NO781580L - Fremgangsmaate for fremstilling av konsentrater av bakteriekulturer - Google Patents

Fremgangsmaate for fremstilling av konsentrater av bakteriekulturer

Info

Publication number
NO781580L
NO781580L NO781580A NO781580A NO781580L NO 781580 L NO781580 L NO 781580L NO 781580 A NO781580 A NO 781580A NO 781580 A NO781580 A NO 781580A NO 781580 L NO781580 L NO 781580L
Authority
NO
Norway
Prior art keywords
centrifugation
culture
concentrates
nutrients
hexametaphosphate
Prior art date
Application number
NO781580A
Other languages
English (en)
Inventor
Randolph S Porubcan
Robert L Sellars
Original Assignee
Hansens Lab
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Hansens Lab filed Critical Hansens Lab
Publication of NO781580L publication Critical patent/NO781580L/no

Links

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23CDAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
    • A23C19/00Cheese; Cheese preparations; Making thereof
    • A23C19/02Making cheese curd
    • A23C19/032Making cheese curd characterised by the use of specific microorganisms, or enzymes of microbial origin
    • A23C19/0323Making cheese curd characterised by the use of specific microorganisms, or enzymes of microbial origin using only lactic acid bacteria, e.g. Pediococcus and Leuconostoc species; Bifidobacteria; Microbial starters in general
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/02Separating microorganisms from their culture media

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Dairy Products (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Description

Fremgangsmåde til fremstilling af et kulturkoncentrat.
Den foreliggende opfindelse angår en fremgangsmåde til fremstilling af et kulturkoncentrat til direkte podning af ostemælk.
Fremstilling af ost, yoghurt, kærnemælk og.lignende mælkepro-dukter kræver brug af mælkesyreproducerende bakterier. Ved den hidtil anvendte fremgangsmåde fremskaffes den ønskede kultur fra et syrevækkerlaboratorium , ' som kan være et kommerc.ielt drevet laboratorium, der sælger kulturer til mejeriindustrien, eller et laboratorium, som drives af'osteproducenten.
Disse laboratoriekulturer bruges så til at fremstille brugs-^-syrevækkere, hvilke sa bruges til podning i ostekarret. Typiske koncentrationer af sådanne laboratoriekulturer har været omkring 2 .x 10^ - 8 x 10^ levende bakterier pr. gram.
Direkte, tilsætning af laboratorie-kulturer til mælk i ostekar vil resultere i en ufuldstændig ostning, undtagen hvis man brugte meget store mængder. Selvom mellemtrinet med at' fremstille brugssyre er en ekstra udgift for os ternejeriet, har' det været nødvendigt for at holde ostningstiden nede på et minimum.
I de seneste år er syrevækkerlaboratorier begyndt at levere kultur-koncentrater som kan bruges til direkte podning af oste-.'.mælk uden forudgående fremstilling af brugssyre. Denne fremgangsmåde benævnes Direct Vat Set eller DVS process (direkte podning i ostekar). -
Til dette brug er det ønskeligt at have bakteriekulturen så . koncentreret som muligt. Standardmetoden til koncentrering er centrifugering. Med de cen trif uger,. der almindeligvis bruges til dette gøremål, udtages den vandige fase kontinuerligt fra centrifugen, og bakterierne opsamles i centrifugekuglen, fra hvilken den kan skrabcs ud eller mekanisk udstødes under centrif ugens gang. Da den dyrkede kultur indeholder rester af næringsstoffer, af hvilke nogle findes som uopløste, faste partikler, er det ikke altid' muligt at få en ren bakteriemasse. ud. Nogle celler tabes sammen med den fraseparerede vædsk.e, og .en del af, substratet kommer med i den faste fase, som inde- . holder bakterierne. Det teoretiske formål er naturligvis at udvinde 100% af cellerne helt fri for substratdele, som, selvom de ikke er skadelige, begrænser den opnåede cellekoncentration pr. volumen-enhed. Der har derfor været udført mange undersø-gelser for at øge udskillelsen af bakterier fra substrat, uden at det går ud over separeringseffekten, specielt når mælk og/ eller vallekomponenter er indeholdt i substratet.
Man har fundet, at en .noget højere cellekoncentration kan opnås ved at have citrat-ioner i substratet under centrifugeringen. Natriumcitrat er det reagens, som har været mest anvendt til dette formål. Imidlertid har den opnåede koncentration ikke været så stor som.ønsket, og hvis der tilsættes den nødvendige mængde citrat for at forbedre cellesepareringen, har■det den. modsatte effekt, at kulturens aktivitet .bliver mindre. En anden-fremgangsmåde, som har været noget anvendt, er tilsætning af et proteolytisk enzym til den dyrkede kultur, således som det er beskrevet i U.S. patent.No. 2.838.443. Behandling med-enzym - ..er af speciel værdi ved at øge cellemassens renhed, hvor der - til dyrkningssubstratet er anvendt ma;lkeprotein (kasein).
Ved brug af enten citrat eller enzym har det været vanskeligt. at. opnå reproducerbare koncentreringer på op imod 50 x 10^ : levende celler pr. gram. Dette gælder specielt ved de fleste blandingskulturer af mælkesyrestreptococcer.
Imidlertid ønsker man gerne koncentrationer på mindst 100 x 10^, levende celler, når der er .tale om DVS-kulturer, specielt hvis sådanne koncentrationer kan opnås uden. at reducere den udvundne cellemængde.
Denne opfindelsé er baseret på den iagttagelse,'at polyfosfat, såsom . natriumhexametafosfat, effektivt- fremmer udskillelsen og ' koncentreringen af bakterieceller fra et dyrkningssubstrat. Det er ikke kendt med sikkerhed, hvordan denne forbedring frem-'kommer. Man mener, at stoffet virker som dispergeringsmiddel for resterne af faste stoffer i substratet, såsom kasein. Da substraterne normalt er fremstillet ud fra fedtfri mælketør-stof .■ (skummetiriælkspulver) , sød valletørstof (vallepulver) eller
■ begge, vil de altid indeho3.de anselige- mængder af caseinrester og valleprotein, som begge ofte vil være i denatureret form.
Under separering af celler ved centrifugering kan noget af
caseinet og valleproteinet blive indesluttet i cellemassen.og herved reducere koncentrationen. Kan man nu dispergere disse proteiner, kan en større del blive separeret ud i vædskefasen og dermed mindre blive indesluttet i cellemassen. Imidlertid forklarer denne teori ikke fuldstændig polyfosfåtets effekt.
I forbindelse med. udviklingen af denne opfindelse har maiV kunnet vise eksperimentelt, at ikke blot får- man en større cellekoncentration, men også separeringsgradenøges. Dette kan del- . vis skyldes 'ændringer i de elektrostatiske ladninger på .cellerne og/eller substratkomponenterne. Imidlertid kan.der ikke .
gives nogen teoretisk forklaring på fænomenet.
Under praktisk arbejdende forhold har man kunnet genvinde 98-1005 af cellerne, når man koncentrerede' ti.l over 50 x IO<9>levende celler pr. gram. Typiske koncentrationer under produktion af DVS,ostekulturer er i området 80 x IO9 - 200 x IO<9>levende celler pr. gram.- Under visse forhold har man kunnet opnå koncentrationer på op til 400 x IO<9>levende celler pr. gram.
Selvom fosfater har været til stede i kultursubstrater, der an-r vendes til dyrkning af ostesyrevækkere iosterier, har de været til stede med andre formål, end det her beskrevne, og, så vidt vides, har den således fremstillede kultur .ikke været under-kastet en efterfølgende centrifugering. Så vidt vi kan se, er polyf osf aters betydning for udsepar.ering af bakferieceller og centrifugerings-effekten ikke tidligere blevet anerkendt eller beskrevet. Som anført i U.S. patenterne 3 . 041. 248 og 3.354.049 kan tilstedeværelse af fosfater i et substrat for bakterier være ønskeligt for at kontrollere'bakteriofagudvikling. Såvel orthofosfater som pyrofosfater er blevet foreslået til dette formål, men det må antages, at man i praksis mere har brugt orthofosfater end pyrofosfater eller andre polyfosfa ter.
Orthofosfater er ikke anvendelige til den her beskrevne.opfindelse.
I nogle kommercielt forhandlede substrater til brugssyrevækker-fremstilling findes natriumhexametafosfat tilligemed natriumcitrat. Imidlertid bliver brugssyrevækkere ikke centrifugerede, men hældes direkte i ostekarret.
Metoden ifølge opfindelsen kan bruges til fremstilling af koncentrerede bakteriekulturer af- velegnede mælkesyrebakterier, såsom kulturer, der anvendes ved frems tilling • af ost,, yoghurt, kærnemælk' rn. v. Metoden vil være anvendelig til fremstilling af bakteriekulturer i koncentreret form til brug som direkte tilsætning til ostemælk, 'altså uden forudgående produktion, af brugssyrevækker.
.Blandt mælkesyrebakterier, som kan behandles ved metoden i
denne opfindelse er følgende: Streptococcus lactis, Streptococcus cremoris,. Streptococcus diacetylactis, Streptococcus thermophilus, Lac tob acillus bulgari cus, Lac tobacillus - acidophilus, . Lac tobacillus helve Licus, L ac tobacillus bifidus, Lactobacillus . casei , Lacto bacillus lac tis-, Lactobaci Hus plan tarum, Lactobacillus rielbrueckii , Lactobacil lus therm ophilus , Lact obac. illus f erme tii , Pecliococcus cerevisiaeog Louconos toe crem oris .
Metoden kan også anvendes ved blandingskulturer af samme bak--teriestamrner. Da brug af kulturer med flere stammer af samme" bakterieart er ønskeligt i syrevækkere (multiple■strains), er det fordelagtigt, at udcentrifugering under t.ilstedeværelse af polyfosfater ikke indvirker. væsentligt på det relative forhold
.mellem. stammerne i det koneentrerede produkt. Den samme be-tragtning kan anstilles ved dyrkning og koncentrering■af blan-dingskulturer• (mixed species), såsom en blandingskultur af
St. thermophilus og Lac. bulgaricus, der bruges som yoghurt
og som syrevækker til italienske ostetyper (Hozzarella m.fl.). Det er derfor ikke nødvendigt at dyrke hver slægt eller bakterieart for sig og så blande arterne efter koncentreringen, således som det findes beskrevet i U.S. patent nr. 3.420.742.
Substraterne, som bruges til dyrkning af bakterierne, vil være de samme, som normalt anvendes til disse formål. Substraterne vil almindeligvis indeholde mælkeproteiner, enten tilsat<:>som skummetmælkspulver, pulver af sød valle eller begge dele''. Substraterne vil også indeholde kulhydrater, .såsom lactose og glucose. De kan også indeholde vækststoffer, uorganiske salte,-stødpudestoffer m.v. Næringsstofferne i substraterne kan være tilstede både i opløst form og som disperge.re.de partikler.
Målt som total tørstof vil der som regel være fra 4' til 12% • næringsstoffer. Hvor mindst 1% af substratet er skummelmælks-.pulver, vil denne opfindelse være specielt fordelagtig, men-den er. ikke begrænset til sådanne substrater.
Hvis det .ønskes, kan polyfosfaterne tilsættes substratet umiddel-bart før det anvendes til dyrkning. Dette kan være en fordel, hvor det er vigtigt at kontrollere (hæmme) bakteriofagudvikling. Imidlertid bør polyfosfatmængden under dyrkningen ikke være
så stor, at bakterievæksten hæmmes. Heldigvis er det sådan,
at man kan opnå den ønskede effekt af polyfosfater under centrif ugeringen efter dyrkningen ved en polyfosfatmængde på ca.
1% af substratvægten , og ved denne polyfosfatmængde har man også e-n effekt over for bak teriof ager. Hvis det ønskes kan ekstra fosfat tilsættes substratet i form af orthof osf at'. Dette virker da som stødpude. Orthofosfat har imidlertid kun mindre værdi som hjælp ved separeringen. ,
Ved udnyttelsen af denne opfindelse i praksis er det vigtigt,
at man har polyfosfaterne som en opløst bestanddel af substratet under selve udcentrifugeringen af cellerne. En del eller hele mængden af polyfosfat kan derfor tilsættes ved dyrkningens afslutning. Beregnet ud fra vægten af den dyrkede vandige kultur (substrat plus celler) kan 0., 25 til 5% polyfosfat være tilstede under udcentrifugeringen. De anvendte polyfosfater
. er tilladte til fødevarer og findes i form af natrium, kalium eller ammoniuinsalte. Der stilles ingen særlige krav til det anvendte salt, bortset fra at det skal være tilladt til lev-nedsmidler. Ét foretrukket polyfosfat betegnes kommercielt som "hexametafosfat", selvom det ikke er et veldefineret produkt, men snarere en blanding af polyfosfater, som kan indeholde fra 4 til 22 fosfatgrupper pr. molekyle. Hexametafosfat findes almindeligvis i handelen som et natriurnsalt og kan med fordel anvendes i denne form til det i opfindelsen anførte, formål. Hexametafosfat.ihdeholdende fra 6-21 fosfatgrupper pr. molekyle er specielt velegnede. Sådanne glasagtige fosfater forhandles af mange firmaer, f .eks.; et produkt som sælges af FMC Corporation, New York, under.handelsnavnene "Hexaphos" og "Sodophos". Mere generelt kan man godt anvende polyf osf at-salte indeho.ldende fra 2 til 22 fosfatgrupper pr. molekyle, og mellem sådanne stof-fe:r' findes også tr i po ly f or f a f og py ro f os fat. Et fordelagtigt niveau for polyfosfat indholdet under centrifugeringen er fra ca. 0,5.til 4,0% baseret .på vægten af den fermenterede kultur, der skal behandles (celler + substrat) .. Man kan dog anvende højere eller lavere koncentrationer og stadig'opnå nogen fordel af den her beskrevne opfindelse. For at fremme separeringen skal koncentrationen være mindst 0,25% (vægt %).. Ved meget høje koncentrationer, f. eks., over 6,0%, kan der optra?de en negativ påvirkning af cellernes , aktivitet. Som følge heraf kan det ikke anbefales at anvende Over 5% poly-. fosfatsalte, selvom saltet tilsættes under dyrkningen og kon-takttiden er relativ kort. Polyfosfat-saltet opløses' i den vandige opløsni.ng og er derfor i intim kontakt med de tilbage-værende faste stoffer i substratet, såvel som med .bakterio-cellerne. Dette er alt sorn kræves for at opna udbytte af denne opfindelse. Centrifugeringen som sådan, udføres på samme måde som tidligere og ved anvendelse af standardccntrifuger, der normalt bruges for koncentrering af bak ter ieceller ■. Ved til s tedeværelsen af po3.y f osf atsalte fås en'signifikant større-, mængde celler pr. volumen. Ligeledes opnås i de fleste tilfælde . en fprøget udskilningsgrad, således, at 98-100% af cellerne uds.l ynges. Videre kan man komme op på cellekoncentrater ud over 50 x 10<9>CFU pr. gram (coloni forming units). Særlig fordel-agtige. koncent.rater vil indeholde mindst 80 x IO<9>CFU, vari-erende fra 80 x IO<9>- 200 x IO<9>CFU pr. gram....
De teoret/iske og kommerciellle aspekter af denne opfindelse belyses nærmere ved de etterfølgende eksperimentelle og kommercielle eksempler.
Eksperimentelle eksempler
Forsøg blev udført i 2 liter kolber. Fremgåhgsmåden var føl-gende : .En blandingskultur indeholdende St. lactis og St. cremoris.
(Chr.. Hansen's laboratory, Inc., Milvaukee, kultur nr. 44) blev podet i 2 liter enheder af pasteuriserede' (90° i 60 minutter) substrater. Podemængde 1%. Inkubation ved 22°C i .16 timer. De forskellige sammensætninger af substraterne fremgår af tabellerne. Efter 16 timers inkubation afkøledes kulturen til. 7°C, og■pH blev justeret til 6,0 med•koncentreret NH4OH. Tidspunktet og % polyfosfat tilsat fremgår af tabellerne.- Polyfosfat•blev
. tilsat under omrøring. Prøver på' 230 ml blev- derpå centrifugeret på en Sorval RC - 2 B laboratoriecentrif uge ved 8.000 x G i 30 minutter ved 7-10°C. Den ovenstående, klare vædske blev dekanteret fra og vægten af cellemasse/substrat koncentrat blev bestemt. Fra konccntraterne blev der derpå udsået på Ellikers
agar (3 plader ved hver bestemmelse) i fortyndinger op til l6_^<u>.Pladerne blev inkuberet ved 30°C i 3 døgn. Alle kolonier blev talt og resultaterne er opgivet som koloni dannende enheder (CFU) pr. gram. Da kædelængden hos mælkesyrestreptococcer varierer som en funktion af stamme, vækst-medium, omrøring, væksttemperatur m.v., vil de enkelte kolonier repræsentere
fra 1-30 bakterieceller eller mere. Derfor opgives tallene
■som CFU/gram.' Da centrifugeringen splitter kæderne op i mindre<->enheder; er det vanskeligt at angive præcist, hvor mange. % af cellerne der egentlig bliver centrifugeret fra.
Under forsøget blev der anvendt mange substratsammensætninger, alle dog justeret til 9% total tørstof i vand. Kontrolprøver dyrkedes parallelt, men uden polyfosfattilsætning, og samme substrat blev undersøgt separat med tilsætning af natrium-hexametaf osf at i mængd før og efter inkubationen. Det anvendte marke af Na-hexametaf osf at var "Ilexaphos", leveret af FMC Corporation, Nev/York. Det opgives at indeholde ca. 13 f osf atgrupper pr. molekyle i gennemsn.lt.
Resultaterne er opnoteret i tabellerne A, B, C og D.
De foran anførte resultater må bedømmes som relative mere end som absolutte tal. Bakteriekoncentrationerne ved inkubationens
-afslutning er væsentlig lavere end tilsvarende tal fundet ved kommercielle dyrkninger, hvor der anvendes store fermenta-torer, som er udstyret med omrørere og pH-styring. Slut-koncentrationen af celler, som kan opnås ved kommercielle dyrkninger, vil derfor være betydelig højere end de forannævnte. Resultaterne er imidlertid gyldige som visende relative koncentrationer, og forøgede•koncentrationer af samme propor-tionale størrelse kan forventes ved kommerciel. dyrkning. Ved
brug af denne opfindelse kan man opnå bakteriekoncentrater indeholdende mindst 50 x IO<9>CFU pr. gram, og i almindelighed vil koncentrater produceret efter denne opfindelse til brug
ved direkte podning af ostemælk indeholde 80 x IO<9>- 200 x IO9 CFU pr. gram. Videre opnås der en væsentlig forbedring af ud-byttet af bakterieceller ved centrifugeringen, idet omkring
93% af cellerne kan genfindes i koncentratet..
Videre detailler af de kommercielle forsøg kan illustreres
ved følgende eksempler.
Kommercielle eksempler
Eksempel 1.
450 US-gallon (-1700 liter) substrat, indeholdende 6 vægt % fedtfri mælkétørstof, 1% glucose og 1% gsrekstrakt fyldes i
en 500 gallon mejeri-fermentator (syrekoger). Substratet varme-behandles ved 90°C i 60 minutter under konstant omrøring, på
24 omdr./min. Derefter køles til 26-30°C. Der podes med 2 volumen % fra e'n aktiv blandingskultur af St. lactis plus St. cremoris (CIIL-kultur nr. 840). Inkubation ved 26-30°C under konstant omrøring- i 10-12 timer og under automatisk pH-kontrol ved pH 5,8 0 til 6,20. Der anvendes koncentreret ammoniumhydroxid til■neutralisation. Efter 10-12 timers inkubation hæves, pH til 6,'40 - 6 , 80 under samti-.dig afkøling- til 12-16°C og tilsætning af 2% natriumhexametafosfat (FMC-hexaphos) . Omrøringen øges til.'48 omdr./min. Efter .30-60 minutters-, omrøring centrifugeres den afkølede kultur på en separator med automatisk udslyngning af koncentrat. Kulturen tilføres separatoren ved 15°C og med 600 gallon pr. time. Den automatiske udslyngning•justeres til at give .5% koncentrat. Den fracentrifugerede vædske indeholdt under 1% af totalmæng-den af tilførte bakterier. Koncentratet indeholdt 20 x flere bakterier pr. volumen end indgangskulturen.
Typiske værdier for koncentrater af kultur nr. 84 0 ,i CFU-qnheder pr. gram bestemt på Ellikers mælke-agar ligger i området' 150 x IO<9>til 250 x IO<9>. 360 ml af et sådant koncentrat er tilstrækkelig podemængde til 5.000 Ibs (2268 kg) mælk til Cheddar ost. Sådanne koncentrater bliver sædvanligvis frosset
i flydende kvælstof ved -196°C og fremstilles kommercielt i aluminiumsdåser.
Eksempel 2.
450 US-gallon (1700 liter) substrat af samme grundsammensæt-ning. som i eksempel ,1, men med halvdelen af skummetmælkspul-veret erstattet med vallepulver, fyldes i en 500 gallon fermentator. Der tilsættes 1% natriumhexametafosfat (FMC-hexaphps) under konstant omrøring, men før pasteurisering. Kultur nr. CHL-630 anvendtes som podemateriale.' Kultur CHL-630 indeholder 2 stammer St. lact.is.
Fremgangsmåden ved kulturens fremstilling var den samme som
i eksempel 1, bortset fra at der ikke blev tilsat Na-hexametafosfat efter-inkubationen. De udcentrifugerede cellekoncentrater indeholdt 250 x IO<9>- 350 x IO<9>CFU pr. gram, og bakteriemassen udgjorde 5% af det oprindelige'volumen. 360 ml koncentrat nr. 630.er tilstrækkelig podemateriale til 10.000 Ibs (4536 kg) mælk til Cheddar ost.
Eksempel 3.
Fremgangsmåde som i eksempel 1, men med den ændring at i stedet for natriumhexametafosfat bruges 3% natriumtripolyfosfat. De udvundne koncentrater indeholdt fra 100 x IO<9>til 150 x IO<9>CFU pr. gram. Bakteriemassen udgjorde 5% af det oprindelige volumen.
Eksempel 4.
Fremgangsmåde som 1 eksempel 3, men der tilsættes 4% natrium-pyrofosfat i stedet for 3% natriumtripo.lyf osf at. De udvundne
koncentrater indeholdt fra 100 x IO<9>til 150 x IO9 CFU pr. ' gram. ,
Eksempel 5.
200 US-gallon (756 kg) substrat indeholdende 4% sød vallepulver, 2% skummetmælkspulver, 1% gærekstrakt, 1% natriumcitrat og forskellige mineralsalte af kalium, mangan og magnesium,'fyldes'i en 200 gallon fermentator. Substratet pasteuriseres og af-køles til 22-26°C. Der podes med 2% af en skumme tmælk sku l.tu r af Leuconostoc cremoris (CHL nr. CAF-1). Inkubation ved 22-26°C i 20-24 timer under pH-styring ved 5,80-6,20 og med koncentreret ammoniumhydroxyd .som neutraliseringsvædske. Efter inkubationen køl.es til 12-16°, og samtidig tilsættes 4% natrium-<4>hexametafosfat■ (Monsanto food-grade). Der omrøres med 48 omdr./ min. i 30 minutter. Kulturen blev derpå separeret ved 14.000 G
■på en Carl Padberg model Z-101 supercentrifuge. Koncentratet
justeredes til 6% af det oprindelige volumen ved- hjælp af steril
skumme.tmælk. Koncentratet indeholdt 50 x IO<9>- 60 x IO9' CFU pr. gram, bestemt på Nickels calciumcitratågar. Et sådant koncentrat af Leuconostoc cremoris bruges til tilsætning til koncentrater af Streptococcus cremosri/lactis og anvendes ved frerristilling af forskellige ostesorter.
Eksempel 6.
Fremgangsmåden fra eksempel 2 anvendes, men med følgende undtagelser: 1% skummetmælkspulver + 5% vallepulver •+ 1% glucose + 1% gærekstrakt. -
Som podemateriale anvendes en stamme af St. diacetylactis (CHL nr. AFI-1) dyrket i steril skummetmælk. Koncentraterne indeholdt 100 x IQ<9>- 125 x IO<9>CFUpr. gram,og cellemassen udgjorde 6' b af udgangsvoluminet.

Claims (9)

1. Fremgangsmåde til fremstilling af koncentrater af bakteriekul^ turer bestemt til direkte podning af portioner af mælk, ved hvilken mælkesyreproducerende bakterier dyrkes i et vandigt substrat indeholdende næringsstoffer, således at der fremkommer en kultur af bak terieceller plus rester af de anvendte næringsstoffer, herunder kasein, og bakteriecellerne udvindes og koncentreres ved udcentrifugering, kendetegnet ved, at man før udcentrifugeringen tilsætter kulturen fra 0,' 25 til 5,0% (på vægtbasis) af vandopløselige, føde-middel-acceptable polyphosphatsa.lte indeholdende 2-22 .phosphatgrupper pr. molekyle..
2. Fremgangsmåde ifølge krav 1, • kendetegnet ved, at polyphosphatsaltet under centrifugeringen er til stede i en mængde på fra 0,5 - 4,0 vægtprocent, og at centrifugeringen er i stand til at producere cellekoncentrater 9 med mindst 50 x 10 CFU pr. gram..
3. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at polyphosphatsaltet er-et tripoly-phosphat eller hexametaphosphat. indeholdende 4 - 22 phosphatgrupper pr. molekyle.
4. Fremgangsmåde ifølge krav '3, kendetegnet ved, at hexametaphosphatet er natriumhexameta-phosphat.
5. Fremgangsmåde ifølge krav 3, kendetegnet ved, at tripolyphosphatet er natriumtripoly-phosphat.
6. Fremgangsmåde ifølge krav 4, kendetegnet ved, at natriumhexametaphosphatet indeholder 6-21 phosphatgrupper pr. molekyle. .
7. Fremgangsmåde ifølge et hvilket som helst af de foregående krav, kendetegnet ved, at centrif ugeringen'. er i stand til at producere cellekoncentrater med mindst 100 x 10 CFU pr. gram. /
8. Fremgangsmåde ifølge krav 7, kendetegnet ved, at centrifugeringen er i stand til at 9 9 producere cellekoncentrater med 150 x 10 - 250 x 10 CFU pr. gram. i
9. Fremgangsmåde ifølge et hvilket som helst af de foregående krav, kendetegnet ved, at den vandige næringsvæske ved dyrkningens begyndelse indeholder fra 4 til 12% af de nævnte næringsstoffer og mindst 1% af næringsstofferne er skummetmælkspulver.
NO781580A 1977-05-04 1978-05-03 Fremgangsmaate for fremstilling av konsentrater av bakteriekulturer NO781580L (no)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US05/793,483 US4115199A (en) 1977-05-04 1977-05-04 Preparation of culture concentrates for direct vat set cheese production

Publications (1)

Publication Number Publication Date
NO781580L true NO781580L (no) 1978-11-07

Family

ID=25160023

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO781580A NO781580L (no) 1977-05-04 1978-05-03 Fremgangsmaate for fremstilling av konsentrater av bakteriekulturer

Country Status (11)

Country Link
US (1) US4115199A (no)
AU (1) AU517009B2 (no)
CA (1) CA1092040A (no)
DE (1) DE2817326A1 (no)
DK (1) DK190478A (no)
FR (1) FR2389673A1 (no)
GB (1) GB1552909A (no)
NL (1) NL7804815A (no)
NO (1) NO781580L (no)
NZ (1) NZ187159A (no)
SE (1) SE7805145L (no)

Families Citing this family (20)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4339464A (en) * 1978-02-24 1982-07-13 Microlife Technics, Inc. Stabilizer producing Streptococcus thermophilus
USRE32079E (en) * 1979-06-28 1986-02-04 State Of Oregon, By And Through The Oregon State Board Of Higher Education On Behalf Of Oregon State University Method and starter compositions for the growth of acid producing bacteria and bacterial compositions produced thereby
US4282255A (en) * 1979-06-28 1981-08-04 State Of Oregon, By And Through The Oregon State Board Of Higher Education On Behalf Of Oregon State University Method and starter compositions for the growth of acid producing bacteria and bacterial compositions produced thereby
US4294930A (en) * 1979-08-22 1981-10-13 Miles Laboratories, Inc. Process for improving the recovery of microbial cell biomass
US4372979A (en) * 1979-09-07 1983-02-08 Leprino Foods Company Reduction of curd fines in cheese manufacture
US4402986A (en) * 1981-07-23 1983-09-06 Stauffer Chemical Company Bulk starter media
CA1224434A (en) * 1983-04-11 1987-07-21 Malireddy S. Reddy Cheese starter media and method of making same
US4621058A (en) * 1983-04-11 1986-11-04 Mid-America Dairymen, Inc. Method of preparing cheese starter media
US4910024A (en) * 1988-07-05 1990-03-20 Micro Chemical, Inc. Method and apparatus for administering live bacteria as feed additives to livestock and poultry
US5128260A (en) * 1989-01-12 1992-07-07 Sanofi Bio Ingredients, Inc. Process for preparing culture concentrates for direct vat set dairy products production
US5716615A (en) * 1992-02-10 1998-02-10 Renata Maria Anna Cavaliere Vesely Dietary and pharmaceutical compositions containing lyophilized lactic bacteria, their preparation and use
NZ503458A (en) * 1997-08-25 2001-08-31 Chr Hansen As The preparation of a stable, aqueous suspension of a starter culture where the propagation of a mother culture into the bulk starter is not required
DE69935889T2 (de) * 1998-08-28 2008-01-17 Nipro Corp., Osaka Polyphosphorsäure enthaltendes Zellwachstumsbeschleunigungsmittel und dessen Verwendung
US6319526B1 (en) 2000-01-06 2001-11-20 Land O'lakes, Inc. Pasta filata cheese
CA2403398A1 (en) * 2000-03-21 2001-09-27 Chr. Hansen A/S Method for supply of starter cultures having a consistent quality
CA2414628A1 (en) * 2000-07-05 2002-01-10 Danmarks Tekniske Universitet Method of improving biomass yield of lactic acid bacterial cultures
US20030045428A1 (en) * 2001-07-05 2003-03-06 Microbes, Inc. Bacillus laterosporus strain CM-3 for promoting grain crop yields
US7021145B2 (en) * 2003-07-21 2006-04-04 Horiba Instruments, Inc Acoustic transducer
CA2757218A1 (en) * 2009-03-30 2010-10-07 Meiji Co., Ltd. Method for culturing lactic acid bacterium and method for producing fermented milk
EA024923B1 (ru) * 2010-07-15 2016-11-30 Компани Жервэ Данон Применение марганца для селективной стимуляции роста lactobacillus casei в смешанных культурах

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3041248A (en) * 1960-06-01 1962-06-26 Robert E Hargrove Control of bacteriophage
USRE28276E (en) 1963-06-06 1974-12-17 Milk fermenting product and method of making same
US3354049A (en) * 1965-07-30 1967-11-21 Marschall Dairy Lab Inc Dry starter composition
US3968256A (en) * 1971-01-25 1976-07-06 Sing Edmond L Preparation of cottage cheese

Also Published As

Publication number Publication date
NL7804815A (nl) 1978-11-07
DK190478A (da) 1978-11-05
AU3481378A (en) 1979-10-11
US4115199A (en) 1978-09-19
SE7805145L (sv) 1978-11-05
DE2817326A1 (de) 1978-11-16
NZ187159A (en) 1980-11-28
GB1552909A (en) 1979-09-19
AU517009B2 (en) 1981-07-02
CA1092040A (en) 1980-12-23
FR2389673A1 (no) 1978-12-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
NO781580L (no) Fremgangsmaate for fremstilling av konsentrater av bakteriekulturer
US4065580A (en) Lipolytic enzyme flavoring system
MX2011004313A (es) Composicion mejorada para producir un producto lacteo.
Gilliland Concentrated starter cultures
US11666060B2 (en) Acid whey with stable lactose content
US3420742A (en) Milk fermenting product and method of making same
JP5963389B2 (ja) 高活性の乳酸菌スターターの調製方法及び当該スターターを用いた発酵乳の製造方法
JPH0468908B2 (no)
USRE28276E (en) Milk fermenting product and method of making same
Ordonez et al. MANUFACTURE of FROZEN YOGURT WITH ULTRAFILTERED MILK and PROBIOTIC LACTIC ACID BACTERIA 1
CA1273886A (en) Method of cultivating, in milk, organisms having a slow growth capacity, and organisms produced by the method, and milk products containing such organisms
AU621579B2 (en) Stabilized protoplasts
RU2337558C2 (ru) Закваска, предназначенная для прямого внесения в молочную основу, и способ производства кисломолочных пищевых продуктов
US5128260A (en) Process for preparing culture concentrates for direct vat set dairy products production
EP0130775B2 (en) An improved process for making dairy products
US3446627A (en) Rapid manufacture of cheese
Willrett Development of internally pH-controlled bulk starter media for the propagation of lactic acid bacteria
SU1731141A1 (ru) Штамм бактерий SтRертососсUS тнеRморнILUS, используемый в составе бактериальных заквасок дл производства творога
US5364641A (en) Process for manufacturing dairy products
RU2157640C2 (ru) Способ получения концентрата молочнокислых бактерий для производства сыров
SU454888A1 (ru) Способ получени бактериального препарата
Chen Manufacture of Cottage Cheese Utilizing a pH-controlled, Whey-Based Lactic Culture
Libudzisz et al. The use of frozen concentrated cultures of mesophilic lactic acid bacteria as a starter in cheese making