NO742383L - - Google Patents
Info
- Publication number
- NO742383L NO742383L NO742383A NO742383A NO742383L NO 742383 L NO742383 L NO 742383L NO 742383 A NO742383 A NO 742383A NO 742383 A NO742383 A NO 742383A NO 742383 L NO742383 L NO 742383L
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- gly
- ala
- cys
- tyr
- peptide
- Prior art date
Links
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 44
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 37
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 29
- 239000011347 resin Substances 0.000 claims description 15
- 229920005989 resin Polymers 0.000 claims description 15
- -1 Cys amino acids Chemical class 0.000 claims description 9
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 claims description 8
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 claims description 6
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 5
- 108010016626 Dipeptides Proteins 0.000 claims description 4
- 150000007524 organic acids Chemical group 0.000 claims description 4
- CXISPYVYMQWFLE-VKHMYHEASA-N Ala-Gly Chemical compound C[C@H]([NH3+])C(=O)NCC([O-])=O CXISPYVYMQWFLE-VKHMYHEASA-N 0.000 claims description 3
- PGNNQOJOEGFAOR-KWQFWETISA-N Ala-Tyr-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)C)CC1=CC=C(O)C=C1 PGNNQOJOEGFAOR-KWQFWETISA-N 0.000 claims description 3
- DLZKEQQWXODGGZ-KWQFWETISA-N Tyr-Ala-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 DLZKEQQWXODGGZ-KWQFWETISA-N 0.000 claims description 3
- HPYDSVWYXXKHRD-VIFPVBQESA-N Tyr-Gly Chemical compound [O-]C(=O)CNC(=O)[C@@H]([NH3+])CC1=CC=C(O)C=C1 HPYDSVWYXXKHRD-VIFPVBQESA-N 0.000 claims description 3
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 claims description 3
- 108010047495 alanylglycine Proteins 0.000 claims description 3
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 claims description 3
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 claims description 3
- 108010005834 tyrosyl-alanyl-glycine Proteins 0.000 claims description 3
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical group [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 claims description 2
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 claims description 2
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 claims description 2
- 239000001257 hydrogen Chemical group 0.000 claims description 2
- 229910052739 hydrogen Chemical group 0.000 claims description 2
- RZKYEQDPDZUERB-UHFFFAOYSA-N Pindone Chemical group C1=CC=C2C(=O)C(C(=O)C(C)(C)C)C(=O)C2=C1 RZKYEQDPDZUERB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 125000003236 benzoyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C(*)=O 0.000 claims 2
- NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N acrylic acid group Chemical group C(C=C)(=O)O NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical group OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 claims 1
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 35
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 34
- 108010056088 Somatostatin Proteins 0.000 description 29
- 239000000122 growth hormone Substances 0.000 description 25
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 24
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 23
- 102000018997 Growth Hormone Human genes 0.000 description 23
- 108010051696 Growth Hormone Proteins 0.000 description 23
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 21
- 102000005157 Somatostatin Human genes 0.000 description 18
- 206010062767 Hypophysitis Diseases 0.000 description 14
- 210000003635 pituitary gland Anatomy 0.000 description 14
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 11
- 102000011923 Thyrotropin Human genes 0.000 description 10
- 108010061174 Thyrotropin Proteins 0.000 description 10
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 description 9
- 210000003016 hypothalamus Anatomy 0.000 description 8
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 8
- 239000000463 material Substances 0.000 description 8
- NHXLMOGPVYXJNR-ATOGVRKGSA-N somatostatin Chemical compound C([C@H]1C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C3=CC=CC=C3NC=2)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(=O)N1)[C@@H](C)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)N)C(O)=O)=O)[C@H](O)C)C1=CC=CC=C1 NHXLMOGPVYXJNR-ATOGVRKGSA-N 0.000 description 8
- 229960000553 somatostatin Drugs 0.000 description 8
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 7
- WTDRDQBEARUVNC-LURJTMIESA-N L-DOPA Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C(O)=C1 WTDRDQBEARUVNC-LURJTMIESA-N 0.000 description 7
- WTDRDQBEARUVNC-UHFFFAOYSA-N L-Dopa Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C(O)=C1 WTDRDQBEARUVNC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 7
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 7
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 7
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 6
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 5
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 5
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 5
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 4
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 4
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 4
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 4
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 description 4
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 3
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 3
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 3
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 3
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 3
- 230000000762 glandular Effects 0.000 description 3
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 3
- 230000001817 pituitary effect Effects 0.000 description 3
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 3
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 3
- DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N β‐Mercaptoethanol Chemical compound OCCS DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- MYRTYDVEIRVNKP-UHFFFAOYSA-N 1,2-Divinylbenzene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1C=C MYRTYDVEIRVNKP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XPDXVDYUQZHFPV-UHFFFAOYSA-N Dansyl Chloride Chemical compound C1=CC=C2C(N(C)C)=CC=CC2=C1S(Cl)(=O)=O XPDXVDYUQZHFPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N Fluorane Chemical compound F KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000005727 Friedel-Crafts reaction Methods 0.000 description 2
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- PPBRXRYQALVLMV-UHFFFAOYSA-N Styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1 PPBRXRYQALVLMV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MUMGGOZAMZWBJJ-DYKIIFRCSA-N Testostosterone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 MUMGGOZAMZWBJJ-DYKIIFRCSA-N 0.000 description 2
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 2
- RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N anisole Chemical compound COC1=CC=CC=C1 RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 2
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 2
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 2
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 2
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 2
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 2
- XWJDVNOOYSANGI-ATOGVRKGSA-N dihydrosomatostatin Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 XWJDVNOOYSANGI-ATOGVRKGSA-N 0.000 description 2
- 229940093915 gynecological organic acid Drugs 0.000 description 2
- 230000002267 hypothalamic effect Effects 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 238000004264 monolayer culture Methods 0.000 description 2
- 230000017066 negative regulation of growth Effects 0.000 description 2
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 2
- FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N ninhydrin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(O)(O)C(=O)C2=C1 FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 2
- 150000002894 organic compounds Chemical class 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 239000000376 reactant Substances 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 229960000874 thyrotropin Drugs 0.000 description 2
- 230000001748 thyrotropin Effects 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- TXUICONDJPYNPY-UHFFFAOYSA-N (1,10,13-trimethyl-3-oxo-4,5,6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-dodecahydrocyclopenta[a]phenanthren-17-yl) heptanoate Chemical compound C1CC2CC(=O)C=C(C)C2(C)C2C1C1CCC(OC(=O)CCCCCC)C1(C)CC2 TXUICONDJPYNPY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZZRIQDWDJVLELF-UHFFFAOYSA-N 3-phenyl-2-sulfanylideneimidazolidin-4-one Chemical class O=C1CNC(=S)N1C1=CC=CC=C1 ZZRIQDWDJVLELF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010000599 Acromegaly Diseases 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IAPXDJMULQXGDD-NSHDSACASA-N Boc-Asn-OPhNO2 Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)OC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 IAPXDJMULQXGDD-NSHDSACASA-N 0.000 description 1
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- XJUZRXYOEPSWMB-UHFFFAOYSA-N Chloromethyl methyl ether Chemical compound COCCl XJUZRXYOEPSWMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 1
- 102000012673 Follicle Stimulating Hormone Human genes 0.000 description 1
- 108010079345 Follicle Stimulating Hormone Proteins 0.000 description 1
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Natural products NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 1
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 102000002704 Leucyl aminopeptidase Human genes 0.000 description 1
- 108010004098 Leucyl aminopeptidase Proteins 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 102400000050 Oxytocin Human genes 0.000 description 1
- 101800000989 Oxytocin Proteins 0.000 description 1
- XNOPRXBHLZRZKH-UHFFFAOYSA-N Oxytocin Natural products N1C(=O)C(N)CSSCC(C(=O)N2C(CCC2)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C1CC1=CC=C(O)C=C1 XNOPRXBHLZRZKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108090000526 Papain Proteins 0.000 description 1
- 102000003946 Prolactin Human genes 0.000 description 1
- 108010057464 Prolactin Proteins 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 101000868151 Rattus norvegicus Somatotropin Proteins 0.000 description 1
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 1
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- 229910021626 Tin(II) chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical class CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GXBMIBRIOWHPDT-UHFFFAOYSA-N Vasopressin Natural products N1C(=O)C(CC=2C=C(O)C=CC=2)NC(=O)C(N)CSSCC(C(=O)N2C(CCC2)C(=O)NC(CCCN=C(N)N)C(=O)NCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C1CC1=CC=CC=C1 GXBMIBRIOWHPDT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010004977 Vasopressins Proteins 0.000 description 1
- 102000002852 Vasopressins Human genes 0.000 description 1
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 239000011149 active material Substances 0.000 description 1
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 1
- 210000004404 adrenal cortex Anatomy 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 1
- KBZOIRJILGZLEJ-LGYYRGKSSA-N argipressin Chemical compound C([C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@@H](C(N[C@@H](CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)N1)=O)N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)NCC(N)=O)C1=CC=CC=C1 KBZOIRJILGZLEJ-LGYYRGKSSA-N 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 1
- 125000001584 benzyloxycarbonyl group Chemical group C(=O)(OCC1=CC=CC=C1)* 0.000 description 1
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 1
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- UXTMROKLAAOEQO-UHFFFAOYSA-N chloroform;ethanol Chemical compound CCO.ClC(Cl)Cl UXTMROKLAAOEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940061627 chloromethyl methyl ether Drugs 0.000 description 1
- 238000007334 copolymerization reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003246 corticosteroid Substances 0.000 description 1
- 229960001334 corticosteroids Drugs 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 239000007822 coupling agent Substances 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 239000000287 crude extract Substances 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- MHDVGSVTJDSBDK-UHFFFAOYSA-N dibenzyl ether Chemical compound C=1C=CC=CC=1COCC1=CC=CC=C1 MHDVGSVTJDSBDK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 230000007515 enzymatic degradation Effects 0.000 description 1
- 230000004907 flux Effects 0.000 description 1
- 229940028334 follicle stimulating hormone Drugs 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 210000004602 germ cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000004907 gland Anatomy 0.000 description 1
- 125000003630 glycyl group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 210000002149 gonad Anatomy 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 1
- 239000013067 intermediate product Substances 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000006651 lactation Effects 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 229960005375 lutein Drugs 0.000 description 1
- 239000001656 lutein Substances 0.000 description 1
- KBPHJBAIARWVSC-RGZFRNHPSA-N lutein Chemical compound C([C@H](O)CC=1C)C(C)(C)C=1\C=C\C(\C)=C\C=C\C(\C)=C\C=C\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\[C@H]1C(C)=C[C@H](O)CC1(C)C KBPHJBAIARWVSC-RGZFRNHPSA-N 0.000 description 1
- ORAKUVXRZWMARG-WZLJTJAWSA-N lutein Natural products CC(=C/C=C/C=C(C)/C=C/C=C(C)/C=C/C1=C(C)CCCC1(C)C)C=CC=C(/C)C=CC2C(=CC(O)CC2(C)C)C ORAKUVXRZWMARG-WZLJTJAWSA-N 0.000 description 1
- 235000012680 lutein Nutrition 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 1
- UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N methoxybenzene Substances CCCCOC=C UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 1
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 1
- 125000005740 oxycarbonyl group Chemical group [*:1]OC([*:2])=O 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- XNOPRXBHLZRZKH-DSZYJQQASA-N oxytocin Chemical compound C([C@H]1C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](N)C(=O)N1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(N)=O)=O)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 XNOPRXBHLZRZKH-DSZYJQQASA-N 0.000 description 1
- 229960001723 oxytocin Drugs 0.000 description 1
- 125000000636 p-nitrophenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(=C([H])C([H])=C1*)[N+]([O-])=O 0.000 description 1
- 229940055729 papain Drugs 0.000 description 1
- 235000019834 papain Nutrition 0.000 description 1
- 238000004810 partition chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N phenylalanine group Chemical group N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)O COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N phenylmethyl ester of formic acid Natural products O=COCC1=CC=CC=C1 UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 229940077150 progesterone and estrogen Drugs 0.000 description 1
- 229940097325 prolactin Drugs 0.000 description 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 239000012264 purified product Substances 0.000 description 1
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 1
- 239000003488 releasing hormone Substances 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 125000003607 serino group Chemical group [H]N([H])[C@]([H])(C(=O)[*])C(O[H])([H])[H] 0.000 description 1
- 235000011150 stannous chloride Nutrition 0.000 description 1
- 239000001119 stannous chloride Substances 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 239000000021 stimulant Substances 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001308 synthesis method Methods 0.000 description 1
- 239000000057 synthetic resin Substances 0.000 description 1
- 229920003002 synthetic resin Polymers 0.000 description 1
- 210000001550 testis Anatomy 0.000 description 1
- 229960003604 testosterone Drugs 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 1
- 125000000341 threoninyl group Chemical group [H]OC([H])(C([H])([H])[H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 210000001685 thyroid gland Anatomy 0.000 description 1
- KBPHJBAIARWVSC-XQIHNALSSA-N trans-lutein Natural products CC(=C/C=C/C=C(C)/C=C/C=C(C)/C=C/C1=C(C)CC(O)CC1(C)C)C=CC=C(/C)C=CC2C(=CC(O)CC2(C)C)C KBPHJBAIARWVSC-XQIHNALSSA-N 0.000 description 1
- 125000001493 tyrosinyl group Chemical group [H]OC1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 229960003726 vasopressin Drugs 0.000 description 1
- FJHBOVDFOQMZRV-XQIHNALSSA-N xanthophyll Natural products CC(=C/C=C/C=C(C)/C=C/C=C(C)/C=C/C1=C(C)CC(O)CC1(C)C)C=CC=C(/C)C=CC2C=C(C)C(O)CC2(C)C FJHBOVDFOQMZRV-XQIHNALSSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
- C07K14/655—Somatostatins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S930/00—Peptide or protein sequence
- Y10S930/01—Peptide or protein sequence
- Y10S930/16—Somatostatin; related peptides
Description
Peptider og fremgangsmåte ved deres frems tilling.
Foreliggende oppfinnelse vedrorer generelt nye petid-komposisjoner som utviser inhiberende effekt på den vekstfremmende funksjon av "hypofysen i mennesker og dyr. Mere spesielt er foreliggende oppfinnelse rettet på nye peptid-komposisjoner som påvirker frigjorelse av veksthormoner fra hypofysekjertelen.
Hypofysekjertelen er ved hjelp av en stilk knyttet til den
nedre området av hjernen som er kjent som hypotalamus. Hypofysekjertelen har to kjertellegemer, nemlig det fremre og
det bakre kjertellegeme. Det bakre kjertellegeme av hypofysekjertelen lagrer og innforer i den generelle blodsirkulasjon to hormoner som fremstilles i hypotalamus, disse er vasopressin
i og oksytocin.Det fremre kjertellegmet av hypofysekjertelen utskiller et antall hormoner, som er komplekse protein eller glykoprotein-molekyler som fores med blodstrømmen til forskjellige organer, som på sin side stimulerer utskillelse av andre hormoner fra perifere organer.og inni blodstrommen. Hypofysekjertelen utskiller et adenocorticotropinhormon som stimulerer binyrebarken til å utskille corticosteroider. Et skjoldbrusk-stimulerende hormon, kjent som thyrotropin frigjores og stimulerer utskillelser fra skjoldbruskkjertelen. Follikkel-stimulerende hormon, lutein-fremkallende hormon
og prolactin frigjores også av hypofysekjertelen. De sist-nevnte hormoner i forskjellige kombinasjoner regulerer lakta-sjon og kjonnskjertel-funksjonen for å produsere testosteron i testiklene og progesteron og ostrogen i ovariene, såvel som
å regulere produksjonen og modning av kjonnscellene.
Den fremre del av hyposekjertelen fremstilles også et veksthormon som direkte påvirker hoydeveksten for pattedyr, innbefattende mennesker. Veksthormonet som frigjores av hypofysekjertelen er også betegnet som samototropin,. Det er rapportert L. Krulich et al., Endocrinology, Vol. 85, s. 319, 1969 at
et råekstrakt av hypotalamus-området vil fungere til å inhibere utskillelse av veksthormonet. Imidlertid har man tidligere ikkekarakterisertet aktivt materiale som på en effektiv og sikker måte bevirker slik inhibering. Foreliggende oppfinnelse vedrorer fremstilling av terapeutisk nyttige peptider som effektivt inhiberer utskillelse av veksthormonet fra hypofysekjertelen til mennesker og dyr,, når de enten innfores direkte eller indirekte i blodstrommen. Peptidene kan innfores indirekte i blodstrommen ved å injisere peptidene subkutant eller intra-muskulært eller ved annen kjent måte, med eller uten en bærer. For å lette den etterfolgende diskusjon vil et materiale som
utviser en inhiberende effekt på utskillelsen av veksthormonet (somatotropin) betegnes som "somatostatin". De spesielle peptider
ifolge foreliggende oppfinnelse som er funnet effektive med hensyn til inhibering aV utskillelse av veksthormonet omtales enkelte ganger i det folgende som somatbstatin-petider.
IHovedhensikten med foreliggende oppfinnelse er å tilveiebringe peptid-materialer som utviser en inhiberende effekt på utskillelse , av veksthormonet fra hypofysekjertelen i pattedyr, innbefattende mennesker.
Generelt i henhold til foreliggende oppfinnelse er det isolert
et peptid fra sauehypotalamus-fragmenter som inhiberer utskillelse in vitro av . åmmunoreaktivt veksthormon av rottehypofyse-celler, og som er aktivt in vivo i pattedyr, innbefattende mennesker. Utgangsmaterialet fra hvilket peptidene ble avledet var hypotalamus-fragmenter fra ca. 5oo.ooo sauehjerner. Hypotalamus-fragmentene ble underkastet ekstraksjon i et system bestående av 81o volumdeler etanol - loo volumdeler kloroform - 5 volumdeler iseddik og 9o volumdeler vann. AIe deler, prosent-angivelser og forhold anvendt i det folgende er pr. volum, hvis intet annet er spesielt angitt. Ekstraktet ble fordelt i et system inneholdende o,l % eddiksyre i vann: n-butanol: pyridin,
i et volumforhold på 11:5:3. Materialet erholdt fra den organiske fase ble deretter fordelt i n-butanol: iseddik: vann,i volum-forholdet 4:1:5. Den vandige fase fra den andre ekstraksjon ble underkastet ionebytte-kromatografi på karboksymetylcellulose. Dette ga en,fraksjon med somatostatin-aktivitet. Denne fraksjon ble ytterligere renset ved gelfiltrering på "Sephadex G-25"-
gel i o,5 M eddiksyre. Ytterligere rensing ble erholdt ved væske-fordeling-kromatografi på en "Sephadex-G25"-underlag i et system omfattende n-butanol: , iseddik: vann, i et volumforhold på 4:1:5. Det endelige renseprodukt veide 8,5 mg og inneholdt 77 vekt-% aminosyrer og viste kun spor av peptidforurensinger når det ble underkastet tynnsjikts-kromatografi og elektroforese.
Kvantitativ aminosyre-analyse av peptidet, isolert ved den ovenfor gitte fremgangsmåte, ga de folgende molare forhold:
Ala: 1, Gly:l, Thr:2, Lys: 2, Phe:3, Ser: 1, Cys: 2, Trp: 1,
Asp: 1, NH^: 1. Aminosyre-analyse etter total enzymatisk nedbrytning med papain og leucin aminopeptidase, viste de samme aminosyre-forhold, bortsett fra at Asp var tilstede som Asn.
i
IPepidets struktur ble bestemt ved trinnvis Edman nedbrytning utfort på det intakte, karboksymetylerte peptid, såvel som
fra de ikke-dekomponerte produkter av truptase og chymotryptase oppslutninger av petpidet. Produktene av Edman degraderingen ble evaluert ved den subtraktive metode ved hjelp av aminosyre-analyse, bestemmelse av sukksesive aminoendegrupper (terminals), med dansylklorid (5-dimetylamino-l-naftalensulfonylklorid) og masse-spektrometri av 3-fenyl-2-tiohydantoin-derivater. Strukturen av peptidet isolert fra hypotalmus-fragmentene av sauehjerner ble funnet å inneholde en broforbindelse og indentifi-sert som folger
De ovenfor angitte forkortelser er konvensjonelle og er basert på de trivielle navnt for amino-syrene som utgjor peptidet, hvori Ala er alanin, Gly er glycin, Cys er cystein, Lys er lysin, Asn er asparagin, Phe er fenylalanin, Trp er tryptofa, Tyr er tyrosin, Thr er treonin og Ser er serin. Formelen som angitt ovenfor er i henhold til den konvensjonelle representasjon . av peptider hvor aminogruppen forefinnes på den venstre side og karboksylgruppen på den hoyre. Eventuelt mulige isomerer av amino-syrene er ment å.omfattes av det trivielle navn, hvis ikke annet er oppgitt.
Generelt utviser også andre peptider, inneholdende en broforbindelse og med en etterfolgende struktur, også biologisk aktivitet med hensyn til å inhibere avgivelse av veksthormon in vivo og in vitro i pattedyr, innbefattende mennesker:
hvor R er en acyleringsmiddelrest eller hydrogen. Det er funnet at tyrosin (Tyr) kan erstatte en hvilken som helst Phe. Det er også trolig at en hvilken som helst av de andre aminosyrerester i det somatostatin-peptidet kan erstattes med andre aminosyrer.:Mere overraskende er det at lineære peptider, syntisert ved fastfase-teknikker og renset ved gel-filtrering i nærvær av . 2-merkaptoetanol, utviste den samme biologiske aktivitet med hensyn til inhibering av veksthormon-utskillelse, som de ovenfor beskrevne peptider inneholdende en broforbindelse. De lineære peptider som er funnet å være effektive har den folgende struktur: R-Cys-Lys-'Asn-Phe-Phe-Trp-Lys-Thr-Phe-Thr-Ser-Cys-OH
hvori R har den ovenfor angitte betydning.
De samme aminosyresubstitusjoner kan utfores i de lineære peptider, slik som beskrevet i forbindelse med peptidene inneholdende en brobinding.
Den herved anvendte betegnelse "acyleringsmiddel" referer seg til organiske forbindelser som er i stand til å tilveiebrinqe
en acylgruppe, som er
er funnet å være
Foretrukne acyleringsmidler som funksjonelle i peptidene ifolge
foreliggende oppfinnelse velges fra de folgende: (a) enhver aminosyre, for peptider med broforbindelse er det foretrukket at aminosyren ikke inneholder en sulfhydrylgruppe. (b) Et dipeptid erholdt fra hvilket som helst to aminosyrer hvori den andre aminosyre forbundet med Clys ikke gir sterisk hindring. Foretrukne 2nc^re aminosyrer er Gly, Ala og (3-Ala. For peptider inneholdende en brobinding er det foretrukket at aminosyrene i dipeptidet ikke inneholder en sulfhydrylgruppe. (c) Et tri-peptid hvori den tredje aminosyre forbundet til Cys ikke gir sterisk hindring og hvori de gjenværende to aminosyrer er hvilken som helst aminosyre. Foretrukne tredje aminosyrer for tripeptidet er Gly, Ala og (3-Ala. For peptider inneholdende en brobinding er det foretrukket at ingen av aminosyrene i tripeptidet inneholder en sulfhydrylgruppe. (d) Alifatiske, aromatiske og cykliske organiske syrer forskjellige fra aminosyrer, med l-lo karbonatomer.De organiske syrer kan være mettede og/eller kan inneholde andre funksjonelle grupper. Spesielt foretrukne acyleringsmidler velges fra organiske forbindelser som tilveiebringer de folgende acylgrupper: Gly, Ala, Ala-Gly, Acetyl-Ala-Gly, Tyr-Gly, Sarc-Gly, Tyr-Ala-Gly, Ala-Tyr-Gly, Acetyl, Acryl, Piva-
i Hver aminosyrene i den del av somatostatinpeptidene ifolge foreliggende oppfinnelse som utstrekker seg mellom og innbefattende de to Cys-grupper er L-isomerer når aminosyrene har isomere former. Enhver aminosyre som omfattes av R-gruppen av peptidene ifolge foreliggende oppfinnelse kan enten være L-isomer eller D-isomerer når aminosyren har isomere former.
Samotostatinpeptidene ifolge foreliggend oppfinnelse ble syntisert ved fastfase-teknikker. Syntesen ble utfort på en trinnvis måte på ;en klormetylenharpiks. Harpiksen var. sammen-satt av fine perler (2o-7o cpm i diameter) av en syntetisk harpiks fremstilt ved kopolymerisering av styren med 1-2% divinylbenzen. Harpiksen benzenringer ble klormetylert ved hjelp av en Friedel-Crafts-reaksjon med klormetylmetyleter og tinn-II-klorid. Det således innforte klor gir en*reaktiv benzylklorid-type-binding. Friedel-Crafts-reaksjonen fikk forlope inntil harpiksen innholdt o, 5-2 mmol klor pr. gramm harpiks. I den etterfølgende beskrivelse av fremstilling av somatostatin-peptidene vil de anvendte reaktanter angis med deres kjemiske navn og med deres vanlige forkortelser i parantes, deretter vil reaktanten omtales med den vanlige forkortelse.
Trietylammoniumsalt av beskyttet Cys ble forestret på den klor-metylerte harpiks ved tilbakelop i etanol i ca. 48 timer. Aminogruppen av Cys ble beskyttet med t-butyloksykarbonyl (Boe). S-sidekjede i Cys ble beskyttet med p-metoksybenzyl (MeOBzl). Benzyl (Bzl) kan også anvendes som en S-beskyttende gruppe.
Etter avbeskytting og nøytralisering ble N cc-Boc-derivatet av den neste aminosyre, nemlig Ser, satt til sammen med et koplings-middel, som var dicykloheksylkarbodiimid (DCC). Sidekjeden i Ser var beskyttet med benzyleter (OBzl).Avbeskytting og noytral-isering og tilsetning av suksessive aminosyrer ble utfort i henhold til det folgende skjema:
i
i Koplingsskjema for aminosyrer andre enn Asn ved fastfase-syntese av somatostatin.
Etter trinn 13 uttas en prove for ninhydrin-prove:
hvis proven er negativ,startes på nytt fra trinn 1 for kopling av den neste aminosyre, hvis proven er positiv eller litt positiv, gjennomgås trinnene 9-13.
Det ovenfor viste reaksjonsskjema ble anvendt for å koble hver av aminosyrene av somatostatin-peptidet til Cys med unntagelse av Asn. For Asn var trinnene 1-8 de samme og det folgende skjema ble anvendt for den gjenværende del av koplingsreaksjonen:
i
' Skjema for Boc-Asn-ONp-kopling ved fastfase-syntese av somatostatin.
Etter trinn 14 uttas en prove for en ninhydrin-prove:
hvis proven er negativ, startes på nytt fra trinn 1 for kopling av den neste aminosyre, hvis proven er postitiv eller litt positiv, gjennomfores trinnene 9 - 14.
N cc-Boc-beskyttelse ble anvendt for hver av de gjenværende aminosyrer gjennom hele syntesen. OBzl ble anvendt som en sidekjede-beskyttende gruppe for Ser og Thr. P-nitrofenyl
(ONp -ester ble anvendt for å aktivere karboksylenden av Asn.
O-nitrofenylester kan også anvendes for dette formål. Benzyl-oksykarbonyl (Z) eller benzyloksykarbonyl-2Cl /Z (2-ClJ_7
ble anvendt som beskyttende gruppe for sidekjede i Lys.
Den N-<cc->beskyttende gruppe for den siste aminosyre tilfort peptidet kan være enhver oksykarbonyl, såsom Boe eller Z.
Når R-gruppen i peptidet er en acylgruppe, knyttes denne til peptidet for peptidet skilles fra harpiksen. Acylgruppen knyttes til peptidet på harpiksen ved å innfore den tilsvarende organiske syre i nærvær av DCC. Acylgruppen kan også innfores ved å anvende acylgruppen som en Na<->beskyttende gruppe for den siste vedhengte aminosyre.
Atskillelse av peptidene fra harpiksen og fjernelse av de sidekjede-beskyttende gruppene i peptidet utfort ved fluss-syre i nærvær av loo mol anisol. Etter elimering av fluss-syren under hoyt vakuum, ble peptidet vasket med eter og ekstrahert med avgasset, fortynnet eddiksyre. Torking av eddiksyreekstraktet ga et hvitt, fluffet materiale. Dette materialet ble underkastet gel-filtrering i 2N eddiksyre i nærvær av |3-merkaptoetanol.
Aktive estere kan anvendes ved fastfase-syntesen og den klas-siske syntese-metode kan også anvendes for å fremstille somatostatinpeptidene ifolge oppfinnelsen.
En in vitro bestemmelse av effektiviteten av somatostatin-peptidene er utviklet. Undersøkelsen utfores ved å behandle hypofysekjertler.fra rotter for fremstilling av separate celler derav. Cellene innfores i kulturskåler i en "Dulbecco's Modiefied Eagle Medium (Dulbecco et al,, Virology, Vol. 8,
s 396, 1949). Karbondioksydgass og oksygen tilfores cellekulturene, som holdes ved 37°C i 4 - 5 dager for anvendelse i bestemmelsen. Etter forandring av dyrkningsmedia inkuberes cellekulturene i en periode på 4 timer og de spesielle somatostatin-peptider settes til disse. Radioimmunoassay-analyse anvendes for å bestemme sekresjonshastigheten for veksthormonet, som uttrykkes i ng/time. Resultatene for forskjellige somatostatin-materialer er angitt i den etterfolgende tabell 1.
■>
I
I
TABELL 1
Effekt av fåre-hjpotalomus-ekstrakter og somatostatin-peptider på sekresjonen på veksthormonet fra rotte-hypofyse-celler i en-lags-kulturer: N. er antall cellekultur-skåler, rGH er rotte-veksthormon ved radioimmunoassay.
Hypotalmus-ekstraktet var erholdt ved ekstraksjon av fåre-hypotalmus-fragmenter med et system omfattende kloroform - etanol -
iseddik - vann i vektforholdet loo:81o:5:9o. Nivået av det anvendte ekstrakt av hypotalmus var basert på en enhet som tilsvarer somatostatin-materialet som potensielt kan ekstra-heres fra ett enkelt hypotalmus-fragment.
Resultatene indikerte gjennomfort inhibering av veksthormon-sekresjon fra hypofyse-enkelt-lag-kulturer av somatostatin-materialene beskrevet i tabell 1.
Et syntetisk fremstilt, lineært somatostatin-peptid ble anvendt for å bestemme effektiviteten av peptidet med hensyn til inhibering av sekresjon av veksthormonet i rotter. Somatostatin-peptidet hadde den folgende struktur:
For å sikre foylighet og effektivitet av resultatene for såvel kontrollrottene som de som ble injisert med peptid, ble alle rotter injisert med o,5 ml saltopplosning i tre dager for forsokene. Hver av rottene.ble injisert av den samme persom som også håndterte rottene et par minutter for å berolige disse. På den tredje dag ble 9 . rotter injisert med o,5 ml saltopplosning og 36 ble injisert med forskjellige nivåer av somato-.statin-peptidet. Femten minutter etter injeksjon ble rottene avlivet og blodprover ble tatt, som ble undersokt med hensyn til tilstedeværelse av veksthormonet og resultatene er gjengitt i den etterfolgende Tabell 2.
Et syntetisk fremstilt somatostatin-peptid tilsvarende den etterfolgende struktur ble anvendt for å undersoke peptidet effektivitet i mennesker;
H-Ala-Gly-Cys-Lys-Asn-Phe-Phe-Trp-Lys-Thr-Phe-Thr-Ser-Cys-OH.
' Da'utskillelseshastigheten avVeksthormonet i mennesker er meget lav, ble sekresjonshastigheten for veksthormonene for hver . forsoksperson forst stimulert. Den forøkede sekresjons-hastihet av veksthormonet ble fremmet enten ved oral administrasjon o,5 g L-Dopa til forsøkspersonen eller ved infusjon (enten direkte eller indirekte) av o,5 g av aminosyren arginin pr.
kg kroppsvekt i forsøkspersonens blodstrom i lopet av 3o min. Begge metoder er aksepterte kliniske metoder for å oppnå en foroket sekresjon av veksthormoner hos dyr. Effekten av administrasjonen av L-Dopa eller infusjon av arginin i hver forsoksperson ble målt i lopet av en periode på 3 timer. Deretter ble på en annden dag ved tidspunktet 0 til forsøks-personene administrert L-Dopa eller infusjon av arginin. Også, ved tidspunktet 0, ble forsøkspersonene injisert intravenøst med 25o \ iq somatostatin-peptid. Forsøkspersonene ble jevnt infusert med en ytterligere mengde av somatostatin-peptidet i lopet av en tidsperiode på 3o min. eller 1 time, idet infusjonen påbegynte ved tidspunktet 0 i det tilfelle hvor L-Dopa var administrert og infusjonen startet ved tidspunktet 3o min. i det tilfellet arginin var administrert. Sekresjonshastigheten av veksthormonet ble igjen målt i lopet av en tre timers periode. Forsøksbetingelsene med hensyn til de 9 forsøkspersoner er vist i den etterfølgende tabell 3.
Effektiviteten på veksthormons-utskillelses-hastigheten for forsokspersoner av veksthormon-stimulantene er vist grafisk i figurene la og 2a for henholdsvis L-Dopa og arginin som utgjor en kontroll. Den inhiberende effekt på veksthormonutskil-lelse-hastigheten av somatostatin-peptidet er vist i fig. lb og 2b for henholdsvis L-Dopa og arginin. I de grafiske fremstillinger er vist middeltallet - standard feil for de forskjellige målte verdier, hvert punkt tilsvarer resultatet til 4 forsokspersoner til hvilke ble administrert hhv. L-Dopa og arginin.
Den kliniske betydning av somatostatin-peptidene i henhold til foreliggende oppfinnelse er klart åpenbart for behandling av en hvilken som helst abnormalitet innbefattende foroket sekresjons-nivå for veksthormonet. Spesielt er somatostatin-peptidene ifolge foreliggende oppfinnelse antatt å være nyttig ved behandling av akromegali og ved behandling av diabetikere, i det sist-nevnte tilfelle kan denne implementeres enten ved administrasjon av somatostatin alene eller i forbindelse med insulin. Somatostatin-peptidene ifolge foreliggende oppfinnelse er også funnet effektive for å inhibere sekresjon av skjoldbruskkjertel-stimulerende hormon av hypofysekjertel og er således antatt
å være av terapeutisk verdi for pasienter med feil eller sykdom som skyldes foroket sekresjon av tyrotropin (også
kjent som skoldbruskkjertelstimulerende hormon.
Evnen til somatostatin-peptidene,i henhold til foreliggende oppfinnelse, til å inhibere TSH -sekresjonen er vist ved det folgende eksperiment. Det er kjent at man kan tilveiebringe en frigjorelse av det skjoldbruskkjertel-stimulerende hormon (TSH) ved hoyere enn normale nivåer ved hjelp av en skjoldbruskkjertel-stimulerende hormonfrigjorelses-faktor (TRF). Strukturen av TRF er rapportert i"Naturey Vol. 226, s. 321-325, 197o. I en serie forsok ble bedovede rotter injisert med forskjellige nivåer av TRF og TRF ikkombinasjon med et somatostatin-peptid ifolge foreliggende oppfinnelse. Somatostatin-peptidet hadde den folgende struktur:
H-Ala-Gly-Cys-Lys-Asn-Phe-Phe-Trp-Lys-Thr-Phe-Thr-Ser-Cys-OH.
5 minutter etter injeksjon ble det tatt en blodprove og denne
prove undersokt med hensyn til TSH ved en radioimmunoassay-metode, Endocrinology, Vol. 91, nr. 4, s. lo45-lo53, 1972. Resultatene er angitt i den etterfølgende tabell 4.
Foreliggende oppfinnelse omfatter også det tidligere omtalte harpiks-kompleks av et peptid koplet til en harpiks, hvor mellomproduktet har strukturen Cys-Lys-Asn-Phe-Phe-Trp-Lys-Thr-Phe-Thr-Ser-Cys-harpiks. _ . ...
Claims (1)
1. Fremgangsmåte ved fremstilling av et terapeutisk aktivt peptid,karakterisert vedtrinnene å fremstille en ester av en N ( X-beskyttet Cys-aminosyre og en klormetylert harpiks, fjerne den beskyttende gruppe fra Cys-aminosyren og trinnvis kople Nc- c-beskyttede aminosyrer til Cys-aminosyrer til å gi et harpikskoblet peptid med strukturen R-Cys-Lys-Asn-Phe-Phe-Trp-Lys-Thr-Phe-Thr-Ser-Cys-harpiks,
hvori R er en acylgruppe eller hydrogen.
2. Fremgangsmåte ifolge krav 1,karakterisert vedat R er en acylgruppe erholdt fra gruppen omfattende aminosyrer, ..0.dipéptider, tripeptider og alifatiske, aromatiske og cykliske organiske syrer med 1 - lo karbonatomer.
3. Fremgangsmåte ifolge krav 2,karakterisert vedat R er en aminosyrerest.
4. Fremgangsmåte ifolge krav 2,karakterisert vedat R er en dipeptidrest.
5. Fremgangsåte ifolge krav 2,karakterisert vedat R er en tripeptidrest.
6. Fremgangsmåte ifolge krav 2, kara k3tt e r i - ser t ved at R er en alifatisk, organisk syrerest med 1 - lo karbonatomer.
7. Fremgangsmåte ifolge krav 2,karakterisert vedat R er en aromatisk syrerest med l-lo karbon atomer.
i
j
! 8." Fremgangsmåte ifolge krav 2,karakterisert vedat R er en cyklisk, organisk syrerest med 1 -
, lo karbonatomer.
9. Fremgangsmåte ifolge krav 1,karakterisert vedat R er valgt fra gruppen inneholdende Gly, Ala, Ala-Gly, .acetyl-Ala-Gly, Tyr-Gly, Sarc-Gly, Tyr-Ala-Gly,Ala-Tyr-Gly, acetyl, acryl, pivalyl og benzoyl.
10. Fremgangsmåte ifolge krav 9,karakterisertvee d at R er Gly.
11. Fremgangsmåte ifolge krav 9,karakteriser ved at R er Ala.
, 12. Fremgangsmåte ifolge krav 9,karakterisert vedat R er Ala-Gly.
13. Fremgangsmåte ifolge krav 9,karakterisert vedat R er acetyl-Ala-Gly.
14. Fremgangsmåte ifolge krav 9,karakterisert vedat R er Tyr-Gly.
15. Fremgangsmåte ifolge krav 9,karakterisert vedat R er Sarc-Gly.
16. Fremgangsmåte ifolge krav 9,karakterisert vedat R er Tyr-Ala-Gly.
17. Fremgangsmåte ifolge krav 9,karakterisert vedat R er Ala-Tyr-Gly.
18. Fremgangsmåte ifolge krav 9,karakterisert vedat R er acetyl.
19. Fremgangsmåte ifolge krav 9,karakterisert vedat R er acryl.
i 2o. Fremgangsmåte ifolge krav 9, karakteri
sert ved at R er pivalyl.
21. Fremgangsmåte ifolge krav 9,karakterisert vedat R er benzoyl.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US37533473A | 1973-07-02 | 1973-07-02 | |
| US478175A US3904594A (en) | 1973-07-02 | 1974-06-12 | Somatostatin and acylated des-(ala' 1', gly' 2') derivatives thereof |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| NO742383L true NO742383L (no) | 1975-01-27 |
Family
ID=27007019
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NO742383A NO742383L (no) | 1973-07-02 | 1974-07-01 |
Country Status (16)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US3904594A (no) |
| JP (1) | JPS5069071A (no) |
| CA (1) | CA1064912A (no) |
| CH (1) | CH603557A5 (no) |
| DE (1) | DE2431776A1 (no) |
| DK (1) | DK355374A (no) |
| FI (1) | FI194374A (no) |
| FR (1) | FR2235701B1 (no) |
| GB (1) | GB1443281A (no) |
| IE (1) | IE39528B1 (no) |
| IL (1) | IL45160A (no) |
| LU (1) | LU70447A1 (no) |
| NL (1) | NL7408940A (no) |
| NO (1) | NO742383L (no) |
| PH (1) | PH12097A (no) |
| SE (1) | SE7408686L (no) |
Families Citing this family (33)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE2519656A1 (de) * | 1974-05-13 | 1975-11-27 | Sandoz Ag | Neue peptide und verfahren zu ihrer herstellung |
| US4113714A (en) * | 1975-01-03 | 1978-09-12 | American Home Products Corporation | [Des-Ala1, Gly2 -desamino-Cys3 ]somatostatin |
| US4011182A (en) * | 1975-03-21 | 1977-03-08 | American Home Products Corporation | Cyclic undecapeptide analogs of somatostatin and intermediates |
| US4130554A (en) * | 1975-04-08 | 1978-12-19 | Merck & Co., Inc. | Process for preparing somatostatin analog |
| US4081530A (en) * | 1975-06-04 | 1978-03-28 | Ayerst, Mckenna & Harrison Limited | Extended chain derivatives of somatostatin |
| SU639446A3 (ru) * | 1975-06-04 | 1978-12-25 | Эйерст Маккенна Энд Харрисон Лимитед, (Фирма) | Способ получени пептидов |
| US4020157A (en) * | 1975-07-08 | 1977-04-26 | Ayerst Mckenna And Harrison Ltd. | Shortened analogs of somatostatin |
| US4372884A (en) * | 1975-08-06 | 1983-02-08 | The Salk Institute For Biological Studies | Pharmaceutically active peptides |
| US4161521A (en) * | 1975-08-08 | 1979-07-17 | Merck & Co., Inc. | Somatostatin analogs |
| US4055553A (en) * | 1975-09-02 | 1977-10-25 | American Home Products Corporation | (Gly3 -Ala)1 -somatostatin |
| US4133805A (en) * | 1975-12-16 | 1979-01-09 | American Home Products Corporation | Cyclic undecapeptides related to somatostatin and intermediates therefor |
| US3991041A (en) * | 1975-12-18 | 1976-11-09 | American Home Products Corporation | (Phe3 -Ala)1 -somatostatin |
| US4061626A (en) * | 1976-04-29 | 1977-12-06 | Eli Lilly And Company | Somatostatin analogs and intermediates thereto |
| NL7706002A (nl) * | 1976-06-07 | 1977-12-09 | Salk Inst For Biological Studi | Werkwijze voor het bereiden van biologisch werk- zame peptiden. |
| US4061608A (en) * | 1976-07-13 | 1977-12-06 | American Home Products Corporation | Arg 4 -somatostatin and analogues thereof |
| US4105603A (en) * | 1977-03-28 | 1978-08-08 | The Salk Institute For Biological Studies | Peptides which effect release of hormones |
| DE2860734D1 (en) * | 1977-06-08 | 1981-09-03 | Merck & Co Inc | Somatostatin analogs, process for their preparation and pharmaceutical compositions containing them |
| US4202802A (en) * | 1978-10-02 | 1980-05-13 | Eli Lilly And Company | Peptides related to somatostatin |
| US4199501A (en) * | 1978-11-20 | 1980-04-22 | Eli Lilly And Company | Peptides related to somatostatin |
| US4199500A (en) * | 1978-11-20 | 1980-04-22 | Eli Lilly And Company | Peptides related to somatostatin |
| US4225472A (en) * | 1979-05-29 | 1980-09-30 | American Home Products Corporation | Truncated somatostatin analogs |
| FR2458539A1 (fr) * | 1979-06-11 | 1981-01-02 | Lilly Co Eli | Peptides apparentes a la somatostatine, leur preparation et leur utilisation therapeutique |
| USRE30548E (en) * | 1979-08-31 | 1981-03-17 | The Salk Institute For Biological Studies | Peptides which effect release of hormones |
| US4316891A (en) * | 1980-06-14 | 1982-02-23 | The Salk Institute For Biological Studies | Extended N-terminal somatostatin |
| DK81082A (da) | 1981-03-06 | 1982-09-07 | Sandoz Ag | Fremgangsmaade til fremstilling af polypeptider |
| IE920416A1 (en) * | 1991-02-08 | 1992-08-12 | Biomeasure | Method of treating benign and malignant proliferative skin¹disease |
| US6184208B1 (en) | 1994-06-29 | 2001-02-06 | Immunotech Developments Inc. | Peptide, a method for its preparation and a pharmaceutical composition containing the peptide |
| IT1307866B1 (it) * | 1999-04-27 | 2001-11-19 | Leo Vincenzo De | Composizioni farmaceutiche contenenti inibitori dell'ormone dellacrescita o loro frammenti biologicamente attivi per il trattamento |
| WO2005018682A2 (en) | 2003-08-20 | 2005-03-03 | The Regents Of The University Of California | Somatostatin analogs with inhibitory activity to growth hormone release |
| RU2302875C1 (ru) * | 2006-06-22 | 2007-07-20 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Сиа Пептайдс" | Средство, нормализующее функции щитовидной железы, и способ его получения |
| ES2526292T3 (es) | 2006-10-16 | 2015-01-09 | The Salk Institute For Biological Studies | Antagonistas de la somatostatina selectivos para receptor (SSTR2) |
| US8691761B2 (en) * | 2006-10-16 | 2014-04-08 | Jean E. F. Rivier | Somatostatin receptor 2 antagonists |
| ES2351569B8 (es) * | 2009-05-07 | 2012-06-20 | Bcn Peptides S.A. | Ligandos peptídicos de receptores de somatostatina. |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3842066A (en) * | 1973-06-25 | 1974-10-15 | American Home Prod | (aia3,aia14)-srif and intermediates |
-
1974
- 1974-06-12 US US478175A patent/US3904594A/en not_active Expired - Lifetime
- 1974-06-24 IE IE1329/74A patent/IE39528B1/xx unknown
- 1974-06-25 FI FI1943/74A patent/FI194374A/fi unknown
- 1974-06-26 GB GB2837774A patent/GB1443281A/en not_active Expired
- 1974-07-01 FR FR7422817A patent/FR2235701B1/fr not_active Expired
- 1974-07-01 NO NO742383A patent/NO742383L/no unknown
- 1974-07-01 PH PH15999A patent/PH12097A/en unknown
- 1974-07-01 IL IL45160A patent/IL45160A/xx unknown
- 1974-07-01 SE SE7408686A patent/SE7408686L/xx unknown
- 1974-07-01 LU LU70447A patent/LU70447A1/xx unknown
- 1974-07-02 CH CH907174A patent/CH603557A5/xx not_active IP Right Cessation
- 1974-07-02 CA CA203,805A patent/CA1064912A/en not_active Expired
- 1974-07-02 JP JP49075748A patent/JPS5069071A/ja active Pending
- 1974-07-02 DE DE2431776A patent/DE2431776A1/de not_active Withdrawn
- 1974-07-02 DK DK355374A patent/DK355374A/da not_active Application Discontinuation
- 1974-07-02 NL NL7408940A patent/NL7408940A/xx not_active Application Discontinuation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| NL7408940A (nl) | 1975-01-06 |
| FI194374A (no) | 1975-01-03 |
| FR2235701A1 (no) | 1975-01-31 |
| IL45160A0 (en) | 1974-10-22 |
| GB1443281A (en) | 1976-07-21 |
| PH12097A (en) | 1978-11-02 |
| LU70447A1 (no) | 1974-11-28 |
| CA1064912A (en) | 1979-10-23 |
| FR2235701B1 (no) | 1978-07-28 |
| JPS5069071A (no) | 1975-06-09 |
| DE2431776A1 (de) | 1975-01-30 |
| AU7073374A (en) | 1976-01-08 |
| US3904594A (en) | 1975-09-09 |
| IE39528L (en) | 1975-01-02 |
| IL45160A (en) | 1979-03-12 |
| SE7408686L (no) | 1975-01-03 |
| DK355374A (no) | 1975-02-24 |
| IE39528B1 (en) | 1978-10-25 |
| CH603557A5 (no) | 1978-08-31 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| NO742383L (no) | ||
| US4226857A (en) | Synthetic peptides having pituitary growth hormone releasing activity | |
| US4224316A (en) | Synthetic peptides having pituitary growth hormone releasing activity | |
| DK173544B1 (da) | Nona- og decapeptider med LHRH antagonist aktivitet, fremgangsmåde til fremstilling heraf og farmaceutiske præparater indeh | |
| DK170618B1 (da) | Alfa-Humant atrium-natriuretisk polypeptid, fremgangsmåde til fremstilling af polypeptidet og diuretisk præparat eller hypotensorpræparat indeholdende polypeptidet | |
| JPH0674279B2 (ja) | 成長ホルモン放出性因子類似体及びその製造方法 | |
| US4228155A (en) | Synthetic peptides having pituitary growth hormone releasing activity | |
| US4228157A (en) | Synthetic peptides having pituitary growth hormone releasing activity | |
| NO762716L (no) | ||
| AU6751290A (en) | Synthetic calcitonin peptides | |
| US5635379A (en) | D-2-alkyl-tryptophan and peptides containing same | |
| NO165804B (no) | Veksthormon-frigjoerende peptider og anvendelse derav. | |
| Sueiras-Diaz et al. | Structure activity studies on the N-terminal region of glucagon | |
| US4981950A (en) | Vasoconstrictor peptide | |
| WO1996014336A1 (fr) | Nouvelle oxyntomoduline | |
| Flouret et al. | Synthesis and biological activity of the hypothalamic LH-and FSH-releasing decapeptide | |
| RU2120944C1 (ru) | [(s) pmp1, d-trp2, pen6, arg8]окситоцин | |
| KR100237948B1 (ko) | 인슐린 활성을 지닌 단쇄 펩타이드, 이의 제조방법 및 이를 포함하는 약제학적 조성물 | |
| JPH01199997A (ja) | 哺乳動物の脳下垂体に作用するペプチド | |
| EP0380554B1 (en) | Vasoactive peptides | |
| DK150205B (da) | Antigeniske peptider indeholdende 12-16 aminosyrerester | |
| EP0651651A1 (en) | Amylin antagonists and agonists | |
| KR0141973B1 (ko) | 신규의 생리활성 펩티드 및 이를 유효성분으로서 함유한 칼슘대사 조절제 | |
| JP3160013B2 (ja) | 新規ペプチド | |
| NL8300413A (nl) | Groeihormoon vrijstellend peptide. |