DK159149B - Analogifremgangsmaade til fremstilling af glutaminderivater. - Google Patents
Analogifremgangsmaade til fremstilling af glutaminderivater. Download PDFInfo
- Publication number
- DK159149B DK159149B DK500081A DK500081A DK159149B DK 159149 B DK159149 B DK 159149B DK 500081 A DK500081 A DK 500081A DK 500081 A DK500081 A DK 500081A DK 159149 B DK159149 B DK 159149B
- Authority
- DK
- Denmark
- Prior art keywords
- glutamine
- lower alkyl
- compound
- formula
- amino
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D209/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
- C07D209/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom condensed with one carbocyclic ring
- C07D209/44—Iso-indoles; Hydrogenated iso-indoles
- C07D209/48—Iso-indoles; Hydrogenated iso-indoles with oxygen atoms in positions 1 and 3, e.g. phthalimide
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C205/00—Compounds containing nitro groups bound to a carbon skeleton
- C07C205/49—Compounds containing nitro groups bound to a carbon skeleton the carbon skeleton being further substituted by carboxyl groups
- C07C205/56—Compounds containing nitro groups bound to a carbon skeleton the carbon skeleton being further substituted by carboxyl groups having nitro groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings and carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Description
DK 159149 B
Den foreliggende opfindelse angår en analogifremgangsmåde til fremstilling af hidtil ukendte glutaminderivater med den almene formel I
0 0 Π II /t-a^xcoz hooc-chch2ch2cnh-//_^) 1 nh2 5 hvor X betegner i) alkylen med formlen -(CH2)n-, hvor n er et helt tal fra 1 til 4, eller vinylen, eller ii) en gruppe med formlen-C(R*)(RZ)-, hvor R^· og R^ kan have samme eller forskellig betydning og betegner hydrogen eller lavere alkyl, med det forbehold, at mindst 10 ét af symbolerne R^ og Rz betegner lavere alkyl; og Z betegner hydrogen eller lavere alkyl, samt ikke-toxiske salte deraf. Fremgangsmåden er ejendommelig ved det i krav l's kendetegnende del angivne.
Det har tidligere vist sig, at visse glutaminderivater har immunosupprimer ende aktivitet (offentliggjorte japanske patentansøgninger nr.
15 36428/1980 og 36454/1980). Forbindelsen fra offentliggjort japansk patentansøgning nr. 36428/1980, nemlig N-(m-methoxyphenyl)-L-gluta-min, udviser virkning med hensyn til forsinkelse af hypersensitivi-tet, når den administreres intraperitonealt, hvorimod den ikke er så virksom, når den administreres oralt. I modsætning hertil udviser de 20 ved fremgangsmåden ifølge den foreliggende opfindelse fremstillede forbindelser signifikante virkninger ved både intraperitoneal og oral administration, jfr. test 3 nedenfor. Endvidere udviser de ved fremgangsmåden ifølge den foreliggende opfindelse fremstillede forbindelser signifikante virkninger over for adjuvant arthritis i rotter, 25 jfr- test 4 nedenfor, hvorimod den fra offentliggjort japansk patentansøgning nr. 36454/1980 kendte forbindelse ikke udviser nogen sådan virkning overhovedet.
Udtrykket "immunomodulerende aktivitet" omfatter her både immuno-supprimerende aktivitet og immunostimulerende aktivitet.
DK 159149 B
2
Fig. 1, 4., 8, 13, 15, 17 og 20 er diagrammer, der viser NMR-spektrene for de i eksemplerne fremstillede produkter, og fig. 2, 3, 5, 6, 7, 9-12, 14, 16, 18, 19 og 21-23 er diagrammer, der viser IR-spektrene for de i eksemplerne fremstillede produkter.
5 De har omhandlede forbindelser er sådanne med den ovenstående formel I og ikke-toxiske salte deraf. Disse forbindelser omfatter fx gluta-minderivater med den almene formel II
0
0 11 || §—^.XCOH
hooc-chch2ch2cnh-<vj^ 11 NH2 10
hvor X har den i sammenhæng med formlen I angivne betydning, og ikke-toxiske salte deraf, samt glutaminderivater med den almene formel III
0
O II
H rvXC0Y
H00C-CHCH2CH2CNH-^ 'y m nh2 15 hvor X har den i sammenhæng med formlen I angivne betydning, og Y betegner lavere alkyl, samt ikke-toxiske salte deraf.
Lavere alkyl som betydning for Y i formel III er alkyl med 1-4 car-bonatomer, som omfatter methyl, ethyl, propyl, butyl, isopropyl, 20 sek.butyl og tert.butyl. 1 formel I kan glutamindelen være en hvilken som helst af L-, DL-eller D-isomererne.
t 3 DK 15914?
Glutaminderivaterne med formlen I omfatter fx: 0 1) /7~Λ II (L-isomer) NH -(/ y- ch2coh
Glu N-(4-carboxymethylphenyl)-L-glutamin 0 2) j—, II (L- isomer) |- NH -(/ V)- CH2COC2H5
Glu 5 N-(4-ethoxycarbonylmethylphenyl)-L-glutamin 3) 0 (racemat) |- NH ch2 - coc2h5
Glu N-(4-ethoxycarbonylmethylphenyl)-DL-glutamin 4) ® (L-isomer) p NH CH2 - COCH3
Glu N-(4-methoxycarbonylmethylphenyl)-L-glutamin 10 5) 0 (L-isomer) p NH O- CH2C0(n-C^Hy)
Glu N-(4-n-propyloxycarbonylmethylphenyl)-L-glutamin DK 159149 B i 4 6) q (L-isomer) |- NH CH2C0(n-C^Hg)
Glu N-(4-n-butyloxycarbonylmethylphenyl)-L-glutamin ” r”-Q s
Glu CH2COC2H5 N-(3-ethoxycarbonylmethylphenyl)-L-glutamin
5 8) |- HN
Glu CH2COC2H5 0 N-(2-ethoxycarbonylmethylphenyl)-L-glutamin 9) 0 |- HN CH2CH2C0C2H5
Glu N-[4-(2-ethoxycarbonylethyl)phenyl]-L-glutamin 10) 0 |- HN CH2CH2CH2COC2H5
Glu 10 N-[4-(3-ethoxycarbonyl-n-propyl)phenyl]-L-glutamin
DK 159149 B
5
O
U) /77\ II
p m X—./ CH = CH - coc2H5
Glu N-[4-(2-ethoxycarbonylvinyl)phenyl]-L-glutamin 12) (D-isomer) 0 p 'NH CH2COC2H5
Glu N-(4-ethoxycarbonylmethylphenyl)-D-glutamin CH3 5 13) CH2 0 p \'H c - COC2H5
Glu N-[4-(l-ethoxycarbonyl-n-propyl)phenyl]-L-glutamin CH3 0 14) f Sli C ' 'COC2H5
Glu CH3 N-[4-(l-ethoxycarbonyl-l-methylethyl)phenyl]-L-glutamin CH3 0
15) /7Λ 1 H
P NH y- CH - COC2H3
Glu 10 N-[4-(1-ethoxycarbonylethyl)phenyl]-L-glutamin CH2CH3
16^ p XH CH COOH
Glu N-[4-(1-carboxy-n-propyl)phenyl]-L-glutamin
DK 159149 B
6 I ovenstående strukturformler forkortes glutaminsyreresten HOOC-C(NH2)HCH2CH2CO- som "Glu" for enkeltheds skyld.
Også af hensyn til kortheden kan de enkelte forbindelser nedenfor udtrykkes ved det ovenstående nummer, fx "forbindelse 1)".
5 Ikke-toxiske salte af disse L-, D- eller DL-glutaminderivater er farmaceutisk tolerable salte, der fx omfatter salte med en uorganisk base såsom et alkalimetal- eller jordalkalimetal, fx natrium, kalium eller calcium; salte med en organisk base såsom procain eller N,N'-dibenzylethylendiamin; eller syreadditionssalte såsom hydrochloridet, 10 sulfatet, fumaratet, maleatet eller formiatet.
De her omhandlede forbindelser kan fremstilles på nedenstående måde.
For nemheds skyld vil fremstillingen af de her omhandlede forbindelser blive beskrevet i to grupper af forbindelserne med formlen II (i det nedenstående benævnt "her omhandlede carboxylsyrer") og sådanne 15 med formlen III (i det nedenstående benævnt "her omhandlede estere").
De her omhandlede carboxylsyrer kan fremstilles ved forskellige syntesefremgangsmåder. De kan fx let fremstilles ud fra en tilsvarende ester ved konventionel esterhydrolyse.
De her omhandlede estere kan fremstilles ved forskellige fremgangs-20 måder. De kan fx fremstilles ved at omsætte et aminobeskyttet gluta-minsyreanhydrid med et anilinderivat med den almene formel IV
O IV
h2k -£V*«r hvor X og Y har den i sammenhæng med formlen III angivne betydning, efterfulgt af eliminering af aminobeskyttelsesgruppen. 1
En anden fremgangsmåde til fremstilling af de her omhandlede estere omfatter omsætning af glutaminsyre, i hvilken både o-carboxyl- og α-aminogrupperne er beskyttede, med et anilinderivat med formlen IV i nærværelse af et aktiveringsmiddel eller omsætning af et reaktivt
DK 159149 B
7 derivat ved 7-carboxylgruppen af en sådan o-carboxyl- og a-aminobe-skyttet glutaminsyre med det ovenstående anilinderivat efterfulgt af eliminering af amino- og carboxylbeskyttelsesgrupperne.
Et hvilket som helst aktiveringsmiddel.eller reaktivt derivat, der 5 kan anvendes inden for den konventionelle peptidsyntese, kan anvendes. Som eksempler på sådanne aktiveringsmidler kan nævnes dicyclo-hexylcarbodiimid eller carbonyldiimidazol, og eksempler på reaktive derivater er blandede syreanhydrider eller aktiverede estere.
Beskyttelsesgruppen for amino kan være en hvilken som helst gruppe, 10 der kan elimineres senere under milde betingelser, og som anvendes inden for den konventionelle peptidsyntese. Eksempler på sådanne grupper omfatter benzyloxycarbonylgruppen, der kan elimineres med hydrogenbromid eller ved katalytisk reduktion, phthalylgruppen, der kan elimineres med hydrazin, og tert.butoxycarbonyl- og formylgrup-15 perne, der kan elimineres under svagt sure betingelser.
Beskyttelsesgruppen for carboxyl omfatter estere med benzyl eller derivater deraf, som elimineres ved katalytisk reduktion, tert.butyl-estere, der er stabile over for alkali og elimineres ved hydrolyse med en syre.
20 N-(4-Ethoxycarbonylmethylphenyl)-L-glutamin kan fx fremstilles ved begge synteser vist i nedenstående reaktionsskema.
O
i ) + H2N-^^CH2C0C2H5 ? i? ° -» yN-CHCH2CH2CNH-^^-CH2C0C2H5
Jj COOH
o o H2NNH2 »H20 ^ H00C-CHCH2CH2CNH-^^-CH2C0C2H5 nh2
DK 159149 B
8
O O
ii) L-(^)-CH20CCHCH2CH2C00H .ispBuOCCl > ®Jjy^®JdSyre“ hnco-ch2-^~^
O
o
Blandet syreanhydrid + H2N-^"~^-ch2coc2H3 o o o CH20CCHCH2CH2CNH-^~~^-CH2C0C2H3 hncoch2-/7v\ II \=/ 0 o _ o H2* H00C-CHCH2CH2CNH-//^-CH2C0C2H3
Palladiumsort „ I \rr/ -* nh2 På lignende måde kan N-[4-(l-ethoxycarbonyl-n-propyl)phenyl]-L-glutamin fx fremstilles ad nedenstående syntesevej.
° ? /77\ 11 „ isoBuOCCl v Blandet syre- L-//_M-CH20CCHCH2CH2C00H —-—* anhydrid HNC0CH2-^~^
O
CH2CH3
Blandet syre- /—v I
anhydrid + h2N-// M-CH-C00C2H3 O O CH2CH3 _> -CH20CCHCH2CH2CNH -chcooc2h5 hncoch2-^J^ o o CH2CHo _JL_^ HOOC-CHCH2CH2CNH-^V)-CHCOOC2H3 nh2
DK 159149 B
9
Anilinderivaterne med den ovenstående formel IV, der kan anvendes som udgangsmaterialer, kan fremstilles ved forskellige synteseveje.
Eksempler på sådanne synteseveje vises nedenfor i to grupper med hensyn til X.
5 1) Når X betegner alkylen med formlen -(CH2)n* eller vinylen: 0 ?\ X‘:0H . Reduktion 02NΧ°°Η
+HOY J +HOY
Esterificering Esterificering lo lo
h2n-{7\ *"oy c Reduktlon o2N-/^r X“Y
Reduktionen kan udføres ved katalytisk hydrogenering under anvendelse af palladium, palladiumsort eller palladium på kul. Alternativt 10 kan reduktion med jernpulver/ammoniumchlorid eller lignende anvendes.
Esterificeringen kan udføres ved opvarmning sammen med udgangsalkoholen i nærværelse af saltsyre, svovlsyre eller p-toluensulfonsyre, om nødvendigt efterfulgt af azeotrop dehydratisering i nærværelse af et azeotropt middel, hvorved den ønskede ester let fås.
15 Forbindelsen 0 H2N-<Q-CH - CHI0C2H5 kan let fås ved reduktion af
DK 159149 B
10 o 02N CH = CHCOC2H5 med jernpulver/ammoniumchlorid.
2) Når X betegner en gruppe med formlen -CiF^KR2)-: cooc2h5 C1^°2 i ) R - CH aH > —-* i COOC2H3
COOC2H5 02N^3-C - R
cooc2h5 (hvor R betegner methyl eller ethyl) C00H r 1) NaOH. . . /ΓΛ 1 Δ . /7"Λ 1
2) H+ x 02N-// \\-C-R -^ 02N-// 'y-CHCOOH
COOH
R
EtOH % /Γ~λ I H2 -—-> 02ffY/ M-ch-cooc2h5 ->
Esterificering '—' Palladiumsort
R
h2n^>_chcooc2h5 5 ii)
/—\ i) NaH
°2N \(_/_CH2C00C2H5 2) ich3 CH3 ^H3 02N-/r^)-C-COOC2H5 -r* H2N-^J^-C-CQ0C2H5 \szy 1 Palladiumsort CH3 CH3
DK 159149 B
11
Et diethyl 2-alkyl-2-(4-nitrophenyl)malonat, der er udgangsmateriale i ovenstående fremgangsmåde i), kan fremstilles ved at omsætte et 2-alkylmalonat med en stærk base såsom natriumhydrid i N,N-dimethylfor-mamid og derefter med p-halogennitrobenzen.
5 Hydrolyse af den resulterende ester kan udføres ved omsætning med natriumhydroxid, kaliumhydroxid eller lignende i vand eller en alkohol, fx methanol eller ethanol, eller en blanding deraf.
En o-alkyl-nitrophenyleddikesyre kan fremstilles ved at opvarme et diethyl 2-alkyl-2-(4-nitrophenyl)malonat sammen med overskydende 10 natriumhydroxid eller kaliumhydroxid i vand eller en alkohol, fx methanol eller ethanol, eller en blanding deraf, eller ved at opvarme en 2-alkyl-2-(4-nitrophenyl)malonsyre sammen med en egnet syre såsom saltsyre, svovlsyre eller p-toluensulfonsyre i et egnet opløsningsmiddel såsom en alkohol, fx methanol eller ethanol, benzen eller 15 toluen.
Den efterfølgende esterificering kan udføres ved opvarmning sammen med ethanol i nærværelse af saltsyre, svovlsyre eller p-toluensulfon-syre.
Reduktionen af nitrogruppen i næste trin kan udføres enten ved kata-20 lytisk hydrogenering under anvendelse af palladium eller palladiumsort eller reduktion med jernpulver/ammoniumchlorid.
Ethyl 2-methyl-2-nitrophenylpropionat, der er udgangsmateriale for ovenstående fremgangsmåde ii), kan fås ved at omsætte ethylnitro-phenylacetat med en stærk base såsom natriumhydrid i N,N-dimethyl· 25 formamid og derefter med overskydende methyliodid.
Den efterfølgende reduktion af nitrogruppen kan udføres enten ved katalytisk hydrogenering under anvendelse af palladium eller palladiumsort eller reduktion med jernpulver/ammoniumchlorid.
De ved disse fremgangsmåder fremstillede ønskede glutaminderivater 30 kan renses ved omkrystallisation, ioribytningsbehandling, chromatogra-
DK 159149 B
12 fi, behandling med aktivkul eller lignende i overensstemmelse med konventionel praksis i organisk kemi.
De her omhandlede forbindelser er værdifulde som immunomodulerende midler til anvendelse i terapi og forebyggelse af forskellige syg-5 domme forårsaget af immunoreaktioner.
Selv om farmaceutiske præparater til immunomodulering, som indeholder mindst én af de her omhandlede forbindelser, i det væsentlige kan bestå af én eller flere sådanne forbindelser, anvendes de her omhandlede forbindelser generelt i overensstemmelse med sædvanlig frem-10 gangsmåde i blanding med ét eller flere hjælpemidler og/eller farmaceutisk acceptable bærere i form af konventionelle farmaceutiske præparater, fx tabletter, fine granuler, pulvere, granuler, kapsler, sirupper til oral administration og salver, linimenter, suppositorier eller injektionspræparater til parenteral administration.
15 Formuleringen af disse præparater kan variere afhængig af administrationsvejen, administrationsplanen og lignende.
Dosis kan variere afhængig af patientens alder, tilstand og vægt og symptomer, arten eventuel samtidig behandling, behandlingsfrekvensen og arten den ønskede effekt.
20 Den daglige terapeutiske dosis ligger generelt i området fra 0,1 til 100 mg/kg for parenteral administration og i området fra 1 til 1000 mg/kg for oral administration.
De farmaceutiske præparater til immunomodulering, som indeholder mindst én af de her omhandlede forbindelser, kan endvidere fx inde-25 holde ét eller flere immunosupprimerende eller immunostimulerende midler eller- kan anvendes sammen med sådanne midler.
De her omhandlede forbindelser har lav toxicitet og er nyttige som immunomodulerende midler til anvendelse i terapien og forebyggelse af forskellige sygdomme forårsaget af immunoreaktioner.
DK 159149 B
13
De farmaceutiske præparater til inununomodulering, som indeholder én eller flere af de her omhandlede forbindelser, kan anvendes til terapi, fx ved følgende sygdomme: autoimmunsygdomme såsom rheumatoid arthritis, systemisk lupus erythematodes (SLE), collagensygdomme osv; 5 allergiske sygdomme såsom asthma, cancer eller bakterielle infektionssygdomme.
En mutagenicitetstest for forbindelse (2) (ca. 100 /tg/plade) under anvendelse af 6 stammer som angivet i "the Labor Safety and Hygiene Law" i Japan som teststammer viser, at den har negativ mutagenicitet 10 inden for et sådant forsøg.
Den foreliggende opfindelse belyses nærmere ved nedenstående fremstillinger og eksempler.
FREMSTILLING 1 p-Aminophenyl i 15%'s hydrogenchlorid-ethanol opvarmes under tilba-15 gesvaling. Efter fjernelse af ethanol ved destillation ekstraheres remanensen med ethylacetat, og ekstrakten vaskes med vand, mættet natriumbicarbonatopløsning og vand i den nævnte rækkefølge og tørres. Ethylacetatet afdampes derefter, hvorved fås p-aminophenyleddikesyre-ethylester.
20 På lignende måde fås methyl-, n-propyl- og n-butylesterne ud fra hydrogenchlorid og de tilsvarende alkoholer.
m- eller o-nitrophenyleddikesyre ethylesterificeres i 15%'s hydrogenchlorid- ethanol, og den resulterende ethylester hydrogeneres med palladiumkatalysator i ethanol, hvorved fås m- eller o-aminophenyled-25 dikesyreethylester.
På lignende måde fås også 4-(p-aminophenyl)butyrat.
På lignende måde underkastes p-nitrokanelsyre ethylesterificering og derefter hydrogenering med palladiumkatalysator, hvorved fås ethyl 3-(p-aminophenyl)propionat. Når hydrogeneringen udføres ved opvarmning
DK 159149 B
14 under tilbagesvaling i jernpulver-ammoniumchlorid-vand-methanol, er det resulterende produkt ethyl p-aminocinnamat.
EKSEMPEL 1 N-(4-Ethoxycarbonylmethylphenyl)-L-glutamin (Forbindelse (1)) 5 a) Til en blanding af 250 ml tetrahydrofuran og 250 ml Ν,Ν-dimethyl-formamid sættes 74,28 g (0,2 mol) N-carbobenzoxy-L-glutaminsyre-a-benzylester og 28 ml (0,2 mol) triethylamin. Under omrøring med isafkøling tilsættes derefter dråbevis 26,4 ml (0,2 mol) isobutylch-lorcarbonat, og der omrøres i 15 minutter. Derefter tilsættes en 10 opløsning af 35,84 g (0,2 mol) ethyl p-aminophenylacetat i 50 ml tetrahydrofuran og 50 ml N,N-dimethylformamid, og blandingen omrøres i 30 minutter under isafkøling og derefter i 8 timer ved stuetemperatur.
Reaktionsopløsningsmidlet afdampes i vakuum, og til remanensen sættes 15 1200 ml ethylacetat og 200 ml vand. Vandfasen fjernes. Ethylacetat- fasen vaskes med 2N saltsyre, mættet natriumbicarbonatopløsning og mættet natriumchloridopløsning i den nævnte rækkefølge og tørres over vandfrit magnesiumsulfat. Efter afdampning af ethylacetatet i vakuum omkrystalliseres remanensen af ethylacetat-n-hexan, hvorved 20 fås 96,16 g (90,7% af det teoretiske) af et mellemprodukt.
Til 53,26 g (0,1 mol) af det ovenfor vundne mellemprodukt sættes 1600 ml ethanol og 600 ml vand, og der opvarmes, indtil der dannes en opløsning. Derefter tilsættes 0,5 g palladiumsort, og blandingen underkastes hydrogenering ved atmosfæretryk og 60°C til eliminering 25 af beskyttelsesgruppen.
Palladium frafiltreres varmt, og filtratet behandles med aktivkul og inddampes.
De udfældede krystaller isoleres derefter ved filtrering, vaskes med isvand og tørres, hvorved fås 28,57 g (93% af det teoretiske) N-(4-30 ethoxycarbonylmethylphenyl)-L-glutamin, smeltepunkt 179,8-180,5°C.
DK 159149 B
15
Analyse:
Beregnet for ci5H2oN2°5: C 58,43 H 6,54 N 9,09.
Fundet: C 58,59 H 6,60 N 9,23.
[a]2jj - +29,5° (c - 1 i 2N HC1).
5 NMR- og IR-spektrene for produktet er vist henholdsvis fig. 1 og fig.
2.
NMR-Spektret måles ved stuetemperatur i trifluoreddikesyre under anvendelse af tetramethylsilan som reference, medens IR-spektret måles i kaliumbromid.
10 (Målingen af disse spektre udføres også på samme måde i de nedenstående eksempler).
b) Til 100 ml tetrahydrofuran sættes 7,43 g (0,02 mol) N-carbobenz-oxy-L-glutaminsyre-a-benzylester og 3,58 g (0,02 mol) ethyl p-amino-phenylacetat, og under isafkøling og omrøring tilsættes 2,2 ml (0,024 15 mol) phosphoroxychlorid og omrøres i 15 minutter. En opløsning af 6,4 ml (0,046 mol) triethylamin i 30 ml tetrahydrofuran tilsættes dråbevis i løbet af 25 minutter under isafkøling, og blandingen omrøres i 1 time under køling og i 3 timer ved stuetemperatur.
Efter at tetrahydrofuranet er afdampet i vakuum, sættes ethylacetat 20 til remanensen. Ethylacetatopløsningen vaskes derefter med vand, 2N saltsyre, mættet natriumbicarbonatopløsning og mættet natriumchlorid-opløsning i den nævnte rækkefølge og tørres over vandfrit magnesiumsulfat. Derefter afdampes ethylacetatet i vakuum, og remanensen omkrystalliseres af ethylacetat-n-hexan, hvorved fås 6,5 g (63% af 25 det teoretiske) af et mellemprodukt.
Mellemproduktet underkastes eliminering af beskyttelsesgruppen som beskrevet i a), hvorved fås 3,4 g (90% af det teoretiske) N-(4-eth-oxycarbonylmethylphenyl)-L-glutamin.
c) Til 200 ml tetrahydrofuran sættes 5,18 g (0,02 mol) N-phthalyl-L-30 glutaminsyrearihydrid og 3,58 g (0,02 mol) ethyl p-aminophenylacetat,
DK 159149 B
16 og blandingen opvarmes under tilbagesvaling i 3 timer. Tetrahydrofu-ranopløsningsmidlet afdampes derefter i vakuum.
Til remanensen sættes 200 ml ethanol og 1,33 ml (0,022 mol) 80 vægtprocents hydrazinhydrat, og blandingen' omrøres i 1 time ved stue-5 temperatur og opvarmes derefter under tilbagesvaling i 3 timer. Efter afdampning af ethanolet i vakuum sættes 300 ml 2N saltsyre til remanensen og omrøres. Det uopløselige materiale fjernes derefter, og opløsningen neutraliseres med koncentreret vandig ammoniak. De udfældede krystaller isoleres ved filtrering, vaskes med isvand og 10 tørres, hvorved fås 3,4 g (55% af det teoretiske) N-(4-ethoxycarb-onylmethylphenyl)-L-glutamin, smeltepunkt 179,4-180,0eC.
Analyse:
Beregnet for 0^Η20^2^5: C 58,43 H 6,54 N 9,09.
Fundet: C 58,20 H 6,67 N 9,01.
15 [o]2d - +28,5° (c - 1 i 2N HC1).
IR-Spektret for produktet er vist i fig. 3.
EKSEMPEL 2 N-(4-Carboxymethylphenyl)-L-glutamin (Forbindelse (2))
En opløsning af 0,62 g (0,0094 mol) 85%'s kaliumhydroxid i 10 ml vand 20 sættes til en suspension af 1,45 g (0,0047 mol) N-(4-ethoxycarbonyl-methylphenyl)-L-glutamin i 20 ml vand, og blandingen omrøres i 4 timer ved stuetemperatur.
Under isafkøling syrnes reaktionsblandingen til pH-værdi 3 med 2N saltsyre, og de udfældede krystaller isoleres ved filtrering, vaskes 25 med isvand og tørres, hvorved fås 1,21 g (92% af det teoretiske) N-(4-carboxymethylphenyl)-L-glutamin, smeltepunkt 197,7-199,6eC.
Analyse:
Beregnet for C13h16N205: C 55,71 H 5,75 N 10,00.
Fundet: C 55,69 H 5,58 N 9,75.
26
DK 159149 B
17 [α] j) = +16,6° (c «* 1 i 0,5N natriumcarbonat).
NMR- og IR-spektrene for produktet er vist i henholdsvis fig. 4 og fig. 5.
EKSEMPEL 3 5 N-(4-Methoxycarbonylmethylphenyl)-L-glutamin (Forbindelse (3))
Under anvendelse af den i a) i eksempel 1 beskrevne fremgangsmåde omsættes 11,14 g (0,03 mol) N-carbobenzoxy-L-glutaminsyre-a-benzyl-ester med 4,96 g (0,03 mol) methyl p-aminophenylacetat, hvorved fås 13,38 g (88% af det teoretiske) af et mellemprodukt.
10 Mellemproduktet opløses i 500 ml tetrahydrofuran, 200 ml methanol og 100 ml vand. Til opløsningen sættes 0,5 g palladiumsort, og blandingen underkastes hydrogenering ved atmosfæretryk, hvorved fås 6,09 g (79% af det teoretiske) N-(4-methoxycarbonylmethylphenyl)-L- gluta-min, smeltepunkt 183,3-184,2eC.
15 Analyse:
Beregnet for C14h18n2°5: C 57,13 H 6,16 N 9,52.
Fundet: C 57,10 H 6,05 N 9,74.
[«]2D “ +29,2° (c “li 2N HC1).
IR-Spektret for produktet er vist i fig. 6.
20 EKSEMPEL 4 N-(4-n-Propyloxycarbonylmethylphenyl)-L-glutamin (Forbindelse (4))
Under anvendelse af den i a) i eksempel 1 beskrevne fremgangsmåde omsættes 11,14 g (0,03 mol) af N-carbobenzoxy-L-glutaminsyre-a-benzylester med 5,8 g (0,03 mol) n-propyl p-aminophenylacetat, hvor-25 ved fås 14,05 g (88% af det teoretiske) af et mellemprodukt.
DK 159149 B
18
Mellemproduktet opløses i 500 ml tetrahydrofuran, 200 ml methanol og 100 ml vand. Til opløsningen sættes 0,5 g palladiumsort, og blandingen underkastes hydrogenering ved atmosfæretryk, hvorved fås 7,53 g (89% af det teoretiske) af N-(4-n-propyloxycarbonylmethylphenyl)-L-5 glutamin, smeltepunkt 177,6-178,9°C.
Analyse:
Beregnet for C 59,61 H 6,88 N 8,69.
Fundet: C 59,88 H 6,99 N 8,52.
[o]2d - +22,8° (c - 1 i 2N HC1).
10 IR-Spektret for produktet er vist i fig. 7.
EKSEMPEL 5 N- (4-n-Butyloxycarbonylmethylphenyl) -L-glutamin (Forbindelse (5) )
Under anvendelse af den i a) i eksempel 1 beskrevne fremgangsmåde omsættes 11,14 g (0,03 mol) N-carbobenzoxy-L-glutaminsyre-a-benzyl-15 ester med 6,21 g (0,03 mol) N-butyl p-aminophenylacetat, hvorved fås 15,0 g (92% af det teoretiske) af et mellemprodukt.
Mellemproduktet opløses i 500 ml tetrahydrofuran, 200 ml methanol og 100 ml vand. Til opløsningen sættes 0,5 g palladiumsort, og blandingen underkastes hydrogenering ved atmosfæretryk, hvorved fås 5,72 g 20 (62% af det teoretiske) N-(4-n-butyloxycarbonylmethylphenyl)-L-gluta min, smeltepunkt 177,0-179,2°C.
Analyse:
Beregnet for C 60,70 H 7,19 N 8,23.
Fundet: C 60,61 H 7,11 N 8,44.
25 [a]2jj - +25,4° (c - 1 i 2N HC1).
NMR- og IR-spektrene for produktet er vist i henholdsvis fig, 8 og fig. 9.
DK 159149 B
EKSEMPEL 6 19 N-(3-Ethoxycarbonylmethylphenyl)-L-glutamin (Forbindelse (6))
Under anvendelse af den i a) i eksempel 1 beskrevne fremgangsmåde omsættes 11,14 g (0,03 mol) N-carbobenzoxy-L-glutaminsyre-a-benzyl-5 ester med 4,96 g (0,03 mol) ethyl m-aminophenylacetat, hvorved fås 12,95 g (81% af det teoretiske) af et mellemprodukt.
Mellemproduktet opløses i 500 ml tetrahydrofuran, 200 ml ethanol og 100 ml vand. Til opløsningen sættes 0,3 g palladiumsort, og blandingen underkastes hydrogenering ved atmosfæretryk, hvorved 6,58 g (89% 10 af det teoretiske) N-(3-ethoxycarbonylmethylphenyl)-L-glutamin, smeltepunkt 175,5-176,2*0.
Analyse:
Beregnet for Ο15η20Ν2Ο5: C 58,43 H 6,54 N 9,09.
Fundet: C 58,41 H 6,46 N 9,01.
15 [a]2l - +26,4° (c - 1 i 2N HC1).
IR-Spektret for produktet er vist i fig. 10.
EKSEMPEL 7 N-(2-Ethoxycarbonylmethylphenyl)-L-glutamin (Forbindelse (7))
Under anvendelse af den i a) i eksempel 1 beskrevne fremgangsmåde 20 omsættes 11,14 g (0,03 mol) N-carbobenzoxy-L-glutaminsyre-a-benzyl-ester med 4,96 g (0,03 mol) ethyl o-aminophenylacetat, hvorved fås 14,19 g (88% af det teoretiske) af et mellemprodukt.
Mellemproduktet opløses i 200 ml tetrahydrofuran, 200 ml ethanol og 100 ml vand. Til opløsningen sættes 0,3 g palladiumsort, og blandin-25 gen underkastes hydrogenering ved atmosfæretryk, hvorved fås 6,85 g (84% af det teoretiske) N-(2-ethoxycarbonylmethylphenyl)-L- glutamin, smeltepunkt 171,2-171,8*0.
DK 159149 B
20
Analyse:
Beregnet for C^5H2q^2®5: C 58,43 H 6,54 N 9,09.
Fundet: C 58,16 H 6,31 N 8,99.
[q]2D = +21,6° (c - 1 i 2N HC1).
5 IR-Spektret for produktet er vist i fig. 11.
EKSEMPEL 8 N-[4-(2-Ethoxycarbonylethyl)phenyl]-L-glutamin (Forbindelse (8))
Under anvendelse af den i a) i eksempel 1 beskrevne fremgangsmåde omsættes 11,14 g (0,03 mol) N-carbobenzoxy-L-glutaminsyre-a-benz-10 ylester med 5,8 g (0,03 mol) ethyl p-aminophenylpropionat, hvorved fås 12,8 g (78% af det teoretiske) af et mellemprodukt.
Mellemproduktet opløses i 200 ml tetrahydrofuran, 200 ml ethanol og 100 ml vand. Til opløsningen sættes 0,3 g palladiumsort, og blandingen underkastes hydrogenering ved atmosfæretryk, hvorved fås 7,09 g 15 (92% af det teoretiske) N-[4-(2-ethoxycarbonylethyl)phenyl)- L-gluta- min, smeltepunkt 179,5-180,6°C.
Analyse:
Beregnet for C^gH22^2®5: C 59,61 H 6,88 N 8,,69.
Fundet: C 59,63 H 6,68 N 8,62.
20 [a]2jj = +25,8° (c = 1 i 2N HC1).
IR-Spektret for produktet er vist i fig. 12.
EKSEMPEL 9 N-[4-(3-Ethoxycarbonyl-n-propyl)phenyl]-L-glutamin (Forbindelse (9))
Under anvendelse af den i a) i eksempel 1 beskrevne fremgangsmåde 25 omsættes 11,14 g (0,03 mol) N-carbobenzoxy-L-glutaminsyre-a-benzyl-
DK 159149 B
21 ester med 6,22 g (0,03 mol) ethyl p-aminophenylbutyrat, hvorved fås 14,7 g (87% af det teoretiske) af et mellemprodukt.
Mellemproduktet opløses i 200 ml tetrahydrofuran, 200 ml ethanol og 100 ml vand. Til opløsningen sættes 0,3 g palladiumsort, og blandin-5 gen underkastes hydrogenering ved atmosfæretryk, hvorved fås 8,6 g (98% af det teoretiske) N-[4-(3-ethoxycarbonyl-n-propyl)phenyl]-L-glutamin, smeltepunkt 179,0-180,1°C.
Analyse:
Beregnet for C 60,70 H 7,19 N 8,33.
10 Fundet: C 60,37 H 6,99 N 8,55.
[ct]2jj - +24,0° (c - 1 i 2N HCl).
NMR- og IR-spektrene for produktet er vist i henholdsvis fig. 13 og 14.
EKSEMPEL 10 15 N-[4-(2-Ethoxycarbonylvinyl)phenyl]-L-glutamin (Forbindelse (10))
Under anvendelse af den i c) i eksempel 1 beskrevne fremgangsmåde omsættes 25,9 g (0,1 mol) N-phthalyl-L-glutaminsyreanhydrid med ethyl p-aminocinnamat og behandles derefter med hydrazin, hvorved fås 11,3 g (35% af det teoretiske) N-[4-(2-ethoxycarbonylvinyl)phenyl]-L-20 glutamin, smeltepunkt 192,5-193,3°C.
Analyse:
Beregnet for C16H20N2°5: C 59,99 H 6,29 N 8,75.
Fundet: C 59,71 H 6,14 N 8,91.
[a]2jj - +30,3° (c = 1 i 2N HCl).
25 NMR- og IR-spektrene for produktet er vist i henholdsvis fig. 15 og 16.
EKSEMPEL 11
DK 159149 B
22 N-(4-Ethoxycarbonylmethylphenyl)-L-glutamin-hydrochlorid (Forbindelse (ID)
En blanding af 5,0 g (0,016 mol) N-(4-ethoxycarbonylmethylphenyl)- L-5 glutamin i 100 ml vand og 200 ml ethanol opvarmes, indtil opløsningen er afsluttet, og 10 ml 21 vægtprocents hydrogenchlorid-ethanolop-løsning tilsættes. Opløsningsmidlet afdampes derefter i vakuum, og remanensen optages i ethanol. Efter behandling af opløsningen med aktivkul tilsættes ether til krystallisering. De udfældede krystaller 10 isoleres ved sugefiltrering og tørres i vakuum, hvorved fås 2,6 g (0,0075 mol, 47% af det teoretiske) N-(4-ethoxycarbonylmethylphenyl)-L-glutamin-hydrochlorid, smeltepunkt 154,8-155,6e C.
Analyse:
Beregnet for c15H21N2°5cll: C 52,25 H 6,14 N 8,12 Cl 10,28.
15 Fundet: C 52,42 H 5,60 N 7,81 Cl 10,94.
EKSEMPEL 12 N-(4-Ethoxycarbonylmethylphenyl)-D-glutamin (Forbindelse (12))
Under anvendelse af den i c) i eksempel 1 beskrevne fremgangsmåde omsættes 12,96 g (0,05 mol) N-phthalyl-D-glutaminsyreahhydrid med 20 8,96 g (0,05 mol) ethyl p-aminophenylacetat og behandles derefter med hydrazin, hvorved fås 8,79 g (57% af det teoretiske) N-(4-ethoxycarbonylmethylphenyl) -D-glutamin, smeltepunkt 176,2-177,2°C.
Analyse:
Beregnet for C^5h2qn2°5: C 58,43 H 6,54 N 9,09.
25 Fundet: C 58,21 H 6,44 N 9,27.
O C
[a] g - -28,0° (c - 1 i 2N HCl).
NMR- og IR-spektrene for produktet er vist i henholdsvis fig. 17 og 18.
DK 159149 B
23 FREMSTILLING 2
Ethyl-2-(4-aminophenyl)-n-butyrat 11 g 50%'s natriumhydrid, der er vasket med n-hexan, suspenderes i 100 ml Ν,Ν-dimethylformamid, og suspensionen omrøres under isafkø-5 ling. Derefter tilsættes dråbevis 37,6 g (0,2 mol) diethylethylmalo-nat, og omrøringen fortsættes, indtil hydrogenudviklingen ophører.
Derefter tilsættes dråbevis en opløsning af 31,51 g (0,2 mol) p-chlornitrobenzen i 50 ml Ν,Ν-dimethylformamid. Ved afslutningen af den dråbevise tilsætning opvarmes blandingen på et oliebad ved 100°C 10 i 9 timer, og Ν,Ν-dimethylformamidet afdampes i vakuum. Remanensen ekstraheres med ethylacetat, og ethylacetatfasen vaskes med 5%'s saltsyre og mættet natriumchloridopløsning og tørres derefter over magnesiumsulfat. Ethylacetatet afdampes i vakuum, og remanensen underkastes chromatografi på silicagel, idet der elueres med en blan-15 ding af benzen og n-hexan (1:1), hvorved fås 48,64 g (0,157 mol, 79% af det teoretiske) diethyl 2-ethyl-2-(4-nitrophenyl)malonat.
37,18 g (0,12 mol) diethyl 2-ethyl-2-(4-nitrophenyl)malonat opløses i 150 ml ethanol, og en opløsning af 30,41 g (0,76 mol) natriumhydroxid i 100 ml vand tilsættes, og derefter opvarmes under tilbagesvaling i 20 3 timer på et oliebad. Efter at opløsningsmidlet er afdampet i va kuum, opløses remanensen i 200 ml vand og ekstraheres derefter med 300 ml ether. Etherfasen fjérnes, og vandfasen syrnes med koncentreret saltsyre og ekstraheres atter med ether. Etherfasen fraskilles, vaskes med mættet natriumchloridopløsning og tørres over magne-25 siumsulfat. Etheren afdampes i vakuum, hvorved fås 17,25 g (0,083 mol, 69% af det teoretiske) 2-(4-nitrophenyl)-n-smørsyre.
16,71 g (0,08 mol) 2-(4-nitrophenyl)-n-smørsyre opløses i 250 ml ethanol, og 15 ml koncentreret svovlsyre tilsættes derefter og opvarmes under tilbagesvaling i 3 1/2 time på et oliebad. Efter at ethano-30 let er afdampet i vakuum, neutraliseres remanensen med mættet na- triumbicarbonatopløsning og ekstraheres med ethylacetat. Ethylacetatfasen vaskes med mættet natriumchloridopløsning og tørres over natriumsulfat. Efter afdampning af ethylacetatet i vakuum underkastes
DK 159149 B
24 remanensen silicagelchromatografi under eluering med en blanding af benzen og n-hexan (1:1), hvorved fås 9,13 g (0,0385 mol, 48% af det teoretiske) ethyl 2-(4-nitrophenyl)-n-butyrat.
En opløsning af 9,13 g (0,0385 mol) ethyl 2-(4-nitrophenyl)-n-butyrat 5 i 150 ml ethanol underkastes hydrogenering i nærværelse af palladi-umsortkatalysator, hvorved fås 7,51 g (0,0363 mol, 94% af det teoretiske) ethyl 2-(4-aminophenyl)-n-butyrat.
FREMSTILLING 3
Ethyl 2-(4-aminophenyl)propionat 10 Under anvendelse af den i fremstilling 2 beskrevne fremgangsmåde fås 35,28 g (0,1196 mol) diethyl 2-methyl-2-(4-nitrophenyl)malonat ud fra 25,0'g (0,159 mol) p-chlomitrobenzen og 29,08 g (0,167 mol) diethyl methylmalonat (75% udbytte), og dette mellemprodukt underkastes derefter hydrolyse, decarboxylering, esterificering med ethanol-15 svovlsyre og reduktion med palladiumkatalysator på samme måde som i fremstilling 2, hvorved fås 7,86 g (0,041 mol, 26% af det teoretiske) e thyl 2-(4-aminophenyl)propionat.
FREMSTILLING 4
Ethyl 2-(4-aminophenyl)-2-methylprop ionat 20 10,56 g (ækvivalent med 0,22 mol) 50%'s natriumhydrid, der er vasket med n-hexan, suspenderes i 100 ml N,N-dimethylformamid, og suspensionen omrøres under isafkøling. En opløsning af 20,9 g (0,1 mol) ethyl 4-nitrophenylacetat i 100 ml Ν,Ν-dimethylformamid tilsættes derefter dråbevis og omrøres i 30 minutter. Derefter tilsættes dråbe-25 vis 13,7 ml (0,22 mol) methyliodid, og der omrøres i 1 time under isafkøling og 2 timer ved stuetemperatur. Efter afdampning af N,N-dimethylformamidet i vakuum ekstraheres remanensen med ethylacetat, og ethylacetatfasen vaskes med 5%'s saltsyre og mættet natriumch-loridopløsning og tørres over natriumsulfat. Ethylacetatet afdampes
DK 159149 B
25 derefter i vakuum, hvorved fås 20,33 g (0,086 mol, 86% af det teoretiske) ethyl 2-methyl-2-(4-nitrophenyl)propionat.
20,33 g af den ovenfor vundne ester hydrogeneres i 120 ml ethanol med 0,3 g palladiumsortkatalysator. Palladiumkatalysatoren frafiltreres, 5 og ethanolet afdampes i vakuum. Remanensen optages i 5%'s saltsyre og vaskes med ethylacetat. Den fraskilte vandfase neutraliseres med natriumcarbonat og ekstraheres med ethylacetat. Efter tørring af ethylacetatfasen over natriumsulfat afdampes ethylacetatet i vakuum, og remanensen underkastes silicagelchromatografi under anvendelse af 10 chloroform som opløsningsmiddel, hvorved fås 8,31 g (0,04 mol, 47% af det teoretiske) ethyl 2-(4-aminophenyl)-2-methylpropionat.
EKSEMPEL 13 N-[4-(l-Ethoxycarbonyl-n-propyl)phenyl]-L-glutamin (Forbindelse (13))
Til 150 ml tetrahydrofuran sættes 13,23 g (0,0357 mol) N-carbobenz-15 oxy-L-glutaminsyre-a-benzylester og 5 ml triethylamin, og blandingen omrøres under isafkøling. Efter dråbevis tilsætning af 4,7 ml isobu-tylchlorcarbonat omrøres blandingen under isafkøling i yderligere 30 minutter. En opløsning af 7,38 g (0,0357 mol) ethyl 2-(4-aminophen-yl)butyrat i 10 ml tetrahydrofuran tilsættes derefter dråbevis, og 20 omrøringen fortsættes i 1 time under isafkøling og i 18 timer ved stuetemperatur. Efter afdampning af tetrahydrofuranet i vakuum ekstraheres remanensen med ethylacetat, og ethylacetatfasen vaskes med mættet natriumbicarbonatopløsning, 5%'s saltsyre og mættet natri-umchloridopløsning og tørres derefter over natriumsulfat. Ethylaceta-25 tet afdampes i vakuum, og remanensen omkrystalliseres af ethylacetat-n-hexan, hvorved fås 12,99 g (0,0232 mol, 65% af det teoretiske) af et mellemprodukt.
Dette mellemprodukt (12,99 g) opløses i 200 ml ethanol og hydrogeneres med tilsætning af 0,3 g palladiumsort. Palladiumkatalysatoren 30 frafiltreres derefter, og ethanolet afdampes i vakuum. Remanensen omkrystalliseres af ethanol-vand, hvorved fås 4,59 g (0,0136 mol, 38%
DK 159149 B
26 af det teoretiske) N-[4-(l-ethoxycarbonyl-n-propyl)phenyl]-L-gluta-min, smeltepunkt 156,8-157,0eC.
Analyse:
Beregnet for C 60,70 H 7,19 N 8,33.
5 Fundet: C 60,42 H 7,07 N 8,45.
[a]2o - +25,0° (2N - HC1).
IR-Spektret (KBr) og NMR-spektret (CF3COOH) er vist i henholdsvis fig. 19 og 20.
EKSEMPEL 14 10 N-[4-(l-Ethoxycarbonyl-l-methylethyl)phenyl]-L-glutamin (Forbindelse (14))
Under anvendelse af den i eksempel 13 beskrevne fremgangsmåde fås 4,84 g (0,0086 mol) af et mellemprodukt ud fra 5,91 g (0,0159 mol) N-carbobenzoxy-L-glutaminsyre-a-benzylester og 3,3 g (0,0159 mol) ethyl 15 2-methyl-2-(4-aminophenyl)propionat (54% af det teoretiske), og det hydrogeneres med palladiumsortkatalysator på samme måde som i eksempel 13, hvorved fås 1,05 g (0,0031 mol, 36% af det teoretiske) N-[4-(l-ethoxycarbonyl-l-methylethyl)phenyl]-L-glutamin, smeltepunkt 146,6-148,5eC.
20 Analyse:
Beregnet for C^H24N2°5: C 60,70 H 7,19 N 8,33.
Fundet: C 60,40 H 6,60 N 8,59.
[a]2l - +25,7° (2N - HC1).
IR-Spektret (KBr) er vist i fig. 21. 1 EKSEMPEL 15 N-[4-(l-Ethoxycarbonylethyl)phenyl]-L-glutamin (Forbindelse (15))
DK 159149 B
27
Under anvendelse af den i eksempel 13 beskrevne fremgangsmåde fås 7,88 g (0,0144 mol) af et mellemprodukt ud fra 7,13 g (0,0192 mol) N-carbobenzoxy-L-glutaminsyre-a-benzylester og 4,4 g (0,0192 mol) ethyl 2-(4-aminophenyl)propionat-hydrochlorid (75% af det teoretiske), og 5 det hydrogeneres med palladiumsortkatalysator på samme måde som beskrevet i eksempel 13, hvorved fås 2,7 g (0,0084 mol, 44% af det teoretiske) N-[4-(l-ethoxycarbonylethyl)phenyl]-L-glutamin, smeltepunkt 157,4-157,9°C.
Analyse: 10 Beregnet for C 59,62 H 6,88 N 8,69.
Fundet: C 59,31 H 6,86 N 8,57.
[a]2l = +27,9° (c = 2N - HC1).
IR-Spektret (KBr) er vist i fig. 22.
EKSEMPEL 16 15 N-[4-(l-Carboxy-n-propyl)phenyl]-L-glutamin (Forbindelse (16) 1,68 g (0,005 mol) N-[4-(l-ethoxycarbonyl-n-propyl)phenyl]-L-glutamin suspenderes i 10 ml methanol, og en opløsning af 0,42 g natriumhydroxid i 20 ml vand tilsættes og omrøres i 1 1/2 time ved stuetemperatur. Der afdampes derefter opløsningsmiddel i vakuum til ca. det 20 halve volumen, og den tilbageværende opløsning symes til pH- værdi 4 med 5%'s saltsyre. De udfældede krystaller isoleres ved filtrering, vaskes med koldt vand og tørres i vakuum, hvorved fås 1,16 g (0,0038 mol, 75% af det teoretiske) N-[4-(l-carboxy-n-propyl)phenyl]-L-glutamin, smeltepunkt 166,5-167,0°C.
25 Analyse:
Beregnet for C^h^q^^S· C 58,43 H 6,54 N 9,09.
Fundet: C 57,67 H 6,33 N 9,00.
[e]2o - +24,0e (c - 2N - HC1).
IR-Spektret (KBr) er vist i fig. 23.
DK 159149 B
28 TEST 1
Akut toxicitet
Testmedikamentet suspenderes i en vandig 50%'s opløsning af "Tween" 80 og administreres til ddY-mus, som vejer 20-25 g, oralt eller 5 intraperitonealt i de i nedenstående tabel I angivne doser. Antallet af medikamentbehandlede mus, som dør i løbet af 7 dage efter administrationen, er anført i tabel I.
Tabel I
Dosis Antal døde mus/- 10 Medikament mg/kg Vej antal forsøgsdyr
Forbindelse (1) 1.000 IP 0/5 5.000 PO 0/5
Forbindelse (2) 1.000 IP 0/5 15 5.000 PO 0/5
Forbindelse (13) 1.000 IP 0/5 5.000 PO 0/5 IP - intraperitonealt 20 P0 - peroralt TEST 2
Virkning på plaquedannende celler i milten hos mus, når der inokule-res med røde blodlegemer fra får
Mus inokuleres ved intravaskulær eller intraperitoneal administration 25 af 1 x 10® fåreceller pr. dyr. Hver gruppe består af fem mus. Testmedikamentet administreres oralt eller intraperitonealt i fire på hinanden følgende dage fra den dag, hvor fårecellerne administreres.
Fire dage senere dræbes musene, og antallet af plaquedannende celler (PFC) i milten baseret på røde blodlegemer fra får bestemmes ved 30 fremgangsmåden ifølge Fujiwara et al. ["Procedure of Immune Experi-
DK 159149 B
29 ments", bind 5, side 1475, Japan, (1976)], som er en modifikation af
Canninghum-metoden.
Resultaterne er anført i nedenstående tabel II
Tabel II
5 Immuni- PFCx2.500/ serings- milt (mid-
Alder vej for delværdi &
Forsøg Muse- i fåre- Medika- Dosis standard- nr. stammer uger celler ment mg/kg Vej afvigelse 1 Balb/c 4 intra- fysiolo- - P.O. 81,4±6,16 vasku- gisk lær saltop løsning 15 4 " azathio- 50 " 22,8+2,40 prin - 4 " Forbin- 30 " 99,0±4,60 delse (2) 4 - " 100 " 91,8±18,6 20 4 " " 300 " 73,4+12,7 2 C3H/He 7 I.P. fysiolo- - P.O. 76,5+26,3 gisk saltop- 25 løsning 7 " azathio- 50 " 46,7±1,2 prin 7 " Forbin- 30 " 113,0±20,4 delse (2) 30 7 " 100 " 160,0±20,6 7 " " 300 " 152,4±11,4 I.P. “ intraperitonealt P.O. - peroralt.
TEST 3
DK 159149 B
30
Virkning på forsinket hypersensibilitet I fodfladerne på højre bagben hos mus (ddY-stamme, vægt 25-30 g) injiceres 40 μΐ røde blodlegemer fra får, hvis koncentration er 5 indstillet til 1 x 10^/40 /*1. Testmedikamentet administreres intra-peritonealt eller oralt i fire på hinanden følgende dage inklusive den dag, de røde blodlegemer fra får administreres.
Tre dage efter administrationsdagen af røde blodlegemer fra får administreres 40 μΐ røde blodlegemer fra får, der indstilles til en 10 koncentration på 5 x 10^/40 μΐ, i fodfladerne på venstre bagben.
Efter 24 timer måles tykkelsen af fodfladerne på højre og venstre bagben. Ødemet udtrykkes som forskellen i tykkelse mellem fodfladerne på venstre og højre bagben. Resultaterne er anført i tabel III, i hvilken ødemet i den medikamentbehandlede gruppe udtrykkes som pro-15 cent af kontrollen, hvilket betyder procentdelen af det ødem, der findes i den gruppe, til hvilken der administreres fysiologisk saltopløsning (kontrolgruppen).
DK 159149 E
31
Tabel III
Medikament Dosis (mg/kg) Vej % af kontrollen 3 I.P. 85,2 5 10 " 78,2 30 " 91,7
Forbindelse (2) 3Q p Q 857 100 " 76,4 300 " 74,5 10 _ 3 I.P. 69,7 10 " 65,9 30 " 62,3
Forbindelse (1) 30 p Q 7g g 15 100 " 66,2 300 " 65,0 3 I.P. 70,4 10 " 80,2 20 30 " 91,7
Forbindelse (3) 30 p.0. 91f7 100 " 91,9 300 " 79,6 25 3 I.P. 91,6 10 " 95,7 30 " 72,2
Forbindelse (4) 3Q p 0 94>5 100 " 84,7 30 300 " 82,2 3 I.P. 94,6 10 " 83,2 30 " 84,3 35 ForM·»»·!« (5) 30 p.o. 81,1 100 " 82,8 300 " 83,1
DK 159149 B
32
Tabel II fortsat 3 I.P. 92,4 10 " 91,1 30 " 86,8 5 Forbindelse (6) 30 P.0. 92,8 100 " 84,8 300 - 82,3 3 I.P. 76,2 10 * 10 " 76,7 30 " 81,0
Forbindelse (7) 30 P.0. 85|0 100 " 80,6 300 " 92,3 15 3 I.P. 91,3 10 " 80,2 30 " 100,6
Forbindelse (8) 30 P<0. 85>3 20 100 " 96,7 300 " 88,9 3 I.P. 100 10 " 101 25 30 " 85,8
Forbindelse (9) 30 P.0. 81>3 100 " 109,9 300 " 82,6 30 3 I.P. 77,7 10 " 67,3 30 " 84,1
Forbindelse (10) 3Q p Q 89 g 100 " 80,8 35 300 " 83,7
DK 159149 B
33
Tabel II fortsat 3 I.P. 79,6 10 " 90,7 30 " 90,0 5 30 P.O. 81,8
Forbindelse (11) 1Q0 „ 75 7 300 " 67,2 3 I.P. 76,1 10 10 " 107,9 30 " 89,1
Forbindelse (12) 30 P.0. 85|4 100 " 81,7 300 " 80,7 15 3 I.P. 78,0
Forbindelse (15) 10 " 62,6 30 " 67,6 20 3 I.P. 77,3
Forbindelse (14) 10 " 72,6 30 " 71,9 3 I.P. 82,1 25 Forbindelse (13) 10 " 70,5 30 " 64,2 30 P.O. 89,6
Forbindelse (13) 100 " 87,4 300 " 75,7 30 _ 30 I.P. 61,0
Azathioprin 100 P.O. 58,2 I.P. - intraperitonealt 35 P.O. = peroralt.
Claims (2)
1. Analogifremgangsmåde til fremstilling af glutaminderivater med den almene formel I O O Π 11 /nyxcoz hooc-chch2ch2cnh-// y i nh2 DK 159149B hvor X betegner i) alkylen med formlen hvor n er et helt tal fra 1 til 4, eller vinylen, eller ii) en gruppe med formlen- C(R^)(R^)-, hvor R1 og R^ kan have samme eller forskellig betydning og betegner hydrogen eller lavere alkyl, med det forbehold, at mindst ét af symbolerne R^· og R^ be-5 tegner lavere alkyl; og Z betegner hydrogen eller lavere alkyl, eller ikke-toxiske salte deraf, kendetegnet ved, at a) til fremstilling af glutaminderivater med den almene formel I, hvor Z er hydrogen, eller ikke-toxiske salte deraf, et glutaminderivat med den almene 10 formel I, hvor Z er lavere alkyl, eller et ikke-toxisk salt deraf hydrolyseres , b) til fremstilling af glutaminderivater med den almene formel I, hvor Z er lavere alkyl, eller ikke-toxiske salte deraf, elimineres aminobeskyttelses-gruppen fra produktet af omsætningen af et aminobeskyttet glutaminsyrean- 15 hydrid med et anilinderivat med den almene formel IV 0 b2n -^r-x"0Y IV hvor X har den i sammenhæng med formlen I angivne betydning, og Y betegner 20 lavere alkyl, eller c) til fremstilling af glutaminderivater med formlen I, hvor Z er lavere alkyl, elimineres amino- og carboxylbeskyttelsesgruppeme fra produktet af omsætning af glutaminsyre, i hvilken både α-carboxyl- og a-aminogrupperne er beskyttet, med et anilinderivat med formlen IV i nærværelse af et aktive- 25 ringsmiddel, eller d) til fremstilling af glutaminderivater med formlen I, hvor Z er lavere alkyl, elimineres amino- og carboxylbeskyttelsesgruppeme fra produktet af omsætning af et reaktivt derivat ved γ-carboxylgruppen i en a-carboxyl- og a-aminobeskyttet glutaminsyre med anilinderivatet IV. DK 159149 B
2. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet véd, at der fremstilles en forbindelse, hvor Z betegner lavere alkyl.
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP15932080 | 1980-11-12 | ||
| JP55159319A JPS6027660B2 (ja) | 1980-11-12 | 1980-11-12 | グルタミン誘導体 |
| JP15931980 | 1980-11-12 | ||
| JP55159320A JPS6027661B2 (ja) | 1980-11-12 | 1980-11-12 | グルタミンの誘導体 |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DK500081A DK500081A (da) | 1982-05-13 |
| DK159149B true DK159149B (da) | 1990-09-10 |
| DK159149C DK159149C (da) | 1991-02-11 |
Family
ID=26486160
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DK500081A DK159149C (da) | 1980-11-12 | 1981-11-11 | Analogifremgangsmaade til fremstilling af glutaminderivater. |
Country Status (6)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4439448A (da) |
| EP (1) | EP0052296B1 (da) |
| KR (1) | KR860001887B1 (da) |
| CA (1) | CA1190240A (da) |
| DE (1) | DE3164463D1 (da) |
| DK (1) | DK159149C (da) |
Families Citing this family (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5684045A (en) * | 1985-09-12 | 1997-11-04 | Brigham And Women's Hospital | Method of treating pancreatic atrophy |
| US5397803A (en) * | 1985-09-12 | 1995-03-14 | Brigham And Women's Hospital | Use of glutamine to reduce rate of pathogenic microorganism infection |
| US5763485A (en) * | 1985-09-12 | 1998-06-09 | Brigham And Women's Hospital | Method of treating catabolic, gut-associated pathological processes and impaired host defenses |
| US5576351A (en) * | 1989-12-29 | 1996-11-19 | Mcgaw, Inc. | Use of arginine as an immunostimulator |
| US5248697A (en) * | 1990-09-20 | 1993-09-28 | Brigham And Women's Hospital | Enhancement of glutathione levels with glutamine |
| US5646182A (en) * | 1992-06-15 | 1997-07-08 | Burzynski; Stanislaw R. | Methods for treating autoimmune diseases |
| US5292722A (en) * | 1992-11-06 | 1994-03-08 | Brigham And Women's Hospital | Intravenous solution that diminishes body protein loss |
| DE602005011754D1 (de) * | 2004-01-23 | 2009-01-29 | Bio Merieux Inc | Neuartiges nukleotidgemisch für ein verbessertes nukleinsäureamplifikationsverfahren |
| WO2014170435A2 (en) * | 2013-04-18 | 2014-10-23 | INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) | Methods and pharmaceutical compositions for inhibiting lymphocyte proliferation in a subject in need thereof |
| CN114516800A (zh) * | 2020-11-20 | 2022-05-20 | 杭州中美华东制药有限公司 | 一种2-(4-硝基苯基)丁酸的合成方法 |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3551419A (en) * | 1964-07-31 | 1970-12-29 | Rotta Research Lab | Amino acid amides and process for their production |
| AT293368B (de) * | 1969-10-13 | 1971-10-11 | Rotta Research Lab | Verfahren zur Herstellung von N-Benzoyl-L-(D- oder DL)-glutaminsäure-l-amiden |
| US4167449A (en) * | 1976-07-29 | 1979-09-11 | American Hospital Supply Corporation | Composition and method for determining transferase and protease activity |
| JPS53113032A (en) * | 1977-03-09 | 1978-10-03 | Mitsubishi Chem Ind Ltd | Immune depresants |
| JPS53147034A (en) * | 1977-05-30 | 1978-12-21 | Wako Pure Chem Ind Ltd | Gamma-glutamyl-p-aminoanilide derivatives and process for their preparation |
| JPS5569549A (en) * | 1978-11-16 | 1980-05-26 | Nitto Boseki Co Ltd | Novel substrate for determination of enzyme activity |
-
1981
- 1981-10-30 EP EP81109431A patent/EP0052296B1/en not_active Expired
- 1981-10-30 DE DE8181109431T patent/DE3164463D1/de not_active Expired
- 1981-11-10 US US06/319,992 patent/US4439448A/en not_active Expired - Fee Related
- 1981-11-11 DK DK500081A patent/DK159149C/da not_active IP Right Cessation
- 1981-11-12 CA CA000389865A patent/CA1190240A/en not_active Expired
- 1981-11-12 KR KR1019810004352A patent/KR860001887B1/ko active
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0052296B1 (en) | 1984-06-27 |
| DK500081A (da) | 1982-05-13 |
| EP0052296A1 (en) | 1982-05-26 |
| CA1190240A (en) | 1985-07-09 |
| DK159149C (da) | 1991-02-11 |
| US4439448A (en) | 1984-03-27 |
| KR830008549A (ko) | 1983-12-10 |
| KR860001887B1 (ko) | 1986-10-24 |
| DE3164463D1 (en) | 1984-08-02 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US3960927A (en) | Olefinic derivatives of amino acids | |
| KR100191050B1 (ko) | 산화질소의 생합성 억제제 | |
| US4668797A (en) | Bicyclic aminoacids as intermediates and processes for their preparation | |
| LV11028B (en) | Novel benzimidazole and azabenzimidazole derivatives | |
| JPH0587504B2 (da) | ||
| US5616606A (en) | Oligopeptide antiretroviral agents | |
| DK164917B (da) | Analogifremgangsmaade til fremstilling af bicyklisk substituerede dipeptidderivater og deres farmaceutisk acceptable salte | |
| NZ198535A (en) | Substituted azabicycloalkanedicarboxylic acids and pharmaceutical compositions containing such | |
| JPS59139357A (ja) | アミジン誘導体 | |
| JPH04503057A (ja) | ヒドロキサム酸に基礎を置くコラゲナーゼ阻害剤 | |
| DK166624B (da) | Analogifremgangsmaade til fremstilling af cis,endo-2-azabicyclo-oe3.3.0aa-octan-3-carboxylsyrer samt deres fysiologisk acceptable salte | |
| JPH10513462A (ja) | トロンビンインヒビター | |
| DK159149B (da) | Analogifremgangsmaade til fremstilling af glutaminderivater. | |
| HU195650B (en) | Process for producing benzoxazepines and pharmaceuticals comprising such compounds | |
| JPH0422907B2 (da) | ||
| DK170928B1 (da) | Kilerem til trinløs hastighedsvariator | |
| JPH0559105B2 (da) | ||
| IE49390B1 (en) | Pyridazin(2h)-3-ones,process for their preparation and their use in antihypertensive agents | |
| AU612229B2 (en) | 5-substituted ornithine derivatives | |
| US4258059A (en) | Amino-benzamides | |
| CS200231B2 (en) | Process for preparing n-substituted lactames | |
| EP0195433B1 (en) | Amide derivatives processes for preparing them and use thereof | |
| CS207785B2 (en) | Method of making the derivatives of the n-phenylalanine or n-phenylglycine | |
| PT91742A (pt) | Processo para a preparacao de benzoxazolonas inibidoras de lipoxigenase e ciclo-oxigenase | |
| JPS63502432A (ja) | アシル化シアナミド組成物 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PBP | Patent lapsed |