NO328208B1 - Inhibitorer for cruzipain og andre cysteinproteaser, fremgangsmate for validering av en kjent eller antatt cysteinproteaseinhibitor som et terapeutisk mal, anvendelser av forbindelsene i fremgangsmaten og ved fremstilling av medikamenter, samt farmasoytiske eller veterinaermedisinske preparater og fremgangsmate for fremstilling derav - Google Patents

Inhibitorer for cruzipain og andre cysteinproteaser, fremgangsmate for validering av en kjent eller antatt cysteinproteaseinhibitor som et terapeutisk mal, anvendelser av forbindelsene i fremgangsmaten og ved fremstilling av medikamenter, samt farmasoytiske eller veterinaermedisinske preparater og fremgangsmate for fremstilling derav Download PDF

Info

Publication number
NO328208B1
NO328208B1 NO20033220A NO20033220A NO328208B1 NO 328208 B1 NO328208 B1 NO 328208B1 NO 20033220 A NO20033220 A NO 20033220A NO 20033220 A NO20033220 A NO 20033220A NO 328208 B1 NO328208 B1 NO 328208B1
Authority
NO
Norway
Prior art keywords
oxohexahydrofuro
oxo
pyrrol
ethyl
alkyl
Prior art date
Application number
NO20033220A
Other languages
English (en)
Other versions
NO20033220D0 (no
NO20033220L (no
Inventor
Martin Quibell
Original Assignee
Amura Therapeutics Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from GB0101179A external-priority patent/GB0101179D0/en
Application filed by Amura Therapeutics Ltd filed Critical Amura Therapeutics Ltd
Publication of NO20033220D0 publication Critical patent/NO20033220D0/no
Publication of NO20033220L publication Critical patent/NO20033220L/no
Publication of NO328208B1 publication Critical patent/NO328208B1/no

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
    • C07D491/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D491/04—Ortho-condensed systems
    • C07D491/044—Ortho-condensed systems with only one oxygen atom as ring hetero atom in the oxygen-containing ring
    • C07D491/048—Ortho-condensed systems with only one oxygen atom as ring hetero atom in the oxygen-containing ring the oxygen-containing ring being five-membered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
    • C07D491/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D491/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P33/00—Antiparasitic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P33/00—Antiparasitic agents
    • A61P33/02—Antiprotozoals, e.g. for leishmaniasis, trichomoniasis, toxoplasmosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system

Landscapes

  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Description

Denne oppfinnelsen vedrører forbindelser som er inhibitorer for proteasen cruzipain, et genprodukt fra Trypanosoma cruzi-parasitten. Nærmere bestemt tilveiebringer oppfinnelsen forbindelser som kan anvendes til den terapeutiske behandling av Trypanosoma cruzi-infeksjon, anvendelsen av disse forbindelsene og farmasøytiske preparater som omfatter dem. Denne oppfinnelsen vedrører dessuten forbindelser som er inhibitorer over et bredt område av cysteinproteaser, anvendelsen av disse forbindelsene og farmasøytiske preparater som omfatter dem. Slike forbindelser kan anvendes til den terapeutiske behandling av sykdom hvor deltakelse av en cysteinprotease er implisert.
Trypanosom-familien av parasitter har en praktisk talt verdensomspennende innvirkning på helsestell for mennesker og dyr (McKerrow, J.H. et al., Ann. Rev. Microbiol., 47, 821-853, 1993). Én parasitt av denne familien, Trypanosoma cruzi, er det forårsakende middel for Chagas' sykdom, som angriper over 20 millioner mennesker årlig i Latin- og Sør-Amerika, og er den ledende årsak til hjertesykdom i disse regionene og resulterer i mer enn 45 000 dødsfall pr. år (ifølge nettstedet til Centers for Disease Control and Prevention). Med økningen i forflytning av den infiserte populasjon fra landlige til urbane steder og forflytninger fra Sør- og Sentral-Amerika til Nord-Amerika spres infeksjonen via blodtransfusjoner og ved fødsel. De foreliggende behandlinger som velges for Trypanosoma cruzi-infeksjon, nifurtimox og benznidazol (en NADH-fumaratreduktaseinhibitor, Turrens, J.F. et al., Mol. Biochem. Parasitol., 82(1), 125-9, 1996) er i beste fall middels vellykket, idet man oppnår ca.
60 % helbredelse under den akutte infeksjonsfasen (se Docampo, R., Curr. Pharm. Design, 7, 1157-1164, 2001, for en generell omtale), mens de ikke foreskrives i det hele tatt under den kroniske fase hvor kardiomyopati ledsaget av hjertesvikt ofte inntrer (Kirchhoff, L.V., New Engl. J. Med, 329, 639-644, 1993). I tillegg har disse to legemidlene alvorlige skadelige, toksiske effekter, noe som gjør at de krever nøye medisinsk overvåkning under behandling, og er blitt påvist å indusere kromosomskade hos chagastiske småbarn (Gorla, N.B. et al., Mutat. Res., 206, 217-220, 1988). Det foreligger derfor et sterkt medisinsk behov for nye effektive legemidler for den kjemoterapeutiske behand ling av Trypanosoma cruzi- infeks jon. Identifikasjonen av enzymer som finnes å være av avgjørende betydning for etableringen eller propageringen av en infeksjonssykdom, har klassisk sett vært avgjørende ved utviklingen av vellykkede legemidler, slik som antivirusmidler (f.eks. HIV-aspartylproteaseinhibitorer) og antibakterielle midler (f.eks. p-laktamantibiotika) . Letingen etter en lignende akilleshæl ved parasittinfeksjoner har ført til undersøkelse av et stort antall enzymer (f.eks. parasittisk dihydrofolatreduktase, se Chowdhury, S.F. et al., J. Med. Chem., 42(21), 4300-4312, 1999; trypanotionreduktase, se Li, Z. et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 11(2), 251-254, 2001; parasittisk glyseraldehyd-3-fosfatdehydrogenase, se Aranov, A.M. et al., J. Med. Chem., 41(24), 4790-4799, 1998). Et særlig lovende forsk-ningsområde har identifisert rollen til cysteinproteaser, kodet for av parasitten, som spiller en avgjørende rolle under livs-syklusen til parasitten (McKerrow, J.H. et al., Bioorg. Med. Chem., 7, 639-644, 1999). Proteaser danner en vesentlig gruppe av biologiske molekyler som hittil utgjør ca. 2 % av alle gen-produktene identifisert etter analyse av flere genomsekvenser-ingsprogrammer (se f.eks. Southan, C, J. Pept. Sei., 6, 453-458, 2000). Proteaser har utviklet seg til å delta i et enormt område av biologiske prosesser, idet de formidler sin effekt ved spalting av peptidamidbindinger i myriaden av proteiner som finnes i naturen. Denne hydrolytiske virkning utføres ved først å gjenkjenne, så binde seg til, særlig tredimensjonale elektron-iske overflater fremvist ved hjelp av protein, som innstiller bindingen for spalting nøyaktig i proteasens katalytiske sete. Katalytisk hydrolyse starter så gjennom nukleofilt angrep av amidbindingen som skal spaltes, enten via en aminosyresidekjede hos selve proteasen eller gjennom virkningen av et vannmolekyl som er bundet til og aktivert ved hjelp av proteasen. Proteaser hvor den angripende nukleofil er tiolsidekjeden til en Cys-rest, er kjent som cysteinproteaser. Den generelle klassifisering av "cysteinprotease" inneholder mange medlemmer som finnes over et bredt spekter av organismer fra virus, bakterier, protozoer, planter og sopper til pattedyr.
Biologisk undersøkelse av Trypanosoma cruzi-infeksjon har kastet lys over en rekke spesifikke enzymer som er av avgjørende betydning for progresjonen i parasittens livssyklus. Ett slikt enzym, cruzipain, en kathepsin L-lignende cysteinprotease, er et klart terapeutisk mål for behandlingen av Chagas' sykdom ((a) Cazzulo, J.J. et al., Curr. Pharm. Des., 7, 1143-1156, 2001; (b) Caffrey, CR. et al., Curr. Drug Targets, 1, 155-162, 2000). Selv om den nøyaktige biologiske rolle til cruzipain i parasittens livssyklus stadig er uklar, indikerer forhøyede cruzipainbudbringer-RNA-nivåer i epimastigotutvik-lingsstadiet en rolle i den ernæringsmessige nedbrytning av vertsmolekyler i lysosomallignende vesikler (Engel, J.C. et al., J. Cell. Sei., 111, 597-606, 1998). Valideringen av cruzipain som et levedyktig terapeutisk mål er blitt oppnådd med økende nivåer av kompleksitet. Tilsetning av en generell cysteinproteaseinhibitor, Z-Phe-Ala-FMK, til Trypanosoma cruzi-infiserte pattedyrcellekulturer blokkerte replikasjon og diffe-rensiering av parasitten og stanset derved parasittens livssyklus (Harth, G., et al., Mol. Biochem. Parasitol., 58, 17-24, 1993). Administrering av en vinylsulfonbasert inhibitor i en Trypanosoma cruzi- infisert murin dyremodell reddet ikke bare musene fra dødelige infeksjoner, men av også en fullstendig helbredelse (Engel, J.C. et al., J. Exp. Med, 188( 4), 725-734, 1998) . Et stort antall andre in vivo-studier har bekreftet at infeksjoner med alternative parasitter, slik som Leishmania major (Selzer, P.M. et al., Proe. Nat'l. Acad. Sei. USA, 96, 11015-11022, 1999), Schistosoma mansoni og Plasmodium falci-parium (Olson, J.E. et al., Bioorg. Med. Chem., 7, 633-638, 1999) kan stanses eller helbredes ved behandling med cysteinproteaseinhibitorer.
Mange forskjellige syntetiske fremgangsmåter er blitt beskrevet mot utformingen av cruzipaininhibitorer. Selv om de gir et biologisk "bevis-for-prinsipp" for behandlingen av Trypanosoma cruzi-infeksjon, oppviser imidlertid nåværende inhibitorer en rekke biokjemiske og fysikalske egenskaper som kan utelukke deres kliniske utvikling (se f.eks. (a) Brinen, L.S. et al., Structure, 8, 831-840, 2000, peptidomimetiske vinylsulfoner, mulig skadelig pattedyrcelletoksisitet (se McKerrow, J.H. og Engel, J., upubliserte resultater gjengitt i Scheidt, K.A. et al., Bioorg. Med. Chem, 6, 2477-2494, 1998); (b) Du, X. et al., Chem. Biol., 7, 733-742, 2000, arylureaer, generelt med lav^M-aktivitet, og høye ClogP-verdier, således dårlig vannoppløselighet og sannsynligvis lav oral biotilgjengelighet; (c) Roush, W.R. et al., Tetrahedron, 56, 9747-9762, 2000, peptidylepoksysuksinater, irreversible inhibitorer, med sterk aktivitet mot pattedyrproteaser i husholdning, slik som kathepsin B; (d) Li, R. et al., Bioorg. Med. Chem., 4( 9), 1421-1427, 1996, bis-arylacylhydrazider og chalkoner, polyhydroksy-lerte aromatiske forbindelser; (e) US 6143931, WO 9846559, ikke-peptid-ot-ketoamider) . Blant de mange forskjellige fremgangsmåter for enzyminhibering som hittil har vært kjent, har bare cruzi-painproteaseinhibitorene vist seg å være effektive når det gjelder å helbrede sykdomsrelaterte dyremodeller for Trypanosoma cruzi-infeksjon. Det foreligger derfor et klart medisinsk behov for å forbedre disse "bevis-for-prinsipp"-funn mot kliniske kandidater, egnet for humanbruk, gjennom oppdagelsen av mer virkningsfulle cruzipaininhibitorer som har en ønskelig kombinasjon av styrke, selektivitet, lav toksisitet og optimaliserte farmakokinetiske parametere.
Cruzipain og faktisk mange andre sentrale parasittiske proteaser tilhører den papainlignende CA-Cl-familie og har strukturelt sett nært beslektede pattedyrhomologer. Cysteinproteaser er klassifisert i "klaner" basert på en likhet i den tredimensjonale struktur eller en bevart ordning av katalytiske rester i den primære proteasesekvens. I tillegg er "klaner" videre klassifisert i "familier", hvor hver protease har til felles et statistisk signifikant slektskap med andre medlemmer når man sammenligner deler av aminosyresekvensen som utgjør de delene som er ansvarlig for proteaseaktivitet (se Barrett, A.J. et al., i "Handbook of Proteolytic Enzymes", red. Barrett, A.J., Rawlings, N.D. og Woessner, J.F., Publ. Academic Press, 1998, for en grundig omtale). Hittil er cysteinproteaser blitt klassifisert i fem klaner, CA, CB, CC, CD og CE (Barrett, A.J. et al., 1998) . En protease fra den tropiske papayafrukt, "papain", danner grunnlaget for klan CA, som for tiden inneholder over 80 forskjellige og fullstendige oppføringer i forskjellige sekvensdatabaser, med mange flere forventet fra de nåværende genomsekvenseringsanstrengelser. Proteaser fra klan CA/familie Cl har vært implisert i et stort antall sykdomsprosesser, f.eks. humanproteaser, slik som kathepsin K (osteoporose), kathepsin S (autoimmune forstyrrelser) , kathepsin L (metastaser), eller parasittproteaser, slik som falcipain (malariaparasitt Plasmodium falciparum) , cruzipain ( Trypanosoma cruzi-infeksjon). Nylig er også en bakterieprotease, stafylopain (S. aureus-infeksjon) blitt midlertidig plassert i klan CA. Røntgenkrystallo-grafiske strukturer er tilgjengelige for en rekke av de ovenfor nevnte proteaser i kompleks med en rekke inhibitorer, f.eks. papain (PDB-innføring, lpad, lpe6, lpip, lpop, 4pad, 5pad, 6pad, lppp, lthe, lcsb, lhuc), kathepsin K (lauO, lau2, lau3, lau4, latk, lmem, lbgo, layw, layu), kathepsin L (lcs8), kathepsin S (for tiden på vent, men publisert, McGrath, M.E. et al., Protein Science, 7, 1294-1302, 1998), cruzain (en rekombinant form av cruzipain, se Eakin, A.E. et al., 268(9), 6115-6118, 1993)
(lewp, laim, 2aim, 1F29, 1F2A, 1F2B, 1F2C) , stafylopain (lcv8). Hver av strukturene oppviser en lignende total aktivt setetopo-logi, slik det ville være forventet gjennom deres "klan"- og "familie"-klassifisering, og slik strukturell likhet eksempli-fiserer ett aspekt av vanskelighetene som er involvert i å opp-dage en selektiv inhibitor for cruzipain som er egnet for humanbruk. Små forskjeller når det gjelder dybden i og den innfløkte form til aktivt sete-gropen i hver CA-Cl-protease er imidlertid klare, og disse kan undersøkes med hensyn på selektiv inhibitor-utforming. I tillegg oppviser mange av de nåværende substratbaserte inhibitorkomplekser av CA-Cl-familieproteaser en serie av bevarte hydrogenbindinger mellom inhibitoren og protease-ryggraden, noe som bidrar signifikant til inhibitorstyrke. Primært er en bidentathydrogenbinding observert mellom proteasen Gly66 (C=0)/inhibitor N-H og proteasen Gly66(NH)/inhibitor (C=0), hvor inhibitor (C=0) og (NH) er tilveiebrakt ved hjelp av en aminosyrerest NHCHRCO som utgjør S2-undersetebindings-elementet i inhibitoren (se Berger, A. og Schecter, I., Philos. Trans. R. Soc. Lond. [Biol.], 257, 249-264, 1970, for en beskrivelse av proteasebindingssetenomenklatur). En ytterligere hydrogenbinding mellom proteasehovedkjede (C=0) i asparagin eller asparaginsyre (158-163, restnummer varierer mellom proteaser) og en inhibitor (N-H) observeres ofte, hvor inhibitoren (N-H) er tilveiebrakt ved hjelp av Sl-undersetebindings-elementet i inhibitoren. Motivet X-NHCHRCO-NH-Y) observeres således ofte blant de tidligere kjente substratbaserte inhibitorer for CA-Cl-proteaser.
I teknikkens stand er utviklingen av cysteinproteaseinhibitorer for humanbruk nylig blitt et område med intens aktivitet. Når man vurderer CA-Cl-familiemedlemmene, er det blitt lagt særlig vekt på utviklingen av inhibitorer for human-kathepsiner, først og fremst kathepsin K (osteoporose), kathepsin S (autoimmune forstyrrelser) og kathepsin L (metastaser) , gjennom bruken av peptid- og peptidomimetiske nitriler (se f.eks. WO-A-0109910, WO-A-0051998, WO-A-0119816, WO-A-9924460, WO-A-0049008, WO-A-0048992, WO-A-0049007, WO-A-0130772, WO-A-0055125, WO-A-0055126, WO-A-0119808, WO-A-0149288, WO-A-0147886) , rettkjedede og sykliske peptid- og peptidomimetiske ketoner (se f.eks. Veber, D.F. og Thompson, S.K., Curr. Opin. Drug Discovery Dev., 3(4), 362-369, 2000, WO-A-0170232, WO-A-0178734, WO-A-0009653, WO-A-0069855, WO-A-0029408, WO-A-0134153 til WO-A-0134160, WO-A-0029408, WO-A-9964399, WO-A-9805336, WO-A-9850533), ketoheterosykliske forbindelser (se f.eks. WO-A-0055144, WO-A-0055124) og monobaktamer (se f.eks. WO-A-0059881, WO-A-9948911, WO-A-0109169). I teknikkens stand beskrives sterke in vitro-inhibitorer, men de mange vanskelighetene ved utvikling av humanterapeutika belyses også. For eksempel beskrives det i WO-A-9850533 og WO-A-0029408 forbindelser som kan henvises til som sykliske ketoner, og som er inhibitorer for cysteinproteaser med en bestemt referanse mot papainfamilieproteaser, og som en mest foretrukket utførelsesform kathepsin K. I WO-A-9850533 beskrives forbindelser som senere er blitt nærmere omtalt i litteraturen som sterke inhibitorer for kathepsin K, med god oral biologisk tilgjengelighet (Witherington, J., "Tetrahydro-furans as Selective Cathepsin K Inhibitors", RSC meeting, Burlington House, London, 1999). Forbindelsene ifølge WO-A-9850533 ble rapportert å binde seg til kathepsin K gjennom dannelsen av en reversibel kovalent binding mellom tetrahydro-furankarbonylresten og cysteinresten i det aktive katalytiske setet (Witherington, J., 1999). I tillegg er de samme sykliske ketonforbindelsene beskrevet i WO-A-9953039 som del av en vidt-rekkende beskrivelse av inhibitorer for cysteinproteaser for-bundet med parasittsykdommer, med særlig referanse til behandlingen av malaria med inhibering av falcipain. Senere litteratur beskriver imidlertid de sykliske ketonforbindelsene ifølge WO-A-9850533 som uegnet for videre utvikling eller for full farmako- kinetisk evaluering på grunn av en fysikalsk-kjemisk egenskap hos inhibitorene, den dårlige kirale stabilitet i det kirale a-aminoketonsentrum (Marquis, R.W. et al., J. Med. Chem., 44( 5), 725-736, 2001). WO-A-0069855 beskriver forbindelser som også kan henvises til som sykliske ketoner med særlig referanse mot inhibering av kathepsin S. Forbindelsene ifølge WO-A-0069855 anses for å være et fremskritt i forhold til forbindelser ifølge WO-A-9850533 på grunn av tilstedeværelsen av p-substituenten på det sykliske ketonringsystem som gir kiral stabilitet til ot-karbonatomet i det sykliske ketonringsystem. Forbindelsene ifølge WO-A-0069855 og særlig de ifølge WO-A-9850533 beskriver imidlertid et behov for tilstedeværelsen av det potensielle hydrogenbindingsmotiv X-NHCHRCO-NH-Y, som ofte observeres blant de tidligere kjente substratbaserte inhibitorer for CA-C1-proteaser.
Det er nå blitt oppdaget at visse forbindelser, definert ved hjelp av de generelle formlene (I) og (II), er sterke og selektive cruzipainproteaseinhibitorer som kan anvendes ved behandlingen av Trypanosoma cruzi- infeksjon. Andre forbindelser definert ved hjelp av de generelle formlene (I) og (II) er proteaseinhibitorer over et bredt spekter av CA-Cl-cysteinproteaser, og forbindelser som kan anvendes ved behandlingen av sykdommer forårsaket av cysteinproteaser. Forbindelser beskrevet ved hjelp av de generelle formlene (I) og (II), inneholder ikke X-NHCHRCO-NH-Y-motivet som er ofte observert blant de tidligere kjente substratbaserte inhibitorene for CA-Cl-proteaser, men forbindelser definert ved de generelle formlene (I) og (II), bibeholder likevel overraskende god styrke. Den foreliggende oppfinnelse tilveiebringer substituerte bisykliske tetrahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-3-on-, tetrahydrotieno[3, 2- b]pyrrol-3-on-, heksahydropyrrolo[3, 2- b]pyrrol-3-on-, heksahydrosyklopenta-[b]pyrrol-6-on-, tetrahydrofuro[3,2-c]pyrazol-6-on-, tetrahydrotieno [3, 2-c]pyrazol-6-on-, heksahydropyrrolo[3,2-c]pyrazol-6-on-, heksahydrosyklopentapyrazol-6-on-, heksahydrofuro[3, 2- b]-pyridin-3-on-, heksahydrotieno[3, 2- b]pyridin-3-on-, oktahydropyrrolo [3, 2- b] pyridin-3-on-, oktahydrosyklopenta [Jb]pyridin-7-on-, heksahydrofuro[3,2-c]pyridazin-7-on-, heksahydrotieno-[3, 2-c]pyridazin-7-on-, oktahydropyrrolo[3,2-c]pyridazin-7-on- eller oktahydrosyklopenta[c]pyridazin-7-on-forbindelser definert ved hjelp av de generelle formlene (I) og (II).
Det første aspektet av oppfinnelsen tilveiebringer følgelig en forbindelse i henhold til den generelle formel (I) eller den generelle formel (II):
hvor:
R<1>= Co-7-alkyl (når C = 0, er R<1>bare hydrogen) , C3_6-sykloalkyl eller Ar-C0-7-alkyl (når C = 0, er R<1>bare en aromatisk rest Ar); 1 = 0, S, CR2R3 eller NR<4>, hvor R<4>er valgt fra C0-7-alkyl, C3-6-sykloalkyl og Ar-C0-7-alkyl; Pi = CR<5>R<6>; P2= CR<7>R<8>; Q = CR<9>R<10>eller NR<11>, hvor R<11>er valgt fra C0-7-alkyl, C3_6-sykloalkyl og Ar-C0-7-alkyl; hver av R<2>, R<3>, R<5>, R6,R7,R<8>,R<9>og R<10>er uavhengig av hverandre valgt fra Co-7-alkyl, C3_6-sykloalkyl, Ar-Co-7-alkyl, 0-Co-7-alkyl, 0-C3_6-sykloalkyl, O-Ar-C0-7-alkyl, S-C0-7-alkyl, S-C3_6-sykloalkyl, S-Ar-C0-7-alkyl, NH-C0-7-alkyl, NH-C3-6-sykloalkyl, NH-Ar-Co-7-alkyl, N (C0-7-alkyl) 2, N (C3_6-sykloalkyl) 2 og N (Ar-C0-7~ alkyl) 2; Y = CR<12>R<13->CO, hvor R<1>2 og R13 er valgt fra C0-7-alkyl, C3_6-sykloalkyl og Ar-C0-7-alkyl; (X)o = CR<14>R<15>, hvorR14ogR1<5>er uavhengig av hverandre valgt fra Co-7-alkyl, C3_6-sykloalkyl og Ar-C0-7-alkyl, og o er et tall fra 0 til 3; (W)n= 0, S, C(0), S(0) eller S(0)2eller NR<16>, hvor R<16>er valgt fra C0-7-alkyl, C3-6-sykloalkyl og Ar-C0-7-alkyl, og n er 0 eller 1; (V)m=C(0), C(S), S(0), S(0)2, S(0)2NH, 0C(0), NHC(O), NHS(O), NHS(0)2, 0C(0)NH, C(0)NH eller CR17R<18>, hvor R<17>og R<18>uavhengig av hverandre er valgt fra C0-7-alkyl, C3_6-sykloalkyl og Ar-Co-7-alkyl, og m er et tall fra 0 til 3, forutsatt at når m er større enn 1, inneholder (V)mmaksimalt én karbonyl- eller sulfonylgruppe;
U = en stabil monosyklisk ring med 5-7 medlemmer eller en stabil bisyklisk ring med 8-11 medlemmer som er enten mettet eller umettet, og som omfatter 0-4 heteroatomer (som spesifisert nedenunder):
hvor:
R<19>er Co-7-alkyl, C3-6-sykloalkyl, Ar-C0-7-alkyl, O-C0-7-alkyl, 0-C3_6-sykloalkyl, O-Ar-C0-7-alkyl, S-C0-7-alkyl, S-C3.6-sykloalkyl, S-Ar-C0-7-alkyl, NH-C0-7-alkyl, NH-C3-6-sykloalkyl, NH-Ar-Co-7-alkyl, N (C0-7-alkyl) 2, N (C3-6-sykloalkyl) 2 eller N (Ar-Co-7-alkyl)2, eller når den er del av en CHR<19->eller CR<19->gruppe, kan R<19>være halogen;
A er valgt fra CH2, CHR<19>, 0, S og NR<20>, hvor R19 er som definert ovenfor, og R20 er valgt fra C0-7-alkyl, C3_6-sykloalkyl og Ar-Co-7-alkyl;
B, D og G er uavhengig av hverandre valgt fra CR<19>, hvorR1<9>er som definert ovenfor, eller N;
E er valgt fra CH2, CHR<19>, 0, S og NR<20>, hvor R19ogR20er som definert ovenfor;
J, L, M, R, T, T2, T3og T4er uavhengig av hverandre valgt fra CR<19>og N, hvorR1<9>er som definert ovenfor;
T5er valgt fra CH og N;
q er et tall fra 1 til 3, og definerer derved en ring med 5, 6 eller 7 medlemmer.
B, D, G, J, L, M, R, T, T2, T3og T4kan i tillegg være et N-oksid (N -> CO) .
Foreliggende oppfinnelse omfatter alle salter, hydrater, solvater, komplekser og forløperlegemidler for forbindelsene ifølge denne oppfinnelsen. Uttrykket "forbindelse" er ment å omfatte alle slike salter, hydrater, solvater, komplekser og forløperlegemidler, med mindre sammenhengen krever noe annet.
Passende farmasøytisk og veterinærmedisinsk akseptable salter av forbindelsene med de generelle formlene (I) og (II) omfatter salter av organiske syrer, spesielt karboksylsyrer, inkludert, men ikke begrenset til, acetat, trifluoracetat, laktat, glukonat, sitrat, tartrat, maleat, malat, pantotenat, adipat, alginat, aspartat, benzoat, butyrat, diglukonat, syklo-pentanat, glukoheptanat, glyserofosfat, oksalat, heptanoat, heksanoat, fumarat, nikotinat, palmoat, pektinat, 3-fenyl-propionat, pikrat, pivalat, proprionat, tartrat, laktobionat, pivolat, kamferat, undekanoat og suksinat; organiske sulfonsyrer, slik som metansulfonat, etansulfonat, 2-hydroksyetan-sulfonat, kamfersulfonat, 2-naftalensulfonat, benzensulfonat, p-klorbenzensulfonat og p-toluensulfonat; og uorganiske syrer, slik som hydroklorid, hydrobromid, hydrojodid, sulfat, bisulfat, hemisulfat, tiocyanat, persulfat, fosfor- og sulfonsyrer. Salter som er ikke farmasøytisk eller veterinærmedisinsk akseptable, kan likevel være verdifulle som mellomprodukter.
Forløperlegemidler er hvilke som helst kovalent bundne forbindelser som frigjør det aktive opphavslegemiddel i henhold til generell formel (I) eller (II) in vivo. Et forløperlege- middel kan f.eks. utgjøre et acetal- eller hemiacetalderivat av den eksosykliske ketongruppe som er til stede i tetrahydrofuro-[3, 2- b]pyrrol-3-on-, tetrahydrotieno[3, 2- b]pyrrol-3-on-, heksahydropyrrolo [3, 2- b]pyrrol-3-on-, heksahydrosyklopenta[ b]pyrrol-6-on-, tetrahydrofuro[3,2-c]pyrazol-6-on-, tetrahydrotieno-[3,2-c]pyrazol-6-on-, heksahydropyrrolo[3,2-c]pyrazol-6-on-, heksahydrosyklopentapyrazol-6-on-, heksahydrofuro[3, 2- b]pyridin-3-on-, heksahydrotieno[3, 2- b]pyridin-3-on-, oktahydropyrrolo-[3, 2- b]pyridin-3-on-, oktahydrosyklopenta[ b]pyridin-7-on-, heksahydrofuro[3,2-c]pyridazin-7-on-, heksahydrotieno[3, 2-c] - pyridazin-7-on-, oktahydropyrrolo[3,2-c]pyridazin-7-on- eller oktahydrosyklopenta[c]pyridazin-7-on-ryggraden. Dersom det er til stede et kiralt sentrum eller en annen form for isomert sentrum i en forbindelse ifølge foreliggende oppfinnelse, er alle former av slike isomerer eller isomerer, inkludert enantiomerer og diastereoisomerer, ment å være dekket. Forbindelser ifølge oppfinnelsen som inneholder et kiralt sentrum, kan anvendes som en racemisk blanding, en enantiomert anriket blanding, eller den racemiske blanding kan separeres ved å anvende velkjente teknikker, og en individuell enantiomer kan anvendes alene.
"Halogen" er, slik det her er brukt, ment å omfatte F, Cl, Br og I.
"Heteroatom" er, slik det her er brukt, ment å omfatte 0, S og N.
"Co-7-alkyl" er, slik det her er brukt, ment å omfatte stabile rettkjedede og forgrenede alifatiske karbonkjeder som inneholder 0 (det vil si bare hydrogen) til 7 karbonatomer, slik som metyl, etyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, isobutyl, t-butyl, pentyl, isopentyl, heksyl, heptyl og hvilke som helst enkle isomerer derav. I tillegg kan ethvert Co-7-alkyl eventuelt være substituert i hvilket som helst punkt med 1, 2 eller 3 halogenatomer (som definert ovenfor) slik at det f.eks. fås en trifluormetylsubstituent. Dessuten kan Co-7-alkyl inneholde ett eller flere heteroatomer (som definert ovenfor) , slik at det f.eks. fås etere, tioetere, sulfoner, sulfonamider, substituerte aminer, amidiner, guanidiner, karboksylsyrer eller karboks-amider. Dersom heteroatomet er lokalisert i en kjedeende, er det passende substituert med 1 eller 2 hydrogenatomer. Et heteroatom
eller halogen er bare til stede når Co-7-alkyl inneholder minst ett karbonatom.
"C3_6-sykloalkyl" er, slik det her er brukt, ment å omfatte enhver variasjon av "Co-7-alkyl", som i tillegg inneholder en karbosyklisk ring, slik som syklopropyl, syklobutyl, syklo-pentyl eller sykloheksyl. Den karbosykliske ring kan eventuelt være substituert med ett eller flere halogener (som definert ovenfor) eller heteroatomer (som definert ovenfor) slik at det f.eks. fås en tetrahydrofuran-, pyrrolidin-, piperidin-, piper-azin- eller morfolinsubstituent.
"Ar-Co-7-alkyl" er, slik det her er brukt, ment å omfatte enhver variasjon av "Co-7-alkyl", som i tillegg inneholder en aromatisk ringrest "Ar". Den aromatiske ringrest Ar kan være en stabil monosyklisk ring med 5 eller 6 medlemmer eller en stabil bisyklisk ring med 9 eller 10 medlemmer som er umettet, som definert tidligere for U i de generelle formlene (I) og (II). Den aromatiske ringrest Ar kan være substituert med R<19>(som definert ovenfor for U i de generelle formlene (I) og (II) ) . Når C = 0 i substituenten Ar-Co-7-alkyl, er substituenten bare den aromatiske ringrest Ar.
Andre uttrykk som inneholder slike termer som alkyl og sykloalkyl, er ment å skulle fortolkes i henhold til defini-sjonene ovenfor. For eksempel er "Ci-4-alkyl" det samme som C0-7-alkyl, bortsett fra at det inneholder fra 1 til 4 karbonatomer.
Dersom det er til stede forskjellige strukturisomerer, og/eller ett eller flere kirale sentre er til stede, er alle isomere former ment å være dekket. Enantiomerer er kjennetegnet ved den absolutte konfigurasjon til deres kirale sentre, og er beskrevet ved hjelp av R- og S-sekvenseringsreglene til Cahn, Ingold og Prelog. Slike konvensjoner er godt kjent innenfor teknikken (se f.eks. "Advanced Organic Chemistry", 3. utg., red. March, J., John Wiley and Sons, New York, 1985).
Foretrukne forbindelser med de generelle formlene (I) og (II) omfatter, men er ikke begrenset til, dem som uavhengig av hverandre eller i kombinasjon: Z er 0, S, NH eller CH2;
Pi og P2er CH2; og
Q er CH2eller NH.
Foretrukne forbindelser med de generelle formlene (I) og (II) omfatter også, men er ikke begrenset til, dem som uavhengig av hverandre eller i kombinasjon: Z er NR<4>, hvor R4 er et Ar-Ci-4-alkyl eller en substituert karbonyl- eller sulfonylgruppe;
Pi og P2er CH2; og
Q er CH2eller NH.
Eksempler på foretrukne forbindelser omfatter således dem som inneholder en bisyklisk rest valgt fra tetrahydrofuro-[3, 2- b]pyrrol-3-on, tetrahydrotieno[3, 2- b]pyrrol-3-on, heksahydropyrrolo [3, 2- b]pyrrol-3-on, heksahydrosyklopenta[ b]pyrrol-6-on, tetrahydrofuro[3,2-c]pyrazol-6-on, tetrahydrotieno[3,2-c]-pyrazol-6-on, heksahydropyrrolo[3,2-c]pyrazol-6-on, heksahydro-syklopentapyrazol-6-on, heksahydrofuro[3, 2- b]pyridin-3-on, heksahydrotieno[3, 2- b]pyridin-3-on, oktahydropyrrolo[3, 2- b]-pyridin-3-on, oktahydrosyklopenta [ b] pyridin-7-on, heksahydrofuro[3,2-c]pyridazin-7-on, heksahydrotieno[3,2-c]pyridazin-7-on, oktahydropyrrolo[3,2-c]pyridazin-7-on og oktahydrosyklopenta[c]-pyridazin-7-on, som vist nedenunder.
I forbindelser med de generelle formlene (I) og (II) er det foretrukket at R<1>omfatter C0-7-alkyl eller Ar-Co-7-alkyl. For
eksempel omfatter således foretrukne R<1->rester hydrogen, eller en rettkjedet eller forgrenet alkylkjede, eller en rettkjedet eller forgrenet heteroalkylkjede, eller en eventuelt substituert arylalkylkjede, eller en eventuelt substituert arylheteroalkylkjede.
Det er særlig foretrukket at R<1>er hydrogen eller Ci_4-alkyl eller Ar-Ci_4-alkyl, og eksempler på slike R<1->substituenter omfatter, men er ikke begrenset til:
hvor R<19>er definert ovenfor.
I foretrukne forbindelser med de generelle formlene (I) og (II) er Y valgt fra CHR<13>CO, hvor R<13>er valgt fra C0-7-alkyl og Ar-Co-7-alkyl, f.eks. hydrogen, en rettkjedet eller forgrenet alkylkjede, en rettkjedet eller forgrenet heteroalkylkjede, en eventuelt substituert arylalkylkjede eller en eventuelt substi tuert arylheteroalkylkjede. I foretrukne forbindelser med de generelle formlene (I) er i tillegg R<13>valgt fra C3-6~sykloalkyl, f.eks. sykloheksylmetyl.
Eksempler på foretrukne Y-substituenter omfatter de følgende:
hvorR19, R<20>og Ar er som definert ovenfor.
Mer foretrukne R<13->grupper omfatter Ci-4-alkyl som kan
være substituert med OH, NR<2>0R20,COOR<20>eller CONR20eller syklo-alkylmetyl eller Ar-Ci_4-alkyl, hvor arylgruppen kan være substituert med R<19>, hvor hver R19ogR20 uavhengig av hverandre er som definert ovenfor.
Enda mer foretrukne R<13->grupper omfatter Ar-Cfø-, hvor den aromatiske ring er en eventuelt substituert fenyl- eller monosyklisk heterosyklisk ring. I tillegg omfatter enda mer foretrukne R<13->grupper enkle, forgrenede alkylgrupper, slik som isobutyl, eller rettkjedede heteroalkylkjeder, slik som benzylsulfanylmetyl eller benzylsulfonylmetyl. Dessuten omfatter enda mer foretrukne R<13->grupper sykloheksylmetyl. Eksempler på enda mer foretrukne Y-substituenter omfatter de følgende:
hvor R<19>og Ar er som definert tidligere.
Det er foretrukket at i gruppen (X)Qer hver av R14ogR1<5>valgt fra C0-7-alkyl og Ar-Co-7-alkyl, f. eks. hydrogen, en rettkjedet eller forgrenet alkylkjede, en rettkjedet eller forgrenet heteroalkylkjede, en eventuelt substituert arylalkylkjede eller en eventuelt substituert arylheteroalkylkjede.
Mer foretrukne (X)0-grupper omfatter R14valgt fra hydrogen; R<15>er Ci_4-alkyl som kan være substituert med OH, NR<20>R<20>, COOR<20>eller CONR<20>eller Ar-Ci-4-alkyl, hvor arylgruppen kan være substituert med R<19>, hvor hver R19 ogR20 uavhengig av hverandre er som definert ovenfor.
Eksempler på foretrukne (X)0-grupper omfatter de følgende:
hvorR19 og R<20>er som definert tidligere.
Enda mer foretrukne forbindelser med de generelle formlene (I) og (II) omfatter (X)Q-grupper som er enkle alkylgrupper, slik som metylen, og hvor o = 0 eller 1.
I gruppen (W)ner W fortrinnsvis 0, S, S02, S(0), C(0) eller NR<16>, hvor R16 er C0-4-alkyl; og n er 0 eller 1.
Mer foretrukne forbindelser med de generelle formlene (I) og (II) omfatter (W)n-grupper definert som 0, S, S02, C(0) og NH, hvor n = 0 eller 1.
Enda mer foretrukne forbindelser med de generelle formlene (I) og (II) omfatter (VJ)n-grupper definert som NH, hvor n = 1.
I gruppen (V)m: V er fortrinnsvis C(0), C(0)NH eller CHR<18>, hvor R<18>er C0-4-alkyl; og m er 0 eller 1.
Foretrukne V- og W-substituentkombinasjoner omfattet av de generelle formlene (I) og (II) omfatter, men er ikke begrenset til:
I tillegg omfatter en foretrukket V- og W-substituent-kombinasjon omfattet av de generelle formlene (I) og (II), men er ikke begrenset til:
Mer foretrukne V-, W- og X-substituentkombinasjoner omfattet av de generelle formlene (I) og (II), omfatter, men er ikke begrenset til:
I foretrukne forbindelser med de generelle formlene (I) og (II) omfatter U en eventuelt substituert, mettet eller umettet heterosyklisk ring med 5 eller 6 medlemmer, eller Ar-gruppe eller en eventuelt substituert, mettet eller umettet heterosyklisk ring med 9 eller 10 medlemmer eller Ar-gruppe. Eksempler på slike foretrukne U-ringer omfatter de følgende:
og også de følgende: hvor R<19>er som definert tidligere. Mer foretrukne forbindelser med de generelle formlene (I) og (II) inneholder en U-gruppe som omfatter en voluminøs alkyl- eller arylgruppe i parastillingen til et aryl Ar. Mer foretrukne forbindelser inneholder dessuten et meta- eller para-biaryl-Ar-Ar, hvor Ar er som tidligere definert. I tillegg inneholder mer foretrukne forbindelser en 6,6- eller 6,5- eller 5,6-kondensert aromatisk ring. Eksempler på mer foretrukne U-grupper er:
hvor R<19>, D, E, G, J, L, M, R, T, T2, T3og T4er som definert tidligere.
Mer foretrukne forbindelser med de generelle formlene (I) og (II), særlig for inhibering av cruzipain, inneholder en U-gruppe som omfatter en Ar-ring med 6 medlemmer som inneholder en voluminøs alkyl- eller arylgruppe i parastillingen, hvor Ar er som tidligere definert:
hvor R<19>, D, E, G, J, L, M, R og T er som definert tidligere.
Enda mer foretrukne forbindelser med de generelle formlene (I) og (II) inneholder en U-gruppe som omfatter, men ikke er ikke begrenset til, de følgende:
hvor R<19>, D, E, G, J og L er som definert tidligere.
Forkortelser og symboler som er vanlig brukt innenfor peptid- og kjemifagene, er anvendt her for å beskrive forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse, ved å følge de generelle retningslinjene som er presentert av IUPAC-IUB Joint Commission on Biochemical Nomenclature, som beskrevet i Eur. J. Biochem., 158, 9-, 1984. Forbindelser med formlene (I) og (II) og mellom-produktene og utgangsmaterialene som anvendes ved deres fremstilling, er navngitt i overensstemmelse med IUPAC-nomenklatur-reglene, hvor de karakteristiske gruppene har avtakende prioritet for angivelse som hovedgruppe. En eksempelforbindelse med formel (I), forbindelse (1), hvor R<1>er H, Pi er metylen, Q er metylen, Z er oksygen, Y er 4-metylpentyl, (X)Q er null, (W)ner oksygen, (V)mer metylen, og U er fenyl, er således navngitt:
(3aS, 6aR)-4-(2S-benzyloksy-4-metylpentanoyl)tetrahydrofuro-[3, 2- b]pyrrol-3-on
En andre eksempelforbindelse med formel (I), forbindelse (2), hvor R<1>er H, Pi er metylen, Q er metylen, Z er svovel, Y er 4-metylpentyl, (X)0 er null, (W)ner oksygen, (V)mer metylen, og U er fenyl, er således navngitt:
(3af?, 6aR) -4 - (2S-benzyloksy-4-metylpentanoyl) tetrahydrotieno-[3, 2- b]pyrrol-3-on
En tredje eksempelforbindelse med formel (I), forbindelse (3) , hvor R<1>er H, Pi er metylen, Q er metylen, Z er metylen, Y er 4-metylpentyl, (X)Q er null, (W)ner oksygen, (V)mer metylen, og U er fenyl, er således navngitt:
{ 3aR,6aS)-1-(2S-benzyloksy-4-metylpentanoyl)heksahydrosyklopenta[ b]pyrrol-6-on
En fjerde eksempelforbindelse med formel (I), forbindelse (4), hvor R<1>er H, Pi er metylen, Q er metylen, Z er NH, Y er 4-metylpentyl, (X)0 er null, (W)ner oksygen, (V)mer metylen, og U er fenyl, er således navngitt:
(3aS, 6aR)-1-(2S-benzyloksy-4-metylpentanoyl)heksahydropyrrolo-[3, 2- b]pyrrol-3-on
En femte eksempelforbindelse med formel (I), forbindelse (5) , hvor R<1>er H, Pi er metylen, Q er NH, Z er oksygen, Y er 4-metylpentyl, (X)0er null, (W)ner oksygen, (V)mer metylen, og U er fenyl, er således navngitt:
{ 3aR, 6aS)-4-(2S-benzyloksy-4-metylpentanoyl)tetrahydrofuro-[3,2-c]pyrazol-6-on
En sjette eksempelforbindelse med formel (I), forbindelse (6) , hvor R<1>er H, Pi er metylen, Q er NH, Z er svovel, Y er 4-metylpentyl, (X)0er null, (W)ner oksygen, (V)mer metylen, og U er fenyl, er således navngitt:
( 3aR, 6aR)-4-(2S-benzyloksy-4-metylpentanoyl)tetrahydrotieno-[3,2-c]pyrazol-6-on
En sjuende eksempelforbindelse med formel (I), forbindelse (7) , hvor R<1>er H, Pi er metylen, Q er NH, Z er metylen, Y er 4-metylpentyl, (X)0er null, (W)ner oksygen, (V)mer metylen, og U er fenyl, er således navngitt:
( 3aR,6aS)-1-(2S-benzyloksy-4-metylpentanoyl)heksahydrosyklo-pentapyrazol-6-on
En åttende eksempelforbindelse med formel (I), forbindelse (8) , hvor R<1>er H, Pi er metylen, Q er NH, Z er NH, Y er 4-metylpentyl, (X)Q er null, (W)ner oksygen, (V)mer metylen, og U er fenyl, er således navngitt:
( 3aR,6aS)-1-(2S-benzyloksy-4-metylpentanoyl)heksahydropyrrolo-[3,2-c]pyrazol-6-on
En eksempelforbindelse med formel (II), forbindelse (9), hvor R<1>er H, Pxer metylen, P2er metylen, Q er metylen, Z er oksygen, Y er 4-metylpentyl, (X)Q er null, (W)ner oksygen, (V)mer metylen, og U er fenyl, er således navngitt:
( 3aS, laR )-4-(2S-benzyloksy-4-metylpentanoyl)heksahydrofuro-[3, 2- b]pyridin-3-on
En andre eksempelforbindelse med formel (II), forbindelse (10) , hvor R<1>er H, Pi er metylen, P2er metylen, Q er metylen, Z er svovel, Y er 4-metylpentyl, (X)0 er null, (W)ner oksygen, (V)mer metylen, og U er fenyl, er således navngitt:
( 3aR, laR)- A-(2S-benzyloksy-4-metylpentanoyl)heksahydrotieno-[3, 2- b]pyridin-3-on
En tredje eksempelforbindelse med formel (II), forbindelse (11) , hvor R<1>er H, Pi er metylen, P2er metylen, Q er metylen, Z er metylen, Y er 4-metylpentyl, (X)0 er null, (W)ner oksygen, (V)mer metylen, og U er fenyl, er således navngitt:
(4aS,7aS)-1-(2S-benzyloksy-4-metylpentanoyl)oktahydrosyklopenta-[jb] pyridin-7-on
En fjerde eksempelforbindelse med formel (II), forbindelse (12), hvor R<1>er H, Pi er metylen, P2er metylen, Q er metylen, Z er NH, Y er 4-metylpentyl, (X)Qer null, (W)ner oksygen, (V)mer metylen, og U er fenyl, er således navngitt:
( 3aS, laR )-4-(2S-benzyloksy-4-metylpentanoyl)oktahydropyrrolo-[3, 2-Jb]pyridin-3-on
En femte eksempelforbindelse med formel (II), forbindelse (13), hvor R<1>er H, Pi er metylen, P2er metylen, Q er NH, Z er oksygen, Y er 4-metylpentyl, (X)0er null, (W)ner oksygen, (V)mer metylen, og U er fenyl, er således navngitt:
(4aJ?, 7aS) -4- (2S-benzyloksy-4-metylpentanoyl) heksahydrof uro-[3,2-c]pyridazin-7-on
En sjette eksempelforbindelse med formel (II), forbindelse (14) , hvor R<1>er H, Pi er metylen, P2er metylen, Q er NH, Z er svovel, Y er 4-metylpentyl, (X)0er null, (W)ner oksygen, (V)mer metylen, og U er fenyl, er således navngitt:
(4aÆ, 7ai?) -4- (2S-benzyloksy-4-metylpentanoyl) heksahydrofuro-[3,2-c]pyridazin-7-on
En sjuende eksempelforbindelse med formel (II), forbindelse (15), hvor R<1>er H, Pi er metylen, P2er metylen, Q er NH, Z er metylen, Y er 4-metylpentyl, (X)Q er null, (W)ner oksygen, (V)mer metylen, og U er fenyl, er således navngitt:
(4aJ?, 7aS) -4- (2S-benzyloksy-4-metylpentanoyl) oktahydrosyklopenta-[c]pyridazin-7-on
En åttende eksempelforbindelse med formel (II), forbindelse (16), hvor R<1>er H, Pi er metylen, P2er metylen, Q er NH, Z er NH, Y er 4-metylpentyl, (X)D er null, (W)ner oksygen, (V)mer metylen, og U er fenyl, er således navngitt:
(4aÆ,7aS)-4-(2S-benzyloksy-4-metylpentanoyl)oktahydropyrrolo-[3,2-c]pyridazin-7-on
Forbindelser ifølge oppfinnelsen omfatter, men er ikke begrenset til, de følgende eksempler som er (3aS, 6aR)-isomeren med den generelle formel (I), hvor Z = "0", og R<1>= "H", og omfatter også ekvivalentanalogene inkludert i den fullstendige definisjon for Z ogR<1>: N- [1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]benzamid
4-tert.-butyl-N-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrof uro [3,2-b]pyrroi-4-yl)etyl]benzamid
N-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-4-trifluormetoksybenzamid
4-dimetylamino-N-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-yl)etyl]benzamid
N-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3, 2- b]pyrroi-4-yl)etyl]-4-isopropylbenzamid
4-difluormetoksy-N-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-yl)etyl]benzamid
N-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3, 2- b]pyrrol-4-yl)etyl]-4-trifluormetylbenzamid
4-brom-N-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrof uro [3, 2- b]pyrroi-4-yl)etyl]benzamid
3-brom-N-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-yl)etyl]benzamid
N-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3, 2- b] pyrrol-4-yl) etyl] -4-vinylbenzamid
naftalen-2-karboksylsyre-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
naftalen-l-karboksylsyre-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2- (3-oksoheksahydrofuro [3, 2- b] pyrrol-4-yl) etyl] amid kinolin-6-karboksylsyre-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrof uro [3, 2- b] pyrrol-4-yl) etyl] amid benzo [£>] tiofen-2-karboksylsyre- [1- (4-hydroksybenzyl) -2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
benzo [jb] tiofen-3-karboksylsyre- [1- (4-hydroksybenzyl) -2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
benzotiazol-5-karboksylsyre-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-yl)etyl]amid bifenyl-4-karboksylsyre-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
N-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-4-fenoksybenzamid
N-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3, 2- b]pyrrol-4-yl)etyl]-3-fenoksybenzamid
N- [1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3, 2- b]pyrrol-4-yl)etyl]-4-imidazol-l-ylbenzaraid
N-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-4-tiofen-2-ylbenzamid
N- [1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3, 2-jb]pyrrol-4-yl) etyl] -4-oksazol-5-ylbenzamid
N-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3, 2-jb]pyrrol-4-yl) etyl] -4- [1, 2, 3] tiadiazol-5-ylbenzamid
N-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3, 2- b]pyrrol-4-yl)etyl]-4-pyrazol-l-ylbenzamid
N-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3, 2- b]pyrrol-4-yl)etyl]-5-tiofen-2-ylnikotinamid
N-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3, 2-jb] pyrrol-4-yl) etyl] -6-f enylnikotinamid
2-fenyltiazol-4-karboksylsyre-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2- (3-oksoheksahydrofuro [3, 2-Jb] pyrrol-4-yl) etyl] amid
2-pyridin-3-yltiazol-4-karboksylsyre-[1-(4-hydroksybenzyl) -2-okso-2- (3-oksoheksahydrofuro [3, 2- b]pyrrol-4-yl) -etyl] - amid
5-fenyltiofen-2-karboksylsyre-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2- (3-oksoheksahydrofuro [3, 2-jb] pyrrol-4-yl) etyl] amid
5-pyridin-3-yltiofen-2-karboksylsyre-[1-(4-hydroksybenzyl) -2-okso-2- (3-oksoheksahydrofuro [3, 2-jb] pyrrol-4-yl) etyl] - amid
2-metyl-5-fenylfuran-3-karboksylsyre-[1-(4-hydroksybenzyl) -2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-yl)etyl]-amid
4-fenyltiofen-2-karboksylsyre-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
4-pyridin-3-yltiofen-2-karboksylsyre-[1-(4-hydroksybenzyl) -2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-yl)etyl]-amid
2-tiofen-2-yltiazol-4-karboksylsyre-[1-(4-hydroksybenzyl) -2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-yl)etyl]-amid
2-metyl-5-(pyrrolidin-l-sulfonyl)furan-3-karboksylsyre-[1- (4-hydroksybenzyl) -2-okso-2- (3-oksoheksahydrofuro [3, 2- b] - pyrrol-4-yl)etyl]amid
3- fenylpyrrol-l-karboksylsyre-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2- (3-oksoheksahydrofuro [3, 2-jb] pyrrol-4-yl) etyl] amid
N-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-karbonyl)butyl]benzamid
4- tert.-butyl-N-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro-[3, 2-b]pyrrol-4-karbonyl)butyl]benzamid
N-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-karbonyl)butyl]-4-trifluormetoksybenzamid
4-dimetylamino-N-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro-[3, 2- b]pyrrol-4-karbonyl)butyl]benzamid
4-isopropyl-N-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro-[3, 2- b]pyrrol-4-karbonyl)butyl]benzamid
4-difluormetoksy-N-[3-metyl-[1-(3-oksoheksahydrofuro-[3, 2-jb] pyrrol-4-karbonyl) butyl] benzamid
N-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-karbonyl)butyl]-4-trifluormetylbenzamid
4-brom-N-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-karbonyl)butyl]benzamid
3-brom-N- [3-metyl- [1- (3-oksoheksahydrof uro [ 3, 2- b] - pyrrol-4-karbonyl)butyl]benzamid
N-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-karbonyl)butyl]-4-vinylbenzamid
naftalen-2-karboksylsyre-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro [3, 2- b]pyrrol-4-karbonyl)butyl]amid
naftalen-l-karboksylsyre-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro [3, 2- b]pyrrol-4-karbonyl)butyl]amid
kinolin-6-karboksylsyre-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro [3, 2- b]pyrrol-4-karbonyl)butyl]amid
benzo [ b] tiof en-2-karboksylsyre- [3-metyl-l- (3-oksoheksahydrofuro [3, 2-b]pyrrol-4-karbonyl)butyl]amid
benzo[ b]tiofen-3-karboksylsyre-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro [3, 2-jb] pyrrol-4-karbonyl) butyl] amid
benzotiazol-5-karboksylsyre-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro [3, 2-jb] pyrrol-4-karbonyl) butyl] amid
bifenyl-4-karboksylsyre-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-karbonyl)butyl]amid
N-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-karbonyl)butyl]-4-fenoksybenzamid
N-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-karbonyl)butyl]-3-fenoksybenzamid
4- imidazol-[1-yl-N-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro-[3, 2- b]pyrrol-4-karbonyl)butyl]benzamid
N-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-karbonyl)butyl]-4-tiofen-2-ylbenzamid
N-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrroi-4-karbonyl)butyl]-4-oksazol-5-ylbenzamid
N-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-karbonyl)butyl]-4-[1,2,3]tiadiazol-4-ylbenzamid
N-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-karbonyl)butyl]-4-pyrazol-l-ylbenzamid
N-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrroi-4-karbonyl)butyl]-5-tiofen-2-ylnikotinamid
N-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-karbonyl)butyl]-6-fenylnikotinamid
2-fenyltiazol-4-karboksylsyre-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro [3, 2- b]pyrrol-4-karbonyl)butyl]amid
2-pyridin-3-yltiazol-4-karboksylsyre-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-karbonyl)butyl]amid
5- fenyltiofen-2-karboksylsyre-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro [3, 2- b]pyrrol-4-karbonyl)butyl]amid
5-pyridin-3-yltiofen-2-karboksylsyre-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro [3, 2- b] pyrrol-4-karbonyl) butyl] amid
2-metyl-5-fenylfuran-3-karboksylsyre-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-karbonyl)butylamid
4-fenyltiofen-2-karboksylsyre-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro [3, 2- b]pyrrol-4-karbonyl)butyl]amid
4-pyridin-3-yltiofen-2-karboksylsyre-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-karbonyl)butyl]amid
2-tiofen-2-yltiazol-4-karboksylsyre-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrof uro [3, 2-b]pyrrol-4-karbonyl)butyl]amid 2- metyl-5-(pyrrolidin-l-sulfonyl)furan-3-karboksylsyre-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrroi-4-karbonyl)butyl]-amid
3- fenylpyrrol-l-karboksylsyre-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro [3, 2- b]pyrrol-4-karbonyl)butyl]amid
N-[1-(3-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]benzamid
4-tert.-butyl-N-[1-(3-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]benzamid
N-[1-(3-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-4-trifluormetoksybenzamid
4-dimetylamino-N-[1-(3-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]benzamid
N-[1-(3-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-4-isopropylbenzamid
4-difluormetoksy-N-[1-(3-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]benzamid
N-[1-(3-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-4-trifluormetylbenzamid
4-brom-N-[1-(3-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]benzamid
3-brom-N-[1-(3-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]benzamid
N-[1-(3-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3, 2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-4-vinylbenzamid
naftalen-2-karboksylsyre-[1-(3-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrroi-4-yl)etyl]amid
naftalen-l-karboksylsyre-[1-(3-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid kinolin-6-karboksylsyre-[1-(3-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
benzo[b]tiofen-2-karboksylsyre-[1-(3-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrroi-4-yl)etyl]amid
benzo[b]tiofen-3-karboksylsyre-[1-(3-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
benzotiazol-5-karboksylsyre-[1-(3-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid bifenyl-4-karboksylsyre-[1-(3-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
N-[1-(3-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-4-fenoksybenzamid
N-[1-(3-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-3-fenoksybenzamid
N-[1-(3-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-4-imidazol-l-ylbenzamid
N- [1- (3-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3, 2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-4-tiofen-2-ylbenzamid
N-[1-(3-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-4-oksazol-5-ylbenzamid
N-[1-(3-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3, 2- b]pyrrol-4-yl)etyl]-4-[1,2,3]tiadiazol-5-ylbenzamid
N-[1-(3-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3, 2- b]pyrrol-4-yl)etyl]-4-pyrazol-l-ylbenzamid
N-[1-(3-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3, 2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-5-tiofen-2-ylnikotinamid
N-[1- (3-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-6-fenylnikotinamid
2-fenyltiazol-4-karboksylsyre-[1-(3-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
2-pyridin-3-yltiazol-4-karboksylsyre-[1-(3-hydroksybenzyl) -2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-amid
5-fenyltiofen-2-karboksylsyre-[1-(3-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
5-pyridin-3-yltiofen-2-karboksylsyre-[1-(3-hydroksybenzyl) -2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrroi-4-yl)etyl]-amid
2-metyl-5-fenylfuran-3-karboksylsyre-[1-(3-hydroksybenzyl) -2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-amid
4-fenyltiofen-2-karboksylsyre-[1-(3-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
4-pyridin-3-yltiofen-2-karboksylsyre-[1-(3-hydroksybenzyl) -2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-amid
2-tiofen-2-yltiazol-4-karboksylsyre-[1-(3-hydroksybenzyl) -2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-amid
2- metyl-5-(pyrrolidin-l-sulfonyl)furan-3-karboksylsyre-[1-(3-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]-pyrrol-4-yl)etyl]amid
3- fenylpyrrol-l-karboksylsyre-[1-(3-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
N-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)-1-pyridin-4-ylmetyletyl]benzamid
4-tert. -butyl-N- [2-okso-2- (3-oksoheksahydrofuro [3, 2-b] - pyrrol-4-yl)-l-pyridin-4-ylmetyletyl]benzamid
N-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-yl)-1-pyridin-4-ylmetyletyl]-4-trifluormetoksybenzamid 4-dimetylamino-N-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3, 2- b]pyrrol-4-yl)-1-pyridin-4-ylmetyletyl]benzamid
N-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)-1-pyridin-4-ylmetyletyl]-4-isopropylbenzamid 4-difluormetoksy-N-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)-l-pyridin-4-ylmetyletyl]benzamid N-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrroi-4-yl)-1-pyridin-4-ylmetyletyl]-4-trifluormetylbenzamid
4-brom-N-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)-l-pyridin-4-ylmetyletyl]benzamid
3-brom-N-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)-l-pyridin-4-ylmetyletyl]benzamid
N-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)-1-pyridin-4-ylmetyletyl]-4-vinylbenzamid
naftalen-2-karboksylsyre-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-yl)-l-pyridin-4-ylmetyletyl]amid
naftalen-l-karboksylsyre-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-yl)-l-pyridin-4-ylmetyletyl]amid
kinolin-6-karboksylsyre-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-yl)-l-pyridin-4-ylmetyletyl]amid
benzo[b]tiofen-2-karboksylsyre-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3, 2-b]pyrrol-4-yl)-l-pyridin-4-ylmetyletyl]amid
benzo[b]tiofen-3-karboksylsyre-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-yl)-l-pyridin-4-ylmetyletyl]amid
benzotiazol-5-karboksylsyre-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-yl)-l-pyridin-4-ylmetyletyl]amid
bifenyl-4-karboksylsyre-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-yl)-l-pyridin-4-ylmetyletyl]amid
N-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)-1-pyridin-4-ylmetyletyl]-4-fenoksybenzamid
N-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)-1-pyridin-4-ylmetyletyl]-3-fenoksybenzamid
N-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)-1-pyridin-4-yImetyletyl]-4-imidazol-l-ylbenzamid
N-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-yl)-1-pyridin-4-ylmetyletyl]-4-tiofen-2-ylbenzamid
N- [2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-yl)-1-pyridin-4-ylmetyletyl]-4-oksazol-5-ylbenzamid
N- [2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-yl)-1-pyridin-4-ylmetyletyl]-4-[1,2,3]tiadiazol-5-ylbenzamid
N- [2-okso-2- (3-oksoheksahydrofuro [3, 2-b] pyrrol-4-yl) -1-pyridin-4-ylmetyletyl]-4-pyrazol-l-ylbenzamid
N-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-yl)-1-pyridin-4-ylmetyletyl]-5-tiofen-2-ylnikotinamid
N-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)-1-pyridin-4-ylmetyletyl]-6-fenylnikotinamid
2-fenyltiazol-4-karboksylsyre-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-yl)-l-pyridin-4-ylmetyletyl]amid
2-pyridin-3-yltiazol-4-karboksylsyre-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3, 2- b]pyrrol-4-yl)-l-pyridin-4-ylmetyletyl]amid
5-fenyltiofen-2-karboksylsyre-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3, 2- b]pyrrol-4-yl)-l-pyridin-4-ylmetyletyl]amid
5-pyridin-3-yltiofen-2-karboksylsyre-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3, 2- b]pyrrol-4-yl)-l-pyridin-4-ylmetyletyl]amid
2-metyl-5-fenylfuran-3-karboksylsyre-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrof uro [3, 2-b]pyrrol-4-yl)-l-pyridin-4-ylmetyletyl)amid
4-fenyltiofen-2-karboksylsyre-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-yl)-l-pyridin-4-ylmetyletyl]amid
4-pyridin-3-yltiofen-2-karboksylsyre-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-yl)-l-pyridin-4-ylmetyletyl]amid
2-tiofen-2-yltiazol-4-karboksylsyre-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-yl)-l-pyridin-4-ylmetyletyl]amid 2- metyl-5-(pyrrolidin-l-sulfonyl)furan-3-karboksylsyre-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)-l-pyridin-4-ylmetyletyl]amid
3- fenylpyrrol-l-karboksylsyre-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-yl)-l-pyridin-4-ylmetyletyl]amid
N-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)-1-pyridin-3-ylmetyletyl]benzamid
4- tert.-t-butyl-N-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)-l-pyridin-3-ylmetyletyl]benzamid
N-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)-1-pyridin-3-ylmetyletyl]-4-trifluormetoksybenzamid 4-dimetylamino-N-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3, 2- b]pyrrol-4-yl)-l-pyridin-3-ylmetyletyl]benzamid
N- [2-okso-2- (3-oksoheksahydrofuro [3, 2-b] pyrrol-4-yl) -1-pyridin-3-ylmetyletyl]-4-isopropylbenzamid 4-difluormetoksy-N-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3, 2- b]pyrrol-4-yl)-l-pyridin-3-ylmetyletyl]benzamid
N-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)-1-pyridin-3-ylmetyletyl]-4-trifluormetylbenzamid
4-brom-N-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)-l-pyridin-3-ylmetyletyl]benzamid
3-brom-N-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)-l-pyridin-3-ylmetyletyl]benzamid
N-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)-1-pyridin-3-ylmetyletyl]-4-vinylbenzamid
naftalen-2-karboksylsyre-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-yl)-l-pyridin-3-yImetyletyl]amid
naftalen-l-karboksylsyre-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-yl)-l-pyridin-3-ylmetyletyl]amid
kinolin-6-karboksylsyre-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-yl)-l-pyridin-3-ylmetyletyl]amid
benzo[b]tiofen-2-karboksylsyre-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3, 2-b]pyrrol-4-yl)-l-pyridin-3-ylmetyletyl]amid
benzo[b]tiofen-3-karboksylsyre-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3, 2-b]pyrrol-4-yl)-l-pyridin-3-ylmetyletyl]amid
benzotiazol-5-karboksylsyre-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-yl)-l-pyridin-3-ylmetyletyl]amid
bifenyl-4-karboksylsyre-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-yl)-l-pyridin-3-ylmetyletyl]amid
N-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)-1-pyridin-3-ylmetyletyl]-4-fenoksybenzamid
N-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)-1-pyridin-3-ylmetyletyl]-3-fenoksybenzamid
N-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)-1-pyridin-3-ylmetyletyl]-4-imidazol-l-ylbenzamid
N-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)-1-pyridin-3-ylmetyletyl]-4-tiofen-2-ylbenzamid
N-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)-1-pyridin-3-ylmetyletyl]-4-oksazol-5-ylbenzamid
N-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-yl)-1-pyridin-3-ylmetyletyl]-4-[1,2,3]tiadiazol-5-ylbenzamid
N-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)-1-pyridin-3-ylmetyletyl]-4-pyrazol-l-ylbenzamid
N-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)-1-pyridin-3-ylmetyletyl]-5-tiofen-2-ylnikotinamid
N-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrroi-4-yl)-1-pyridin-3-ylmetyletyl]-6-fenylnikotinamid
2-fenyltiazol-4-karboksylsyre-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-yl)-l-pyridin-3-ylmetyletyl]amid
2-pyridin-3-yltiazol-4-karboksylsyre-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-yl)-l-pyridin-3-ylmetyletyl]amid
5-fenyltiofen-2-karboksylsyre-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-yl)-l-pyridin-3-ylmetyletyl]amid
5-pyridin-3-yltiofen-2-karboksylsyre-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-yl)-l-pyridin-3-ylmetyletyl]amid
2-metyl-5-fenylfuran-3-karboksylsyre-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-yl)-l-pyridin-3-ylmetyletyl]amid
4-fenyltiofen-2-karboksylsyre-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-yl)-l-pyridin-3-ylmetyletyl]amid
4-pyridin-3-yltiofen-2-karboksylsyre-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrof uro [3, 2-b]pyrrol-4-yl)-l-pyridin-3-ylmetyletyl]amid
2-tiofen-2-yltiazol-4-karboksylsyre-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrroi-4-yl)-1-pyridin-3-yImetyletyl]amid 2- metyl-5-(pyrrolidin-l-sulfonyl)furan-3-karboksylsyre-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)-l-pyridin-3-ylmetyletyl]amid
3- fenylpyrrol-l-karboksylsyre-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-yl)-l-pyridin-3-ylmetyletyl]amid
N-[1-(4-brombenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]benzamid
4- tert.-butyl-N-[1-(4-brombenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3, 2-b]pyrrol-4-yl)etyl]benzamid
N-[1-(4-brombenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-4-trifluormetoksybenzamid
4-dimetylamino-N-[1-(4-brombenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]benzamid
N-[1-(4-brombenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrroi-4-yl)etyl]-4-isopropylbenzamid 4-difluormetoksy-N-[1-(4-brombenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]benzamid
N-[1-(4-brombenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-4-trifluormetylbenzamid
4-brom N-[1-(4-brombenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]benzamid
3-brom-N-[1-(4-brombenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]benzamid
N-[1-(4-brombenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-4-vinylbenzamid
naftalen-2-karboksylsyre-[1-(4-brombenzyl)-2-okso-2- (3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
naftalen-l-karboksylsyre-[1-(4-brombenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
kinolin-6-karboksylsyre-[1-(4-brombenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
benzo[b]tiofen-2-karboksylsyre-[1-(4-brombenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
benzo[b]tiofen-3-karboksylsyre-[1-(4 brombenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid benzotiazol-5-karboksylsyre-[1-(4-brombenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
bifenyl-4-karboksylsyre-[1-(4-brombenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
N-[1-(4-brombenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-4-fenoksybenzamid
N-[1-(4-brombenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-3-fenoksybenzamid
N-[1-(4-brombenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3, 2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-4-imidazol-l-ylbenzamid
N-[1-(4-brombenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-4-tiofen-2-ylbenzamid
N-[1-(4-brombenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-4-oksazol-5-ylbenzamid
N-[1-(4-brombenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-4-[1,2,3]tiadiazol-5-ylbenzamid
N-[1-(4-brombenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-4-pyrazol-l-ylbenzamid
N-[1-(4-brombenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3, 2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-5-tiofen-2-ylnikotinamid
N-[1-(4-brombenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-6-fenylnikotinamid
2-fenyltiazol-4-karboksylsyre-[1-(4-brombenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
2-pyridin-3-yltiazol-4-karboksylsyre-[1-(4-brombenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
5-fenyltiofen-2-karboksylsyre-[1-(4-brombenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
5-pyridin-3-yltiofen-2-karboksylsyre-[1-(4-brombenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
2-metyl-5-fenylfuran-3-karboksylsyre-[1-(4-brombenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
4-fenyltiofen-2-karboksylsyre-[1-(4-brombenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
4-pyridin-3-yltiofen-2-karboksylsyre-[1-(4-brombenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
2-tiofen-2-yltiazol-4-karboksylsyre-[1-(4-brombenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid 2- metyl-5-(pyrrolidin-l-sulfonyl)furan-3-karboksylsyre-[1-(4-brombenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
3- fenylpyrrol-l-karboksylsyre-[1-(4-brombenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
N-[1-(4-fluorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3, 2-b]pyrrol-4-yl)etyl]benzamid
4- tert.-butyl-N-[1-(4-fluorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]benzamid
N- [1- (4-fluorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-4-trifluormetoksybenzamid
4-dimetylamino-N-[1-(4-fluorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]benzamid
N- [1-(4-fluorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-4-isopropylbenzamid
4-difluormetoksy-N-[1-(4-fluorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrroi-4-yl)etyl]benzamid
N-[1-(4-fluorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-4-trifluormetylbenzamid
4-brom-N-[1-(4-fluorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]benzamid
3-brom-N-[1-(4-fluorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrroi-4-yl)etyl]benzamid
N-[1-(4-fluorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3, 2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-4-vinylbenzamid
naftalen-2-karboksylsyre-[1-(4-fluorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
naftalen-l-karboksylsyre-[1-(4-fluorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
kinolin-6-karboksylsyre-[1-(4-fluorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
benzo[b]tiofen-2-karboksylsyre-[1-(4-fluorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
benzo[b]tiofen-3-karboksylsyre-[1-(4-fluorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
benzotiazol-5-karboksylsyre-[1-(4-fluorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
bifenyl-4-karboksylsyre-[1-(4-fluorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
N-[1-(4-fluorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-4-fenoksybenzamid
N-[1-(4-fluorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-3-fenoksybenzamid
N-[1-(4-fluorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-4-imidazol-l-ylbenzamid
N-[1-(4-fluorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrroi-4-yl)etyl]-4-tiofen-2-ylbenzamid
N-[1-(4-fluorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-4-oksazol-5-ylbenzamid
N-[1-(4-fluorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-4-[1,2,3]tiadiazol-5-ylbenzamid
N-[1-(4-fluorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3, 2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-4-pyrazol-l-ylbenzamid
N-[1-(4-fluorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-5-tiofen-2-ylnikotinamid
N-[1-(4-fluorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-6-fenylnikotinamid
2-fenyltiazol-4-karboksylsyre-[1-(4-fluorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
2-pyridin-3-yltiazol-4-karboksylsyre-[1-(4-fluor-benzyl) -2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-yl)etyl]-amid
5-fenyltiofen-2-karboksylsyre-[1-(4-fluorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
5-pyridin-3-yltiofen-2-karboksylsyre-[1-(4-fluor-benzyl) -2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-yl)etyl]-amid
2-metyl-5-fenylfuran-3-karboksylsyre-[1-(4-fluor-benzyl) -2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-yl)etyl]-amid
4-fenyltiofen-2-karboksylsyre-[1-(4-fluorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
4-pyridin-3-yltiofen-2-karboksylsyre-[1-(4-fluor-benzyl) -2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-yl)etyl]-amid
2-tiofen-2-yltiazol-4-karboksylsyre-[1-(4-fluorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
2- metyl-5-(pyrrolidin-l-sulfonyl)furan-3-karboksylsyre-[1-(4-fluorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
3- fenylpyrrol-l-karboksylsyre-[1-(4-fluorbenzyl)-2-okso-2- (3-oksoheksahydrof uro [3, 2-jb] pyrrol-4-yl) etyl] amid
N-[1-(4-klorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]benzamid
4- tert.-butyl-N-[1-(4-klorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrof uro [3, 2- b]pyrrol-4-yl)etyl]benzamid
N-[1-(4-klorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3, 2- b]pyrrol-4-yl)etyl]-4-trifluormetoksybenzamid 4-dimetylamino-N-[1-(4-klorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3, 2-jb]pyrrol-4-yl) etyl]benzamid
N-[1-(4-klorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-4-isopropylbenzamid
4-difluormetoksy-N-[1-(4-klorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3, 2-jb] py r roi-4-yl) etyl] benzamid
N-[1-(4-klorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrroi-4-yl)etyl]-4-trifluormetylbenzamid
4-brom-N-[1-(4-klorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3, 2-jb] pyrrol-4-yl) etyl] benzamid
3-brom-N-[1-(4-klorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3, 2- b]pyrrol-4-yl)etyl]benzamid
N-[1- (4-klorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrro1-4-yl)etyl]-4-vinylbenzamid
naftalen-2-karboksylsyre-[1-(4-klorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
naftalen-l-karboksylsyre-[1-(4-klorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
kinolin-6-karboksylsyre-[1-(4-klorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
benzo[b]tiofen-2-karboksylsyre-[1-(4-klorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
benzo[b]tiofen-3-karboksylsyre-[1-(4-klorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid benzotiazol-5-karboksylsyre-[1-(4-klorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
bifenyl-4-karboksylsyre-[1-(4-klorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
N-[1-(4-klorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-4-fenoksybenzamid
N-[1-(4-klorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-3-fenoksybenzamid
N- [1-(4-klorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-4-imidazol-l-ylbenzamid
N-[1-(4-klorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3, 2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-4-tiofen-2-ylbenzamid
N-[1-(4-klorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-4-oksazol-5-ylbenzamid
N- [1-(4-klorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-4-[1,2,3]tiadiazol-5-ylbenzamid
N-[1-(4-klorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-4-pyrazol-l-ylbenzamid
N-[1-(4-klorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-5-tiofen-2-ylnikotinamid
N-[1-(4-klorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-6-fenylnikotinamid
2-fenyltiazol-4-karboksylsyre-[1-(4-klorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
2-pyridin-3-yltiazol-4-karboksylsyre-[1-(4-klorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
5-fenyltiofen-2-karboksylsyre-[1-(4-klorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
5-pyridin-3-yltiofen-2-karboksylsyre-[1-(4-klorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
2-metyl-5-fenylfuran-3-karboksylsyre-[1-(4-klorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
4-fenyltiofen-2-karboksylsyre-[1-(4-klorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrroi-4-yl)etyl]amid
4-pyridin-3-yltiofen-2-karboksylsyre-[1-(4-klorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrroi-4-yl)etyl]amid
2-tiofen-2-yltiazol-4-karboksylsyre-[1-(4-klorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
2- metyl-5-(pyrrolidin-l-sulfonyl)furan-3-karboksylsyre-[1-(4-klorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
3- fenylpyrrol-l-karboksylsyre-[1-(4-klorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
N-[1-(3,4-diklorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3, 2-b]pyrrol-4-yl)etyl]benzamid
4- tert.-butyl-N-[1-(3,4-diklorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrof uro [3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]benzamid
N-[1-(3,4-diklorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3, 2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-4-trifluormetoksybenzamid
4-dimetylamino-N-[1-(3,4-diklorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]benzamid
N-[1-(3,4-diklorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3, 2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-4-isopropylbenzamid
4-difluormetoksy-N-[1-(3,4-diklorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]benzamid
N-[1-(3,4-diklorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-4-trifluormetylbenzamid
4-brom-N-[1-(3,4-diklorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]benzamid
3-brom-N-[1-(3,4-diklorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b] pyrrol-4-yl)etyl]benzamid
N-[1-(3,4-diklorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-4-vinylbenzamid
naftalen-2-karboksylsyre-[1-(3,4-diklorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
naftalen-l-karboksylsyre-[1-(3,4-diklorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-yl)etyl]amid kinolin-6-karboksylsyre-[1-(3,4-diklorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
benzo[b]tiofen-2-karboksylsyre-[1-(3,4-diklorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
benzo[b]tiofen-3-karboksylsyre-[1-(3,4-diklorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
benzotiazol-5-karboksylsyre-[1-(3,4-diklorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid bifenyl-4-karboksylsyre-[1-(3,4-diklorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
N-[1-(3,4-diklorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-4-fenoksybenzamid
N- [1-(3,4-diklorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-3-fenoksybenzamid
N-[1-(3,4-diklorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-4-imidazol-l-ylbenzamid
N-[1-(3,4-diklorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-4-tiofen-2-ylbenzamid
N-[1-(3,4-diklorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-4-oksazol-5-ylbenzamid
N-[1-(3,4-diklorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-4-[1,2,3]tiadiazol-5-ylbenzamid
N- [1-(3,4-diklorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-4-pyrazol-l-ylbenzamid
N-[1-(3,4-diklorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-5-tiofen-2-ylnikotinamid
N-[1-(3,4-diklorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3, 2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-6-fenylnikotinamid
2-fenyltiazol-4-karboksylsyre-[1-(3,4-diklorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
2-pyridin-3-yltiazol-4-karboksylsyre-[1-(3,4-diklor-benzyl) -2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-amid
5-fenyltiofen-2-karboksylsyre-[1-(3,4-diklorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
5-pyridin-3-yltiofen-2-karboksylsyre-[1-(3,4-diklor-benzyl) -2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-amid
2-metyl-5-fenylfuran-3-karboksylsyre-[1-(3,4-diklor-benzyl) -2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-amid
4-fenyltiofen-2-karboksylsyre-[1-(3,4-diklorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
4-pyridin-3-yltiofen-2-karboksylsyre-[1-(3,4-diklor-benzyl) -2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-amid
2-tiofen-2-yltiazol-4-karboksylsyre-[1-(3,4-diklor-benzyl) -2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-amid
2- metyl-5-(pyrrolidin-l-sulfonyl)furan-3-karboksylsyre-[1-(3,4-diklorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]-pyrrol-4-yl)etyl]amid
3- fenylpyrrol-l-karboksylsyre-[1-(3,4-diklorbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
N-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)-1-tiofen-2-ylmetyletyl]benzamid
4- tert.-butyl-N-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]-pyrrol-4-yl)-1-tiofen-2-ylmetyletyl]benzamid
N-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)-1-tiofen-2-yImetyletyl]-4-trifluormetoksybenzamid 4-dimetylamino-N-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)-1-tiofen-2-yImetyletyl]benzamid
N-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)-1-tiofen-2-ylmetyletyl]-4-isopropylbenzamid
4-difluormetoksy-N-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrroi-4-yl)-1-tiofen-2-ylmetyletyl]benzamid
N-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)-1-tiofen-2-ylmetyletyl]-4-trifluormetylbenzamid
4-brom-N- [2-okso-2- (3-oksoheksahydrofuro [3, 2-jb] pyrrol-4-yl)-1-tiofen-2-ylmetyletyl]benzamid
3-brom-N- [2-okso-2- (3-oksoheksahydrofuro [3, 2-jb] pyrrol-4-yl)-1-tiofen-2-ylmetyletyl]benzamid
N-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)-1-tiofen-2-ylmetyletyl]-4-vinylbenzamid
naftalen-2-karboksylsyre-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3, 2- b]pyrrol-4-yl)-1-tiofen-2-ylmetyletyl]amid
naftalen-l-karboksylsyre-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3, 2- b]pyrrol-4-yl)-1-tiofen-2-ylmetyletyl]amid
kinolin-6-karboksylsyre-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3, 2- b]pyrrol-4-yl)-l-tiofen-2-ylmetyletyl]amid
benzo[ b]tiofen-2-karboksylsyre-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-yl)-1-tiofen-2-ylmetyletyl]amid
benzo[b]tiofen-3-karboksylsyre-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-yl)-1-tiofen-2-ylmetyletyl]amid
benzotiazol-5-karboksylsyre-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-yl)-1-tiofen-2-ylmetyletyl]amid
bifenyl-4-karboksylsyre-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-yl)-1-tiofen-2-ylmetyletyl]amid
N-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)-1-tiofen-2-ylmetyletyl]-4-fenoksybenzamid
N-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)-1-tiofen-2-yImetyletyl]-3-fenoksybenzamid
N-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)-1-tiofen-2-ylmetyletyl]-4-imidazol-l-ylbenzamid
N-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrroi-4-yl)-1-tiofen-2-ylmetyletyl]-4-tiofen-2-ylbenzamid
N-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)-1-tiofen-2-ylmetyletyl]-4-oksazol-5-ylbenzamid
N-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)-1-tiofen-2-ylmetyletyl]-4-[1,2,3]tiadiazol-5-ylbenzamid
N-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)-1-tiofen-2-ylmetyletyl]-4-pyrazol-l-ylbenzamid
N-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)-1-tiofen-2-ylmetyletyl]-5-tiofen-2-ylnikotinamid
N-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)-1-tiofen-2-ylmetyletyl]-6-fenylnikotinamid
2-fenyltiazol-4-karboksylsyre-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-yl)-1-tiofen-2-ylmetyletyl]amid
2-pyridin-3-yltiazol-4-karboksylsyre-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-yl)-1-tiofen-2-ylmetyletyl]amid
5-fenyltiofen-2-karboksylsyre-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3, 2-b]pyrrol-4-yl)-1-tiofen-2-ylmetyletyl]amid
5-pyridin-3-yltiofen-2-karboksylsyre-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-yl)-1-tiofen-2-ylmetyletyl]amid
2-metyl-5-fenylfuran-3-karboksylsyre-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrroi-4-yl)-1-tiofen-2-ylmetyletyl]amid
4-fenyltiofen-2-karboksylsyre-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3, 2-b]pyrrol-4-yl)-1-tiofen-2-ylmetyletyl]amid
4-pyridin-3-yltiofen-2-karboksylsyre-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-yl)-1-tiofen-2-ylmetyletyl]amid
2-tiofen-2-yltiazol-4-karboksylsyre-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-yl)-1-tiofen-2-ylmetyletyl]amid 2- metyl-5-(pyrrolidin-l-sulfonyl)furan-3-karboksylsyre-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)-l-tiofen-2-ylmetyletyl]amid
3- fenylpyrrol-l-karboksylsyre-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-yl)-1-tiofen-2-ylmetyletyl]amid
N-[1-(4-aminobenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]benzamid
4- tert.-butyl-N-[1-(4-aminobenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]benzamid
N-[1-(4-aminobenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrroi-4-yl)etyl]-4-trifluormetoksybenzamid 4-dimetylamino-N-[1-(4-aminobenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]benzamid
N-[1-(4-aminobenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-4-isopropylbenzamid
4-difluormetoksy-N-[1-(4-aminobenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b] pyrrol-4-yl)etyl]benzamid
N-[1-(4-aminobenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-4-trifluormetylbenzamid
4-brom-N-[1-(4-aminobenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3, 2-b]pyrrol-4-yl)etyl]benzamid
3-brom-N-[1-(4-aminobenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]benzamid
N-[1-(4-aminobenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-4-vinylbenzamid
naftalen-2-karboksylsyre-[1-(4-aminobenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
naftalen-l-karboksylsyre-[1-(4-aminobenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
kinolin-6-karboksylsyre-[1-(4-aminobenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
benzo[b]tiofen-2-karboksylsyre-[1-(4-aminobenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
benzo[b]tiofen-3-karboksylsyre-[1-(4-aminobenzyl) -2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
benzotiazol-5-karboksylsyre-[1-(4-aminobenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
bifenyl-4-karboksylsyre-[1-(4-aminobenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
N-[1-(4-aminobenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-4-fenoksybenzamid
N-[1-(4-aminobenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-3-fenoksybenzamid
N-[1-(4-aminobenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-4-imidazol-l-ylbenzamid
N-[1-(4-aminobenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3, 2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-4-tiofen-2-ylbenzamid
N-[1-(4-aminobenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3, 2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-4-oksazol-5-ylbenzamid
N-[1-(4-aminobenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3, 2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-4-[1,2,3]tiadiazol-5-ylbenzamid
N-[1-(4-aminobenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3, 2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-4-pyrazol-l-ylbenzamid
N-[1-(4-aminobenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-5-tiofen-2-ylnikotinamid
N-[1-(4-aminobenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-6-fenylnikotinamid
2-fenyltiazol-4-karboksylsyre-[1-(4-aminobenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
2-pyridin-3-yltiazol-4-karboksylsyre-[1-(4-amino-benzyl) -2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrroi-4-yl)etyl]-amid
5-fenyltiofen-2-karboksylsyre-[1-(4-aminobenzyl)-2-okso-2- (3-oksoheksahydrofuro [3, 2-b] py r roi-4-yl) etyl] amid
5-pyridin-3-yltiofen-2-karboksylsyre-[1-(4-amino-benzyl) -2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-amid
2-metyl-5-fenylfuran-3-karboksylsyre-[1-(4-amino-benzyl) -2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-amid
4-fenyltiofen-2-karboksylsyre-[1-(4-aminobenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
4-pyridin-3-yltiofen-2-karboksylsyre-[1-(4-amino-benzyl) -2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-amid
2-tiofen-2-yltiazol-4-karboksylsyre-[1-(4-aminobenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid 2- metyl-5-(pyrrolidin-l-sulfonyl)furan-3-karboksylsyre-[1-(4-aminobenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
3- fenylpyrrol-l-karboksylsyre-[1-(4-aminobenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
N-[l-benzyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]-pyrrol-4-yl)etyl]benzamid
4- tert.-butyl-N-[l-benzyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrroi-4-yl)etyl]benzamid
N-[l-benzyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]-pyrrol-4-yl)etyl]-4-trifluormetoksybenzamid
4-dimetylamino-N-[l-benzyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]benzamid
N-[l-benzyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]-pyrrol-4-yl)etyl]-4-isopropylbenzamid
4-difluormetoksy-N-[l-benzyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]benzamid
N-tl-benzyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]-pyrrol-4-yl)etyl]-4-trifluormetylbenzamid
4-brom-N-[l-benzyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]benzamid
3-brom-N-[l-benzyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrroi-4-yl)etyl]benzamid
N-[1-benzyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]-pyrrol-4-yl)etyl]-4-vinylbenzamid
naftalen-2-karboksylsyre-[l-benzyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrof uro [3, 2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
naftalen-l-karboksylsyre-[l-benzyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
kinolin-6-karboksylsyre-[l-benzyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b] pyrrol-4-yl)etyl]amid
benzo[b]tiofen-2-karboksylsyre-[l-benzyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
benzo[b]tiofen-3-karboksylsyre-[l-benzyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
benzotiazol-5-karboksylsyre-[l-benzyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrroi-4-yl)etyl]amid
bifenyl-4-karboksylsyre-[l-benzyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl] amid
N-[l-benzyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]-pyrrol-4-yl)etyl]-4-fenoksybenzamid
N-[l-benzyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]-pyrrol-4-yl)etyl]-3-fenoksybenzamid
N-[l-benzyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]-pyrrol-4-yl)etyl]-4-imidazol-l-ylbenzamid
N-[l-benzyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]-pyrrol-4-yl)etyl]-4-tiofen-2-ylbenzamid
N-[l-benzyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]-pyrrol-4-yl)etyl]-4-oksazol-5-ylbenzamid
N-[l-benzyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]-pyrrol-4-yl)etyl]-4-[1,2,3]tiadiazol-5-ylbenzamid
N-[l-benzyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]-pyrrol-4-yl)etyl]-4-pyrazol-l-yl-benzamid
N-[l-benzyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]-pyrrol-4-yl)etyl]-5-tiofen-2-ylnikotinamid
N-[l-benzyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]-pyrrol-4-yl)etyl]-6-fenylnikotinamid
2-fenyltiazol-4-karboksylsyre-[l-benzyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
2-pyridin-3-yltiazol-4-karboksylsyre-[1-benzyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrroi-4-yl)etyl]amid
5-fenyltiofen-2-karboksylsyre-[l-benzyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
5-pyridin-3-yltiofen-2-karboksylsyre-[l-benzyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
2-metyl-5-fenylfuran-3-karboksylsyre-[1-benzyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
4-fenyltiofen-2-karboksylsyre-[l-benzyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
4-pyridin-3-yltiofen-2-karboksylsyre-[1-benzyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid 2-tiofen-2-yltiazol-4-karboksylsyre-[1-benzyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
2- metyl-5-(pyrrolidin-l-sulfonyl)furan-3-karboksylsyre-[l-benzyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-yl)-etyl]amid
3- fenylpyrrol-l-karboksylsyre-[l-benzyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
4- [2-(4-tert.-butyl-benzylsulfanyl)-4-metyl-pentanoyl]-tetrahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-3-on
4-[2-(4-tert.-butylbenzylsulfanyl)-3-(4-hydroksyfenyl)-propionyl]tetrahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-3-on
2-isobutyl-l-(3-oksoheksahydrofuro[3,2 b]pyrrol-4-yl)-4-(3-fenylpyrrol-[1-yl)butan-1,4-dion
2-isobutyl- [1- (3-oksoheksahydrofuro [3, 2-jb] pyrrol-4-yl) - 4-(3-fenylpyrrolidin-l-yl)butan-1,4-dion
2-(4-hydroksybenzyl)-1-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]-pyrrol-4-yl)-4-(3-fenylpyrrol-l-yl)butan-1,4-dion
2-(4-hydroksybenzyl)-1-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]-pyrrol-4-yl)-4-(3-fenylpyrrolidin-l-yl)butan-1,4-dion
4-(1,3-dihydroisoindol-2-yl)-2-isobutyl-l-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-yl)butan-1, 4-dion
4-(1,3-dihydroisoindol-2-yl)-2-(4-hydroksybenzyl)-1-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)butan-1,4-dion
4-(3,4-dihydro-lH-isokinolin-2-yl)-2-isobutyl- [1-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)butan-1,4-dion
4-(3,4-dihydro-lH-isokinolin-2-yl)-2-(4-hydroksybenzyl) -1-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrroi-4-yl)butan-1,4-dion.
Ytterligere forbindelser ifølge oppfinnelsen omfatter, men er ikke begrenset til, de følgende eksempler som er
( 3aS, 7aJ?) - eller (3aiR, 7aS)-isomeren med den generelle formel (II), hvor Z = "0", og R<1>= "H", og omfatter også ekvivalentanalogene inkludert i den fullstendige definisjon for Z og R<1>: N-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyridin-4-yl)etyl]benzamid
4-tert.-butyl-N-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3, 2- b]pyridin-4-yl)etyl]benzamid
N-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3, 2- b]pyridin-4-yl)etyl]-4-trifluormetoksybenzamid
4-dimetylamino-N-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyridin-4-yl)etyl]benzamid
N-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3, 2- b]pyridin-4-yl)etyl]-4-isopropylbenzamid
4-difluormetoksy-N-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyridin-4-yl)etyl]benzamid
N-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3, 2- b]pyridin-4-yl)etyl]-4-trifluormetylbenzamid
4-brom-N-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3, 2- b]pyridin-4-yl)etyl]benzamid
3-brom-N-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyridin-4-yl)etyl]benzamid
N-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyridin-4-yl)etyl]-4-vinylbenzamid
naftalen-2-karboksylsyre-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyridin-4-yl)etyl]amid
naftalen-[1-karboksylsyre-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyridin-4-yl)etyl]amid
kinolin-6-karboksylsyre-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyridin-4-yl)etyl]amid
benzo[b]tiofen-2-karboksylsyre-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyridin-4-yl)etyl]amid
benzo[b]tiofen-3-karboksylsyre-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyridin-4-yl)etyl]amid
benzotiazol-5-karboksylsyre-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyridin-4-yl)etyl]amid bifenyl-4-karboksylsyre-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyridin-4-yl)etyl]amid
N-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyridin-4-yl)etyl]-4-fenoksybenzamid
N-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3, 2- b]pyridin-4-yl)etyl]-3-fenoksybenzamid
N- [1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3, 2-jb] pyridin-4-yl) etyl] -4-imidazol-l-ylbenzamid
N-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyridin-4-yl)etyl]-4-tiofen-2-ylbenzamid
N-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksa-hydro-furo[3, 2- b]pyridin-4-yl)etyl]-4-oksazol-5-ylbenzamid
N-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3, 2-b]pyridin-4-yl)etyl]-4-[1,2,3]tiadiazol-5-ylbenzamid
N-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyridin-4-yl)etyl]-4-pyrazol-l-ylbenzamid
N-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyridin-4-yl)etyl]-5-tiofen-2-ylnikotinamid
N-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyridin-4-yl)etyl]-6-fenylnikotinamid
2-fenyltiazol-4-karboksylsyre-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyridin-4-yl)etyl]amid
2-pyridin-3-yltiazol-4-karboksylsyre-[1-(4-hydroksybenzyl) -2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyridin-4-yl)etyl]-amid
5-fenyltiofen-2-karboksylsyre-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyridin-4-yl)etyl]amid
5-pyridin-3-yltiofen-2-karboksylsyre-[1-(4-hydroksybenzyl) -2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyridin-4-yl)etyl]-amid
2-metyl-5-fenylfuran-3-karboksylsyre-[1-(4-hydroksybenzyl) -2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyridin-4-yl)etyl]-amid
4-fenyltiofen-2-karboksylsyre-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyridin-4-yl)etyl]amid
4-pyridin-3-yltiofen-2-karboksylsyre-[1-(4-hydroksybenzyl) -2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyridin-4-yl)etyl]-amid
2-tiofen-2-yltiazol-4-karboksylsyre-[1-(4-hydroksybenzyl) -2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyridin-4-yl)etyl]-amid
2- metyl-5-(pyrrolidin-l-sulfonyl)furan-3-karboksylsyre-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]-pyridin-4-yl)etyl]amid
3- fenylpyrrol-l-karboksylsyre-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyridin-4-yl)etyl]amid
N-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyridin-4-karbonyl)butyl]benzamid
4- tert.-butyl-N-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyridin-4-karbonyl)butyl]benzamid
N-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2-b]pyridin-4-karbonyl)butyl]-4-trifluormetoksybenzamid
4-dimetylamino-N-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro-[3, 2-b]pyridin-4-karbonyl)butyl]benzamid
4-isopropyl-N-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]-pyridin-4-karbonyl)butyl]benzamid
4-difluormetoksy-N-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyridin-4-karbonyl)butyl]benzamid
N-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2-b]pyridin-4-karbonyl)butyl]-4-trifluormetylbenzamid
4-brom-N-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]-pyridin-4-karbonyl)butyl]benzamid
3-brom-N-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]-pyridin-4-karbonyl)butyl]benzamid
N-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyridin-4-karbonyl)butyl]-4-vinylbenzamid
naftalen-2-karboksylsyre-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyridin-4-karbonyl)butyl]amid
naftalen-[1-karboksylsyre-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyridin-4-karbonyl)butyl]amid
kinolin-6-karboksylsyre-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro [3, 2-b]pyridin-4-karbonyl)butyl]amid
benzo[b]tiofen-2-karboksylsyre-[3-metyl-l- (3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyridin-4-karbonyl)butyl]amid
benzo[b]tiofen-3-karboksylsyre-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro [ 3, 2- b]pyridin-4-karbonyl)butyl]amid
benzotiazol-5-karboksylsyre-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyridin-4-karbonyl)butyl]amid
bifenyl-4-karboksylsyre-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro [3, 2-b]pyridin-4-karbonyl)butyl]amid
N-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyridin-4-karbonyl)butyl]-4-fenoksybenzamid
N-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyridin-4-karbonyl)butyl]-3-fenoksybenzamid
4- imidazol-[1-yl-N-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro-[3, 2- b]pyridin-4-karbonyl)butyl]benzamid
N-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyridin-4-karbonyl)butyl]-4-tiofen-2-ylbenzamid
N-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyridin-4-karbonyl)butyl]-4-oksazol-5-ylbenzamid
N-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyridin-4-karbonyl)butyl]-4-[1,2,3]tiadiazol-4-ylbenzamid
N-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyridin-4-karbonyl)butyl]-4-pyrazol-l-ylbenzamid
N-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyridin-4-karbonyl)butyl]-5-tiofen-2-ylnikotinamid
N-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyridin-4-karbonyl)butyl]-6-fenylnikotinamid
2-fenyltiazol-4-karboksylsyre-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro [3, 2- b]pyridin-4-karbonyl)butyl]amid
2-pyridin-3-yltiazol-4-karboksylsyre-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyridin-4-karbonyl)butyl]amid
5- fenyltiofen-2-karboksylsyre-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyridin-4-karbonyl)butyl]amid
5-pyridin-3-yltiofen-2-karboksylsyre-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyridin-4-karbonyl)butyl]amid
2-metyl-5-fenylfuran-3-karboksylsyre-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyridin-4-karbonyl)butyl]amid
4-fenyltiofen-2-karboksylsyre-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrof uro[3, 2- b]pyridin-4-karbonyl)butyl]amid
4-pyridin-3-yltiofen-2-karboksylsyre-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyridin-4-karbonyl)butyl]amid
2-tiofen-2-yltiazol-4-karboksylsyre-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro [3, 2- b]pyridin-4-karbonyl)butyl]amid 2- metyl-5-(pyrrolidin-l-sulfonyl)furan-3-karboksylsyre-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyridin-4-karbonyl)-butyl]amid
3- fenylpyrrol-l-karboksylsyre-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro [3, 2- b]pyridin-4-karbonyl)butyl]amid.
Ytterligere forbindelser ifølge oppfinnelsen omfatter, men er ikke begrenset til, de følgende eksempler som er (3aS, 6aR)-isomeren med den generelle formel (I), hvor Z = "0", og R<1>= "H", og omfatter også ekvivalentanalogene inkludert i den fullstendige definisjon for Z og R<1>: N-[l-syklopropylmetyl-2-okso-2-(3-oksoheksa-hydrofuro-[3, 2-jb] pyrrol-4-yl) etyl] benzamid
4-tert.-butyl-N-[l-syklopropylmetyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]benzamid
N-[l-syklopropylmetyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrroi-4-yl)etyl]-4-trifluormetoksybenzamid 4-dimetylamino-N-[l-syklopropylmetyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrroi-4-yl)etyl]benzamid
4-isopropyl-N-[l-syklopropylmetyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b] pyrrol-4-yl)etyl]benzamid
4-difluormetoksy-N-[l-syklopropylmetyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]benzamid
N-[l-syklopropylmetyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-4-trifluormetylbenzamid 4-brom-N-[l-syklopropylmetyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]benzamid
3-brom-N-[l-syklopropylmetyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]benzamid
N-[l-syklopropylmetyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-4-vinylbenzamid
naftalen-2-karboksylsyre-[1-syklopropyImety1-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
naftalen-1-karboksylsyre-[1-syklopropyImety1-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
kinolin-6-karboksylsyre-[1-syklopropylmety1-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid benzo[b]tiofen-2-karboksylsyre-[1-syklopropyImety1-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
benzo[b]tiofen-3-karboksylsyre-[l-syklopropylmetyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
benzotiazol-5-karboksylsyre-[l-syklopropylmetyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
bifenyl-4-karboksylsyre-[1-syklopropyImetyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
N-[l-syklopropylmetyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-4-fenoksybenzamid
N-[l-syklopropylmetyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3, 2- b]pyrrol-4-yl)etyl]-3-fenoksybenzamid
4- imidazol-l-yl-N-[l-syklopropylmetyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3, 2-jb] pyrrol-4-yl) etyl] benzamid
N-[l-syklopropylmetyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3, 2- b]pyrrol-4-yl)etyl]-4-tiofen-2-ylbenzamid
N-[l-syklopropylmetyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3, 2- b]pyrrol-4-yl)etyl]-4-oksazol-5-ylbenzamid
N-[l-syklopropylmetyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3, 2- b]pyrrol-4-yl)etyl]-4-[1,2,3]tiadiazol-4-ylbenzamid
N-[l-syklopropylmetyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3, 2- b]pyrrol-4-yl)etyl]-4-pyrazol-l-ylbenzamid
N-[l-syklopropylmetyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3, 2- b]pyrrol-4-yl)etyl]-5-tiofen-2-ylnikotinamid
N-[l-syklopropylmetyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-6-fenylnikotinamid
2-fenyltiazol-4-karboksylsyre-[l-syklopropylmetyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
2-pyridin-3-yltiazol-4-karboksylsyre-[1-syklopropyl-metyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
5- fenyltiofen-2-karboksylsyre-[l-syklopropylmetyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
5-pyridin-3-yltiofen-2-karboksylsyre-[1-syklopropy1-metyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrroi-4-yl)etyl]amid
2-metyl-5-fenylfuran-3-karboksylsyre-[1-syklopropyl-metyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
4-fenyltiofen-2-karboksylsyre-[l-syklopropylmetyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
4-pyridin-3-y1tiofen-2-karboksylsyre-[1-syklopropyl-metyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
2-tiofen-2-yltiazol-4-karboksylsyre-[1-syklopropy1-metyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid 2- metyl-5-(pyrrolidin-l-sulfonyl)furan-3-karboksylsyre-[l-syklopropylmetyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
3- fenylpyrrol-l-karboksylsyre-[l-syklopropylmetyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
N-[1-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-karbonyl)-butyl]benzamid
4-tert.-butyl-N-[1-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-karbonyl)butyl]benzamid
N-[1-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-karbonyl)-butyl]-4-trifluormetoksybenzamid
4-dimetylamino-N-[1-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-karbonyl)butyl]benzamid
4-isopropyl-N-[1-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-karbonyl)butyl]benzamid
4-difluormetoksy-N-[1-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]-pyrrol-4-karbonyl)butyl]benzamid
N-[1-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-karbonyl)-butyl]-4-trifluormetylbenzamid
4-brom-N-[1-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-karbonyl)butyl]benzamid
3-brom-N-[1-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-karbonyl)butyl]benzamid
N-[1-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-karbonyl)-butyl]-4-vinylbenzamid
naftalen-2-karboksylsyre-[1-(3-oksoheksahydrofuro-[3, 2- b]pyrrol-4-karbonyl)butyl]amid
naftalen-l-karboksylsyre-[1-(3-oksoheksahydrofuro-[3, 2-jb] pyrrol-4-karbonyl) butyl] amid
kinolin-6-karboksylsyre-[1-(3-oksoheksahydrofuro-[3, 2-jb] pyrrol-4-karbonyl) butyl] amid
benzo[ b]tiofen-2-karboksylsyre-[1-(3-oksoheksahydrofuro [3, 2-Jb] pyrrol-4-karbonyl) butyl] amid
benzo[ b]tiofen-3-karboksylsyre-[1-(3-oksoheksahydrofuro [3, 2-Jb] pyrrol-4-karbonyl) butyl] amid
benzotiazol-5-karboksylsyre-[1-(3-oksoheksahydrofuro-[3, 2- b]pyrrol-4-karbonyl)butyl]amid
bifenyl-4-karboksylsyre-[1-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-karbonyl)butyl]amid
N-[1-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-karbonyl)-butyl]-4-fenoksybenzamid
N-[1-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-karbonyl)-butyl]-3-fenoksybenzamid
4- imidazol-l-yl-N-[1-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]-pyrrol-4-karbonyl)butyl]benzamid
N-[1-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-karbonyl)-butyl]-4-tiofen-2-ylbenzamid
N- [1- (3-oksoheksahydrofuro [3, 2-jb] pyrrol-4-karbonyl) - butyl]-4-oksazol-5-ylbenzamid
N-[1-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-karbonyl)-butyl]-4-[1,2,3]tiadiazol-4-ylbenzamid
N-[1-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-karbonyl)-butyl]-4-pyrazol-l-ylbenzamid
N-[1-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-karbonyl)-butyl]-5-tiofen-2-ylnikotinamid
N-[1-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-karbonyl)-butyl]-6-fenylnikotinamid
2-fenyltiazol-4-karboksylsyre-[1-(3-oksoheksahydrofuro [3, 2- b]pyrrol-4-karbonyl)butyl]amid
2-pyridin-3-yltiazol-4-karboksylsyre-[1-(3-oksoheksahydrofuro [3, 2- b]pyrrol-4-karbonyl)butyl]amid
5- fenyltiofen-2-karboksylsyre-[1-(3-oksoheksahydrofuro [3, 2- b]pyrrol-4-karbonyl)butyl]amid
5-pyridin-3-yltiofen-2-karboksylsyre-[1-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-karbonyl)butyl]amid
2-metyl-5-fenylfuan-3-karboksylsyre-[1-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-karbonyl)butylamid
4-fenyltiofen-2-karboksylsyre-[1-(3-oksoheksahydrofuro [3, 2-jb]pyrrol-4-karbonyl)butyl]amid
4-pyridin-3-yltiofen-2-karboksylsyre-[1-(3-oksoheksahydrofuro [3, 2-jb]pyrrol-4-karbonyl) butyl] amid
2-tiofen-2-yltiazol-4-karboksylsyre-[1-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-karbonyl)butyl]amid 2- metyl-5-(pyrrolidin-l-sulfonyl)furan-3-karboksylsyre-[1-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-karbonyl)butyl]amid
3- fenylpyrrol-l-karboksylsyre-[1-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-karbonyl)butyl]amid
4- metyl-N- [3-metyl-l- (3-oksoheksahydrofuro [3, 2-jb] - pyrrol-4-karbonyl)butyl]benzamid
4-metoksy-N-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]-pyrrol-4-karbonyl)butyl]benzamid
N-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-karbonyl)butyl]-4-morfolin-4-ylbenzamid
4-tert.-butyl-N-[1-(4-metoksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3, 2- b]pyrrol-4-yl)etyl]benzamid naftalen-2-karboksylsyre-[1-(4-metoksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
bifenyl-4-karboksylsyre-[1-(4-metoksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid 4-tert.-butyl-N-[1-(4-hydroksymetylbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-yl)etyl]benzamid
naftalen-2-karboksylsyre-[1-(4-hydroksymetylbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
bifenyl-4-karboksylsyre-[1-(4-hydroksymetylbenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-yl)etyl]amid furan-2-karboksylsyre-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
furan-3-karboksylsyre-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrroi-4-yl)etyl]amid
tiofen-2-karboksylsyre-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
tiofen-3-karboksylsyre-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
morfolin-4-karboksylsyre-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
N-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-2-fenylacetamid
N-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-3-fenylpropionamid
furan-2-karboksylsyre-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro-[3, 2-b]pyrrol-4-karbonyl)butyl]amid
furan-3-karboksylsyre-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro-[3, 2-b]pyrrol-4-karbonyl)butyl]amid
tiofen-2-karboksylsyre-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro [3, 2-b]pyrrol-4-karbonyl)butyl]amid
tiofen-3-karboksylsyre-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-karbonyl)butyl]amid
morfolin-4-karboksylsyre-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-karbonyl)butyl]amid
N-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-karbonyl)butyl]-2-fenylacetamid
N-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-karbonyl)butyl]-3-fenylpropionamid
furan-2-karboksylsyre-[l-sykloheksylmetyl-2-okso-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
furan-3-karboksylsyre-[l-sykloheksylmetyl-2-okso-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
tiofen-2-karboksylsyre-[l-sykloheksylmetyl-2-okso-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
tiofen-3-karboksylsyre-[l-sykloheksylmetyl-2-okso-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
morfolin-4-karboksylsyre-[l-sykloheksylmetyl-2-okso-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
N-[l-sykloheksylmetyl-2-okso-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-2-fenylacetamid
N-[l-sykloheksylmetyl-2-okso-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-3-fenylpropionamid
N-[l-sykloheksylmetyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]benzamid
naftalen-1-karboksylsyre-[l-sykloheksylmetyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
benzo[b]tiofen-2-karboksylsyre-[l-sykloheksylmetyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
furan-2-karboksylsyre-[3,3-dimetyl-l-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-karbonyl)butyl]amid
furan-3-karboksylsyre-[3,3-dimetyl-l-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-karbonyl)butyl]amid
tiofen-2-karboksylsyre-[3,3-dimetyl-l-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-karbonyl)butyl]amid
tiofen-3-karboksylsyre-[3,3-dimetyl-l-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-karbonyl)butyl]amid
morfolin-4-karboksylsyre-[3,3-dimetyl-l-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-karbonyl)butyl]amid
N-[3,3-dimetyl-l-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-karbonyl)butyl]-2-fenylacetamid
N-[3,3-dimetyl-l-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-karbonyl)butyl]-3-fenylpropionamid
benzo[b]tiofen-2-karboksylsyre-[3,3-dimetyl-l-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-karbonyl)butyl]amid
N-[3,3-dimetyl-l-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-karbonyl)butyl]benzamid
furan-2-karboksylsyre-[l-benzyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
furan-3-karboksylsyre-[l-benzyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
tiofen-2-karboksylsyre-[l-benzyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
tiofen-3-karboksylsyre-[l-benzyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
morfolin-4-karboksylsyre-[l-benzyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
N-[l-benzyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]-pyrrol-4-yl)etyl]-2-fenylacetamid
N-[l-benzyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]-pyrrol-4-yl)etyl]-3-fenylpropionamid
benzo[b]tiofen-2-karboksylsyre-[l-benzyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
N-[l-benzyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]-pyrrol-4-yl)etyl]benzamid
furan-2-karboksylsyre-[l-syklopentylmetyl-2-okso-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
furan-3-karboksylsyre-[l-syklopentylmetyl-2-okso-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
tiofen-2-karboksylsyre-[l-syklopentylmetyl-2-okso-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrroi-4-yl)etyl]amid
tiofen-3-karboksylsyre-[l-syklopentylmetyl-2-okso-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
morfolin-4-karboksylsyre-[l-syklopentylmetyl-2-okso-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
N-[l-syklopentylmetyl-2-okso-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrroi-4-yl)etyl]-2-fenylacetamid
N-[l-syklopentylmetyl-2-okso-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-3-fenylpropionamid
N-[l-syklopentylmetyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]benzamid
naftalen-[1-karboksylsyre-[l-syklopentylmetyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
benzo[b]tiofen-2-karboksylsyre-[l-syklopentylmetyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid furan-2-karboksylsyre-[1-benzylsulfanyImety1-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
furan-3-karboksylsyre-[1-benzylsulfanylmetyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
tiofen-2-karboksylsyre-[1-benzylsulfanyImety1-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
tiofen-3-karboksylsyre-[1-benzylsulfanyImetyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
morfolin-4-karboksylsyre-[1-benzylsulfanyImety1-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
N-[1-benzylsulfanylmetyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-2-fenylacetamid
N-[1-benzylsulfanylmetyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]-3-fenylpropionamid
benzo[b]tiofen-2-karboksylsyre-[1-benzylsulfanylmetyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
N-[1-benzylsulfanylmetyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]benzamid
naftalen-1-karboksylsyre-[1-benzylsulfanyImety1-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid furan-2-karboksylsyre-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)-1-(fenylmetansulfonylmetyl)etyl]amid
furan-3-karboksylsyre-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)-1-(fenylmetansulfonylmetyl)etyl]amid
tiofen-2-karboksylsyre-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3, 2-b]pyrrol-4-yl)-1-(fenylmetansulfonylmetyl)etyl]amid
tiofen-3-karboksylsyre-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3, 2-b]pyrrol-4-yl)-1-(fenylmetansulfonylmetyl)etyl]amid
morfolin-4-karboksylsyre-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-yl)-1-(fenylmetansulfonylmetyl)etyl]amid
N-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrroi-4-yl)-1-(fenylmetansulfonylmetyl)etyl]-2-fenylacetamid
N-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)-1-(fenylmetansulfonylmetyl)etyl]-3-fenylpropionamid
benzo[b]tiofen-2-karboksylsyre-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3, 2- b]pyrrol-4-yl)-1-(fenylmetansulfonylmetyl)etyl]-amid
N- [2-okso-2- (3-oksoheksahydrofuro [3, 2-jb] py r roi-4-yl) -1-(fenylmetansulfonylmetyl)etyl]benzamid
naftalen-l-karboksylsyre-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3, 2-b]pyrrol-4-yl)-1-(fenylmetansulfonylmetyl)etyl]amid
4-(2-benzyloksy-3-sykloheksyl-propionoyl)tetrahydrofuro[3,2-b]pyrrol-3-on
4-[2-(4-tert.-butylbenzyloksy)-4-metyl-pentanoyl]tetrahydrofuro[3,2-b]pyrrol-3-on
4-[2-(naftalen-l-ylmetoksy)-3-fenylpropionyl]tetra-hydrof uro [3,2-b]pyrrol-3-on
4-[3-sykloheksyl-2-(furan-2-ylmetansulfanyl)propionoyl]tetrahydrofuro[3,2-b]pyrrol-3-on
4-[3-sykloheksyl-2-(furan-3-ylmetansulfanyl)propionoyl]tetrahydrofuro[3,2-b]pyrrol-3-on
4-[3-sykloheksyl-2-(furan-2-ylmetansulfonyl)propionoyl]tetrahydrofuro[3,2-b]pyrrol-3-on
4-[3-sykloheksyl-2-(furan-3-ylmetansulfonyl)propionoyl]tetrahydrofuro[3,2-b]pyrrol-3-on
morfolin-4-karboksylsyre-l-sykloheksylmetyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etylester
morfolin-4-karboksylsyre 3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-karbonyl)butylester
morfolin-4-karboksylsyre-3,3-dimetyl-l-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-karbonyl)butylester
2-sykloheksylmetyl-4-morfolin-4-yl-l-(3-oksoheksahydrofuro [3, 2-b]pyrrol-4-yl)butan-1,4-dion
2-isobutyl-4-morfolin-4-yl-[1-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-4-yl)butan-l,4-dion
2-(2,2-dimetylpropyl)-4-morfolin-4-yl-l-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyrrol-4-yl)butan-1,4-dion
4-(2-bifenyl-3-yl-4-metylpentanoyl)tetrahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-3-on
Ytterligere forbindelser ifølge oppfinnelsen omfatter, men er ikke begrenset til, de følgende eksempler som er ( 3aS, laR )- eller ( 3aR, laS)-isomeren med den generelle formel
(II), hvor Z = "0", og R<1>= "H", og omfatter også ekvivalentanalogene inkludert i den fullstendige definisjon for Z og R<1>: furan-2-karboksylsyre-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyridin-4-yl)etyl]amid
furan-3-karboksylsyre-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyridin-4-yl)etyl]amid
tiofen-2-karboksylsyre-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyridin-4-yl)etyl]amid
tiofen-3-karboksylsyre-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyridin-4-yl)etyl]amid morfolin-4-karboksylsyre-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2- (3-oksoheksahydrofuro [3, 2-Jb] pyridin-4-yl) etyl] amid
N-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3, 2- b]pyridin-4-yl)etyl]-2-fenylacetamid
N-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3, 2- b]pyridin-4-yl)etyl]-3-fenylpropionamid
N-[1-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3, 2- b]pyridin-4-yl)etyl]benzamid
furan-2-karboksylsyre-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro-[3, 2-jb] pyridin-4-karbonyl) butyl] amid
furan-3-karboksylsyre-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyridin-4-karbonyl)butyl]amid
tiofen-2-karboksylsyre-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyridin-4-karbonyl)butyl]amid
tiofen-3-karboksylsyre-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyridin-4-karbonyl)butyl]amid
morfolin-4-karboksylsyre-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyridin-4-karbonyl)butyl]amid
N-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyridin-4-karbonyl)butyl]-2-fenylacetamid
N-[3-metyl-l-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyridin-4-karbonyl)butyl]-3-fenylpropionamid
furan-2-karboksylsyre-[l-sykloheksylmetyl-2-okso-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyridin-4-yl)etyl]amid
furan-3-karboksylsyre-[l-sykloheksylmetyl-2-okso-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyridin-4-yl)etyl]amid
tiofen-2-karboksylsyre-[l-sykloheksylmetyl-2-okso-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyridin-4-yl)etyl]amid
tiofen-3-karboksylsyre-[l-sykloheksylmetyl-2-okso-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyridin-4-yl)etyl]amid
morfolin-4-karboksylsyre-[l-sykloheksylmetyl-2-okso-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyridin-4-yl)etyl]amid
N-[l-sykloheksylmetyl-2-okso-(3-oksoheksahydrofuro-[3, 2- b]pyridin-4-yl)etyl]-2-fenylacetamid
N-[l-sykloheksylmetyl-2-okso-(3-oksoheksahydrofuro-[3, 2-i>] pyridin-4-yl) etyl] -3-f enylpropionamid
N-[l-sykloheksylmetyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3, 2- b]pyridin-4-yl)etyl]benzamid
naftalen-1-karboksylsyre-[1-sykloheksyImety1-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyridin-4-yl)etyl]amid benzo[ b]tiofen-2-karboksylsyre-[l-sykloheksylmetyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyridin-4-yl)etyl]amid
furan-2-karboksylsyre-[3,3-dimetyl-l-(3-oksoheksahydrofuro [3, 2- b]pyridin-4-karbonyl)butyl]amid
furan-3-karboksylsyre-[3,3-dimetyl-l-(3-oksoheksahydrofuro [3, 2-b]pyridin-4-karbonyl)butyl]amid
tiofen-2-karboksylsyre-[3,3-dimetyl-l-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyridin-4-karbonyl)butylamid
tiofen-3-karboksylsyre-[3,3-dimetyl-l-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyridin-4-karbonyl)butyl]amid
morfolin-4-karboksylsyre-[3,3-dimetyl-l-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyridin-4-karbonyl)butyl]amid
N-[3,3-dimetyl-l-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyridin-4-karbonyl)butyl]-2-fenylacetamid
N-[3,3-dimetyl-l-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyridin-4-karbonyl)butyl]-3-fenylpropionamid
benzo[b]tiofen-2-karboksylsyre-[3,3-dimetyl-l-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyridin-4-karbonyl)butyl]amid
N-[3,3-dimetyl-l-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyridin-4-karbonyl)butyl]benzamid
furan-2-karboksylsyre-[l-benzyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyridin-4-yl)etyl]amid
furan-3-karboksylsyre-[l-benzyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyridin-4-yl)etylamid
tiofen-2-karboksylsyre-[l-benzyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyridin-4-yl)etyl]amid
tiofen-3-karboksylsyre-[l-benzyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3, 2-b]pyrrol-4-yl)etyl]amid
morfolin-4-karboksylsyre-[l-benzyl-2-okso-2- (3-oksoheksahydrofuro [3, 2-b]pyridin-4-yl)etyl]amid
N-[l-benzyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyridin-4-yl)etyl]-2-fenylacetamid
N-[l-benzyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyridin-4-yl)etyl]-3-fenylpropionamid
benzo[b]tiofen-2-karboksylsyre-[l-benzyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyridin-4-yl)etyl]amid
N-[l-benzyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyridin-4-yl)etyl]benzamid
furan-2-karboksylsyre-[l-syklopentylmetyl-2-okso-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyridin-4-yl)etyl]amid
furan-3-karboksylsyre-[l-syklopentylmetyl-2-okso-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyridin-4-yl)etyl]amid
tiofen-2-karboksylsyre-[l-syklopentylmetyl-2-okso-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyridin-4-yl)etyl]amid
tiofen-3-karboksylsyre-[l-syklopentylmetyl-2-okso-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyridin-4-yl)etyl]amid
morfolin-4-karboksylsyre-[l-syklopentylmetyl-2-okso-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyridin-4-yl)etyl]amid
N-[l-syklopentylmetyl-2-okso-(3-oksoheksahydrofuro-[3, 2-b]pyridin-4-yl)etyl]-2-fenylacetamid
N-[l-syklopentylmetyl-2-okso-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyridin-4-yl)etyl]-3-fenylpropionamid
N-[l-syklopentylmetyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyridin-4-yl)etyl]benzamid
naftalen-1-karboksylsyre-[1-syklopentyImety1-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyridin-4-yl)etyl]amid benzo[b]tiofen-2-karboksylsyre-[l-syklopentylmetyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyridin-4-yl)etyl]amid furan-2-karboksylsyre-[1-benzylsulfanyImety1-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyridin-4-yl)etyl]amid
furan-3-karboksylsyre-[1-benzylsulfanyImetyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyridin-4-yl)etyl]amid
tiofen-2-karboksylsyre-[1-benzylsulfanyImetyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyridin-4-yl)etyl]amid
tiofen-3-karboksylsyre-[1-benzylsulfanyImetyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyridin-4-yl)etyl]amid
morfolin-4-karboksylsyre-[1-benzylsulfanyImety1-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyridin-4-yl)etyl] amid
N-[l-benzylsulfanylmetyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3, 2- b]pyridin-4-yl)etyl] -2-fenylacetamid
N-[1-benzylsulfanylmetyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3, 2-b] pyridin-4-yl) etyl] -3-f enylpropionamid
benzo[ b]tiofen-2-karboksylsyre-[1-benzylsulfanylmetyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyridin-4-yl)etyl]amid
N-[1-benzylsulfanylmetyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3, 2- b]pyridin-4-yl)etyl]benzamid
naftalen-[1-karboksylsyre-[l-benzylsulfanylmetyl-2-okso-2- (3-oksoheksahydrofuro [3, 2-Jb] pyridin-4-yl) etyl] amid furan-2-karboksylsyre-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3, 2-Jb] pyridin-4-yl) -1- (fenylmetansulfonylmetyl) etyl] amid
furan-3-karboksylsyre-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyridin-4-yl)-1-(fenylmetansulfonylmetyl)etyl]amid
tiofen-2-karboksylsyre-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyridin-4-yl)-1-(fenylmetansulfonylmetyl)etyl]amid
tiofen-3-karboksylsyre-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro-[3,2-b]pyridin-4-yl)-1-(fenylmetansulfonylmetyl)etyl]amid
morfolin-4-karboksylsyre-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyridin-4-yl)-1-(fenylmetansulfonylmetyl)etyl]amid
N-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyridin-4-yl)-1-(fenylmetansulfonylmetyl)etyl]-2-fenylacetamid
N-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyridin-4-yl)-1-(fenylmetansulfonylmetyl)etyl]-3-fenylpropionamid
benzo[b]tiofen-2-karboksylsyre-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyridin-4-yl)-[1-(fenylmetansulfonylmetyl)-etyl]amid
N-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyridin-4-yl)-1-(fenylmetansulfonylmetyl)etyl]benzamid
naftalen-l-karboksylsyre-[2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro [3,2-b]pyridin-4-yl)-1-(fenylmetansulfonylmetyl)etyl]amid
morfolin-4-karboksylsyre-l-sykloheksylmetyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyridin-4-yl)etylester
4-[3-sykloheksyl-2-(furan-2-ylmetansulfanyl)propionyl]-heksahydrofuro[3,2-b]pyridin-3-on
4-[3-sykloheksyl-2-(furan-2-ylmetansulfonyl)propionyl]-heksahydrofuro[3, 2- b]pyridin-3-on
4- [3-sykloheksyl-2-(furan-3-ylmetansulfanyl)propionyl]-heksahydrofuro[3, 2- b]pyridin-3-on
4-[3-sykloheksyl-2-(furan-3-ylmetansulfonyl)propionyl]-heksahydrofuro[3, 2- b]pyridin-3-on
2-sykloheksylmetyl-4-morfolin-4-yl-1-(3-oksoheksahydrofuro [3, 2- b]pyridin-4-yl)butan-1,4-dion.
Alle eksemplene ovenfor tatt i betraktning, så er de
også ment å inkludere de oksiderte analogene av tildeknings-grupper som inneholder et lett oksidert nitrogen, sl'ik at N-oksidet fås, eller et lett oksidert svovel, slik at sulfonet fås. De følgende formler er illustrerende eksempler:
For fagfolk innen organisk kjemi kan forbindelser med
de generelle formlene (I) og (II) lett syntetiseres ved hjelp av en rekke kjemiske strategier, utført enten i oppløsning eller på den faste fase (se Atherton, E. og Sheppard, R.C. i "Solid Phase Peptide Synthesis: A Practical Approach", Oxford University
Press, Oxford, UK, 1989, for en generell oversikt over prinsip-per for fastfasesyntese). Fastfasestrategien er attraktiv ved at den er i stand til å generere mange tusen analoger, vanligvis i en skala på 5-100 mg, gjennom etablerte metoder for parallell-syntese (se f.eks. (a) Bastos, M. , Maeji, N.J., Abeles, R.H., Proe. Nati. Acad. Sei. USA, 92, 6738-6742, 1995).
Én strategi for syntesen av forbindelser med de generelle formlene (I) og (II) omfatter derfor:
(a) fremstilling av en passende funksjonalisert og beskyttet bisyklisk ketonbyggeblokk i oppløsning, (b) festing av byggeblokken (a) til den faste fase gjennom en linker som er stabil overfor syntese-betingelsene, men gjerne labil overfor spalting ved slutten av en syntese (se James, I.W., Tetrahedron, 55 (rapport nr. 489), 4855-4946, 1999, f.eks. av "linker"-funksjonen slik den anvendes ved fastfasesyntese), (c) organisk fastfasekjemi (se Brown, R.D., J. Chem. Soc. Perkin Trans. 1, 19, 3293-3320, 1998) for å konstruere det gjenværende av molekylet, (d) forbindelsesspalting fra den faste fase i opp-løsning, (e) spaltingsopparbeidelse og forbindelsesanalyse.
Det første trinn i en syntese av forbindelser med de generelle formlene (I) og (II) er fremstillingen i oppløsning av en funksjonalisert og beskyttet byggeblokk. Et typisk reaksjonsskjema mot tetrahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-3-on (19) er nærmere beskrevet i reaksjonsskjerna 1. De følgende beskrivelser vist i reaksjonsskjemaene 1-13 kan likeledes anvendes ved å bruke alternative grunnskjeletter med de generelle formlene (I) og
(II)
Reaksjonsskjema 1. (a) "-BuOCOCl, NMM, DCM, -15 °C, 10 min under argon, (b) diazometan i dietyleter, -15 °C til romtemperatur i løpet av 1 time. (c) eddiksyre. (d) LiCl (10 ekv.) i 80 % vandig eddiksyre, 5 °C til romtemperatur i løpet av 1 time.
FmOC(O) betegner den velkjente aminbeskyttelsesgruppe 9-fluorenylmetoksykarbonyl (Fmoc, se Atherton, E. og Sheppard, R.C., 1989), og "Pg" betegner enten en fri hydroksyl- eller hydroksylbeskyttelsesgruppe, slik som tert.-butyleter. I det illustrerte tilfellet gir kondensasjon med diazometan R<1>=H. Selv om dannelse av diazoketonet klart ses etter 1 times omsetning, oppnås en totalforbedring i isolert utbytte ved å la reaksjonen forløpe med eterisk diazometan i 24 timer.
Når det gjelder trinn (a), kan syntesen starte fra passende beskyttet p-hydroksyprolin (17) (eller beskyttet p-hydroksypipekolsyre), som er tilgjengelig via mange forskjellige litteraturmetoder, f.eks. (a) Heffner, R.J. et al., J. Am. Chem. Soc, 114, 10181-10189, 1992; (b) Hughes, P., Cardy, J. , J. Org. Chem., 54, 3260-3264, 1989; (c) Heffner, R.J., Jouille, M.M., Tet. Lett., 30, 7021-7024, 1989; (d) Ewing, W.R., Jouille, M.M., Heterocycles, 27, 2843-2850, 1988; (e) Kolodziej, S.A., Marshall, G.R., Int. J. Pept. Prot. Res., 48, 274-280, 1996; (f) Evans, D.A., Weber, A.E., J. Am. Chem. Soc, 109, 7151-7157, 1987; (g) Langlois, N., Rakotondradany, F., Tetrahedron, 56, 2437-2448, 2000; (h) Sugisaki, C.H. et al., Tet. Lett., 39, 3413-3416, 1998; (i) Greck, C. et al., Tet. Lett., 37, 2031-, 1996; (j) Agami, C. et al., Tet. Lett., 37, 4001-, 1996.
Aktivering av passende beskyttede p-hydroksyprolin (17) via isobutylklorformiatblandet anhydrid, etterfulgt av kondensasjon med diazometan, gir diazometylketonmellomproduktene (18). Behandling av diazometylketonmellomproduktene (18) med litiumklorid i vandig eddiksyre gir beskyttede tetrahydrofuro[3, 2- b]-pyrrol-3-on (19) . Innføring av enkle R<1->substituenter kan oppnås ved hjelp av kondensasjon av aktiverte (17) med alternativer til diazometan, slik som diazoetan (R<1>= CH3) , eller 1-fenyloksydiazo-etan (R<1>= CH2OPh) .
De beskyttede byggeblokkene (syntese eksemplifisert ved hjelp av tetrahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-3-on (19)), beskrevet i reaksjonsskjema 1, kan benyttes ved en fastfasesyntese av inhibitormolekyler (trinnene (b)-(e)). Trinn (b), fastfase-bindingen av et aldehyd eller keton, er tidligere blitt beskrevet ved hjelp av mange forskjellige metoder (se f.eks.
(a) James, I.W., 1999; (b) Lee, A., Huang, L., Ellman, J.A., J. Am. Chem. Soc, 121(43) 9907-9914, 1999; (c) Murphy, A.M. et al., J. Am. Chem. Soc, 114, 3156-3157, 1992). En egnet metode som er tilgjengelig for den reversible binding av en alkylketon-
gruppe, slik som (19), skjer gjennom en kombinasjon av de tidligere beskrevne kjemiske fremgangsmåtene. Semikarbazidet, 4-[[(hydrazinokarbonyl)amino]metyl]sykloheksankarboksylsyre-trifluoracetat (20) (Murphy, A.M. et al., J. Am. Chem. Soc, 114, 3156-3157, 1992), kan utnyttes som illustrert i reaksjonsskjema 2, eksemplifisert ved binding av tetrahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-3-on (19).
Reaksjonsskjema 2. (a) (19) i 90 % EtOH/H20/l,5 ekv. NaOAc/4-[[(hydrazinokarbonyl)amino]metyl]sykloheksankarboksylsyre.trifluoracetat (20), 2 t refluks. (b) 3 ekv. konstruksjon (21)/ 3 ekv. HBTU/3 ekv. HOBt/6 ekv. NMM, NH2-fastfase, DMF, RT, o/n. (c) 20 % piperidin/DMF, 30 min. (d) rekke av kjemiske omset-ninger for å innføre U-V-W-X-Y. (e) TFA/H20 (95:5, volum/volum), RT, 2 t.
Konstruksjon (21) fremstilles gjennom omsetning av linkermolekylet (20) og tetrahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-3-onet (19)) ved hjelp av refluks i vandig etanol/natriumacetat. Standard fastfaseteknikker (se f.eks. Atherton, E. og Sheppard, R.C., 1989) anvendes for å forankre konstruksjonen til en aminofunk-sjonalisert fastfase gjennom den frie karboksylsyregruppen i (21), hvorved man får den ladede konstruksjon (22).
Ladet konstruksjon (22) kan omsettes med et bredt spekter av karboksylsyrer tilgjengelige kommersielt eller i litteraturen, for å innføre den venstre delen "U-V-W-X-Y" i den generelle formel (I). I det enkleste eksemplet omfatter hele venstre del av en inhibitor med generell formel (I) en tildekket aminosyre (reaksjonsskjema 3), hvorved man får f.eks. analoger med generell formel (I), hvor R<12>= "H", (X)D= "-", (W)n= "NH", R<16>="H", n = 1, (V)m<=>"CO", m = 1, og U = aryl.
Reaksjonsskjema 3. (a) 20 % piperidin/DMF, 30 min. (b) 20 ekv. Fmoc-aminosyre/20 ekv. HBTU/20 ekv. HOBt/40 ekv. NMM, DMF, o/n. (c) 5 ekv. karboksylsyre/5 ekv. HBTU/5 ekv. HOBt/10 ekv. NMM, DMF, RT, o/n. (d) TFA/H20 (95:5, v/v), RT, 2 t. Alternativt kan karboksylsyrer fremstilles i oppløsning ved hjelp av tradisjonelle organisk-kjemiske metoder og kobles til konstruksjon (22) på den faste fase (reaksjonsskjemaene 4-8). For eksempel gir (reaksjonsskjema 4) behandling i oppløsning av en aminosyre, eksemplifisert ved hjelp av (24), med natriumnitritt/H2S04a-hydroksysyren eksemplifisert ved (25) (Degerbeck, F. et al., J. Chem. Soc, Perkin Trans. 1, 11-14, 1993). Behandling av ct-hydroksysyre (25) med natriumhydrid i en blanding av dimetylformamid og diklormetan, etterfulgt av tilsetning av benzylbromid, gir 2ÆS-benzyloksy-3-sykloheksylpropionsyre (26). Kobling av (26) til fastfasekonstruksjonen (22) etterfulgt av spalting gir (27), et eksempel på generell formel (I), hvor R12 = "H", (X)o= "-", (W)n="0", n = 1, (V)ra= "CH2", dvs. R<17>,R18="H", m = 1, og U = fenyl. For fagfolk innen utøvelsen av organisk syntese kan et bredt spekter av aminosyrer, slik som (24) , omdannes til den tilsvarende a-hydroksysyre, slik som (25) , ved å følge de generelle betingelsene som er beskrevet. I tillegg kan benzylbromid erstattes med et rimelig Ar-CR<17>R<18->halogenid, hvorved man får mange variasjoner av karboksylsyre (26) ved å følge de generelle betingelsene som er beskrevet. I visse tilfeller kan det være fordelaktig midlertidig å beskytte karboksylsyren som metylesteren (f.eks. forbindelse (32), reaksjonsskjema 6) før omsetning med alkylhalogenidet. Ester-mellomproduktet hydrolyseres så ganske enkelt til syre (26). Analoger av (27) hvor et bredt spekter av (V)mog U i generell formel (I) undersøkes, kan fremstilles gjennom de generelle betingelsene som er beskrevet i reaksjonsskjema 4. Ettersom det endelige syntesetrinn omfatter en trifluoreddiksyre(TFA)formid-let spalting av den fastfasebundne forbindelse, kan analoger hvor den substituerte eter er labil overfor TFA fremstilles i oppløsning ved hjelp av et alternativt reaksjonsspor (se reaksjonsskjema 11).
Reaksjonsskjema 4. (a) NaN02/H2S04, 0 °C -> RT, 2 t. (b) 2,3 ekv. NaH, 1:1 DMF/DCM, 1,4 ekv. benzylbromid, o/n. (c) 20 % piperidin/DMF, 30 min. (d) 10 ekv. (26)/10 ekv. HBTU/10 ekv. HOBt/ 20 ekv. NMM, DMF, RT, o/n. (e) TFA/H20 (95:5, volum/volum), RT,
2 t.
Kobling av konstruksjon (22) (etter fjerning av Fmoc) med a-hydroksysyren (25) gir alternativt en skiftende fastfase-bundet mellomprodukt-"Y"-substituent i generell formel (I) som kan omsettes med mange reagenser. For eksempel kan a-hydroksyl- gruppen omsettes under Mitsunobu-betingelser (Hughes, D.L., Org. React. (N.Y), 42, 335-656, 1992), hvorved man får etere (dvs. X = "-", W = "0", i den generelle formel (I)) (se Grabowska, U. et al., J. Comb. Chem., 2(5), 475-490, 2000, for et eksempel på Mitsunobu-reaksjon på den faste fase). Alternativt kan a-hydroksylgruppen omsettes med et karbamoylklorid, hvorved man får et karbamat (dvs. X = "-", W = "0", V = "NHC(O)", i generell formel (I)) .
Alternativt gir (reaksjonsskjema 5) behandling i opp-løsning av en aminosyre, eksemplifisert ved (24), med natriumnitritt/H2S04/kaliumbromid a-bromsyren, eksemplifisert ved (28)
(Souers, A.J. et al., Synthesis, 4, 583-585, 1999), med bibehol-delse av konfigurasjon. Behandling av ct-bromsyre (28) med en alkyltiol, eksemplifisert ved 4-tert.-butylfenylmetantiol (29), i dimetylformamid/trietylamin gir 2S-(4-tert.-butylbenzyl-sulfanyl)-4-metylpropionsyre (30) med inversjon av konfigurasjon. Kobling av (30) til fastfasekonstruksjonen (22) etterfulgt av spalting gir (31), et eksempel på generell formel (I), hvor R<12>= "H", (X)o="-", (W)ner "S", n = 1, (V)m= "CH2", dvs. R<17>, R<18>= "H", m = 1, og U = 4-tert.-butylfenyl. For fagfolk innen utøvelsen av organisk syntese kan et bredt spekter av aminosyrer, slik som (24), omdannes til den tilsvarende a-bromsyre, slik som (28), ved å følge de generelle betingelsene som er beskrevet. Ved å starte med S-isomeren (24), fås i tillegg S-bromsyreanalogen (28) og Æ-tioeteranalogen (30). I tillegg kan (4-tert.-butylfenyl)metantiol (29) erstattes med hvilken som helst rimelig Ar-CR<17>R<18->SH, hvorved man får mange variasjoner av karboksylsyre (30) ved å følge de generelle betingelsene som er beskrevet. Analoger av (31) som undersøker et bredt spekter av (V)mog U i den generelle formel (I), kan således fremstilles gjennom de generelle betingelsene som er beskrevet i reaksjonsskjema 5.
Reaksjonsskjema 5. (a) NaN02/H2S04, KB r 0 °C -> RT, 2 t.
(b) alkyltiol (29)/DMF/NEt3, o/n. (c) 20 % piperidin/DMF, 30 min. (d) 10 ekv. (30)/10 ekv. HBTU/10 ekv. HOBt/20 ekv. NMM, DMF, RT, o/n. (e) TFA/H20 (95:5, volum/volum), RT, 2 t.
Kobling av konstruksjon (22) (etter fjerning av Fmoc) med en a-bromsyre, f.eks. (28), gir alternativt en skiftende mellomprodukt-"Y"-substituent i generell formel (I) som kan omsettes med mange reagenser, ct-bromidet kan f.eks. erstattes med nukleofiler, f.eks. alkoholer, tioler, karbanioner etc, hvorved man får etere (dvs. X = "-", W = "0", i generell formel (I)), tioetere (dvs. X = "-", W = "S", i generell formel (I)). Tio-eterne kan eventuelt oksideres til sulfonet (se reaksjonsskjema 9, dvs. X = "-", W = "S02", i generell formel (I)) (se Grabowska, U. et al., J. Comb. Chem., 2(5), 475-490, 2000, som et eksempel på bromidfortrengning og tioeteroksidasjon på den faste fase).
Alternativt gir (reaksjonsskjema 6) behandling av en a-hydroksysyre, eksemplifisert ved (25), med trimetylsilylklorid og metanol metylesteren (32). Aktivering av den frie hydroksyl-gruppe på klorformiatet med fosgen i diklormetan etterfulgt av tilsetning av morfolin, så hydrolyse, gir morfolin-4-karboksylsyre-lS-karboksy-2-sykloheksyletylester (33). Kobling av (33) til fastfasekonstruksjonen (22) etterfulgt av spalting gir (34), et eksempel på generell formel (I), hvor R12="H",(X)0= "-", (W)n= "0", n = 1, (V)m= "CO", og U = morfolino. For fagfolk innen utøvelsen av organisk syntese vil et bredt spekter av oc-hydroksysyreestere, slik som (32), kunne omdannes til det akti verte klorformiat ved å følge de generelle betingelsene som er beskrevet. Morfolin kan i tillegg erstattes med ethvert rimelig amin, hvorved man får mange variasjoner av karboksylsyre (33) ved å følge de generelle betingelsene som er beskrevet. Analoger av (34) som undersøker et bredt spekter av (V)mog U i den generelle formel (I), kan fremstilles gjennom de generelle betingelsene som er beskrevet i reaksjonsskjema 6.
Reaksjonsskjema 6. (a) Me3SiCl, MeOH, RT, o/n. (b) i. C0C12/DCM/o/n; ii. morfolin/DCM 0 °C, 2 t; iii. LiOH i H20/dioksan,
0 °C. (c) 20 % piperidin/DMF, 30 min. (d) 10 ekv. (33)/10 ekv. HBTU/10 ekv. HOBt/20 ekv. NMM, DMF, RT, o/n. (e) TFA/H20 (95:5, volum/volum), RT, 2 t.
Alternativt er (reaksjonsskjema 7) et bredt spekter av alkylsuksinatestere, eksemplifisert ved 2iR-sykloheksylmetyl-ravsyre-l-metylester (35), kommersielt tilgjengelig eller fremstilles lett ved hjelp av kjente fremgangsmåte (se (a) Azam et al., J. Chem. Soc. Perkin Trans. 1, 621-, 1996; (b) Evans et al., J. Chem. Soc. Perkin Trans. 1, 103, 2127, 1981; (c) Oikawa et al., Tet. Lett, 37, 6169, 1996). Karboksylaktivering av alkylsuksinatester (35), etterfulgt av tilsetning av morfolin i dimetylformamid og etterfølgende esterhydrolyse, gir 2£-sykloheksylmetyl-4-morfolin-4-yl-4-oksosmørsyre (36). Kobling av (36) til fastfasekonstruksjonen (22) etterfulgt av spalting gir (37), et eksempel på generell formel (I), hvor R<12>= "H", (X)0 = "CH2", dvs.R<14>, R<15>= "H", o = 1, (W)n= "CO", n = 1, (V)m= "-", og U = morfolino. For fagfolk innen utøvelsen av organisk syntese kan et bredt spekter av alkylsuksinatestere, slik som (35), fremstilles og omdannes til den tilsvarende substituerte alkylsuksi-natsyre, slik som (36), ved å følge de generelle betingelsene som er beskrevet. I tillegg kan morfolin erstattes med hvilket som helst rimelig amin, hvorved man får mange variasjoner av karboksylsyre (36) ved å følge de generelle betingelsene som er beskrevet. Analoger av (37) som undersøker et bredt spekter av (X)o, (V)mog U i den generelle formel (I), kan således fremstilles gjennom de generelle betingelsene som er beskrevet i reaksjonsskjema 7.
Reaksjonsskjema 7. (a) i. EDC/l-hydroksybenzotriazol/DMF, 0 °C, 30 min; ii. morfolin, RT, o/n. (b) LiOH i H20/dioksan, 0 °C.
(c) 20 % piperidin/DMF, 30 min. (d) 10 ekv. (36)/10 ekv. HBTU/
10 ekv. HOBt/20 ekv. NMM, DMF, RT, o/n. (e) TFA/H20 (95:5, volum/volum), RT, 2 t. Alternativt er (reaksjonsskjema 8) et bredt spekter av biarylalkyleddiksyrer, eksemplifisert ved 2iRS-bif enyl-3-yl-4-metylpentansyre (39), lett tilgjengelige ved hjelp av kjente fremgangsmåter (se (a) DesJarlais, R.L. et al., J. Am. Chem. Soc, 120, 9114-9115, 1998; (b) Oballa, R.M. et al., WO 0149288). Kobling av biarylalkyleddiksyre (39) til fastfasekonstruksjonen (22) etterfulgt av spalting gir (40), et eksempel på generell formel (I), hvor R<12>= "H", (X)0 = "-", (<W>)n = (V)m= "-", og U er m-bifenyl. For fagfolk innen utøvelsen av organisk syntese kan et bredt spekter av biarylalkyleddiksyrer, slik som (39), fremstilles ved alkylering av a-anionet i den frie syreanalog (38), som igjen fremstilles ved hjelp av Suzuki-kobling av fenylborsyre og 3-bromfenyleddiksyremetylester. Fenylborsyre kan erstattes med et bredt spekter av arylborsyrer i Suzuki-koblingen, hvorved man får mange variasjoner av karboksylsyre (39) ved å følge de generelle betingelsene som er beskrevet. Analoger av (40) som undersøker et bredt spekter av gruppe "U" i den generelle formel (I), kan således fremstilles gjennom de generelle betingelsene som er beskrevet i reaksjonsskjema 8.
Reaksjonsskjema 8. (a) LiOH i H20/dioksan, 0 °C. (b) i. LDA, THF, 2-metylpropenylbromid; ii. Pd/C, EtOH, H2. (c) 20 % piperidin/DMF, 30 min. (d) 10 ekv. (39)/10 ekv. HBTU/10 ekv. HOBt/
20 ekv. NMM, DMF, RT, o/n. (e) TFA/H20 (95:5, volum/volum), RT,
2 t.
Det kan brukes mange andre muligheter for organisk f astf asekj emi (se f.eks. Brown, R.D., J. Chem. Soc, Perkin Trans. 1, 19, 3293-3320, 1998, for en oversikt over nyere SPOC-publikasjoner) for å derivatisere konstruksjon (22) mot forbindelser med generell formel (I) (og på samme måte, gjennom det passende ladede derivat, forbindelser med generell formel (II)) . For eksempel kan venstredelen "U-V-W-X-Y" i den generelle formel (I) konstrueres delvis i oppløsning, kobles til konstruksjon (22) og modifiseres videre på den faste fase. For eksempel skjer (reaksjonsskjema 9) en enkel utvidelse av reaksjonsskjema 5 gjennom oksidasjonen av mellomprodukttypen som er bundet til fast fase, med m-klorperbenzosyre i diklormetan før spalting, hvorved man får sulfonanalog (42). Ved å starte fra en variasjon av karboksylsyrer (30), 3-sykloheksyl-2S-(furan-2-ylmetylsulfan-yl) propionsyre (41), fremstilles sulfon (42), et eksempel på generell formel (I), hvor R12="H",(X)0= "-", (W)n= "S02", n = 1, (V)m= "CH2", dvs. R17, R18="H", m = 1, og U = 2-furanyl. Som beskrevet i reaksjonsskjema 5, kan mange variasjoner av karboksylsyre (30) fremstilles ved å følge de generelle betingelsene som er beskrevet, f.eks. (41). Analoger av (42) som undersøker et bredt spekter av (V)mog U i generell formel (I), kan således fremstilles gjennom de generelle betingelsene som er beskrevet i reaksjonsskjemaene 5 og 9.
Reaksjonsskjema 9. (a) 20 % piperidin/DMF, 30 min. (b) 5 ekv.
(41)/5 ekv. HBTU/5 ekv. HOBt/10 ekv. NMM, DMF, RT, o/n.
(c) 5 ekv. m-klorperbenzosyre/DCM, RT, 5 t. (d) TFA/H20 (95:5, volum/volum), RT, 2 t.
Forbindelser med de generelle formlene (I) og (II) fri-gjøres til sist fra den faste fase ved behandling med trifluoreddiksyre/vann, etterfulgt av inndamping, lyofilisering og standard analytisk karakterisering.
En andre strategi for syntesen av forbindelser med de generelle formlene (I) og (II) omfatter: (a) fremstilling av en passende funksjonalisert og beskyttet tetrahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-3-on-, tetrahydrotieno [3, 2-jb] pyrrol-3-on-, heksahydropyrrolo [3, 2- b]pyrrol-3-on-, heksahydrosyklopenta-[ b]pyrrol-6-on-, tetrahydrofuro[3,2-c]pyrazol-6-on-, tetrahydrotieno[3,2-c]pyrazol-6-on-, heksa hydropyrrolo[3,2-c]pyrazol-6-on-, heksahydro-syklopentapyrazol-6-on-, heksahydrofuro[3, 2- b]-pyridin-3-on-, heksahydrotieno[3, 2- b]pyridin-3-on-, oktahydropyrrolo[3, 2- b]pyridin-3-on-, oktahydrosyklopenta [ b]pyridin-7-on-, heksahydrofuro-[3,2-c]pyridazin-7-on-, heksahydrotieno[3, 2-c] - pyridazin-7-on-, oktahydropyrrolo[3,2-c]pyrid-azin-7-on- eller oktahydrosyklopenta[c]pyridazin-7-on-byggeblokk i oppløsning. Foretrukne beskyt-telsesgrupper for oppløsningsfasekjemi er Noc-tert.-butoksykarbonylgruppen og Noc-benzyloksy-karbonylgruppen;
(b) standardfremgangsmåter innen organisk kjemi for omdannelsen av byggeblokk (a) mot forbindelser med de generelle formlene (I) og (II).
I det enkleste eksemplet kan hele venstredelen av en inhibitor med de generelle formler (I) og (II) fremstilles i oppløsning ved hjelp av tradisjonelle organisk-kjemiske fremgangsmåter og kobles sammen til byggeblokk (a) (se reaksjonsskjema 10, eksemplifisert ved fremstilling av og anvendelse av 3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-karboksylsyre-tert.-butyl-ester (45)) .
Reaksjonsskjema 10. (a)<1>BuOCOCl, NMM, DCM, -15 °C, 10 min, under argon, (b) diazometan i dietyleter, -15 °C til RT over 24 t.
(c) eddiksyre. (d) LiCl (10 ekv.) i 80 % vandig eddiksyre, 5 °C til RT over 1 t. (e) 4 M HC1 i dioksan, 0 °C, 2 t. (f) på forhånd fremstilt U-V-W-X-Y-COOH/aktivering, f.eks. HATU/HOAt/NMM, DMF, RT, o/n. Den generelle strategi som er beskrevet i reaksjonsskjema 10, er særlig anvendbar når forbindelsen med generell formel (I) inneholder en substituent som er labil overfor trifluoreddiksyre, idet dette er det siste reagens som anvendes i hver av fastfasereaksjonsskjemaene 4-9. For eksempel (reaksjonsskjema 11) gir behandling i oppløsning av a-hydroksysyre (47) med natriumhydrid i en blanding av dimetylformamid og diklormetan, etterfulgt av tilsetning av 4-tert.-butylbenzylbromid, 2RS-(4-tert.-butylbenzyloksy)-4-metylpentansyre (48). Kobling av (48) til hydrokloridsalt (46) gir (49) , et eksempel på generell formel (I), hvor R<12>= "H", (X)0="-", (W)n<=>"0", n = 1, (V)m= "CH2", dvs. R17, R18="H", m = 1, og U = 4-tert.-butylf enyl. For fagfolk innen utøvelsen av organisk syntese kan 4-tert.-butyl-benzylbromid erstattes med hvilket som helst rimelig Ar-CR17R<18->halogenid, hvorved man får mange variasjoner i karboksylsyre (48) under de viste betingelser. Analoger av (49) som undersøker et bredt spekter av (V)mog U i den generelle formel (I), kan således fremstilles gjennom betingelsene som er angitt i reaksjonsskjema 11.
Reaksjonsskjema 11. (a) 2,2 ekv. NaH, 1:1 DMF/DCM, 1.25 ekv. 4-tert.-benzylbromid, 2 t. (b) 1 ekv. (48), 1 ekv. "-BuOCOCl, 2 ekv. NMM, DCM, -15 °C, 1 t, under nitrogen, så 1 ekv. (46), RT, o/n.
En tredje strategi for syntesen av forbindelser med de generelle formlene (I) og (II), hvor tilsetningen av U-V-W-X-Y
til den beskyttede byggeblokk omfatter flertrinns organiske reaksjoner, omfatter: (a) fremstilling av en passende funksjonalisert og beskyttet tetrahydrofuro[3,2-b]pyrrol-3-on-, tetrahydrotieno[3,2-b]pyrrol-3-on-, heksahydropyrrolo [3,2-b]pyrrol-3-on-, heksahydrosyklopenta-[b]pyrrol-6-on-, tetrahydrofuro[3,2-c]pyrazol-6-on-, tetrahydrotieno[3,2-c]pyrazol-6-on-, heksahydropyrrolo [3,2-c]pyrazol-6-on-, heksahydro-syklopentapyrazol-6-on-, heksahydrofuro[3,2-b]-pyridin-3-on-, heksahydrotieno[3,2-b]pyridin-3-
on-, oktahydropyrrolo[3,2-b]pyridin-3-on-, oktahydrosyklopenta [b]pyridin-7-on-, heksahydrofuro-[3,2-c]pyridazin-7-on-, heksahydrotieno[3, 2-c] - pyridazin-7-on-, oktahydropyrrolo[3,2-c]pyrid-azin-7-on- eller oktahydrosyklopenta[c]pyridazin-7-on-byggeblokk i oppløsning. Foretrukne beskyt-telsesgrupper for oppløsningsfasekjemi er Na-tert.-butoksykarbonylgruppen og Na-benzyloksy-karbonylgruppen;
(b) beskyttelse av ketongruppen i tetrahydrofuro-[3,2-b]pyrrol-3-on-, tetrahydrotieno[3,2-b]-pyrrol-3-on-, heksahydropyrrolo[3,2-b]pyrrol-3-
on-, heksahydrosyklopenta[b]pyrrol-6-on-, tetrahydrofuro[3,2-c]pyrazol-6-on-, tetrahydrotieno-[3,2-c]pyrazol-6-on-, heksahydropyrrolo[3,2-c]-pyrazol-6-on-, heksahydrosyklopentapyrazol-6-on-, heksahydrofuro[3,2-b]pyridin-3-on-, heksahydrotieno [3, 2-b]pyridin-3-on-, oktahydropyrrolo-[3,2-b]pyridin-3-on-, oktahydrosyklopenta[b]-pyridin-7-on-, heksahydrofuro[3,2-c]pyridazin-7-on-, heksahydrotieno[3,2-c]pyridazin-7-on-, oktahydropyrrolo [ 3, 2-c] pyridazin-7-on- eller oktahydrosyklopenta [c]pyridazin-7-on-byggeblokken, f.eks. som et dimetylacetal. Alternativt kan ketonet reduseres til de akirale sekundære
alkoholene og oksideres på nytt som det siste syntesetrinn; (c) standardmetoder innen organisk kjemi for omdannelsen av byggeblokk (b) mot forbindelser med de generelle formlene (I) og (II); (d) mellomprodukter kan fremstilles i oppløsning, etterfulgt av kobling til byggeblokk (b) og videre derivatisering mot forbindelser med de generelle formlene (I) og (II) (se reaksjonsskjema 12, eksemplifisert ved fremstilling og anvendelse av 3-hydroksyheksahydrofuro[3, 2- b]-pyrrol-4-karboksylsyre-tert.-butylester (50)).
Reaksjonsskjema 12. (a) reduksjon, f.eks. NaBH4. (b) 4 M HC1 i dioksan, 0 °C, 2 t. (c) trinnvis omsetning med mellomprodukter for Y, så X, så W etc, for trinnvis å konstruere forbindelsene (52). (d) oksidasjon, f.eks. Dess-Martin-periodan, CH2C12.
Avhengig av typene av kjemiske fremgangsmåter som anvendes for å konstruere venstresiden U-V-W-X-Y i forbindelser med de generelle formlene (I) og (II), kan ketonet alternativt kreve beskyttelse, f.eks. som dimetylacetalet. En slik fremgangsmåte er beskrevet og eksemplifisert i reaksjonsskjema 13 ved fremstillingen og anvendelsen av 3,3-dimetoksyheksahydro-furo[3, 2- b]pyrrol-4-karboksylsyrebenzylester (54). Reaksjonsskjema 13. (a) trietylortoformiat/pTSA/McOH. (b) H2, Pd-C. (c) trinnvis omsetning med mellomprodukter for Y, så X, så W etc, for trinnvis å konstruere forbindelsene (56). (d) tri-f Iuoreddiksyre/CH2C12/H20.
Oppfinnelsen omfatter nye mellomprodukter som beskrevet ovenfor, og fremgangsmåter for fremstilling av forbindelser med generell formel (I) eller (II) fra hver av deres umiddelbare forløpere. Fremgangsmåte for fremstilling av mellomprodukter fra deres umiddelbare forløpere danner også i sin tur en del av oppfinnelsen .
Forbindelser med de generelle formlene (I) og (II) kan anvendes både som laboratorieredskaper og som terapeutiske midler. I laboratoriet er bestemte forbindelser ifølge oppfinnelsen anvendbare ved å fastslå hvorvidt en kjent eller ny-oppdaget cysteinprotease bidrar med en kritisk eller i det minste signifikant biokjemisk funksjon under etableringen eller progresjonen av en sykdomstilstand, en prosess som vanligvis henvises til som "målvalidering".
I henhold til et andre aspekt av oppfinnelsen er det tilveiebrakt en fremgangsmåte for validering av en kjent eller antatt cysteinproteaseinhibitor som et terapeutisk mål, hvor fremgangsmåten omfatter: (a) fastleggelse av in vitro-bindingen av en forbindelse, som beskrevet ovenfor, til en isolert, kjent eller antatt cysteinprotease, hvorved man får et mål for styrke; og eventuelt ett eller flere av trinnene: (b) fastleggelse av bindingen av forbindelsen til nært beslektede homologe proteaser til målet og generell husholdningsprotease (f.eks. trypsin), hvorved man får et mål for selektiviet; (c) overvåkning av en cellebasert funksjonell markør for en bestemt cysteinproteaseaktivitet i nærvær av forbindelsen; og (d) overvåkning av en dyremodellbasert funksjonell markør for en bestemt cysteinproteaseaktivitet i nærvær av forbindelsen.
Oppfinnelsen tilveiebringer derfor en fremgangsmåte for validering av en kjent eller antatt cysteinproteaseinhibitor som et terapeutisk mål. Forskjellige fremgangsmåter og kompleksi-tetsnivåer er passende for den effektive inhibering og "validering" av et bestemt mål. I det første tilfellet omfatter fremgangsmåten fastleggelse av in vitro-bindingen av en forbindelse med generell formel (I) eller (II) til en isolert, kjent eller antatt cysteinprotease, hvorved man får et mål for "styrke". En ytterligere fastleggelse av bindingen av en forbindelse med generell formel (I) eller (II) til nært beslektede homologe proteaser til målet og de generelle husholdningsproteaser (f.eks. trypsin) gir et mål for "selektivitet". Et andre kompleksitetsnivå kan fastlegges ved å overvåke en cellebasert funksjonell markør for en bestemt cysteinproteaseaktivitet i nærvær av en forbindelse med generell formel (I) eller (II) . For eksempel er en "human osteoklastresorpsjonsanalyse" blitt benyttet som et cellebasert sekundært in vitro-testsystem for overvåkning av aktiviteten til kathepsin K og den biokjemiske effekt av proteaseinhibitorer (se f.eks. WO-A-9850533). Det er blitt benyttet en "MHC-II-prosesserings-T-celleaktiverings-analyse" som et cellebasert sekundært in vitro-testsystem for overvåkning av aktiviteten til kathepsin S og den biokjemiske effekt av proteaseinhibitorer (Shi, G.-P. et al., Immunity, 10, 197-206, 1999). Når virus- eller bakterieinfeksjoner undersøkes, vil en slik markør ganske enkelt kunne være en funksjonell fastleggelse av virus- (f.eks. antall mRNA-kopier) eller bakterie-belastning og fastleggelse av den biokjemiske effekt av proteaseinhibitorer. Det tredje kompleksitetsnivå kan fastlegges ved å overvåke en dyremodellbasert funksjonell markør for en bestemt cysteinproteaseaktivitet i nærvær av en forbindelse med den generelle formel (I) eller (II) . For eksempel indikerer murinmodeller på Leishmania- infeksjon, P. vinakei-infeksjon, malariainfeksjon (inhibering av falcipain) og T. cruzi-infeksjon (cruzipain) at inhibering av cysteinproteaser som spiller en nøkkelrolle i patogen propagering, er effektiv når det gjelder å stanse sykdomssymptomer, idet de "validerer" de nevnte mål.
Oppfinnelsen omfatter derfor anvendelsen av en forbindelse med den generelle formel (I) eller (II) ved valideringen av en kjent eller antatt cysteinproteaseinhibitor som et terapeutisk mål.
Forbindelser med de generelle formlene (I) og (II) kan anvendes til in vivo-behandlingen eller profylaksen av sykdommer hvor deltakelse av en cysteinprotease er implisert.
Ifølge et tredje aspekt av oppfinnelsen er det tilveiebrakt en forbindelse med den generelle formel (I) eller (II) for anvendelse innen medisinen, spesielt til profylakse eller behandling av sykdommer hvor sykdomspatologien kan modifiseres ved å inhibere en cysteinprotease.
Ifølge et fjerde aspekt av oppfinnelsen er det tilveiebrakt anvendelse av en forbindelse med den generelle formel (I) eller (II) ved fremstilling av et medikament for profylakse eller behandling av sykdommer hvor sykdomspatologien kan modifiseres ved å inhibere en cysteinprotease.
Bestemte cysteinproteaser virker i den normale fysio-logiske prosess for proteinnedbrytning hos dyr, inkludert mennesker, f.eks. ved nedbrytningen av bindevev. Forhøyede nivåer av disse enzymene i kroppen kan imidlertid resultere i patologiske tilstander som fører til sykdom. Cysteinproteaser har således vært implisert i forskjellige sykdomstilstander, inkludert, men ikke begrenset til, infeksjoner av Pneumocystis carinii, Trypsanoma cruzi, Trypsanoma brucei og Crithidia fusiculata; samt ved osteoporose, autoimmunitet, schistosomiasis, malaria, tumormetastase, metakromatisk leukodystrofi, muskulær dystrofi, amytrofi og lignende. Se WO-A-9404172 og EP-A-0603873 og litteraturhenvisninger angitt i begge disse. I tillegg har en utskilt bakteriell cysteinprotease fra S. aureus, kalt stafylopain, vært implisert som en bakteriell virulens- faktor (Potempa, J. et al., J. Biol. Chem., 262(6), 2664-2667, 1998) .
Oppfinnelsen er anvendbar ved profylakse og/eller behandling av hver av sykdomstilstandene som er nevnt eller implisert ovenfor. Den foreliggende oppfinnelse er også anvendbar ved en fremgangsmåte for behandling eller profylakse av sykdommer forårsaket av patologiske nivåer av cysteinproteaser, særlig cysteinproteaser i papainsuperfamilien, hvor fremgangsmåtene omfatter administrering til et dyr, særlig et pattedyr, helst et menneske, som trenger det av en forbindelse ifølge foreliggende oppfinnelse. Foreliggende oppfinnelse tilveiebringer særlig fremgangsmåter for behandling av sykdommer hvor cysteinproteaser er implisert, inkludert infeksjoner av Pneumocystis carinii, Trypsanoma cruzi, Trypsanoma brucei, Leishmania mexicana, Clostridium histolyticum, Staphylococcus aureus, fot-og munnsykdomsvirus og Crithidia fusiculata; samt ved osteoporose, autoimmunitet, schistosomiasis, malaria, tumormetastase, metakromatisk leukodystrofi, muskulær dystrofi og amytrofi.
Inhibitorer for cruzipain, særlig cruzipainspesifikke forbindelser, kan anvendes til behandlingen av Chagas' sykdom.
I overensstemmelse med denne oppfinnelsen kan en effektiv mengde av en forbindelse med den generelle formel (I) eller (II) administreres for å inhibere proteasen som er implisert ved en bestemt tilstand eller sykdom. Denne doseringsmengden vil selvsagt videre være modifisert i henhold til administrerings-typen for forbindelsen. For å oppnå en "effektiv mengde" for akutt terapi er f.eks. parenteral administrering av en forbindelse med generell formel (I) eller (II) foretrukket. En intra-venøs innsprøyting av forbindelsen i 5 % dekstrose i vann eller normal saltoppløsning, eller en lignende formulering med egnede eksipienser, er mest effektiv, selv om en intramuskulær bolus-injeksjon også er anvendbar. Vanligvis vil den parenterale dose være ca. 0,01 til ca. 100 mg/kg, fortrinnsvis mellom 0,1 og 20 mg/kg, på en måte som opprettholder konsentrasjonen av legemiddel i plasmaet ved en konsentrasjon som er effektiv når det gjelder å inhibere en cysteinprotease. Forbindelsene kan administreres 1-4 ganger daglig ved et nivå som gjør at det oppnås en total daglig dose på ca. 0,4 til ca. 400 mg/kg/dag. Den nøy-aktige mengde av en forbindelse ifølge oppfinnelsen som er tera peutisk effektiv, og veien hvorved en slik forbindelse best administreres, bestemmes lett av fagfolk innen teknikken ved å sammenligne blodnivået av midlet med konsentrasjonen som trengs for å få en terapeutisk effekt. Forløperlegemidler av forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse kan fremstilles ved hjelp av hvilken som helst egnet metode. For de forbindelsene hvor for-løperlegemiddelresten er en ketongruppe, nærmere bestemt ketaler og/eller hemiacetaler, kan omdannelsen bevirkes i overensstemmelse med vanlige metoder.
Forbindelsene ifølge denne oppfinnelsen kan også administreres oralt til pasienten på en slik måte at konsentrasjonen av legemiddel er tilstrekkelig til å inhibere benresorp-sjon eller til å oppnå hvilken som helst annen terapeutisk indikasjon, som beskrevet her. Vanligvis administreres et farma-søytisk preparat som inneholder forbindelsen i en oral dose mellom ca. 0,1 og ca. 50 mg/kg på en måte som er i overensstemmelse med tilstanden til pasienten. Fortrinnsvis vil den orale dose være ca. 0,5 til ca. 20 mg/kg.
De uakseptable toksikologiske effektene forventes når forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse administreres i overensstemmelse med den foreliggende oppfinnelse. Forbindelsene ifølge denne oppfinnelsen, som kan ha god biotilgjengelighet, kan testes i én av flere biologiske analyser for å bestemme konsentrasjonen av en forbindelse som trengs for å få en bestemt farmakologisk effekt.
I henhold til et femte aspekt av oppfinnelsen er det tilveiebrakt et farmasøytisk eller veterinærmedisinsk preparat som omfatter én eller flere forbindelser med den generelle formel (I) eller (II) og en farmasøytisk eller veterinærmedisinsk akseptabel bærer. Andre aktive materialer kan også være til stede, etter hva som anses som passende eller tilrådelig for sykdommen eller tilstanden som behandles eller forhindres.
Bæreren eller, dersom mer enn én er til stede, hver av bærerne må være akseptable i betydning av å være kompatible med de øvrige bestanddelene i preparatet, og ikke skadelig for mot-takeren.
Preparatene omfatter dem som er egnet for rektal, nasal, topisk (inkludert bukkal og sublingual), vaginal eller parenteral (inkludert subkutan, intramuskulær, intravenøs og intradermal) administrering, men fortrinnsvis er preparatet et oralt administrert preparat. Preparatene kan passende presenteres i enhetsdoseringsform, f.eks. tabletter og kapsler med langvarig frigivelse, og kan fremstilles ved hjelp av hvilke som helst metoder som er godt kjent innenfor farmasien.
Slike metoder omfatter trinnet å bringe det ovenfor definerte aktive middel i forbindelse med bæreren. Generelt fremstilles preparatene ved jevnt og intimt å bringe det aktive middel i forbindelse med flytende bærere eller fint oppdelte, faste bærere eller begge deler, og så om nødvendig forme produktet. Oppfinnelsen omfatter fremgangsmåter for fremstilling av et farmasøytisk preparat som omfatter å bringe en forbindelse med generell formel (I) eller (II) sammen eller i forbindelse med en farmasøytisk eller veterinærmedisinsk akseptabel bærer eller et vehikkel.
Preparater for oral administrering ved foreliggende oppfinnelse kan presenteres som atskilte enheter, slik som kapsler, kapsler med pulver eller tabletter som hver inneholder en forutbestemt mengde av det aktive middel; som et pulver eller granulat; som en oppløsning eller en suspensjon av det aktive middel i en vandig væske eller ikke-vandig væske; eller som en olje-i-vann-væskeemulsjon eller en vann-i-olje-væskeemulsjon; eller som en bolus etc.
For preparater for oral administrering (f.eks. tabletter og kapsler) omfatter uttrykket "akseptabel bærer" slike bærere som vanlige eksipienser, f.eks. bindemidler, f.eks. sirup, akasie, gelatin, sorbitol, tragant, polyvinylpyrrolidon (povidon), metylcellulose, etylcellulose, natriumkarboksymetyl-cellulose, hydroksypropylmetylcellulose, sukrose og stivelse; fyllstoffer og bærere, f.eks. maisstivelse, gelatin, laktose, sukrose, mikrokrystallinsk cellulose, kaolin, mannitol, di-kalsiumfosfat, natriumklorid og alginsyre; og slike smøremidler som magnesiumstearat, natriumstearat og andre metallstearater, glyserolstearat, stearinsyre, silikonvæske, talkumvokser, oljer og kolloidal silika. Smaksmidler, slik som peppermynte, vinter-grønnolje, kirsebærsmak og lignende, kan også anvendes. Det kan være ønskelig å tilsette et fargemiddel for å gjøre doserings-formen lett identifiserbar. Tabletter kan også belegges ved hjelp av metoder som er godt kjent innenfor teknikken. En tablett kan lages ved pressing eller støping, eventuelt med én eller flere tilleggsbestanddeler. Pressede tabletter kan fremstilles ved å presse i en egnet maskin det aktive middel i en frittflytende form, slik som et pulver eller granulat, eventuelt blandet med et bindemiddel, smøremiddel, inert fortynningsmiddel, konserveringsmiddel, overflateaktivt eller dispergerende middel. Støpte tabletter kan lages ved å støpe i en egnet maskin en blanding av den oppmalte forbindelse fuktet med et inert flytende fortynningsmiddel. Tablettene kan eventuelt være belagt eller laget hakk i, og kan være formulert slik at det tilveie-bringes sakte eller regulert frigivelse av det aktive middel.
Andre preparater som er egnet for oral administrering, omfatter sugetabletter som omfatter det aktive middel i en smakstilsatt basis, vanligvis sukrose og akasie eller tragant; pastiller som omfatter det aktive middel i en inert basis, slik som gelatin og glyserol, eller sukrose og akasie; og munnvann som omfatter det aktive middel i en egnet flytende bærer.
Parenterale preparater vil generelt være sterile.
Ifølge et sjette aspekt av oppfinnelsen er det tilveiebrakt en fremgangsmåte for fremstilling av et farmasøytisk eller veterinærmedisinsk preparat som beskrevet ovenfor, hvor fremgangsmåten omfatter å bringe den eller de aktive forbindelsen(e) i forbindelse med bæreren, f.eks. ved blanding.
Foretrukne trekk for hvert aspekt av oppfinnelsen er som for ethvert annet aspekt mutatis mutandis.
Oppfinnelsen vil nå bli illustrert med de følgende eksempler:
Oppløsningsfasekjemi - generelle fremgangsmåter
Alle oppløsningsmidler ble innkjøpt fra ROMIL Ltd.
(Waterbeach, Cambridge, UK) ved finhetsgrad SpS eller Hi-Dry, med mindre annet er angitt. Generelle peptidsyntesereagenser ble erholdt fra Chem-Impex Intl. Inc. (Wood Dale IL 60191, USA). Tynnsjiktkromatografi (TLC) ble utført på forbelagte plater (Merck aluminiumsfolie-silika 60 F254, del nr. 5554). Visuali-sering av forbindelser ble oppnådd under ultrafiolett lys
(254 nm) eller ved å anvende passende fargereagens. Hurtig-kolonnerensing ble utført på silikagel 60 (Merck 9385). All analytisk HPLC ble erholdt på Phenomenex Jupiter C4, 5 \ i, 300 A,
250 x 4,6 mm, ved å anvende blandinger av oppløsningsmiddel A = 0,1 % vandig trifluoreddiksyre (TFA) og oppløsningsmiddel B = 90 % acetonitril/10 % oppløsningsmiddel A på automatiserte Agilent-systemer med 215 og/eller 254 nm UV-deteksjon. Med mindre annet er angitt, ble en gradient fra 10 til 90 % B i A i løpet av 25 minutter ved 1,5 ml/min utført for full analytisk HPLC-analyse. HPLC-MS-analyse ble utført på Agilent 1100-serie LC/MSD ved å anvende automatiserte Agilent HPLC-systemer, med en gradient fra 10 til 90 % B i A i løpet av 10 minutter på Phenomenex Columbus Ca, 5 u, 300 A, 50 x 2,0 mm ved 0,4 ml/min. Kjernemagnetisk resonans (NMR) ble oppnådd på et Bruker DPX400 (400 MHz, lH-frekvens; QXI-probe) i de angitte oppløsningsmidler og temperaturer. Kjemiske skiftinger er uttrykt i deler pr. million (8) og er henvist til som restsignaler fra oppløsnings-midlet. Koblingskonstanter (J) er uttrykt i Hz.
Fastfasekjemi - generelle fremgangsmåter
Eksempelvise inhibitorer (1-156) ble fremstilt gjennom en kombinasjon av oppløsnings- og fastfase-Fmoc-baserte kjemiske fremgangsmåter (se "Solid Phase Peptide Synthesis", Atherton, E. og Sheppard, R.C., IRL-Press Ltd., Oxford, UK, 1989, for en generell beskrivelse). En passende beskyttet og funksjonalisert byggeblokk ble fremstilt i oppløsning (f.eks. generell forbindelse (19), reaksjonsskjema 1, så festet reversibelt til fastfasen gjennom en passende linker. Runder med kobling/avbeskyttelse/kjemisk modifisering, f.eks. oksidasjon, ble så utført inntil det ønskede fullengdemolekyl var fullstendig (reaksjonsskjema 2). Eksempelvise inhibitorer (1-156) ble så frigjort (spaltet) fra fastfasen, analysert, renset og analysert med hensyn på inhibering versus en rekke proteaser.
Generelt ble det anvendt multipinner (polyamid 1.2 10 umol ladninger, se www. mimotopes. com) til fastfasesyntesen, selv om hvilken som helst egnet fastfaseoverflate kunne velges. Generelt ble 1,2 umol-"verktøyet" brukt for å tilveiebringe småskala-råeksempler for preliminær screening, mens 10 |.imol-"kronene" ble brukt til oppskaleringssyntese og rensing av foretrukne eksempler. Standard koblings- og Fmoc-avbeskyttelses-metoder ble anvendt (se Grabowska, U. et al., J. Comb. Chem., 2(5), 475-490, 2000, for en grundig beskrivelse av fastfase-multipinnemetoder).
Fremstilling av innledende sammenstilling
Byggeblokk-linkerkonstruksjoner (f.eks. (21), vanligvis 100 mg til 2 g) ble karboksylaktivert med 2-(lH-benzotriazol-1-yl)-1,1,3,3-tetrametyluroniumheksafluorfosfat (HBTU, 1 molekvivalent), 1-hydroksybenzotriazol.hydrat (HOBT, 1 molekvivalent) og N-metylmorfolin (NMM, 2 molekvivalenter) i dimetylformamid (DMF, vanligvis 1 til 10 ml) i 5 minutter. Aminofunksjonaliserte DA/MDA-"kroner" eller HEMA-"verktøy" (10 umol pr.
"krone"/l,2 umol pr. "verktøy", 0,33 molekvivalent av total overflateaminofunksjonalisering sammenlignet med aktivert konstruksjon) ble tilsatt, etterfulgt av ytterligere DMF for å tildekke fastfaseoverflaten. Ladningsreaksjonen fikk stå over natten. Etter ladning over natten ble "kroner"/"verktøy" tatt gjennom standardsykluser med vasking, Fmoc-avbeskyttelse og ladningskvantifisering (se Grabowska, U. et al.), hvorved man fikk ladede byggeblokk-linkerkonstruksjoner (f.eks. (22)). Analyse indikerte praktisk talt kvantitativ ladning i alle eksempler.
Koblingssykluser
Koblingen av standard Fmoc-aminosyrer (10 eller 20 molekvivalenter) ble kjørt via karboksylaktivert med 2-(lH-benzo-triazol-l-yl)-1,1,3,3-tetrametyluroniumheksafluorfosfat (HBTU, 10 eller 20 molekvivalenter), 1-hydroksybenzotriazol.hydrat (HOBT, 10 eller 20 molekvivalenter) og N-metylmorfolin (NMM,
20 eller 40 molekvivalenter) i dimetylformamid, med foraktivering i 5 minutter. Aktiverte arter ble dispensert til de passende brønner i en 96-brønners plate av polypropylen (Beckman, 1 ml brønner, 500 ul oppløsning pr. brønn for "kroner" eller 250 ul oppløsning pr. brønn for "verktøy") i et påkrevd mønster for syntese. Ladede fritt amino-byggeblokk-linkerkonstruksjoner (f.eks. (22)) ble tilsatt, og koblingsreaksjonen fikk forløpe over natten. Etter sammenkobling over natten ble "kroner"/"verk-tøy" tatt gjennom standardsykluser med vasking og Fmoc-avbeskyttelse (se Grabowska, U. et al.). Identiske aktiverings- og koblingsbetingelser ble brukt til koblingen av en rekke karboks ylsyrer (R-COOH). Alternativt ble klorformiater, f.eks. morfolin-4-karbonylklorid (10 molekvivalenter) koblet i DMF med tilsetningen av NMM (10 molekvivalenter).
Acidolytisk spaltingssyklus
En blanding av 95 % TFA og 5 % vann ble fordispensert i to 96-brønners plater av polystyren (Beckman, 1 ml brønner,
600 ul oppløsning pr. brønn for "kroner" eller 300 ul oppløsning pr. brønn for "verktøy") i et mønster som tilsvarer syntesens. Den fullførte multipinnesammenstilling ble tilsatt til den første platen (moderplate), blokken ble tildekket i aluminiumsfolie og spaltet i 2 timer. Den spaltede multipinnesammenstilling ble så fjernet fra den første platen og tilsatt til den andre platen (vaskeplate) i 15 minutter. Den forbrukte multipinnesammenstilling ble så kassert, og moder-/vaskeplatene ble inndampet på en HT-4-Gene Vac-platefordamper.
Analyse og rensing av spaltede eksempler
(a) Eks. 1,2 umol "verktøy". 100 ul dimetylsulfoksid (DMSO) ble tilsatt til hver etterspaltet og tørket vaskeplate-brønn, grundig blandet, overført til den tilsvarende etter-spaltede og tørkede moderplatebrønn og igjen grundig blandet. 10 ul av denne DMSO-oppløsningen ble fortynnet til 100 ul med en 90 % blanding av acetonitril og 10 % 0,1 % vandig TFA. 20 ul alikvoter ble analysert ved hjelp av HPLC-MS og full analytisk HPLC. I hvert tilfelle gav de urensede eksempelmolekylene det forventede [M + H]<+->ion og en HPLC-topp ved > 80 % (ved 215 nm UV-analyse). Dette gav en omtrentlig 10 mM DMSO-forrådsoppløs-ning av urensede eksempler med god kvalitet for preliminær proteaseinhibitorscreening.
(b) Eks. 10 umol "kroner". 500 ul av en 90 % blanding av acetonitril og 10 % 0,1 % vandig TFA ble tilsatt til hver vaskeplatebrønn, grundig blandet, overført til den tilsvarende moderplatebrønn og igjen grundig blandet. 5 ul av denne oppløs-ningen ble fortynnet til 100 ul med en 90 % blanding av acetonitril og 10 % 0,1 % vandig TFA. 20 ul alikvoter ble analysert ved hjelp av HPLC-MS og full analytisk HPLC. I hvert tilfelle gav de urensede eksempelmolekylene det forventede [M + H]<+->ion og
en HPLC-topp ved > 80 % (ved 215 nm UV-analyse). Polystyren-blokkene som inneholder råeksemplene, ble så lyofilisert.
(c) Individuelle eksempler (eks. (b)) ble på nytt opp-løst i en l:l-blanding av 0,1 % vandig TFA og acetonitril (1 ml) og renset ved hjelp av semipreparativ HPLC Phenomenex Jupiter C4, 5 u, 300 A, 250 x 10 mm, en 25-90 % B- i A-gradient i løpet av 25 minutter, 4,0 ml/min, 215 nm UV-deteksjon). Fraksjoner ble lyofilisert i fortarrerte prøveflasker av glass, hvorved man fikk rensede eksempler (vanligvis 2-4 mg, 40-80 % utbytte). (d) Rensede eksempler ble oppløst i et passende volum av DMSO, hvorved man fikk en 10 mM forrådsoppløsning, for nøy-aktig proteaseinhibitorscreening.
Eksempel 1
( Et eksempel på generell formel ( I)). ( 3aS, 6aR )- N-[ IS-( 4-hydroksybenzyl)- 2- okso- 2-( 3- okso- heksahydrofuro [ 3, 2- b] pyrrol- 4-yl) etyl] benzamid
Ved å følge de generelle detaljene fra reaksjonsskjema 1, ble den nødvendige toring-byggeblokk (3aS, SaR)-3-oksoheksahydrofuro [3, 2- b]pyrrol-4-karboksylsyre-9H-fluoren-9-ylmetyester (19) fremstilt i 8 trinn på følgende måte.
(1) Fremstilling av ( 2S, 35)-( 3- hydroksy) pyrrolidin- 1, 2-dikarboksylsyre- 1-( 9H- fluoren- 9- ylmetyl) ester
Trans-3-hydroksy-L-prolin (10,0 g, 76,3 mmol) ble tilsatt til en grundig omrørt, isavkjølt oppløsning av natriumkarbonat (16,90 g, 160,2 mmol) i vann (100 ml). 1,4-dioksan (75 ml) ble tilsatt, hvorved man fikk en opak men mobil blanding. 9-fluorenylmetylklorformiat (20,31 g, 80 mmol) i 1,4- dioksan (75 ml) ble tilsatt i løpet av 1 time, så ble isavkjøl-ingen fjernet, og blandingen ble omrørt ved romtemperatur i ytterligere 2 timer. Ytterligere vann (300 ml) ble tilsatt, reaksjonsblandingen ble vasket med kloroform (2 x 250 ml), og de kombinerte organiske lag ble kassert. Vannfasen ble surgjort med 1 N HC1 inntil ca. pH 2, hvorved man fikk en tykk, opak blanding. Den surgjorte vannblanding ble ekstrahert med kloroform (2 x 500 ml), og den nå klare vannfasen ble kassert. De opake kombinerte kloroformlag ble tørket (Na2S04) , filtrert og redusert under vakuum, hvorved man fikk porsjon 1 (5,70 g). Restutfellingen (en blanding av produkt og tørkemiddel) ble triturert med varm metanol (2 x 250 ml), og de kombinerte metanoloppløsninger ble redusert under vakuum, hvorved man fikk porsjon 2 (10,25 g). Porsjoner 1 og 2 ble hver for seg analysert ved hjelp av TLC (enkelt-UV-flekk, Rf = 0,15, 20 % MeOH i CHC13) og HPLC-MS (enkelt-hoved-UV-topp med Rt = 7,069 minutter, 354,2
[M + H]<+>, 376,2 [M + Na]<+>) og funnet å være identisk, hvorved man fikk et kombinert utbytte på 15,95 g (45,2 mmol, 59,2%). Analyse ved hjelp av<1>H- og<13>C-NMR viste tilstedeværelsen av geometriske cis- og transisomerer rundt 3°-amidbindingen.
8H (DMSO-d6ved 298 K) ; 1, 80-2, 02 (2 HY, m) , 3,49-3,62 (2 H5, m) , 4,12-4,38 (Ha, Hp, Fmoc H-9 og CH2, m) , 5,55/5, 62 (OH) , 7,30-7,31 (2 H, aromatisk, Fmoc H-2 og H-7), 7,35-7,37 (2 H, aromatisk, Fmoc H-3 og H-6), 7,43-7,45 (2 H, aromatisk, Fmoc H-l og H-8), 7,63-7,65 (2 H, aromatisk, Fmoc H-4 og H 5),12,8-13,0
(COOH).
8H (DMSO-d6ved 298 K) ; 31,70/32, 70 (d, Cy) , 44, 68/45, 32 (d, C8) , 46, 94/46, 97 (u, Fmoc C-9) , 67,04/67, 33 (d, Fmoc CH2) ,
68,24/68, 51 (u, Ca) , 73, 12/74,23 (u, Cp), 120, 49/120,52 (u, Fmoc C-4 og C-5), 125,49/125,58 (u, Fmoc C-l og C-8), 127,50 (u, Fmoc C-2 og C-7), 128,04 (u, Fmoc C-3 og C-6), 140,99/141,09 (q, Fmoc C-4' og C-5'), 144,02/144,16 (q, Fmoc C-l' og C8•), 154,33/154,54 (q, OCON), 172,10/172,39 (COOH).
(2) Fremstilling av ( 25, 35)-( 3- hydroksy) pyrrolidin- 1, 2-dikarboksylsyre- 2- allylester- l-{ 9H - f luoren- 9- ylmetyl)-ester
(25,3S)-(3-hydroksy)pyrrolidin-1,2-dikarboksylsyre-l-(9tf-fluoren-9-ylmetyl)ester (10,9 g, 30,8 mmol) ble oppløst i
toluen (75 ml) g i et Dean-Stark-apparat. Allylalkohol (20 ml) ble tilsatt, etterfulgt av p-toluensulfonsyrehydrat (6,05 g,
31,4 mmol). Blandingen ble kokt under tilbakeløpskjøling i 1 time, avkjølt, og CHC13(300 ml) ble tilsatt. Det organiske lag ble vasket med NaHC03(300 ml), 0,1 N HC1 (300 ml) og saltoppløs-ning (300 ml) og så tørket (Na2S04) . Filtrering og reduksjon under vakuum gav et blekgult skum (13,5 g). Råskummet ble renset over silikagel (150 g) under eluering med en gradient av heptan:etylacetat 3:1 -> 4:1. Ønskede fraksjoner ble slått sammen og redusert under vakuum til et fargeløst gummiutbytte på
10,34 g (26,3 mmol, 85,4 %). TLC (enkelt-UV-flekk, Rf = 0,30, heptan:etylacetat 1:1), analytisk HPLC, Rt = 18,849 minutter, HPLC-MS (enkelt-hoved-UV-topp med Rt = 8,354 minutter, 394,2
[M + H]<+>, 416,2 [M + Na] + ) . Analyse ved hjelp av<1>R- og<13>C-NMR viste tilstedeværelsen av geometriske cis- og transisomerer rundt 3°-amidbindingen.
8H (CDC13ved 298 K) ; 2,00-2,21 (2 Hy, m) , 2,70/2,85
(OH, b) , 3,72-3,81 (2 Hs, m) , 4,12-4,67 (Ha, Hp, Fmoc H-9 og CH2, 2 x COOCH2CH=CH2, m) , 5,20-5,40 (2 x COOCH2CH=CH2, m) , 5,82-5,99 (1 x COOCH2CH=CH2, m) , 7,28-7, 33 (2 H, aromatisk, Fmoc H-2 og H-7), 7,34-7,41 (2 H, aromatisk, Fmoc H-3 og H-6), 7,53-7,66 (2 H, aromatisk, Fmoc H-l og H-8), 7,77-7,81 (2 H, aromatisk, Fmoc H-4 og H-5).
8H (CDC13ved 298 K) ; 32,28/33, 04 (d, CY) , 44,98/45, 32 (d, C5) , 47, 56/47, 63 (u, Fmoc C-9) , 66,44 (d, COOCH2CH=CH2) , 68, 01/68, 11 (d, FmocCH2), 68, 32/68, 72 (u, Ca) , 74, 49/75, 67 (u, Cp), 119,20/119, 48 (d, COOCH2CH=CH2) , 120, 34/120, 37 (u, Fmoc C-4 og C-5), 125,36/125,60 (u, Fmoc C-l og C-8), 127,47 (u, Fmoc C-2 og C-7), 128,06/128,12 (u, Fmoc C-3 og C-6), 131,79/131,94 (u, COOCH2CH=CH2) , 141,65/141,71 (q, Fmoc C-4' og C-5'), 144,12/144,34 (q, Fmoc C-l' og C-8'), 155,13/155,59 (q, OCON), 170, 53/170, 55 (COOCH2CH=CH2) .
(3) Fremstilling av ( 2S, 3R )-( 3- formyloksy) pyrrolidin- l, 2-dikarboksylsyre- 2- allylester- l-( 9ff- fluoren- 9- ylmetyl)-ester
Trifenylfosfin (2,76 g, 10,5 mmol, TPP) ble oppløst i tørt tetrahydrofuran (75 ml) under et nitrogenteppe med omrøring og isavkjølt. Diisopropylazodikarboksylat (2,12 g, 2,07 ml, 10,5 mmol DIAD) ble tilsatt dråpevis i løpet av 15 minutter, hvorved man brått fikk en hvit blanding. (2S, 3S) - (3-hydroksy) - pyrrolidin-1,2-dikarboksylsyre-2-allylester-( 9H- fluoren-9-ylmetyl)ester (4,15 g, 10,5 mmol) og maursyre (0,97 g, 0,79 ml, 21,0 mmol) ble blandet i tørt tetrahydrofuran (30 ml) og tilsatt i løpet av 15 minutter til TPP/DIAD-blandingen. Reaksjonsblandingen ble omrørt i ytterligere 1 time ved 0 °C, så over natten ved romtemperatur. Oppløsningsmidlene ble fjernet under vakuum, hvorved man fikk en viskøs, blekgul olje (11,1 g). Råoljen ble renset over silikagel (250 g) under eluering med en gradient av heptan:etylacetat 4:1 -> 1: Produktfraksjoner ble identifisert og redusert under vakuum, hvorved man fikk (2S, 3R)-(3-formyloksy)-pyrrolidin-1,2-dikarboksylsyre-2-allylester-l-( 9H- fluoren-9-ylmetyl)ester/bis-hydrazid av DIAD, hvitt, fast stoff, utbytte 4,0 g. TLC (enkelt-UV-flekk, Rf = 0,30, heptan-.etylacetat 1:1), analytisk HPLC, Rt = 19,064 minutter, HPLC-MS (enkelt-hoved-UV-topp med Rt = 9,721 minutter, 422,2 [M + H]<+>, 444,1 [M + Na]<+>og en ikke-UV-topp med Rt = 5,057 minutter, 205,1 [M + H]<+>, 431,2
[2 M + Na]<+>) .
(4) Fremstilling av ( 25, 3R )-( 3- hydroksy) pyrrolidin- l, 2-dikarboksylsyre- 2- allylester- l-( 9ff- fluoren- 9- ylmetyl) ester
(2S, 3R)-(3-formyloksy)pyrrolidin-1,2-dikarboksylsyre-2-allylester-1-(9H-fluoren-9-ylmetyl)/bis-hydrazid av DIAD-blanding (4,0 g) ble oppløst i allylalkohol (18 ml), cH2S04
(75 jul) ble tilsatt, og det ble varmet opp til koking under til-bakeløpskjøling i 90 minutter. Blandingen ble avkjølt, EtOAc (200 ml) ble tilsatt, og det ble vasket med NaHC03(200 ml), saltoppløsning (200 ml) og tørket (Na2S04). Oppløsningsmidlene ble fjernet under vakuum, hvorved man fikk en viskøs, gyllenbrun olje (4,2 g). Råoljen ble renset over silikagel (150 g) under eluering med en gradient av heptan:etylacetat 2:1 -> 1:1. Ønskede fraksjoner ble slått sammen og redusert under vakuum til et fargeløst gummiutbytte på 1,75 g (4,44 mmol, 42,4 %). TLC (enkelt-UV-flekk, Rf = 0,25, heptan:etylacetat 1:1), analytisk HPLC, Rt = 17,795 minutter, HPLC-MS (enkelt-hoved-UV-topp med Rt = 8,574 minutter, 394,2 [M + H]<+>, 416,2 [M + Na]<+>). Analyse ved
hjelp av1H- og 13C-NMR viste tilstedeværelsen av geometriske cis- og transisomerer rundt 3°-amidbindingen.
5H (CDCI3ved 298 K) ; 2,09-2,19 (2 HY, m) , 2,52 (OH, dd, J 1, 0, 6, 0), 3,54-3, 65/3, 70-3,82 (2 H8, m) , 4,14-4, 20/4,22-4,30 (Fmoc H-9, dm), 4,30-4,39 (1 x Fmoc CH2, m) , 4, 43-4, 58 (Ha + 1 x Fmoc CH2, m) , 4,60-4,65 (Hp, m) 4,65-4,76 (2 x COOCH2CH=CH2, m) , 5, 23-5, 36 (2 x COOCH2CH=CH2, m) , 5,81-6,00 (1 x COOCH2CH=CH2, m) , 7, 28-7, 38 (2 H, aromatisk, Fmoc H-2 og H-7) , 7, 39-7, 46 (2 H, aromatisk, Fmoc H-3 og H-6), 7,53-7,69 (2 H, aromatisk, Fmoc H-l og H-8), 7,73-7,81 (2 H, aromatisk, Fmoc H-4 og H-5).
8H (CDCI3ved 298 K) ; 32,34/33,22 (d, CY) , 44, 65/44,90 (d, C8) , 47, 57/47, 63 (u, Fmoc C-9) , 63,89/64, 22 (u, Ca) , 66, 38/66, 41 (d, COOCH2CH=CH2) , 68, 02 (d, Fmoc CH2) , 71, 84/72, 80 (u, Cp), 119,08/119,31 (d, COOCH2CH=CH2) , 120, 39 (u, Fmoc C-4 og C-5),125,32/125,46/125,56 (u, Fmoc C-l og C-8), 127,46 (u, Fmoc C-2 og C-7), 128,12 (u, Fmoc C-3 og C-6), 132,03/132,14 (u, COOCH2CH=CH2) , 141, 65/141, 69 (q, Fmoc C-4' og C-5'), 144,00/144,16/144,43/144,48 (q, Fmoc C-l' og C-8'), 154, 88/155,25 (q, OCON), 169, 94/169, 99 (COOCH2CH=CH2) .
(5) Fremstilling av ( 25, 3. R) - ( 3- tert ■ - butoksy) pyrrolidin-1, 2- dikarboksysyre- 2- allylester- l-( 9 ff- fluoren- 9- ylmetyl) ester
(2S, 3R)-(3-hydroksy)pyrrolidin-1, 2-dikarboksylsyre-2-allylester-1-(9ff-fluoren-9-ylmetyl)ester (1,75 g, 4,45 mmol) ble oppløst i tørt diklormetan (20 ml) i et 50 ml trykkrør av glass og avkjølt til -78 °C. Isobutylengass (ca. 10 ml) ble kondensert i oppløsningen, og cH2S04 (100 ul) ble tilsatt. En rørepinne ble tilsatt, røret ble lukket, avkjølingen fjernet, og det ble om-rørt ved romtemperatur i 72 timer. Det lukkede rør ble avkjølt til -78 °C, N-metylmorfolin (200 ul, 1 ekv. w.r.t. cH2S04) ble tilsatt, og det fikk varmes opp til romtemperatur, åpnet, med omrøring i løpet av 2 timer. Diklormetan (75 ml) ble tilsatt, og de organiske stoffene ble vasket med NaHC03(75 ml) , så salt-oppløsning (75 ml) og tørket (Na2S04) . Oppløsningsmidlene ble fjernet under vakuum, hvorved man fikk en mobil lys, gyllenbrun olje (2,41 g). Råoljen ble renset over silikagel (150 g) under eluering med en gradient av heptan:etylacetat 4:1 -> 3:1. Ønskede fraksjoner ble slått sammen og redusert under vakuum til en
tykk, klar olje, utbytte 1,66 g (3,69 mmol, 83,0 %) . TLC (enkelt-UV-flekk, Rf = 0,45, heptan:etylacetat 2:1), analytisk HPLC, Rt = 22,811 minutter, HPLC-MS (enkelt-hoved-UV-topp med Rt = 11,193 minutter, 450,2 [M + H]<+>, 472,2 [M + Na]<+>, 921,4 [2 M + Na]+) .
(6) Fremstilling av ( 25, 3R )-( 3- tert.- butoksy) pyrrolidin-1, 2- dikarboksylsyre- l-( 9H- fluoren- 9- ylmetyl) ester
(2S, 3R)-(3-tert.-butoksy)pyrrolidin-1,2-dikarboksylsyre-2-allylester-l-(9H-fluoren-9-ylmetyl)ester (1,60 g,
3,56 mmol) ble oppløst i tørt diklormetan (20 ml) med omrøring. Tetrakistrifenylfosfinpalladium(O) (83 mg, 0,071 mmol,
0,02 ekv.) ble tilsatt, etterfulgt av fenyltrihydrosilan
(0,77 g, 0,674 ml, 7,12 mmol, 2 ekv.). Etter 2 timer ble diklormetan (150 ml) tilsatt, og de organiske stoffene ble vasket med 0,01 N HC1 (150 ml), saltoppløsning (150 ml) og tørket (Na2S04) . Oppløsningsmidlene ble fjernet under vakuum, hvorved man fikk et mørkegrått, fast stoff (2,14 g) . Det urensede faste stoff ble renset over silikagel (75 g) under eluering med en gradient av heptan:etylacetat 2:1 -> 1:6. Ønskede fraksjoner ble slått sammen og redusert under vakuum til et hvitt, krystallinsk stoff i et utbytte på 0,89 g (2,17 mmol, 61,1 %). TLC (enkelt-UV-flekk, Rf = 0,30, heptan:etylacetat 1:2), analytisk HPLC, Rt = 19,135 minutter, HPLC-MS (enkelt-hoved-UV-topp med Rt = 9,386 minutter, 354, 1 [M + H-Bufc]+, 410,2 [M + H]<+>, 432, 1 [M + Na]<+>, 841,1 [2 M + Na]<+>). Analyse ved hjelp av<1>H- og<13>C-NMR viste tilstedeværelsen av geometriske cis- og transisomerer rundt 3°-amidbindingen.
5H (CDC13ved 298 K) ; 1,23 (9 H, s) , 1, 98-2,28 (2 Hv,
m) , 3,40-3,50 (1 H8, m) , 3,68-3,81 (1 H5, m) , 4,10-4,50 (Ha + Hp + Fmoc H-9 + 2 x Fmoc CH2, m) , 7,29-7, 40 (2 H, aromatisk, Fmoc H-2 og H-7), 7,42-7,47 (2 H, aromatisk, Fmoc H-3 og H-6), 7,55-7,70 (2 H, aromatisk, Fmoc H-l og H-8), 7,73-7,85 (2 H, aromatisk, Fmoc H-4 og H-5), 6,30-8,30 (COOH, b).
8H (CDCI3ved 298 K) ; 28,285 (u, (CH3)C), 31,47/32, 29 (d, CY) , 44, 13/44, 38 (d, Cs) , 47, 51/47,60 (u, FmocC-9), 62, 73/62, 95 (u, Ca) , 67,96/68,13 (d, Fmoc, CH2) , 71, 77/72, 67 (u, Cp), 120,33 (u, Fmoc C-4 og C-5), 125,39/125,50/125,55/125,61 (u, Fmoc C-l og C-8), 127,46 (u, Fmoc C-2 og C-7), 128,01/128,07 (u, Fmoc C-3 og C-6), 141,58/141,66 (q, Fmoc C-4' og C-5'),
144,04/144,23/144,46 (q, Fmoc C-l' og C-8'), 154,95/155,32 (q, OCON), 175,19/175,65 (COOH).
(7) Fremstilling av ( 2S, 3R )-( 3- tert.- butoksy)- 2-( 2- diazo-acetyl) pyrrolidin- 1- karboksylsyre- 9 ff- fluoren- 9- yl-metylester
(2S, 3 JR) - (3-tert. -butoksy) pyrrolidin-1, 2-dikarboksylsyre-1-( 9H- fluoren-9-ylmetyl)ester (615 mg, 1,5 mmol) ble opp-løst med omrøring i tørt diklormetan (15 ml). Reaksjonsblandingen ble gjennomboblet med nitrogen og avkjølt til -15 °C. Iso-butylklorformiat (225 mg, 1,6 mmol) i tørt diklormetan (2,5 ml) og N-metylmorfolin (303 mg, 3,0 mmol i tørt diklormetan (2,5 ml) ble tilsatt samtidig 0,5 ml alikvoter i løpet av 15 minutter. Eterisk diazometan (generert fra Diazald (4,7 g, ca. 15 mmol i dietyleter (75 ml)) på natriumhydroksid (5,25 g) i vann
(7,5 ml/etanol (15 ml) ved 60 °C) ble tilsatt til den aktiverte aminosyreoppløsning, og det ble omrørt ved romtemperatur i 24 timer. Eddiksyre (ca. 2 ml) ble tilsatt for å stanse reaksjonen, så ble tert.-butylmetyleter (150 ml) tilsatt, de organiske stoffene ble vasket med vann (3 x 200 ml) og så tørket (Na2S04) . Oppløsningsmidlene ble fjernet under vakuum, hvorved man fikk en tykk, gul olje (890 g). Råoljen ble renset over silikagel (75 g) under eluering med en gradient av heptan:etylacetat 3:1 -> 2:1. Ønskede fraksjoner ble slått sammen og redusert under vakuum, hvorved man fikk (2S, 3R)-(3-tert.-butoksy)-2-(2-diazoacetyl) pyrrolidin-l-karboksylsyre-9ff-fluoren-9-ylmetyl-ester, et blekgult, fast stoff, utbytte 270 mg (0,624 mmol,
41,6 %) . TLC (enkelt-UV-flekk, Rf=0,55, heptan:etylacetat 1:1), analytisk HPLC, Rt = 20,085 minutter, HPLC-MS (2 hoved-UV-topper med Rt = 7,48 minutter, 350,1 [M + H]<+>, 372,1 [M + Na]<+>, 721,0
[2 M + Na]<+>og Rt = 9, 949 minutter, 406,2 [M + H-N2]<+>, 456,2
[M + Na]<+>, 889, 3 [2 M + Na]+) .
Legg merke til at etter HPLC-MS-analyse tilsvarer m/z 350,1 det ønskede toring-produktet (3aS, 6aR)-3-okso-heksahydrofuro[3, 2-b]pyrrol-4-karboksylsyre-9ff-fluoren-9-ylmetylester (19) •
(8) Ringslutning til ( 3aS, 6aR )- 3- oksoheksahydrofuro[ 3, 2 - b ]-pyrrol- 4- karboksylsyre- 9H- fluoren- 9- yImetyester ( 19)
En oppløsning av litiumklorid (205 mg, 4,8 mmol) i vann (1,25 ml) og eddiksyre (5,0 ml) ble tilsatt til (2S,3i?)-(3-tert.-butoksy)-2-(2-diazoacetyl)pyrrolidin-l-karboksylsyre-9H-fluoren-9-ylmetylester (209 mg, 0,483 mmol). Gass ble utviklet, og det gule, oljeaktige, faste stoff ble oppløst i løpet av 1 time, hvorved man fikk en praktisk talt fargeløs oppløsning. Etter 90 minutter ble kloroform (150 ml) tilsatt, og de organiske stoffene ble vasket med NaHCC>3 (2 x 150 ml) , salt-oppløsning (150 ml) og tørket (Na2S04) . Oppløsningsmidlene ble fjernet under vakuum, hvorved man fikk en tykk, gul gummi (200 mg). Rågummien ble renset over silikagel (40 g) under eluering med en gradient av heptan:etylacetat 3:2 — > 1:1. Ønskede fraksjoner ble slått sammen og redusert under vakuum til et hvitt, krystallinsk stoff, utbytte 133 mg (0,38 mmol, 18,6 % fra utgangssyre). TLC (enkelt-UV-flekk, Rf = 0,25, heptan:etylacetat 1:1), analytisk HPLC, bred topp, Rt = 15,2-17,6 minutter, HPLC-MS (enkelt bred UV-topp med Rt = 7,45-8,56 minutter, 350,1 [M + H]<+>, 372, 1 [M + Na]<+>, 721,2 [2 M + Na]<+>). Analyse ved hjelp av<1>H-og<13>C-NMR viste tilstedeværelsen av geometriske cis- og transisomerer rundt 3°-amidbindingen.
5H (CDC13ved 298 K) ; 1,61-1,97 (2 Hy, m) , 3,32-3,45
(1 Hs, m) , 3, 66-3,75/3, 85-3, 95 (1/2 H8+ % H8, dm), 3,95/4,10 (1 x COCH2a+ 1 x COCH2p, dm), 4,15-4,30 (Fmoc H-9 + 2 x Fmoc CH2, m) , 4,40-4,60/4,80-4,92 (H„ + Hp, kompleks), 7,20-7,30 (2 H, aromatisk, Fmoc H-2 og H-7), 7,31-7,42 (2 H, aromatisk, Fmoc H-3 og H-6), 7,50-7,57/7,60-7,66 (2 H, aromatisk, Fmoc H-l og H-8), 7,68-7,76 (2 H, aromatisk, Fmoc H-4 og H-5).
8H (CDCI3ved 298 K) ; 31, 76/32,28 (d, CY) , 45, 59/45,95 (d, C8) , 47, 64 (u, FmocC-9), 62,26/62, 77 (u, C«) , 68, 03/68, 65 (d, Fmoc, CH2) , 71,28 (d, COCH2) , 82, 17/83, 11 (u, Cp), 120, 38 (u, Fmoc C-4 og C-5), 125,41/125,59/125,88 (u, Fmoc C-l og C-8), 127,45/127,49 (u, Fmoc C-2 og C-7), 128,13 (u, Fmoc C-3 og C-6), 141,73 (q, Fmoc C-4' og C-5'), 144,16/144/37/144,88 (q, Fmoc C-1' og C-8'), 155, 33 (q, OCON), 209, 32 (COCH2) .
Ved å følge de generelle retningslinjene fra reaksjonsskjema 2, ble den nødvendige toring-byggeblokk (3aS, 6aR)-3-okso heksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-karboksylsyre- 9H- fluoren-9-yl-metylester (19) omdannet til byggeblokk-linkerkonstruksjonen (21) på følgende måte: (3aS, 6aR)-3-okso-heksahydrofuro[3, 2- b]pyrrol-4-karboksylsyre-9H-fluoren-9-ylmetylester (19) (100 mg, 0,286 mmol) ble oppløst i en blanding av etanol (5,0 ml) og vann (0,75 ml) inneholdende natriumacetat.trihydrat (59 mg, 0,428 mmol, 1,5 ekv.). 4-[[(hydrazinokarbonyl)amino]metyl]sykloheksankarboksylsyre-trifluoracetat (95 mg, 0,286 mmol, 1,0 ekv., Murphy, A.M. et al., J. Am. Chem. Soc, 114, 3156-3157, 1992) ble tilsatt, og blandingen ble kokt under tilbakeløpskjøling i 90 minutter. Kloroform (50 ml) ble tilsatt, og de organiske stoffene ble vasket med HC1 (50 ml, ca. pH 3), tørket (Na2S04) og redusert under vakuum, hvorved man fikk urenset byggeblokk-linker-konstruks jon (21) som en fargeløs gummi. Utbytte 172 mg, analyttisk HPLC, 2 topper, Rt = 16,477 og 18,512 minutter (geometriske cis- og transisomerer), HPLC-MS (2 x UV-topp med Rt = 7,75 og 8,82 minutter, 547, 3 [M + H]<+>, 569, 3 [M + Na]<+>). Urenset (21) ble brukt direkte til å konstruere påfylling.
Ved å følge de generelle retningslinjene fra reaksjonsskjema 2, ble den nødvendige byggeblokk-linkerkonstruksjon (21) festet til den faste fasen, hvorved man fikk ladet byggeblokk-linkerkonstruks jon (22) på følgende måte: Byggeblokk-linkerkonstruksjon (21) (0,26 mmol), 2-(lH-benzotriazol-l-yl)1,1,3,3-tetrametyluroniumheksafluorfosfat (HBTU, 98,6 mg, 0,26 mmol) og 1-hydroksybenzotriazol.hydrat (HOBT, 39,8 mg, 0,26 mmol) ble oppløst i dimetylformamid (3 ml), og N-metylmorfolin (NMM, 58 ul, 0,52 mmol) ble tilsatt. Etter foraktivering i 5 minutter ble frie amin-"verktøy" (72 x 1,2 umol) tilsatt, etterfulgt av dimetylformamid (5,5 ml) og fikk stå over natten. Den forbrukte koblingsoppløsning ble så tilsatt til frie amin-"kroner" (10 x 10 umol) og fikk stå over natten. Standardvasking og analyser indikerte kvantitativ påfylling.
Ved å følge de generelle retningslinjene fra reaksjonsskjema 2, ble den nødvendige ladede byggeblokk-linkerkonstruksjon (22) utarbeidet på den faste fase på følgende måte: Ladet konstruksjon (22) ble utformet til eksempelforbindelse 1, (3aS, 6aR)-N-[IS-(4-hydroksybenzyl)-2-okso-2-(3- oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyrrol-4-yl)etyl]benzamid, ved hjelp av standard Fmoc-avbeskyttelse og sekvensvis kobling med Fmoc-Tyr-(OBut)-OH og så benzosyre. Den urensede eksempelforbindelse ble spaltet og analysert (se generelle teknikker). HPLC Rt =
10,15 minutter (> 95 %), HPLC-MS 395,1 [M + H]<+>.
De følgende eksempler (2-82) ble fremstilt som nærmere angitt for eksempel 1, idet det ble koblet med de nødvendige reagenser, hvorved man fikk fullengdemolekylet.
Eksempel 2
( 3aS, 6aR ) - bifenyl- 4- karboksylsyre-[ IS-( 4- hydroksybenzyl)- 2- okso-2-( 3- oksoheksahydrofuro[ 3, 2 - b ] pyrrol- 4- yl) etyl] amid
HPLC, Rt = 14,94-15,46 minutter (> 90 %), HPLC-MS 471,2 [M + H]<+.>
Eksempel 3
( 3aS, 6aR )- 4- tert.- butyl- N-[ IS-( 4- hydroksybenzyl)- 2- okso- 2-( 3-oksoheksahydrofuro[ 3, 2- b] pyrrol- 4- yl) etyl] benzamid
HPLC, Rt = 15,29-15,89 minutter (> 90 %), HPLC-MS 451,3 [M + H]<+.>
Eksempel 4
( 3a5, 6aR ) - N- [ IS- ( 4- hydroksybenzyl) - 2- okso- 2- ( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2 - b ] pyrrol- 4- yl) etyl]- 5- tiofen- 2- ylnikotinamid
HPLC, Rt = 11,12 minutter (> 90 %), HPLC-MS 478,2 [M + H]<+.>
Eksempel 5
( 3aS, 6a. R) - 2- pyridin- 3- yltiazol- 4- karboksylsyre- [ IS- ( 4- hydroksybenzyl) - 2- okso- 2-( 3- oksoheksahydrofuro[ 3, 2 - b ] pyrroi- 4- yl) etyl]-amid
HPLC, Rt = 8,58 minutter (> 90 %), HPLC-MS 479,2 [M + H]<+.>
Eksempel 6
( 3aS, 6aR)- N-[ IS-( 4- hydroksybenzyl)- 2- okso- 2-( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2- b] pyrrol- 4- yl) etyl]- 4- tiofen- 2- ylbenzamid
HPLC, Rt = 14,77-15,31 minutter (> 90 %), HPLC-MS 477,2 [M + H]<+.>
Eksempel 7
( 3aS, 6a. R) - N- [ 15- ( 4- hydroksybenzyl) - 2- okso- 2- ( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2 - b ] pyrrol- 4- yl) etyl]- 4- trifluormetoksybenzamid
HPLC, Rt = 14,68 minutter (> 90 %), HPLC-MS 479,2 [M + H]<+.>
Eksempel 8
( 3a5, 6aR )- bifenyl- 4- karboksylsyre-[ 3- metyl- lS-( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2 - b ] pyrrol- 4- karbonyl) butyl] amid
HPLC, Rt = 16,90-18,04 minutter (> 90 %), HPLC-MS 421,3 [M + H]<+.>
Eksempel 9
( 3aS, 6a. R) - 4- tert. - butyl- N- [ 3- metyl- lS- ( 3- oksoheksahydrof uro-[ 3, 2 - b ] pyrrol- 4- karbonyl) butyl] benzamid
HPLC, Rt = 17,45-18,62 minutter (> 90 %), HPLC-MS 401,2 [M + H]<+>.
Eksempel 10
( 3aS, 6a. R) - N- [ 3- metyl- lS- ( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2 - b ] pyrrol- 4-karbonyl) butyl]- 4- fenoksybenzamid
HPLC, Rt = 17,26-18,38 minutter (> 90 %), HPLC-MS 437,2 [M + H]<+>.
Eksempel 11
( 3aS, 6aR )- N-[ 3- metyl- lS-( 3- oksoheksahydrofuro[ 3, 2 - b ] pyrrol- 4-karbonyl) butyl]- 3- fenoksybenzamid
HPLC, Rt = 17,34-18,52 minutter (> 90 %), HPLC-MS 437,2 [M + H]<+>.
Eksempel 12
( 3a5, 6aR )- 4- brom- N-[ 3- metyl- lS-( 3- oksoheksahydrofuro[ 3, 2 - b ]-pyrrol- 4- karbonyl) butyl] benzamid
HPLC, Rt = 14,81 minutter (> 90 %), HPLC-MS 423,2/425,2 [M + H]<+.>
Eksempel 13
( 3a5, 6aR )- 3- brom- N-[ 3- metyl- lS-( 3- oksoheksahydrofuro[ 3, 2 - b ]-pyrrol- 4- karbonyl) butyl] benzamid
HPLC, Rt = 14,85-16,20 minutter (> 90 %), HPLC-MS 423,2/425,2
[M + H] + .
Eksempel 14
( 3aS, 6aR )- 4- isopropyl- N-[ 3- metyl- lS-( 3- oksoheksahydrofuro-[ 3, 2- b] pyrrol- 4- karbonyl) butyl] benzamid
HPLC, Rt = 16,41-17,65 minutter (> 90 %), HPLC-MS 387,2 [M + H]<+>.
Eksempel 15
( 3aS, SaR )- N-[ 3- metyl- lS-( 3- oksoheksahydrofuro[ 3, 2 - b ] pyrrol- 4-karbonyl) butyl]- 4- vinylbenzamid
HPLC, Rt = 14,63 minutter (> 90 %), HPLC-MS 371,1 [M + H]<+>.
Eksempel 16
( 3aS, 6aR)- 4- imidazol- l- yl- N-[ 3- metyl- lS-( 3- oksoheksahydrofuro-[ 3, 2- b] pyrrol- 4- karbonyl) butyl] benzamid
HPLC, Rt = 9,20 minutter (> 90 %), HPLC-MS 411,2 [M + H]<+.>
Eksempel 17
( 3aS, 6aR)- N-[ 3- metyl- l S -( 3- oksoheksahydrofuro[ 3, 2- b] pyrroi- 4-karbonyl) butyl]- 4- tiofen- 2- ylbenzamid
HPLC, Rt = 16,49-18,34 minutter (> 90 %), HPLC-MS 427,2 [M + H]<+>.
Eksempel 18
( 3a5, 6a£)- N-[ 3- metyl- lS-( 3- oksoheksahydrofuro[ 3, 2- b] pyrrol- 4-karbonyl) butyl]- 4- oksazol- 5- ylbenzamid
HPLC, Rt = 12,79 minutter (> 90 %), HPLC-MS 412,2 [M + H]<+>.
Eksempel 19
( 3aS, 6aR )- 2- fenyltiazol- 4- karboksylsyre-[ 3- metyl- lS-( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2 - b ] pyrrol- 4- karbonyl) butyl] amid
HPLC, Rt = 16,41-17,80 minutter (> 90 %), HPLC-MS 428,2 [M + H]<+.>
Eksempel 20
( 3aS, 6af?) - 5- fenyltiofen- 2- karboksylsyre- [ 3- metyl- lS- ( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2 - b ] pyrrol- 4- karbonyl) butyl] amid
HPLC, Rt = 16,89 minutter (> 90 %), HPLC-MS 427,2 [M + H]<+>.
Eksempel 21
J_3aS, Sa R ) - kinolin- 6- karboksylsyre- [ 3- metyl- lS- ( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2 - b ] pyrrol- 4- karbonyl) butyl] amid
HPLC, Rt = 9,08 minutter (> 90 %), HPLC-MS 396,2 [M + H]<+.>
Eksempel 22
( 3aS, 6aR)- N-[ 3- metyl- lS-( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2- b] pyrrol- 4-karbonyl) butyl]- 4-[ 1, 2, 3] tiadiazol- 4- ylbenzamid
HPLC, Rt = 13,41 minutter (> 90 %), HPLC-MS 429,2 [M + H]<+>.
Eksempel 23
( 3aS, 6aK)- N-[ 3- metyl- lS-( 3- oksoheksahydrofuro[ 3, 2- b] pyrrol- 4-karbonyl) butyl]- 5- tiofen- 2- ylnikotinamid
HPLC, Rt = 13,24 minutter (> 90 %), HPLC-MS 428,2 [M + H]<+>.
Eksempel 24
( 3aS, 6aR)- 2- pyridin- 3- yltiazol- 4- karboksylsyre-[ 3- metyl- lS-( 3-oksoheksahydrofuro[ 3, 2- b] pyrrol- 4- karbonyl) butyl] amid
HPLC, Rt = 10,22 minutter (> 90 %), HPLC-MS 429,2 [M + H]<+>.
Eksempel 25
( 3aS, 6aR )- N-[ 3- metyl- lS-( 3- oksoheksahydrofuro[ 3, 2 - b ] pyrrol- 4-karbonyl) butyl]- 4- trifluormetoksybenzamid
HPLC, Rt = 16,90-18,34 minutter (> 90 %), HPLC-MS 429,2 [M + H]<+.>
Eksempel 26
( 3aS, 6aR)- 4- tert.- butyl- N-[ IS-( 3- hydroksybenzyl)- 2- okso- 2-( 3-oksoheksahydrofuro[ 3, 2 - b ] pyrrol- 4- yl) etyl] benzamid
HPLC, Rt = 16,14-17,02 minutter (> 90 %), HPLC-MS 451,2 [M + H]<+.>
Eksempel 27
( 3aS, 6aR )- N-[ IS-( 3- hydroksybenzyl)- 2- okso- 2-( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2 - b ] pyrrol- 4- yl) etyl] - 4- tiof en- 2- ylbenzamid
HPLC, Rt = 15,31-16,07 minutter (> 90 %), HPLC-MS 477,2 [M + H]<+.>
Eksempel 28
( 3aS, SaR )- 4- tert.- butyl- N-[ IS-( 4- fluorbenzyl)- 2- okso- 2-( 3- oksoheksahydrof uro [ 3, 2 - b ] pyrrol- 4- yl) etyl] benzamid
HPLC, Rt = 18,37-19,63 minutter (> 90 %), HPLC-MS 453,1 [M + H]<+>.
Eksempel 29
( 3aS, SaR ) - N-[ IS-( 4- fluorbenzyl)- 2- okso- 2-( 3- oksoheksahydrofuro-[ 3, 2 - b ] pyrrol- 4- yl) etyl]- 4- tiofen- 2- ylbenzamid
HPLC, Rt = 17,45-18,59 minutter (> 90 %), HPLC-MS 479,2 [M + H]<+>.
Eksempel 30
( 3aS, 6aR )- morfolin- 4- karboksylsyre-[ IS-( 4- hydroksybenzyl)- 2-okso- 2-( 3- oksoheksahydrofuro[ 3, 2 - b ] pyrrol- 4- yl) etyl] amid
HPLC, Rt = 7,38 minutter (> 95%), HPLC-MS 404,2 [M + H]<+>.
Eksempel 31
( 3aS, SaR )- morfolin- 4- karboksylsyre-[ 3- metyl- lS-( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2- b] pyrrol- 4- karbonyl) butyl] amid
HPLC-MS 354,2 [M + H]<+>.
Eksempel 32
( 3aS, SaR )- morfolin- 4- karboksylsyre-[ lS- sykloheksylmetyl- 2- okso-2-( 3- oksoheksahydrofuro[ 3, 2- b] pyrrol- 4- yl) etyl] amid
HPLC-MS 394,2 [M + H]<+>.
Eksempel 33
( 3aS, SaR )- morfolin- 4- karboksylsyre-[ lS- benzyl- 2- okso- 2-( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2- b] pyrrol- 4- yl) etyl] amid
HPLC, Rt = 10,07 minutter (> 95%), HPLC-MS 388,1 [M + H]<+>.
Eksempel 34
( 2RS , 3aS, 6aJR) - 4- ( 2- benzyloksy- 3- [ sykloheksyl] propionoyl) tetra-hydrof uro [ 3, 2 - b ] pyrrol- 3- on
HPLC, Rt = 17,5-19,7 minutter (> 90 %), HPLC-MS 372,4 [M + H]<+>, 390,3 [M + H + 18]<+>(a) Fremstilling av 3- sykloheksyl- 2S- hydroksypropionsyre ( forbindelse ( 25), reaksjonsskjema 4) En oppløsning av natriumnitritt (12,1 g, 175 mmol) i vann (40 ml) ble tilsatt dråpevis til en omrørt suspensjon av (S)-a-aminosykloheksanpropionsyrehydrat (5 g, 26,5 mmol) i 0,5 M svovelsyre (120 ml, 60 mmol) ved 0 °C i løpet av 1,5 timer. Blandingen fikk varmes opp til omgivelsestemperatur i løpet av 20 timer. Produktet ble ekstrahert over i dietyleter (2 x 25 ml), så ble de eteriske lag vasket med mettet, vandig natriumkloridoppløsning (2 x 25 ml) , tørket (Na2S04) , og oppløs-ningsmidlene ble fjernet under vakuum. Resten (5,3 g) ble re-krystallisert fra dietyleter (10 ml) og heptan (25 ml), hvorved man fikk 3-sykloheksyl-2S-hydroksypropionsyre som et hvitt, fast stoff, utbytte 2,4 g (53 %) .
8H (400MHz, CDC13ved 298 K) ; 0, 89-1, 35 (5 H, m) og 1,51-1,86 (7 H, m) (OCHCH2og sykloheksyl), 4,32 (1 H, OCHCH2,
m) .
(b) Fremstilling av 2f?S- benzyloksy- 3- sykloheksylpropionsyre ( forbindelse ( 26), reaksjonsskjema 4)
Natriumhydrid (265 mg 60 % dispersjon i olje, 6,6 mmol) ble tilsatt i to porsjoner til en omrørt blanding av 3-syklo heksyl-2S-hydroksypropionsyre (0,52 g, 3,0 mmol), dimetylformamid (5 ml) og diklormetan (5 ml) ved 0 °C i løpet av 5 minutter. Blandingen ble omrørt ved 0 °C i 5 minutter og så ved omgivelsestemperatur i 45 minutter. Benzylbromid (0,45 ml, 3,8 mmol) ble tilsatt, og blandingen ble så omrørt i 1 time før dimetylformamid (5 ml) ble tilsatt. Etter omrøring i 4 timer ble kalium-jodid (50 mg, 0,3 mmol) tilsatt. Blandingen ble omrørt i 20 timer og så varmet opp ved 55 °C i 1 time og fikk så avkjøles til omgivelsestemperatur og helt over i vann (15 ml). En mettet, vandig natriumkloridoppløsning (5 ml) ble tilsatt, og blandingen ble så ekstrahert med diklormetan (5 ml, så 10 ml) som så ble kassert. Vannlaget ble surgjort ved å anvende 1 M saltsyre (10 ml) og så ekstrahert med diklormetan (2 x 10 ml). Diklormetanlaget ble tørket (MgS04) , og oppløsningsmidlet ble fjernet under vakuum. Resten (0,55 g) ble oppløst i dimetylformamid
(8 ml) og så avkjølt til 0 °C før tilsetning av natriumhydrid (190 mg av 60 % dispersjon i olje, 4,75 mmol). Blandingen ble omrørt i 30 minutter, og så ble polymerbundet isocyanat (380 mg, 2 mmol Ng-<1>) tilsatt. Blandingen ble omrørt i 2 timer ved omgivelsestemperatur og så helt over i vann (15 ml). IM saltsyre (10 ml) ble tilsatt, og produktet ble så ekstrahert over i diklormetan (2 x 10 ml), tørket (Na2S04), og oppløsningsmidlet ble fjernet under vakuum. Resten ble renset ved hjelp av hurtigkromatografi over silikagel under eluering med en gradient av metanol:diklormetan 0:1 -> 1:20. Passende fraksjoner ble slått sammen, og oppløsningsmidlene ble fjernet under vakuum, hvorved man fikk 2RS-benzyloksy-3-sykloheksylpropionsyre som en fargeløs olje, utbytte 41 mg (5,2 %).
HPLC-MS (enkelt-hoved-UV-topp med Rt=9,47 minutter, 261,2 [M - H]~, 285, 2 [M + Na]<+>, 547, 3 [2 M + Na]<+>).
8H (400M Hz, CDC13ved 298 K) ; 0,72-1, 03 (2 H, sykloheksan, m), 1,08-1,38 (3 H, sykloheksan, m), 1,45-1,93 (6 H + 2 Hp, sykloheksan, m), 3,93-4,18 (1 Ha, OCHCO), 4,35-4,53 (1H.. , CH20, d, J = 11,52 Hz), 4, 68-4, 88 (1 H., CH20, d, J = 11,54 Hz), 7,20-7,47 (5 H, ArH, m), 9,36 (1 H, OH, brs).
Forbindelse (26) ble koblet under standardbetingelser til ladet byggeblokk-linkerkonstruksjon (22) og så spaltet, hvorved man fikk eksempelforbindelse 34.
Eksempel 35
( 3aS, 6aR ) - morfolin- 4- karboksylsyre- [ l£- benzylsulfanylmetyl- 2-okso- 2-( 3- oksoheksahydrofuro[ 3, 2- b] pyrrol- 4- yl) etyl] amid
HPLC, Rt = 12,15 minutter (> 95 %), HPLC-MS 434,1 [M + H]<+>.
Eksempel 36
( 3aS, 6a. R) - N- [ 3- metyl- IS- ( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2- b] pyrrol- 4-karbonyl) butyl] benzamid
HPLC, Rt = 12,43 minutter (> 95 %), HPLC-MS 345,2 [M + H]<+>.
Eksempel 37
( 3aS, 6aJ?) - N- [ lf?- benzylsulfanylmetyl- 2- okso- 2- ( 3- oksoheksahydrof uro [ 3, 2- b] pyrrol- 4- yl) etyl] benzamid
HPLC, Rt = 15,09 minutter (> 95 %), HPLC-MS 425,1 [M + H]<+.>
Eksempel 38
( 3aS, 6a. R) - N- [ lS- sykloheksylmetyl- 2- okso- 2- ( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2 - b ] pyrrol- 4- yl) etyl] benzamid
HPLC, Rt=15,63 minutter (> 90 %), HPLC-MS 385,3 [M + H]<+>, 791,3 [2 M + Na]<+>.
Eksempel 39
( 3aS, 6aR )- N-[ IS benzyl- 2- okso- 2-( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2 - b ] - pyrrol- 4- yl) etyl] benzamid
HPLC, Rt = 12,85 minutter (> 90 %), HPLC-MS 379,1 [M + H]<+.>
Eksempel 4 0
( 3aS, 6aR )- furan- 3- karboksylsyre-[ lS- syklopentylmetyl- 2- okso- 2-( 3- oksoheksahydrofuro[ 3, 2 - b ] pyrrol- 4- yl) etyl] amid
HPLC, Rt = 13,23 minutter (> 95 %), HPLC-MS 361,2 [M + H]<+.>
Eksempel 41
( 3aS, 6a. R) - N- [ IS- ( 4- hydroksybenzyl) - 2- okso- 2- ( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2- b] pyrrol- 4- yl) etyl] - 2- fenylacetamid
HPLC, Rt = 10,71 minutter (> 95 %), HPLC-MS 409,1 [M + H]<+.>
Eksempel 42
( 3aS, 6aR )- N-[ 3- metyl- lS-( 3- oksoheksahydrofuro[ 3, 2 - b ] pyrrol- 4-karbonyl) butyl]- 2- fenylacetamid
HPLC, Rt = 13,00 minutter (> 95 %), HPLC-MS 359,2 [M + H]<+.>
Eksempel 43
( 3aS, 6aR )- N-[ lR- benzylsulfanylmetyl- 2- okso- 2-( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2 - b ] pyrrol- 4- yl) etyl]- 2- fenylacetamid
HPLC, Rt = 15,53 minutter (> 90 %), HPLC-MS 439,1 [M + H]<+.>
Eksempel 4 4
( 3aS, 6aR )- N-[ lS- sykloheksylmetyl- 2- okso- 2-( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2 - b ] pyrrol- 4- yl) etyl]- 2- fenylacetamid
HPLC, Rt = 18,5 minutter (> 90 %), HPLC-MS 399,2 [M + H]<+.>
Eksempel 4 5
( 3aS, 6aR )- N-[ lS- benzyl- 2- okso- 2-( 3- oksoheksahydrofuro[ 3, 2 - b ]-pyrrol- 4- yl) etyl]- 2- fenylacetamid
HPLC, Rt = 13,2 minutter (> 90 %), HPLC-MS 393,2 [M + H]<+.>
Eksempel 4 6
( 3aS, 6aR )- furan- 3- karboksylsyre-[ IS-( 4- hydroksybenzyl)- 2- okso- 2-( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2 - b ] pyrrol- 4- yl) etylamid
HPLC, Rt = 8,65 minutter (> 95 %), HPLC-MS 385,2 [M + H]<+.>
Eksempel 47
( 3aS, 6aR )- furan- 3- karboksylsyre-[ 3- metyl- lS-( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2 - b ] pyrrol- 4- karbonyl) butyl] amid
HPLC, Rt = 10,95 minutter (> 90 %), HPLC-MS 335,1 [M + H]<+>, 357,1 [M + Na]<+>.
Eksempel 4 8
( 3aS, 6aR ) - furan- 3- karboksylsyre- [ lJR- benzylsulfanylmetyl- 2- okso-2-( 3- oksoheksahydrofuro[ 3, 2 - b ] pyrrol- 4- yl) etyl] amid
HPLC, Rt = 13,68 minutter (> 90 %), HPLC-MS 415,1 [M + H]<+.>
Eksempel 4 9
( 3aS, 6aR )- furan- 3- karboksylsyre-[ 15- sykloheksylmetyl- 2- okso- 2-( 3- oksoheksahydrofuro[ 3, 2 - b ] pyrrol- 4- yl) etyl] amid
HPLC, Rt = 14,39 minutter (> 90 %), HPLC-MS 375,2 [M + H]<+>, 771,3 [2 M + Na]<+>.
Eksempel 50
( 3aS, 6aR )- furan- 3- karboksylsyre-[ lS- ben2yl- 2- okso- 2-( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2- b] pyrrol- 4- yl) etyl] amid
HPLC, Rt = 11,51 minutter (> 90 %), HPLC-MS 369,1 [M + H]<+>.
Eksempel 51
( 3aS, 6aiR) - tiofen- 3- karboksylsyre- [ 15- syklopentylmetyl- 2- okso- 2-( 3- oksoheksahydrofuro[ 3, 2 - b ] pyrrol- 4- yl) etyl] amid
HPLC, Rt = 14,07 minutter (> 95 %), HPLC-MS 377,3 [M + H]<+.>
Eksempel 52
( 3aS, 6aR )- tiofen- 3- karboksylsyre-[ 15-( 4- hydroksybenzyl)- 2- okso-2-( 3- oksoheksahydrofuro[ 3, 2- b] pyrrol- 4- yl) etyl] amid
HPLC, Rt = 11,75 minutter (> 95 %), HPLC-MS 401,3 [M + H]<+.>
Eksempel 53
( 3aS, 6aR )- tiofen- 3- karboksylsyre-[ 3- metyl- lS-( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2 - b ] pyrrol- 4- karbonyl) butyl] amid
HPLC, Rt = 14,01 minutter (> 90 %), HPLC-MS 351,1 [M + H]<+>, 373,1 [M + Na] + .
Eksempel 54
( 3aS, 6aR ) - tiofen- 3- karboksylsyre- [ li?- benzylsulf anylmetyl- 2- okso-2-( 3- oksoheksahydrofuro[ 3, 2- b] pyrrol- 4- yl) etyl] amid
HPLC, Rt = 14,51 minutter (> 95 %), HPLC-MS 431,1 [M + H]}.
Eksempel 55
( 3aS, 6aR )- tiofen- 3- karboksylsyre-[ 15- sykloheksylmetyl- 2- okso- 2-( 3- oksoheksahydrofuro[ 3, 2 - b ] pyrrol- 4- yl) etyl] amid
HPLC, Rt = 15,11 minutter (> 90 %) , HPLC-MS 391,1 [M + H]<+>, 803,3 [2 M + Na]<+>.
Eksempel 56
( 3aS, 6aR)- tiofen- 3- karboksylsyre-[ lS- benzyl- 2- okso- 2-( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2- Jb] pyrrol- 4- yl) etyl] amid
HPLC, Rt = 12,27 minutter (> 95 %), HPLC-MS 385,1 [M + H]<+>, 407,1 [M + Na]<+>, 791,2 [2 M + Na]<+>.
Eksempel 57
( 3aS, 6aR ) - furan- 3- karboksylsyre- [ 3, 3- dimetyl- lS- ( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2 - b ] pyrrol- 4- karbonyl) butyl] amid
HPLC, Rt = 12,50 minutter (> 95 %), HPLC-MS 349,2 [M + H]<+>.
Eksempel 58
( 3aS, 6aR )- N-[ 15-( 4- bydroksybenzyl)- 2- okso- 2-( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2- Jb] pyrrol- 4- yl) etyl] - 3- fenylpropionamid
HPLC, Rt = 11,72 minutter (> 90 %), HPLC-MS 423,2 [M + H]<+>.
Eksempel 59
( 3a5, 6aR ) - N- [ 3- metyl- lS- ( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2- Jb] pyrrol- 4-karbonyl) butyl]- 3- fenylpropionamid
HPLC, Rt = 13,46 minutter (> 90 %), HPLC-MS 373,1 [M + H]<+>, 767,3 [2 M + Na]<+>.
Eksempel 60
( 3a5, 6aR )- N-[ l£- benzylsulfanylmetyl- 2- okso- 2-( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2 - b ] pyrrol- 4- yl) etyl]- 3- fenylpropionamid
HPLC, Rt = 16,22 minutter (> 90 %), HPLC-MS 453,2 [M + H]<+>, 475,0 [M + Na] + .
Eksempel 61
( 3aS, 6aiR) - N- [ lS- sykloheksylmetyl- 2- okso- 2- ( 3- oksoheksahydrofuro-[ 3, 2- Jb] pyrrol- 4- yl) etyl] - 3- fenylpropionamid
HPLC-MS 413,2 [M + H]<+>.
Eksempel 62
( 3aS, 6aR )- N-[ lS- benzyl- 2- okso- 2-( 3- oksoheksahydrofuro[ 3, 2 - b ]-pyrrol- 4- yl) etyl]- 3- fenylpropionamid
HPLC, Rt = 16,68 minutter (> 90 %), HPLC-MS 407,2 [M + H]<+>, 835,2 [2 M + Na]\ Eksempel 63 ( 3aS, 6aR )- tiofen- 3- karboksylsyre-[ 3, 3- dimetyl- lS-( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2- b] pyrrol- 4- karbonyl) butyl] amid
HPLC, Rt = 13,24 minutter (> 95 %), HPLC-MS 365,2 [M + H]<+>.
Eksempel 64
( 3aS, 6aR ) - benzo [ Jb] tiofene- 2- karboksylsyre- [ IS- ( 4- hydroksybenzyl) - 2- okso- 2-( 3- oksoheksahydrofuro[ 3, 2- b] pyrroi- 4- yl) etyl]-amid
HPLC, Rt =13,10 minutter (> 85 %), HPLC-MS 451,1 [M + H]<+>, 923,2 [2 M + Na]<+>.
Eksempel 65
( 3a5, 6aR ) - enzo [ b ] tiofen- 2- karboksylsyre- [ 3- metyl- 15- ( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2 - b ] pyrrol- 4- karbonyl) butyl] amid
HPLC, Rt = 15,62 minutter (> 90 %), HPLC-MS 401,1 [M + H]<+>, 823,2 [2 M + Na]<+>.
Eksempel 66
( 3aS, 6aR ) - benzo [ b ] tiofen- 2- karboksylsyre- [ liR- benzylsulfanylmetyl- 2- okso- 2-( 3- oksoheksahydrofuro[ 3, 2 - b ] pyrrol- 4- yl) etyl] amid
HPLC, Rt = 17,47 minutter (> 90 %), HPLC-MS 481,1 [M + H]\ 983,2 [2 M + Na]<+>.
Eksempel 67
( 3aS, 6aR ) - benzo [ ib] tiof en- 2- karboksylsyre- [ lS- sykloheksylmetyl- 2-okso- 2- ( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2- £>] pyrrol- 4- yl) etyl] amid
HPLC, Rt = 18,15 minutter (> 90 %), HPLC-MS 441,2 [M + H]<+>, 903,2 [2 M + Na] + .
Eksempel 68
( 3aS, 6aR )- benzo[ b] tiofen- 2- karboksylsyre-[! S- ben2yl- 2- okso- 2-( 3-oksoheksahydrofuro[ 3, 2- b] pyrrol- 4- yl) etyl] amid
HPLC, Rt = 15,58 minutter (> 85 %), HPLC-MS 435,1 [M + H]<+>, 891,2 [2 M + Na]<+>.
Eksempel 69
( 3aS, 6aR )- naftalen- l- karboksylsyre-[ IS-( 4- hydroksybenzyl)- 2-okso- 2-( 3- oksoheksahydrofuro[ 3, 2- b] pyrrol- 4- yl) etyl] amid
HPLC, Rt = 12,42 minutter (> 85 %), HPLC-MS 445,1 [M + H]<+>, 911,3 [2 M + Na]<+>.
Eksempel 70
( 3aS, SaR )- naftalen- l- karboksylsyre-[ 3- metyl- 15-( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2 - b ] pyrrol- 4- karbonyl) butyl] amid
HPLC, Rt = 14,81 minutter (> 85 %), HPLC-MS 395,2 [M + H]<+>, 811,3 [2 M + Na]<+>.
Eksempel 71
( 3aS, SaR ) - naftalen- l- karboksylsyre- [ 1- R- benzylsulfanylmetyl- 2-okso- 2-( 3- oksoheksahydrofuro[ 3, 2 - b ] pyrrol- 4- yl) etyl] amid
HPLC, Rt = 17,10 minutter (> 90 %), HPLC-MS 475,2 [M + H]<+.>
Eksempel 72
( 3aS, SaR )- naftalen- l- karboksylsyre-[ lS- sykloheksylmetyl- 2- okso-2- ( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2- Jb] pyrrol- 4- yl) etyl] amid
HPLC, Rt = 17,45 minutter (> 90 %), HPLC-MS 435,2 [M + H]<+>, 891,4 [2 M + Na]\ Eksempel 73 ( 3aS, 6aR)- naftalen- l- karboksylsyre-[ 15- benzyl- 2- okso- 2-( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2 - b ] pyrrol- 4- yl) etyl] amid
HPLC, Rt = 15,17 minutter (> 90 %), HPLC-MS 429,1 [M + H]<+>, 879,3 [2 M + Na]<+>.
Eksempel 7 4
( 15, 3aS, 6aR )- morfolin- 4- karboksylsyre- l- sykloheksylmetyl- 2- okso-2-( 3- oksoheksahydrofuro[ 3, 2 - b ] pyrrol- 4- yl) etylester
HPLC-MS 395,2 [M + H]<+>, 811,4 [2 M + Na]<+>.
(a) Fremstilling av 3- sykloheksyl- 2S- hydroksypropionsyre-metylester ( forbindelse ( 32), reaksjonsskjema 6)
Trimetylsilylklorid (1,78 ml, 14,0 mmol) ble tilsatt dråpevis til en omrørt oppløsning av 3-sykloheksyl-2S-hydroksypropionsyre (forbindelse (25), 1,31 g, 7,6 mmol) i metanol (35 ml). Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 20 timer, og så ble oppløsningsmidlene fjernet under vakuum, hvorved man fikk en blekgul olje (1,38 g) . Råoljen ble renset ved hjelp av kromatografi over silikagel under eluering med en gradient av n-heptan:etylacetat (4:1). Passende fraksjoner ble slått sammen, og oppløsningsmidlene ble fjernet under vakuum, hvorved man fikk 3-sykloheksyl-2S-hydroksypropionsyremetylester som en fargeløs olje, utbytte 1,26 g (89 %). HPLC-MS (enkelthovedtopp med Rt = 7,43 minutter, 187,14 [M + H]<+>, 395,2 [2 M + Na]<+>).
8H (400 MHz, CDC13ved 298 K) ; 0, 84-1,04 (2 H, CH2(sykloheksan), m), 1,09-1,36 (3 H, CH2(sykloheksan), CH (sykloheksan), m) , 1, 45-1, 77 (7 H . , CH2(sykloheksan), CH (sykloheksan), m) , 1, 80-1, 90 (1 HP, m) , 2,72 (1 H, OH, d, J = 5,99 Hz), 3,80 (3 H, CH3O, s), 4,20-4,31 (1 Ha, m).
(b) Fremstilling av morfolin- 4- karboksylsyre- l- karboksy- 2-sykloheksyletylester ( forbindelse ( 33), reaksjonsskjema il
En oppløsning av fosgen (33,6 ml, 20 % i toluen) ble tilsatt til 3-sykloheksyl-25-hydroksypropionsyremetylester (forbindelse (32), 0,7 g, 4,03 mmol), etterfulgt av 6 dråper di-metylf ormamid . Blandingen ble omrørt ved omgivelsestemperatur i 16 timer, og så ble oppløsningsmidlene fjernet under vakuum. Resten ble azeotropdestillert med toluen (3 x 20 ml) og oppløst i vannfritt diklormetan (11 ml). Oppløsningen ble avkjølt til 0 °C, og så ble morfolin (0,86 g, 9,85 mmol) tilsatt. Blandingen ble omrørt i 2 timer og så fordelt mellom diklormetan (30 ml) og 0,5 M saltsyre (30 ml). Diklormetanlaget ble vasket med mettet, vandig natriumhydrogenkarbonatoppløsning (30 ml), mettet, vandig natriumkloridoppløsning (30 ml), tørket (Na2S04) , og oppløsnings-midlet ble fjernet under vakuum. Resten ble renset ved hjelp av kromatografi over silikagel under eluering med etylacetat:heptan 1:1. Passende fraksjoner ble slått sammen, og oppløsningsmidlene ble fjernet under vakuum, hvorved man fikk morfolin-4-karboksylsyre-2-sykloheksyl-l-metoksykarbonyletylester (0,13 g, 10 %) som en olje. En oppløsning av litiumhydroksidmonohydrat (17,5 mg,
0,418 mmol) i vann (0,76 ml) ble tilsatt til an isvannavkjølt oppløsning av morfolin-4-karboksylsyre-2-sykloheksyl-l-metoksy-karbonyletylester (110 mg, 0,367 mmol) i dioksan (1,5 ml). Blandingen ble omrørt ved omgivelsestemperatur i 1 time og så fortynnet med vann (10 ml). Vannlaget ble ekstrahert med dietyl-
eter (2 x 10 ml) som ble kassert, og så ble det surgjort til pH = 2 med 6 M saltsyre. Produktet ble ekstrahert over i dietyleter (2 x 10 ml), så ble de kombinerte eteriske lag vasket med mettet, vandig natriumklorid (10 ml), tørket (MgSCU) , og oppl-øsningsmidlet ble fjernet under vakuum, hvorved man fikk morfolin-4-karboksylsyre-l-karboksy-2S-sykloheksyletylester som et hvitt, fast stoff, utbytte 0,11 g (100 % fra ester). TLC (enkeltflekk, Rf = 0,20, metanol:diklormetan 1:9), HPLC-MS (enkelthovedtopp med Rt = 7,614 minutter, 286,2 [M + H]<+>, 287,2 [M + 2H]<+>, 593, 3 [2 M + Na]+) .
8H (400MHz, CDC13ved 298 K) ; 0,75-1, 00 (2 H, CH2(sykloheksan), m), 1,02-1,28 (4 H, CH2(sykloheksan), m), 1,33-1,46 (1 H, CH (sykloheksan), m), 1,50-1,79 (6 H, CH2(sykloheksan), m) , 3,28-3, 73 (8 H, CH2OCH2og CH2NCH2,m), 4,92-5,02
(1 Ha, m), 5,99 (1 H, OH, brs).
Forbindelse (33) ble koblet under standardbetingelser til ladet byggeblokk-linkerkonstruksjon (22) og så spaltet, hvorved man fikk eksempelforbindelse 74.
Eksempel 75
( 3aS, 6aJ?) - 4- [ 2- ( 4- tert. - butylbenzylsulf anyl) - 4- metylpentanoyl] - tetrahydrofuro[ 3, 2 - b ] pyrrol- 3- on
HPLC, Rt = 21,3-23,4 minutter (> 80 %), HPLC-MS 404,4 [M + H]<+.>
(a) Fremstilling av 2. R- brom- 4- metylpentansyre ( forbindelse ( 28), reaksjonsskjema 5)
En oppløsning av natriumnitritt (5,1 g, 73 mmol) i vann (15 ml) ble dråpevis tilsatt ved 0 °C i løpet av 5 timer til en omrørt blanding av D-leucin (8,75 g, 67 mmol), kaliumbromid (29,75 g, 0,25 mol) og konsentrert svovelsyre 8,6 ml) i vann
(100 ml). Blandingen ble omrørt i 30 minutter ved 0 °C og så ved omgivelsestemperatur i 20 timer. Produktet ble ekstrahert over i dietyleter (2 x 150 ml), så ble de kombinerte eteriske lag vasket med mettet, vandig natriumkloridoppløsning (2 x 100 ml), tørket (MgS04) , og oppløsningsmidlet ble fjernet under vakuum. Resten ble renset ved hjelp av hurtigkromatografi over silikagel under eluering med en gradient av metanol:diklormetan 1:50 1:20. Passende fraksjoner ble slått sammen, og oppløsnings-midlene ble fjernet under vakuum, hvorved man fikk 2i?-brom-4-metylpentansyre (28) som en fargeløs olje, utbytte 1,60 g (12,3 %) .
TLC (enkeltflekk, Rf = 0,2, metanol:diklormetan 1:20). I tillegg ble det erholdt en andre porsjon (5,2 g, 40 %) av svakt forurenset produkt.
8H (400 MHz, CDC13ved 298 K) ; 0,95 og 0,99 (begge 3 H, CH3CH, d, J = 6,55 Hz), 1,77-1,89 (1 H, CH3CH, m), 1,93 (2 Hp, m) , 4,31 (1 Ha, t, J = 7,7 Hz), 9,3 (1 H, C02H, brs) .
(b) Fremstilling av 2S-( 4- tert.- butylbenzylsulfanyl)- 4-metylpentansyre ( forbindelse ( 30), reaksjonsskjema 5)
En oppløsning av 2.R-brom-4-metylpentansyre (forbindelse (28), 1,1 g, 5,6 mmol) og (4-(tert.-butyl)fenyl)metantiol (1,0 g, 5,6 mmol) i dimetylformamid (15 ml) ble gjennomboblet med nitrogen i 5 minutter og så avkjølt to 0 °C. Trietylamin (0,79 ml, 5,7 mmol) ble tilsatt dråpevis i løpet av 1 minutt, og så ble blandingen omrørt i 2 dager ved omgivelsestemperatur. Oppløsningsmidlene ble fjernet under vakuum, og resten ble renset ved hjelp av hurtigkromatografi over silikagel under eluering med en gradient av metanol:diklormetan 0:1 — > 1:20. Passende fraksjoner ble slått sammen, og oppløsningsmidlene ble fjernet under vakuum, hvorved man fikk en rest som ble renset ved hjelp av hurtigkromatografi over silikagel under eluering med etylacetat:heptan 2:5. Passende fraksjoner ble slått sammen, og oppløsningsmidlene ble fjernet under vakuum, hvorved man fikk 2S-(4-tert.-butylbenzylsulfanyl)-4-metylpentansyre (30) som en fargeløs olje, utbytte 150 mg (9 %) . TLC (enkeltflekk, Rf = 0,2, heptan:etylacetat 5:2), analytisk HPLC med hovedtopp Rt = 22,117 minutter, HPLC-MS (hoved-UV-toopp med Rt = 11,072 minutter, 317,2 [M + Na]<+>).
8H (400 MHz, CDCI3ved 298 K) ; 0,70 og 0,85 (begge 3 H, CH3CH, d, J = 6,3), 1,29 (9 H, (CH3)3C, s) , 1,44-1,51 (1 H, CH3CH, m) , 1, 62-1, 75 (2 Hp\m) , 3,15-3,20 (1 Ha, m) , 3,81 og 3,88 (begge 1 H, SCH2, d, J = 13,2 Hz), 7,25-7,35 (4 H, aromatisk).
Forbindelse (30) ble koblet under standardbetingelser til ladet byggeblokk-linkerkonstruksjon (22) og så spaltet, hvorved man fikk eksempelforbindelse 75.
Eksempel 7 6
( 3aS, 6aR ) - 4- [ 3- syklohexyl- 25 ( furan- 2- ylmetansulfonyl) propion-yl] tetrahydrof uro [ 3, 2- Jb] pyrrol- 3- on
HPLC, Rt = 12,8-15,1 minutter (> 90 %), HPLC-MS 410,1 [M + H]<+>, 841,2 [2 M + Na] + .
(a) Fremstilling av ( R )- a- bromsykloheksanpropionsyre
En oppløsning av natriumnitritt (0,45 g, 6,5 mmol) i vann (1,2 ml) ble dråpevis tilsatt ved 0 °C i løpet av 4 timer til en omrørt blanding av ( R)-a-aminosykloneksanpropionsyre (1 g, 5,8 mmol), kaliumbromid (2,3 g, 19,2 mmol) og konsentrert svovelsyre (0,66 ml) i vann (7 ml). Blandingen ble omrørt i 5 timer ved 0 °C og så ved omgivelsestemperatur i 16 timer. Produktet ble ekstrahert over i dietyleter (4 x 20 ml), så ble de kombinerte eteriske lagene vasket med mettet, vandig natrium-kloridoppløsning (2 x 50 ml), tørket (MgS04) , og oppløsnings-midlet ble fjernet under vakuum. Resten ble renset ved hjelp av kromatografi over silikagel under eluering med en gradient av metanol:diklormetan 1:50 -» 1:20. Passende fraksjoner ble slått sammen, og oppløsningsmidlene ble fjernet under vakuum, hvorved man fikk ( R)-a-bromsykloheksanpropionsyre som en blekgul olje, 0,374 g, (27 %). TLC (enkeltflekk, Rf = 0,45, 10 % metanol i diklormetan), HPLC-MSI (enkelthovedtopp med Rt = 8,88 minutter, 234, 1/236, 1 [M + H]<+>, 257, 2/259,2 [M + Na]<+>).
8H (400 MHz, CDC13ved 298 K) ; 0, 83-1,88 (11 H, CH (sykloheksan), CH2(sykloheksan), m), 1,89-2,05 (2 Hp, m), 4,32-4,44 (1 Ha, m).
(b) Fremstilling av 3- sykloheksyl- 2S-( furan- 2- ylmetyl-sulfanyl) propionsyre ( forbindelse ( 41), reaksjonsskjema
IL
(i?)-a-bromsykloheksanpropionsyre (0,37 g, 1,58 mmol) og furan-2-ylmetantiol (0,18 g, 1,58 mmol) ble oppløst i dimetylformamid (10 ml), og det ble gjennomboblet med nitrogen i 10 minutter. Oppløsningen ble avkjølt til 0 °C, og så ble trietylamin (0,22 ml, 1,58 mmol) tilsatt dråpevis i løpet av 1 minutt. Blandingen ble omrørt ved 0 °C i 30 minutter og så ved omgivelsestemperatur i 16 timer. Oppløsningsmidlet ble fjernet under vakuum, og resten ble renset ved hjelp av kromatografi over silikagel under anvendelse av metanol:diklormetan 1:100 som elueringsmiddel. Passende fraksjoner ble slått sammen, og opp-løsningsmidlene ble fjernet under vakuum, hvorved man fikk 3-sykloheksyl-2S-(furan-2-ylmetylsulfanyl)propionsyre (41) som en lysebrun olje, utbytte 14 2mg (33 %). Analytisk HPLC-topp, Rt = 18,68 minutter. TLC (enkeltflekk, Rf = 0,45, 10 % metanol i diklormetan), HPLC-MS (enkelthovedtopp med Rt = 9,53 minutter, 291, 0 [M + Na]+) .
8H (400 MHz, CDCI3ved 298 K) ; 0, 68-0, 89 (2 H, CH2(sykloheksan), m), 0,97-1,77 (11 H, CH (sykloheksan), CH2(sykloheksan), m), 3,21-3,32 (1 Ha, t, J=7,79 Hz), 3,69-3,79 (1 H, CH2S, d, J = 14,79 Hz), 3,84-3,94 (1 H, CH2S, d, J = 14,8 Hz), 6,15-6,28 (2 H, furan H-3 og H-4, d, J = 27,34 Hz), 7,30
(1 H, furan H-5, s).
Forbindelse (41) ble koblet under standardbetingelser til ladet byggeblokk-linkerkonstruksjon (22) . Den midlertidig tilknyttede tioeter (1,2 umol "verktøy" ble oksidert med m-klorperbenzosyre (5 ekv., 65 % reagens, 1,6 mg) i diklormetan
(200 ul) i 5 timer, etterfulgt av standardvasking og så av-spaltet, hvorved man fikk eksempelforbindelse 76.
Eksempel 7 7
( 3aS, 6aR ) - 2iR- sykloheksylmetyl- 4- morf olin- 4- yl- l- ( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2- jb] pyrrol- 4- yl) butan- 1, 4- dion
HPLC-MS 393, 1 [M + H]<+>, 807, 3 [2 M + Na] + .
(a) Fremstilling av 2JR- sykloheksylmetyl- 4- morfolin- 4- yl- 4-okso- smørsyrernetylester
1-(3-dimetylaminopropyl)-3-etylkarbodiimid.HC1 (1,12 g, 5,69 mmol) og så 1-hydroksybenzotriazolmonohydrat (0,87 g,
5,69 mmol) ble tilsatt til en omrørt oppløsning av 2R-(sykloheksylmetyl) ravsyre-l-metyl-ester (forbindelse (35), 1,0 g,
4,38 mmol) i dimetylformamid (10 ml) ved 0 °C under argon. Blandingen ble omrørt i 25 minutter, og så ble morfolin (0,7 ml, 8,76 mmol) tilsatt dråpevis i løpet av 1 minutt, og omrøring ble fortsatt ved omgivelsestemperatur i 16 timer. Produktet ble ekstrahert over i etylacetat (200 ml) og så vasket med 1,0 M saltsyre (3 x 100 ml), mettet, vandig natriumhydrogenkarbonat-oppløsning (3 x 100 ml), vann (100 ml), så mettet, vandig natriumkloridoppløsning (100 ml), tørket (MgS04) , og oppløsnings-midlet ble fjernet under vakuum, hvorved man fikk 2Æ-sykloheksylmetyl-4-morfolin-4-yl-4-oksosmørsyremetylester som et gråhvitt, fast stoff, utbytte 1,22 g (94 %). HPLC-MS (enkelttopp med Rt = 7,91 minutter, 298, 1 [M + H]<+>, 617,3 [2 M + Na]<+>).
(b) Fremstilling av 2jR- sykloheksylmetyl- 4- morfolin- 4- yl- 4-oksosmørsyre ( forbindelse ( 36), reaksjonsskjema 7)
En oppløsning av litiumhydroksidmonohydrat (0,51 g, 12,18 mmol) i vann (27 ml) ble tilsatt en omrørt oppløsning av 2Æ-sykloheksylmetyl-4-morfolin-4-yl-4-oksosmørsyremetylester (1,21 g, 4,06 mmol) i tetrahydrofuran (55 ml) og metanol (27 ml) ved 0 °C. Blandingen ble omrørt ved omgivelsestemperatur i 1 time og så fortynnet med vann (100 ml). Vannlaget ble ekstrahert med dietyleter (2 x 50 ml) som ble kassert, og så ble det surgjort til pH = 1-2 med 1 M saltsyre. Produktet ble ekstrahert over i diklormetan (3 x 50 ml), så ble de kombinerte eteriske lagene vasket med vann (2 x 50 ml), mettet, vandig natriumkloridoppløs-ning (2 x 50 ml), tørket (MgS04) , og oppløsningsmidlet ble fjernet under vakuum, hvorved man fikk en rest. Resten ble renset ved hjelp av kromatografi over silikagel under eluering med en gradient av metanol:diklormetan 1:100 -> 3:100. Passende fraksjoner ble slått sammen, og oppløsningsmidlene ble fjernet under vakuum, hvorved man fikk 2i?-sykloheksylmetyl-4-morfolin-4-yl-4-oksosmørsyre (36) som et hvitt, fast stoff, utbytte 0,82 g (71 %). HPLC-MS (enkelttopp med Rt = 6,769 minutter, 284,2
[M + H]<+>, 589,2 [2 M + Na]+) .
8H (400 MHz, CDC13ved 298 K) ; 0, 77-0, 90 (2 H, CH2(sykloheksan), 1,05-1,40 (4 H, CH2(sykloheksan), m), 1,50-1,90 (7 H, CH (sykloheksan), CH2(sykloheksan), m) , 2, 30-2, 44 (2 Hp, m) , 2, 64-2,77 (1 Ha, m), 2,96-3,10 (1 H, OH, brs), 3,40-3,78
(8 H, CH2OCH2og CH2NCH2, m) .
Forbindelse (36) ble koblet under standardbetingelser til ladet byggeblokk-linkerkonstruksjon (22), og så ble det spaltet, hvorved man fikk eksempelforbindelse 77.
Eksempel 78
( 3aS, 6aR )- 4-( 2- bifenyl- 3- yl- 4- metylpentanoyl) tetrahydrofuro-[ 3, 2- b] pyrrol- 3- on
HPLC, Rt = 19,09-20,76 minutter (> 90 %), HPLC-MS 378,4 [M + H]<+.>
(a) Fremstilling av bifenyl- 3- yl- eddiksyremetylester ( forbindelse ( 38), reaksjonsskjema 8)
Konsentrert svovelsyre (588 ul) ble tilsatt til en opp-løsning av 3-bromfenyleddiksyre (10 g, 46,5 mmol) i metanol (100 ml). Blandingen ble kokt under tilbakeløpskjøling i 1,5 time og så avkjølt til omgivelsestemperatur og inndampet under redusert trykk, hvorved man fikk en rest. Resten ble på nytt oppløst i dietyleter (500 ml), vasket med vann (2 x 100 ml), saltoppløsning (100 ml), tørket (MgS04) og så inndampet under redusert trykk, hvorved man fikk 3-bromfenyleddiksyremetylester (10,65 g). 3-bromfenyleddiksyremetylesteren ble opp-løst i toluen (117 ml), så ble fenylborsyre (6,8 g, 55,69 mmol) tilsatt, etterfulgt av en vandig oppløsning av natriumkarbonat (93 ml, 2 M) og tetrakis(trifenylfosfin)palladium (1,6 g,
1,41 mmol). Blandingen ble omrørt over natten og så avkjølt til omgivelsestemperatur, og En vandig oppløsning av mettet ammo-niumklorid (100 ml) ble tilsatt. Blandingen ble ekstrahert med etylacetat (2 x 200 ml), tørket (Na2S04) og inndampet under redusert trykk, hvorved man fikk en rest. Hurtigkromatografi av resten over silika (200 g) under anvendelse av etylacetat:heptan (3:48) som elueringsmiddel gav bifenyl-3-yleddiksyremetylester, utbytte 10,5 g (99 %), TLC (enkelt-UV-flekk, Rf = 0,24, 10 % etylacetat i heptan), analytisk HPLC, Rt = 19,55 minutter, HPLC-MS (enkelthoved-UV-topp med Rt = 9,35 minutter, 227,1 [M + H]<+>).
8H (400 MHz, CDC13ved 298 K) ; 3,76 (2 H, s, CH2CO2CH3) , 3,77 (3 H, s, OCH3) , 7, 34-7, 66 (9 H, m, bifenyl-3-yl) .
(b) Fremstilling av bifenyl- 3- yleddiksyre
Vann (39 ml), etterfulgt av litiumhydroksidmonohydrat (4,2 g, 101,5 mmol) ble tilsatt til en oppløsning av bifenyl-3-yleddiksyremetylester (11,43 g, 50,57 mmol) i metanol (265 ml). Blandingen ble omrørt ved omgivelsestemperatur i 2 timer, og så ble de organiske stoffene fjernet under redusert trykk. Blandingen ble surgjort med fortynnet saltsyre (1 M, 80 ml), ekstrahert med kloroform (2 x 100 ml), tørket (MgS04) og inndampet under redusert trykk, hvorved man fikk bifenyl-3-yleddiksyre som et hvitt, fast stoff, utbytte 10,6 g (99 %), analytisk HPLC, Rt = 16,565 minutter, HPLC-MS (enkelthoved-UV-topp med Rt = 7,91 minutter, 213,1 [M + H]<+>).
8H (400 MHz, CDCI3ved 298 K) ; 3,77 (2 H, s, Ctf2C02CH3) , 7,28-7,52 (9 H, m, bifenyl-3-yl).
(c) Fremstilling av 2RS - bif enyl- 3- yl- 4- metylpent- 4- ensyre
En oppløsning av bifenyl-3-yleddiksyre (7,0 g, 33 mmol) i vannfritt tetrahydrofuran (84 ml) ble tilsatt dråpevis til en oppløsning av litiumdiisopropylamid (36,4 ml, 2 M oppløsning i heksaner) i vannfritt tetrahydrofuran (84 ml) ved -78 °C. Blandingen fikk varmes opp til 0 °C og ble omrørt i 40 minutter. Blandingen ble så avkjølt til -78 °C, og 3-brom-2-metylpropen
(4,97 ml) ble hurtig tilsatt. Blandingen ble omrørt i 1 time ved
-78 °C, og så ble vann (28 ml) tilsatt, og de organiske stoffene ble fjernet under redusert trykk. Blandingen ble så surgjort med saltsyre (6 M, 14 ml), ekstrahert med etylacetat (3 x 100 ml), tørket (MgS04) og inndampet under redusert trykk, hvorved man fikk en rest. Hurtigkromatografi av resten over silika (400 g) under anvendelse av metanol:diklormetan (3:97) som elueringsmiddel gav uren 2-bifenyl-3-yl-4-metylpent-4-ensyre (8,3 g). Hurtigkromatografi over silika (400 g) under anvendelse av metanol:diklormetan (1,5:98,5) gav ren 2-bifenyl-3-yl-4-metylpent-4-ensyre, utbytte 5,27 g (60 %), TLC (enkelt-UV-flekk med Rf = 0,28, 5 % metanol i diklormetan), analytisk HPLC, Rt = 19,99 minutter, HPLC-MS (enkelthoved-UV-topp med Rt =
9,57 minutter, 267,1 [M + H]<+>).
8H (400 MHz, CDCI3ved 298 K) ; 1, 765 (3 H, s, CH3) , 2,53 (1 H, dd, J = 6,6 og 14,7 Hz, 3-Hi) , 2,91 (1 H, dd, J = 8,9 og 14,7 Hz, 3-Hi), 3,92 (1 H, dd, J = 6,6 og 8,9 Hz, 2 H) , 4,79
(2 H, d, J = 10,7 Hz, 5 H2), 7,30-7,62 (9 H, m, bifenyl-3-yl).
(d) Fremstilling av 2RS- bifenyl- 3- yl- 4- metylpentansyre ( forbindelse ( 39), reaksjonsskjema 8)
Palladium-på-karbon (10 %, 300 mg) ble tilsatt porsjonsvis til en oppløsning av 2f?S-bifenyl-3-yl-4-metylpent-4-ensyre (lg, 3,7 6 mmol) i etanol (40 ml) ved 0 °C. En hydrogen-atmosfære ble så innført, og blandingen fikk varmes opp til omgivelsestemperatur. Blandingen ble omrørt i 18 timer, og så ble hydrogenatmosfæren fjernet og blandingen filtrert over celitt, og katalysatoren ble vasket med etanol (40 ml). Det kombinerte organiske filtrat ble konsentrert under redusert trykk, hvorved man fikk en rest som ble hurtigkromatografert over silika (150 g) under anvendelse av metanol:diklormetan (1:99) som elueringsmiddel, hvorved man fikk 2f?S-bifenyl-3-yl-4-metylpentansyre, utbytte 980 mg (98 %), TLC (enkelt-UV-flekk, Rf = 0,45, 5 % metanol i diklormetan), analytisk HPLC, Rt =
20,92 minutter, HPLC-MS (enkelthoved-UV-topp med Rt =
10,15 minutter, 269, 1 [M + H]<+>, 291,1 [M+Na]<+>).
5H (400 MHz, CDC13ved 298 K) ; 0,93 (6 H, d, J = 6,6 Hz, 2 x CH3), 1, 52-1, 57 (1 H, m, 4-Hi) , 1,71-1,76 (1 H, m, 3-Hi) , 1, 97-2, 05 (1 H, m, 3-Hi) , 3,66 (1 H, t, J = 7,8 Hz, 2-Hi) , 7,32-7,60 (9 H, m, bifenyl-3-yl).
Forbindelse (39) ble koblet under standardbetingelser til ladet byggeblokk-linkerkonstruksjon (22), og så ble det spaltet, hvorved man fikk eksempelforbindelse 78.
Eksempel 7 9
( 3aS, 6a. R) - 4- metyl- N- [ 3- metyl-l S- ( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2 - b ] - pyrrol- 4- karbonyl) butyl] benzamid
HPLC, Rt = 13,74-14,85 minutter (> 90 %) , HPLC-MS 359,2 [M + H]<+>.
Eksempel 80
( 3aS, 6aR )- 4- metoksy- N-[ 3- metyl- lS-( 3- oksoheksahydrofuro[ 3, 2 - b ]-pyrrol- 4- karbonyl) butyl] benzamid
HPLC, Rt = 12,95-13,87 minutter (> 90 %), HPLC-MS 375,2 [M + H]<+>.
Eksempel 81
( 3aS, 6a£)- 4- tert.- butyl- N-[ IS-( 4- brombenzyl)- 2- okso- 2-( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2 - b ] pyrrol- 4- yl) etyl] benzamid
HPLC, Rt = 18,40-19,10 minutter (> 90 %), HPLC-MS 513,2/515,2
[M + H]<+>.
Eksempel 82
( 3aS, 6aR )- 4- tert.- butyl- N-[ IS-( 4- metoksybenzyl)- 2- okso- 2-( 3-oksoheksahydrofuro[ 3, 2 - b ] pyrrol- 4- yl) etyl] benzamid
HPLC, Rt = 17,50-18,31 minutter (> 90 %), HPLC-MS 465,2 [M + H]<+.>
Eksempel 83 ( et eksempel på generell formel ( II))
( 3aS, 7aK)- morfolin- 4- karboksylsyre-[ lR- benzylsulfanylmetyl- 2-okso- 2-( 3- oksoheksahydrofuro[ 3, 2- b] pyridin- 4- yl) etyl] amid
Den påkrevde toring-byggeblokk ( 3aSjJ_ aR)-3-oksoheksahydrof uro [3, 2-b] pyridin-4 -karboksyl syre-9 ff- fluoren-9-ylmetyl-ester ble fremstilt i åtte trinn på følgende måte.
(1) Fremstilling av cis- rac-( 3- hydroksy) pyrrolidin- 1, 2-dikarboksylsyre- 1-( 9fl- fluoren- 9- ylmetyl) ester
Cis-rac-(3-hydroksy)piperidin-2-karboksylsyre (erholdt ved hydrogenering av kommersielt tilgjengelig 3-hydroksypikolin-syre, se Drummond, J. et al., J. Med. Chem., 32, 2116-2128, 1989) (15,0 g, 103,4 mmol) ble tilsatt til en kraftig omrørt, isavkjølt oppløsning av natriumkarbonat (22,90 g, 217,1 mmol) i vann (200 ml). 1,4-dioksan (100 ml) ble tilsatt, hvorved man fikk en klar, blekgul oppløsning. 9-fluorenylmetylkloroformiat (27,52 g, 108,4 mmol) i 1,4-dioksan (100 ml) ble tilsatt i løpet av 1 time, og så ble isavkjølingen fjernet og blandingen omrørt ved romtemperatur i ytterligere 1 time. Ytterligere vann
(150 ml) ble tilsatt, reaksjonsblandingen ble vasket med kloroform (2 x 250 ml) og de kombinerte organiske lagene kassert. Vannfasen ble surgjort med 1 N HC1 til ca. pH 2, hvorved man fikk en tykk, opak blanding. Den surgjorte vandige blanding ble ekstrahert med kloroform (2 x 500 ml), og den nå klare vannfase ble kassert. De opake kombinerte kloroformlagene ble tørket (Na2S04) , filtrert og redusert under vakuum, hvorved man fikk et hvitt skum, utbytte 30,2 g (82,2 mmol, 79,5 %). TLC (liten UV-flekk, Rf = 0,58, stor UV-flekk, Rf = 0,25, metanol:kloroform 1:4), analytisk HPLC, hovedtopp, Rt = 16,990 minutter, HPLC-MS
(enkelthoved-UV-topp med Rt = 7,976 minutter, 368,0 [M + H]<+>, 390, 0 [M + Na]<+.>Analyse ved hjelp av1H- og<13>C-NMR viste tilstedeværelsen av geometriske cis- og transisomerer rundt 3°-amidbindingen.
8C (DMSO-de ved 298 K) , 23,29/23, 57 (d, Cg), 28, 89 (d, CY) , 40,19 (d, CE), 47, 59 (u, Fmoc C-9) , 59,11/59,43 (u, Ca) , 67, 34 (u, Cp), 67, 75/67, 87 (d, Fmoc CH2) , 121,13 (u, Fmoc C-4 og C-5), 126,90/127,02 (u, Fmoc C-l og C-8), 128,11 (u, Fmoc C-2 og C-7), 128,68 (u, Fmoc C-3 og C-6), 141,73 (q, Fmoc C-4' og C-5'), 144,58/144,76 (q, Fmoc C-l' og C-8<1>), 155,71/156,23 (q, OCON), 172,37/172,63 (COOH).
(2) Fremstilling av cis- rac-( 3- hydroksy) pyrrolidin- 1, 2- dikarboksylsyre- 2- allylester- l-( 9H- fluoren- 9- ylmetyl)-ester
Cis-rac-(3-hydroksy)pyrrolidin-1,2-dikarboksylsyre-1-(9H-fluoren-9-ylmetyl)ester (28,2 g, 76,7 mmol) ble oppløst i toluen (200 ml) i et Dean-Stark-apparat. Allylalkohol (50 ml) ble tilsatt, etterfulgt av p-toluensulfonsyre.hydrat (15,1 g, 78,2 mmol). Blandingen ble kokt under tilbakeløpskjøling i 1 time og avkjølt, og CHCI3(500 ml) ble tilsatt. Det organiske lag ble vasket med NaHC03(2 x 250 ml), 0,1 N HC1 (250 ml) og saltoppløsning (250 ml) , så tørket (Na2S04) . Filtrering og reduksjon under vakuum gav en blekgul mobil olje (35 g). Den urene olje ble renset over silikagel (240 g) under eluering med en gradient av heptan:etylacetat 3:1 -» 1:1. Ønskede fraksjoner ble slått sammen og redusert under vakuum til en fargeløs gummi, utbytte 20,4 g (50,1 mmol, 65,3 %). TLC (enkelt-UV-flekk, Rf = 0,20, heptan:etylacetat 2:1), analytisk HPLC, Rt = 20,003 minutter, HPLC-MS (enkelthoved-UV-topp med Rt = 9,473 minutter, 408,1 [M + H]<+>, 430,1 [M + Na]<+>). Analyse ved hjelp av<X>H- og<13>C-NMR viste tilstedeværelsen av geometriske cis- og transisomerer rundt 3°-amidbindingen.
8H (CDCI3ved 298 K) ; 1,55 (2 HY eller 2H8, d, J 9,3), 1,81 (lHy eller 1H8, d, J 3,2), 2,06 (1 Hy eller 1H8, d, J 3,2), 2, 78/2, 92 (1 HE, dbt), 3,55 (1HP, dd, J 12,6, 9,2), 3,78 (OH, b) , 3,95/4,11 (1 HE, d, J 13), 4,31 (Fmoc H-9, m) , 4,49 (Fmoc CH2, m) , 4,71 (2 x COOCH2CH=CH2, m) , 4,99/5,17 (Ha, d, J 4,8), 5,31
(2 x COOCH2CH=CH2, m) , 5,87 (1 x COOCH2CH=CH2, m) , 7,37 (2 H,
aromatisk, Fmoc H-2 og H-7), 7,47 (2 H, aromatisk, Fmoc H-3 og H-6), 7,62 (2 H, aromatisk, Fmoc H-l og H-8), 7,83 (2 H, aromatisk, Fmoc H-4 og H-5).
8C (CDC13ved 298 K) ; 23,87/24,11 (d, CY) , 30,59 (d, CY) , 41,26/41, 56 (d, CE) , 47, 62 (u, Fmoc C-9) , 58,29/59,54 (u, C«) , 66, 44/66, 54 (d, COOCH2CH=CH2) , 68, 28 (d, Fmoc CH2) , 69, 14/69, 42 (u, Cp), 119,67/119,90 (d, COOCH2CH=CH2) , 120, 43 (u, Fmoc C-4 og C-5), 125,22/125,35 (u, Fmoc C-l og C-8), 127,48 (u, Fmoc C-2 og C-7), 128,15 (u, Fmoc C-3 og C-6), 131,43/131,57 (u, COOCH2-CH=CH2), 141,73 (q, Fmoc C-4' og C-5'), 144,19/144,38 (q, Fmoc C-1' og C-8'), 155, 67/156, 27 (q, OCON), 171,56 (COOCH2CH=CH2) .
(3) Enzymatisk oppløsning av cis- rac-( 3- hydroksy) pyrrolidin- 1, 2- di karboksyl sy re- 2- ally lest er- 1- ( 9/ f- f luoren- 9-ylmetyl) ester til ( 2R , 3S)-( 3- hydroksy) pyrrolidin- 1, 2-dikarboksylsyre- 2- allylester- l-( 9H- fluoren- 9- ylmetyl)-ester og ( 2S, 3R )-( 3- acetoksy) pyrrolidin- 1, 2- dikarboksylsyre- 2- allylester- l-( 9 ff- fluoren- 9- ylmetyl) ester
Cis-rac-(3-hydroksy)pyrrolidin-1,2-dikarboksylsyre-2-allylester-1-(9H-fluoren-9-ylmetyl)ester (19,6 g, 48,1 mmol), Lipase PS (25 g, eks. Amano Enzyme Inc.), vinylacetat (300 ml) og isopropyleter (200 ml) ble omrørt ved 38 °C. Etter 5 dager indikerte HPLC ekvilibrering av to topper (52 %:48 %, noe som indikerer 95 % omdannelse), og reaksjonsblandingen ble filtrert gjennom celitt (3 cm x 10 cm lag). Celittlaget ble vasket med kloroform (3 x 250 ml), og det kombinerte organiske filtrat ble redusert under vakuum til en viskøs, gyllenbrun olje (23,0 g). Den urene olje ble renset over silikagel (300 g) under eluering med en gradient av heptan:etylacetat 3:1 -> 1:2. To hoved-fraksjoner ble identifisert og redusert under vakuum.
Produkt 1. ( 25, 3R )-( 3- acetoksy) pyrrolidin- 1, 2- dikarboksylsyre- 2-allylester- 1-( 9ff- fluoren- 9- ylmetyl) ester
En viskøs, svært blekgul olje, utbytte 9,5 g
(21,1 mmol, 43,9 %). TLC (enkelt-UV-flekk, Rf = 0,40, heptan:etylacetat 2:1), analytisk HPLC, Rt = 22,633 minutter, HPLC-MS (enkelthoved-UV-topp med Rt = 10,714 minutter, 450,1
[M + H]<+>, 472, 1 [M + Na]<+>). Analyse ved hjelp av<1>H- og 13C-NMR viste tilstedeværelsen av geometriske cis- og transisomerer rundt 3°-amidbindingen.
8H (CDCI3ved 298 K) ; 1,25-1,32/1, 52-1, 70/1,72-2, 00
(2 Hy + 2 Hg, bm), 2,05-2,15 (OCOCH3, bs) , 3, 35-3, 58 (1 HE, m) , 3, 98-4, 10/4,18-4, 22 (1 HE, dd), 4,24-4,31 (Fmoc H-9, m) , 4,32-4,52 (Fmoc CH2, m) , 4, 60-4, 82 (2 x COOCH2CH=CH2, m) , 4,92-4,99 (Hp, m) , 5,22-5,32 (H0, m) , 5,28-5,32/5,34-5,41 (2 x COOCH2CH=CH2, dd, J 17,2), 5, 89-6, 00 (1 x COOCH2CH=CH2, m) , 7, 30-7,37 (2 H, aromatisk, Fmoc H-2 og H-7), 7,38-7,46 (2 H, aromatisk, Fmoc H-3 og H-6), 7,59-7,76 (2 H, aromatisk, Fmoc H-l og H-8), 7,78-7,80 (2 H, aromatisk, Fmoc H-4 og H-5, d, J 7,5).
8C (CDCI3ved 298 K) ; 21,22 (u, OCOCH3) , 23,01 (d, Cs) , 25,54 (d, Cy) , 40, 51/40, 88 (d, Ce) , 47, 44 (u, Fmoc C-9) , 55, 55 (u, Cu) , 66, 08 (d, COOCH2CH=CH2) , 68, 30/68,65 (d, Fmoc CH2) , 69,21/69, 59 (u, Cp), 118, 94/119,22 (d, COOCH2CH=CH2) , 120,31 (u, Fmoc C-4 og C-5), 125,34/125,49 (u, Fmoc C-l og C-8), 127,43 (u, Fmoc C-2 og C-7), 128,04 (u, Fmoc C-3 og C-6), 131,93 (u, C00-CH2CH=CH2), 141,61 (q, Fmoc C-4' og C-5'), 144,15 (q, Fmoc C-l' og C-8'), 155,50/156,36 (q, OCON), 169,42/169,91/170,37 (COO-CH2CH=CH2+ OCOCH3) .
Produkt 2. ( 2R , 35)-( 3- hydroksy) pyrrolidin- 1, 2- dikarboksylsyre- 2-allylester- 1-( 9H- fluoren- 9- ylmetyl) ester
Et hvitt, krystallinsk stoff, utbytte 9,05 g
(22,2 mmol, 46,1 %). TLC (enkelt-UV-flekk, Rf = 0,20, heptan:etylacetat 2:1), analytisk HPLC, Rt = 19,970 minutter, HPLC-MS (enkelthoved-UV-topp med Rt = 9,450 minutter, 408,1
[M + H]<+>, 430,1 [M + Na]<+>). Analyse ved hjelp av<1>H- og<13>C-NMR viste tilstedeværelsen av geometriske cis- og transisomerer rundt 3°-amidbindingen.
8H (CDCI3ved 298 K) ; 1,47-1,61 (1 HY+ 1 Hs, m) , 1,71-1,81 (1 H8, b), 2,02-2,11 (1 Hy, b) , 2, 71-2,81/2, 84-2,94 (1 HE, dt), 3, 54-3, 59 (Hp, m) , 3, 70-3, 82 (OH, b) , 3, 93-3, 96/4, 10-4,16/4,11 (1 HE, d, J 10), 4,24-4,31 (Fmoc H-9, m) , 4,40-4,56 (Fmoc CH2, m) , 4,61-4,78 (2 x COOCH2CH=CH2, m) , 4,98/5,18 (HG, d, J 5, 0), 5,25-5, 37 (2 x COOCH2CH=CH2, m), 5, 86-5, 96 (1 x COO-CH2CH=CH2, m) , 7, 30-7, 34 (2 H, aromatisk, Fmoc H-2 og H-7), 7,41-7,48 (2 H, aromatisk, Fmoc H-3 og H-6), 7,53-7,62 (2 H, aromat-
isk, Fmoc H-l og H-8), 7,79-7,81 (2 H, aromatisk, Fmoc H-4 og H-5) .
8C (CDC13ved 298 K) ; 23, 87/24, 12 (d, C») , 30,60 (d, CY) , 41,27/41,57 (d, CE) , 47, 62 (u, Fmoc C-9) , 58, 29/59, 54 (u, C«) , 66, 44/66,54 (d, COOCH2CH=CH2) , 68, 28 (d, Fmoc CH2) , 69,15/69,42 (u, Cp), 119,67/119,91 (d, COOCH2CH=CH2) , 120, 42 (u, Fmoc C-4 og C-5), 125,22/125,35 (u, Fmoc C-l og C-8), 127,48 (u, Fmoc C-2 og C-7), 128,15 (u, Fmoc C-3 og C-6), 131,42/131,57 (u, COOCH2-CH=CH2), 141,73 (q, Fmoc C-4' og C-5'), 144,12/144,37 (q, Fmoc C-1' og C-8'), 155, 67/156,26 (q, OCON), 171,57 (COOCH2CH=CH2) .
(4) Fremstilling av ( 2S, 3JR)-( 3- hydoksy) pyrrolidin- 1, 2- dikarboksylsyre- 2- allylester- l-( 9H- fluoren- 9- ylmetyl)-ester
(2S, 3 JR) - (3-acetoksy) pyrrolidin-1, 2-di karboksyl sy re-2-allylester-1- (9ff-f luoren-9-ylmetyl) ester (4,5 g, 10 mmol) ble oppløst i allylalkohol (50 ml), cCH2S04(200 ul) ble tilsatt, og det ble varmet opp til refluks i 24 timer. Blandingen ble av-kjølt, EtOAc (250 ml) ble tilsatt, og det ble vasket med NaHC03(250 ml), saltoppløsning (250 ml) og tørket (Na2S04) . Oppløs-ningsmidlene ble fjernet under vakuum, hvorved man fikk en gyllenbrun olje (4,2 g). Den urene olje ble renset over silikagel (170 g) under eluering med en gradient av heptan:etylacetat 3:1 -» 1:1. Ønskede fraksjoner ble slått sammen og redusert under vakuum til et hvitt, krystallinsk stoff, utbytte 3,0 g
(7,37 mmol, 73,7 %). TLC (enkelt-UV-flekk, Rf = 0,20, heptan:etylacetat 2:1), analytisk HPLC, Rt = 19,474 minutter, HPLC-MS (enkelthoved-UV-topp med Rt = 9,507 minutter, 408,2
[M + H]\ 430,2 [M + Na]<+>). Analyse ved hjelp av<1>H- og<13>C-NMR viste tilstedeværelsen av geometriske cis- og transisomerer rundt 3°-amidbindingen.
8H (CDCI3ved 298 K) ; 1,46-1, 59 (1 HY + 1 H8, m) , 1,74-1,81 (1 H8, b) , 2,01-2,10 (1 Hy , b) , 2, 70-2, 82/2, 88-2, 99 (1 He, dt), 3, 49-3, 62 (Hp, m) , 3, 70-3, 80 (OH, b) , 3, 90-3, 94/4, 09-4,14
(1 He, dd), 4, 26-4,32 (Fmoc H-9, m) , 4,41-4,58 (Fmoc CH2, m) , 4, 60-4, 80 (2 x COOCH2CH=CH2, m) , 4, 96-4,98/5, 17-5,18 (Ha, dd, J 4, 8), 5,25-5, 42 (2 x COOCH2CH=CH2, m) , 5, 82-5, 97 (1 x COOCH2-CH=CH2, m) , 7,30-7, 38 (2 H, aromatisk, Fmoc H-2 og H-7), 7,42-7,48 (2 H, aromatisk, Fmoc H-3 og H-6), 7,55-7,63 (2 H, aromat-
isk, Fmoc H-l og H-8), 7,79-7,84 (2 H, aromatisk, Fmoc H-4 og H-5) .
8C (CDC13ved 298 K) ; 23, 86/24,12 (d, C8) , 30,62 (d, CY) , 41,28/41, 57 (d, CE) , 47,62 (u, Fmoc C-9) , 58,29/59,54 (u, Ca) , 66, 43/66,54 (d, COOCH2CH=CH2) , 68, 27 (d, Fmoc CH2) , 69, 15/69, 43 (u, Cp), 119,69/119,91 (d, COOCH2CH=CH2) , 120, 42 (u, Fmoc C-4 og C-5), 125,22/125,35 (u, Fmoc C-l og C-8), 127,47 (u, Fmoc C-2 og
C-7), 128,14 (u, Fmoc C-3 og C-6), 131,43/131,57 (u, COOCH2-CH=CH2), 141,73 (q, Fmoc C-4' og C-5'), 144,12/144,37 (q, Fmoc C-1<*>og C-8'), 155, 67/156,26 (q, OCON), 171,57 (COOCH2CH=CH2) . (5) Fremstilling av ( 2S, 3R )-( 3- tert.- butoksy) pyrrolidin-1, 2- dikarboksylsyre- 2- allylester- l- ( 9ff- fluoren- 9- ylmetyl) ester (2S, 3JR) - (3-hydoksy) pyrrolidin-1, 2-dikarboksylsyre-2-allylester-1-(9ff-fluoren-9-ylmetyl)ester (1,75 g, 4,30 mmol) ble oppløst i tørt diklormetan (20 ml) i et 50 ml trykkrør av glass, og det ble avkjølt til -78 °C. Isobutylengass (ca. 10 ml) ble kondensert i oppløsningen, og cH2S04(100 ul) ble tilsatt. En rørepinne ble tilsatt, røret ble lukket, avkjølingen fjernet, og det ble omrørt ved romtemperatur i 72 timer. Det lukkede rør ble avkjølt til -78 °C, N-metylmorfolin (200 ul, 1 ekv. w.r.t. cH2S04) , og fikk varmes opp til romtemperatur og åpnet med om-røring i 2 timer. Diklormetan (75 ml) ble tilsatt, og de organiske stoffene ble vasket med NaHC03(75 ml) , så saltoppløs-ning (75 ml) og tørket (Na2S04) . Oppløsningsmidlene ble fjernet under vakuum, hvorved man fikk en blek gyllenbrun olje (1,91 g). Den urene olje ble renset over silikagel (100 g) under eluering med en gradient av heptan:etylacetat 5:1 -» 3:1. Ønskede fraksjoner ble slått sammen og redusert under vakuum til en tykk, klar olje, utbytte 1,59 g (3,43 mmol, 79,8 %). TLC (enkelt-UV-flekk, Rf = 0,50, heptan:etylacetat 2:1), analytisk HPLC, Rt = 24,123 minutter, HPLC-MS (enkelthoved-UV-topp med Rt = 11,91 minutter, 408,2 [M + H-Bu<fc>]<+>, 486, 3 [M + Na]<+>, 949, 5 [2 M + Na]<+>). Analyse ved hjelp av<:>H- og<13>C-NMR viste tilstedeværelsen av geometriske cis- og transisomerer rundt 3°-amidbindingen. 8H (CDCI3ved 298 K) ; 1,23 (9 x C(CH3)3, s), 1,46-1,98 (2 Hy + 2 H8, m) , 3,37-3, 45/3, 46-3, 57 (1 HE, dt) , 3,61-3,72 (Hp, b), 3,90-3, 99/4,02-4,10 (1 HE, dd), 4,20-4,72 (Fmoc H-9 + Fmoc CH2+ 2 x COOCH2CH=CH2, bm), 4,89/5,01 (Ha, dd, J 6,3), 5,24 (1 x COOCH2CH=CH2, d, J 10,5), 5,38 (1 x COOCH2CH=CH2, d) , 5,88-5,99 (1 x COOCH2CH=CH2, m) , 7,29-7, 36 (2 H, aromatisk, Fmoc H-2 og H-7), 7,38-7,47 (2 H, aromatisk, Fmoc H-3 og H-6), 7,56-7,69 (2 H, aromatisk, Fmoc H-l og H-8), 7,76-7,81 (2 H, aromatisk, Fmoc H-4 og H-5). 8C (CDC13ved 298 K) ; 23, 69/23, 99 (d, C6) , 28, 38/28, 65 (u, C(CH3)3), 28, 75 (d, CY) , 40, 40/40,72 (d, CE) , 47,61 (u, Fmoc C-9), 58, 36/58, 47 (u, Ca) , 65, 67 (d, COOCH2CH=CH2) , 67, 82 (u, Cp), 67,99/68, 13 (d, Fmoc CH2) , 74, 97 (q, C(CH3) 3), 118, 44/118, 57 (d, COOCH2CH=CH2) , 120, 40 (u, Fmoc C-4 og C5) , 125, 39/125, 48 (u, Fmoc C-l og C-8), 127,46 (u, Fmoc C-2 og C-7), 128,10 (u, Fmoc C-3 og C-6), 132, 49 (u, COOCH2CH=CH2) , 141,71 (q, Fmoc C-4' og C-5'), 144,14/144,30 (q, Fmoc C-l' og C-8'), 155,44/157,00 (q, OCON), 170, 43/171,05 (COOCH2CH=CH2) .
(6) Fremstilling av ( 2S , 3R )-( 3- tert.- butoksy) pyrrolidin-1, 2- dikarboksylsyre- l( 9 lf- fluoren- 9- ylmetyl) ester
(2S, 3R)-(3-tert.-butoksy)pyrrolidin-1,2-dikarboksylsyre-2-allylester-l-(9ff-fluoren-9-ylmetyl)ester (1,52 g,
3,29 mmol) ble oppløst i tørt diklormetan (25 ml) med omrøring. Tetrakistrifenylfosfinpalladium(O) (76 mg, 0,066 mmol,
0,02 ekv.) ble tilsatt, etterfulgt av fenyltrihydrosilan
(0,71 g, 0,622 ml, 6,58 mmol, 2 ekv.). Etter 1 time ble diklormetan (150 ml) tilsatt, og de organiske stoffene ble vasket med 0,01 N HC1 (150 ml), saltoppløsning (150 ml) og tørket (Na2S04) . Oppløsningsmidlene ble fjernet under vakuum, hvorved man fikk et mørkegrått, fast stoff (2,05 g). Det urene faste stoff ble renset over silikagel (75 g) under eluering med en gradient av heptan:etylacetat 2:1 -> 1:2. Ønskede fraksjoner ble slått sammen og redusert under vakuum til et hvitt, krystallinsk stoff, utbytte 0,97 g (2,29 mmol, 69,6 %). TLC (enkelt-UV-flekk, Rf = 0,25, heptan:etylacetat 1:1), analytisk HPLC, Rt = 21,310 minutter, HPLC-MS (enkelthoved-UV-topp med Rt = 10,254 minutter, 368,2 [M + H-Bu<t>]<+>, 446,2 [M + Na]<+>, 869, 3 [2 M + Na]<+>). Analyse ved hjelp av1H- og<13>C-NMR viste tilstedeværelsen av geometriske cis- og transisomerer rundt 3°-amidbindingen.
8H (CDC13ved 298 K) ; 1, 32/1, 40 (9 x C(CH3)3, ds), 1,42-1,58 (1 Hy + 1 H8, m) , 1, 72-1,80 (1 H8, bm), 1, 82-1,96 (1 HY, bm),
2, 76-2, 82/2, 90-2, 97 (1 HE, dt) , 3, 70-3, 84 (Hp, b) , 3,90-4,07
(1 He, dd), 4,22-4, 32 (Fmoc H-9), 4, 40-4,58 (Fmoc CH2, bm), 4,59-4,61/5,02-5,04 (Ha, dd, J 5,7), 7,29-7,36 (2 H, aromatisk, Fmoc H-2 og H-7), 7,39-7,43 (2 H, aromatisk, Fmoc H-3 og H-6), 7,53-7,67 (2 H, aromatisk, Fmoc H-l og H-8), 7,76-7,81 (2 H, aromatisk, Fmoc H-4 og H-5), 10,90-11,10 (COOH, bs).
8C (CDC13ved 298 K) ; 23, 71/24,23 (d, C5) , 28,21/28,28 (u, C(CH3)3), 30, 58/30,72 (d, Cy) , 40, 49/40, 79 (d, CE) , 47, 58/47, 63 (u, Fmoc C-9), 58,20/58, 43 (u, Ca) , 67, 78/68, 32 (u, Cp), 68, 69/68, 88 (d, Fmoc CH2) , 78, 48/78, 67 (q, C(CH3)3), 120,31 (u, Fmoc C-4 og C-5), 125,16/125,27/125,50/125,53 (u, Fmoc C-l og C-8), 127,42/127,46/127,59 (u, Fmoc C-2 og C-7), 128,03/128,10 (u, Fmoc C-3 og C-6), 141,55/141,69/141,79 (q, Fmoc C-4' og C-5'), 144,06/144,12/144,38/144,48 (q, Fmoc C-l' og C-8'), 155,73/156,49 (q, OCON), 169,26/169,52 (COOH).
(7) Fremstilling av ( 2S, 3R )-( 3- tert.- butoksy)- 2-( 2- diazo-acetyl) pyrrolidin- 1, 2- dikarboksylsyre- l-( 9H - f luoren- 9-ylmetyl) ester
(2S, 3jR) - (3-tert. -butoksy) pyrrolidin-1, 2-dikarboksylsyre-l- (9H-fluoren-9-ylmetyl)ester (830 mg, 1,96 mmol) ble opp-løst ved omrøring i tørt diklormetan (20 ml). Reaksjonsblandingen ble gjennomboblet med nitrogen og avkjølt til -15 °C. Iso-butylkloroformiat (296 mg, 2,16 mmol i tørt diklormetan (2,5 ml) og N-metylmorfolin (397 mg, 3,92 mmol i tørt diklormetan
(2,5 ml) ble tilsatt samtidig i 0,5 ml alikvoter i løpet av
15 minutter. Eterisk diazometan (generert fra diazald (2,5 g, ca. 8 mmol i dietyleter (40 ml)) på natriumhydroksid (2,75 g) i vann (4,3 ml)/etanol (8,6 ml) ved 60 °C ble tilsatt til den aktiverte aminosyreoppløsning, og det ble omrørt ved romtemperatur i 24 timer. Eddiksyre (ca. 2 ml) ble tilsatt for å stanse reaksjonen, så ble tert.-butylmetyleter (100 ml) tilsatt, de organiske stoffene ble vasket med vann (3 x 150 ml) og så tørket (Na2S04) . Oppløsningsmidlene ble fjernet under vakuum, hvorved man fikk en tykk, gul olje (1,02 g). Den urene olje ble brukt til det neste trinn uten rensing. TLC (enkelthoved-UV-flekk, Rf = 0,40, heptan:etylacetat 2:1), analytisk HPLC, Rt = 18,887 minutter (50,8 %) pluss et stort antall mindre topper, HPLC-MS (to hoved-UV-topper med Rt = 9,095 minutter, 364,2 [M + H]<+>, 749,2
[2 M + Na]<+>og Rt = 10, 856 minutter, 420,2 [M + H-N2]<+>, 470,2
[M + Na]<+>, 917, 3 [2 M + Na]+) .
Legg merke til at etter HPLC-MS-analyse tilsvarer m/z 364,2 det ønskede toring-produktet ( 3aSj_ laR) -3-oksoheksahydrofuro [3, 2-Jb] pyridin-4-karboksylsyre-9H-fluoren-9-ylmetylester.
(8) Ringslutning til ( 3aS, laR ) - 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2- Jb] - pyridin- 4 - karbo ksyls yre- 9if- fluoren- 9- ylmet yles ter
En oppløsning av litiumklorid (844 mg, 20 mmol) i vann (5 ml) og eddiksyre (20 ml) ble tilsatt til (2S, 3 R)-(3-tert.-butoksy)-2-(2-diazoacetyl)pyrrolidin-1,2-dikarboksylsyre-l-{ 9H-fluoren-9-ylmetyl)ester (1000 mg, ca. 2 mmol). Gass ble utviklet, og det gule, oljeaktige, faste stoff ble oppløst i løpet av 1 time, hvorved man fikk en praktisk talt fargeløs oppløs-ning. Etter 90 minutter ble kloroform (150 ml) tilsatt, og de organiske stoffene ble vasket med NaHCC>3 (2 x 150 ml) , salt-oppløsning (150 ml) og tørket (Na2S04) . Oppløsningsmidlene ble fjernet under vakuum, hvorved man fikk en blekgul gummi
(920 mg). Den urene gummi ble renset over silikagel (135 g) under eluering med en gradient av heptan:etylacetat 3:1 — > 1:1. Ønskede fraksjoner ble slått sammen og redusert under vakuum til et hvitt, krystallinsk stoff, utbytte 370 mg (1,02 mmol, 51,9 % fra utgangssyre). TLC (enkelt-UV-flekk, Rf = 0,25, heptan:etylacetat 2:1), analytisk HPLC, Rt = 18,734 minutter, HPLC-MS (enkelt-UV-topp med Rt = 9,051 minutter, 364,2 [M + H]<+>, 386,2
[M + Na]<+>). Analyse ved hjelp av<X>H- og<13>C-NMR viste tilstede-værelse av geometriske cis- og transisomerer rundt 3°-amidbindingen.
8H (CDC13ved 298 K) ; 1,29-1, 49 (1 Hy + 1HS, m) , 1,61-1,80 (1 H8, bm), 2,06-2,19 (1 Hy, bm), 2, 50-2, 62/2, 63-2, 80 (1 He, m) , 3,96 (1 He, b) , 3,97 (COCH2A, d, J 16,3), 4,15 (Fmoc H-9, bt) , 4,25-4, 34 (Hp, b) , 4, 36-4, 60 (Fmoc CH2+ C0CH2B, bm), 4,75-4,82/5,11-5,19 (Ha, bd) , 7, 30-7,36 (2 H, aromatisk, Fmoc H-2 og H-7), 7,41-7,49 (2 H, aromatisk, Fmoc H-3 og H-6), 7,52-7,68
(2 H, aromatisk, Fmoc H-l og H-8), 7,75-7,85 (2 H, aromatisk, Fmoc H-4 og H-5).
8C (CDCI3ved 298 K) ; 21, 75/22, 04 (d, C8) , 26, 60 (d, Cy) , 41, 40/41, 66 (d, Ce), 47,59 (u, Fmoc C-9) , 60, 42 (u, Ca) , 67,54 (d, Fmoc CH2), 68, 21/68, 39 (d, COCH20) , 72, 61 (u, Cp), 120, 39 (u,
Fmoc C-4 og C-5), 125,43 (u, Fmoc C-l og C-8), 127,51 (u, Fmoc C-2 og C-7), 128,14 (u, Fmoc C-3 og C-6), 141,73 (q, Fmoc C-4' og C-5'), 144,30 (q, Fmoc C-l' og C-8'), 155,79/156,35 (q, OCON), 211,10/211,4 (q, COCH20) .
Ved å følge de generelle retningslinjene fra reaksjonsskjema 2, ble den nødvendige toring-byggeblokk ( 3aS, laR )-3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyridin-4-karboksylsyre- 9H-fluoren-9-yl-metylester omdannet til byggeblokk-linkerkonstruksjon på følgende måte: (3aS, laR)-3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyridin-4-karboksylsyre-9tf-fluoren-9-ylmetylester (250 mg, 0,689 mmol) ble opp-løst i en blanding av etanol (12,0 ml) og vann (1,75 ml) inneholdende natriumacetat.trihydrat (141 mg, 1,03 mmol, 1,5 ekv.). 4-[[(hydrazinokarbonyl)amino]metyl]sykloheksankarboksylsyretri-fluoracetat (227 mg, 0,689 mmol, 1,0 ekv., Murphy, A.M. et al., J. Am. Chem. Soc, 114, 3156-3157, 1992) ble tilsatt, og blandingen ble kokt under tilbakeløpskjøling i 4 timer. Kloroform (150 ml) ble tilsatt og de organiske stoffene vasket med HCl (150 ml, ca. pH 3), tørket (Na2S04) og redusert under vakuum, hvorved man fikk en uren byggeblokk-linkerkonstruksjon som en klar, viskøs olje. Utbytte 350 mg, analytisk HPLC, to topper, Rt = 17,101 (74,7 %) og 18,547 minutter (25,3 %) (geometriske cis-/transisomerer), HPLC-MS (2 x UV-topp med Rt=8,037 og 8,972 minutter, 561,2 [M + H]<+>). Råkonstruksjon ble brukt direkte til konstruksjonslading.
Ved å følge de generelle retningslinjene fra reaksjonsskjema 2, ble den nødvendige byggeblokk-linkerkonstruksjon festet til fastfasen, hvorved man fikk ladet byggeblokk-linker-konstruks jon på følgende måte: Byggeblokk-linkerkonstruksjon (0,595 mmol), 2-(lH-benzotriazol-l-yl)-1,1,3,3-tetrametyluroniumheksafluorfosfat (HBTU, 226,0 mg, 0,596 mmol), 1-hydroksybenzotriazolhydrat (HOBT, 92 mg, 0,596 mmol) ble oppløst i dimetylformamid (3 ml), og N-metylmorfolin (NMM, 131 ul 1,197 mmol) ble tilsatt. Etter foraktivering i 5 minutter ble frie amin-"verktøy" (160 x
1,2 mmol) tilsatt, etterfulgt av dimetylformamid (17,5 ml) og fikk stå over natten. Den forbrukte koblingsoppløsning ble så tilsatt til frie amin-"kroner" (18 x 10 umol) og fikk stå over
natten. Standardvasking og -analyser indikerte kvantitativ lading i begge tilfeller.
Ved å følge de generelle retningslinjene fra reaksjonsskjema 2, ble den nødvendige ladede byggeblokk-linkerkonstruksjon utformet på den faste fase på følgende måte: Ladet konstruksjon ble bygget opp til eksempelforbindelse 83, (3aS, laR) -morfolin-4-karboksylsyre- [ l.R-benzylsulf anylmetyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyridin-4-yl)etyl]-amid, ved hjelp av standard Fmoc-avbeskyttelse og sekvensvis kobling med Fmoc-Cys(SBzl)-0H, så morfolin-4-karbonylklorid. Den urene eksempelforbindelse ble spaltet og analysert (se generelle teknikker). HPLC, Rt = 15,59 minutter (> 80 %), HPLC-MS 449,2
[M + H] + .
De følgende eksempler (84-130) ble fremstilt som nærmere beskrevet for eksempel 83, idet det ble koblet med de nødvendige reagenser slik at man fikk fullengdemolekylet.
Eksempel 84
( 3aS, laR )- naftalen- 2- karboksylsyre-[ IS-( 4- hydroksybenzyl)- 2-okso- 2- ( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2- Jb] pyridin- 4- yl) etyl] amid
HPLC, Rt = 15,79 minutter (> 80 %), HPLC-MS 459,3 [M + H]<+>.
Eksempel 85
( 3aS , laR )- 4- dimetylamino- N-[ IS-( 4- hydroksybenzyl)- 2- okso- 2-( 3-oksoheksahydrofuro[ 3, 2- b] pyridin- 4- yl) etyl] benzamid
HPLC, Rt = 10,98 minutter (> 80 %), HPLC-MS 452,2 [M + H]<+.>
Eksempel 8 6
( 3aS, laR )- naftalen- l- karboksylsyre-[ 3- metyl- lS-( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2- b] pyridin- 4- karbonyl) butyl] amid
HPLC, Rt = 17,71 minutter (> 80 %), HPLC-MS 409,2 [M + H]<+.>
Eksempel 87
( 3aS, laR )- naftalen- 2- karboksylsyre-[ 3- metyl- lS-( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2- b] pyridin- 4- karbonyl) butyl] amid
HPLC, Rt = 18,28 minutter (> 80 %), HPLC-MS 409,2 [M + H]<+>.
Eksempel 88
( 3aS, 7ai?) - N- [ IS- ( 4- hydroksybenzyl) - 2- okso- 2- ( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2- b] pyridin- 4- yl) etyl]- 5- tiofen- 2- ylnikotinamid
HPLC, Rt = 13,16 minutter (> 80 %), HPLC-MS 492,2 [M + H]<+>.
Eksempel 89
( 3aS, laR )- 2- pyridin- 3- yltiazol- 4- karboksylsyre-[ IS-( 4- hydroksybenzyl) - 2- okso- 2-( 3- oksoheksahydrofuro[ 3, 2- b] pyridin- 4- yl) etyl]-amid
HPLC, Rt = 10,45 minutter (> 80 %), HPLC-MS 493,2 [M + H]<+>.
Eksempel 90
( 3aS, laR )- bifenyl- 4- karboksylsyre-[ IS-( 4- hydroksybenzyl)- 2- okso-2-( 3- oksoheksahydrofuro[ 3, 2 - b ] pyridin- 4- yl) etyl] amid
HPLC, Rt = 17,38 minutter (> 80 %), HPLC-MS 485,2 [M + H]<+>.
Eksempel 91
( 3aS, laR )- 4- tert.- butyl- N-[ IS-( 4- hydroksybenzyl)- 2- okso- 2-( 3-oksoheksahydrofuro[ 3, 2 - b ] pyridin- 4- yl) etyl] benzamid
HPLC, Rt = 17,90 minutter (> 80 %), HPLC-MS 485,2 [M + H]<+>.
Eksempel 92
( 3aS, laR )- N-[ IS-( 4- hydroksybenzyl)- 2- okso- 2-( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2 - b ] pyridin- 4- yl) etyl]- 4- tiofen- 2- ylbenzamid
HPLC, Rt = 17,00 minutter (> 80 %), HPLC-MS 491,2 [M + H]<+>.
Eksempel 93
( 3aS, laR )- N-[ IS-( 4- hydroksybenzyl)- 2- okso- 2-( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2 - b ] pyridin- 4- yl) etyl]- 4- trifluormetoksybenzamid
HPLC, Rt = 17,07 minutter (> 80 %), HPLC-MS 493,2 [M + H]<+>.
Eksempel 94
( 3aS, laR )- N-[ 3- metyl- lS-( 3- oksoheksahydrofuro[ 3, 2 - b ] pyridin- 4-karbonyl) butyl]- 5- tiofen- 2- ylnikotinamid
HPLC, Rt = 15,82 minutter (> 80 %), HPLC-MS 442,2 [M + H]<+>.
Eksempel 95
( 3aS, laR ) - 2- pyridin- 3- yltiazol- 4- karboksylsyre- [ 3- metyl- lS- ( 3-oksoheksahydrofuro [ 3, 2- jb] pyridin- 4- karbonyl) butyl] amid
HPLC, Rt = 12,55 minutter (> 80 %), HPLC-MS 443,2 [M + H]<+>.
Eksempel 96
( 3a5, 7a. R) - bifenyl- 4- karboksylsyre- [ 3- metyl- lS- ( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2 - b ] pyridin- 4- karbonyl) butylamid
HPLC, Rt = 19,88 minutter (> 80 %), HPLC-MS 435,2 [M + H]<+>.
Eksempel 97
( 3a5, laR )- 4- tert.- butyl- N-[ 3- metyl- lS-( 3- oksoheksahydrofuro-[ 3, 2- ib] pyridin- 4- karbonyl) butyl] benzamid
HPLC, Rt = 20,42 minutter (> 80 %), HPLC-MS 415,2 [M + H]<+.>
Eksempel 98
( 3aS, laR )- N-[ 3- metyl- lS-( 3- oksoheksahydrofuro[ 3, 2 - b ] pyridin- 4-karbonyl) butyl]- 4- tiofen- 2- ylbenzamid
HPLC, Rt = 19,60 minutter (> 80 %), HPLC-MS 441,2 [M + H]<+>.
Eksempel 99
( 3aS, laR )- N-[ 3- metyl- lS-( 3- okso heksahydrofuro[ 3, 2 - b ] pyridin- 4-karbonyl) butyl]- 4- trifluormetoksybenzamid
HPLC, Rt = 19,66 minutter (> 80 %), HPLC-MS 443,2 [M + H]<+>.
Eksempel 100
( 3aS, laR )- 2- metyl- 5- fenylfuran- 3- karboksylsyre-[ 3- metyl- lS-( 3-oksoheksahydrofuro[ 3, 2 - b ] pyridin- 4- karbonyl) butyl] amid
HPLC, Rt = 20,48 minutter (> 80 %), HPLC-MS 439,2 [M + H]<+>.
Eksempel 101
( 3aS, laR )- morfolin- 4- karboksylsyre-[ IS-( 4- hydroksybenzyl)- 2-okso- 2- ( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2- Jb] pyridin- 4- yl) etyl] amid
HPLC-MS 418,2 [M + H]<+>.
Eksempel 102
( 3aS, laR )- N-[ IS-( 4- hydroksybenzyl- 2- okso- 2-( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2- jb] pyridin- 4- yl) etyl] benzamid
HPLC, Rt = 12,71 minutter (> 85 %), HPLC-MS 409,2 [M + H]<+>.
Eksempel 103
( 3aS, laR )- naftalen- l- karboksylsyre-[ IS-( 4- hydroksybenzyl)- 2-okso- 2-( 3- oksoheksahydrofuro[ 3, 2- b] pyridin- 4- yl) etyl] amid
HPLC, Rt = 14,88 minutter (> 85 %), HPLC-MS 459,2 [M + H]<+.>
Eksempel 104
( 3aS, 7a. R) - furan- 3- karboksylsyre- [ IS- ( 4- hydroksybenzyl) - 2- okso- 2-( 3- oksoheksahydrofuro[ 3, 2- b] pyridin- 4- yl) etyl] amid
HPLC, Rt = 11,14 minutter (> 85 %), HPLC-MS 399,2 [M + H]<+>.
Eksempel 105
( 3aS, 7a. R) - benzo [ ib] tiofen- 2- karboksylsyre- [ IS- ( 4- hydroksybenzyl) - 2- okso- 2-( 3- oksoheksahydrofuro[ 3, 2- b] pyridin- 4- yl) etyl] amid
HPLC, Rt = 15,99 minutter (> 85 %), HPLC-MS 465,2 [M + H]<+>.
Eksempel 106
( 3aS, laR ) - benzo [ b] tiofen- 3- karboksylsyre- [ IS- ( 4- hydroksybenzyl) - 2- okso- 2-( 3- oksoheksahydrofuro[ 3, 2- b] pyridin- 4- yl) etyl] amid
HPLC, Rt = 15,58 minutter (> 85 %), HPLC-MS 465,2 [M + H]<+>, 951,3 [2 M + Na]<+>.
Eksempel 107
( 3a5, laR )- furan- 3- karboksylsyre-[ 15- benzyl- 2- okso- 2-( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2 - b ] pyridin- 4- yl) etyl] amid
HPLC, Rt = 14,44 minutter (> 85 %), HPLC-MS 383,2 [M + H]<+>.
Eksempel 108
( 3aS, laR )- tiofen- 3- karboksylsyre-[ lS- benzyl- 2- okso- 2-( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2 - b ] pyridin- 4- yl) etyl] amid
HPLC, Rt = 15,34 minutter (> 80 %), HPLC-MS 399,2 [M + H]<+>.
Eksempel 109
( 3aS, laR )- morfolin- 4- karboksylsyre-[ 3- metyl- lS-( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2 - b ] pyridin- 4- karbonyl) butyl] amid
HPLC-MS 368,2 [M + H]<+>.
Eksempel 110
( 3a5, laR )- N-[ 3- metyl- lS-( 3- oksoheksahydrofuro[ 3, 2 - b ] pyridin- 4-karbonyl) butyl] benzamid
HPLC, Rt = 15,42 minutter (> 85 %), HPLC-MS 359,2 [M + H]<+.>
Eksempel 111
( 3a5, 7aiR) - furan- 3- karboksylsyre- [ 3- metyl- lS- ( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2 - b ] pyridin- 4- karbonyl) butyl] amid
HPLC, Rt = 13,74 minutter (> 85 %), HPLC-MS 349,2 [M + H]<+.>
Eksempel 112
( 3aS, laR ) - benzo [ £>] tiof en- 2- karboksylsyre- [ 3- metyl- lS- ( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2 - b ] pyridin- 4- karbonyl) butyl] amid
HPLC, Rt = 18,52 minutter (> 85 %), HPLC-MS 415,2 [M + H]<+>, 851,3 [2 M + Na]<+.>
Eksempel 113
( 3a5, laR )- 4- dimetylamino- N-[ 3- metyl- lS-( 3- oksoheksahydrofuro-[ 3, 2 - b ] pyridin- 4- karbonyl) butyl] benzamid
HPLC, Rt = 13,55 minutter (> 85 %), HPLC-MS 402,2 [M + H]<+>.
Eksempel 114
( 3aS, laR )- benzo[ b ] tiofen- 3- karboksylsyre-[ 3- metyl- 15-( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2- Jb] pyridin- 4- karbonyl) butyl] amid
HPLC, Rt = 18,26 minutter (> 85 %), HPLC-MS 415,2 [M + H]<+>.
Eksempel 115
( 3aS, laR )- tiofen- 3- karboksylsyre-[ 3- metyl- lS-( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2- jb] pyridin- 4- karbonyl) butyl] amid
HPLC, Rt = 14,80 minutter (> 85 %), HPLC-MS 365,2 [M + H]<+.>
Eksempel 116
( 3a5, laR )- N-[ l£- benzylsulfanylmetyl- 2- okso- 2-( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2- jp] pyridin- 4- yl) etyl] benzamid
HPLC, Rt = 17,78 minutter (> 90 %), HPLC-MS 439,2 [M + H]<+>, 899,3 [2 M + Na]<+>.
Eksempel 117
( 3aS, 7a. R) - furan- 3- karboksylsyre- [ l. R- benzylsulfanylmetyl- 2- okso-2-( 3- oksoheksahydrofuro[ 3, 2 - b ] pyridin- 4- yl) etyl] amid
HPLC, Rt = 16,41 minutter (> 85 %), HPLC-MS 429,2 [M + H]\ 451,2 [M + Na]<+>.
Eksempel 118
( 3a5, laR ) - tiofen- 3- karboksylsyre- [ lJR- benzylsulfanylmetyl- 2- okso-2-( 3- oksoheksahydrofuro[ 3, 2- b] pyridin- 4- yl) etyl] amid
HPLC, Rt = 17,23 minutter (> 85 %), HPLC-MS 445,2 [M + H]<+>, 911,2 [2 M + Na] + .
Eksempel 119
( 3aS, 7a. R) - morf olin- 4- karboksylsyre- [ lS- sykloheksylmetyl- 2- okso-2-( 3- oksoheksahydrofuro[ 3, 2- b] pyridin- 4- karbonyl) etyl] amid
HPLC-MS 408, 3 [M + H]<+>, 430, 3 [M + Na]\
Eksempel 120
( 3aS, 7a. R) - N- [ 15- sykloheksylmetyl- 2- okso- 2- ( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2- b] pyridin- 4- yl) etyl] benzamid
HPLC, Rt = 18,47 minutter (> 85 %), HPLC-MS 399,2 [M + H]<+>, 819,2 [2 M + Na]<+>.
Eksempel 121
( 3aS, laR )- furan- 3- karboksylsyre-[ lS- sykloheksylmetyl- 2- oksc— 2-( 3- oksoheksahydrofuro[ 3, 2 - b ] pyridin- 4- yl) etyl] amid
HPLC, Rt = 17,12 minutter (> 85 %), HPLC-MS 389,2 [M + H]<+>, 411,2 [2 M + Na]<+>.
Eksempel 122
( 3aS, 7a. R) - tiofen- 3- karboksylsyre- [ lS- sykloheksylmetyl- 2- okso- 2-( 3- oksoheksahydrofuro[ 3, 2 - b ] pyridin- 4- yl) etyl] amid
HPLC, Rt = 17,95 minutter (> 85 %), HPLC-MS 405,2 [M + H]<+>, 831,2 [2 M + Na]<+>.
Eksempel 123
( 3aS, laR )- furan- 3- karboksylsyre-[ 15- syklopentylmetyl- 2- okso- 2-( 3- oksoheksahydrofuro[ 3 , 2 - b ] pyridin- 4- yl) etyl] amid
HPLC, Rt = 15,80 minutter (> 80 %), HPLC-MS 375,2 [M + H]<+>, 771,3 [2 M + Na]<+>.
Eksempel 124
( 3aS, laR )- tiofen- 3- karboksylsyre-[ lS- syklopentylmetyl- 2- okso- 2-( 3- oksoheksahydrofuro[ 3, 2- b] pyridin- 4- yl) etyl] amid
HPLC, Rt = 16,72 minutter (> 85 %), HPLC-MS 391,1 [M + H]<+>, 803,3 [2 M + Na]<+>.
Eksempel 125
( 3aS, laR )- furan- 3- karboksylsyre-[ 3, 3- dimetyl- lS-( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2- b] pyridin- 4- karbonyl) butyl] amid
HPLC, Rt = 15,06 minutter (> 90 %), HPLC-MS 363,2 [M + H]<+>, 747,4 [2 M + Na]<+>.
Eksempel 126
( 3aS, 7ai?) - tiofen- 3- karboksylsyre- [ 3, 3- dimetyl- lS- ( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2 - b ] pyridin- 4- karbonyl) butyl] amid
HPLC, Rt = 15,75 minutter (> 85 %), HPLC-MS 379,2 [M + H]<+>, 779,3 [2 M + Na]<+>.
Eksempel 127
( 3aS, 7ai?) - morf olin- 4- karboksylsyre- lS- sykloheksyImety 1- 2- okso- 2-( 3- oksoheksahydrofuro[ 3, 2 - b ] pyridin- 4- yl) etylester
HPLC-MS 409,2 [M + H]<+>, 839, 5 [2 M + Na] + .
Som nærmere redegjort for i eksempel 74, ble forbindelse (33) koblet under standardbetingelser (etter Fmoc-fjerning) til (3aS, 7af?) -3-oksoheksahydrofuro [3, 2- b] pyridin-4-karboksylsyre-9tf-fluoren-9-ylmetylesterekvivalenten til ladet byggeblokk-linkerkonstruks jon (22), og så ble det spaltet, hvorved man fikk eksempelforbindelse 127.
Eksempel 128
( 2S , 3aS , laR )- 4-[ 3- sykloheksyl- 2-( furan- 2- ylmetansulfanyl)-propionyl] heksahydrofuro[ 3, 2 - b ] pyridin- 3- on
HPLC-MS 392, 1 [M + H]<+>, 805,2 [2 M + Na]<+>.
Som nærmere redegjort for i eksempel 7 6, ble forbindelse (41) koblet under standardbetingelser (etter Fmoc-fjerning) til (3aS, laR)-3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyridin-4-karboksylsyre-9ff-fluoren-9-ylmetylesterekvivalenten til ladet byggeblokk-linkerkonstruks jon (22), og så ble det spaltet, hvorved man fikk eksempelforbindelse 128.
Eksempel 129
( 2S, 3a5, laR )- 4-[ 3- sykloheksyl- 2-( furan- 2- ylmetansulfonyl)-propionyl] heksahydrofuro[ 3, 2 - b ] pyridin- 3- on
HPLC, Rt = 19,015 minutter (> %), HPLC-MS 424,1 [M + H]<+>, 869,2 [2 M + Na]<+>.
Som nærmere redegjort for i eksempel 76, ble forbindelse (41) koblet under standardbetingelser (etter Fmoc-fjerning) til (3aS, laR)-3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyridin-4-karboksyl syre-9ff-fluoren-9-ylmetylesterekvivalenten til ladet byggeblokk-linkerkonstruks jon (22). Den ladede mellomprodukttioeter (1,2 umol "verktøy") ble oksidert med m-klorperbenzosyre (5 ekv., 65 % reagens, 1,6 mg) i diklormetan (200 ul) i 5 timer, etterfulgt av standardvasking og så spaltet, hvorved man fikk eksempelforbindelse 129.
Eksempel 130
( 3aS, laR ) - 2. R- sykloheksylmetyl- 4- morf olin- 4- yl- l- ( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2 - b ] pyridin- 4- yl) butan- 1, 4- dion
HPLC-MS 407,1 [M + H]<+>, 833,3 [2 M + Na] + .
Som nærmere redegjort for i eksempel 77, ble forbindelse (36) koblet under standardbetingelser (etter Fmoc-fjerning) til (3aS, laR)-3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyridin-4-karboksylsyre-9ff-fluoren-9-ylmetylesterekvivalenten til ladet byggeblokk-linkerkonstruks jon (22), og så ble det spaltet, hvorved man fikk eksempelforbindelse 130.
Eksempel 131 ( et eksempel på generell formel ( II))
( 3aR , laS ) - morfolin- 4- karboksylsyre- [ l. R- benzylsulfanylmetyl- 2-okso- 2-( 3- oksoheksahydrofuro[ 3, 2 - b ] pyridin- 4- yl) etyl] amid
Den nødvendige toring-byggeblokk ( 3aR, laS)-3-oksoheksahydrofuro [3, 2- b] pyridin-4-karboksylsyre-9tf-fluoren-9-ylmetyl-ester ble fremstilt i ytterligere fire trinn fra { 2R, 3S)-(3-hydroksy)pyrrolidin-1,2-dikarboksylsyre-2-allylester-1-( 9H-fluoren-9-ylmetyl)ester på følgende måte.
(1) Fremstiling av ( 2R , 3S )-( 3- tert.- butoksy) pyrrolidin- 1, 2-dikarboksylsyre- 2- allylester- l-( 9H - f luoren- 9- ylmetyl)-ester
( 2R, 3S)-(3-hydoksy)pyrrolidin-1,2-dikarboksylsyre-2-allylester-1-(9H-fluoren-9-ylmetyl)ester (1,75 g, 4,30 mmol) ble oppløst i tørt diklormetan (20 ml i et 50 ml trykkrør av glass og avkjølt til -78 °C. Isobutylengass (ca. 10 ml) ble kondensert 1 oppløsningen, og cH2S04 (100 ul) ble tilsatt. En rørepinne ble tilsatt, røret ble lukket, avkjølingen fjernet, og det ble om-rørt ved romtemperatur i 72 timer. Det lukkede rør ble avkjølt til -78 °C, N-metylmorfolin (200 ul, 1 ekv. w.r.t. cH2S04) og fikk varmes opp til romtemperatur og åpnet med omrøring i 2 timer. Diklormetan (75 ml) ble tilsatt, og de organiske stoffene ble vasket med NaHC03(75 ml), så saltoppløsning (75 ml) og tørket (Na2S04) . Oppløsningsmidlene ble fjernet under vakuum, hvorved man fikk en blek gyllenbrun olje (1,93 g). Den urene olje ble renset over silikagel (100 g) under eluering med en gradient av heptan:etylacetat 5:1 -» 3:1. Ønskede fraksjoner ble slått sammen og redusert under vakuum til en tykk, klar olje, utbytte 1,48 g (3,19 mmol, 74,3 %). TLC (enkelt-UV-flekk, Rf = 0,50, heptan:etylacetat 2:1), analytisk HPLC, Rt = 24,083 minutter, HPLC-MS (enkelthoved-UV-topp med Rt = 11,996 minutter, 408,2 [M + H-Bu<t>]<+>, 486, 3 [M + Na]<+>). Analyse ved hjelp av<X>H- og<13>C-NMR viste tilstedeværelsen av geometriske cis- og transisomerer rundt 3°-amidbindingen.
8H (CDC13ved 298 K) ; 1,24 (9 x C(CH3)3, s) , 1,51-1,90
(2 Hy + 2 H8, m) , 3, 38-3, 48/3, 49-3, 58 (1 HE, dt) , 3, 62-3, 74 (Hp,
b) , 3,95-4,02/4,06-4,14 (1 He, dd), 4,24-4,78 (Fmoc H-9 + Fmoc CH2+ 2 x COOCH2CH=CH2, bm), 4,88/5,01 (Ha, dd, J 5,8), 5,25 (1 x
COOCH2CH=CH2, d, J 5,7), 5,37 (1 x COOCH2CH=CH2, d, J 16,8), 5,88-6,00 (lx COOCH2CH=CH2, m) , 7,28-7, 39 (2 H, aromatisk, Fmoc H-2 og H-7), 7,39-7,46 (2 H, aromatisk, Fmoc H-3 og H-6), 7,57-7,71
(2 H, aromatisk, Fmoc H-l og H-8), 7,78-7,86 (2 H, aromatisk, Fmoc H-4 og H-5).
8C (CDC13ved 298 K) ; 23, 69/24, 00 (d, C8) , 28, 38 (u, C(CH3)3), 28, 65 (d, Cy) , 40, 41/40, 72 (d, CE) , 47,61 (u, Fmoc C-9) , 58, 46 (u, Ca) , 65, 67 (d, COOCH2CH=CH2) , 67, 82 (u, Cp), 68,12 (d, FmocCH2), 74, 93 (q, C(CH3)3), 118, 46/118, 57 (d, COOCH2CH=CH2) , 120,40 (u, Fmoc C-4 og C-5), 125,39 (u, Fmoc C-l og C-8), 127,46 (u, Fmoc C-2 og C-7), 128,10 (u, Fmoc C-3 og C-6), 132,49 (u, COOCH2CH=CH2) , 141,71 (q, Fmoc C-4' og C-5'), 144,12/144, 35 (q, Fmoc C-l' og C-8'), 156,24 (q, OCON), 170,42/171,06 (COOCH2-CH=CH2) . (2) Fremstiling av [ 2R , 3S )-( 3- tert.- butoksy) pyrrolidin- 1, 2-dikarboksylsyre- 1( 9H - f luoren- 9- ylmetyl) ester ( 2R,3S)-(3-tert.-butoksy)pyrrolidin-1,2-dikarboksylsyre-2-allylester-l-(9H-fluoren-9-ylmetyl)ester (1,42 g,
3,07 mmol) ble oppløst i tørt diklormetan (25 ml) med omrøring. Tetrakistrifenylfosfinpalladium(O) (71 mg, 0,062 mmol,
0,02 ekv.) ble tilsatt, etterfulgt av fenyltrihydrosilan
(0,66 g, 0,581 ml, 6,14 mmol, 2 ekv.). Etter 1 time ble diklormetan (150 ml) tilsatt, og de organiske stoffene ble vasket med 0,01 N HC1 (150 ml), saltoppløsning (150 ml) og tørket (Na2S04) . Oppløsningsmidlene ble fjernet under vakuum, hvorved man fikk et mørkegrått, fast stoff (2,0 g). Det urene faste stoff ble renset over silikagel (75 g) under eluering med en gradient av heptan:etylacetat 2:1 —> 1:2. Ønskede fraksjoner ble slått sammen og redusert under vakuum til et hvitt, krystallinsk stoff, utbytte 1,07 g (2,53 mmol, 82,3 %). TLC (enkelt-UV-flekk, Rf = 0,25, heptan:etylacetat 1:1), analytisk HPLC, Rt = 21,306 minutter, HPLC-MS (enkelthoved-UV-topp med Rt = 10,269 minutter, 368,2 [M + H-BuV, 446,2 [M + Na]<+>, 869, 3 [2 M + Na]<+>). Analyse ved hjelp av1H- og<13>C-NMR viste tilstedeværelsen av geometriske cis- og transisomerer rundt 3°-amidbindingen.
8H (CDC13ved 298 K) ; 1,32/1,41 (9 x C(CH3)3, ds), 1,43-1,59 (1 Hy + 1 H5, m) , 1,70-1,81 (1 H5, bm), 1, 82-1, 99 (1 H?, bm), 2,75-2,82/2, 90-2, 97 (1 He, dt) , 3,73-3,85 (Hp, b) , 3,92-4,05
(1 HE, dd), 4,23-4, 32 (Fmoc H-9), 4, 40-4, 58 (Fmoc CH2, bm), 4,60-4,62/5,02-5,04 (Ha, dd, J 5,7), 7,29-7,36 (2 H, aromatisk, Fmoc H-2 og H-7), 7,39-7,44 (2 H, aromatisk, Fmoc H-3 og H-6), 7,54-
7,67 (2 H, aromatisk, Fmoc H-l og H-8), 7,77-7,82 (2 H, aromatisk, Fmoc H-4 og H-5), 10,80-11,15 (COOH, bs).
8C (CDC13ved 298 K) ; 23, 71/24,24 (d, C8) , 28,20/28,27 (u, C(CH3)3), 30, 60/30, 73 (d, CY) , 40, 50/40, 79 (d, Ce) , 47,58/47,63 (u, Fmoc C-9), 58,20/58,44 (u, Ca), 67,77/68,33 (u, Cp), 68, 67/68, 87 (d, Fmoc CH2) , 78, 48/78, 67 (q, C(CH3)3), 120,30 (u, Fmoc C-4 og C-5), 125,16/125,27/125,52 (u, Fmoc C-l og C-8), 127,42/127,48/127,59 (u, Fmoc C-2 og C-7), 128,04/128,10 (u, Fmoc C-3 og C-6), 141,57/141,69/141,78 (q, Fmoc C-4' og C-5'), 144,06/144,11/144,36/144,47 (q, Fmoc C-l' og C-8'), 155,73/156,49 (q, OCON), 169,26/169,55 (COOH).
(3) Fremstiling av ( 2. R, 3S) ( 3- tert. - butoksy) - 2-( 2- diazo-acetyl) pyrrolidin- 1, 2- dikarboksylsyre- l-( 9ff- fluoren- 9-ylmetyl) ester
( 2R,3S)-(3-tert.-butoksy)pyrrolidin-1,2-dikarboksylsyre-l- ( 9H- fluoren-9-ylmetyl)ester (830 mg, 1,96 mmol) ble opp-løst ved omrøring i tørt diklormetan (20 ml). Reaksjonsblandingen ble gjennomboblet med nitrogen og avkjølt til -15 °C. Iso-butylklorformiat (296 mg, 2,16 mmol i tørt diklormetan (2,5 ml) og N-metylmorfolin (397 mg, 3,92 mmol i tørt diklormetan
(2,5 ml) ble tilsatt samtidig i 0,5 ml alikvoter i løpet av
15 minutter. Eterisk diazometan (generert fra diazald (2,5 g,
ca. 8 mmol i dietyleter (40 ml)) på natriumhydroksid (2,75 g) i vann (4,3 ml)/etanol (8,6 ml) ved 60 °C ble tilsatt til den aktiverte aminosyreoppløsning, og det ble omrørt ved romtemperatur i 3 timer. Eddiksyre (ca. 3 ml) ble tilsatt for å stanse reaksjonen, så ble tert.-butylmetyleter (100 ml) tilsatt, de organiske stoffene ble vasket med vann (3 x 150 ml) og så tørket (Na2S04) . Oppløsningsmidlene ble fjernet under vakuum, hvorved man fikk en klebrig, blekgul olje (910 mg). Den urene olje ble renset over silikagel (75 g) under eluering med en gradient av
heptan:etylacetat 4:1 - > 3:1. Ønskede fraksjoner ble slått sammen og redusert under vakuum til en blekgul olje/fast stoff, utbytte 560 mg (1,25 mmol, 63,9 %). TLC (enkelthoved-UV-flekk, Rf = 0,35, heptan:etylacetat 2:1), analytisk HPLC, Rt = 18,754 minutter, HPLC-MS (UV-topper med Rt = 9,095 minutter, 364,2 [M + H]<+>, 386,1 [M + Na]<+>, 749,2 [2 M + Na]<+>og Rt = 10,856 minutter, 420,2
[M + H-N2]<+>, 470,2 [M + Na]<+>, 917,3 [2 M + Na]<+>).
Legg merke til at etter HPLC-MS-analyse tilsvarer m/z 364,2 det ønskede toring-produktet ( 3aR,7aS)-3-oksoheksahydrofuro [3, 2- b]pyridin-4-karboksylsyre-9H-fluoren-9-ylmetylester.
Analyse ved hjelp av<1>H- og<13>C-NMR viste tilstedeværelsen av geometriske cis- og transisomerer rundt 3°-amidbindingen.
8H (CDCI3ved 298 K) ; 1,29/1, 46 (9 x C(CH3)3, ds), 1,40-1,85 (2 HY + 2 H5, bm), 3, 05/3, 38 (1 H, dt) , 3, 39-3, 44/3, 62-3, 69 (Hp, dm), 3, 90-3, 97 (1 HE, dd), 4, 05-4, 07/4, 78-4,83 (Ha, bm), 4,24-4,33 (Fmoc H-9), 4,36-4,42/4,4 6-4,51 (1 x Fmoc CH2, dm), 4,61-4,68 (1 x Fmoc CH2, m) , 4, 89/5, 90 (COCH=N2, s + bs) , 7,28-7,39 (2 H, aromatisk, Fmoc H-2 og H-7), 7,40-7,44 (2 H, aromatisk, Fmoc H-3 og H-6), 7,53-7,67 (2 H, aromatisk, Fmoc H-l og H-8), 7,76-7,81 (2 H, aromatisk, Fmoc H-4 og H-5).
8C (CDCI3ved 298 K) ; 23, 94/24, 51 (d, C8) , 28, 38/28, 53 (u, C(CH3)3), 29,23/29,84 (d, Cy) , 40,83/41,45 (d, CE) , 47,57/47, 64 (u, Fmoc C-9), 55, 50/56,38 (u, COCH= N2) , 61, 69/62, 66 (u, Ca), 66, 85/68,20 (d, Fmoc CH2) , 69, 35/69,61 (u, Cp), 75,11/75, 54 (q, C(CH3)3), 120, 29/120, 32 (u, Fmoc C-4 og C-5), 124,85/125,25/125,53 (u, Fmoc C-l og C-8), 127,4 6/127,59 (u, Fmoc C-2 og C-7), 127,97/128,03/128,07 (u, Fmoc C-3 og C-6), 141,62/141,69/141,73 (q, Fmoc C-4' og C-5'),
144,24/144,31/144,50/144,61 (q, Fmoc C-l' og C-8'), 155, 68/156,89 (q, OCON), 191, 90/192,37 (COCH=N2) .
(4) Ringslutning til ( 3aR , laS )- 3- oksoheksahydrofuro[ 3, 2 - b ]-pyridin- 4- karboksylsyre- 9lf- fluoren- 9- yImetylester
En oppløsning av litiumklorid (494 mg, 11,6 mmol) i vann (3 ml) og eddiksyre (12 ml) ble tilsatt til (2.R, 3S)-(3-tert.-butoksy)-2-(2-diazoacetyl)pyrrolidin-1,2-dikarboksylsyre-1-(9H-fluoren-9-ylmetyl)ester (520 mg, 1,16 mmol). Gass ble utviklet, og det gule, oljeaktige, faste stoff ble oppløst i løpet av 1 time, hvorved man fikk praktisk talt fargeløs opp-løsning. Etter 90 minutter ble kloroform (150 ml) tilsatt, og de organiske stoffene ble vasket med NaHC03(2 x 150 ml), salt-oppløsning (150 ml) og tørket (Na2S04). Oppløsningsmidlene ble fjernet under vakuum, hvorved man fikk et hvitt, krystallinsk stoff (390 mg). Det urene faste stoff ble renset over silikagel (75 g) under eluering med en gradient av heptan:etylacetat 3:1 2:1. Ønskede fraksjoner ble slått sammen og redusert under vakuum til et hvitt, krystallinsk stoff, utbytte 340 mg (0,94 mmol, 47,7 % fra utgangssyre). TLC (enkelt-UV-flekk, Rf = 0,25, heptan:etylacetat 2:1), analytisk HPLC, Rt = 18,563 minutter, HPLC-MS (enkelt-UV-topp med Rt = 9,074 minutter, 364,2
[M + H]<+>, 386,2 [M + Na]<+>). Analyse ved hjelp av<X>H- og<13>C-NMR viste tilstedeværelsen av geometriske cis- og transisomerer rundt 3°-amidbindingen.
5H (CDC13ved 298 K) ; 1,20-1,38 (1 HY+ 1 Hs, m) , 1,51-1,68 (1 H8, bm), 1, 962, 08 (1 HY, bm), 2, 40-2,52/2, 53-2, 67 (1 He, m) , 3,87 (COCH2A, d, J 16,5), 3,85-3, 95 (1 HE, b) , 4,09 (Fmoc H-9, bt), 4,14 (Hp, b) , 4,21-4,46 (Fmoc CH2+ COCH2B, bm), 4,62-4, 70/5, 00-5, 09 (Ha, 2 x b) , 7,23-7,27 (2 H, aromatisk, Fmoc H-2 og H-7), 7,32-7,35 (2 H, aromatisk, Fmoc H-3 og H-6), 7,41-7,53 (2 H, aromatisk, Fmoc H-l og H-8), 7,69-7,71 (2 H, aromatisk, Fmoc H-4 og H-5).
5C (CDCI3ved 298 K) ; 22, 08 (d, Cs) , 26,61 (d, Cy) , 41,67 (d, CE), 47, 58 (u, Fmoc C-9) , 60, 54 (u, Ca, 67, 55 (d, Fmoc CH2) , 68, 40 (d, COCH20) , 72, 61 (u, Cp), 120, 39 (u, Fmoc C-4 og C-5), 125,42 (u, Fmoc C-l og C-8), 127,51 (u, Fmoc C-2 og C-7), 128,14 (u, Fmoc C-3 og C-6), 141,73 (q, Fmoc C-4' og C-5'), 144,16 (q, Fmoc C-l' og C-8'), 156,20 (q, OCON), 211,64 (q, COCH20) .
Ved å følge de generelle retningslinjene fra reaksjonsskjema 2, ble den nødvendige toring-byggeblokk ( 3aR, laS)-3-oksoheksahydrofuro [3, 2- b]pyridin-4-karboksylsyre- 9H-fluoren-9-yl-metylester omdannet til byggeblokk-linkerkonstruksjon på følgende måte: ( 3aR, laS)-3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyridin-4-karboksylsyre 9H- fluoren-9-ylmetylester (290 mg, 0,80 mmol) ble oppløst i en blanding av etanol (14,0 ml) og vann (2,0 ml) inneholdende natriumacetat.trihydrat (163 mg, 1,198 mmol, 1,5 ekv.). 4-[[(hydrazinokarbonyl)amino]metyl]sykloheksankarboksylsyretri-fluoracetat (263 mg, 0,80 mmol, 1,0 ekv., Murphy, A.M. et al., J. Am. Chem. Soc, 114, 3156-3157, 1992) ble tilsatt, og blandingen ble kokt under tilbakeløpskjøling i 4 timer. Kloroform (150 ml) ble tilsatt, og de organiske stoffene ble vasket med HC1 (150 ml, ca. pH 3), tørket (Na2S04) og redusert under vakuum, hvorved man fikk en uren byggeblokk-linkerkonstruksjon som et gråhvitt, krystallinsk stoff. Utbytte 450 mg, analytisk HPLC, to topper, Rt = 17,109 (67,6 %) og 18,565 minutter
(26,3 %) (geometriske cis-/transisomerer), HPLC-MS (2 x UV-topp med Rt = 8,069 og 9,050 minutter, 561,2 [M + H]<+>). Uren konstruksjon ble brukt direkte til konstruksjonslading.
Ved å følge de generelle retningslinjer fra reaksjonsskjema 2, ble den nødvendige byggeblokk-linkerkonstruksjon festet til den faste fase, hvorved man fikk ladet byggeblokk-linkerkonstruks jon på følgende måte: Byggeblokk-linkerkonstruksjon (0,680 mmol), 2-(lH-benzotriazol-l-yl)-1,1,3,3-tetrametyluroniumheksafluorfosfat (HBTU, 258 mg, 0,680 mmol), 1-hydroksybenzotriazol.hydrat (HOBT, 105 mg, 0,680 mmol) ble oppløst i dimetylformamid (3 ml), og N-metylmorfolin (NMM, 150 ul, 1,36 mmol) ble tilsatt. Etter foraktivering i 5 minutter ble frie amin-"verktøy" (190 x 1,2 umol) tilsatt, etterfulgt av dimetylformamid (17,5 ml) og fikk stå over natten. Den forbrukte koblingsoppløsning ble så tilsatt til frie amin-"kroner" (18 x 10 umol) og fikk stå over natten. Standardvasking og analyser indikerte kvantitativ lading i begge tilfeller.
Ved å følge de generelle retningslinjer fra reaksjonsskjema 2, ble den nødvendige ladede byggeblokk-linkerkonstruksjon utformet på den faste fase på følgende måte: Ladet konstruksjon ble utformet til eksempelforbindelse 91, ( 3aR, laS) -morfolin-4-karboksylsyre- [l.R-benzylsulfanylmetyl-2-okso-2-(3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyridin-4-yl)etyl]amid ved hjelp av standard Fmoc-avbeskyttelse og sekvensvis kobling med Fmoc-Cys(SBzl)-OH, så morfolin-4-karbonylklorid. Den urene eksempelforbindelse ble spaltet og analysert (se generelle teknikker). HPLC, Rt = 15,59 minutter (> 80 %), HPLC-MS 449,2
[M + H]<+>.
De følgende eksempler (132-156) ble fremstilt som nærmere redegjort for i eksempel 131, ved kobling med de nød-vendige reagenser for å tilveiebringe fullengdemolekylet.
Eksempel 132
( 3a. R, 7aS) - morfolin- 4- karboksylsyre- [ IS- ( 4- hydroksybenzyl) - 2-okso- 2-( 3- oksoheksahydrofuro[ 3, 2 - b ] pyridin- 4- yl) etyl] amid
HPLC-MS 418,2 [M + H]<+>.
Eksempel 133
{ 3aR , 7aS)- N-[ IS-( 4- hydroksybenzyl- 2- okso- 2-( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2 - b ] pyridin- 4- yl) etyl] benzamid
HPLC, Rt = 12,67 minutter (> 80 %), HPLC-MS 409,1 [M + H]<+>.
Eksempel 134
( 3a. R, 7aS) - naftalen- l- karboksylsyre- [ IS- ( 4- hydroksybenzyl) - 2-okso- 2- ( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2- Jb] pyr idin- 4- yl) etyl] amid
HPLC, Rt = 14,87 minutter (> 80 %), HPLC-MS 459,2 [M + H]<+>.
Eksempel 135
( 3a. R, 7aS) - morfolin- 4- karboksylsyre- [ 3- metyl- lS- ( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2 - b ] pyridin- 4- karbonyl) butyl] amid
HPLC-MS 368,2 [M + H]<+>, 390,2 [M + Na]<+>.
Eksempel 136
( 3aR , laS )- N-[ 3- metyl- 15-( 3- oksoheksahydrofuro[ 3, 2 - b ] pyridin- 4-karbonyl) butyl] benzamid
HPLC, Rt = 15,40 minutter (> 80 %), HPLC-MS 359,2 [M + H]<+.>
Eksempel 137
( 3a. R, 7aS) - furan- 3- karboksylsyre- [ 3- metyl- lS- ( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2 - b ] pyridin- 4- karbonyl) butyl] amid
HPLC, Rt = 13,74 minutter (> 85 %), HPLC-MS 349,2 [M + H]<+>, 371,2 [2 M + Na]<+>.
Eksempel 138
( 3a£, 7aS)- benzo[ £>] tiofen- 2- karboksylsyre-[ 3- metyl- lS-( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2 - b ] pyridin- 4- karbonyl) butyl] amid
HPLC, Rt = 18,52 minutter (> 80 %), HPLC-MS 415,2 [M + H]<+>, 851,3 [2 M + Na]<+>.
Eksempel 139
( 3aR, 7aS)- 4- dimetylamino- N-[ 3- metyl- lS-( 3- oksoheksahydrofuro-[ 3, 2 - b ] pyridin- 4- karbonyl) butyl] benzamid
HPLC, Rt = 13,55 minutter (> 80 %), HPLC-MS 402,2 [M + H]<+>, 825,3 [2 M + Na]<+>.
Eksempel 140
( 3aR , 7aS) - benzo [ ib] tiof en- 3- karboksylsyre- [ 3- metyl- lS- ( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2- Jb] pyridin- 4- karbonyl) butyl] amid
HPLC, Rt = 18,26 minutter (> 80 %), HPLC-MS 415,2 [M + H]<+>, 851,3 [2 M + Na] +.
Eksempel 141
( 3aR , laS )- tiofen- 3- karboksylsyre-[ 3- metyl- lS-( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2 - b ] pyridin- 4- karbonyl) butyl] amid
HPLC, Rt = 14,80 minutter (> 80 %), HPLC-MS 365,2 [M + H]<+>, 387,2 [M + Na]<+>.
Eksempel 142
( 3a. R, 7aS) - N- [ li?- benzylsulfanylmetyl- 2- okso- 2- ( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2- jb] pyridin- 4- yl) etyl] benzamid
HPLC, Rt = 17,78 minutter (> 80 %), HPLC-MS 439,2 [M + H]<+>, 899,3 [2 M + Na]<+>.
Eksempel 143
{ 3aR , laS ) - furan- 3- karboksylsyre- [ lJR- benzylsulfanylmetyl- 2- okso-2-( 3- oksoheksahydrofuro[ 3, 2- b] pyridin- 4- yl) etyl] amid
HPLC, Rt = 16,41 minutter (> 85 %) , HPLC-MS 429, 6 [M 4- H]<+>, 451,5 [M + Na]<+>.
Eksempel 144
( 3a. R, 7aS) - tiofen- 3- karboksylsyre- [ lJR- benzylsulfanylmetyl- 2- okso-2-( 3- oksoheksahydrofuro[ 3, 2- b] pyridin- 4- yl) etyl] amid
HPLC, Rt = 17,23 minutter (> 80 %), HPLC-MS 445,1 [M + H]<+>, 911,2 [2 M + Na]<+>.
Eksempel 145
{ 3aR , laS )- morfolin- 4- karboksylsyre-[ lS- sykloheksylmetyl- 2- okso-2-( 3- oksoheksahydrofuro[ 3, 2- b] pyridin- 4- yl) etyl] amid
HPLC-MS 408,2 [M + H]<+>.
Eksempel 14 6
( 3aiR, 7aS) - N- [ lS- sykloheksylmetyl- 2- okso- 2- ( 3- oksoheksahydrofuro-[ 3, 2 - b ] pyridin- 4- yl) etyl] benzamid
HPLC, Rt = 18,47 minutter (> 80 %), HPLC-MS 399,2 [M + H]<+>, 819,3 [2 M + Na] + .
Eksempel 147
{ 3aR , laS )- furan- 3- karboksylsyre-[ lS- sykloheksylmetyl- 2- okso- 2-( 3- oksoheksahydrofuro[ 3, 2- b] pyridin- 4- yl) etyl] amid
HPLC, Rt = 17,12 minutter (> 80 %), HPLC-MS 389,2 [M + H]<+>.
Eksempel 148
( 3aR , laS )- tiofen- 3- karboksylsyre-[ lS- sykloheksylmetyl- 2- okso- 2-( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2- Jb] pyridin- 4- yl) etyl] amid
HPLC, Rt = 18,05 minutter (> 85 %), HPLC-MS 405,2 [M + H]<+>, 831,2 [2 M + Na]<+>.
Eksempel 14 9
( 3aR , laS )- furan- 3- karboksylsyre-[ lS- syklopentylmetyl- 2- okso- 2-( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2- Jb] pyridin- 4- yl) etyl] amid
HPLC, Rt = 15,84 minutter (> 85 %), HPLC-MS 375,2 [M + H]<+>, 771,3 [2 M + Na]<+>.
Eksempel 150
( 3aiR, 7aS) - tiofen- 3- karboksylsyre- [ lS- syklopentylmetyl- 2- okso- 2-( 3- oksoheksahydrofuro[ 3, 2 - b ] pyridin- 4- yl) etyl] amid
HPLC, Rt = 16,78 minutter (> 85 %), HPLC-MS 391,1 [M + H]<+>, 803,3 [2 M + Na]<+>.
Eksempel 151
( 3aR , laS )- furan- 3- karboksylsyre-[ 3, 3- dimetyl- lS-( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2- Jb] pyridin- 4- karbonyl) butyl] amid
HPLC, Rt = 15,05 minutter (> 85 %), HPLC-MS 363,2 [M + H]<+>, 747,4 [2 M + Na]<+>.
Eksempel 152
( 3a. R, 7aS) - tiofen- 3- karboksylsyre- [ 3, 3- dimetyl- lS- ( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2- Jb] pyridin- 4- karbonyl) butyl] amid
HPLC, Rt = 15,7b minutter (> 80 %), HPLC-MS 379,2 [M + H]<+>, 779,3 [2 M + Na]<+>.
Eksempel 153
{ 3aR , laS )- morfolin- 4- karboksylsyre- lS- sykloneksyImety1- 2- okso- 2-( 3- oksoheksahydrofuro [ 3, 2- Jb] pyridin- 4- yl) etylester
HPLC-MS 409, 2 [M + H]<+>, 839, 5 [2 M + Na] + .
Som nærmere redegjort for i eksempel 127, ble forbindelse (33) koblet under standardbetingelser (etter Fmoc-fjerning) til ( 3aR, laS)-3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyridin-4-karboksylsyre-9fl-fluoren-9-ylmetylesterekvivalenten til ladet byggeblokk-linkerkonstruksjon (22), og så ble det spaltet, hvorved man fikk eksempelforbindelse 153.
Eksempel 154
( 2S, 3aR , 7aS)- 4-[ 3- sykloheksyl- 2-( furan- 2- ylmetansulfanyl)-propionyl] heksahydrofuro[ 3, 2- b] pyridin- 3- on
HPLC-MS 392, 1 [M + H]<+>, 805, 3 [2 M + Na]<+>.
Som nærmere redegjort for i eksempel 128, ble forbindelse (41) koblet under standardbetingelser (etter Fmoc-fjerning) til ( 3aR, laS)-3-oksoheksahydrofuro[3,2-b]pyridin-4-karboksylsyre-9f/-fluoren-9-ylmetylesterekvivalenten til ladet byggeblokk-linkerkonstruksjon (22), og så ble det spaltet, hvorved man fikk eksempelforbindelse 154.
Eksempel 155
( 25, 3aR , laS )- 4-[ 3- sykloheksyl- 2-( furan- 2- ylmetansulfonyl)-propionyl] heksahydrofuro[ 3, 2 - b ] pyridin- 3- on
HPLC, Rt = 18,8-19,4 minutter (> 90 %), HPLC-MS 424,1 [M + H]\ 869,2 [2 M + Na]<+>.
Som nærmere redegjort for i eksempel 129, ble forbindelse (41) koblet under standardbetingelser (etter Fmoc-fjerning) til ( 3aR, laS)-3-oksoheksahydrofuro[3, 2- b]pyridin-4-karboksylsyre-97f-fluoren-9-ylmetylesterekvivalenten til ladet byggeblokk-linkerkonstruksjon (22). Den ladede mellomprodukttioeter (1,2 umol "gear") ble oksidert med m-klorperbenzosyre (5 ekv., 65 % reagens, 1,6 mg) i diklormetan (200 ul) i 5 timer, etterfulgt av standardvasking og så spaltet, hvorved man fikk eksempelforbindelse 155.
Eksempel 156
( 3a. R, 7a5) - 2J?- sykloheksylmetyl- 4- morfolin- 4- yl- l- ( 3- oksoheksahydrof uro [ 3, 2- b]- pyridin- 4- yl) butan- 1, 4- dion
HPLC-MS 407,2 [M + H]<+>, 833, 3 [2 M + Na] + .
Som nærmere redegjort for i eksempel 130, ble forbindelse (36) koblet under standardbetingelser (etter Fmoc-f jerning) til (3af?, 7aS) -3-oksoheksahydrofuro [3, 2- b] pyridin-4-karboksylsyre-97i-fluoren-9-ylmetylesterekvivalenten til ladet byggeblokk-linkerkonstruksjon (22), og så ble det spaltet, hvorved man fikk eksempelforbindelse 156.
Eksempel A
Analyser med hensyn på cysteinproteaseaktivitet
Forbindelsene ifølge denne oppfinnelse kan testes i én av en rekke litteraturbaserte biokjemiske analyser som er utformet for å belyse forbindelsesinhiberingskarakteristikaene. Dataene fra disse typene analyser gjør det mulig å måle og kvantifisere forbindelsesstyrken og reaksjonshastighetene. Denne informasjonen vil, enten alene eller i kombinasjon med annen informasjon, gjøre det mulig å bestemme mengden forbindelse som er nødvendig for å gi en farmakologisk effekt.
Generelle materialer og metoder
Med mindre annet er angitt, ble alle generelle kjemi-kalier og biokjemikalier innkjøpt enten fra Sigma Chemical Company, Poole, Dorset, U.K., eller fra Fisher Scientific UK, Loughborough, Leicestershire, U.K. Absorbansble analyser utført i flatbunnede. 96-brønners plater (spektra; Greiner Bio-One Ltd., Stonehouse, Gloucestershire, U.K.) under anvendelse av en SpectraMax PLUS384-plateavleser (Molecular Devices, Crawley, U.K.). Fluorescensanalyse med høy gjennomstrømning ble utført i enten 384-brønners mikrotiterplater (Corning Costar 3705-plater, Fisher Scientific) eller 96-brønners, "U"-bunnede Microfluor Wl-mikrotiterplater (Thermo Labsystems, Ashford, Middlesex, U.K.). Fluorescensanalyser ble overvåket under anvendelse av en SpectraMax Gemini-fluorescensplateavleser (Molecular Devices). For substrater hvor det anvendes enten en 7-amino-4-metyl-kumarin(AMC)- eller 7-amino-4-trifluormetylkumarin(AFC)fluoro-for, ble analyser overvåket ved en eksitasjonsbølgelengde på 365 nm og en emisjonsbølgelengde på 450 nm, og fluorescensplateavleseren ble kalibrert med AMC. For substrater hvor det anvendes en 3-aminobenzoyl(Abz)fluorofor, ble analyser overvåket ved en eksitasjonsbølgelengde på 310 nm og en emisjonsbølge-lengde på 445 nm; fluorescensplateavleseren ble kalibrert med 3-aminobenzamid (Fluka). Med mindre annet er angitt, ble alle peptidasesubstrater innkjøpt fra Bachem UK, St. Helens, Merseyside, U.K. Substrater hvor det benyttes en metode med fluorescensresonansenergioverføring (det vil si FRET-baserte substrater), ble syntetisert ved Incenta Limited under anvendelse av publiserte metoder (Atherton&Sheppard, Solid Phase Peptide Synthesis, IRL Press, Oxford, U.K., 1989), og det ble anvendt Abz (2-aminobenzoyl) som fluorescensdonoren, og 3-nitro-tyrosin [Tyr(N02)] som fluorescensslukkeren (Meldal, M. og Breddam, K., Anal. Biochem., 195, 141-147, 1991). Hydroksyetyl-piperazinetansulfonat (HEPES), tris-hydroksylmetylaminometan-(tris)base, bis-tris-propan og alle de biologiske detergentene (f.eks. CHAPS, zwittergents etc.) ble innkjøpt fra CN Biosciences UK, Beeston, Nottinghamshire, U.K. Glyserol ble inn-kjøpt fra Amersham Pharmacia Biotech, Little Chalfont, Buckinghamshire, U.K. Forrådsoppløsninger av substrat eller inhibitor ble laget opp til 10 mM i 100 % dimetylsulfoksid (DMSO) (Rathburns, Glasgow, U.K.) og fortynnet etter det som passende var påkrevd. I alle tilfeller ble DMSO-konsentrasjonen i analysene holdt lavere enn 1 vol%.
Analyseprotokoller ble basert på litteraturpresedens (tabell 1; Barrett, A.J., Rawlings, N.D. og Woessner, J.F., 1998, Handbook of Proteolytic Enzymes, Academic Press, London, og referanser som der er gitt) og modifisert etter behov for å passe til lokale analyseprotokoller. Enzym ble tilsatt etter behov for å initiere reaksjonen og aktiviteten, og det ble fore-tatt overvåking over tid, som bedømt ved hjelp av endringen i fluorescens etter omdannelse av substrat til produkt. Alle analyser ble utført ved 25 ± 1 °C.
Trypanosoma cruzi- cruzipainpeptidase- aktivitetsanalyser
Willtype-cruzipain, utvunnet fra Trypanosoma cruzi-Dm28-epimastigoter, ble erholdt fra dr. Julio Scharfstein (Instituto de Biofisica Carlos Chagas Filho, Universidade Federal do Rio de Janeiro, Rio de Janeiro, Brasil). Aktivitetsanalyser ble utført i 100 mM natriumfosfat, pH 6,75, inneholdende 1 mM EDTA og 10 mM L-cystein under anvendelse av 2,5 nM enzym. Ac-Phe-Arg-AMC (KM<app>» 12 uM) og I>Val-Leu-Lys-AMC (KM<app>4 uM) ble brukt som substratene. Rutinemessig ble Ac-FR-AMC brukt ved en konsentrasjon ekvivalent med KM<app>, og D-Val-Leu-Lys-AMC ble brukt ved en konsentrasjon på 25 uM. Omdannelseshastigheten av substrat til produkt ble avledet fra helningsvinkelen til økningen i fluorescens overvåket kontinuerlig over tid.
Leishmania mexicana- cysteinprotease B ( CPB)- peptidaseaktivitetsanalyser
Rekombinant villtype-CPB uten den C-terminale forleng-else (det vil si CPB2.8ACTE; Sanderson, S.J., et. al., Biochem. J., 347, 383-388, 2000) ble erholdt fra dr. Jeremy Mottram (Wellcome Centre for Molecular Parasitology, The Anderson College, University of Glasgow, Glasgow, U.K.). Aktivitetsanalyser ble utført i 100 mM natriumacetat; pH 5,5, inneholdende 1 mM EDTA, 200 mM NaCl og 10 mM DTT (Alves, L.C. et. al., Mol. Biochem. Parasitol., 116, 1-9, 2001) under anvendelse av 0,25 nM enzym. Pro-Phe-Arg-AMC (KM<app>38 uM) ble brukt som substratet ved en konsentrasjon ekvivalent med KM<app>. Omdannelseshastigheten fra substrat til produkt ble avledet fra helningsvinkelen til økningen i fluorescens overvåket kontinuerlig over tid.
Kathepsinpeptidase- aktivitetsanalyser
Bovint kathepsin S, humant kathepsin L, humant kathepsin H og humant kathepsin B ble erholdt fra CN Biosciences. Rekombinant humant kathepsin S, humant kathepsin K og humant kathepsin X ble erholdt fra Dr. Boris Turk (Josef Stefan Institute, Ljubljana, Slovenia). Med mindre annet er angitt, ble alle peptidaseaktivitetsanalyser utført i 10 mM bis-tris-propan (BTP), pH 6,5, inneholdende 1 mM EDTA, 5 mM 2-merkaptoetanol og 1 mM CaCl2. Humant kathepsin H-aktivitetsanalyser ble utført i 10 mM BTP,
pH 6,5, 142 mM NaCl2, 1 mM CaCl2, 1 mM EDTA, 1 mM DTT, 0, 035 mM Zwittergent 3-16. Humant kathepsin K-analyser ble utført i
100 mM natriumacetat; pH 5,5, inneholdende 20 mM L-cystein og 1 mM EDTA (Bossard, M.J. et. al., J. Biol. Chem., 21, 12517-12524, 1996). Humant kathepsin X-analyser ble utført i 100 mM natriumacetat; pH 5,5, inneholdende 20 mM L-cystein, 0,05 %
(vekt/volum) Brij 35 og 1 mM EDTA (Santamaria, I. et. al., J. Biol. Chem., 273, 16816-16823, 1998; Klemencic, J. et al., Eur. J. Biochem., 267, 5404-5412, 2000). De endelige enzymkonsentrasjonene som ble brukt i analysene, var 0,5 nM bovint kathepsin S, 1 nM kathepsin L, 0,1 nM kathepsin B, 0,25 nM kathepsin K, 1 nM kathepsin X og 10 nM kathepsin H. For inhiberingsanalysene var substratene som ble brukt til kathepsin S, kathepsin L, kathepsin B, kathepsin K og kathepsin H, henholdsvis boc-Val-Leu-Lys-AMC (K"M<app>« 30 uM) , Ac-Phe-Arg-AMC (KM<app>20 uM) , Z-Phe-Arg-AMC (KM<app>40 uM) , Z-Leu-Arg-AMC (KM<app>«2 uM) , Bz-Phe-Val-Arg-AMC (KM<app>150 uM) . I hvert tilfelle var substratkonsentra-sjonen som ble brukt i hver analyse, ekvivalent med 7<M<app->Omdannelseshastigheten fra substrat til produkt ble avledet fra helningsvinkelen til økningen i fluorescens overvåket kontinuerlig over tid.
Trypsinpeptidase- aktivitetsanalyser
Aktivitetsanalyser for humant pankreatisk trypsin (joderingsgrad; CN Biosciences) ble utført i 10 mM HEPES, pH 8,0, inneholdende 5 mM CaCl2under anvendelse av 0,1 nM trypsin. For inhiberingsanalysene ble Z-Gly-Gly-Arg-AMC ( Kaapp «84 uM) brukt som substratet ved en konsentrasjon ekvivalent med KM<app.>Omdannelseshastigheten fra substrat til produkt ble avledet fra helningsvinkelen til økningen i fluorescens overvåket kontinuerlig over tid.
Clostripainpeptidase- aktivitetsanalyser
Aktivitetsanalyser for Clostripain (Sigma) ble utført i 10 mM BTP, pH 6,5, inneholdende 1 mM EDTA, 5 mM 2-merkaptoetanol og 1 mM CaCl2under anvendelse av 0,3 nM enzym. For inhiberingsanalysene ble Z-Gly-Gly-Arg-AMC (KM<app>» 100 uM) brukt som substratet ved en konsentrasjon ekvivalent med K"Mapp. Omdannelseshastigheten fra substrat til produkt ble avledet fra helningsvinkelen til økningen i fluorescens overvåket kontinuerlig over tid.
Calpainpeptidase- aktivitetsanalyser
Aktivitetsanalyser for calpain (humant erytrocytt-u-calpain og porcint nyre-m-calpain; CN Biosciences) ble utført i 10 mM HEPES, pH 7,5, inneholdende 2 mM 2-merkaptoetanol og CaCl2under anvendelse av 25 nM av hvert enzym (Sasaki et. al., J. Biol. Chem., 259, 12489-12494, 1984). For u-calpain-inhiberingsanalyser inneholdt bufferen 100 uM CaCl2og Abz-Ala-Asn-Leu-Gly-Arg-Pro-Ala-Leu-Tyr (N02) Asp-NH2 (KM<app>« 100 uM; Incenta Limited) ble brukt som substrat. For m-calpain-inhiberingsanalyser inneholdt analysebufferen 200 uM CaCl2og Abz-Lys-Leu-Cys(Bzl)-Phe-Ser-Lys-Gln-Tyr (N02)-Asp-NH2 (KM<app>22 uM; Incenta Limited) ble brukt som substrat. I begge tilfellene var substratkonsentra-sjonen som ble anvendt i analysene, ekvivalent med ffM<app>. Omdannelseshastigheten fra substrat til produkt ble avledet fra helningsvinkelen til økningen i fluorescens overvåket kontinuerlig over tid.
Peptidaseaktivitetsanalyser for ekstracellulær S. aureus - VS - cysteinpeptidase ( stafylopain)
S. aureus-V8 ble erholdt fra professor S. Arvidson, Karolinska Instituttet, Stockholm, Sverige. Aktivitetsanalyser for ekstracellulær S. aureus- V8- cysteinpeptidase (stafylopain) ble utført ved å anvende delvis renset S. aureus-V8-kultursuper-natant (erholdt fra dr. Peter Lambert, Aston University, Birmingham, U.K.). Aktivitetsanalyser ble utført i 10 mM BTP, pH 6,5, inneholdende 1 mM EDTA, 5 mM 2-merkaptoetanol og 1 mM CaCl2under anvendelse av to ganger fortynnet, delvis renset ekstrakt. For inhiberingsanalysene ble Abz-Ile-Ala-Ala-Pro-Tyr(N02)-Glu-NH2(KM<app>w 117 uM;Incenta Limited) brukt som substrat ved en konsentrasjon ekvivalent med KM<app>. Omdannelseshastigheten fra substrat til produkt ble avledet fra helningsvinkelen til økningen i fluorescens overvåket kontinuerlig over tid.
Aktivitetsanalyser for munn- og klovsykelederpeptidase ( FMDV- LP)
Rekombinant villtype-FMDV-LP ble erholdt fra dr. Tim Skern (Institut fiir Medizinische Biochemie, Abteilung fur Biochemie, Universitat Wien, Wien, Østerrike). Aktivitetsanalyser ble utført i 50 mM tris-acetat, pH 8,4, inneholdende 1 mM EDTA, 10 mM L-cystein og 0,25 % (vekt/volum) CHAPS under anvendelse av 10 nM enzym. For inhiberingsanalysene ble Abz-Arg-Lys-Leu-Lys-Gly-Ala-Gly-Ser-Tyr (N02) -Glu-NH2 (KM<app>» 51 uM; Incenta Limited) brukt som substrat ved en konsentrasjon ekvivalent med fCMapp-Omdannelseshastigheten fra substrat til produkt ble avledet fra helningsvinkelen til økningen i fluorescens overvåket kontinuerlig over tid.
Kaspasepeptidase- aktivitetsanalyser
Kaspaser 1-10 ble erholdt fra CN Biosciences eller Bio-Vision Inc. (Mountain View, CA, USA), og alle analysene ble ut-ført i 50 mM HEPES; pH 7,2, 10 % (volum/volum) glyserol, 0,1 % CHAPS, 142 mM NaCl, 1 mM EDTA, 5 mM ditiotreitol (DTT) under anvendelse av 0,1-1 U pr. analyse. For kaspase 1 ble Ac-Leu-Glu-His-Asp-AMC brukt som substrat; for kaspase 2 ble Z-Val-Asp-Val-Ala-Asp-AFC brukt som substrat; for kaspase 3 ble Ac-Asp-Glu-Val-Asp-AMC brukt som substrat; for kaspase 4 ble Suc-Tyr-Val-Ala-Asp-AMC brukt som substrat; for kaspase 5 ble Ac-Leu-Glu-His-Asp-AMC brukt som substrat; for kaspase 6 ble Ac-Val-Glu-Ile-Asp-AMC brukt som substrat; for kaspase 7 ble Ac-Asp-Glu-Val-Asp-AMC brukt som substrat; for kaspase 8 ble Ac-IIe-Glu-Thr-Asp-AMC brukt som substrat; for kaspase 9 ble Ac-Leu-Glu-His-Asp-AMC brukt som substrat; for kaspase 10 ble Ac-Ile-Glu-Thr-Asp-AMC brukt som substrat (Nicholson, D.W. og Thornberry, N.A., TIBS, 22, 299-306, 1997; Stennicke, H.R. og Salvesen, G.S., J. Biol. Chem., 272(41), 25719-25723, 1997; Talanian, R.V. et. al., J. Biol. Chem., 272(15), 9677-9682, 1997; Wolf, B.B. og Green, D.R., J. Biol. Chem., 274(29), 20049-20052, 1999). Omdannelseshastigheten fra substrat til produkt ble avledet fra helningsvinkelen til økningen i fluorescens overvåket kontinuerlig over tid.
Måling av de tilsynelatende makroskopiske bindingskonstanter ( Michaelis) ( KMapp) for substrater
Den tilsynelatende makroskopiske bindingskonstant (KM<app>) for hvert substrat ble beregnet ut fra avhengigheten til enzym-aktiviteten som en funksjon av substratkonsentrasjon. De observerte hastigheter ble plottet på ordinaten mot den relaterte substratkonsentrasjon på abscissen, og dataene ble tilpasset ved hjelp av direkte regresjonsanalyse (Prism v 3,02; GraphPad, San Diego, USA) under anvendelse av ligning 1 (Cornish-Bowden, A., Fundamentals of enzyme kinetics, Portland Press, 1995, 93-128).
I ligning 1 er "Vj." den observerte starthastighet, "Vmaks<app>" er den observerte maksimale aktivitet ved mettet substratkonsentrasjon, "KM<app>" er den tilsynelatende makroskopiske bindingskonstant (Michaelis) for substratet, "[S0]" er start-substratkonsentrasj onen.
Måling av inhiberingskonstantene
Den tilsynelatende inhiberingskonstant (Kj.) for hver forbindelse ble bestemt på grunnlag av at inhibering var reversibel og fremkom ved hjelp av en ren-kompetitiv mekanisme. K±-verdiene ble beregnet ut fra avhengigheten til enzymaktivitet som en funksjon av inhibitorkonsentrasjon, ved hjelp av direkte regresjonsanalyse (Prism v 3,02) under anvendelse av ligning 2 (Cornish-Bowden, A., 1995).
I ligning 2 er "Vj." den observerte restaktivitet, "Vmaks<app>"er den observerte maksimale aktivitet (det vil si i fra-vær av inhibitor) , " Knapp" er den tilsynelatende makroskopiske bindingskonstant (Michaelis) for substratet, "[S]" er startsubstratkonsentrasjonen, " Kx" er den tilsynelatende dissosia-sjonskonstant, og "[I]" er inhibitorkonsentrasjonen.
Ved situasjoner hvor den tilsynelatende dissosiasjons-konstant (Ki<app>) nådde enzymkonsentrasjonene, ble K^^-verdiene
beregnet under anvendelse av en kvadratisk løsning i formen beskrevet ved hjelp av ligning 3 (Morrison, J.F., Trends Biochem. Sei., 7, 102-105, 1982; Morrison, J.F., Biochim. Biophys. Acta, 185, 269-286, 1969; Stone, S.R. og Hofsteenge, J. Biochemistry, 25, 4622-4628, 1986).
I ligning 3 er "Vj." den observerte restaktivitet, "F" er forskjellen mellom den maksimale aktivitet (det vil si i fra-vær av inhibitor) og den minimale enzymaktivitet, "E0" er den totale enzymkonsentrasjon, «k^ pp» er den tilsynelatende diss-osiasjonskonstant, og "Io" er inhibitorkonsentrasjonen. Kurver ble tilpasset ved hjelp av ikke-lineær regresjonsanalyse (Prism) under anvendelse av en fastlagt verdi for enzymkonsentrasjonen. Ligning 4 ble brukt til å sørge for substratkinetikken, hvor " K±" er inhiberingskonstanten, "[So]" er startsubstratkonsentrasjonen, og " Ktiapp" er den tilsynelatende makroskopiske bindingskonstant (Michaelis) for substratet (Morrison, 1982).
Andreordens reaksjonshasatighet for inhibitor med enzym
Der det kunne gjøres, ble konsentrasjonsavhengigheten til den observerte reaksjon ( koh3) for hver forbindelse med enzym analysert ved å bestemme enzyminaktiveringshastigheten under pseudo-førsteordens betingelser i nærvær av substrat (Morrison, J.F., TIBS, 102-105, 1982; Tian, W.X. og Tsou, C.L., Biochemistry, 21, 1028-1032, 1982; Morrison, J.F. og Walsh, C.T., fra Meister (red.), Advances in Enzymol., 61, 201-301, 1988; Tsou, C.L., fra Meister (red.), Advances in Enzymol., 61, 381-436, 1988). Analyser ble utført ved tilsetning av forskjellige konsentrasjoner av inhibitor til analysebuffer inneholdende substrat. Analyser ble initiert ved hjelp av tilsetningen av enzym til reaksjonsblandingen, og endringen i fluorescens ble overvåket over tid. Under analyseforløpet ble det forbrukt mindre enn 10 % av substratet.
Aktivitetskurvene for fluorescensutvikling ble tilpasset ved hjelp av ikke-lineær regresjonsanalyse (Prism) under anvendelse av ligning 5 (Morrison, 1969; Morrison, 1982); hvor "F" er fluorescensresponsen, "t" er tid, "v0" er starthastig-heten, "vs" er likevektshastigheten ved stasjonær tilstand, "kotos" er den observerte pseudo-førsteordens hastighetskonstant, og "D" er interceptet ved tid null (det vil si ordinatforskyvningen av kurven). Andreordens hastighetskonstant ble erholdt fra helningsvinkelen til linjen gjennom en plotting av k-obs versus inhibitorkonsentrasjonen (det vil si kobs/[ I]). For å korrigere for substratkinetikk ble ligning 6 brukt, hvor "[So]" er startsubstratkonsentrasjonen, og "KM<app>" er den tilsynelatende makroskopiske bindingskonstant (Michaelis) for substratet.
Forbindelser ifølge oppfinnelsen ble testet ved hjelp av de ovenfor beskrevne analyser og observert å utvise cruzipain-inhibitoraktivitet eller inhibitoraktivitet mot en alternativ CA-Cl-cysteinprotease med en in vitro Ka.-inhibitorkonstant som er mindre enn eller lik med 100 uM. Eksempelvise inhiberingsdata for en rekke eksempelforbindelser ifølge oppfinnelsen er gjengitt i tabell 2.

Claims (23)

1. Forbindelse ifølge generell formel (I) eller generell formel (II):
hvor: R<1>= Co-7-alkyl (når C = 0, er R<1>bare hydrogen), C3_6-sykloalkyl eller Ar-Co-7-alkyl (når C = 0, er R<1>bare en aromatisk rest Ar); Z = 0, S, CR2R3 eller NR<4>, hvor R<4>er valgt fra C0-7-alkyl, C3_6-sykloalkyl og Ar-Co-7-alkyl; Pi = CR<5>R<6>; P2= CR<7>R<8>; Q = CR<9>R<10>eller NR<11>, hvor R<11>er valgt fra C0_7-alkyl, C3_6-sykloalkyl og Ar-Co-7-alkyl; hver av R<2>, R<3>, R<5>, R6,R7,R<8>,R<9>og R<10>er uavhengig valgt fra Co-7-alkyl, C3_6-sykloalkyl, Ar-Co-7-alkyl, O-Co-7-alkyl, 0-C3-6-sykloalkyl, O-Ar-C0-7-alkyl, S-Co-7-alkyl, S-C3_6-sykloalkyl, S-Ar-Co-7-alkyl, NH-C0-7-alkyl, NH-C3-6-sykloalkyl, NH-Ar-C0-7-alkyl, N (Co-7-alkyl) 2, N (C3.6-sykloalkyl) 2 og N (Ar-C0-7-alkyl) 2; Y =CR12R<13->CO, hvorR12ogR1<3>er valgt fra C0-7-alkyl, C3_6-sykloalkyl og Ar-Co-7-alkyl; (X)o = CR<14>R<15>, hvor R<1>4 ogR1<5>uavhengig er valgt fra Co-7-alkyl, C3_6-sykloalkyl og Ar-Co-7-alkyl, og o er et tall fra 0 til 3; (W)n= 0, S, C(0), S(0) eller S(0)2eller NR<16>, hvor R<16>er valgt fra Co-7-alkyl, C3_6-sykloalkyl og Ar-C0-7-alkyl, og n er 0 eller 1; (V)m=C(0), C(S), S(0), S(0)2, S(0)2NH, 0C(0), NHC(O), NHS(O), NHS(0)2, 0C(0)NH, C(0)NH eller CR17R<18>, hvor R<17>og R<18>uavhengig av hverandre er valgt fra Co-7-alkyl, C3-6~sykloalkyl og uavhengig av hverandre er valgt fra C0-7-alkyl, C3_6-sykloalkyl og Ar-Co-7-alkyl, og m er et tall fra 0 til 3, forutsatt at når m er større enn 1, inneholder (V)mmaksimalt én karbonyl- eller sulfonylgruppe; U = en stabil monosyklisk 5-7-ring eller en stabil bisyklisk 8-11-ring som er enten mettet eller umettet, og som omfatter 0-4 heteroatomer (som angitt nedenunder):
hvor: R<19>er Co-7-alkyl, C3-6-sykloalkyl, Ar-C0-7-alkyl, O-C0-7-alkyl, 0-C3_6-sykloalkyl, O-Ar-Co-7-alkyl, S-Co-7-alkyl, S-C3_6-sykloalkyl, S-Ar-C0-7-alkyl, NH-C0-7-alkyl, NH-C3_6-sykloalkyl, NH-Ar-Co-7-alkyl, N (C0_7-alkyl) 2, N (C3.6-sykloalkyl) 2 eller N (Ar-Co-7-alkyl)2, eller når den er del av en CHR<19->eller CR<19->gruppe, kan R<19>være halogen; A er valgt fra CH2, CHR<19>, 0, S og NR<20>, hvor R<19>er som definert ovenfor, og R<20>er valgt fra C0-7-alkyl, C3-6_sykloalkyl og Ar-Co-7-alkyl; B, D og G er uavhengig av hverandre valgt fra CR<19>, hvorR1<9>er som definert ovenfor, eller N; E er valgt fra CH2, CHR<19>, 0, S og NR<20>, hvor R19ogR20er som definert ovenfor; J, L, M, R, T, T2, T3og T4er uavhengig av hverandre valgt fra CR<19>og N, hvorR1<9>er som definert ovenfor; T5er valgt fra CH og N; q er et tall fra 1 til 3, hvorved det defineres en 5-, 6- eller 7-ring.
2. Forbindelse ifølge krav 1, hvor uavhengig av hverandre eller i kombinasjon: a) Z er 0, S, CH2, NH eller NR<4>, hvor R<4>er en Ar-Ci-4-alkyl- eller en substituert karbonyl- eller sulfonylgruppe; b) Pi og P2er CH2; c) Q er CH2eller NH; d) R<1>omfatter C0-7-alkyl eller Ar-C0-7-alkyl; e) Y er CR12R13-CO, hvor R<12>og R<13>er valgt fra C0-7-alkyl, C3_6-sykloalkyl og Ar-Co-7-alkyl; f) i gruppen (X)D er X CR<14>R15, og hver av R<1>4ogR15 er valgt fra Co-7-alkyl og Ar-C0-7-alkyl; g) i gruppen (W)ner W 0, S, S02, SO, C(0) eller NR<16>, hvor R<16>er C0-4-alkyl, og n er 0 eller 1; h) i gruppen (V)mer V C(0), C(0)NH eller CHR<18>, hvor R<18>er Co-4-alkyl, og m er 0 eller 1; i) U omfatter en eventuelt substituert, mettet eller umettet 5- eller 6-heteroring, eller en eventuelt substituert, mettet eller umettet 9- eller 10-heteroring.
3. Forbindelse ifølge krav 1 eller krav 2, hvor R<1>er valgt fra hydrogen eller en av de følgende rester:
4. Forbindelse ifølge hvilket som helst av kravene 1-4, hvor Y er valgt fra en av de følgende rester:
hvorR19, R<20>og Ar er som definert ovenfor.
5. Forbindelse ifølge hvilket som helst av kravene 1-4, hvor Y er CHR<13>CO, hvor: R<13>er Ar-CH2-, hvor den aromatiske ring er en eventuelt substituert fenyl- eller monosyklisk heteroring; R<13>er en enkel, forgrenet alkylgruppe eller en rettkjedet heteroalkylkjede; ellerR1<3>omfatter sykloheksylmetyl.
6. Forbindelse ifølge hvilket som helst av kravene 1-5, hvor Y er valgt fra de følgende:
hvor R<19>og Ar er som definert tidligere.
7. Forbindelse ifølge hvilket som helst av kravene 1-6, hvor (X)oX er en av de følgende rester:
hvor R<1>9 ogR2<0>er som definert tidligere.
8. Forbindelse ifølge hvilket som helst av kravene 1-11, hvor (X)oer en enkel alkylgruppe, og hvor o=0 eller 1.
9. Forbindelse ifølge hvilket som helst av kravene 1-8, hvor i gruppen (W)n: W er 0, S, S02, SO, C(0) eller NH, hvor n er 0 eller 1.
10. Forbindelse ifølge hvilket som helst av kravene 1-9, hvor gruppen (W)ner NH.
11. Forbindelse ifølge hvilket som helst av kravene 1-10, hvor kombinasjonen (V)mog (W)ner en av de følgende:
12. Forbindelse ifølge hvilket som helst av kravene 1-11, hvor kombinasjonen (X)0, (V)mog (W)ner en av de følgende:
13. Forbindelse ifølge hvilket som helst av kravene 1-12, hvor U omfatter en av de følgende:
hvor R<19>er som definert tidligere.
14. Forbindelse ifølge hvilket som helst av kravene 1-13, hvor U omfatter: en voluminøs alkyl- eller arylgruppe i parastillingen til et aryl Ar; en meta- eller para-biaryl-Ar-Ar, hvor Ar er som tidligere definert; eller en 6,6- eller 6,5- eller 5,6-kondensert, aromatisk ring.
15. Forbindelse ifølge hvilket som helst av kravene 1-14, hvor U er en gruppe:
hvor R<19>, D, E, G, J, L, M, R, T, T2, T3og T4er som definert tidligere.
16. Forbindelse ifølge hvilket som helst av kravene 1-15, hvor U er en gruppe:
hvor R<19>, D, E, G, J, L, M, R og T er som definert tidligere.
17. Forbindelse ifølge hvilket som helst av kravene 1-16, hvor U er en gruppe:
hvor R<19>, D, E, G, J og L er som definert tidligere.
18. Fremgangsmåte for validering av en kjent eller antatt cysteinproteaseinhibitor som et terapeutisk mål,karakterisert vedat: (a) in vitro-bindingen av en forbindelse ifølge hvilket som helst av kravene 1-17 til en isolert, kjent eller antatt cysteinprotease fastlegges, hvorved man får et mål for "styrke"; og eventuelt ett eller flere av de følgende trinn: (b) bindingen av en forbindelse ifølge hvilket som helst av kravene 1-17 til nært beslektede homologe proteaser til målet og generelle husholdningsproteaser (f.eks. trypsin) fastlegges, hvorved man får et mål for "selektivitet"; (c) en cellebasert funksjonell markør for en bestemt cysteinproteaseaktivitet overvåkes i nærvær av en forbindelse ifølge hvilket som helst av kravene 1-17; og (d) en dyremodellbasert funksjonell markør for en bestemt cysteinproteaseaktivitet overvåkes i nærvær av en forbindelse ifølge hvilket som helst av kravene 1-17.
19. Anvendelse av en forbindelse ifølge hvilket som helst av kravene 1-17 ved validering av en kjent eller antatt cysteinproteaseinhibitor som et terapeutisk mål.
20. Forbindelse ifølge hvilket som helst av kravene 1-17 for anvendelse innen medisinen, spesielt til profylakse eller behandling av sykdommer hvor sykdomspatologien kan modifiseres ved inhibering av en cysteinprotease, f.eks. Chagas' sykdom.
21. Anvendelse av en forbindelse ifølge hvilket som helst av kravene 1-17 ved fremstilling av et medikament for profylakse eller behandling av sykdommer hvor sykdomspatologien kan modifiseres ved inhibering av en cysteinprotease, f.eks. Chagas' sykdom.
22. Farmasøytisk eller veterinærmedisinsk preparat,karakterisert vedat det omfatter én eller flere forbindelser ifølge hvilket som helst av kravene 1-17 og en farmasøytisk eller veterinærmedisinsk akseptabel bærer.
23. Fremgangsmåte for fremstilling av et farmasøytisk eller veterinærmedisinsk preparat ifølge krav 22,karakterisert vedat den aktive forbindelse eller de aktive forbindelsene bringes i forening med bæreren, f.eks. ved tilblanding.
NO20033220A 2001-01-17 2003-07-16 Inhibitorer for cruzipain og andre cysteinproteaser, fremgangsmate for validering av en kjent eller antatt cysteinproteaseinhibitor som et terapeutisk mal, anvendelser av forbindelsene i fremgangsmaten og ved fremstilling av medikamenter, samt farmasoytiske eller veterinaermedisinske preparater og fremgangsmate for fremstilling derav NO328208B1 (no)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GB0101179A GB0101179D0 (en) 2001-01-17 2001-01-17 Biologically active compounds
US27535901P 2001-03-13 2001-03-13
PCT/GB2002/000184 WO2002057270A1 (en) 2001-01-17 2002-01-17 Inhibitors of cruzipain and other cysteine proteases

Publications (3)

Publication Number Publication Date
NO20033220D0 NO20033220D0 (no) 2003-07-16
NO20033220L NO20033220L (no) 2003-09-17
NO328208B1 true NO328208B1 (no) 2010-01-11

Family

ID=26245571

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO20033220A NO328208B1 (no) 2001-01-17 2003-07-16 Inhibitorer for cruzipain og andre cysteinproteaser, fremgangsmate for validering av en kjent eller antatt cysteinproteaseinhibitor som et terapeutisk mal, anvendelser av forbindelsene i fremgangsmaten og ved fremstilling av medikamenter, samt farmasoytiske eller veterinaermedisinske preparater og fremgangsmate for fremstilling derav

Country Status (21)

Country Link
US (2) US7425562B2 (no)
EP (1) EP1362052B1 (no)
JP (1) JP4608183B2 (no)
KR (1) KR100860067B1 (no)
CN (1) CN1269822C (no)
AT (1) ATE356130T1 (no)
AU (1) AU2002219397B2 (no)
BR (1) BR0206501A (no)
CA (1) CA2436462C (no)
CY (1) CY1106640T1 (no)
DE (1) DE60218633T2 (no)
DK (1) DK1362052T3 (no)
ES (1) ES2281516T3 (no)
HK (1) HK1060729A1 (no)
IL (2) IL156774A0 (no)
MX (1) MXPA03006224A (no)
NO (1) NO328208B1 (no)
NZ (1) NZ526913A (no)
PT (1) PT1362052E (no)
RU (1) RU2329266C2 (no)
WO (1) WO2002057270A1 (no)

Families Citing this family (26)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
MXPA03005601A (es) 2000-12-22 2004-12-02 Axys Pharm Inc Nuevos compuestos y composiciones como inhibidores de catepsina.
US7030116B2 (en) 2000-12-22 2006-04-18 Aventis Pharmaceuticals Inc. Compounds and compositions as cathepsin inhibitors
CN1324008C (zh) 2001-09-14 2007-07-04 安万特药物公司 作为组织蛋白酶抑制剂的新化合物和组合物
WO2003042197A1 (en) 2001-11-14 2003-05-22 Aventis Pharmaceuticals Inc. Oligopeptides and compositions containing them as cathepsin s inhibitors
NZ537853A (en) * 2002-07-16 2007-02-23 Amura Therapeutics Ltd Inhibitors of cathepsin K and related cysteine protesases of the CA clan
US7399765B2 (en) * 2003-09-19 2008-07-15 Abbott Laboratories Substituted diazabicycloalkane derivatives
DE602005019971D1 (de) * 2004-01-08 2010-04-29 Medivir Ab Inhibitoren von cysteinprotease
JP2005350417A (ja) * 2004-06-11 2005-12-22 Dai Ichi Seiyaku Co Ltd 還元的エーテル化法を用いたピロリジン誘導体の製造法
BRPI0609695A2 (pt) * 2005-03-21 2011-10-18 Applera Corp composto ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, composição farmacêutica, e, método para tratar uma doença e uma paciente sofrendo uma terapia
GB0513839D0 (en) * 2005-07-07 2005-08-10 Medivir Ab Cysteine protease inhibitors
GB0513840D0 (en) * 2005-07-07 2005-08-10 Medivir Ab Cysteine protease inhibitors
GB0614037D0 (en) * 2006-07-14 2006-08-23 Amura Therapeutics Ltd Compounds
GB0614044D0 (en) * 2006-07-14 2006-08-23 Amura Therapeutics Ltd Compounds
GB0614046D0 (en) 2006-07-14 2006-08-23 Amura Therapeutics Ltd Compounds
GB0614053D0 (en) * 2006-07-14 2006-08-23 Amura Therapeutics Ltd Compounds
GB0614052D0 (en) * 2006-07-14 2006-08-23 Amura Therapeutics Ltd Compounds
GB0614042D0 (en) 2006-07-14 2006-08-23 Amura Therapeutics Ltd Compounds
GB0614073D0 (en) 2006-07-14 2006-08-23 Amura Therapeutics Ltd Compounds
WO2008114054A1 (en) * 2007-03-19 2008-09-25 Medivir Ab Protease inhibitors
US7893067B2 (en) * 2007-06-27 2011-02-22 Medivir Ab Cysteine protease inhibitors
EP2240491B1 (en) 2008-01-09 2015-07-15 Amura Therapeutics Limited TETRAHYDROFURO(2,3-b)PYRROL-3-ONE DERIVATIVES AS INHIBITORS OF CYSTEINE PROTEINASES
GB0804702D0 (en) * 2008-03-13 2008-04-16 Amura Therapeutics Ltd Compounds
GB0804701D0 (en) 2008-03-13 2008-04-16 Amura Therapeutics Ltd Compounds
US9409880B2 (en) 2011-01-20 2016-08-09 The Regents Of The University Of Colorado, A Body Corporate Modulators of TLR3/dsRNA complex and uses thereof
IN2015MN00405A (no) * 2012-08-30 2015-09-04 Univ Tokyo
CN106279188A (zh) * 2016-07-21 2017-01-04 青岛科技大学 一种多取代呋喃并[2,3‑b]吡咯衍生物的制备方法

Family Cites Families (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3652574A (en) 1970-04-01 1972-03-28 Abbott Lab Certain 1 2 3 4 - tetrahydro-5h-pyrido (4 3-b)indoles and the corresponding 1 2 3 4-tetrahydro-9h-pyrido(3 4-b)indoles and derivatives thereof
DZ2285A1 (fr) 1996-08-08 2002-12-25 Smithkline Beecham Corp Inhibiteurs de protéase de la cystéine.
JP2000517319A (ja) 1996-08-28 2000-12-26 スミスクライン・ビーチャム・コーポレイション システインプロテアーゼのインヒビター
PL196641B1 (pl) 1996-12-23 2008-01-31 Elan Pharm Inc Związki laktamowe i środek farmaceutyczny
AR013079A1 (es) * 1997-05-06 2000-12-13 Smithkline Beecham Corp Derivados sustituidos de tetrahidrofurano-3-onas, de tetrahidropirano-3- onas y tetrahidrotiofen-3-onas, un procedimiento para su preparacion unacomposicion farmaceutica de un medicamento util como inhibidores de proteasas e intermediarios
MA26618A1 (fr) 1998-04-09 2004-12-20 Smithkline Beecham Corp Composes et compositions pharmaceutiques pour le traitement du paludisme
CO5150165A1 (es) 1998-11-13 2002-04-29 Smithkline Beecham Plc Inhibidores de proteasa: tipo catepsina k
GB9911417D0 (en) * 1999-05-18 1999-07-14 Peptide Therapeutics Ltd Furanone derivatives as inhibitors of cathepsin s
JP2004513942A (ja) 2000-11-17 2004-05-13 メディヴァー　ユーケイ　リミテッド システインプロテアーゼインヒビター
MXPA03005601A (es) 2000-12-22 2004-12-02 Axys Pharm Inc Nuevos compuestos y composiciones como inhibidores de catepsina.

Also Published As

Publication number Publication date
BR0206501A (pt) 2004-01-13
DK1362052T3 (da) 2007-07-09
JP4608183B2 (ja) 2011-01-05
HK1060729A1 (en) 2004-08-20
PT1362052E (pt) 2007-04-30
ATE356130T1 (de) 2007-03-15
WO2002057270A1 (en) 2002-07-25
EP1362052A1 (en) 2003-11-19
CN1269822C (zh) 2006-08-16
US20040138250A1 (en) 2004-07-15
ES2281516T3 (es) 2007-10-01
CN1486320A (zh) 2004-03-31
RU2329266C2 (ru) 2008-07-20
US20090247471A1 (en) 2009-10-01
RU2003125270A (ru) 2005-02-20
NZ526913A (en) 2004-12-24
AU2002219397B2 (en) 2008-02-14
US7425562B2 (en) 2008-09-16
EP1362052B1 (en) 2007-03-07
KR20030075161A (ko) 2003-09-22
NO20033220D0 (no) 2003-07-16
CY1106640T1 (el) 2012-01-25
CA2436462A1 (en) 2002-07-25
DE60218633D1 (de) 2007-04-19
MXPA03006224A (es) 2004-10-15
IL156774A0 (en) 2004-02-08
NO20033220L (no) 2003-09-17
JP2004518674A (ja) 2004-06-24
CA2436462C (en) 2011-07-05
KR100860067B1 (ko) 2008-09-24
DE60218633T2 (de) 2008-02-21
IL156774A (en) 2008-08-07

Similar Documents

Publication Publication Date Title
NO328208B1 (no) Inhibitorer for cruzipain og andre cysteinproteaser, fremgangsmate for validering av en kjent eller antatt cysteinproteaseinhibitor som et terapeutisk mal, anvendelser av forbindelsene i fremgangsmaten og ved fremstilling av medikamenter, samt farmasoytiske eller veterinaermedisinske preparater og fremgangsmate for fremstilling derav
AU2002219397A1 (en) Inhibitors of cruzipain and other cysteine proteases
JP2006504651A (ja) 生物活性化合物
DK2646443T3 (en) CAT-II inhibitors
JP2011518120A (ja) 化合物
Beyer et al. Asymmetric total synthesis of the indole alkaloid cyclopiazonic acid and first structure–activity data
US6958358B2 (en) Inhibitors of cruzipain and other cysteine proteases
WO2002057249A1 (en) Cyclic 2-carbonylaminoketones as inhibitors of cruzipain and other cysteine proteases
US7132449B2 (en) Inhibitors of cruzipain and other cysteine proteases
WO2007023281A2 (en) Biologically active compounds
US20040127549A1 (en) Cyclic 2-carbonylaminoketones as inhibitors of cruzipain and other cysteine proteases
US7846934B2 (en) Furo[3,2-B] pyrrol-3-one derivatives and their use as cysteinyl proteinase inhibitors
AU2002225157A1 (en) Inhibitors of cruzipain and other cysteine proteases
BRPI0206501B1 (pt) An inhibitor compound of cruzipain and other cysteine ​​proteases, their uses, their pharmaceutical or veterinary composition, the process for the preparation of said composition and the method of establishing whether a cysteine ​​protease contributes to a biochemical function
AU2002219399A1 (en) Cyclic 2-carbonylaminoketones as inhibitors of cruzipain and other cysteine proteases
Haller Suberone-based type I½ p38α MAPK-inhibitors with improved properties to treat colorectal cancer
CN114621204A (zh) 一种含有嘧啶二酮酰基多取代哌嗪类衍生物及其制备方法与应用
KR20050019877A (ko) 생물학적으로 활성이 있는 화합물
UA80250C2 (en) Inhibitors of cruzipain and other cysteine proteases

Legal Events

Date Code Title Description
MM1K Lapsed by not paying the annual fees