DK150205B - Antigeniske peptider indeholdende 12-16 aminosyrerester - Google Patents
Antigeniske peptider indeholdende 12-16 aminosyrerester Download PDFInfo
- Publication number
- DK150205B DK150205B DK49686A DK49686A DK150205B DK 150205 B DK150205 B DK 150205B DK 49686 A DK49686 A DK 49686A DK 49686 A DK49686 A DK 49686A DK 150205 B DK150205 B DK 150205B
- Authority
- DK
- Denmark
- Prior art keywords
- peptide
- leu
- amino acid
- glu
- boc
- Prior art date
Links
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title description 45
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 title description 30
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 title description 18
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 title description 11
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 30
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 22
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 22
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 17
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 17
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 16
- 108010028554 LDL Cholesterol Proteins 0.000 description 14
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 102100031357 L-lactate dehydrogenase C chain Human genes 0.000 description 9
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 9
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 9
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 8
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 230000035558 fertility Effects 0.000 description 7
- -1 glu-tarnine Chemical compound 0.000 description 7
- 238000000034 method Methods 0.000 description 7
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 6
- 229960003646 lysine Drugs 0.000 description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 5
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 5
- 235000018977 lysine Nutrition 0.000 description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 5
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 4
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 4
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 125000004218 chloromethyl group Chemical group [H]C([H])(Cl)* 0.000 description 4
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 4
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 4
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 4
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 4
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 125000001433 C-terminal amino-acid group Chemical group 0.000 description 3
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 3
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 3
- 229960005261 aspartic acid Drugs 0.000 description 3
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 3
- TVFDJXOCXUVLDH-UHFFFAOYSA-N caesium atom Chemical class [Cs] TVFDJXOCXUVLDH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000013507 mapping Methods 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 3
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 3
- 229960000814 tetanus toxoid Drugs 0.000 description 3
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 3
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- DQUHYEDEGRNAFO-QMMMGPOBSA-N (2s)-6-amino-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]hexanoic acid Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN DQUHYEDEGRNAFO-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- MYRTYDVEIRVNKP-UHFFFAOYSA-N 1,2-Divinylbenzene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1C=C MYRTYDVEIRVNKP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N Hydrogen bromide Chemical compound Br CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010044467 Isoenzymes Proteins 0.000 description 2
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 2
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MDXGYYOJGPFFJL-QMMMGPOBSA-N N(alpha)-t-butoxycarbonyl-L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)OC(C)(C)C MDXGYYOJGPFFJL-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N N-Methylpyrrolidone Chemical compound CN1CCCC1=O SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Chemical compound CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 2
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N anisole Chemical compound COC1=CC=CC=C1 RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 2
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 2
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 2
- FJDQFPXHSGXQBY-UHFFFAOYSA-L caesium carbonate Chemical compound [Cs+].[Cs+].[O-]C([O-])=O FJDQFPXHSGXQBY-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229910000024 caesium carbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 2
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 239000003433 contraceptive agent Substances 0.000 description 2
- 230000002254 contraceptive effect Effects 0.000 description 2
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 2
- 229960002433 cysteine Drugs 0.000 description 2
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 108010074605 gamma-Globulins Proteins 0.000 description 2
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 2
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 2
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 2
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 2
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 2
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 2
- 235000005772 leucine Nutrition 0.000 description 2
- 229960003136 leucine Drugs 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 2
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 2
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 150000003573 thiols Chemical class 0.000 description 2
- CSDVLQAMRGTDDK-LBPRGKRZSA-N (2S)-2-[benzyl-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonyloxy]amino]butanedioic acid Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)ON([C@@H](CC(O)=O)C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 CSDVLQAMRGTDDK-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 1
- SOHLZANWVLCPHK-LBPRGKRZSA-N (2s)-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]-4-oxo-4-phenylmethoxybutanoic acid Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(=O)OCC1=CC=CC=C1 SOHLZANWVLCPHK-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 1
- JVIPLYCGEZUBIO-UHFFFAOYSA-N 2-(4-fluorophenyl)-1,3-dioxoisoindole-5-carboxylic acid Chemical compound O=C1C2=CC(C(=O)O)=CC=C2C(=O)N1C1=CC=C(F)C=C1 JVIPLYCGEZUBIO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WFIYPADYPQQLNN-UHFFFAOYSA-N 2-[2-(4-bromopyrazol-1-yl)ethyl]isoindole-1,3-dione Chemical compound C1=C(Br)C=NN1CCN1C(=O)C2=CC=CC=C2C1=O WFIYPADYPQQLNN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ATRRKUHOCOJYRX-UHFFFAOYSA-N Ammonium bicarbonate Chemical compound [NH4+].OC([O-])=O ATRRKUHOCOJYRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000013 Ammonium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- HIBWGGKDGCBPTA-UHFFFAOYSA-N C=CC1=CC=CC=C1.C=CC1=CC=CC=C1 Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.C=CC1=CC=CC=C1 HIBWGGKDGCBPTA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229920001425 Diethylaminoethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N Fluorane Chemical compound F KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 150000008575 L-amino acids Chemical group 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N L-arginine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- VGALFAWDSNRXJK-VIFPVBQESA-N L-aspartic acid beta-benzyl ester Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(=O)OCC1=CC=CC=C1 VGALFAWDSNRXJK-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 102000003855 L-lactate dehydrogenase Human genes 0.000 description 1
- 108700023483 L-lactate dehydrogenases Proteins 0.000 description 1
- 125000000174 L-prolyl group Chemical group [H]N1C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[C@@]1([H])C(*)=O 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- FYYSQDHBALBGHX-YFKPBYRVSA-N N(alpha)-t-butoxycarbonyl-L-asparagine Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(N)=O FYYSQDHBALBGHX-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- 125000001429 N-terminal alpha-amino-acid group Chemical group 0.000 description 1
- 241001460678 Napo <wasp> Species 0.000 description 1
- 101100342977 Neurospora crassa (strain ATCC 24698 / 74-OR23-1A / CBS 708.71 / DSM 1257 / FGSC 987) leu-1 gene Proteins 0.000 description 1
- CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N O-Xylene Chemical compound CC1=CC=CC=C1C CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000007079 Peptide Fragments Human genes 0.000 description 1
- 108010033276 Peptide Fragments Proteins 0.000 description 1
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 1
- MGDFPGCFVJFITQ-CIUDSAMLSA-N Pro-Glu-Asp Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O MGDFPGCFVJFITQ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 1
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 1
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 1
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 description 1
- 230000002745 absorbent Effects 0.000 description 1
- 238000005903 acid hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 150000003862 amino acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000012538 ammonium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001099 ammonium carbonate Substances 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 235000009697 arginine Nutrition 0.000 description 1
- 229960003121 arginine Drugs 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 1
- HFACYLZERDEVSX-UHFFFAOYSA-N benzidine Chemical compound C1=CC(N)=CC=C1C1=CC=C(N)C=C1 HFACYLZERDEVSX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 125000001584 benzyloxycarbonyl group Chemical group C(=O)(OCC1=CC=CC=C1)* 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- 150000001718 carbodiimides Chemical class 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 229920006026 co-polymeric resin Polymers 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 1
- 239000012050 conventional carrier Substances 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 239000007857 degradation product Substances 0.000 description 1
- 238000010612 desalination reaction Methods 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 1
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 1
- 229910000042 hydrogen bromide Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910000040 hydrogen fluoride Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 1
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 231100000503 infertility induction Toxicity 0.000 description 1
- JDNTWHVOXJZDSN-UHFFFAOYSA-N iodoacetic acid Chemical compound OC(=O)CI JDNTWHVOXJZDSN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000014705 isoleucine Nutrition 0.000 description 1
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N methoxybenzene Substances CCCCOC=C UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000003101 oviduct Anatomy 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 1
- 229920003053 polystyrene-divinylbenzene Polymers 0.000 description 1
- 229920000915 polyvinyl chloride Polymers 0.000 description 1
- 239000004800 polyvinyl chloride Substances 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 235000013930 proline Nutrition 0.000 description 1
- 229960002429 proline Drugs 0.000 description 1
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 1
- 239000000376 reactant Substances 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000001850 reproductive effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000004366 reverse phase liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 235000004400 serine Nutrition 0.000 description 1
- 229960001153 serine Drugs 0.000 description 1
- 238000007086 side reaction Methods 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 1
- 238000001308 synthesis method Methods 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 210000001550 testis Anatomy 0.000 description 1
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 1
- 235000014393 valine Nutrition 0.000 description 1
- 229960004295 valine Drugs 0.000 description 1
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 1
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 1
- 239000008096 xylene Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/06—Linear peptides containing only normal peptide links having 5 to 11 amino acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/0005—Vertebrate antigens
- A61K39/0006—Contraceptive vaccins; Vaccines against sex hormones
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/0004—Oxidoreductases (1.)
- C12N9/0006—Oxidoreductases (1.) acting on CH-OH groups as donors (1.1)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
Description
150205
Den foreliggende opfindelse angår hidtil ukendte antigeniske peptider indeholdende 12-16 aminosyrerester, hvilke peptider er ejendommelige ved, at de har en af de i krav 1 angivne formler.
Det har været kendt i mange år, at pattedyrspermatozoer er 05 antigeniske. Senere er det blevet vist, at pattedyrsperma indeholder et antigenisk enzym kendt som C^-isozymet af lactatdehydroge-nase (LDH-X, LDH-C^). LDH-C^ er blevet isoleret i ren krystallinsk form fra musetestis, Goldberg (1972), J. Biol. Chem., 247:2044-2048. Enzymet har en molekylvægt pi 140.000 og er sam-10 mensat af fire identiske C-underenheder. Aminosyresekvensen og den tredimensionelle struktur af LDH-C^ er blevet studeret og delvis bestemt af flere forskere, se Musick et al. (1976), J. Mol.
Biol., 104:659-668, og Wheat et al. (1977), Biochem. & Biophys.
Res. Comm., 74, Nr. 3:1066-1077. Wheat et al. bestemte sekvensen 15 af det essentielle thiolpeptid fra aminosyre 159 til 171 og fandt, at dette var næsten identisk med essentielle thiolpeptider fra andre hvirveldyr-LDH-isozymer.
I 1974 gav Dr. Erwin Goldberg en redegørelse for virkningerne af immunisering med LDH-X (LDH-C^) på fertilitet, og fremsatte 20 den mulighed, at det "ved anvendelse af en defineret makromoleky-lær sperma komponent bliver muligt at klarlægge dens primære struktur i form af aminosyresekvens, specifikt at kortlægge den eller de antigeniske determinanter, der er ansvarlige for fremkaldelse af infertilitet, og derefter konstruere syntetiske peptider indeholdende 25 disse determinanter. Når man kan syntetisere et molekyle med sådanne egenskaber, muliggøres fertilitetskontrol ad immunologisk vej", Karolinska Symposia on Research Methods in Reproductive Endocrinology, 7th Symposia: Immunological Approaches to Fertility Control, Geneve, 1974, 202-222. Sådanne syntetiske antigeniske 30 peptider vedblev imidlertid at være et mål og ikke et resultat, selv om deres teoretiske ønskelighed var erkendt. I 1979 summerede Dr.
Erwin Goldberg teknikkens standpunkt som følger: "Som konklusion kræver immunoterapi til fødselskontrol i praksis mere end effektivitet, specificitet, reversibilitet og 35 fravær af systemisk bireaktion. Temmelig store mængder af an tigenet må være tilgængelige i utvetydigt ren form. Denne betingelse kan muligvis ikke opfyldes med et naturproduktenzym- 2 150205 antigen fra sperma eller testis. Antikonceptionel teknologi kræver snarere et syntetiserbart peptidfragment, der bibeholder antigenicitet og fremkalder et respons, der svækker fertilitet. Afslutning af de strukturelle analyser af LDH-C^ skulle mulig-05 gøre kortlægning af antigeniske determinanter og syntese af sådanne peptider til anvendelse ved en ny antikonceptionel teknologi", "Recent advances in Reproduction and Regulation of Fertility", G.P. Talwar, udgiver, EIsevier/North Holland Biomedical Press (1979).
10 Det har nu vist sig, at stærkt antigeniske peptider kan frem stilles ved syntetisering af lineære sekvenser af aminosyrer, hvilke sekvenser menes at svare til aminosyresekvenser, der forefindes i det naturlige enzym LDH-C^. Disse sekvenser indbefatter: glutamin-syre-glutamin-leucin-isoleucin-glutamin-asparagin-leucin-valin-prolin-15 glutaminsyre-asparaginsyre-lysin, der menes at svare til LDH-C^ aminosyrerne 5 til 16. Denne sekvens svarer dog ikke til den publicerede foreløbige kortlægning af LDH-C^, se Musick et al. (25. august 1979), J. Biol. Chem., 254, nr. 16:7621-7623.
Blandt forbindelser, der indbefatter den ovenfor identificerede 20 antigeniske sekvens, er følgende specifikke forbindelser: (a) N-Glu-GIn-Leu-lle-Gln-Asn-Leu-Val-Pro-Glu-Asp-Lys-C, (b) N-Glu-GIn-Leu-lle-GIn-Asn-Leu-Val-Pro-Glu-Asp-Lys-Leu-C, (c) N-Glu-Gln-Leu-lIe-GIn-Asn-Leu-Val-Pro-GJu-Asp-Lys-Leu-Ser-C, 25 (d) N-Glu-GIn-Leu-lle-GIn-Asn-Leu-Val-Pro-Glu-Asp-Lys-Leu-Ser-
Arg-C, (e) N-Cys-Glu-GIn-Leu-lle-GIn-Asn-Leu-Val-Pro-Glu-Asp-Lys-C, (f) N-Cys-Glu-GIn-Leu-Ile-GIn-Asn-Leu-Val-Pro-Glu-Asp-Lys-Leu-C, 30 (g) N-Cys-Glu-GIn-Leu-lle-GIn-Asn-Leu-Val-Pro-Glu-Asp-Lys-Leu-
Ser-C, og (h) N-Cys-Glu-Gfn-Leu-Ile-GIn-Asn-Leu-Val-Pro-Glu-Asp-Lys-Leu-Ser-Arg-C.
I de foregående formler betegner bogstavet "N" N-terminal 35 aminosyren, mens bogstavet "C" betegner C-terminal aminosyren.
Glu, Gin, Leu, Ile, Asn, Val, Pro, Asp, Lys, Ser, Arg og Cys repræsenterer henholdsvis L-aminosyreformerne af glutaminsyre, glu- 3 150205 tarnin, leucin, isoleucin, asparagin, valin, prolin, asparaginsyre, lysin, serin, arginin og cystein. Som man vil bemærke, indbefatter forbindelserne (a) til (h) den sekvens af 12 aminosyrer, begyndende med glutaminsyre og sluttende med lysin, der menes at svare til 05 aminosyrerne 5 til 16 i LDH-C^. De yderligere aminosyrer i forbindelserne (b), (c) og (d) menes at svare til de næste aminosyrer i LDH-C^, dvs. nr. 17, 18 og 19. Forbindelse (d) vil derfor indeholde aminosyrerne i sekvensen 5 til 19. Forbindelserne (e) til (h) indbefatter de samme antigeniske sekvenser som henholdsvis forbin-10 delserne (a) til (d), men cystein er tilføjet ved N-terminalenden for at lette disse forbindelsers kobling til proteiner ved fremstilling af antigeniske vacciner.
Peptidforbindelserne ifølge opfindelsen kan syntetiseres ud fra de aminosyrer, hvoraf de er opbygget. Syntesen kan for eksempel 15 udføres ved Merrifield fastfase-metoden som beskrevet i J.A.C.S. 85:2149-2154 (1963). Denne fastfase-metode til syntetisering af ami-nosyresekvenser er også beskrevet i Stewart og Young, Solid Phase Peptide Synthesis (W.H. Freeman & Co., San Francisco, 1969), pp.
1-4. Ved denne fremgangsmåde fastgøres C-terminal-aminosyren, så-20 som lysin, ved fremstilling af forbindelserne (a) og (e), eller leucin ved fremstilling af forbindelserne (b) og (f), til chlormethylerede polystyren-divinylbenzencopolymer-perler. Derefter tilføjes hver efterfølgende aminosyre med passende beskyttelsesgrupper sekventielt til den voksende kæde. Den a-amino-beskyttende gruppe kan for 25 eksempel, som beskrevet i Merryfield-artiklen, være en carbobenz-oxygruppe. Ved hjælp af kobling, afbeskyttelse og kobling af den næste aminosyre kan den ønskede aminosyresekvens og kædelængde frembringes. Som et afsluttende trin fjernes den beskyttende gruppe fra N-terminal-aminosyren og eventuelle sidekædebeskyttelses-30 grupper, og C-terminal-aminosyren spaltes fra harpiksen under anvendelse af et passende reagens, såsom trifluoreddikesyre og hy-drogenbromid. De ovenfor beskrevne forbindelser (a) til (h) fremstilles ved denne syntesemetode til brug ved reduktion af pattedyrs fertilitet.
35 For at udnytte antigeniske peptider ifølge opfindelsen i fertili tetsreducerende vacciner, bringes peptidet i forbindelse med et bærermolekyle, som fortrinsvis er et protein, der selv fremkalder et 4 150205 antigenisk respons og som kan administreres sikkert. For eksempel kan peptidet kobles til tetanustoxoid til administrering ved intra-muskulær injektion. For eksempel giver en blanding af 1 μ moJ tetanustoxoid, 60 μ mol antigenisk peptid og 18 millimol 1-ethyl-3-(3-05 dimethylaminopropyl)carbodiimid,hydrochlorid omsat i vand (pH 6) i 12 timer ved stuetemperatur og 24 timer ved 4° et produkt, der indeholder 3,5 mol peptid/mol tetanustoxoid. Overskud af reaktanter kan fjernes ved dialyse eller gelfiltrering, se Pique et al., fmmuno-chemistry, 15:55-60 (1978). Alternativt kan peptidet kobles under 10 anvendelse af bisdiazoteret benzidin (Bassiri et al., Endocrinology, 90:722 (1972)) eller glutaraldehyd.
Til intramuskulær injektion kan det koblede peptid suspenderes i en steril isotonisk salineopløsning eller anden konventionel bærer og et adjuvans kan om ønsket tilsættes. En foretrukken anvendelse 15 af en sådan vaccine er til administrering til kvinder. Der vil dannes antistoffer, som vil vise sig i ovidukt-fluiderne, hvorved der opnås en signifikant fertilitetsreduktion. Til dette formål vil mængden, der skal administreres, variere fra ca. 1 til 10 mg af det antigeniske peptid.
20 Peptidforbindelserne ifølge opfindelsen, deres fremstilling og deres antigeniske virkning illustreres nærmere i de efterfølgende eksempler.
Eksempel 1 25 Fremstilling af lineært peptid
Cys-Glu-Gln-Leu-lle-GIn-Asn-Leu-Val-Pro-Glu-Asp-Lys
Syntese af ovenstående peptid, heri omtalt som forbindelse (e), kan udføres ved anvendelse af fastfase-teknikker, der nu er velkendte inden for området. Ved en foretrukken fremgangsmåde 30 kobles aminobeskyttet lysin, der repræsenterer -COOH terminalgruppen i ovenstående peptid, til en konventionel fastfase-peptid-synteseharpiks, såsom chlormethylpolystyren, der er tværbundet med 1 til 2% divinylbenzen. Den aminobeskyttende gruppe fjernes si selektivt under anvendelse af et passende reagens, hvis art vil af-35 hænge af den anvendte beskyttende gruppe. I den foretrukne udførelsesform anvendes t-butyioxycarbonylgruppen (Boc) til amino-gruppebeskyttelse, og 40% trifluoreddikesyre i methylenchlorid er 5 150205 det selektive, afbeskyttelsesmlddel.
Efter afbeskyttelse behandles lysin-harpiksen med beskyttet asparaginsyre, fortrinsvis N-Boc-O-benzylasparaginsyre, og dicyc-lohexylcarbodiimid pi i og for sig kendt måde til dannelse af en 05 peptidbinding mellem lysinrestens fri amino-gruppe og den beskyttede asparaginsyres carboxylgruppe.
Denne cyklus med afbeskyttelse og kobling med aminosyrederi-vater og dicyclohexylcarbodiimid gentages så med de resterende aminosyrer i sekvensrækkefølgen i ovennævnte peptid. Nogle af 10 aminosyrerne kræver sidekædebeskyttelsesgrupper ud over alpha- aminobeskyttelsen. Sådanne aminosyrer og blokeringsgrupperne er som følger:
Cys(MBzl), Glu(oBzl), Asp(oBzl), Lys(CI-z), hvori oBzl er benzyl, Cl-z er o-chlorbenzyloxycarbonyl og MBzl er 15 methoxybenzyl.
Fuldendelse af syntesen gav følgende peptid koblet til styrendi vinylbenzencopolymerharpiksen: TFA-Cys(MBzl)-Glu(oBzl)-Gln-Leu-lle-Gln-Asn-Leu-Val-Pro-
Glu(oBzl)-Asp(oBzl)-Lys(CI-z)-harpiks 20 Frakobling af peptidet fra harpiksen opnås ved behandling med flydende hydrogenfluorid under ledsagende fraspaltning af alle beskyttende grupper til frembringelse af det ønskede peptid.
Fastfase-syntese af N-Boc-Lys(CI-z)-harpiks 25 Knytning af N-Boc-Lys(CI-z) til chlormethylharpiks udførtes ved cæsiumsaltmetoden. En prøve af chlormethylharpiks (200 g) indeholdende 0,74 mmol chlorid pr gram behandles med cæsiumsaltet af Boc-Lys-(CI-z) hidrørende fra neutralisation af Boc-Lysin med cæ-siumcarbonat. Ca. 73,8 g Boc-Lysin opløses i 80% methanol og 20% 30 vand og indstilles til pH 7,0 med ca. 29 g cæsiumcarbonat. Den resulterende opløsning tørres i en rotationsinddamper, hvorefter den tørres yderligere tre gange efter tre tilsætninger af 100 ml xylen.
Til cæsiumsaltet af Boc-Lys(CI-z) sættes 200 g chlormethylharpiks som ovenfor og tilstrækkeligt 1-methyl-2-pyrrolidinon til at bringe 35 det samlede volumen på ca. 1,90 liter. Den resulterende blanding omrøres ved 55°C i 48 timer. Harpiksen vaskes så ekstensivt med methanol efterfulgt af vand og derefter igen med methanol. Harpik- 6 150205 sen lufttørres og tørres si under vakuum. Efter spaltning af lysln fra harpiks med HF gav aminosyreanalyse en top svarende til 0,36 mmol/g.
En prøve af den netop beskrevne harpiks (6,0 g) underkaste-05 des følgende synteseprogram: (1) vask med tre 100 ml portioner methylenchlorid, (2) fjernelse af Boc-gruppen med 40% TFA i methylenchlorid under et minuts vask og en 20 minutters reaktionstid, (3) vask med tre 100 ml portioner methylenchlorid, (4) vask med to 100 ml portioner isopropa-10 nol, (5) vask med tre 100 ml portioner methylenchlorid, (6) vask i et minut og neutralisation i 10 minutter med 100 ml portioner af 10% triethylamin i methylenchlorid, (7) vask med tre portioner af 100 ml methylenchlorid, (8) tilsætning af 2,5 ækvivalenter (7,2 mmol) Boc-aminosyre og 2,5 ækvivalenter (7,2 mmol) dicyclohexylcarbodiimid i 15 methylenchlorid og rystning i 2 timer, (9) vask med tre 100 ml portioner methylenchlorid, (10) vask med to 100 ml portioner isopropa-nol, (11) vask med tre 100 ml portioner methylenchlorid. Ovenstående cyklus gentoges for følgende N-beskyttede aminosyrer:
Boc-Asp(oBzl) Boc-GIn 20 Boc-Glu(oBzI) Boc-lle
Boc-Pro Boc-Leu
Boc-Val Boc-GIn
Boc-Leu Boc-Glu(oBzl)
Boc-Asn Boc-Cys(MBzl) 25 Den beskyttede peptidharpiks underkastedes afbeskyttelse, hvilket gav TFA-saltet af den afbeskyttede peptidharpiks. Den tørrede harpiks (5,88 g) omrørtes i nærværelse af 6 ml anisol og 60 ml flydende HF ved 0°C i 1 time. HF fjernedes ved vakuum, og den olieagtige remanens vaskedes med to 50 ml portioner ethylether.
30 Peptidet ekstraheredes fra harpiksen med tre 50 ml portioner 1 molær eddikesyre, og de kombinerede filtrater lyofiliseredes, hvilket gav 2,27 g råt peptid. Dette rensedes ved 250 overførsler i et modstrømsfordelingsapparat. Opløsningsmiddelsystemet til ovennævnte fraktionering var butanol:eddikesyre:vand i forholdene 4:1:5.
35 Noget rensede fraktioner fra modstrømsfordelingsapparatet ren- sedes yderligere ved søjlechromatografi på diethylaminoethylcellulose med en linær gradient på 0,01 til 0,5 molær ammoniumbicarbonat, 150205 7 hvilket gav 356 mg rent peptid.
Aminosyreanalyse af det rene peptid efter sur hydrolyse gav:
Lys-,,02' ammoniak^, Asp^g, Glu^, PrOggg, Cysggg,
Valg 97, Neg 7g, Leu1 85· Dette peptid gav en enkelt plet med en 05 Rf p| 0,89 ved cellulosetyndtlagschromatografi med et opløsningsmiddelsystem af butanol:ethylacetat:eddikesyre:vand i forholdene 1:1:1:1.
Forbindelserne (a) til (d) og (f) til (h), der indeholder samme antigeniske sekvenser som forbindelse (e) fremstilles og karakteri-10 seres pi tilsvarende måde.
Forsøgsresultater
Rensede peptider indbefattende lineære aminosyresekvenser fra muse LDH-C^ fremstilledes pi følgende måde: 15 Ren muse LDH-C4 reduceres og carboxymethyleres med iod- eddikesyre. Nedbrydning med trypsin (4 vægt/vægtprocent) forløber i 4 timer i nærvær af 2M urinstof. Efter afsaltning på "Sepha-dex G-10" fraktioneres nedbrydningsproduktet på en "pBondapak C_jgu søjle (3,9 mm x 30 cm; Waters Associates) med en voksende 20 acetonitrilgradient. Trifluoreddikesyre (0,04%) forefindes under hele gradienten. Søjleeffluenten overvåges ved 214 nm, og fraktioner opsamles manuelt på grundlag af absorbanstoppe. Fraktioner tørres under en nitrogenstrøm og lyofiliseres for vand. Renhed vurderes isokratisk i samme chromatografiske system, og peptider renses igen 25 efter behov. Efter hydrolyse (6N HCI, 107°, 40 timer) bestemmes aminosyresammensætninger ved reversfasechromatografi af o-pthalal-dehydderivater. Se Hili et al. (1979), Anal. Chem. 41:1338-1341. Aminosyresekvenser blev bestemt ved manuel Edman-nedbrydning.
Se Tarr (1977) i Methods in Enzymology, Vol. 47, side 335-357, og 30 Tarr (1981) Anal. Biochem. 111:27-32.
Et af de fraskilte rensede peptider betegnedes Peptid G-5 og havde en aminosyresekvens svarende til aminosyrerne 5-15 i nativ muse LDH-C^. Peptid G-5 var sammensat af følgende aminosyrer (fra N-terminal til C-terminal): Glu-GIn-Leu-lle-GIn-Asn-Leu-Val-35 Pro-Glu-Asp.
Antistofbinding med peptid G-5 blev bestemt ved en fast ma-trixradioimmunoanalyseprocedure som beskrevet af Pierre et al.
8 150205 (1976), J. Exp, Med. 144:1254-1262. Peptidet blev anbragt som belægning på væggene af en polyvinylchloridmikrotiterplade ved inkubation natten over ved 4°C af en opløsning indeholdende 5 nmol peptid i 100 μΙ 0,04M NaPO^, 0,14M NaCl (PBS) i hver fordybning.
05 Hver fordybning vaskedes med 200 μΙ/fordybning 10% hesteserum i PBS og inkuberedes i samme opløsning i 1 time. Efter vask inkuberedes pladen med 50 μΐ af gammaglobulinfraktionen af sammenblandede kaninantimuse LDH-C. sera. Efter 4 timers inkubation vaskeri 125 des pladen og inkuberedes derefter med 100 μΙ/fordybning I- ”*0 gedeantikaningammaglobulin ved 4°C i 16 timer. Efter omfattende vask bestemtes bindingsradioaktivitet under anvendelse af en gammatæller.
Det bestemte bindingsaktivitetsniveau for peptid G-5 er anført i nedenstående tabel A.
15
TABEL A
Niveau af peptidbinding til kaninantimuse LDH-C^ sera 20 Peptid SekvensAntistofbinding (cpm)^ G-5(1) 5-15 1360 (1) Glu-GIn-Leu-He-GIn-Asn-Leu-Val-Pro-Glu-Asp (2) I nativ muse LDH-C^ 25 (3) Udtrykt i tælfeværdier pr. minut (cpm)
De foranstående data viser, at peptid G-5 har højt antigenici-tetsniveau, som svarer til tilsvarende antigeniske områder i nativ LDH-C4· Den immunogene evne af peptid G-5 påvistes også ved 20 konjugering af peptidet med okseserumalbumin som bærer og immunisering af kaniner med konjugaterne til frembringelse af et anti-LDH-C4 serum. Dette antiserum fandtes at være stærkt aktivt overfor nativ LDH-C4· Hver kanin injiceret med G-5-konjugatet frembragte antistoffer, som var specifikke for nativ LDH-C4· 35 '
Applications Claiming Priority (6)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US26702181 | 1981-05-26 | ||
| US06/267,021 US4353822A (en) | 1981-05-26 | 1981-05-26 | Antigenic linear peptide compounds |
| US06/277,623 US4354967A (en) | 1981-06-26 | 1981-06-26 | Antigenic linear peptide compound |
| US27762381 | 1981-06-26 | ||
| US28029581A | 1981-07-06 | 1981-07-06 | |
| US28029581 | 1981-07-06 |
Publications (4)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DK49686D0 DK49686D0 (da) | 1986-01-31 |
| DK49686A DK49686A (da) | 1986-01-31 |
| DK150205B true DK150205B (da) | 1987-01-05 |
| DK150205C DK150205C (da) | 1987-10-05 |
Family
ID=27401934
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DK028983A DK150145C (da) | 1981-05-26 | 1983-01-25 | Antigeniske peptider indeholdende 10-11 aminosyrerester |
| DK049686A DK150205C (da) | 1981-05-26 | 1986-01-31 | Antigeniske peptider indeholdende 12-16 aminosyrerester |
Family Applications Before (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DK028983A DK150145C (da) | 1981-05-26 | 1983-01-25 | Antigeniske peptider indeholdende 10-11 aminosyrerester |
Country Status (11)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0079934B1 (da) |
| JP (1) | JPS58500810A (da) |
| AU (1) | AU544846B2 (da) |
| CA (1) | CA1238312A (da) |
| CH (1) | CH651057A5 (da) |
| DE (1) | DE3276169D1 (da) |
| DK (2) | DK150145C (da) |
| IE (1) | IE53459B1 (da) |
| IT (1) | IT1158013B (da) |
| NO (1) | NO830241L (da) |
| WO (1) | WO1982004250A1 (da) |
Families Citing this family (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5019383A (en) * | 1981-01-09 | 1991-05-28 | New York Blood Center, Inc. | Fatty acid carriers for synthetic peptides |
| US4554101A (en) * | 1981-01-09 | 1985-11-19 | New York Blood Center, Inc. | Identification and preparation of epitopes on antigens and allergens on the basis of hydrophilicity |
| ZA831547B (en) * | 1982-03-15 | 1984-10-31 | New York Blood Center Inc | Fatty acid carriers for synthetic vaccines |
| US4585587A (en) * | 1984-10-19 | 1986-04-29 | Northwestern University | Antigenic peptide compounds |
| US5658876A (en) * | 1994-04-28 | 1997-08-19 | The General Hospital Corporation | Activin antagonists as novel contraceptives |
| CN103175952A (zh) * | 2011-12-22 | 2013-06-26 | 兰风华 | 一种用于检测免疫不育相关自身抗体的新型抗原 |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4310456A (en) * | 1980-08-18 | 1982-01-12 | Northwestern University | Antigenic linear peptide compound |
-
1982
- 1982-05-05 CA CA000402348A patent/CA1238312A/en not_active Expired
- 1982-05-11 DE DE8282901897T patent/DE3276169D1/de not_active Expired
- 1982-05-11 WO PCT/US1982/000619 patent/WO1982004250A1/en active IP Right Grant
- 1982-05-11 JP JP57501924A patent/JPS58500810A/ja active Pending
- 1982-05-11 EP EP82901897A patent/EP0079934B1/en not_active Expired
- 1982-05-11 CH CH518/83A patent/CH651057A5/de not_active IP Right Cessation
- 1982-05-11 AU AU85819/82A patent/AU544846B2/en not_active Ceased
- 1982-05-24 IT IT48497/82A patent/IT1158013B/it active
- 1982-05-25 IE IE1249/82A patent/IE53459B1/en unknown
-
1983
- 1983-01-25 NO NO830241A patent/NO830241L/no unknown
- 1983-01-25 DK DK028983A patent/DK150145C/da not_active IP Right Cessation
-
1986
- 1986-01-31 DK DK049686A patent/DK150205C/da not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| NO830241L (no) | 1983-01-25 |
| DK150205C (da) | 1987-10-05 |
| IT1158013B (it) | 1987-02-18 |
| EP0079934B1 (en) | 1987-04-29 |
| EP0079934A4 (en) | 1983-12-23 |
| DE3276169D1 (en) | 1987-06-04 |
| DK150145C (da) | 1987-12-21 |
| DK49686D0 (da) | 1986-01-31 |
| IE53459B1 (en) | 1988-11-23 |
| DK28983A (da) | 1983-01-25 |
| AU8581982A (en) | 1982-12-07 |
| IT8248497A0 (it) | 1982-05-24 |
| EP0079934A1 (en) | 1983-06-01 |
| DK49686A (da) | 1986-01-31 |
| DK28983D0 (da) | 1983-01-25 |
| JPS58500810A (ja) | 1983-05-19 |
| CA1238312A (en) | 1988-06-21 |
| CH651057A5 (de) | 1985-08-30 |
| WO1982004250A1 (en) | 1982-12-09 |
| DK150145B (da) | 1986-12-15 |
| AU544846B2 (en) | 1985-06-13 |
| IE821249L (en) | 1982-11-26 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Tam et al. | Vaccine engineering: enhancement of immunogenicity of synthetic peptide vaccines related to hepatitis in chemically defined models consisting of T-and B-cell epitopes. | |
| Yi-An et al. | Chemically unambiguous peptide immunogen: preparation, orientation and antigenicity of purified peptide conjugated to the multiple antigen peptide system | |
| US4493795A (en) | Synthetic peptide sequences useful in biological and pharmaceutical applications and methods of manufacture | |
| FI92325C (fi) | Menetelmä tymopentiinianalogien valmistamiseksi | |
| CA2024855C (en) | Process and intermediates for producing glucagon | |
| US5204328A (en) | Peptides having atrial natriuretic factor activity | |
| US4392997A (en) | Antigenic peptide compounds | |
| US4761470A (en) | Immunogenic synthetic peptide capable of eliciting herpes simplex virus neutralizing antibody | |
| US4473555A (en) | Nona- and dodecapeptides for augmenting natural killer cell activity | |
| DK150205B (da) | Antigeniske peptider indeholdende 12-16 aminosyrerester | |
| EP0175613B1 (en) | Immunogenic hav peptides | |
| US4585587A (en) | Antigenic peptide compounds | |
| US4377516A (en) | Antigenic linear peptide compounds | |
| CA2045420A1 (en) | Peptides having atrial natriuretic factor activity | |
| EP0227604A2 (en) | Use of oligopeptides in the treatment of viral infections | |
| US4782136A (en) | Synthetic peptide compounds producing anitbodies binding to human LDH-C.sub. | |
| IE920055A1 (en) | Improvements in and relating to hormones | |
| Yaron et al. | Synthesis and immunological properties of the oligolysyl-Niε-dinitrophenyllysine and oligolysylalanylalanylalanyl-Niε-dinitrophenyllysine peptide series | |
| US4353822A (en) | Antigenic linear peptide compounds | |
| Bernard et al. | Synthesis of conjugates between luteinizing hormone releasing hormone (LH‐RH) and N‐acetyl‐muramyl‐L‐alanyl‐D‐isoglutamine (MDP) models of totally synthetic vaccines | |
| US4578219A (en) | Antigenic peptide compound | |
| CA1181742A (en) | Antigenic linear peptide compound | |
| EP0101677B1 (en) | Antigenic linear peptide compounds | |
| Granier et al. | Synthesis and immunological characterization of two peptides which are models for two of the four major antigenic sites of a scorpion toxin | |
| US4354967A (en) | Antigenic linear peptide compound |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PBP | Patent lapsed |