimetylesteroppløsningen ble tilsatt til reaksjonsblandingen så hurtig som mulig mens man

holdt temperaturen ved -65°C. Den ble omrørt i 3 1/2

time ved -65°C og deretter oppvarmet til romtemperatur og omrørt over natten. Reaksjonsblandingen ble helt i 3N saltsyre, ekstrahert til kloroform, vasket med natriumbi-karbonatoppløsning, vann, saltoppløsning og tørket over vannfri natriumsulfat. Kloroformen ble fordampet i vakuum hvorved man oppnådde et gult faststoff, dimetyl-N-{[5-(4-klorobenzoyl)-1,4-dimetyl-lH-pyrrol-2-yl]acetyl}-glutamat i et utbytte av 45,7% og mediet smeltepunkt på 129-130,5°C.

Eksempel 2 0

Met¥l-N{ [ 5ii4-klorbenzoyl izls. lz^ hE2t:Y. lzl^ z2Y- £- £2lzZzYll~ acetyl2i2iY£iD§£

22,6 ml eller 0,16 mol trietylamin ble tilsatt til en suspensjon av 6,78 g eller 0,054 mol glycinmetylesterhydroklorid i 200 ml kloroform av spektralkvalitet. Blandingen ble av-kjølt til 0°C og en oppløsning av 16,8 g eller 0,54 mol [5-(4-klorbenzoyl)-1,4-dimetyl-lH-pyrrol-2-yl]-acetylklorid i 80 ml kloroform ble tilsatt langsomt. Blandingen ble om-rørt ved romtemperatur over natten. Oppløsningen ble vasket suksessivt med fortynnet saltsyre og vann og tørket over vannfri magnesiumsulfat. Oppløsningsmidlet ble fordampet i vakuum. Resten ble omkrystallisert suksessivt fra metanol og acetonitril og man oppnådde 9,2 eller 47% krystallinsk metyl-N-{[5-(4-klorbenzoyl)-1,4-dimetyl-lH-pyrrol-2-yl]-acetyl}-glycinat med et smeltepunkt på 198-201°C.

Eksempel 21

<N>=££<5->i<4-klorb>enzoy<l>)_-<l>i<4>2<d>i glycin

Til en oppløsning av 8,55 g eller 0,0236 mol metyl-N-{[5-(4-klorbenzoyl)-1,4-dimetyl-lH-pyrrol-2-yl]-acetyl}-glycinat i 50 ml tilbakeløpskokende metanol, ble det tilsatt 49,2 mol 0,5 N natriumhydroksyd. Oppløsningen ble oppvarmet under tilbakeløp i 30 minutter. Blandingen ble helt i fortynnet saltsyre. Bunnfallet ble samlet og tørket. Dette ble omkrystallisert suksessivt fra etanol og metanol og man opp nådde 6,2 g eller 75% hvitt krystallinsk N-{[5-(4-klorbenzoyl)-l,4-dimetyl-lH-pyrrol-2-yl]-acetyl}-glycin med et smeltepunkt på 206-208°C.

Analyse: Beregnet for C17H17C1N204: C 58,54; H 4,91

Funnet: C 58,42; H 5,03

Eksempel 22

Ved bruk av fremgangsmåten ifølge eksempel 21 og ved å benytte N-[5-(4-klorbenzoyl)-1,4-dimetyl-lH-pyrrol-2-yl]-acetyl-derivatene av aminosyremetylestrene fra eksemplene 16, 17 og 19 istedet for metyl-N-[5-(4-klorbenzoyl)-1,4-dimetyl-lH-pyrrol-2-yl]-glycinat og ved å benytte en ekvivalent natriumhydroksyd for hver forsåpbar estergruppe, ble følgende N-[5-(4-klorbenzoyl)-1,4-dimetyl-lH-pyrrol-2-yl]-acetyIderi-vater av aminosyrene fremstilt.

Eksempel 23

Ved å benytte fremgangsmåten ifølge eksempel 21 og ved å benytte N-[5-(4-klorbenzoyl)-1,4-dimetyl-lH-pyrrol-2-yl]-acetyl-aminosyremetylestrene fra eksempel 18, kan følgende produkter oppnås: N-{[5-(4-klorbenzoyl)-1,4-dimetyl-lH-pyrrol-2-yl]-acetyl}-valin

N-{[5-(4-klorbenzoyl)-1,4-dimetyl-lH-pyrrol-2-yl]-acetyl}-leucin

N-{[5-(4-klorbenzoyl)-1,4-dimetyl-lH-pyrrol-2-yl]-acetyl}-isoleucin

Eksempel 24

2^5liil3si2£2§222Yiiliiål^im§tYizISzPYIE2iz2zYllzS2§tYl }-lY5iS^Y^£5£_låi§i

En oppløsning av 3,7 g eller 5,7 mmol N^-benzyloksykarbonyl-N 2- {[5-(4-klorbenzoyl)-1,4-dimetyl-lH-pyrrol-2-yl]-acetyl}-lycinat i 75 ml metylenklorid ble avkjølt til -70°C. En oppløsning av 35,7 ml IM bortribromid i metylenklorid ble tilsatt i andeler og blandingen omrørt ved -70°C i 3 timer. Reaksjonen ble tillatt oppvarmet til romtemperatur i løpet av 1 time. Vann ble tilsatt. Det vandige sjikt ble justert til en pH-verdi på 7,5 ved tilsetning av IN NaOH-oppløsning. Utfelt faststoff ble samlet og omkrystallisert fra etanol: vann i et forhold på 2:1, hvorved man oppnådde 1,5 g eller 50% N -{[5-(4-klorbenzoyl)-1,4-dimetyl-lH-pyrrol-2-yl]-acetyl}-lysinhydrat (5:8) med et smeltepunkt på 252-253°C.

Analyse: Beregnet for C21H26C1N304: C 56,19; H 6,20; N 9,36

Funnet: C 55,97; H 6,59; N 9,07

Eksempel 2 5

^ziI^zilz3si2I22D22Yiiziiiz^in}2£YlzI5zBY£I22:Z2zYllzS£§iYiIz glutamin

En oppløsning av 30,5 g eller 0,1 mol [5-(4-klorbenzoyl)-l,4-dimetyl-lH-pyrrol-2-yl]-acetylklorid i 150 ml dioksan ble tilsatt langsomt ved 0-5°C til en suspensjon av 5,88 g eller 0,15 mol magnesiumoksyd og 14,3 g eller 0,1 mol L-glutamin i 300 ml vann. Den resulterende gule suspensjon ble omrørt ved romtemperatur i 64 timer. Blandingen ble surgjort med IN saltsyre og avkjølt. Utfellingen ble samlet, vasket med vann og tørket i luft. Den ble omkrystallisert tre ganger fra 2-propanol hvorved man oppnådde 10,8 g lys gyllenbrun faststoff som ble underkastet kromatografi på silikagel. Kolonnen ble eluert med kloroform:eddiksyre: metanol i forholdet 95:0,5:4,5). Fraksjonen som inneholdt hovedforbindelsen ble konsentret til tørr tilstand og resten omkrystallisert fra aceton:vann i forholdet 2:1 hvorved man oppnådde 4,5 g eller 10% blek gult krystallinsk N-{[5-(4-klorbenzoyl)-1,4-dimetyl-lH-pyrrol-2-y1]-acetyl}-glutamin;hydrat i forholdet 1:1 og med et smeltepunkt på 186-188°C.

Analyse: Beregnet for C20H22ClN2O,- 'H-jO:

C 54,86; H 5,52; H20 4,11 Funnet: C 54,75; H 5,42; H20 4,30 Eksempel 26 §§iter_ay_N-n54-klorbenzoyl Yll~acetyl}-aminosyrer (A) Ved å behandle acylaminosyre fra eksempel 21 med 5N NaOH og å filtrere faststoffet, kan følgende natriumsalt oppnås; natrium-N-{[5-(4-klorbenzoyl)-1,4-dimety1-lH-pyrrol-2-yl]-acetyl}-glycinat. Alkalimetallsaltene av syrene fra eksemplene 22-25 kan oppnås på tilsvarende måte. (B) Ved å behandle acylaminosyrene fra eksempel 21 med 2-amino-2-(hydroksymetyl)-1,3-propandiol i alholisk oppløs-ning og konsentrering av oppløsningen, kan følgende tro-metaminsalt fremstilles: 2-ammonium-2-hydroksymetyl-l,3-propandiol-N-{[5-(4-klorbenzoyl)-1,4-dimetyl-lH-pyrrol-2-yl]-acetyl}-alaninat. Trometaminsaltene av syrene fra eksemplene 22-25 kan oppnås på tilsvarende måte. (C) Ved å oppløse acylaminosyrene fra eksempel 21 i en ekvivalent vandig metamin og tilsetning av vandig kalsium-kloridoppløsning, kan følgende kalsiumsalt oppnås: kalsium-N-{[5-(4-klorbenzoyl)-1,4-dimetyl-lH-pyrrol-2-yl]-acetyl}-metioninat i et forhold på 1:2. Kalsiumsaltene av syrene fra eksemplene 22-25 kan oppnås på tilsvarende måte.

Claims

1. Fremgangsmåte for fremstilling av en pyrrol-2-acetylamino-syreforbindelse med den følgende formel:

eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, hvori R" er H, C1 _6 -alkyl, (CH2 )n C02 H, CH2CH"2SCH3, (CH2)4NH2 eller (CH2 )2 CONH2 ; n er 1 eller 2; og Y er hydrogen og Q er CH3 eller Y er CH3 og Q er Cl, karakterisert ved at den gjennomføres ved følgende sekvenser:

der X er halogenid, -OCH2 CN, eller -OCOO-alkyl, R er H, alkyl, (CH2) CC^R' , CH2 CH2 SCH3 , (CH2 ) NHCbZ, eller (CH2 )2 CONH2' R' er alkyl eller benzyl, og n og R" er som angitt ovenfor for formel (5).

2. Pyrrol-2-acetylaminosyreforbindelse med formel (5):

eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, karakterisert ved at R" er H, C g-alkyl, (C <H>2 )n C02 H, CH2 CH2 SCH3 , (CH2)4NH2 eller (CH2 )2 CONH2 ; n er 1 eller 2; og Y er hydrogen og Q er CH3 eller Y er CH3 og Q er Cl.

3 . Forbindelse ifølge krav 2, karakterisert ved at den er natrium-N-{[l-metyl-5-(4-metylbenzoyl) - lH-pyrrol-2-yl]-acety1}-glycinat.

4 . Forbindelse ifølge krav 2, karakterisert ved at den er N-{[5-(4-klorbenzoyl)-1,4-dimetyl-lH-pyrrol-2-y1]-acetyl}-aspartinsyre.

5. Amidesterforbindelse, karakterisert ved at den har formel.(6):

der R er H, alkyl, (CH2) CC^R1, CH2 CH2 SCH3 , (CH^NHCbZ eller (CH2 )2 CONH2; n er 1 eller 2; R <1> er alkyl eller benzyl; og Y er hydrogen og Q er CH3 eller Y er CH3 og Q er Cl.

6. Forbindelse ifølge krav 5, karakterisert ved at den er metyl-N-{[5-(4-klorbenzoyl)-1,4-dimetyl-lH-pyrrol-2-yl]-acetyl}-metioniat.