DK150145B - Antigeniske peptider indeholdende 10-11 aminosyrerester - Google Patents
Antigeniske peptider indeholdende 10-11 aminosyrerester Download PDFInfo
- Publication number
- DK150145B DK150145B DK28983A DK28983A DK150145B DK 150145 B DK150145 B DK 150145B DK 28983 A DK28983 A DK 28983A DK 28983 A DK28983 A DK 28983A DK 150145 B DK150145 B DK 150145B
- Authority
- DK
- Denmark
- Prior art keywords
- peptide
- amino acid
- ldh
- boc
- antigenic
- Prior art date
Links
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title description 45
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 title description 25
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 title description 18
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 title description 11
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 30
- 108010028554 LDL Cholesterol Proteins 0.000 description 17
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 17
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 17
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 16
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 16
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 10
- 102100031357 L-lactate dehydrogenase C chain Human genes 0.000 description 9
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 9
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 230000035558 fertility Effects 0.000 description 8
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 238000000034 method Methods 0.000 description 7
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 7
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 6
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- -1 amino-protected lysine Chemical class 0.000 description 6
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 5
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 5
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 5
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 4
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 4
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 4
- 229960005261 aspartic acid Drugs 0.000 description 4
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 4
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 4
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 4
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 4
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 4
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 4
- 229960003646 lysine Drugs 0.000 description 4
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 4
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 3
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- TVFDJXOCXUVLDH-UHFFFAOYSA-N caesium atom Chemical class [Cs] TVFDJXOCXUVLDH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 125000004218 chloromethyl group Chemical group [H]C([H])(Cl)* 0.000 description 3
- 229960002433 cysteine Drugs 0.000 description 3
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 3
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000013507 mapping Methods 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 3
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 3
- 229960000814 tetanus toxoid Drugs 0.000 description 3
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 3
- MYRTYDVEIRVNKP-UHFFFAOYSA-N 1,2-Divinylbenzene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1C=C MYRTYDVEIRVNKP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide Chemical compound CCN=C=NCCCN(C)C LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ATRRKUHOCOJYRX-UHFFFAOYSA-N Ammonium bicarbonate Chemical compound [NH4+].OC([O-])=O ATRRKUHOCOJYRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910000013 Ammonium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000001433 C-terminal amino-acid group Chemical group 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N Hydrogen bromide Chemical compound Br CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010044467 Isoenzymes Proteins 0.000 description 2
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- VGALFAWDSNRXJK-VIFPVBQESA-N L-aspartic acid beta-benzyl ester Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(=O)OCC1=CC=CC=C1 VGALFAWDSNRXJK-VIFPVBQESA-N 0.000 description 2
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 2
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N N-Methylpyrrolidone Chemical compound CN1CCCC1=O SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000001429 N-terminal alpha-amino-acid group Chemical group 0.000 description 2
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 2
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 2
- 229960003767 alanine Drugs 0.000 description 2
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 2
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 2
- 235000012538 ammonium bicarbonate Nutrition 0.000 description 2
- 239000001099 ammonium carbonate Substances 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N anisole Chemical compound COC1=CC=CC=C1 RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 2
- FJDQFPXHSGXQBY-UHFFFAOYSA-L caesium carbonate Chemical compound [Cs+].[Cs+].[O-]C([O-])=O FJDQFPXHSGXQBY-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229910000024 caesium carbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 2
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 2
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 2
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 2
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 2
- 239000003433 contraceptive agent Substances 0.000 description 2
- 230000002254 contraceptive effect Effects 0.000 description 2
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 2
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 2
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 2
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 2
- 150000003573 thiols Chemical class 0.000 description 2
- 229960002898 threonine Drugs 0.000 description 2
- CSDVLQAMRGTDDK-LBPRGKRZSA-N (2S)-2-[benzyl-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonyloxy]amino]butanedioic acid Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)ON([C@@H](CC(O)=O)C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 CSDVLQAMRGTDDK-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 1
- SOHLZANWVLCPHK-LBPRGKRZSA-N (2s)-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]-4-oxo-4-phenylmethoxybutanoic acid Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(=O)OCC1=CC=CC=C1 SOHLZANWVLCPHK-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 1
- FHOAKXBXYSJBGX-YFKPBYRVSA-N (2s)-3-hydroxy-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]propanoic acid Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O FHOAKXBXYSJBGX-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- DQUHYEDEGRNAFO-QMMMGPOBSA-N (2s)-6-amino-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]hexanoic acid Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN DQUHYEDEGRNAFO-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- CHRJZRDFSQHIFI-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.C=CC1=CC=CC=C1C=C CHRJZRDFSQHIFI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JVIPLYCGEZUBIO-UHFFFAOYSA-N 2-(4-fluorophenyl)-1,3-dioxoisoindole-5-carboxylic acid Chemical compound O=C1C2=CC(C(=O)O)=CC=C2C(=O)N1C1=CC=C(F)C=C1 JVIPLYCGEZUBIO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WFIYPADYPQQLNN-UHFFFAOYSA-N 2-[2-(4-bromopyrazol-1-yl)ethyl]isoindole-1,3-dione Chemical compound C1=C(Br)C=NN1CCN1C(=O)C2=CC=CC=C2C1=O WFIYPADYPQQLNN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229920001425 Diethylaminoethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N Fluorane Chemical compound F KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 125000000998 L-alanino group Chemical group [H]N([*])[C@](C([H])([H])[H])([H])C(=O)O[H] 0.000 description 1
- 150000008575 L-amino acids Chemical group 0.000 description 1
- 102000003855 L-lactate dehydrogenase Human genes 0.000 description 1
- 108700023483 L-lactate dehydrogenases Proteins 0.000 description 1
- 125000000174 L-prolyl group Chemical group [H]N1C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[C@@]1([H])C(*)=O 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FYYSQDHBALBGHX-YFKPBYRVSA-N N(alpha)-t-butoxycarbonyl-L-asparagine Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(N)=O FYYSQDHBALBGHX-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- MDXGYYOJGPFFJL-QMMMGPOBSA-N N(alpha)-t-butoxycarbonyl-L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)OC(C)(C)C MDXGYYOJGPFFJL-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N O-Xylene Chemical compound CC1=CC=CC=C1C CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 240000008881 Oenanthe javanica Species 0.000 description 1
- 102000007079 Peptide Fragments Human genes 0.000 description 1
- 108010033276 Peptide Fragments Proteins 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 1
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 1
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 1
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 description 1
- 230000002745 absorbent Effects 0.000 description 1
- 239000008351 acetate buffer Substances 0.000 description 1
- 238000005903 acid hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 150000003862 amino acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000002532 anti-gammaglobulin Effects 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 1
- HFACYLZERDEVSX-UHFFFAOYSA-N benzidine Chemical compound C1=CC(N)=CC=C1C1=CC=C(N)C=C1 HFACYLZERDEVSX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 125000001584 benzyloxycarbonyl group Chemical group C(=O)(OCC1=CC=CC=C1)* 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920006026 co-polymeric resin Polymers 0.000 description 1
- 230000001268 conjugating effect Effects 0.000 description 1
- 239000012050 conventional carrier Substances 0.000 description 1
- 239000007857 degradation product Substances 0.000 description 1
- 239000012351 deprotecting agent Substances 0.000 description 1
- 238000010612 desalination reaction Methods 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 108010074605 gamma-Globulins Proteins 0.000 description 1
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 1
- 229910000042 hydrogen bromide Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910000040 hydrogen fluoride Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 1
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 1
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 231100000503 infertility induction Toxicity 0.000 description 1
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003136 leucine Drugs 0.000 description 1
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N methoxybenzene Substances CCCCOC=C UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- QYSGYZVSCZSLHT-UHFFFAOYSA-N octafluoropropane Chemical compound FC(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)F QYSGYZVSCZSLHT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003101 oviduct Anatomy 0.000 description 1
- OXNIZHLAWKMVMX-UHFFFAOYSA-N picric acid Chemical compound OC1=C([N+]([O-])=O)C=C([N+]([O-])=O)C=C1[N+]([O-])=O OXNIZHLAWKMVMX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920003053 polystyrene-divinylbenzene Polymers 0.000 description 1
- 229920000915 polyvinyl chloride Polymers 0.000 description 1
- 239000004800 polyvinyl chloride Substances 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 229960002429 proline Drugs 0.000 description 1
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 1
- 239000000376 reactant Substances 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 230000001850 reproductive effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000004366 reverse phase liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 229960001153 serine Drugs 0.000 description 1
- 238000007086 side reaction Methods 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 238000001308 synthesis method Methods 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 210000001550 testis Anatomy 0.000 description 1
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 1
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 1
- 239000008096 xylene Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/06—Linear peptides containing only normal peptide links having 5 to 11 amino acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/0005—Vertebrate antigens
- A61K39/0006—Contraceptive vaccins; Vaccines against sex hormones
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/0004—Oxidoreductases (1.)
- C12N9/0006—Oxidoreductases (1.) acting on CH-OH groups as donors (1.1)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Virology (AREA)
- Reproductive Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
150146
Den foreliggende opfindelse angår hidtil ukendte antigeniske peptider indeholdende 10-11 aminosyrerester, hvilke peptider er ejendommelige ved, at de har en af de i kravet angivne formler.
Det har været kendt i mange år, at pattedyrspermatozoer er 05 antigeniske. Senere er det blevet vist, at pattedyrsperma indeholder et antigenisk enzym kendt som C^-isozymet af lactatdehydroge-nase (LDH-X, LDH-C4). LDH-C4 er blevet isoleret i ren krystallinsk form fra musetestis, Goldberg (1972), J. Biol. Chem., 247:2044-2048. Enzymet har en molekylvægt pi 140.000 og er sam-10 mensat af fire identiske C underenheder. Aminosyresekvensen og den tredimensionelle struktur af LDH-C^ er blevet studeret og delvis bestemt af flere forskere, se Musick et al. (1976), J. Mol.
Biol., 104:659-668, og Wheat et al. (1977), Biochem. & Biophys.
Res. Comm., 74, Nr. 3:1066-1077. Wheat et al. bestemte sekvensen 15 af det essentielle thiolpeptid fra aminosyre 159 til 171 og fandt, at dette var næsten identisk med essentielle thiolpeptider fra andre hvirveldyr LDH isozymer.
I 1974 gav Dr. Erwin Goldberg en redegørelse for virkningerne af immunisering med LDH-X (LDH-C4) pi fertilitet, og fremsatte 20 den mulighed, at det "ved anvendelse af en defineret makromoleky-lær sperma komponent bliver muligt at klarlægge dens primære struktur i form af aminosyresekvens, specifikt at kortlægge den eller de antigeniske determinanter, der er ansvarlige for fremkaldelse af infertilitet, og derefter konstruere syntetiske peptider indeholdende 25 disse determinanter. Når man kan syntetisere et molekyle med sådanne egenskaber, muliggøres fertilitetskontrol ad immunologisk vej", Karolinska Symposia on Research Methods in Reproductive Endocrinology, 7th Symposia: Immunological Approaches to Fertility Control, Geneve, 1974, 202-222. Sådanne syntetiske antigeniske 30 peptider vedblev imidlertid at være et mål og ikke et resultat, selv om deres teoretiske ønskelighed var erkendt. I 1979 summerede Dr.
Erwin Goldberg teknikkens standpunkt som følger: "Som konklusion kræver immunoterapi til fødselskontrol i praksis mere end effektivitet, specificitet, reversibilitet og 35 fravær af systemisk bireaktion. Temmelig store mængder af an tigenet må være tilgængelige i utvetydigt ren form. Denne betingelse kan muligvis ikke opfyldes med et naturproduktenzym- 150145 2 antigen fra sperma elier testis. Antikonceptionel teknologi kræver snarere et syntetiserbart peptidfragment, der bibeholder antigenicitet og fremkalder et respons, der svækker fertilitet. Afslutning af de strukturelle analyser af LDH-C4 skulle mulig-05 gøre kortlægning af antigeniske determinanter og syntese af sådanne peptider til anvendelse ved en ny antikonceptionel teknologi", "Recent advances in Reproduction and Regulation of Fertility", G.P. Talwar, udgiver, Elsevier/North Holland Biomedical Press (1979).
10 Det har nu vist sig, at stærkt antigeniske peptider kan frem stilles ved syntetisering af lineære sekvenser af aminosyrer, hvilke sekvenser menes at svare til aminosyresekvenser, der forefindes i det naturlige enzym LDH-C^. Disse sekvenser indbefatter serin-leu-cin-asparagin-prolin-alanin-isoleucin-glycin-threonin-asparaginsyre-15 fysin, der menes at svare til LDH-C4 aminosyrerne 211 til 220. Denne sekvens svarer dog ikke til den publicerede foreløbige kortlægning af LDH-C4, se Musick et al. (25. august 1979), J. Biol.
Chem., 254, nr. 16:7621-7623.
Blandt forbindelser, der indbefatter den ovenfor identificerede 20 antigeniske sekvens, er følgende specifikke forbindelser: (m) N-Ser-Leu-Asn-Pro-Ala-lle-Gly-Thr-Asp-Lys-C, og (n) N-Cys-Ser-Leu-Asn-Pro-Ala-lle-Gly-Thr-Asp-Lys-C.
I de foregående formler betegner bogstavet "N" N-terminal aminosyren, mens bogstavet "C" betegner C-termina! aminosyren.
25 Gly repræsenterer giycin, og Leu, Ile, Asn, Pro, Asp, Lys, Ser,
Cys, Ala og Thr repræsenterer henholdsvis L-aminosyreformerne af leucin, isoleucin, asparagin, prolin, asparaginsyre, lysin, serin, cystein, alanin og threonin. Som man vil bemærke, indeholder forbindelse (n) samme antigeniske sekvens som forbindelse (m), bortset 30 fra, at cystein er tilføjet ved N-terminalenden for at lette koblingen til proteiner ved fremstilling af antigeniske vacciner.
Peptidforbindelserne ifølge opfindelsen kan syntetiseres ud fra de aminosyrer, hvoraf de er opbygget. Syntesen kan for eksempel udføres ved Merrifield fastfase-metoden som beskrevet i J.A.C.S.
35 85:2149-2154 (1963). Denne fastfase-metode til syntetisering af ami nosyresekvenser er også beskrevet i Stewart og Young, Solid Phase Peptide Synthesis (W.H. Freeman & Co., San Francisco, 1969), pp.
150145 3 r 1-4. Ved denne fremgangsmåde fastgøres C-terminal-aminosyren ly-sin ti! chlormethylerede polystyren-divinylbenzencopolymer-perler.
Derefter tilføjes hver efterfølgende aminosyre med passende beskyttelsesgrupper sekventielt til den voksende kæde. Den a-amino-be-05 skyttende gruppe kan for eksempel, som beskrevet i Merryfield-ar-tiklen, være en carbobenzoxygruppe. Ved hjælp af kobling, afbe-skyttelse og kobling af den næste aminosyre kan den ønskede amino-syresekvens og kædelængde frembringes. Som et afsluttende trin fjernes den beskyttende gruppe fra N-terminal-aminosyren og even-10 tuelle sidekædebeskyttelsesgrupper, og C-terminal-aminosyren spaltes fra harpiksen under anvendelse af et passende reagens, såsom tri-fluoreddikesyre og hydrogenbromid. De ovenfor beskrevne forbindelser (m) og (n) fremstilles ved denne syntesemetode til brug ved reduktion af pattedyrs fertilitet.
15 For at udnytte antigeniske peptider ifølge opfindelsen i fertili tetsreducerende vacciner, bringes peptidet i forbindelse med et bærermolekyle, som fortrinsvis er et protein, der selv fremkalder et antigenisk respons og som kan administreres sikkert. For eksempel kan peptidet kobles til tetanustoxoid til administrering ved intra-20 muskulær injektion. For eksempel giver en blanding af 1 μ mol tetanustoxoid, 60 μ mol antigenisk peptid og 18 millimol 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimid,hydrochlorid omsat i vand (pH 6) i 12 timer ved stuetemperatur og 24 timer ved 4° et produkt, der indeholder 3,5 mol peptid/mol tetanustoxoid. Overskud af reaktanter 25 kan fjernes ved dialyse eller gelfiltrering, se Pique et al., Immuno-chemistry, 15:55-60 (1978). Alternativt kan peptidet kobles under anvendelse af bisdiazoteret benzidin (Bassiri et al., Endocrinology, 90:722 (1972)) eller glutaraldehyd.
Til intramuskulær injektion kan det koblede peptid suspenderes 30 j en steril isotonisk salineopløsning eller anden konventionel bærer og et adjuvans kan om ønsket tilsættes. En foretrukken anvendelse af en sådan vaccine er til administrering til kvinder. Der vil dannes antistoffer, som vil vise sig i ovidukt-fluiderne, hvorved der opnås en signifikant fertilitetsreduktion. Til dette formål vil mængden, 35 der skal administreres, variere fra ca. 1 til 10 mg af det antigeniske peptid.
150145 4
Peptidforbindelserne ifølge opfindelsen, deres fremstilling og deres antigeniske virkning illustreres nærmere i de efterfølgende eksempler.
05 Eksempel 1
Fremstilling af lineært peptid Cys-Ser-Leu-Asn-Pro-Ala-lle-Gly-Thr-Asp-Lys
Syntese af ovenstående peptid, heri omtalt som forbindelse (n), kan udføres ved anvendelse af fastfase-teknikker, der nu er 10 velkendte inden for området. Ved en foretrukken fremgangsmåde kobles aminobeskyttet lysin, der repræsenterer -COOH terminal-gruppen i ovenstående peptid, til en konventionel fastfase-peptid-synteseharpiks, såsom chlormethylpolystyren, der er tværbundet med 1 til 2% divinyl benzen. Den aminobeskyttende gruppe fjernes så 15 selektivt under anvendelse af et passende reagens, hvis art vil afhænge af den anvendte beskyttende gruppe. I den foretrukne udførelsesform anvendes t-butyloxycarbonylgruppen (Boc) til amino-gruppebeskyttelse, og 40% trifluoreddikesyre i methylenchlorid er det selektive afbeskyttelsesmiddel.
20 Efter afbeskyttelse behandles lysinharpiksen med beskyttet as- paraginsyre, fortrinsvis N-Boc-O-benzylasparginsyre, og dicyclo-hexylcarbodiimid på i og for sig kendt måde til dannelse af en peptidbinding mellem lysinrestens fri amino-gruppe og den beskyttede asparaginsyres carboxylgruppe.
25 Denne cyklus med afbeskyttelse og kobling med aminosy rederi- vater og dicyclohexylcarbodiimid gentages så med de resterende aminosyrer i sekvensrækkefølgen i ovennævnte peptid. Nogle af aminosyrerne kræver sidekædebeskyttelsesgrupper ud over alpha-aminobeskyttelsen. ' Sådanne aminosyrer og blokeringsgrupperne er 30 · som følger:
Cys(MBzl), Ser(oBzl), Thr(oBzl), Asp(oBzl), Lys(CI-z), hvori oBzl er benzyl, Mbzl er p-methoxybenzyl og Cl-z er o-chlor-benzyloxycarbonyl.
Fuldendelse af syntesen gav følgende peptid koblet til styren-35 divinylbenzencopolymerharpiksen: TFA-Cys(MBzl)-Ser(oBzI)-Leu-Asn-Pro-Ala-lle-Gly-Thr(oBzl)-
Asp(oBzl)-Lys(CI-z)-harpiks.
150145 5
Frakobling af peptidet fra harpiksen opnås véd behandling med flydende hydrogenfluorid under ledsagende fraspaltning af alle beskyttende grupper til frembringelse af det ønskede peptid.
05 Fastfase-syntese af
Cys(MBzl)-Ser(oBzl)-Leu-Asn-Pro-Ala-lle-Gly-Thr(oBzl)-Asp(oBzl)-
Lys(CI-z)-harpiks_
Knytning af N-Boc-Lys(CI-z) til chlormethylharpiks udførtes ved cæsiumsaltmetoden. En prøve af chlormethylharpiks (200 g) in-10 deholdende 0,74 mmol chlorid pr gram behandles med cæsiumsaltet af Boc-Lysin hidrørende fra neutralisation af N-Boc-Lys(Cl-z) med cæ-siumcarbonat. Ca. 73,8 g N-Boc-Lys(CI-z) opløses i 80% methanol og 20% vand og indstilles til pH 7,0 med ca. 29 g cæsiumcarbonat. Den resulterende opløsning tørres i en rotationsinddamper, hvorefter 15 den tørres yderligere tre gange efter tre tilsætninger af 100 ml xy-len. Til cæsiumsaltet af N-Boc-Lys(CI-z) sættes 200 g chlormethylharpiks som ovenfor og tilstrækkeligt 1-methyl-2-pyrrolidinon til at bringe det samlede volumen pi ca. 1,90 liter. Den resulterende blanding omrøres ved 55°C i 48 timer. Harpiksen vaskes så eksten-20 sivt med methanol efterfulgt af vand og derefter igen med methanol.
Harpiksen lufttørres og tørres så under vakuum. Efter spaltning af lysin fra harpiks med HF gav aminosyreanalyse en top svarende til 0,36 mmol/g.
En prøve af den netop beskrevne harpiks (5,5 g) underkaste-25 des følgende synteseprogram: (1) vask med tre 100 ml portioner methylenchlorid, (2) fjernelse af Boc-gruppen med 40% TFA i methylenchlorid under et minuts vask og en 20 minutters reaktionstid, (3) vask med tre 100 ml portioner methylenchlorid, (4) vask med to 100 ml portioner isopropa-30 . nol, (5) vask med tre 100 ml portioner methylenchlorid, (6) vask i et minut og neutralisation i 10 minutter med 100 ml portioner af 10% triethylamin i methylenchlorid, (7) vask med tre portioner af 100 ml methylenchlorid, (8) tilsætning af 2,5 ækvivalenter (7,2 mmol) Boc-aminosyre og 2,5 ækvivalenter (7,2 mmol) dicyclohexylcarbodiimid i 35 methylenchlorid og rystning i 2 timer, (9) vask med tre 100 ml portioner methylenchlorid, (10) vask med to 100 ml portioner isopropa-nol, (11) vask med tre 100 ml portioner methylenchlorid. Ovenstående cyklus gentoges for følgende N-beskyttede aminosyrer: 150145 6
Boc-Asp(oBzl) Boc-Leu
Boc-Thr(oBzl) Boc-Ser(oBzl)
Boc-Gly Boc-Cys(MBzl)
Boc-lle 05 Boc-Ala
Boc-Pro Boc-Asn
Den beskyttede peptidharpiks underkastedes afbeskyttelse, hvilket gav TFA-saitet af den afbeskyttede peptidharpiks. En por-10 tion af den tørrede harpiks (6 g) omrørtes i nærværelse af 6 ml anisol og 60 ml flydende HF ved 0°C i 1 time. HF fjernedes ved vakuum og den olieagtige remanens vaskedes med to 50 ml portioner ethylether. Peptidet ekstraheredes fra harpiksen med tre 50 ml portioner 1 molær eddikesyre, og de kombinerede filtrater lyofilisere-15 des.
Peptidet dimeriseredes ved omrøring af en opløsning i vand med pH 9,0 i tre dage i nærværelse af luft. Det lyofiliseredes si og underkastedes modstrømsfordeling i systemet 0,1% eddikesyre:butanol rpyridin i forholdet 11:5:3. De mest rene fraktioner rensedes 20 yderligere ved søjlechromatografi på carboxymethylcellulose under anvendelse af en ammoniumbicarbonatgradient fra 0,01 molær til 0,2 molær. De mest rene fraktioner underkastedes søjlechromatografi pi diethylaminoethylcellulose under anvendelse af en ammoniumbicarbonatgradient fra 0,01 molær til 0,05 molær. Det rene peptid lyofilise-25 redes, hvilket gav 77 mg.
Aminosyreanalyse af peptidet efter sur hydrolyse gav: lysin^ ammoniakg gg, asparaginsyre^ ^g, threonin^ seri%96' prolini,0' ' 9’yc?n1,00' alaninw, cystein^g, isoleucing gg og leucing g^. Tyndtlagschromatografi pi cellulose i 30 butanol:ethyiacetat:eddikesyre:vand i forholdene 1:1:1:1 gav en pi 0,64 med en mindre øvre plet. Når der anvendtes tyndtlagschromatografi på cellulose med butanol:pyridin:eddikesyre:vand i forholdene 15:10:3:12, var Rf 0,45, også med en mindre øvre plet. Papirelektroforese på "Whatman 3MM" papir med pyridinacetatpuffer 35 med pH 6,4 viste en enkelt plet i den neutrale position, R^. 0,20 i forhold til picrinsyre.
Forbindelse (m), der indeholder samme antigeniske sekvens som forbindelse (n), fremstilles og karakteriseres på tilsvarende måde.
150145 7
Forsøgsresultater
Rensede peptider indbefattende lineære aminosyresekvenser fra muse LDH-C^ fremstilledes på følgende måde:
Ren muse LDH-C4 reduceres og carboxymethyleres med iod-05 eddikesyre. Nedbrydning med trypsin. (4 vægt/vægtprocent) forløber i 4 timer i nærvær af 2M urinstof. Efter afsaltning på "Sepha-dex G-10" fraktioneres nedbrydningsproduktet på en "pBondapak C-|g" søjle (3,9 mm x 30 cm; Waters Associates) med en voksende acetonitrilgradient. Trifluoreddikesyre (0,04%) forefindes under hele 10 gradienten. Søjleeffluenten overvåges ved 214 nm, og fraktioner opsamles manuelt på grundlag af absorbanstoppe. Fraktioner tørres under en nitrogenstrøm og lyofiliseres for vand. Renhed vurderes i so krati sk i samme chromatografiske system, og peptider renses igen efter behov. Efter hydrolyse (6N HCI, 107°, 40 timer) bestemmes 15 aminosyresammensætninger ved reversfasechromatografi af o-pthalal-dehydderivater. Se Hiil et al. (1979), Anal. Chem. 41:1338-1341. Aminosyresekvenser blev bestemt ved manuel Édman-nedbrydning.
Se Tarr (1977) i Methods in Enzymology, Vol. 47, side 335-357, og Tarr (1981) Anal. Biochem. 111:27-32.
20 Et af de fraskilte rensede peptider betegnedes Peptid G-4 og havde en aminosyresekvens svarende til aminosyrerne 211-220 i nativ· muse LDH-C4« Peptid G-4 var sammensat af følgende aminosyrer (fra N-terminal til C-terminal): Ser-Leu-Asn-Pro-Ala-lle-Gly-Thr-Asp-Lys.
25 Antistofbinding med peptid G-4 blev bestemt ved en fast ma- trixradioimmunoanalyseprocedure som beskrevet af Pierre et al.
(1976), J. Exp. Med. 144:1254-1262. Peptidet blev anbragt som belægning pi væggene af en polyvinylchloridmikrotiterplade ved inkubation natten over ved 4°C af en opløsning indeholdende 5 nmol 30 peptid i 100 μΙ 0,04M NaP04, 0,14M NaCI (PBS) i hver fordybning.
Hver fordybning vaskedes med 200 μΙ/fordybning .10% hesteserum i PBS og inkuberedes i samme opløsning i 1 time. Efter vask inkuberedes pladen med 50 μΙ af gammaglobulinfraktionen af sammenblandede kaninantimuse LDH-C. sera. Efter 4 timers inkubation vaske- ** 125 35 des pladen og inkuberedes derefter med 100 μΙ/fordybning I- gedeantikaningammaglobulin ved 4°C i 16 timer. Efter omfattende vask bestemtes bindingsradioaktivitet under anvendelse af en gammatæller.
8 1501A5
Det bestemte bindingsaktivitetsniveau for peptid G-4 er anført i nedenstående tabel A.
TABEL A 05
Niveau af peptidbinding til kaninantimuse LDH-C^ sera (2) (3)
Peptid Sekvensv J Antistofbinding (cpm)v G-4(1) 211-220 1706 10 (11 v J Ser-Leu-Asn-Pro-Ala-ile-Gly-Thr-Asp-Lys (21 v J i nativ muse LDH-C.
(31 4
Udtrykt i tælleværdier pr. minut (cpm) 15 De foranstående data viser, at peptid G-4 har højt antigenici- tetsniveau, som svarer til tilsvarende antigeniske områder i nativ LDH-C^. Den immunogene evne af peptid G-4 påvistes også ved konjugering af peptidet med okseserumalbumin som bærer og immunisering af kaniner med konjugatet til frembringelse af et anti-LDH-C^ 20 serum. Dette antiserum fandtes at være stærkt aktivt overfor nativ LDH-C^„ Hver kanin injiceret med G-4-konjugatet frembragte antistoffer, som var specifikke for nativ LDH-C^.
Applications Claiming Priority (8)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US06/267,021 US4353822A (en) | 1981-05-26 | 1981-05-26 | Antigenic linear peptide compounds |
| US26702181 | 1981-05-26 | ||
| US27762381 | 1981-06-26 | ||
| US06/277,623 US4354967A (en) | 1981-06-26 | 1981-06-26 | Antigenic linear peptide compound |
| US28029581A | 1981-07-06 | 1981-07-06 | |
| US28029581 | 1981-07-06 | ||
| US8200619 | 1982-05-11 | ||
| PCT/US1982/000619 WO1982004250A1 (en) | 1981-05-26 | 1982-05-11 | Antigenic linear peptide compounds |
Publications (4)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DK28983D0 DK28983D0 (da) | 1983-01-25 |
| DK28983A DK28983A (da) | 1983-01-25 |
| DK150145B true DK150145B (da) | 1986-12-15 |
| DK150145C DK150145C (da) | 1987-12-21 |
Family
ID=27401934
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DK028983A DK150145C (da) | 1981-05-26 | 1983-01-25 | Antigeniske peptider indeholdende 10-11 aminosyrerester |
| DK049686A DK150205C (da) | 1981-05-26 | 1986-01-31 | Antigeniske peptider indeholdende 12-16 aminosyrerester |
Family Applications After (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DK049686A DK150205C (da) | 1981-05-26 | 1986-01-31 | Antigeniske peptider indeholdende 12-16 aminosyrerester |
Country Status (11)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0079934B1 (da) |
| JP (1) | JPS58500810A (da) |
| AU (1) | AU544846B2 (da) |
| CA (1) | CA1238312A (da) |
| CH (1) | CH651057A5 (da) |
| DE (1) | DE3276169D1 (da) |
| DK (2) | DK150145C (da) |
| IE (1) | IE53459B1 (da) |
| IT (1) | IT1158013B (da) |
| NO (1) | NO830241L (da) |
| WO (1) | WO1982004250A1 (da) |
Families Citing this family (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4554101A (en) * | 1981-01-09 | 1985-11-19 | New York Blood Center, Inc. | Identification and preparation of epitopes on antigens and allergens on the basis of hydrophilicity |
| US5019383A (en) * | 1981-01-09 | 1991-05-28 | New York Blood Center, Inc. | Fatty acid carriers for synthetic peptides |
| ZA831547B (en) * | 1982-03-15 | 1984-10-31 | New York Blood Center Inc | Fatty acid carriers for synthetic vaccines |
| US4585587A (en) * | 1984-10-19 | 1986-04-29 | Northwestern University | Antigenic peptide compounds |
| US5658876A (en) * | 1994-04-28 | 1997-08-19 | The General Hospital Corporation | Activin antagonists as novel contraceptives |
| CN103175952A (zh) * | 2011-12-22 | 2013-06-26 | 兰风华 | 一种用于检测免疫不育相关自身抗体的新型抗原 |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4310456A (en) * | 1980-08-18 | 1982-01-12 | Northwestern University | Antigenic linear peptide compound |
-
1982
- 1982-05-05 CA CA000402348A patent/CA1238312A/en not_active Expired
- 1982-05-11 JP JP57501924A patent/JPS58500810A/ja active Pending
- 1982-05-11 CH CH518/83A patent/CH651057A5/de not_active IP Right Cessation
- 1982-05-11 AU AU85819/82A patent/AU544846B2/en not_active Ceased
- 1982-05-11 DE DE8282901897T patent/DE3276169D1/de not_active Expired
- 1982-05-11 EP EP82901897A patent/EP0079934B1/en not_active Expired
- 1982-05-11 WO PCT/US1982/000619 patent/WO1982004250A1/en active IP Right Grant
- 1982-05-24 IT IT48497/82A patent/IT1158013B/it active
- 1982-05-25 IE IE1249/82A patent/IE53459B1/en unknown
-
1983
- 1983-01-25 DK DK028983A patent/DK150145C/da not_active IP Right Cessation
- 1983-01-25 NO NO830241A patent/NO830241L/no unknown
-
1986
- 1986-01-31 DK DK049686A patent/DK150205C/da not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CA1238312A (en) | 1988-06-21 |
| DK150205C (da) | 1987-10-05 |
| DK49686D0 (da) | 1986-01-31 |
| DK28983D0 (da) | 1983-01-25 |
| DK28983A (da) | 1983-01-25 |
| AU544846B2 (en) | 1985-06-13 |
| DE3276169D1 (en) | 1987-06-04 |
| IT8248497A0 (it) | 1982-05-24 |
| DK49686A (da) | 1986-01-31 |
| IT1158013B (it) | 1987-02-18 |
| EP0079934A1 (en) | 1983-06-01 |
| EP0079934A4 (en) | 1983-12-23 |
| DK150205B (da) | 1987-01-05 |
| NO830241L (no) | 1983-01-25 |
| AU8581982A (en) | 1982-12-07 |
| IE821249L (en) | 1982-11-26 |
| CH651057A5 (de) | 1985-08-30 |
| DK150145C (da) | 1987-12-21 |
| IE53459B1 (en) | 1988-11-23 |
| WO1982004250A1 (en) | 1982-12-09 |
| JPS58500810A (ja) | 1983-05-19 |
| EP0079934B1 (en) | 1987-04-29 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CA2052375C (en) | Parathyroid hormone derivatives | |
| US5229490A (en) | Multiple antigen peptide system | |
| Tam et al. | Vaccine engineering: enhancement of immunogenicity of synthetic peptide vaccines related to hepatitis in chemically defined models consisting of T-and B-cell epitopes. | |
| Yi-An et al. | Chemically unambiguous peptide immunogen: preparation, orientation and antigenicity of purified peptide conjugated to the multiple antigen peptide system | |
| FI92325C (fi) | Menetelmä tymopentiinianalogien valmistamiseksi | |
| US4607023A (en) | Natriuretic | |
| JP2008534628A (ja) | ペプチド誘導体の製造のための方法 | |
| JPH05163298A (ja) | 新規ポリペプチドおよびこれを用いる抗ｈｉｖ剤 | |
| CA2024855C (en) | Process and intermediates for producing glucagon | |
| EP0270376B1 (en) | Calcitonin gene-related peptide derivatives | |
| US5204328A (en) | Peptides having atrial natriuretic factor activity | |
| US4392997A (en) | Antigenic peptide compounds | |
| EP0263655A2 (en) | Novel peptides having antiallergic activity | |
| US4761470A (en) | Immunogenic synthetic peptide capable of eliciting herpes simplex virus neutralizing antibody | |
| US4473555A (en) | Nona- and dodecapeptides for augmenting natural killer cell activity | |
| DK150145B (da) | Antigeniske peptider indeholdende 10-11 aminosyrerester | |
| CA2045420A1 (en) | Peptides having atrial natriuretic factor activity | |
| US4377516A (en) | Antigenic linear peptide compounds | |
| DK149093B (da) | Analogifremgangsmaade til fremstilling af pentapeptidderivater eller farmaceutisk acceptable salte deraf | |
| Bernard et al. | Synthesis of conjugates between luteinizing hormone releasing hormone (LH‐RH) and N‐acetyl‐muramyl‐L‐alanyl‐D‐isoglutamine (MDP) models of totally synthetic vaccines | |
| IE920055A1 (en) | Improvements in and relating to hormones | |
| US4353822A (en) | Antigenic linear peptide compounds | |
| CA1181742A (en) | Antigenic linear peptide compound | |
| EP0101677B1 (en) | Antigenic linear peptide compounds | |
| Granier et al. | Synthesis and immunological characterization of two peptides which are models for two of the four major antigenic sites of a scorpion toxin |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PBP | Patent lapsed |